Journal Reading

In Vitro Baktericidal dan Virucidal Efficacy of Povidone-Iodine Gargle/Mouthwash Against

Respiratory and Oral Tract Pathogens

Sita Nuraini, S.Ked

NIM. 1930912320107

Pembimbing :
dr. Khairiyadi, M.Kes, Sp.A(K)

BAGIAN/SMF ILMU KESEHATAN ANAK

FAKULTAS KEDOKTERAN ULM
RSUD ULIN BANJARMASIN
JULI, 2020
 PENDAHULUAN
 Peningkatan resistensi antibiotik

 Infeksi mulut dan saluran pernapasan Streptococcus pneumoniae dan Klebsiella

pneumoniae

 Virus influenza menjadi penyebab terbanyak dari infeksi pernapasan didunia yang
mencapai 3-5 juta kasus dan sekitar 250.000-500.000 mengalami kematian

 Patogen influenza ditularkan melalui dispersi udara aerosol partikel kecil (≤5 µm),
batuk atau bersin

 SARS-CoV dan MERS-CoV menyebar melalui udara dan diinokulasi ke mata,

hidung dan mulut dari jarak dekat

2
 PENDAHULUAN
 Berkumur memiliki manfaat melalui pembersihan protease orofaring

 PVP-I sebagai antimikroba menunjukkan efikasi in vitro terhadap gram positif, gram
negatif, beberapa bakteri pembentuk spora (Clostridia, Bacillus spp.) dan virus enveloped
dan non-enveloped
 Penelitian ini meneliti bakterisdal in vitro dan efikasi virusidal dari obat kumur PVP-I 7%
terhadap patogen mulut dan saluran pernapasan berdasarkan uji standar Eropa
EN13727 dan EN14476

3
 Metode

Quantitative suspension test

 Baktericidal : Uji EN13727:2012+A2:2015

 Virucidal : EN14476:2013 / FprA1:2015

4
 Uji Produk

2 ml PVP-I 7% ditambahkan
Konsentrasi 0,23%
air hingga 60 ml

5
 1. Uji Bakterisidal

Pengenceran 1 : 10 Pengenceran 1 : 100 Pengenceran 1 : 1000

Diperoleh konsentrasi 0,7% Diperoleh konsentrasi 0,07% Diperoleh konsentrasi 0,007%

2. Uji Virusidal

Pengenceran 1 : 300 Pengenceran 1 : 3000

Diperoleh konsentrasi 0,023% Diperoleh konsentrasi 0,0023%

6
 Uji Bakterisidal

Streptococcus pneumoniae &

Klebsiella pneumoniae

Suspensi bakteri ditambahkan ke

dalam larutan PVP-I 7% di bawah
Uji inaktivasi EN13727:2012
kondisi kotor [3,0 g/l bovine
+ A2:2015, T : 20,0 ± 1,0 °C
serum albumin (BSA) + 3,0 ml/l
eritrosit]

Dinetralkan dengan 3%
Tween 80 + 0,1% histidin +
Setelah 15 s dan 30 s 0,3% Lesitin +  0,5% natrium
tiosulfat
Bakteri ≥5 log10 (≥99,999%)
dianggap mewakili khasiat
antibakteri efektif
Hitung jumlah organisme uji
yang masih hidup dalam
campuran 7
 Uji Virusidal

 SARS (strain Frankfurt) → sel Vero E6

 MERS (HCoV-EMC/2012) → sel Vero E6
Uji inaktivasi
 Virus influenza A (H1N1) pdm09 → sel Madin-
EN14476:2013/FprA1:2015,
Darby Canine Kidney (MDCK)
T : 20.0 ± 1.0 °C
 Human rotavirus non-enveloped strain Wa →
sel MA104

8
 Uji Virusidal
Uji inaktivasi
EN14476:2013/FprA1:2015,
T : 20.0 ± 1.0 °C

Suspensi virus kemudian Kecuali untuk suspensi

ditambahkan ke larutan PVP-I 7% rotavirus, yang diuji tanpa
dalam kondisi bersih (0,3 g/l BSA) protein load (menggunakan
dan kondisi kotor (3,0 g/l BSA + air suling sebagai zat
3,0 ml/l eritrosit) pengganggu)

9
 Uji Virusidal

 100 µl suspensi virus

 100 µl zat pengganggu Waktu kontak :
 800 µl PVP-I  SARS-CoV dan MERS-CoV → 15 s
 Campuran kontrol virus  Influenza → 15 dan 30 s
diuji menggunakan air  Rotavirus → 15, 30, 60, dan 120 s
suling

Aktivitas virusidal dari larutan segera

dihambat melalui pengenceran dengan
media dingin (MEM + 2,0% FCS) dan
diencerkan sebanyak sepuluh kali lipat
 5 tabung untuk SARS-CoV dan 1
untuk MERS-CoV dari pelat
mikrotiter yang mengandung lapisan
tunggal sel host yang diinokulasi
dengan 100 µl uji suspensi
 Kemudian sel diinkubasi pada suhu
37,0°C dalam tekanan atmosfer yang
lembab di bawah 5,0% CO2

10

Untuk pewarnaan infektivitas
virus influenza atau rotavirus,
sel-sel difiksasi selama 10
menit dengan larutan
aseton/metanol dingin (40:60)
Uji Virusidal
 Dihambat dengan 1% BSA dalam
larutan fosfat-buffered saline
(PBS) selama 30 menit
 Diwarnai menggunakan metode
immunoperoxidase

Pengujian influenza A → Pengujian rotavirus → antibodi goat

antibodimonoklonal (25 µl/tabung) poliklonal berlabel peroxidase (BT81-
(Chemicon, Temecula, CA) diujikan 2998-04, Biotren, Köln, Jerman) diujikan
terhadap virus influenza A (MAB8251) terhadap human rotavirus

Setelah diinkubasi selama 30 menit Setelah diinkubasi selama 30 menit pada

pada suhu 37°C, pelat kemudian dicuci suhu 37°C, pelat kemudian dicuci

Diinkubasi dengan horseradish berlabel Diinkubasi dengan horseradish berlabel

peroxidase antibodi anti-mouse sekunder peroxidase antibodi anti-goat sekunder
dan terakhir menggunakan substrat 3- pada pengenceran 1:500 dan terakhir
amino-9-etilkarbazole (AEC) menggunakan substrat AEC 11
  Titer virus ditentukan menggunakan
Metode Spearman-Kärber dan
dinyatakan dalam tissue culture
infectious dose 50% (TCID50/ml)

Substrat 3-
amino-9-  Aktivitas virucidal ditentukan oleh
etilkarbazol perbedaan titer logaritmik dari kontrol
e (AEC) virus dikurangi titer logaritmik dari virus
yang uji ( Δ log10 TCID50/ml)

 Penurunan titer virus ≥4 log 10 (sesuai

dengan inaktivasi sebesar ≥99,99%)
dianggap sebagai bukti yang cukup
untuk menunjukkan aktivitas virusidal
Sel-sel yang terwarnai diperiksa
dengan mikroskop cahaya

12
HASIL PENELITIAN

13
HASIL PENELITIAN

14
 DISKUSI
● Dari studi in vitro penelitian ini menunjukkan waktu kontak minimum selama 15 detik terbukti
cukup untuk obat kumur PVP-I 7% agar bekerja efektif pada pengenceran yang
direkomendasikan di Jepang sebesar 1:30 (setara dengan bahan aktif berkonsentrasi 0,23%)

Shimizu et al
Menunjukkan efikasi lengkap larutan PVP-I
0,2% terhadap isolat klinis bakteri Klebsiella
pneumoniae, Serratia marcescens,
Pseudomonas aeruginosa, Alcaligenes faecalis
dan Alcaligenes xylosoxydans selama 30
detik menggunakan metodologi sederhana
(the broth turbidity method)
Eggers et al
Menunjukkan aktivitas virusidal larutan
pembersih kulit PVP-I 4%, scrub bedah 7,5%,
larutan 10% dan larutan 3,2% PVP-I/alkohol
terhadap virus Ebola dan MVA dan scrub bedah
PVP-I 7,5%, pembersih kulit 4% dan 1% obat
kumur yang efektif terhadap MERS-CoV dan
MVA dalam waktu pemakaian selama 15 detik

15
 DISKUSI
 Dalam penelitian lain, obat kumur PVP-I dalam konsentrasi rendah (0,23-0,47%) mampu
membunuh methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) dan Pseudomonas aeruginosa,
termasuk strain yang resisten terhadap banyak obat selama 15-60 detik

 Studi yang membandingkan antara aktivitas bakterisidal dari tiga obat kumur terhadap
isolat (MRSA) dan bakteri gram negatif (Pseudomonas aeruginosa dan Klebsiella pneumoniae),
larutan PVP-I (diencerkan sebanyak 15, 30, 60 kali lipat) mampu membunuh ketiga strain
bakteri secara cepat setelah 30 detik dan CHG sama sekali tidak efektif

 Uji virusidal pada larutan PVP-I ditemukan mampu menonaktifkan beberapa virus termasuk
adenovirus, virus mumps, rotavirus, poliovirus (tipe 1 dan 3), virus coxsackie, rhinovirus,
virus herpes simpleks, rubella, campak, influenza, dan HIV, sementara larutan obat kumur
CHG, benzalkonium klorida (BAC), BEC dan alkyldiaminoethyl-glycine hidroklorida (AEG)
tidak efektif terhadap adenovirus, poliovirus dan rhinovirus

16
 DISKUSI
Kariwa et al
Penggunaan produk PVP-I dengan
konsentrasi 0,23-1% selama 1-2 menit
mampu mengurangi infektivitas virus SARS-
CoV dari 1,17x106 TCID50/ml
Ito et al
Pengurangan titer infeksi virus dari virus flu
burung A (H5N1, H5N3, H7N7 dan H9N2)
turun hingga di bawah batas yang dapat
dideteksi melalui waktu inkubasi hanya
selama 10 detik menggunakan enam
produk PVP-I yang berbeda termasuk obat
kumur 0,23% dan spray tenggorokan 0,23%
Dalam penelitian ini, larutan oral PVP-I
pada konsentrasi 0,23% juga efektif
terhadap non-enveloped rotavirus setelah
15 detik waktu paparan
Steinmann et al
Larutan PVP-I konsentrasi 7,5% tidak aktif
terhadap virus non-enveloped yang diuji
Sauerbrei dan Wutzler
PVP-I memerlukan waktu selama 5 menit
untuk menonaktifkan polyomavirus SV40
dan adenovirus
17
 DISKUSI

 Hasil penelitian ini menunjukkan  Profil keamanan penggunaan PVP-I

bahwa penggunaan obat kumur dinilai sudah cukup aman. Berbeda
PVP-I dapat menjadi langkah
dengan agen antiseptik lainnya,
perlindungan yang berguna
terhadap infeksi oral dan saluran produk perawatan mulut larutan PVP-I
pernapasan. tidak menyebabkan iritasi atau
kerusakan mukosa mulut, bahkan pada
penggunaan jangka panjang.

18
 KESIMPULAN

1. Rekomendasi untuk berkumur dengan obat kumur antiseptik sebagai

bentuk pengendalian infeksi saluran pernapasan dan mulut

2. Efikasi bakterisidal dan virusidal yang cepat dari povidone iodine,

termasuk obat kumur PVP-I, terhadap patogen penyebab infeksi oral
dan saluran pernapasan yang diamati dalam penelitian in vitro dan in
vivo lainnya

3. Profil keselamatan penggunaan larutan PVP-I yang telah ditetapkan

pada penggunaan lebih dari 60 tahun, memberikan dasar pemikiran
yang kuat untuk penggunaan oral larutan PVP-I untuk pengelolaan
kebersihan orofaring bagi individu berisiko tinggi terhadap infeksi
patogen oral dan saluran pernapasan
19
 Terimakasih

CREDITS: This presentation template was created by Slidesgo, including icons by

Flaticon, infographics & images by Freepik and illustrations by Stories