Jahe Merah (Zingiber

officinale) dan Herba Meniran

(Phyllanthus niruri L.)
Sebagai Imunomodulator
kelompok 1 NUTRACEUTICAL
1.Budi Adiana 201851045
2.Hani Rhamadhani 201851106
3.Helen Amelya Simanjuntak 201851113
4.Sri Murniati Naibaho 201951234
 NUTRACEUTICAL?

itu keanekaragaman hayati yang ada di Indonesia merupakan aset dan sumberdaya
yang harus dipelihara dan dikelola untuk dapat menjadi warisan leluhur dan bermanfaat
bagi masyarakat untuk pemeliharaan kesehatan ) dimana terdapat lebih kurang
30.000 jenis tanaman yang tersebar di seluruh tanah air, sekitar 9.600 spesies
berkhasiat obat dan kurang lebih 300 spesies digunakan sebagai bahan pengobatan
tradisional oleh industri obat tradisional

Kata "nutraceutical" adalah kombinasi dari kata " nutrisi " dan " farmasi ", diciptakan pada
tahun 1989 oleh Stephen L. DeFelice , pendiri dan ketua Yayasan Kedokteran Inovasi.
Istilah nutraceutical didefinisikan oleh Stephen De Felice (1995) sebagai ‘‘ zat apa pun
yang merupakan makanan atau bagian dari makanan yang memberikan manfaat medis atau
kesehatan, termasuk pencegahan dan perawatan penyakit”. De Felice (1995) mengutip
bahwa revolusi nutraceutical dimulai pada tahun 80-an. Nutraceutical seringkali disebut
sebagai functional foods atau makanan fungsional. Pasar nutraceutical modern mulai
berkembang di Jepang selama tahun 1980-an
 IMUNITAS
?
Sistem kekebalan tubuh (imunitas) dapat didefinisikan sebagai kemampuan tubuh untuk mengidentifikasi dan
menahan maupun menghilangkan sejumlah besar mikroorganisme menular dan berbahaya, memungkinkan tubuh
untuk mencegah atau melawan penyakit dan menghambat kerusakan jaringan. Respon imun dapatdiperkuat
dengan bantuan asupan senyawa kimia dari luar. Salah satunya adalah senyawa kimia yang berkemampuan
sebagai imunomodulator. Imunomodulator adalah zat biologis atau sintetis yang dapat merangsang untuk
menekan atau memodulasi setiap aspek dari system kekebalan tubuh

Sistem kekebalan tubuh (imunitas) adalah suatu mekanisme yang digunakan tubuh untuk menangkal pengaruh
faktor/ zat yang berasal dari luar tubuh (Roitt, 1990). Ada dua sumber kekebalan tubuh, yakni kekebalan
alami dan adaptif (Bellanthi, 1993). Pada prinsipnya kerja sistem imun dalam menghadapi invasi bahan asing
dari luar tubuh bekerja secara serempak Dalam upaya meningkatkan penerimaan masyarakat terhadap obat
herbal, maka diperlukan
pengembangan obat tradisional menjadi fitofarmaka. Fitofarmaka adalah sediaan obat yang telah dibuktikan
keamanan dan khasiatnya, bahan bakunya terdiri dari simplisia atau sediaan galenik yang telah memenuhi
persyaratan yang berlaku

Dalam presentasi ini kami akan mengupas tentang tanaman pangan jahe merah (Zingiber officinale) dan
Herba Meniran (Phyllanthus niruri L.) sebagai sumber imunodulator.
 A. Jahe Merah (Zingiber
officinale)

Pembahasan materi ini bersumber dari Jurnal Riset Kefarmasian Indonesia Vol.3 no.2 tahun 2021 yang
berjudul “Isolasi Senyawa Aktif dan Uji Aktivitas Ekstrak Jahe Merah (Zingiber officinale) Sebagai
Imunomodulator”, disusun oleh Masniah dkk.

Jahe merah merupakan jenis tanaman herbal yang tergolong ke dalam jenis tanaman rimpang, jahe
sering dijadikan sebagai bahan untuk membuat minuman atau jamu tradisional. Jahe adalah jenis
rempah-rempah yang memiliki kandungan senyawa yang sangat berkhasiat untuk mengatasi berbagai
jenis penyakit seperti rematik, batuk sudah dikenal sejak jaman dulu hingga sekarang. Jahe merah
mengandung zingiberena, bisabolena dan kamfer yang berkhasiat sebagai anti inflamasi

Rimpang jahe merah mengandung cadangan minyak atsiri berupa lemonin, kamfena, zingiberin, gingerol,
shogool dan gingeral. Gingerol dalam jahe merah menyebabkan rasa jahe yang panas dan berkhasiat
sebagai menjadi antiinflamasi yang sangat baik bagi tubuhJahe merah (Zingiber officinale) mengandung
banyak senyawa kimia yang mempunyai banyak aktivitas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui senyawa
aktif dari Zingiber officinale dan aktivitas imunomodulator yang dapat meningkatkan fagositosis sel
 Herba Meniran (Phyllanthus
niruri
Pembahasan L.)ini bersumber dari Jurnal Kimia
materi 13 (2),
Juli 2019, yang berjudul “Formulasi Sediaan Sirup Peningkat
Imunitas dari Herba Meniran (Phyllanthus niruri L.)”, disusun oleh
W. O. Sugarda dkk.

Herba meniran (Phyllanthus niruri L.). memiliki kandungan

kimia flavonoid seperti kuersetin, kuersitrin, isokuersitrin,
astragalin, dan rutin, serta mengandung kaempferol-1-4-
ramnopiranosid, eridiktol-7-ramnopiranosid, nirurin, nirurisid,
filantin, hipofilantin, triterpene, dan alkaloid sekurinin yang
berfungsi sebagai imunomodulator alami (Puspitasari, 2010; Ross,
1999). Pemanfaatan tanaman herba meniran sebagai
imunomodulator alami dapat ditingkatkan efektivitasnya dengan
memformulasikan ekstrak etanol herba meniran menjadi bentuk
sediaan sirup

Ekstrak herba meniran yang akan digunakan dalam pembuatan

produk farmasi perlu dilakukan standarisasi ekstrak untuk
mengetahui bahwa ekstrak yang diperoleh telah memenuhi
parameter standar mutu ekstrak
METODE
PENELITIAN

TANAMAN PANGAN JAHE MERAH (ZINGIBER

OFFICINALE)
&
TANAMAN HERBA MENIRAN (PHYLLANTHUS NIRURI L.)
 Jahe Merah
(Zingiber
officinale)
Penelitian meliputi jahe merah segar, dibuat menjadi ekstrak etanol, dikeringkan, Hasilnya
dibuat suspensi, ekstrak lalu diberi pada sel makrofag (pengujian fagositosis) dan sel limfosit
(pengujian proliferasi) secara in-vitro untuk diujikan efek imunomodulator

Sampel yang diuji pada penelitian ini adalah bagian limpa mencit (Balb/C) jantan. Hewan
percobaan dalam penelitian ini adalah mencit dengan kondisi sehat yang diperoleh dari
peternakan. Jumlah mencit yang digunakan 5 0 ekor. Jumlah hewan percobaan tiap kelompok
dihitung dengan rumus Federer. Hewan percobaan minimal untuk masing-masing pelakuan
sebanyak 3 (tiga) ekor. Hewan uji yang digunakan tiap kelompok 5 ekor untuk mendapatkan
data yang lebih banyak
 Jahe Merah
(Zingiber
officinale)
Pembuatan ekstrak etanol jahe merah:
Ekstrak etanol jahe merah dibuat secara maserasi dengan menggunakan cairan penyari alkohol 96%.
100 bagian ekstrak cair yang akan dibuat = 3000 g
Maka 10 bagian serbuk jahe merah = 300 g
Menurut Farmakope Indonesia Edisi IV, Bj etanol = 0,812 – 0,816
Langkah-langkah
ekstraksi
a. Masukkan 300 gram jahe merah yang telah dihaluskan ke dalam
wadah kemudian tuangi dengan 2764 ml cairan penyari.
b. Tutup rapat, diamkan selama 5 hari terlindung dari cahaya
matahari (selama pendiaman diaduk minimal sebanyak 3 kali).
c. Setelah 5 hari campuran tersebut diserkai, peras dan dibilas
ampasnya dengan menggunakan sisa cairan penyari. Dimasukkan
ke dalam wadah tertutup rapat, diamkan selama 2 hari di tempat
gelap.
d. Enap tuangkan, kemudian maserat diuapkan dengan alat rotary
evaporator hingga diperoleh ekstrak kental jahe merah.
e. Ekstrak etanol jahe merah yang diperoleh dilakukan skrining
fitokimia.
Penyiapan sampel bahan uji
a. Suspensi induk
Sebanyak 10 mg ekstrak ditambahkan DMSO 100 μL hingga homogen.
Kemudian ditambahkan dengan laritan medium komplit hingga 900 μL dan
divortex kembali hingga homogen. Diperoleh konsentrasi suspensi 10000
μg/ml, disebut dengan suspensi induk.
b. Suspensi ekstrak 600 ppm.
Sebanyak 1600 μL suspensi induk dimasukkan ke dalam tabung eppendorf dan
ditambahkan larutan medium komplit sebanyak 400 μL.
c. Suspensi ekstrak 450 ppm.
Sebanyak 1200 μL suspensi induk dimasukkan ke dalam tabung eppendorf dan
ditambahkan larutan medium komplit sebanyak 800 μL.
d. Suspensi ekstrak 300 ppm.
Sebanyak 800 μL suspensi induk dimasukkan ke dalam tabung eppendorf dan
ditambahkan larutan medium komplit sebanyak 1200 μL.
e. Suspensi ekstrak 150 ppm.
Sebanyak 400 μL suspensi induk dimasukkan ke dalam tabung eppendorf dan
ditambahkan larutan medium komplit sebanyak 1600 μL
1.Pengujian Aktivitas Fagositosis Sel Makrofag
Evaluas
i
Mencit dieuthanasia dengan eter, kemudian dilakukan pembedahan perut pada mencit dan diambil cairan peritonial, kemudian
ditambahkan medium Roswell Park Memorial Institute (RPMI) dengan cara diinjeksikan secara intra peritoneal, kemudian dibiarkan
hingga medium menyebar ke seluruh peritonial dan sel makrofag pun terbentuk. Cairan peritonial dikeluarkan dari rongga
peritonium menggunakan jarum suntik pada bagian yang tidak berlemak dan jauh dari usus. Semua cairan yang diambil dengan
jarum suntik dicampur menjadi satu. Cairan tersebut kemudian dipindah dalam tabung sentrifugasi. Cairan disentrifugasi pada
12 00 rpm selama 10 menit. Endapan diambil dan supernatan dibuang lalu ditambahkan 2 mL dapar tris amonium klorida.

Campuran tersebut kemudian diresuspensi ke dalam 5 mL medium komplit. Jumlah sel dihitung dengan hemositometer
kemudian diresuspensikan dengan medium komplit sehingga didapat suspensi sel dengan jumlah 2,5 x 10 6 sel/mL.
Suspensi sel (sel makrofag dan medium komplit) pada plate 24 well yang sebelumnya telah diberi coverslip bulat, diberi 20 0 μL
tiap sumuran dan diinkubasi selama 30 menit, kemudian ditambah 80 0 μL medium komplit dan diinkubasi kembali selama 2 4
jam.
Selanjutnya pada wells diganti dengan 50 0 μL ekstrak dengan berbagai macam konsentrasi. Plate diinkubasi selama 1 jam.
Aktivitas makrofag diukur berdasarkan kemampuan memakan atau memfagositosis lateks.

Lateks disuspensikan sehingga memiliki konsentrasi 2,5 x 10 7 mL, kemudian plate dicuci dengan P B S sebanyak 3 kali untuk
menghilangkan lateks. Plate dikeringkan dengan suhu kamar. Setelah kering, masing-masing sumuran difiksasi dengan metanol
selama 3 0 detik dan kemudian coverslip direndam dengan cat Giemsa 2 0 % selama 20 menit. Tiap sumuran dicuci dengan
akuades dan dikeringkan pada suhu kamar. Jumlah latex yang terfagositosis oleh sel makrofag dapat diamati dengan
mikroskop cahaya dengan perbesaran 40 0 kali
 Evaluas
i
1. Pengujian Aktivitas Proliferasi Sel Limfosit

Mencit dieuthanasia dengan eter, kemudian dilakukan pengambilan limpa pada mencit kemudian ditambahkan medium Roswell Park Memorial Institute
(RPMI), lalu dilakukan sentrifugasi selama 1 0 menit dengan kecepatan 1 5 0 0 rpm, filtrat dibuang dan endapan disuspensikan dalam 5 mL dapar tris
amonium klorida untuk melisiskan eritrosit. Sel dicampur hingga homogen dan didiamkan pada suhu kamar selama 5 menit. Selanjutnya ditambahkan
dengan medium R P M I dan disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3 0 0 0 rpm. Supernatan dibuang, dan endapan yang didapat disuspensikan pada
medium komplit hingga volume 5 mL. Sel disuspensikan dalam medium komplit kembali hingga pengenceran seratus kali hingga jumlah sel nya 1,5 x
1 0 6 sel/mL. Selanjutnya sel limfosit siap untuk diuji aktivitasnya dan dikultur dalam inkubator.

Uji proliferasi limfosit ini menggunakan metode MTT-assay. Sebanyak 2 0 0 μL sel limfosit didistribusikan ke dalam sumuran mikroplat 96-wells sesuai
dengan masing-masing kelompok perlakuan kemudian ditambahkan vaksin hepatitis B sebanyak 1 0 μL/sumuran dan diinkubasi selama 1 jam dalam
inkubator. Kemudian ditambahkan ekstrak dengan berbagai konsentrasi pada masing-masing kelompok perlakuan dan diinkubasi kembali selama 4 8
jam. Setelah diinkubasi, masing-masing sumuran ditambahkan larutan M T T dan diinkubasi selama 4 jam. Reaksi dengan M T T dihentikan dengan
menambah reagen stopper yaitu larutan S D S 1 0 % dalam asam klorida 0,01 N sebanyak 5 0 μL pada tiap sumuran.

Selanjutnya diukur absorbansinya dengan mikroplate reader dengan panjang gelombang 5 5 0 nm dan didokumentasikan dengan kamera pada
mikroskop. Identifikasi Kandungan Senyawa dengan L C - M S dan G C - M S
Untuk fraksi yang teaktif dilakukan uji analisis selanjutnya menggunakan L C - M S di Pusat Penelitian Kimia-LIPI Jakarta. L C - M S dengan sistem
ESI (Electrospray Ionisation) dengan mode positif ion. Sedangkan untuk G C - M S dilakukan di Puslabfor Mabes Polri Jakarta.
 0 Ekstrak etanol jahe merah
dapat memberi efek
1 peningkatan aktivitas
fagositosi sel makrofag
pada konsentrasi 5 0 0 ppm.

kesimpulan 02
sel
Ekstrak pada kelompok A
meningkatkan proliferasi

:
limfosit.

0 Kandungan senyawa aktif

yanterdapat pada ekstrak
3 etanol jahe merah diduga
Geraniol
Tanaman Herba
Meniran
(Phyllanthus niruri
L.)

Dalam penelitian ini bahan yang digunakan yaitu Herba Meniran (Phyllanthus niruri
L.), Sukrosa, Propilenglikol, Nipagin, Essence Anggur dan Aquades
 Pembuatan Ekstrak
Meniran
Serbuk herba meniran diayak dengan pengayak 100 mesh. Sebanyak 250 gram serbuk herba meniran
dimaserasi dengan 1000 mL pelarut etanol 96% selama 24 jam dan dilanjutkan dengan remaserasi dengan
1000 mL pelarut etanol 96% selama 24 jam. Maserat yang diperoleh dihitung volumenya dan diuapkan
pelarutnya dengan rotary evaporator pada suhu 40°C hingga diperoleh ekstrak kenta

Standarisasi ekstrak herba meniran meliputi perhitungan kadar air, penetapan kadar abu total, penetapan
kadar abu tidak larut asam dan penetapan kadar flavonoid total

1. Perhitungan Kadar Air

Uji kadar air dilakukan dengan metode gravitimetri. Dimasukkan 10 gram zat dan ditimbang dalam wadah
yang telah ditara, dikeringkan pada suhu 105ºC selama 5 jam dan ditimbang. Dilanjutkan dengan
pengeringan dan ditimbang pada jarak 1 jam sampai perbedaan antara dua penimbangan berturut-turut
tidak lebih dari 0,25%. . Kadar air dihitung dalam % v/b (DepKes RI, 1995). Dimana kadar air untuk
ekstrak herba meniran tidak lebih dari 17% (DepKes RI, 2008).
2. Penetapan Kadar Abu Total

Sebanyak 3 gram ekstrak yang telah digerus dan

ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam krus
3. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
silikat yang telah dipijarkan dan ditara,
diratakan. Pijarkan perlahan-lahan hingga arang
Abu yang diperoleh pada penetapan kadar
habis dinginkan dan timbang. Jika cara ini arang
abu, dididihkan dengan 25 mL asam sulfat
tidak dapat dihilangkan, tambahkan air panas,
encer P selama 5 menit, kumpulkan bagian
saring kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa dan
yang tidak larut dalam asam, kemudian
kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan
saring melalui krus kaca masir atau kertas
filtrat kedalam krus, uapkan, pijarkan hingga
saring bebas abu, cuci dengan air panas,
bobot tetap, timbang, hitung kadar abu
pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Lalu
terhadap bahan yang telah dikeringkan di
hitung kadar abu yang tidak larut dalam
udara (DepKes RI, 2000). Dimana standarisasi
asam terhadap bahan yang telah dikeringkan
kadar abu total untuk ekstrak herba meniran
diudara (DepKes RI, 2000). Dimana
tidak lebih dari 3,5% (DepKes RI, 2008).
standarisasi kadar abu tidak larut asam
untuk ekstrak herba meniran tidak lebih dari
1,5% (DepKes RI, 2008).
4 Penetapan Kadar
Flavonoid Total
a.. Pembuatan Kurva Standar Kuersetin
Kuersetin ditimbang sebanyak 25 mg dimasukkan kedalam labu
ukur 25 mL, kemudian ditambahkan etanol 80% sampai 25 mL
(larutan induk 1000 μg/mL). Kemudian dibuat serangkaian larutan
standar 20 μg/mL, 40 μg/mL, 60 μg/mL, 80 μg/mL dan 100 μg/mL.
Dipipet masing-masing sejumlah 0,5 mL dari larutan standar
ditambah dengan 1,5 mL etanol 95%, 0,1 mL aluminium klorida
(AlCl3) 10%, 0,1 mL kalium asetat 1 M dan ditambahkan akuades
2,8 mL. Setelah itu diinkubasi selama 30 menit pada suhu 25oC.
Serapannya diukur pada λ 434,2 nm menggunakan
spektrofotometer Uv-Vis.
Kemudian dibuat kurva kalibrasi dengan menghubungkan nilai
serapan sebagai koordinat (Y) dan konsentrasi larutan standar
sebagai absis (X) (Azizah dkk., 2014).
 4 Penetapan Kadar
Flavonoid
b. Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Herba Meniran
Total
Ekstrak herba meniran diambil 5,0 g kemudian ditambah 25 mL etanol. Kemudian diaduk selama 24 jam
menggunakan alat pengaduk pada kecepatan 200 rpm, kemudian disaring dan filtrat yang diperoleh
ditambah etanol sampai 25 mL (Azizah dkk., 2014).

c. Penentuan Kadar Flavonoid

Larutan blanko dibuat dengan mengganti larutan standar dengan etanol 0,5 mL. Ditambah dengan 1,5 mL
etanol 95%, 0,1 mL aluminium klorida (AlCl3) 10%, 0,1 mL kalium asetat 1 M dan ditambahkan akuades 2,8
mL. Setelah itu diinkubasi selama 30 menit pada suhu 25oC. Setiap pengukuran serapan dibandingkan
terhadap blanko. Larutan uji berisi 1,0 mL ekstrak etanol herba meniran dipipet, kemudian ditambah etanol
sampai 10 mL dalam labu ukur. Sejumlah 0,5 mL larutan kemudian ditambah dengan 1,5 mL etanol 95%, 0,1
mL aluminium klorida (AlCl3) 10%, 0,1 mL kalium asetat 1 M dan ditambahkan akuades 2,8 mL. Setelah itu
diinkubasi selama 30 menit pada suhu 25oC. Serapannya diukur pada λ 434,2 nm menggunakan
spektrofotometer Uv-Vis. Pengujian dilakukan secara triplo. (Azizah dkk., 2014). Dimana kadar flavonoid
total untuk simplisia herba meniran tidak kurang dari 3,20% dihitung sebagai kuersetin (DepKes RI, 2008).
Formulasi
Senyawa
Ditimbang bahan-bahan secara seksama dan
botol sediaan ditera 60 mL. Kemudian dibuat
sirupus simpleks dengan melarutkan sukrosa
dengan aquades didalam beaker glass di atas
hot plate. Kemudian dilarutkan nipagin dalam
propilenglikol secukupnya (campuran I),
ekstrak herba meniran dilarutkan dengan sisa
propilenglikol hingga larut, selanjutnya
ditambahkan dengan campuran I dan sirupus
simpleks secukupnya hingga semua bahan
terlarut. Campuran ditambahkan essence
anggur, kemudian sediaan dimasukkan kedalam
botol dan ditambahkan sisa sirupus simpleks
hingga volumenya 60 mL
 Evaluas
i
Uji Evaluasi Sediaan:
1. Uji organoleptis yaitu sediaan sirup berwarna ungu pekat dengan aroma
anggur yang khas.
2.Bobot jenis sediaan sirup adalah 1,2482 gram/mL.
3.Uji volume terpindahkan hasil yang didapat pada percobaan ke-1 sebanyak
58 mL, percobaan ke-2 sebanyak 59 mL. percobaan ke-3 sebanyak 57 mL.
Hal ini menunjukkan bahwa sediaan tersebut telah memenuhi persyaratan
dimana volume yang terpindahkan tidak kurang dari 95% volume yang
dinyatakan dalam etiket.
4.Uji pH sediaan yang terukur adalah sebesar 5,52. Nilai pH sediaan sirup
sudah sesuai dengan nilai pH yang dipersyaratkan, dimana nilai pH yang
dianjurkan untuk sirup adalah berkisar antara pH 4-7
Uji viskositas. Rheogram yang diperoleh menunjukkan bahwa sediaan yang telah direkonstitusi
memiliki sifat alir pseudoplastik. Hal ini menunjukkan bahwa sediaan yang dibuat memenuhi
persyaratan dimana sediaan farmasi sebagian besar mengikuti sifat aliran Non-Newton
pseudoplastik yaitu tipe sifat alir yang akan menurun dengan meningkatnya kecepatan geser
 Hasil standarisasi ekstrak
0 herba meniran
menunjukkan bahwa
1 ekstrak herba meniran
yang diperoleh telah
memenuhi parameter
standar mutu ekstrak

kesimpulan herba meniran FHI

berdasarkan parameter uji
kadar air, parameter uji
kadar abu total, parameter

: uji kadar abu tidak larut

asam dan parameter uji
kadar flavonoid total,
sehingga ekstrak herba
meniran dapat digunakan
sebagai bahan dalam
produk farmasi
 Daftar
Pustaka
Masniah, Jafril Rezi, Ahmad Purnawarman Faisal. 2021. “Isolasi Senyawa Aktif dan Uji Aktivitas
Ekstrak Jahe Merah (Zingiber Officinale) Sebagai Imunomodulator”. Jurnal Riset Kefarmasian
Indonesia (hal. 77- 91).

Aidha, Novi Nur. 2020. “Mengenal Istilah Cosmeceutical, Nutricosmetics, dan Nutraceuticals”. Balai
Besar Kimia dan Kemasan.

Oki Sandra Agnesa dkk, “Aktivitas Imunostimulan Ekstrak Bawang Putih Tunggal pada Mencit
yang Diinduksi Escherichia coli”, dalam Jurnal Pharmaciana Vol.7, No.1, Mei 2017 (Malang: UM,
2017), hal. 106.

W. O. Sugarda dkk, “Formulasi Sediaan Sirup Peningkat Imunitas dari Herba Meniran
(Phyllanthus niruri L.)”, dalam Jurnal Kimia (Journal Of Chemistry) 13 (2), Juli 2019 (Bali:
Udayana, 2019), hal. 139.
Terima kasih
!
APAKAH ADA
PERTANYAAN?