Modul Inti 2:

Pemeriksaan HIV
BA

D A
Dr dr Agus Susanto Kosasih SpPK,MARS
TI Instalasi Patologi Klinik
K

H U S Sakit Kanker Dharmais

A
Rumah

Hp: 0816 813637 , agus.kosasih0102@yahoo.com

 TUJUAN

UMUM
Setelah menyelesaikan sesi ini peserta mampu melakukan
pemeriksaan laboratorium dengan benar & sesuai standar

KHUSUS
Peserta mampu :
1. Mengetahui pemeriksaan HIV menjadi bagian integral dari
pelayanan
2. Mengetahui strategi pemeriksaan & ragam metode pemeriksaan HIV
BA

3. Mengetahui kelebihan dan kekurangan pemeriksaan HIV rapid &

D A
EIA
Melaksanakan pemeriksaanT HIV
K

I HmetodeS rapid & interpretasi hasil

A
4.
pemeriksaan
U
PERAN & FUNGSI LABORATORIUM
• Bagian integral dari pelayanan kesehatan, berperan dalam
mendukung upaya kesehatan
(UU Kesehatan 36/2009)

• Fungsi Laboratorium :
- Diagnosis  etiologi penyakit  menentukan terapi
BA

- Monitoring & evaluasi terapi

D A
- Skrining TI
K

U S
A
- Deteksi dini masalah kes masy H surveilans
Target Virus HIV
 Target virus HIV: sel limfosit T helper (CD4)
 Infeksi HIV  menurunnya jumlah sel CD4 secara

bertahap
 Bila jumlah CD4 turun < 200 atau terdapat infeksi

oportunistik/ kanker  AIDS (Acquired

Immunodeficiency Syndrome)
BA

D A
TI
K

H U S
A
Perjalanan penyakit HIV

BA

D A
TI
K

H U S
A
Berbagai Metoda Deteksi HIV

BA

D A
TI
K

H U S
A
 ECLIPSE PERIOD
BA

D A
 Tidak ada HIV marker yang dapat dideteksi (serologi /
TI
K

virologi)
S
A
 H U
Diakhiri dengan munculnya HIV RNA or DNA (NAT) & HIV
p24 antigen
 10 hari dari terpapar HIV
 WINDOW PERIOD
BA

D A
 Dimulai dari terinfeksi HIV sampai terdeteksi
T I secara serologi.
K

antibodi HIV-1/2 H U S
A
 Tidak terdeteksi secara serologi, terdeteksi

secara HIV RNA/DNA (NAT), p24 antigen.

Durasi “window period”
 Tergantung beberapa faktor :
(1) Jenis virulensi virus

(2) Imunitas penderita

(3) metoda pemeriksaan (deteksi Antigen atau Antibodi)

 Window period tergantung pada generation pemeriksaan:

 4th generation < 3rd < 2nd < 1st
BA

D A
TI
K

H U S
A
Ragam Metode Pemeriksaan HIV
Diagnosis HIV (Antibodi)
1. Enzyme Immunoassay (EIA)
Enzyme-linked Immunosorbent assays (ELISA)
Chemiluminecence Immunoassays (CLIA)
Electro-chemiluminecence Immunoassays (ECLs)
2. Pemeriksaan Rapid Test (RTD)
3. Western Blot (WB) / tes komfirmasi HIV
Jenis sampel :
BA

EIA, WB : Serum

D A
T I(whole Sblood), Serum/plasma
Rapid Test : Kapiler
K

A
Stabilitas sampel : H U
Kapiler,serum/plasma : 24 jam pada suhu kamar,
serum/plasma : 7 hari pada 2 – 8 ooC
Ragam Metode Pemeriksaan HIV
Diagnosis awal untuk bayi dan Balita usia < 18 bulan
1. EID HIV DNA (kualitatif)
2. HIV RNA (Viral Load)
Minimal pada usia 6 minggu

Jenis Sampel
1. EID HIV DNA :
- darah kapiler Dry Blood spot (DBS)
BA

- plasma EDTA 2 mL

D A
stabilitas :7 hari (2 – 8ooC), 24 jam pada suhu kamar
T
K

2. HIV RNA (viral Load) I H U S

- plasma EDTA 3 mL A
 Ragam Metode Pemeriksaan HIV

Inisiasi, pemantauan terapi ARV

CD4 :untuk inisiasi dan pemantauan terapi ARV

◦ Non flowcytometry (POCT)
Darah EDTA 3 cc (stabilitas 6 jam)
◦ Flowcytometry
Darah EDTA 3 cc (stabilitas 24 jam)
BA

D A
HIV RNA (Viral Load) :
TI
K

pemantauan dan respon S

terapi ARV
A
H U
Plasma EDTA dipisahkan < 6 jam,
stabilitas 7 hari (2 – 8ooC)
 STRATEGI
PEMERIKSAAN
WHO & UNAIDS
Tujuan Prevalensi Strategi
Pemeriksaan infeksi HIV Pemeriksaan

Keamanan transfusi/ Semua prevalensi I

transplant

Surveilans > 10% I

< 10% II

Diagnosis:
BA

- Bergejala infeksi > 30% I

D A
HIV / AIDS < 30% II
TI
> 10% II
K

H U S
A
- Tanpa gejala < 10% III
STRATEGI PEMERIKSAAN
 Serial
- Sampel diperiksa dengan Uji/ reagen I
- Uji pertama menentukan apakah diperlukan
uji tambahan
 Paralel

Sampel diperiksa sekaligus/ secara bersamaan dgn

BA

D A
2 atau 3 uji / reagen yang berbeda
TI
K

H U S
A
 REAGENSIA YANG DIGUNAKAN ANTI HIV
Kegunaan
Screning / penyaring darah,
transfusi & transplantasi PMI
(Strategi I)
Surveilans HIV (Strategi II)
Diagnosis (Strategi III)
Permenkes No.15/ Tahun 2015
Pelayanan Laboratorium
pemeriksaan HIV dan Infeksi
Oportunistik
REAGEN
Rapid / EIA
Sensitivitas dan spesifisitas  99%
Rapid/ EIA
R/ I : Sensitivitas > 99 %
R/ II : Spesifitas > 98 %
Rapid / EIA
Reagen I : Sensitivitas > 99 %
Reagen II : Spesifisitas > 98 %
BA
Reagen III: Spesifisitas > 99 %
D A
Prinsip tes berbeda, Hasil diskordan < 5%
TI
K
H U S
A
Pemeriksaan secara serial
Petugas terlatih dan tersertifikasi
Harus melakukan PMI dan mengikuti PME
Reagen yang digunakan sudah lulus evaluasi dari
LRN RSCM
PENTING DIKETAHUI
 Diwajibkan membaca instruksi kerja yang ada di kotak
reagensia setiap kali membuka kotak reagensia yang
baru.
 Walaupun Merek reagensia yang sama, instruksi kerja

dapat berbeda setiap lot. No

 Perhatikan juga penyimpanan reagensia , harus sesuai

instruksi kerja, apakah suhu ruang atau suhu 2 – 8o C

BA

D A
 Jangan mencampur reagen dari kotak lama dengan
TI
K

H U S
A
kotak yang baru.
Pada saat menerima reagensia / melakukan pemeriksaan
yang perlu diperhatikan pada reagen

● Keadaan reagen
● Tanggal kadaluarsa reagen
● No lot pada reagen
● penyimpanan reagen
◦ Packet Insert (instruksi kerja)
Peralatan dan reagensia untuk tes HIV
BA

D A
- Reagen kit HIV TI
K

H U S
- mikropipet 5 – 50µl
A
- Tip kuning/ biru
- wadah sampah infeksius, Hipoclorit 5%
 Alur pemeriksaan Diagnosis HIV

Bersedia di tes HIV

Tes Antibodi HIV

A1

Nonreaktif Reaktif

Tes Antibodi HIV

A2

Nonreaktif Reaktif

Ulang tes HIV

A1 dan A2

Keduanya
Hasil Reaktif
Tes antibodi HIV
pengulangan
Keduanya Salah satu A3
Nonreaktif Reaktif
BA

D A
Nonreaktif Reaktif

TI
K

H U S
A
Hasil
A1 Pengulangan A1 (R) A1 (NR) A1 (R) A1 (NR) A1 (R) A1 (R)
non A1 (NR) A2 (NR) A2 (R) A2 (R) A2 (R) A2 (NR) A2 (R)
reaktif A2 (NR) A3 (NR) A3 (NR) A3 (NR) A3 (R) A3 (R) A3 (R)

Laporan laboratorium

Berisiko
HIV Negatif Indeterminate HIV Positif
Tidak Ya

Keputusan klinis
Laboratory Test Report

Laboratory’s report

BA

D A
TI
K

H U S
A
Clinical judgement
HIV Test Result Interpretation

BA

D A
HIV negatif HIV HIV
TI
K

S
Indeterminate positif
A
H U
 Catatan penting :

 Untuk hasil yang “indeterminate”, perlu diulang

dengan bahan baru yang diambil sedikitnya 14 hari
sesudah yang pertama
 Bila hasil tetap “indeterminate” dengan bahan baru,
lakukan pemantauan ulang pada 3, 6 atau 12 bulan.
Bila setelah 1 tahun hasil tetap “indeterminate”,
dianggap tidak terinfeksi HIV
 Bila ada fasilitas HIV RNA, hasil “indeterminate”
BA

sebaiknya dikonfirmasi dengan HIV RNA

D A
 Hasil Laboratorium hanya T I melaporkan reaktif dan
K

H U S
A
non reaktif.
 Kesimpulan klinis di simpulkan oleh dokter klinik.
Pembacaan Hasil

BA

D A
TI
K

H U S
A
Pembacaan Hasil
REAKTIF NON REAKTIF INVALID

C T1 T2 S C T1 T2 S C T1 T2 S

C T1 T2 S C T1 T2 S
BA

C T1 T2 S C T1 T2 S

D A
TI
K

H U S
A C T1 T2 S

23
Tentukan Hasilnya
???? ????

BA

D A
TI
K

H U S
A

24
Reaktif atau Non Reaktif Palsu
 Biological Error
- terjadi cross reaksi antigen
- terjadi ikatan antibodi yang non spesifik
- kontaminasi spesimen atau tertukar
 Human Error
- Kompetensi pemeriksa tidak sesuai (belum terlatih)
- Tidak mengikuti prodedur dalam instruksi kerja (kit insert)
BA

D A
- Tempat penyimpanan atau transportasi reagen tidak sesuai
TI
K

instruksi kerja S
A
H U
 Manufacturing Error
- Kualitas kit tidak terjaga
 KELEBIHAN & KEKURANGAN
PEMERIKSAAN HIV RAPID
NO KELEBIHAN
1 Cepat (< 30 menit)
2 Tidak menggunakan listrik
3 Reagensia dapat disimpan pada
suhu kamar (maksimal 25°C)
4 Mudah di gunakan, efektif u/
BA
layanan 1 hari
5 Keahlian teknis minimal
TI
K
6 Bisa di lakukan di lapangan
H -UTidak
KEKURANGAN
Pembacaan secara visual
(subjektivitas)
Waktu pembacaan harus tepat
Umumnya tidak disertai bahan kontrol
Jika Spesimen gagal mengalir ke
samping, harus di ulang
D A
- Jumlah pemeriksaan < 20
S dapat menyimpan bukti
A
pemeriksaan
- Resiko kontaminasi > tinggi ( jika
pemeriksaan dilakukan di lapangan)
 KELEBIHAN & KEKURANGAN
PEMERIKSAAN HIV EIA

NO KELEBIHAN KEKURANGAN
1 Dapat membedakan hasil reaktif Dilakukan oleh petugas lab. yang
berasal dari adanya antigen terlatih & trampil
P24/antibodi (dual signaling)

2 Dapat menyaring individu dengan Menggunakan listrik

ag positif & ab negatif di populasi Reagen harus di simpan suhu 2 -8
prevalensi infeksi HIV tinggi o
C
BA

D A
3 Dapat memperkecil window TI Waktu pemeriksaan rata-rata 2
K

UjamS
A
period (lebih akurat) H
4 Jumlah pemeriksaan > 60
5 Kontaminasi rendah
( memenuhi kaidah lab.)
 HASIL EVALUASI REAGEN HIV DARI RSCM

    (Per   Mei 2010)       

Type of
No. Kit Manufacturer kit Sensitivity Specificity Month
1 Abbott HIV 1/2 gO Abbott EIA 100.00 99.43 December 2001
2 Enzygnost anti-HIV 1/2 Plus Dade Behring EIA 99.34 98.30 December 2001
3 Murex HIV-1.2.O Abbott EIA 100.00 97.16 December 2001
4 HIV Uniform II Ag.Ab Organon Teknika EIA 98.68 96.59 December 2001
5 Vidas HIV Duo BioMerieux EIA 98.68 97.16 December 2001
6 Serodia HIV-1/2 Fujirebio Rapid 98.68 93.71 December 2001
7 Entebe HIV Dipstick Hepatika Laboratories Rapid 98.03 99.43 December 2001

8 Immunocomb II HIV 1&2 BiSpot PBS Orgenics Rapid 98.68 99.43 December 2001

9 HIV Spot Genelabs Diagnostics Rapid 94.70 100.00 December 2001

BA

10 Hexagon HIV Human Rapid 97.37 100.00 December 2001

D A
11 Determine HIV ½ Abbott Rapid 98.68 100.00 December 2001
12 HIV 1&2 Antibody Rapid Oncoprobe Biotech
TI Rapid 97.39 98.86 December 2001
K

H U S
Pemeriksaant

A
13 Eucardio HIV EIA Lab Inc EIA 49.34 98.30 December 2001
14 HIVase 1+2 General Biologicals EIA 84.21 90.91 December 2001
15 dBest One Step HIV-1/HIV-2 AmeriTek Rapid 98.03 80.11 December 2001
Pemeriksaant Strip
16 Capillus HIV-1/HIV-2 Trinity Biotech Rapid 96.05 99.43 December 2001
17 Genie II HIV-1/HIV-2 BioRad Rapid 95.39 99.43 December 2001
 HASIL EVALUASI REAGEN HIV DARI RSCM
(Per Mei 2010)
18SD HIV 1/2 ELISA 3.0 Standard Diagnostics EIA 98.03 98.86 August 2002
19SD HIV 1/2 3.0 Standard Diagnostics Rapid 99.33 99.44 August 2002
20Rapid HIV 1&2 Double Spot Biotech Atlantic Rapid 95.97 100.00 August 2002
21Vironostika Uniform II HIV Plus O Organon EIA 100.00 99.43 August 2002
Teknika/BioMerieux
22HIV 1&2 Antibody Rapid Oncoprobe Biotech Rapid 98.68 98.30 18 November 2002
Pemeriksaant version 2002
23Virolisa HIV 1 + 2 Index Union EIA 99.40 100.00 27 December 2002
Diagnostics
24HIV Tridot J Mitra Rapid 95.36 100.00 31 December 2002
25Ortho HIV-1/HIV-2 Antibody Ortho Diagnostics EIA 98.68 99.43 28 February 2003
Capture
26BioPemeriksaant Anti-HIV Tetra BioPemeriksaant EIA 100.00 100.00 17 June 2003
ELISA
27Human HIV-1+ 2 Human EIA 98.68 97.16 30 June 2003
BA

28HIV Combi EIA Roche Diagnostics EIA 98.03 100.00 2 July 2003

D A
29Hexagon HIV 3rd generation Human Rapid 99.34 98.30 30 July 2003
30Advance Quality Rapid HIV Intec
TI Rapid 98.68 98.86 6 August 2003
K

H U S
A
Pemeriksaant
31Acon HIV 1/2 Acon Rapid 99.34 97.73 25 August 2003
32Detect HIV Adaltis EIA 98.68 94.32 31 August 2003
33Entebe anti-HIV Cassette Hepatika Laboratories Rapid 98.68 98.86 31 August 2003
34Entebe anti-HIV Strip Hepatika Laboratories Rapid 98.03 98.30 31 August 2003
35 Vitros HIV ECI Ortho Diagnostics EIA 98.68 99.44 12 December 2003
36 Diaspot HIV 1/2 ? Rapid 98.68 89.20 23 February 2004
37 Vironostika HIV Uniform II Ag/Ab BioMerieux EIA 100.00 100.00 30-Sep-04
(2004)
38 Uni-Gold Recombigen HIV Trinity Biotech Rapid 98.00 98.86 24 November 2004
39 HIV 1/2 Human Immunodeficiency Elitzmedi Rapid 97.33 99.43 19 January 2005
Virus Rapid Pemeriksaant Singke
Use Kit
40 Architect HIV Ag/Ab Combo Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 18 February 2005
41 Instant Chek HIV EY Laboratories Rapid 95.33 86.36 22 March 2005
42 Acon HIV 1/2/O Triline Acon Rapid 99.33 96.59 15 April 2005
43 Elecsys HIV Combi Roche Diagnostics EIA 100.00 93.75 30 May 2005
44 Genedia HIV 1/2 Rapid 3.0 Green Cross Rapid 99.33 98.30 30 May 2005
45 Vitros HIV ECI Ortho Diagnostics EIA 100.00 98.30 1 July 2005

46 Onsight HIV Stat Rapid HIV-1/2 Amgenix Rapid 97.33 99.43 1 July 2005
Serum/Plasma Pemeriksaant
47 Master Screen Rapid Screen Masters Health Labs Rapid 99.33 100.00 4 July 2005
Pemeriksaant for HIV 1 and HIV 2
48 Axsym HIV 1/2 Combo Abbott Diagnostics EIA 100.00 100.00 16 September 2005
BA

D A
49 Wantai Screening HIV 1+2 Beijing Wantai EIA 100.00 94.89 5 October 2005
Biolocical Pharmacy
TI
K

Enterprice

H U S
A
50 Murex HIV Ag/Ab Combination Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 5 October 2005
51 HIV 1&2 Antibody Rapid Oncoprobe Rapid 100.00 100.00 26 October 2005
Pemeriksaant 4th generation
52 Genscreen Ultra HIV Ag-Ab BioRad EIA 100.00 97.16 8 April 2006
53 Vidas HIV Duo Ultra BioMerieux EIA 98.68 98.30 10 February 2006
54 Fokus Diagnostic Rapid Fokus Diagnostic Rapid 100.00 99.43 2 March 2006
Pemeriksaant Anti-HIV 1/2
Cassette
55Advance HIV 1&2 ELISA InTec Product Inc EIA 100.00 99.43 2 March 2006
Pemeriksaant kit (3rd generation)
56Microlisa HIV J Mitra EIA 96.67 96.02 13 March 2006

57One Step Anti-HIV (1&2) Tri-line InTec Product Inc Rapid 99.33 99.43 12 April 2006
Pemeriksaant
58Bioelisa HIV 1+2 Biokit EIA 98.67 98.30 5 May 2006

59Carestart TM HIV 1/2 Access Bio Rapid 98.67 99.43 5 May 2006

60Virolisa anti-HIV 1+2 Indec Diagnostica EIA 100.00 89.20 23 June 2006

61Anti-HIV 1+2 ELISA Axiom EIA 99.33 96.02 23 June 2006

62HIVase 1+2 General Biologicals EIA 99.33 98.86 10 July 2006

63Rapid HIV 1+2 Blood ? (Distributed by PT Rapid 82.67 100.00 27 November 2006
Pemeriksaant Asia Agrindo
Internasional)
64Core HIV 1 & 2 Core Diagnostics Rapid 96.67 98.86 27 November 2006

65Determine HIV 1/2 Abbott Diagnostics Rapid 99.33 99.43 13 December 2006
BA

66Foresight HIV 1/2/O EIA Acon EIA 100.00 96.59 18 June 2007

D A
67Immunocomb II HIV 1&2 TriSpot Orgenics Rapid 96.71 98.86 3 September 2007
TI
K

Ag-Ab

H U S
A
68Serodia HIV-1/2 Fujirebio Rapid 99.33 90.91 29 November 2007

69Signal HIV-1/2 Span Diagnostics Rapid 98.67 99.43 7 January 2008

70AIM HIV 1/2 Rapid Card Akurat Intan Madya Rapid 94.00 99.43 9 January 2008

71Vikia HIV 1/2 BioMerieux Rapid 100.00 100.00 1 February 2008

72 One Step Cassette Style Anti HIV IND Diagnostics Inc Rapid 99.33 99.43 18 April 2008
1+2 2 lines
73 HIV 1/2 Ultra Rapid Fast Rapid 89.12 99.43 15 May 2008

74 Determine HIV 1/2 Inverness Medical Rapid 99.33 97.73 26 May 2008

75 Mirawell Rapid HIV Medmira Rapid 95.33 98.30 26 May 2008

Pemeriksaant
76 Fokus Diagnostic Rapid Fokus Diagnostic Rapid 100.00 98.86 14 July 2008
Pemeriksaant Anti-HIV 1/2
Cassette
77 Entebe HIV Dipstick Hepatika Laboratories Rapid 98.00 98.86 6 October 2008

78 SFD HIV 1/2 PA Fujirebio-Biorad Rapid 100.00 78.98 10 November 2008

79 One Step Anti-HIV (1&2) Tri-line InTec Product Inc Rapid 99.34 100.00 22 December 2008
Pemeriksaant
80 Axsym HIV 1/2 gO Abbott Diagnostics EIA 100.00 99.43 2 March 2009

81 Oraquick Advance Rapid HIV-1/2 Orasure Rapid 98.00 99.43 22 May 2009
Antibody Pemeriksaant
BA

82 Insti HIV 1+2 Biolytica Rapid 99.33 100.00 22 June 2009

D A
83 Uji HIV Pakar Biomedika Rapid 99.33 94.89 22 June 2009
TI
K

H U S
A
84 Doublecheck HIV-1 & HIV-2 Orgenics Rapid 99.33 99.43 6 August 2009

85 Determine 1/2 HIV Ab/Ag Combo Inverness Medical Rapid 98.00 98.30 7 December 2009

86 Vironostika HIV Ag/Ab BioMerieux EIA 100.00 100.00 7 December 2009

87 Acon HIV 1/2/O Triline Acon Rapid 99.33 100.00 5 May 2010
BA

D A
TI
K

H U S
A