Praktikum Kimor II

ISOLASI-Farmasi F
Isolation, identification and purification of
caffeine from Coffea arabica L. and Camellia
sinensis L.: A combination antibacterial study
Kelompok 3 “CAFFEINE”
 Anggota Kelompok
- Diana Pangastuti
- Rifat Daniel Achmad
- Alviani Qoulan R.A
- Alyara Dinar Ramadhanti
- Priyanti fathonah
- Novita Aprilia
- Nanda Safira Ramdhani
- Nur Islami Vikri Abdillah
- Astry Delima Aprilia
- M.Fauzan Ahnaf A
- Ahmad Syauqi Rifani
(202010410311275)
(202010410311276)
(202010410311277)
(202010410311278)
(202010410311279)
(202010410311280)
(202010410311281)
(202010410311283)
(202010410311284)
(202010410311285)
(202010410311286)
1. EFEK FARMAKOLOGIS
 Efek Farmakologis

Setelah diidentifikasi, kafein dari tanaman Kopi (Coffea arabica L.) dan
Green tea (Camellia sinensi L.) tersebut diteliti sebagai antibakteri tunggal
dan gabungannya aktivitas melawan beberapa bakteri patogen. Inisial
skrining aktivitas antibakteri masing-masing tanaman senyawa diuji secara
in vitro dengan metode difusi agar.
Kafein merupakan senyawa yang menarik karena sifatnya yang
ekstensif aplikasi dalam persiapan farmakologis, termasuk analgesik,
bantuan diet dan obat pilek/flu.
2. Nama bahan DAN JUMLAH
BAHAN YANG DIGUNAKAN
Nama bahan yang digunakan :
Bahan utama :
1. Daun Camellia sinensis
2. Biji coffea arabica (tidak dipanggang)
-Daun teh hijau dicuci dengan air suling dan dikeringkan pada suhu kamar
dalam gelap
-kemudian digiling hingga bubuk menggunakan blender.
-Biji kopi mentah digiling dan disaring melalui saringan 250 µm untuk
mendapatkan tekstur yang seragam.
-Kopi dan kopi hijau yang diayak dengan jumlah yang akurat bubuk daun teh
(masing-masing sekitar 50 mg) dilarutkan dalam 25 ml air suling.
-Larutan diaduk selama satu jam menggunakan pengaduk magnet dan
dipanaskan dengan lembut hingga menghilangkan kafein dengan mudah dari
larutan.
-Kemudian, solusinya disaring menggunakan filter kaca untuk menghilangkan
partikel.
Jumlah Bahan yang Digunakan :

1. Kopi yang diayak : 50 mg

2. Bubuk daun teh hijau : 50 mg
3. Air suling : 25 ml
4. Diklorometana : 25 ml
5. Aseton panas : 5 ml
3. Metode isolasi
Penelitian ini dilakukan untuk mengisolasi senyawa bioaktif terpenting dari biji
Coffea arabica (kopi) dan Camellia daun sinensis (teh hijau). Kafein (3,7-dihydro-
1,3,7-trimethyl-1H-purine-2,6-dione) diisolasi dari kedua tanaman menggunakan
metode ekstraksi cair-cair, terdeteksi pada pelat kromatografi lapis tipis (KLT)
dibandingkan dengan kafein standar, yang berfungsi sebagai kontrol positif. Selain
itu, spektrometer inframerah transformasi Fourier (FTIR) dan kromatografi cair
kinerja tinggi (HPLC) analisis digunakan untuk mengkonfirmasi kemurnian dan
karakterisasi dari kafein yang diekstraksi. Bahan yang diisolasi dari keduanya
tanaman diselidiki untuk aktivitas antibakteri tunggal dan gabungannya terhadap
enam bakteri patogen terpilih. Gram- bakteri positif adalah; Staphylococcus aureus,
Bacillus cereus dan bakteri Gram-negatif termasuk; Escherichia coli, Proteus
mirabilis, Klebsiella pneumonia dan Pseudomonas aeruginosa.
Kedua senyawa pada konsentrasi 2 mg/ml menunjukkan sifat antibakteri yang sama
aktivitas terhadap semua bakteri yang diuji, kecuali P. mirabilis, dan efek
penghambatan tertinggi diamati terhadap P. aeruginosa menggunakan metode difusi
agar yang dimodifikasi. Konsentrasi hambat minimal (MIC) kafein ditentukan
dengan menggunakan mikrodilusi kaldu metode di 96 pelat mikrotiter multi-sumur.
Nilai MIC berkisar antara 62,5 hingga 250,0µg / ml untuk kafein yang diisolasi dari
kopi dan 62,5 hingga 500,0µg/ml untuk kafein teh hijau. Hasil kombinasi
menunjukkan efek aditif terhadap sebagian besar bakteri patogen terutama untuk P.
aeruginosa, menggunakan kedua uji antibakteri. Kata kunci: Aktivitas antibakteri,
Coffea arabica, camellia sinensis, Kafein
4. Cara menentukan
kemurnian senyawa
Dalam penelitian ini metode fisik yang berbeda digunakan untuk mengkarakterisasi
kafein yang diekstraksi, di antaranya adalah metode spektrum inframerah dan
HPLC, yang menunjukkan kemurnian mutlak dari kafein yang diisolasi. HPLC
adalah metode penentuan dan pemisahan kualitatif dan kuantitatif yang paling
banyak digunakan. Metode ini populer karena tidak merusak dan dapat diterapkan
pada senyawa yang labil secara termal (tidak seperti GC); ini juga merupakan teknik
yang sangat sensitif, karena menggabungkan berbagai pilihan metode deteksi.
5. Identifikasi struktur
 1, 3, 7-trimethylpurine-2,6-dione
3,7-dihydro-1,3,7-trimethyl-1H-purine-2,6-dione
Kafein diisolasi dari kedua tanaman menggunakan diklorometana sebagai pelarut
ekstraksi, dan kemudian dideteksi pada pelat KLT dibandingkan dengan kafein
standar. Kafein dari kedua tanaman dilarutkan dalam pelarut yang sesuai,
diaplikasikan pada pelat silika gel dan dikembangkan menggunakan sistem pelarut
: etil asetat :metanol : air ( 100 : 13.5 : 10). Pelat Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
terlebih dahulu disemprot dengan 1 g kalium iodida dan 1 g iodin yang dilarutkan
dalam 100 ml etanol, dilanjutkan penyemprotan dengan campuran 1 : 1 etanol 25%
HCl : 96% (pereaksi I/HCl)
6. Perhitungan redemen
Perhitungan :
Rendemen Kopi
2 mg/50 mg X 100 % = 4%

Rendemen teh hijau

2 mg/50 mg X 100 % = 4%
Terimakasih