N

DA
0
1
3
T IK
S
I
2

E P
R
M
A

TIS
N
A
F

O
G
, A
I

IO
L

A N
R
O
B
T
K T
M
IK
F E E
IN W
ES A
D NG
PE
 Desinfektan, antiseptik dan pengawet merupakan suatu senyawa kimia
memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan mikroba

Desinfeksi adalah proses melenyapkan mikroorganime, termasuk yang patogen, dari

permukaan benda tidak hidup.
Desinfeksi tidak membunuh semua mikroorganisme tetapi hanya mengurangi sampai
tingkat level tertentu

Antiseptik adalah destruksi atau inhibisi mikroorganisme pada jaringan hidup,

berfungsi untuk mencegah penyebaran infeksi berbahaya. Senyawa kimia digunakan
pada kulit atau membran mukosa. Syarat yang haru dipenuhi adalah memiliki
kemampuan antimikroba, tidak toksik dan tidak mengiritasi kulit.

Pengawet adalah suatu senyawa kimia yang biasanya terdapat pada produk tertentu
(termasuk didalamnya sediaan farmasi) untuk mencegah kontaminasi mikroba pada
produk dan untuk meminimalisir pasien terkena infeksi akibat produk yang digunakan.
Pengawet digunakan pada konsentrasi yang lebih rendah dibandingkan dengan
desinfektan dan antiseptik. Pengawet harus dapat membatasi proliferasi
mikroorganisme yang tidak dapat dihindari pada produk non steril.
 Komposisi
senyawa kimia

Toksisitas
Tantangan
senyawa
mikroorganisme
desinfektan
Faktor yang
mempengauhi
pemilihan
antimikroba

Faktor lingkungan Aplikasi rutin

Komposisi Senyawa Kimia
• Kemampuan membunuh
atau menghambat
tergantung dari reaksi kimia
yang terjadi, kecepatan dan
lama reaksi
• Dipengaruhi oleh
konsentrasi, suhu, pH dan
formulasi
Tantangan mikrobiologi
• Tipe mikroorganisme dan
level kontaminasi
(bioburden)  menentukan
hasil
• Bioburden tinggi
konsentrasi tinggi  waktu
yang diperlukan lebih lama
Bakteri vegetatif
Desinfektan  Pada konsentrasi in-use harus memiliki kemampuan membunuh sel
vegetatif mikroba.
Antiseptik dan pengawet  pada konsentrasi in-use harus bersifat biosidal, setelahnya
hanya bersifat biostatik.

Mycobacterium tuberculosa dan bakteri mikobakteria yang lain resisten terhadap

bakterisida. Bisa dengan cara menurunkan permeabilitas selular (resistensi intrinsik)
juga bisa dengan bantuan mutasi dan plasmid (resistensi ekstrinsik).

Spora mikroba juga bersifat resisten. Beberapa senyawa yang bisa membasmi spora
adalah senyawa kimia turunan aldehid, halogen dan peroksida.

Fungi lebih sensitif dibanding bakteri. Spora fungi juga bersifat resisten (conidia dan
chlamydiospora). Biasanya digunakan etanol 70%.

Virus  tergantung dari apakah virus tersebut punya selubung lipid atau tidak. Virus
tanpa selubung lipid lebih resisten, contohnya HAV, HBV dan HIV. Untuk HIV dan HBV
diperlukan desinfektan dengan level tinggi
Protozoa
Contohnya kista dari Acanthamoeba sp  masalah desinfektan lensa kontak.
Turunan klor  gagal untuk membasmi protozoa ini. Paling banyak digunakan adalah
Polyhexamethylene Biguanida. Yang paling efektif  hidrogen peroksida

Prion
Infeksi yang diakibatkan prion banyak terjadi di otak, tulang belakang dan mata.
Biasanya desinfeksi dilakukan terhadap alat-alat medis yang kontak dengan jaringan
terinfeksi  direndam dalam NaOH 1 N atau NaOCl (20000 ppm Cl2) selama 1 jam
kemudian dilanjutkan dengan autoklaf, pembersihan dan sterilisasi rutin  rekomendasi
WHO
Aplikasi Rutin
• Penggunaan desinfektan
tidak boleh merusak
instrumen  korosi logam,
tekstur polimer, kejernihan
lensa
• Beberapa plastik dan karet
bisa mengadsorpsi
desinfektan  QAC oleh
bahan pakaian, fenolik oleh
karet  [desinfektan] turun
Faktor lingkungan
• Komponen organik (darah, faeces,
susu, residu makanan, protein) 
mempengaruhi kerja desinfektan 
membentuk barrier ke permukaan
atau mengadsoprsi senyawa kimia
Toksisitas senyawa kimia
• COSHH (Control of Substance
Hazardous to Health)
membatasi penggunaan
senyawa fenolik, formaldehid
dan glutaraldehid
 Asam dan
Ester
Turunan
senyawa Alkohol
lain

Surfaktan Aldehid

Tipe
Senyawa

Fenol Biguanida

Senyawa
Peroksida Halogen
Logam
Berat
 Senyawa Kimia yang Digunakan
Asam dan Ester
• Aktivitas antimikroba kebanyakan
oleh senyawa asam organik,
terutama asam lemah yang akan
terdisosiasi. Yang memiliki aktivitas
antimikroba adalah bentuk dasar
(HA). Nilai pKa juga mempengaruhi
formula yang digunakan
• Asam benzoat, asam sorbat
• Belerang dioksida, sulfit dan
metabisulfit
• Metil, etil, propil, dan butil
prahidroksibenzoat
Alkohol
• Sebagai desinfektan dan
antiseptik, contoh etanol dan
IPA. Etanol pada konsentrasi
100% tidak efektif, efektif 60-
95%. IPA lebih toksik 60-70%.
Penetrasi rendah dipengaruhi
komponen organik.
• Sebagai pengawet, contoh benzil
alkohol (2.0%), klorbutanol
(0.5%), feniletanol (0.25-0.5%),
bronopol (0.01-0.1%)
 Senyawa Kimia yang Digunakan
Aldehid
• Glutaraldehid memiliki spektrum luas. Tidak
dipengaruhi senyawa organik. 1 menit 
bakteri mati; 3 jam  spora. Punya 2 ggs
aldehid yang reaktif. pH tinggi aktivitas
tinggi tp tdk stabil (terbentuk polimer). pH
rendah stabil tp kurang aktif. Konsentrasi 2%
dalam suasana asam, sebelum digunakan
ditambah agen pembasa, digunakan untuk
endoskop, laparoskop, dll.
• O-phtalaldehyde (OPA) stabil pada pH 3-9
• Formaldehid  toksik, dalam bentuk
padatan atau larutan 34-38%. Gas dibentuk
dengan direaksikan KMnO4 dan H2O. Bisa
juga untuk desinfektan permukaan (formalin
4%)
Biguanida
• Klorheksidin  punya struktur
proguanil (aktivitas antimikroba).
Yang digunakan dalam bentuk
garam glukonat, asetat. Pada pH 7-8
membentuk dikation yang dalam
sabun akan membentuk air sadah.
Air yang digunakan harus air deion
atau destilasi. Aktivitas dipengaruhi
komponen organik.
• Poliheksametilen biguanida (PHMB)
 digunakan untuk tetes mata,
spektrumnya luas meliputi bakteri
Gram negatif dan positif
 Senyawa Kimia yang Digunakan
Halogen Logam Berat
• Klorin • Logam yang biasa
• Hipoklorit (NaOCl)  kompatibel dengan
berbagai surfaktan anion dan kation, digunakan adalah merkuri.
dipengaruhi material organik. pH optimum Contoh senyawa thiomersal,
5,0
• Senyawa klorin organik  turunan =N-Cl, fenilmerkurinitrat/asetat 
contoh kloramin T dan dikloramin T diabsorbsi oleh karet dan
untuk desinfeksi air minum; turunan =N-Cl
dari senyawa N heterosiklik (NADCC, Na- plastik. Digunakan untuk
diklorosianurat) dalam bentuk tablet tete mata, lensa kontak.
dengan air akan membentuk klorin
• Iodin kelarutan dalam air rendah dapat
Dahulu untuk pengawet
meninggalkan warna pada kulit dan vaksin  bersifat
pakaian
neurotoksik
• Iodofor (pembawa iodin), terbagi menjadi
4 : polyoxymer iodofor, surfaktan kationik
iodofor, surfaktan nonionik iodofor dan
PVP-I
 Senyawa Kimia yang Digunakan
Senyawa Peroksida
• Hidrogen peroksida  Desinfektan level
tinggi dengan cara pembentukan radikal
hidroksil. Senyawa dekomposisinya non
toksik dan biodegradable. Konsentrasi
yang biasa digunakan adalah 3-6%. Hingga
35% bersifat sporicidal.
• Asam perasetat  Peroksida dari asam
asetat. Lebih poten dibandingkan
hidrogen peroksida. Tetap aktif dengan
kehadiran komponen organik. Konsentrasi
0.2-0.35%. Biasa digunakan secara sinergis
dengan hidrogen peroksida untuk sterilan
mesin dialisis
Fenol
• Aktif pada pH rendah. Bersifat
baktersida tetapi tidak sporisida.
Punya efek kaustik dan toksik.
• Senyawa turunan lain, contoh
karbol (asam karbolat) dan lysol
(kresol, xylenol) fenol yang
diperoleh dari hasil destilasi
fraksinasi batu bara 
toksisitasnya rendah
• Turunan bisphenol, contoh :
triclosan (anti pseudomonal)
 Senyawa Kimia yang Digunakan
Surfaktan
• Yang paling banyak
digunakan adalah surfaktan
kation (QAC), contoh
benzalkonium klorida,
cetrimide. Aktif pada pH
netral, inaktif pada pH
asam, dipengaruhi
komponen organik, paling
aktif terhadap bakteri Gram
positif
Senyawa turunan lain
• Diamidin, contoh propamidin
untuk sediaan tetes mata
(0.1%)
• Pewarna, contoh gentian
violet, brilliant green 
pewarna trifenilmetan 
punya aktivitas bakterisotatik,
fungistatik
• Turunan quinolon  aktif
terhadap Gram positif 
digunakan pada lozenges
 Faktor yang mempengaruhi aktivitas
antimikroba desinfektan
Pertahanan alami mikroorganisme Densitas mikroba
• Prion, endospora dan • Agar bisa bekerja dengan
mikobakteria baik desinfektan harus
• Mikroba yang tumbuh di dapat menempel pada
permukaan dalam bentuk permukaan mikroba
biofilm • Makin tinggi jumlah
• Uji untuk desinfektan harus mikroba  makin lama
lebih banyak menggunakan waktu yang dibutuhkan
mikroba, contoh Ps.
aeruginosa, E. coli, S.
aureus, E. hirae
 Faktor yang mempengaruhi aktivitas
antimikroba desinfektan
Konsentrasi desinfektan dan waktu
pemaparan
• Makin tinggi konsentrasi • Death time : waktu yang
desinfektan  efikasi makin dibutuhkan untuk membunuh
tinggi (kecuali untuk mikroba
iodofor)  makin sedikit • Kurva antara log t dan log [] 
waktu yang dibutuhkan gradien merupakan
konsentrasi eksponen
• Berlaku hubungan
• HgCl2 ƞ = 1, artinya kekuatan
eksponensial antara potensi
akan menurun dengan faktor
dam konsentrasi
pengenceran 1. Pengenceran 3
kali akan menurunkan aktivitas
sebanyak 31 = 3 kali
 Faktor yang mempengaruhi aktivitas
antimikroba desinfektan
Faktor fisika dan kimia
• Temperatur
Sampai batas tertentu aktivitas akan naik,
suhu naik secara aritmatika dan kecepatan
akan naik secara geometri
• Kation divalen  pada air sadah dapat
berinteraksi dengan permukaan sel sehingga
memblok situs adsorpsi desinfektan pada
permukaan sel. Bisa menyebabkan kerusakan
membran luar bakteri Gram – sehingga
menyebabkan peningkatan masuknya senyawa
• pH
- Mempengaruhi pertahanan dan
pertumbuhan mikroorganisme
- Mempengaruhi potensi desinfektan dan
antimikroba
- Mempengaruhi penempelan pada
permukaan sel
- Apabila senyawa asam/basa  derajat
ionisasi dipengaruhi
- Senyawa glutaraldehid dan QAC pH
tinggi, aktivitas tinggi
- Peningkatan pH eksternal  permukaan sel
jadi cenderung lebih negatif  sehingga
meningkatkan penempelan senyawa
kationik seperti klorheksidin dan QAC
 Faktor yang mempengaruhi aktivitas
antimikroba desinfektan
Kehadiran komponen organik
• Aktivitas antimikroba • Material organik juga dapat
dipengaruhi oleh kehadiran menempel pada permukaan
komponen organik seperti sel mikroba, memblok
faeces, protein adsorpsi desinfektan pada
• Desinfektan halogen sel mikroba
(NaOCl) akan bereaksi • Uji desinfektan dilakukan
dengan material organik pada kondisi “kotor” dan
membentuk kompleks yang “bersih”
tidak aktif
 Evaluasi Desinfektan Cair
• Capacity-Use Test (Kelsey-Sykes Test)
Uji Suspensi Mikroba
• Uji Koefisien Fenol (Rideal-
Walker Test)
Uji standarisasi senyawa fenol
untuk membunuh bakteri
Salmonella thypii. Kekurangan
tidak bisa digunakan untuk
senyawa selain fenol karena
menggunakan fenol sebagai
standarnya. Bakteri juga hanya
untuk S. thypii tidak bisa
digunakan bakteri lain  uji
tidak representatif
Prinsip : Tes kapasitas, dimana inokulum
bakteri ditambahkan pada 3 lot
desinfektan, pada rentang waktu 0, 1 dan
5 menit.
Uji menggunakan 4 mikroba yaitu S.
aureus, E.coli, P. aeruginosa dan Proteus
vulgaris.
Uji dilakukan pada media cair yang
mengandung Tween 80. Menggunakan
pipet terkalibrasi. Desinfektan diencerkan
dengan air sadah. Dilakukan dalam 3
replikasi
Kelebihan : Organisme yang digunakan
lebih banyak, dibandingkan antara kondisi
kotor dan bersih, tes kapasitas 
Pass/Fail, bukan berbentuk koefisien
Kekurangan : hanya bisa dilakukan untuk
desinfektan yang jernih
 Evaluasi Desinfektan Cair
Quantitative Suspension Test
• Suspensi bakteri ditambahkan dengan
desinfektan uji, kemudian koloni bakteri
yang tersisa dihitung dibandingkan
dengan suspensi bakteri tanpa
desinfektan.
• Proses desinfeksi dihentikan dengan
penambahan netralizer atau diencerkan
dengan pengencer yang sesuai
• Harus diuji dengan kehadiran albumin
dan air sadah
• Bisa juga digunakan metode filtrasi
membran, dimana suspensi bakteri +
desinfektan disaring dengan membran
filter, kemudian filter disimpan pada
media agar padat
 Evaluasi Desinfektan Cair
• Simulated use test
In-use dan simulated use test
• In-use test
Dikembangkan oleh Maurer 1972,
digunakan untuk menguji desinfektan
dalam kemasan atau wadah
Sejumlah kecil cairan dibuang dari wadah
yang digunakan, kemudian diencerkan
dengan sejumlah pengencer. Selanjutnya
dihitung jumlah mikroba yang terkandung.
Dibuat dalam 2 petri, satu petri diinkubasi
pada 32°C selama 3 hari dan satu petri
diinkubasi pada suhu kamar selama 7 hari
Pertumbuhan 1-2 koloni pada plat agar
diabaikan karena desinfektan bukan
sterilan.
Pertumbuhan ≥10 koloni menunjukkan
aktivitas sidal yang rendah
Kontaminasi suspensi mikroba pada
instrumen, permukaan dan kulit.
Pertama-tama permukaan dibiarkan
kering. Kemudian diekspos
desinfektan selama beberapa watu
tertentu. Selanjutnya mikroba
dihilangkan dengan diusap
menggunakan alat swab steril. Alat
swab kemudian diresuspensi dengan
cairan penetral  diuji mikroba yang
masih hidup
Biasanya produk yang diuji
dibandingkan dengan komparator
seperti 60% 2-propanol yang biasa
digunakan untuk desinfektan tangan
 Evaluasi Desinfektan Cair
Uji Fungisida
• Ragi, biakannya seperti bakteri karena
uniselular
• Suspensi spora (dalam NaCl fisiologis
0.9% yang mengandung Tween 80),
dari biakan 7 hari
• Jumlah spora dalam suspensi 106
cfu/mL
• Media yang digunakan Malt Extract
Agar, inkubasi 20°C, 48 jam atau lebih
• Syarat dari EN 1275 minimum reduksi
dengan faktor 104 dalam 60 menit
• Uji dilakukan pada Candida albicans
dan Aspergillus niger
Uji Virusida
• Sulit dilakukan karena virus merupakan
parasit intraseluler dan tidak bisa
ditumbuhkan pada media sintetis
• Uji biasa dilakukan untuk rotavirus,
adenovirus, poliovirus, pox virus, HIV, HBV
dan FMDV
• Virus ditumbuhkan terlebih dahulu pada
cell line, kemudian dicampur dengan air
yang telah mengandung pengotor organik
dan desinfektan yang diuji, dibiarkan
beberapa waktu kemudian residu
infekivitas dilakukan dengan uji kultur
jaringan/plak
• Syarat EN 14476 harus ada pengurangan
faktor 104
• Untuk sel yang tdk dapat ditumbuhkan di
lab maka digunakan sel terinfeksi
 Evaluasi Desinfektan Cair
Uji Desinfeksi Prion
• Membutuhkan biaya yang
mahal dan waktu yang lama
• Menggunakan jaringan yang
dihomogenisasi
• Log penurunan ditetapkan
dari penentuan periode
inkubasi
• Desinfektan yang biasa
digunakan adalah NaOH
dan NaOCl
 Permasalahan yang timbul
• Mikobakteria  bersifat hidrofob, sulit membuat suspensi bakteri yang tidak
menggumpal
• MTB sulit tumbuh dan berbahaya sehingga diganti dengan bakteri M. hirae
• Spora jamur yang digunakan untuk uji membutuhkan inkubasi beberapa hari
(lebih lama) untuk memfasilitasi pertumbuhan
• Bakteri dalam bentuk biofilm diinokulasikan pada permukaan dalam bentuk
biofilm atau menggunakan sumur2 mikro. Setelah itu diimersikan dengan
desinfektan selama interval waktu tertentu  sel pada biofilm diambil lalu
disonikasi dan diresuspensi pada medium netralisasi  dihitung jumlah sel
mikroba dalam bentuk planktonik
• Bakteri yang hidup di mikroorganisme lain, diuji 2 kali, yaitu suspensi bakteri
tersebut dan suspensi bakteri dan protozoanya. Sel yang dihitung adalah
yang hidup setelah sel protozoanya lisis
 Evaluasi Desinfektan Padat
• Biasanya terdiri dari komponen desinfektan yang
diencerkan dengan serbuk inert
• Senyawa fenol yang diadsorpsi pada kieselguhr, atau
NADCC, acriflavine, zinc undekanoat, asam salisilat yang
dicampur dengan talk
• Mikroba uji ditumbuhkan pada media padat. Desinfektan
padat ditaburkan pada permukaan media padat yang telah
ditumbuhi mikroba, menggunakan pengencer inert sebagai
kontrol. Pertumbuhan kemudian diamati selama inkubasi.
Lalu dilakukan subkultur untuk melihat jumlah mikroba
yang dapat bertahan hidup
 Evaluasi Desinfektan Gas
• Suspensi mikroba dibuat dalam ruangan
tertutup, lalu diekspos pada desinfektan (bisa
dalam bentuk radiasi, aerosol atau uap kimia).
Mikroba yang bertahan hidup di udara
disampling dengan menggunakan Air sampler
• Kesulitan terletak pada bagaimana caranya
membuat suspensi bakteri di udara dan
bagaimana caranya menetralkan desinfektan
sisa uji
 Evaluasi Pengawet
• Pengawet biasanya digunakan pada sediaan kosmetik
• Masalah muncul pada bentuk sediaan dimana pengawet
biasanya terkonsentrasi pada salah satu fase
• Menggunakan metode uji suspensi atau uji pengenceran
• Sediaan farmasi diinokulasi dengan biakan jamur dan bakteri.
Untuk sediaan yang mengandung kadar gula tinggi juga
diujikan Zygosaccharomyces rouxii (jamur/ragi osmofilik)
• Jumlah bakteri yang mati kemudian dihitung
• Diuji untuk sediaan injeksi multidose, tetes mata, sediaan
topikal dan sediaan oral
 Rapid Test
• Epifluorescent 
menggunakan pewarna
acridine orange, dilihat
di bawah UV, sel hidup
akan berfluoresens
hijau kuning, sedangkan
sel mati tetap orange
• Bioluminescence
• PCR (Polymerase Chain
Reaction)