MEDIA TANAM

PADA LAB. JAMUR

Dra. Mulyati MS
Dr. dr. Robiatul Adawiyah, M.Biomed
 JENIS MEDIA YANG
DIGUNAKAN
Media Isolasi Jamur :
 Agar Sabouraud Dekstrosa (ASD / SDA)
 Bird Seed Agar (BSA)
 Potatoes Dekstrosa Agar (PDA)

Media Identifikasi Jamur

 Chromagar Candida (CMC)
 Chromagar Malassezia (CMM)
 Rice Cream Tween (RCT)/ Corn Meal Tween (CMT)
 SDA
 Fermentasi/ Asimilasi Karbohidrat
 BSA (Bird seed Agar)
 Agar Sabouraud Dekstrosa
 Merupakan media yang baik untuk isolasi jamur dari
bahan klinik
 Media ini juga digunakan sebagai
media identifikasi jenis jamur kapang
dengan tehnik slide culture
 Untuk mencegah pertumbuhan bakteri
kedalam media tersebut dapat
ditambahkan antibiotik Kloramfenikol
500 mg/l (ASD +)
Komposisi ASD ( gr/L)
 Pepton 10 gr
 Glucosa 40 gr
 Agar 15 gr
 Kloramfenikol 500 mg

p H 5,6 ± 2
Disimpan pada suhu 25oC
 Cara Membuatnya ASD/SDA :

 65 gram bubuk ASD dilarutkan dalam 1000 ml

akuades kemudian dipanaskan sampai
mendidih dan bubuk larut sempurna
(ASD/SDA -)
 Untuk membuat ASD/SDA (+) tambahkan
kloramfenikol kedalam larutan media yang
masih panas dan dikocok sampai larut
sempurna
 Media disterilisasi dalam autoclave selama 15
menit pada suhu 121oC
 Pembuatan Media ASD dalam Tabung

 Larutan media dimasukkan ke dalam tabung reaksi 1/3

bagian tabung atau 7,5 ml – 10 ml larutan kemudian
ditutup dengan kapas atau tutup ulir
 Media dalam tabung disterilisasi dalam autoclave
selama 15 menit pada suhu 121oC
 Media didinginkan pada suhu ruang dengan
meletakkan tabung tersebut pada meja yang datar,
dimana bagian mulut tabung posisinya lebih tinggi
daripada bagian dasar tabung  akan terbentuk media
agar miring
 ASD + lipid (Olive oil)

 Media ini dipakai untuk isolasi jamur Malassezia sp dari

bahan klinik
 Lipid: olive oil atau minyak kelapa 1-2%
 Tambahkan antibiotik untuk mencegah pertumbuhan
bakteri
 Cara membuat ASD + lipid
(gr/L)
 Sama seperti membuat SDA (+)
 Tambahkan olive oil sebanyak 1-2 % (10-20 ml /L)
 Larutan SDA + minyak masukkan ke dalam tabung
reaksi 7,5-10 ml kemudian disterilisasi di dalam
autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC
 Media didinginkan caranya seperti mendinginkan
agar miring setelah dingin dibagian permukaan
media akan dilapisi oleh lipid/minyak
 Media siap digunakan untuk isolasi Malassezia sp.
 CHROMAGAR Candida
 Medium ini merupakan medium
Khusus untuk identifikasn beberapa
spesies Candida berdasarkan
Warna koloni yang muncul
 Spesifik untuk identifikasi jenis:
C. albicans, C. tropicalis, C.
parapsilosis, C. glabrata dan
C. krusei
 bersifat fotolabil  tidak boleh
terkena cahaya (Disimpan dalam
keadaan tertutup)
 Media CMC (gr/L)

Komposisi :
 Agar 15 gr
 Peptone 10.2 gr
 Chloramphenicol 0,5 gr
 Chromogenic mix 22 gr
 ph 6,1
 Cara membuat media
CMC (Chromagar)
 Timbang 47.7 gr kemudian ditambahkan 1000 ml akuades
 Panaskan larutan media CMC diatas api sampai larut
sempurna
 Dalam proses pemanasan tidak boleh sampai mendidih
 Tuang larutan media CMC kedalam cawan petri dan
dibiarkan membeku dan dingin
 Dalam proses pendinginan dan penyimpanan sebaiknya
media tidak terkena cahaya matahari
 Media disimpan didalam refrigerator (kulkas biasa)
 RCT (Media agar tajin) atau
CMT (media tepung jagung)
 Media ini dipakai untuk identifikasi Candida sp dengan
tehnik Slide culture
 Dapat mengidentifikasi seluruh spesies Candida
berdasarkan gambaran susunan spora dan hifa semu
yang khas
 Menggunakan beras (RCT) atau tepung jagung (CMT)
 Penambahan Tween 80 sebanyak 1% untuk
mempercepat pembentukan hifa semu dan spora
sehingga dalam waktu 2 hari sudah bisa dibaca
 Komposisi Media Agar Tajin Tween
(RCT)

 Beras 2 gr
 Agar murni 2 gr
 Akuades 100 ml
 Tween 80 1 ml
 Cara membuat media RCT
 Beras 2 gr (2%) dan100 ml akuades dimasak dengan api kecil selama
45 menit
 Labu Erlenmeyer dletakkan corong yang sudah dilapisi dengan kain
kasa kemudian saring rebusan beras tadi  volume air tajin yang
didapat diukur
 Tambahkan akuades secukupnya sampai volume air tajin mencapai
100 ml
 Tambahkan 2 gran agar murni dan dipanaskan sampai larut sempurna
 Media disterilisiasi dgn autoclave selama 15 menit pada suhu 121oC
121oC  biarkan suhu media sampai sampai 60oC
 Masukkan 1 ml Tween 80 dan dikocok sampai larut sempurna
 Media dapat disimpan dalam refrigerator
 BSA/NSA (Bird sheed agar/
Niger sheed agar)
Komposisi : untuk membuat 500 ml media

 Bird sheed 50 gram diblender hingga

hancur
 Bacto agar 10 gram
 Kloramfenikol 250 mg
 Akuadest 500 m;
 Cara membuat BSA / NSA
 Bird sheed (BS) yang telah hancur ditambahkan 500 ml
akuades dan direbus selama 30 menit kemudian disaring
 Air rebusan BS yang didapat volumenya disesuai menjadi
500 ml dengan penambahan akuades
 Tambahkan bacto agar dan kloramfenikol kemudian
dilarutkan kembali
 Masukkan ke dalam tabung perbenihan dan disterilisasi
dengan autoclave selama 20 menit dengan tekanan 1,5
atm, suhu 121oC
Terima kasih
SELAMAT
PRAKTIKUM