Nama : Elvira Masarrang

NIM : 210106503001
Kelas : Kimia Sains
TUGAS BIOKIMIA III
Cara pembuatan Nutrient Agar
Untuk membuat 1 liter medium ini, lakukanlah prosedur berikut ini :
a. Timbang sebanyak 23,5 gram medium instant.
b. Suspensikan dalam akuadest dan volume akhir dibuat 1000 ml.
c. Panaskan suspensi ini sampai agar-agar menjadi matang.
d. Masukkan ke dalam tabung reaksi (± 5ml untuk media miring, dan ± 10 ml untuk media tegak).
e. Sterilkan dengan autoclave pada temperatur 121 oC dan tekanan 15 lbs. Selama 15 menit.
f. Simpan pada tempat yang dingin dan kering (dalam kulkas).
Pembuatan Malt Extrak
Untuk membuat 1 liter medium ini, lakukan kangkah-langkah berikut :
a. Timbang sebanyak gram media instant.
b. Suspensikan dalam akuadest sampai volume akhir menjadi 1000 ml.
c. Masukkan ke dalam tabung reaksi (kurang lebih 7 ml tiap tabung)
d. sterilkan dengan autoclave pada suhu 121 oC dan tekanan 15 lbs, selama 15 menit
Pembuatan medium Lactose Broth
Dalam praktikum ini akan dibuat medium lactose broth dengan dua konsentrasi (single strength dan
double strength). Untuk membuat satu liter single strength lactose broth, lakukanlah prosedur berikut
ini :
a. Timbang sebanyak 13 gram medium lactose broth instant.
b. Suspensikan dalam akuades sampai volume akhir mencapai 1000 ml.
c. Masukkan ke dalam tabung reaksi yang telah dilengkapi dengan tabung Durham. Petunjuk
Praktikum Mikrobiologi 6Oleh: I N. Sujaya
d. Sterilkan dengan autoclave pada suhu 121 oC pada tekanan 15 lbs selama 15 menit.
e. Simpan pada tempat yang sejuk dan kering (dalam kulkas).
f. Prosedur yang sama dikerjakan untuk membuat double strength lactose broth, tapi konsentrasinya
dilipat duakan.
Pembuatan medium BGBB (Brilliant Green Bile 2 % Broth)
Untuk membuat satu liter medium ini, lakukan prosedur berikut ini :
a. Timbang sebanyak gram medium instant.
b. Suspensikan dalam akuadest dan volume akhir dibuat menjadi 1000 ml.
c. Masukkan ke dalam tabung reaksi kecil yang telah dilengkapi dengan tabung Durham.
d. Sterilkan dengan autoclave pada temperatur 121 oC pada tekanan 15 lbs, selama 15 menit.
e. Simpan di tempat yang sejuk dan kering.
Pembuatan medium Endo Agar
Untuk membuat 1 liter medium ini, lakukanlah prosedur berikut:
a. Timbang sebanyak gram medium instant.
b. Suspensikan dalam akuades dan buat volume akhir menjadi 1000 ml.
c. Panaskan sampai semua komponen larut.
d. Sterilkan dengan autoclave pada suhu 121 oC pada tekanan 15 lbs, selama 15 menit.
e. Simpan ditempat yang sejuk dan kering (dalam kulkas).
Pembuatan medium Palte Count Agar
Untuk membuat 1 liter medium ini, lakukanlah prosedur berikut:
a. Timbang sebanyak 23,5 gram medium instant PCA, Pronadisa).
Catatan : Merk yang berbeda mempunyai kompisisi yang berbeda sehingga berat gram / lt
mungkin berbeda. Sehingga, perhatikan panduan yang tertulis pada kemasan/botol media yang
dipergunakan.
b. Suspensikan dalam akuades dan buat volume akhir menjadi 1000 ml.
c. Panaskan sampai semua komponen larut (langkah ini bisa tdak dilakukan apabila tidak
mempersiapkan agar tega/agar mirin dalam tabung reaksi).
d. Sterilkan dengan autoclave pada suhu 121 oC pada tekanan 15 lbs, selama 15 menit.
e. Media bisa dituang ke dalam cawan petri yang sudah di autovlave .
f. Biarkan agar dalam cawan petri membeku, tutup cawan di buka sampai agar memebrku (20-30
menit dalam laminar flow).
g. Simpan ditempat yang sejuk dan kering (dalam kulkas) dalam keadaan dibungkus kantong plastik
dan agar diletakkan terbalik (bagian tutup cawan petri di bawah dan agar di atas).
Sumber : I Nengah Sujaya. 2017. Penuntun Praktikum Mikrobiologi. Program Studi Ilmu Kesehatan
Universitas Udayana
Pembuatan Potato Dextrose Agar (PDA)

1. Timbang komponen media dengan menggunakan timbangan analitis untuk volume yang diinginkan
sesuai dengan komposisi berikut:
· Potato/kentang 3 g
· Peptone 5 g
· Agar 15 g
· Akuades s.d 1000 ml
· (sebelum ditimbang, sebaiknya kentang dikupas dan diiris kecil-kecil)

2. Rebus kentang dalam sebagian akuades tadi selama 1-3 jam sampai lunak, kemudian diambil
ekstraknya dengan menyaring dan memerasnya menggunakan kertas saring lalu ditampung di Beaker
glass baru.
3. Agar dilarutkan dengan Hot Plate Stirrer dalam 50 ml akuades lalu setelah larut dapat ditambahkan
dekstrosa dan dihomogenkan lagi.
4. Setelah semua larut, ekstrak kentang dan agar-dekstrosa dicampur dan dihomogenkan. Atur pH
media menjadi 5-6 dengan meneteskan HCl/NaOH.
5. Media dituang ke dalam Erlenmeyer atau ke tabung reaks kemudian siap untuk disterilisasi.
Sumber : Anonim. 2010. Petunjuk Praktikum Mikrobiologi Dasar. Laboratorium Agroekoteknologi
Fakultas Pertanian ; Universitas Sultan Agen Tirtayasa Banten

Media dari Bahan Taoge

1. Sterilisasi alat-alat yang digunakan.
2. Taoge sebanyak 25 gram direbus dengan akuades 250 mL sampai mendidih selama 60 menit.
3. Disaring kemudian ditambahkan sukrosa sebanyak 15 gram, kemudian didihkan lagi sampai
semua sukrosa larut.
4. Tambahkan aquades yang hilang karena penguapan sampai volume 250 mL.
5. Ukur pH larutan
6. Masukkan larutan kedalam tabung reaksi (2 tabung) hingga memenuhi 2/3 isi tabung.
7. Tutup tabung reaksi menggunakan aluminium foil.
8. Sterilisasi dengan otoklaf (121 °C; 15 menit) atau panci presto (mendidih; 20 menit), atau
penangas air (100 °C; 20 menit).
9. Tempelkan label yang telah diberi keterangan, pada setiap tabung reaksi.
10. Simpan media didalam inkubator selama 2 x 24 jam pada suhu 12 – 15 °C.
11. Catat hasil pengamatan dan pengukuran dalam jurnal praktikum sesuai dengan format yang
telah ditentukan.
B. Media dari Bahan Penyedap Rasa
1. Sterilisasi alat-alat yang digunakan.
2. Larutkan 3 gram sukrosa, 1 gram MSG, dan 1,5 gram agar-agar kedalam akuades 100 mL
mendidih.
3. Tambahkan aquades yang hilang karena penguapan sampai volume 100 mL.
4. Masukkan larutan kedalam tabung reaksi (2 tabung) hingga memenuhi 2/3 isi tabung.
5. Tutup tabung reaksi menggunakan aluminium foil.
6. Sterilisasi dengan otoklaf (121 °C; 15 menit) atau panci presto (mendidih; 20 menit), atau
penangas air (100 °C; 20 menit).
7. Tempelkan label yang telah diberi keterangan, pada setiap tabung reaksi.
8. Simpan media didalam inkubator selama 3 x 24 jam pada suhu 12 – 15 °C.
9. Catat hasil pengamatan dan pengukuran dalam jurnal praktikum sesuai dengan format yang
telah ditentukan.
Sumber : Ricky Febriyanto. S.Si., M.Si, Membuat Media Mikroorganisme. Program Studi Teknik
Lingkungan Universitas Banten Jaya