METODA

PEMISAHAN
 Deskripsi singkat mata kuliah
 Membahas berbagai metoda
pemisahan ,meliputi
 teori,
 konsep,
 instrumentasi dan aplikasi
 Untuk mendapatkan senyawa murni ataupun
data kualitatitif dan kuantitatif dari campuran
sampel biologis, alam dan sediaan obat
 Silabus Perkuliahan
 Pengantar Metoda Pemisahan
 Destilasi
 Kromatografi
 Kromatografi kolom konvensional
 Kromatografi kertas dan KLT partisi
 Kromatografi gas
 Kromatografi eksklusi/permeasi gel
 DCCC
Separating Mixtures
 Separating Mixtures
Mixing sulphur and iron...

...how could you separate this mixture?

Separating Mixtures
 Pemisahan campuran
Semua Materi
Tidak Apakah dapat dipisahkan Ya
melalui proses fisik ?

Zat Campuran

Ya Dapat diuraikan Tidak Ya Apakah sera- Tidak

melalui proses gam di seluruh
kimia ? Materi ?

Senyawa Unsur Homogen Heterogen

 Separation Techniques

• The separation of mixtures may be done to

enhance the purity of substances
• Accomplished using different characteristic
properties, such as density, boiling point,
melting point, solubility, etc
+
Separating Mixtures

 Substances in a mixture are physically combined, so processes bases

on differences in physical properties are used to separate component

 Numerous techniques have been developed to separate mixtures to

study components
 Some Types of
Separation Techniques

– filtration
– mechanical separation
– floatation
– centrifugation
– simple distillation
– fractional distillation
– crystallization
– chromatography
Cara memilih Teknik pemisahan

1. Pilih langkah terbesar pada step pertama jika mungkin

termurah. Misal ekstraksi pelarut
2. Pilih proses pemisahan yang didasarkan pada perbedaan
sifat fisika. Misal muatan (pertukaran ion), ukuran (filtrasi
gel, sentrifugasi)
3. Pilih proses dimana mengeksploitasi perbedaan terbesar
sifat fisika antara analit/produk dengan matriks/pengotor
4. Pilih langkah termahal pada saat terakhir, misal hplc
Tujuan Pemisahan kimia:
1. Telaah Fitokimia -struktur

Bahan alam

simplisia Penapisan fitokimia

Ekstraksi
Ekstrak
Fraksinasi
Fraksi
Pemisahan/ pemurnian
Isolat
Karakterisasi & Identifikasi
Struktur kimia
2. Isolasi Senyawa Model /Lead Compound
- biasanya punya efek
- tidak harus dominan

3. Bahan Baku sediaan

Hasil ekstrak dapat digunakan untuk
membuat sediaan

4. Uji farmakologi  pada hewan coba

Dalam teknik pemisahan, selalu terdapat
fase-fase :
• Fase 1
• Fase 2

Kecuali : elektroforesis dan ultrasentrifugasi hanya

melibatkan satu fase.
 Nama fase dalam beberapa metode pemisahan

Metode Fase 1 Fase 2

Kromatografi Diam Gerak

Eksraksi Cair-CairRafinat Ekstraktan
(yang sudah ada) (yang ditambahkan)
Dialisis Retentat Difusat/dialisat
(di tabung) (yang didialisa)
Penggolongan Metode Pemisahan
A. Berdasarkan Wujud Fase
Fase 1 Fase 2 keterangan
Gas Gas Difusi termal
Cair Krom. Gas-Cair
Padat Krom. Gas-Padat
Cair Gas Destilasi
Cair Krom. Cair-Cair, Ekstraksi,
dialisis, ultrasentrifugasi.
Padat Krom. Cair-Padat,
pengendapan, elektrodeposisi,
kristalisasi, pemebrntukan
Padat Gas senyawa,
Sublimasiinklusi
Cair Leaching
dengan
Fase 1: fase awal /mengandung cuplikan sendiri
Fase 2: fase yang ditambahkan / yang terbentuk
B. Berdasarkan asal Fase 2

Fase 2 ditambah Fase 2 terbentuk

Kromatografi Destilasi
ECC Pengendapan
Dialisis kristalisasi
Elektroforesis Penghabluran
zona
Pengendapan
E. Berdasarkan jenis proses
Proses mekanis Pengayakan
Filtrasi/pengayakan
Sentrifugasi
Proses fisis Krom. Gas-Cair
Krom. Gas-Padat
Krom Cair-Cair
ECC
Destilasi, Sublimasi
Proses Kimia Pengendapan
Krom. Pertukaran ion
+
Filtration

 Used to separate heterogeneous mixtures composed

of solids and liquids

 Uses a porous barrier to separate the solid from the

liquid

 Liquid passes through leaving the solid in the filter

paper
Filtration can be used
to separate an
insoluble substance
from a soluble
substance
 Examples of Mixtures You Can Separate
Using Filtration

• Sand and water

• Broken glass and water
 Mechanical Separation

• Physical separation methods that involve

the use of tools such as forceps and
sieves, to separate the components of a
mixture.
• Ex. Gravel and sand
 Flotation
Separation method
in which some solids
of a suspension
mixture are allowed
to settle and the less
dense material is
poured off.

Ex. Panning of gold

Evaporation can
be used to
separate a solute
from the solvent
in a solution
+
Crystallization

 Separation technique that results in the

formation of pure solid particles from a
solution containing the dissolved
substance

 As one substance evaporates, the

dissolved substance comes out of
solution and collects as crystals

 Produces highly pure solids

 Rocky candy is an example of this

 Crystallisation
 To separate dissolved pure solid from a
solution. Maximum amount
of solid dissolved
in a given solvent.

2. Saturated solution

Evaporation of solution

3. Pure Crystals formed.

1. Heat the solution

until saturated.
+ Centrifuging 30
 • Speeds up the
Centrifugation
separation of a solid
from a liquid through
the centripetal force
developed during the
rotation of the
centrifuge.
Centrifuges rotate containers of 32

liquids to separate suspended

materials with different densities.

Centrifuges separate different

components of human blood or milk and to
clarify solutions. A high speed separator
can rotate at great speed to separate fat
(cream) from milk.

The spin drier in washing machines is a

type of centrifuge that throws out the liquid
by the "centrifugal force" of the rotation.
+
Distillation

 Used to separate homogeneous

mixtures

 Based on differences in boiling

points of substances involved
+
Chromatography

 Separates components of a mixture based on

ability of each component to be drawn across the
surface of another material

 Mixture is usually liquid and is usually drawn

across chromatography paper

 Separation occurs because various components

travel at different rates

 Components with strongest attraction for paper

travel the slowest
 35
 Chromatography ( colour writing) is
used to separate small amounts of
chemicals so that they can be
analysed.
 Different substances or different
components move at different speeds
through a strip of wet paper a gel or a
gas.
+
Destilasi
 menjelaskan defenisi destilasi sederhana,

 Rektifikasi dan Destilasi Uap.

 Teori fisika yang mendasari destilasi dan

 instrumen yang berdasarkan penguapan dan kondensasi

+
Kromatografi kertas dan partisi

 Teori partisi yang mendasari kromatografi kertas dan KLT-partisi.

 Fasa diam dan fasa gerak yang digunakan untuk kromatografi kertas
dan KLT-partisi.

 Instrumentasi dan cara pengerjaan, meliputi penyiapan fasa gerak,

penjenuhan bejana kromatografi (chamber),

 aplikasi sampel,

 pengembangan (menaik dan menurun) dan

 deteksi/visualisasi.
+
Kromatografi kolom konvensional

 Fasa diam dan fasa gerak,

 menyiapkan kolom,

 aplikasi sampel dan elusi.

 Monitoring fraksi dengan KLT dan lampu UV/reagensia.

+
Kromatografi gas

 GLC dan GSC,

 kolom konvensional dan kolom kapiler,

 fasa diam dan fasa gerak.

 Variabel tR, vR, α, SP, k’, HETP, n.

 Hukum Van Deemter

+
Kromatografi eksklusi/permeasi gel.

 Fasa diam dan fasa gerak,

 dasar pemisahan,

 pembuatan kurfa kalibrasi.

 Variabel void volume, volume pori, Va dan koofisienpartisi.

 Kompatibilitas solut dengan fasa gerak dan fasa diam.

+
DCCC

 Sistem fasa diam dan fasa gerak untuk solut lipofil, solut polar dan
sangat polar.

 Penjajakan sistem yang sesuai utuk pemisahan campuran solute

dengan prinsip kelarutan dan KLT.

 Instrumentasi, sistem pengembangan menaik dan menurun.

 Evaluasi fraksi dengan KLT dan kromatogram.