Praktikum Mikroparasitologi

Penyiapan Media
Laboratorium Biologi
Universitas Muhammadiyah Malang
2018
 Tujuan Praktikum
Untuk memperoleh media padat lempeng
dan media padat miring
 Apa itu Media?
Bahan yang terdiri dari campuran zat-zat
nutrisi yang diperlukan mikroorganisme
untuk pertumbuhannya
 Jenis-Jenis Media

Media Media
Hidup Mati
Manusia, telur
berembrio, Agar, kaldu
biakan jaringan
Macam-Macam Media
Mati
Sifat Fisiologis dan
Konsistensi Komposisi
Biologis

Padat Sintesis Persemaian

Setengah Semi
padat sintesis Selektif

Cair Non sintesis Eksklusif

 Media Berdasarkan
Konsistensinya

SOLID

CAIR

SEMISOLID
 Contoh-Contoh Media

Nutrient Agar (NA) untuk Potato Dextrose Agar

umum (bakteri/jamur) (PDA) untuk jamur Sabouraud Dextrose
Agar (SDA) untuk jamur

Eosin Methylen Blue (EMB)

Salmonella Shigella Agar
untuk E. coli dan
(SSA)
Enterobacteriaceae
 Media Alternatif?
Media pengganti yang dapat dibuat dari
bahan-bahan alami untuk pertumbuhan
mikroorganisme
 Langkah Pembuatan
Media
• Menghitung kebutuhan media
• Menimbang kebutuhan media
• Mencampurkan bahan-bahan
• Menghomogenkan larutan medium
• Sterilisasi
 Rumus Perhitungan
Media
• Media solid
∑cawan petri atau tabung reaksi x takaran standart volume
x standart media
1000
• Media semisolid
1
2 x Media solid
• Media cair Takaran Standart Volume:
1 • Cawan Petri 15 ml
10 x Media solid • Tabung Reaksi 5-10 ml
 Standart Media Instan (/l)
• NA : 28 /L

+
• SDA : 65 /L
• PDA : 39 /L Aquades
• SSA : 60 /L
• EMB : 36 /L
Contoh Perhitungan Media
NA
• Diketahui 5 cawan petri dan 5 tabung reaksi
• Ditanya: Berapakah kebutuhan NA solid, semi solid, cair, dan
aquadesnya?
• Jawab:

(5x15ml) + (5x10ml)
NA solid = x 20 = 25 g
1000

Aquades = (5x15ml) + (5x10ml) = 125 ml

NA semisolid 1
X 2,5 = 1,25 g
2

NA cair 1
X 2,5 = 0,25 g
10
 Takaran Media Alternatif
Taoge Agar
a. Taoge : 100 gr
b. Sukrosa : 60 gr
c. Agar :15 gr
d. Aquades : 1000 ml
Kentang Dekstrosa Agar
a. Kentang : 200 gr
b. Glukosa : 20 gr
c. Agar : 15 gr
Wortel Agar
a. Wortel : 200 gr d. Aquades : 1000 ml
b. CaSO4 : 2 gr
c. Agar : 4 gr
d. Aquades : 1000 ml
 Pembuatan Media Alternatif
Kentang Kentang Dekstrosa Agar
a. Kentang : 200 gr
b. Glukosa : 20 gr
c. Agar : 15 gr
d. Aquades : 1000 ml

Perhitungan:
(1x15 ml) + (1x10)
a. Kentang X 200 g = 5 g
1000 ml

(1x15 ml) + (1x10)

b. Glukosa X 20 g = 0,5 g
1000 ml

(1x15 ml) + (1x10)

c. Agar X 15 g = 0,375 g
1000 ml

(1x15 ml) + (1x10)

X 1000 ml = 25 ml
d. Aquades 1000 ml
 Sterilisasi
Proses membebaskan benda/bahan
dari semua bentuk kehidupan
(mikroorganisme)
 Jenis Sterilisasi
• Mekanik (filter/saringan khusus)
• Kimia (alkohol 70%, desinfektan)
• Fisik (pemijaran langsung, autoklaf, oven, UV)
What should we do?
Media NA Media Alternatif Kentang
• NA 0,84 gr • Kentang 4 gr
• Aquades 30 ml • Glukosa 0,4 gr
• Agar 0,3 gr
• Aquades 20 ml

Untuk tiap 2 kelompok

KELOMPOK 1&2 KELOMPOK 3&4 KELOMPOK 5&6

Erlenmeyer
Alat
Corong
Kertas saring
Gelas ukur
Beaker glass
Tabung reaksi
Cawan petri
Alumunium foil
Plastik wrap
Timbangan analitik
Hotplate
Autoclave
Cutter
Spirtus/Bunsen
Karet
Spatula
Magnetik stirer
LAF
Inkubator
Cara Kerja Pembuatan Media
Kentang
• Menghitung semua kebutuhan bahan-bahan yang diperlukan
dengan rumus.
• Mengupas dan mengiris kentang secukupnya.
• Menimbang kentang, glukosa, agar, dan aquades sesuai
kebutuhan yang sudah dihitung menggunakan timbangan
analitik dan gelas ukur.
• Merebus kentang didalam beaker glass berisi aquades dengan
menggunakan hotplate hingga mendidih (± 10 menit).
• Menyaring kentang menggunakan kertas saring dan corong.
• Menambahkan glukosa dan agar kedalam filtrat kentang dan
menghomogenkan dengan magnetik stirer hingga 10 menit.
• Menambahkan aquades yang hilang karena penguapan.
• Mensterilkan media dan alat lainnya kedalam autoclave.
• Menuangkan media kedalam cawan petri dan tabung reaksi.
• Meletakkan media kedalam inkubator serta pengamatan 2 x 24
jam.
 Cara Kerja Pembuatan Media
NA
• Menghitung semua kebutuhan bahan-bahan yang diperlukan
dengan rumus.
• Menimbang NA dan aquades sesuai kebutuhan yang sudah
dihitung menggunakan timbangan analitik dan gelas ukur.
• Menghomogenkan NA didalam erlenmeyer/beaker glass berisi
aquades menggunakan magnetik stirer hingga 10 menit.
• Menambahkan aquades yang hilang karena penguapan.
• Mensterilkan media dan alat lainnya kedalam autoclave.
• Menuangkan media kedalam cawan petri dan tabung reaksi.
• Meletakkan media kedalam inkubator serta pengamatan 2 x
24 jam.
Terima kasih