Prosedur pertama dalam melakukan percobaan HPLC (High Performance Liquid Chromatography) atau KCKT (Kromatografi Cair Kinerja

Tinggi) adalah mempersiapkan sampel makanan pedas yang akan dianalisis yaitu masing-masing sampel makanan pedas yang dimiliki dihaluskan terlebih dahulu dengan cara digerus dengan menggunakan mortir dan stamper, kemudian setelah halus, ditimbang masing-masing sampel seberat 2 gr dengan kaca arloji, kemudian masing-masing sampel dimasukkan ke dalam tabung sentrifuga yang telah disiapkan. Kemudian ke dalam masing-masing tabung sentrifuga yang telah berisi sampel ditambahkan 5 ml kloroform, kemudian masing-masing tabung sentrifuga tadi ditutup dan kemudian divortex selama kurang lebih 2 menit untuk menyari capsaicin yang memberi rasa pedas pada makanan. Kemudian seluruh tabung yang telah divortex dimasukkan ke dalam sentrifugator untuk disentrifugasi selama 5 menit. Kemudian masing-masing supernatan sampel diambil dan disaring menggunakan membran filter hingga diperoleh supernatan yang bening dan kemudian dimasukkan ke dalam vial HPLC hingga separuh volume vial HPLC saja. Bila supernatan yang diperoleh kurang, maka dapat dilakukan pengenceran 1:10 (100 g sampel dan 900 g kloroform atau 50 g sampel dan 450 g kloroform). Sampel selesai dipreparasi dan siap dianalisis. Kemudian prosedur selanjutnya adalah menganalisis sampel dengan cara vial HPLC dimasukkan ke dalam wadah sampel pada alat HPLC, kemudian alat HPLC dihidupkan dan dipilih metode untuk menganalisis capsaicin dengan waktu running 15 menit dan kromatogram yang diperoleh dianalisis.