Makalah Bioteknologi Dasar

BIOTRANSFORMASI DAN BIOENERGI

KELOMPOK VII :

NUR AQLIA
NURFAIIZAH AQIILAH F.
FITRIA ANNURANI
NURSANTI
YENNI OCTAVIANA

H311 12 287
H311 12 289
H311 12 901
H311 12 902
H311 12 293

JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2015

BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Biotransformasi adalah perubahan atau modifikasi senyawa kimia oleh
enzim atau sel mikrob. Proses yang diinginkan dari biotransformasi adalah
pembuatan (sintesis) suatu senyawa maupun menghilangkan senyawa tersebut.
Saat ini biotransformasi banyak berperan dalam berbagai industri seperti industri
makanan, obat-obatan dan vitamin, pembuatan senyawa kimia, dan pakan ternak.
Penggunaan enzim dan sel mikrob dalam proses industri berdampak pada
berkurangnya penggunaan senyawa kimia berbahaya sehingga memiliki sifat
ramah lingkungan. Maka dari itu, enzim dan sel mikrob disebut biokatalis yang
akan menggantikan katalis kimia
Bioenergi adalah energi terbarukan yang didapatkan dari sumber biologis,
umumnya biomassa. Biomassa adalah bahan organik yang menyimpan
energicahaya matahari dalam bentuk energi kimia. Biomassa sebagai bahan bakar
umumnya berupa kayu, limbah industri kayu, jerami, dan hasil pertanian seperti
tebu yang dapat diolah menjadi bahan bakar. Dalam definisi yang lebih sempit,
bioenergi adalah sinonim dari biofuel, yang merupakan bahan bakar turunan dari
sumber biologis.
Dalam cakupan yang lebih luas, bioenergi mencakup juga biomassa.
Bioenergi adalah energi yang dihasilkan dari biomassa, tetapi bioenergi bukanlah
biomassa itu sendiri. Pada tahun 2010, 35 gigawatt pembangkit listrik bioenergi
telah dibangun di seluruh dunia, dengan seperlimanya berada di Amerika Serikat.

Berdasarkan informasi dan penjelasan di atas maka dilakukan pembahasan

materi mengenai biotransformasi dan bioenergi pada makalah ini.

1.2 Rumusan Masalah

Adapun rumusan masalah dari percobaan ini yaitu :
1. Apa yang dimaksud dengan biotransformasi dan bioenergi ?
2. Bagaimana tahapan biotransformasi dan bioenergi ?
3. Apa saja contoh-contoh biotransformasi dan bioenergi ?

BAB II
PEMBAHASAN

2.1 Tinjauan Umum Tentang Biotransformasi

Biotransformasi adalah proses pengubahan suatu senyawa menjadi
senyawa turunannya yang strukturnya berbeda dari senyawa asalnya akibat
aktivitas metabolisme suatu mikroba. Proses ini berkaitan dengan penggunaan
enzim untuk mengubah substrat menjadi produk. Pembentukan suatu proses
biotransformasi membutuhkan perkembangan optimal biokatalisator, media reaksi
dan bioreaktor.
Pengertian biotransformasi menurut Walker adalah suatu proses dimana
suatu senyawa dapat berubah menjadi senyawa turunannya yang lebih baik
dengan menggunakan mikroorganisme sebagai katalis. Mikroorganisme adalah
salah satu agen biokatalis yang paling efisien dengan kemampuan luas untuk
memetabolisme substrat.
Saat ini banyak upaya riset diarahkan untuk mengembangkan proses dan
atau produk baru yang ramah lingkungan (green chemistry), yang antara lain
mempunyai karakteristik: produksi limbah berbahaya minimal, efisiensi karbon
tinggi, konsumsi energi rendah serta penggunaan bahan baku murah dan
terbarukan. Biotransformasi dengan menggunakan bio-katalis merupakan metode
alternatif yang dapat dimanfaatkan.
Biotransformasi dipilih karena reaksinya bersifat enzimatis sehingga reaksi
biotransformasi selektif dan sangat spesifik dalam mengubah substrat yang ada.
Spesifisitas dan selektivitas ini disebabkan oleh struktur kiral protein enzim.

Apabila ada beberapa gugus fungsi maka hanya posisi spesifik tertentu yang
dipengaruhi. Reaksi biotransformasi dapat digunakan untuk menyerang gugus
fungsi yang tidak dapat diaktifkan secara efisien atau memerlukan beberapa tahap
antara sebelum dapat bereaksi secara kimia.

2.1.1 Minyak Terpentin

Minyak terpentin adalah minyak atsiri yang dihasilkan atau diperoleh dari
penyulingan getah pohon Pinus merkusii. Kandungan utama dari minyak terpentin
adalah senyawa -pinena (70-90%), -pinena (5-10%), 3-karena (4-10%), dan
juga -longifolena (0,2-5%). Rumus struktur -pinena terdiri atas dua cincin yang
menyatu yaitu siklobutana dan sikloheksana yang membentuk suatu bisiklo,
mengandung atom karbon dan hidrogen yang tidak bersifat aromatik, serta
tersusun atas jumlah karbon C10 sehingga digolongkan ke dalam kelompok
senyawa monoterpena bisiklis. Penggunaan utama -pinena adalah flavor dan
fragrans yang dapat menghangatkan dan memberi bau seperti pinus. Hal ini
sebagai dasar untuk membuat tipetipe produk parfum, ester, dan hidrokarbon
terpena yang lain.

2.1.2 Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa mampu menghasilkan beberapa enzim, salah
satunya adalah enzim lipase (Carvalho, 2006). Dengan enzim ini Pseudomonas
aeruginosa mampu mengubah lipid menjadi gliserol. Pseudomonas aeruginosa
dapat dibedakan dengan Pseudomonas yang lain karena dapat tumbuh pada suhu
42 C, bersifat oksidase positif, pigmen yang khas, dan aktifitas biokimianya
membutuhkan substrat yang banyak untuk tes.

2.1.3 Tahapan Proses Biotransformasi (Transformasi -Pinena dengan

Bakteri Pseudomonas aeruginosa ATCC 25923)
Peremajaan Bakteri
Biakan Murni
- Digores dengan oase
- Digeruskan oase biakan murni pada
permukaan agar
- Diinkubasi pada suhu 37 C selama
24 jam
Hasil

Inokulasi
Media agar
- Digores dengan oase
- Dicelupkan kedalam 10 mL medium
cair
- Diinkubasi pada suhu kamar selama
24 jam sambil diaduk
Hasil

 Isolasi

Minyak Terpentin 10 %
- Dimasukkan kedalam tabung reaksi

berisi media cair hasil inokulasi

hingga konsentrasi 0,5 %, 1 %, 2 %
dan 4 %.
- Diinkubasi pada suhu kamar selama

48 jam
- Dishaker beberapa kali

Hasil
- Diekstraksi dengan dietil eter 2x (10

mL)

Lapisan Dietil Eter

Lapisan Air

- Ditambah Na2SO4
- Disentrifugasi
- Disaring dengan membran nilon 0,45 m
- Diuapkan dengan N2
- Dianalisis FTIR dan GC

Hasil

- Disisihkan

2.1.4 Hasil dari Biotransformasi

Hasil analisis minyak terpentin menggunakan kromatografi gas pada
gambar 1(a) menunjukkan adanya senyawa -pinena dengan konsentrasi 64,12 %,
sedangkan senyawa -pinena 5,29 % dan senyawa 3-karena 20,49 %. Hasil
analisis pada gambar 1(b) menunjukkan adanya perubahan pada kadar -pinena
menjadi 67,15 % sedangkan kadar -pinena turun menjadi 2,26 % dan kadar 3karena turun menjadi 9,16 %. Pada konsentrasi minyak terpentin 2 % terdapat
puncak baru pada waktu retensi 5,555 menit dengan kadar 3,74 %, waktu retensi
5,982 menit dengan kadar 1,60 %, waktu retensi 6,697 menit dengan kadar 5,66 %
dan waktu retensi 6,774 dengan kadar 2,09 %. Hal ini menunjukkan adanya
perubahan senyawa pada minyak terpentin hasil transformasi dengan bakteri
Pseudomonas aeruginosa.

Tabel 2. Spektrum IR minyak Terpentin

Gugus Fungsi

Bilangan Gelombang

C-H alkana

2916 -1dan 2870 cm-1

-CH2

1442 cm-1

-CH3

1373 cm-1

-C=C-

1951 cm-1

-OH

3402 cm-1

-C-O

1049 cm-1

Dari hasil spektrum IR ada beberapa senyawa yang mengandung gugus

hidroksil, dari hasil penelitian, senyawa yang dapat di mungkinkan sebagai
produk baru hasil transformasi komponen minyak terpentin dengan bakteri
Pseudomonas aeruginosa antara lain: borneol, carveol, pinocarveol, verbenol,
mirteol, dan -terpineol (Gambar 3)

2.2 Tinjauan Umum Tentang Bioenergi

Bioenergi adalah energi yang diperoleh/ dibangkitkan yang berasal
dari biomassa. Biomassa adalah bahan-bahan organik berumur relatif muda
dan berasal dari tumbuhan/hewan,

produk & limbah industri budidaya

(pertanian, perkebunan, kehutanan, peternakan, perikanan). Bentuk-bentuk

final terpenting bioenergi.
Bentuk-bentuk final terpenting bioenergi :
-

bahan bakar nabati (biofuels);

listrik biomassa (biomass-based electricity).

Bioenergi adalah energi yang diperoleh dari biomassa sebagai fraksi

produk biodegradasi, limbah, dan residu dari pertanian (berasal dari nabati
dan hewani), industri kehutanan dan terkait, dan sebagian kecil biodegradasi
dari limbah industri dan kota (FAO). Bioenergi berperan penting pada
pencapaian target dalam menggantikan petroleumdidasarkan pada bahan
bakar transportasi dengan bahan bakar alternatif dan pereduksian emisi
karbon dioksida dalam jangka panjang. Berbagai sumber biomassa dapat
digunakan untuk menghasilkan bioenergi berbagai bentuk. Contohnya,
makanan, serat dan kayu sebagai residu dari sektor industri, energi dan rotasi
pendek tanaman dan limbah pertanian, dan hutan dan hutan pertanian
(agroforestry) sebagai residu dari sektor kehutanan dimana seluruhnya dapat
digunakan untuk menghasilkan listrik, panas, gabungan panas dan tenaga, dan
bentuk-bentuk bioenergi.
Bioenergi modern bergantung pada konversi teknologi yang efisien
untuk aplikasi skala rumah tangga, usaha kecil, dan industri. Input biomassa

padat atau cair dapat diproses untuk menjadi energi yang lebih nyaman. Ini
termasuk biofuel yang solid (misalnya kayu bakar, serpihan kayu, pellet,
arang, dan briket), biofuel gas (biogas, gas sintesis, hidrogen), dan biofuel
cair (misalnya bioetanol, biodiesel).

2.2.1 Tahapan Proses Bioenergi

Tahap Bioenergi

Bagan 1. Proses untuk produksi biofuel yang berbeda

Pada bagan 1 menggambarkan (a) tepung dan gula menghasilkan bioetanol.
Dalam bagan ini, tepung dapat dihidrolisis menjadi monosakarida, dimana gula
dapat difermentasi selanjutnya menjadi etanol. (b) Lignoselulosa menjadi
bioetanol. Produksi lignoselulosa menghasikan bioetanol mempunyai penanganan

awal material biomassa, hidrolisis untuk produksi monosakarida, dan dilanjutkan

fermentasi untuk memproduksi etanol. (c) Biodiesel. Produksi biodiesel sering
mempunyai proses transesterifikasi asam lemak. (d) Gasifikasi biomassa.
Biomassa dapat digunakan utnuk memproduksi metanol, karbon monoksida,
hidrogen, atau gas lainnya yang terbentuk dalam proses gasifikasi (Sari dan
Hardyanto, 2013).
1.

Bagan A
Pati merupakan salah satu polisakarida yang terdapat dalam semua

tanaman, terutama dalam jagung, kentang, biji-bijian, ubi akar, padi, dan gandum
(Sastrohamidjojo, 200). Pati terdapat sebagai butiran kecil dengan berbagai
ukuran dan bentuk yang khas untuk spesies tumbuhan. Butir pati dapat
ditunjukkan dengan mikroskop cahaya biasa dan cahaya terpolarisasi, serta
dengan difraksi sinar-X terlihat struktur kristal yang sangat beraturan (De Man,
1997).
Pati terdiri atas dua macam polisakarida yang keduanya merupakan polimer
dari glukosa. Polimer glukosa tersebut tersusun dari unit satuan -D-glukosa yang
dihubungkan oleh ikatan -1,4 glikosidik dan ikatan -1,6 glikosidik pada
percabangan rantainya. Kedua polimer glukosa tersebut adalah amilosa dan
amilopektin. Amilosa mempunyai molekul yang berbentuk lurus dari satuansatuan glukosa dan terdiri atas 250-300 unit D-glukosa yang terikat dengan ikatan
-(1,4) glikosidik. Amilopektin merupakan polimer glukosa dengan susunan yang
bercabang-cabang, karena adanya ikatan -(1,6) glikosidik pada titik tertentu
dalam molekulnya, sehingga molekul amilopektin berbentuk rantai terbuka dan

bercabang. Rantai cabang yang demikian itu dapat mengandung 200-3000 satuan
glukosa hingga mempunyai berat molekul relatif 500.000 (Girindra, 1990).
Proses fermentasi untuk menghasilkan alkohol ini untuk pertama kali
dipelajari tahun 1789 oleh ahli kimia berkebangsaan Perancis bernama Lavosier.
Pada waktu itu proses fermentasi terjadi secara alami. Di dalam studi
kuantitatifnya, selama proses fermentasi selain dihasilkan alkohol dan
karbondioksida, juga terdapat produk lain yang disebut asam asetat. Sebanyak
95,5% gula bila difermentasi akan menghasilkan 57,7% etanol, 33,3%
karbondioksida, dan 2,5% asam asetat. Pada tahun 1810 lebih lanjut Gay Lussac
memperkenalkan persamaan reaksi yang dikenal sebagai persamaan Gay Lussac
yang ditunjukkan reaksi berikut (Persamaan reaksi konversi glukosa menjadi
etanol):

Selama proses fermentasi, terjadi proses oksidasi karbohidrat menjadi

molekul organik lain. Tahapan proses oksidasi karbohidrat digambarkan pada
reaksi berikut:

Bioetanol diperoleh dari hasil fermentasi bahan yang mengandung gula.

Bioetanol diproduksi melalui proses fermentasi gula, baik yang berupa glukosa,
sukrosa, maupun fruktosa dengan bantuan ragi (yeast) terutama Saccharomyces

sp. atau bakteri Zymomonas mobilis. Pada proses ini gula akan dikonversi menjadi
etanol dan gas karbon dioksida.
2.

Bagan B (Tumbuhan Berligniselulosa)

Lignoselulosa adalah komponen utama dari biomassa, terdiri dari tiga tipe

polimerselulosa, hemiselulosa dan lignin-yang terikat kuat diantaranya dan terikat

secara kimia melalui ikatan non kovalen dan ikatan silang kovalen. Indonesia
memiliki limbah biomassa yang kaya lignoselulosa seperti bagas, jerami padi.
tongkol jagung, tandan kosong kelapa sawit, sampah perkotaan dll. Hidrolisa
sempurna limbah berlignoselulosa menjadi bahan yang mudah mengalami
degradasi

memerlukan

sinergi

dari

beberapa

mikroorganisme

yaitu

mikroorganisme selulolitik untuk menghidrolisis selulosa, hemiselulolitik untuk

menghidrolisis hemiselulosa dan lignolitik untuk menghidrolisis lignin. Bakteri
dari jenis Streptomyces dan jamur dari jenis Trichoderma memegang peranan
cukup penting dalam mendegradasi lignoselulosa. Mikroorganisme ini dapat
mendegradasi selulosa, mannan, xilan pektin dan mensolubilisasi lignin.
Komponen selulosa dan hemiselulosa dapat difermentasi menjadi bioetanol
menggunakan mikroorganisme yang sesuai, yang terlebih dahulu di hidrolisis oleh
enzim (proses sakarifikasi) menjadi monomer-monomernya.
3.

Bagan C

a. Minyak yang dimanfaatkan untuk bahan bakar dapat berasal dari tanaman
bunga matahari dan kelapa sawit.
Komponen utama minyak dan lemak adalah trigliserida sedangkan komponen
non-trigliserida adalah berupa asam lemak bebas, air, kotoran dan komponen lain

yang tidak diharapkan. Adapun komposisi dari asam lemak dalam minyak sawit
dapat dilihat pada table dibawah ini:
Tabel 1.Komposisi asam lemak minyak yang berasal dari tanaman

Proses Transesterifikasi
Proses transesterifikasi yaitu mengeluarkan gliserin dari minyak dan
mereaksikan asam lemak bebasnya dengan alkohol (misalnya metanol) menjadi
ester. Transesterifikasi dilakukan dengan mencampur minyak dengan metanol
dengan KOH. Proses transesterifikasi berlangsung selama 0,5-1 jam pada suhu
400 oC. Campuran yang terjadi kemudian didiamkn hingga terbentuk dua lapisan,
yaitu lapisan bawah gliserin dan dan lapisan atas metil ester. Agar reaksi
berlangsung sempurna, maka tahap pertama kemudian direksikan lagi dengan
metanol (tahap 2). Hal ini bertujuan untuk menghilangkan kandungan gliserin
dalam biodiesel (Desmafianti, 2013).
4.

Bagan D
Biogas merupakan merupakan hasil fermentasi dari bahan organik dalam

kondisi anaerob, karena diproses secara alami, gas ini merupakan campuran
beberapa gas yang tergolong sebagai bahan bakar di mana gas yang dominan

adalah CH4 dan yang lain yang jauh lebih kecil adalah CO2, NO2, SO2, dan lainlain. Biogas ini memiliki nilai kalor yang cukup tinggi yaitu pada kisaran
4800~6700 kkal/m3, sedang gas

methana

murni

nilai

kalornya 8900

kkal/m3(Simanjuntak, 2005).
Bahan-bahan yang dapat menghasilkan biogas diantaranya adalah: kotoran
hewan, kotoran manusia, dan limbah pertanian. Untuk kotoran sapi misalnya
memiliki kandungan seperti tabel di bawah (Simanjuntak, 2005):
Jenis Gas
Methana (CH4)
Karbondioksida (CO2)
Karbon monoksida
Nitrogen (N2)
Oksigen (O2)
Hidrogen sulfida (H2S)

Kandungan (%)
54-70
27-45
0,1
0,5-3,0
0,1
Sangat sedikit

Secara umum, proses produksi biogas mempunyai empat tahapan yaitu : (1)
Hidrolysis, (2) Pengasaman, (3) Pembentukan asam asetat, dan (4) Pembentukan
metana. Penjelasan singkat dari proses-proses tersebut adalah sebagai berikut
(ESDM, 2011):
1. Hidrolysis : Pada tahapan ini, substrat organik yang mengandung lemak,
protein, dan karbohidrat dengan proporsi yang berbeda-beda dihidrolisasi
menjadi dimer dan polimer rantai pendek (asam lemak, asam amino dan gula)
2. Pengasaman : Pada tahap pengasaman, dimer dan polimer rantai pendek diubah
oleh bakteri menjadi asam organik rantai-pendek atau asam lemak yang mudah
menguap.
3. Pembentukan asam asetat : alkohol dan asam lemak yang mudah menguap
diubah menjadi asam asetik, asam asetat, CO2 dan H2.

4. Pembentukan metana : Pada tahap inilah bakteri dari jenis archae methanogens
akan memproduksi metana.
2.2.2 Contoh Bioenergi (Produksi Biodiesel dari Lipid Fitoplankton
Nannochloropsis sp. Melalui Metode Ultrasonik)
2.2.2.1 Prosedur Kerja
a. Pengkulturan Fitoplankton Laut
Air laut ditampung dalam wadah kemudian disterilkan selanjutnya diukur
salinitasnya dengan menggunakan alat salinometer dan disaring dengan
menggunakan kertas saring. Air laut yangtelah steril ditambahkan medium
Conway dan dikondisikan gas CO2 dengan proses aerasi lalu ditambahkan
fitoplankton.
Perhitungan kepadatan sel fitoplankton memakai Haemocytometer dengan
pengamatan mikroskop. Setelah beberapa hari, kultur dipindahkan ke dalam
toples yang terbuat dari kaca. Selama pelaksanaan kultur, parameter fisika-kimia
dipertahankan.
b. Penentuan Waktu Pertumbuhan Fitoplankton Laut
Penentuan pola pertumbuhan fitoplankton, dilakukan penghitungan jumlah
sel per milliliter medium setiap 24 jam.
c.

Isolasi Lipid Fitoplankton

Fitoplankton laut Nannochloropsis sp. yang sudah dikeringkan dalam

oven, ditempatkan dalam erlenmeyer dan ditambahkan dengan pelarut etanol 96

% dengan perbandingan 1 : 6 b/v, kemudian diekstraksi dengan alat ultrasonik
cleaner yang dioperasikan pada frekuensi 40 kHz. Ekstrak etanol yang
mengandung lipid kemudian dipisahkan dengan menggunakan rotary evaporator.

d. Sintesis Biodiesel Melalui Metode Ultrasonik

Lipid murni dari fitoplankton laut Nannochloropsis sp. yang sudah
diperoleh, dimasukkan ke dalam erlenmeyer dan dipanaskan dalam alat ultrasonik
cleaner yang dioperasikan pada frekuensi 40 kHz dan suhu 50-60 oC, kemudian
dicampur dengan larutan yang terbuat dari metanol (perbandingan mol lipid :
metanol = 1 : 12) dan katalis KOH (9 % berat minyak) yang telah diaduk selama
15 menit. Waktu untuk proses transesterifikasi yakni sekitar 180 menit. Selama
reaksi tersebut berlangsung, suhu pemanasan perlu dijaga. Selanjutnya, hasil
transesterifikasi dibiarkan selama 3-4 hari hingga terbentuk dua fasa. Fasa bawah
yang berupa gliserol dipisahkan dengan fasa atasnya yang berupa metil ester.
Setelah itu ditambahkan Na2SO4 anhidrat ke dalam metil ester tersebut untuk
menarik sisa air dalam larutan tersebut. Tahap selanjutnya adalah memisahkan
Na2SO4 dari biodiesel dengan menggunakan sentrifuge. Supernatan berupa metil
ester (biodiesel) diambil kemudian dipanaskan dalam oven pada suhu 70 oC.
Selanjutnya diperoleh biodiesel murni yang kemudian dianalisis sifat fisika dan
kimia untuk mengetahui kualitas biodiesel tersebut.
e. Analisis Sifat Fisika
Analisis sifat fisika yakni densitas dan viskositas. Prosedur analisis
densitas dilakukan berdasarkan metode ASTM D1475 dan analisis viskositas
dilakukan berdasarkan metode ASTM D445.
f. Analisis Sifat Kimia
Analisis sifat kimia yakni kadar asam lemak (% FFA) bebas, bilangan
penyabunan, dan bilangan iodium. Prosedur kadar asam lemak bebas (% FFA)
dilakukan berdasarkan Metode AOCS Ca 5a-40, bilangan penyabunan

berdasarkan metode AOCS Cd 3-25, dan bilangan iodium berdasarkan metode

Wijs.
2.2.2.2 Hasil dan Pembahasan
a. Pola Pertumbuhan Fitoplankton Laut Nannochloropsis sp.
Pengamatan pola pertumbuhan fitoplankton laut Nannochloropsis sp.
dilakukan setiap 24 jam selama 17 hari dengan menggunakan medium Conway
sebagai media pertumbuhan dalam air laut steril yang disesuaikan dengan
salinitasnya dan disertai dengan penambahan vitamin ke dalam media tersebut.
Adapun grafik pola pertumbuhan fitoplankton Nannochloropsis sp. ditunjukkan
pada Gambar 1.

Berdasarkan Gambar 1, dapat dilihat bahwa pada hari ke-1 sampai hari ke-2
merupakan fase adaptasi bagi fitoplankton Nannochloropsis sp. terhadap medium
pertumbuhannya. Selanjutnya pada hari ke-3 sampai ke-10Nannochloropsis sp.
mengalami peningkatan populasi yang sangat pesat atau yang dikenal dengan fase
eksponensial. Selanjutnya pada fase stasioner dimana kecepatan pertumbuhan
mulai melambat atau tidak semaksimal hari-hari sebelumnya yang terjadi pada
hari ke-10 sampai hari ke-13. Selanjutnya pada hari ke-13 sampai hari ke-17
mulai terjadi penurunan populasi fitoplankton Nannochloropsis sp. Fase ini

merupakan fase kematian dimana terjadi penurunan populasi atau penurunan

kecepatan pertumbuhan fitoplankton. Waktu pertumbuhan optimal fitoplankton
ini dapat dilihat dari kepadatan sel tertinggi Nannochloropsis sp. sebesar 2542,5 x
104sel/mL yang terjadi pada hari ke-13.
b. Isolasi Lipid Fitoplankton Nannochloropsis sp.
Tahap awal pembuatan biodiesel dari fitoplankton yaitu isolasi lipid
fitoplankton Nannochloropsis sp. dengan menggunakan metode ekstraksi
ultrasonik. Pada tahap ini digunakan pelarut yang memiliki polaritas yang sama
dengan bahan yang akan diekstrak dengan menghancurkan komponen penyusun
dinding sel fitoplankton, yaitu pelarut etanol 96 %. Sampel biomassa kering
fitoplankton Nannochloropsis sp. sebesar 17,6478 gram kemudian diekstraksi
dengan pelarut etanol 96 % dengan waktu ekstraksi 9 jam 10 menit. Waktu yang
dibutuhkan untuk ekstraksi cukup lama karena sulitnya merusak dinding sel.
Hasil ekstraksi berupa lipid yang terlarut dalam etanol 96 % kemudian
dipisahkan dengan cara dievaporasi hingga semua pelarut etanol 96 % yang
digunakan terpisah sehingga diperoleh lipid

yang murni.

Berat

lipid

Nannochloropsis sp. diperoleh sebesar 3,6453 gram dengan kandungan lipid

20,6558 % BK biomassa. Kandungan lipid yang diperoleh darispesies
fitoplankton tersebut tidak mencapai 50 % dari biomassa kering. Hal ini
disebabkan fitoplankton tidak hanya mengandung lipid, melainkan terdapat juga
karbohidrat dan protein.
c. Sintesis Biodiesel dari Lipid Fitoplankton
Sintesis biodiesel dari lipid fitoplankton dilakukan dengan reaksi
transesterifikasi menggunakan pelarut metanol (1:12). Hal ini dipercepat dengan

penambahan katalis basa KOH (9 % berat minyak). Waktu reaksi transesterifikasi

yakni sekitar 180 menit dengan suhu pemanasan 50-60 oC menggunakan alat
ultrasonik cleaner yang dioperasikan pada frekuensi 40 kHz. Kemudian hasil
reaksi dibiarkan selama 3-4 hari hingga terbentuk dua lapisan. Lapisan atas
merupakan lapisan biodiesel yang berwarna hijau jingga keruh, sedangkan lapisan
bawah merupakan lapisan gliserol berwarna coklat kekuningan.

Setelah diperoleh dua lapisan tersebut, maka lapisan atas dan bawah
dipisahkan. Lapisan atas kemudian disentrifuge untuk menghilangkan pengotor
dan gliserol yang mungkinterikut pada saat pemisahan. Selanjutnya sisa metanol
dalam biodiesel yang tidak bereaksi dihilangkan dengan cara dipanaskan dalam
oven pada suhu 70 oC. Selanjutnya diperoleh biodiesel murni yang dapat dilihat
pada Gambar 3.

Berat biodiesel yang dihasilkan sebesar 8,5291 gram dengan berat rendamen
48,33 %. Hal ini dikarenakan adanya komponen asam lemak dalam lipid
fitoplankton yang belum bereaksi secara sempurna dengan ion metoksi dalam
reaksi transesterifikasi. Faktor-faktor yang bisa menyebabkan hal tersebut adalah
suhu dan waktu reaksi yang belum optimal.
Biodiesel yang dihasilkan dari fitoplankton ini pun memiliki karakteristik
warna hijau jingga. Hal ini disebabkan ikutnya pigmen warna dari fitoplankton
tersebut.
d. Analisa Sifat Fisika Biodiesel
Tahap selanjutnya dari hasil sintesis biodiesel dari lipid fitoplankton
Nannochloropsis sp. melalui reaksi transesterifikasi ini adalah dilakukan
karakterisasi sifat fisika berdasarkan standar ASTM D6751. Uji sifat fisika dari
biodiesel meliputi analisa densitas dan viskositas. Hasil analisa densitas dan
viskositas dapat dilihat pada Tabel 1.

Analisa Densitas
Biodiesel yang dihasilkan dari lipid fitoplankton Nannochloropsis sp.
mempunyai nilai densitas sebesar 0,8151 g.cm-3 pada suhu 40 oC. Adapun standar
nilai densitas 40 oC yang ditetapkan dalam ASTM D6751 adalah 0,82-0,90 g.cm-3.

Densitas merupakan salah satu penentu kualitas biodiesel karena berkaitan

dengan nilai kalor dan daya yang dihasilkan mesin diesel. Semakin rendah nilai
densitas, maka nilai kalor atau pembakaran juga akan semakin tinggi (Aziz et al.,
2011).
Jika dibandingkan dengan standar ASTM D6751, maka biodiesel dari
spesies fitoplankton ini dapat dikatakan tidak masuk dalam rentang nilai densitas
yang telah ditetapkan dimana berada di bawah dengan rentang nilai yang
ditentukan. Hal ini disebabkan masih adanya senyawa-senyawa nonpolar lain
tercampur di dalam biodiesel sehingga turut mempengaruhi nilai densitas
biodiesel yang diproduksi. Namun hal ini tidaklah menjadi masalah karena
dengan perbaikan metode kedepannya, maka hasil yang diperoleh dapat dibuat
sesuai dengan standar yang ditetapkan.
Analisa Viskositas
Viskositas merupakan salah satu standar dalam penentu kualitas biodiesel
dan memiliki peranan yang sangat penting dalam proses penginjeksian bahan
bakar. Viskositas yang terlalu rendah dapat menyebabkan kebocoran pompa
injeksi bahan bakar dan apabila terlalu tinggi dapat mempengaruhi kerja cepat alat
injeksi dan mempersulit pengabutan bahan bakar (Azis et al., 2011).
Salah satu penyebab tinggi rendahnya nilai viskositas adalah penggunaan
konsentrasi katalis dan suhu. Semakin tinggi konsentrasi katalis yang dipakai,
maka viskositas akan menurun. Ini dikarenakan konsentrasi katalis yang berlebih
akan mempercepat terpecahnya tligliserida menjadi tiga ester lemak yang akan
menurunkan nilai viskositas 5-10 %.

Viskositas kinematik yang diperoleh pada hasil penelitian ini sebesar 1,15
cSt dimana nilainya lebih kecil dibandingkan dengan standar rentang nilai
viskositas kinematik yang dianjurkan dalam ASTM D6751 adalah sebesar 1,60
5,80 cSt. Hal ini disebabkan masih adanya sisa metanol yang terkandung di dalam
biodiesel sehingga nilai viskositas yang diperoleh agak kecil.
e. Analisa Sifat Kimia Biodiesel
Uji karakterisasi sifat kimia biodiesel berdasarkan standar ASTM D6751
dilakukan setelah selesai dilaksanakan uji sifat fisika. Uji sifat kimia biodiesel
meliputi analisa kadar asam lemak bebas (% FFA), bilangan penyabunan, dan
bilangan iodium. Hasil analisa kadar asam lemak bebas (% FFA), bilangan
penyabunan, dan bilangan iodium dapat dilihat pada Tabel 2.

Analisa Kadar Asam Lemak Bebas (% FFA)

Nilai kadar asam lemak bebas biodiesel hasil penelitian ini sebesar 0,5381
% dimana nilainya melebihi batas maksimal standar kadar asam lemak bebas /
FFA (%) biodiesel yang dianjurkan dalam ASTM D6751 adalah sebesar 0,4500
%.
Kadar asam lemak bebas yang tinggi dapat menyebabkan endapan dalam
sistem pembakaran dan juga merupakan indikator bahwa bahan bakar tersebut

dapat berfungsi sebagai pelarut yang dapat mengakibatkan penurunan kualitas

pada sistem bahan bakar.
Makin tinggi asam lemak bebas maka semakin rendah kualitas biodieselnya.
Asam lemak bebas yang tinggi dapat juga mengurangi umur dari pompa dan filter.
Analisa Bilangan Penyabunan
Bilangan penyabunan

didefinisikan sebagai

milligram

KOH

yang

dibutuhkan untuk menyabunkan satu gram sampel. Semakin rendah berat

molekul, maka semakin tinggi bilangan penyabunan. begitupun sebaliknya
(Nirwana, 2012).
Nilai bilangan penyabunan biodiesel hasil penelitian ini sebesar 5,0291 mg
KOH/g dan standar bilangan penyabunan biodiesel yang ditetapkan dalam ASTM
D6751 adalah maksimal sebesar 500 mg KOH/g. Berdasarkan data tersebut
biodiesel dari spesies fitoplankton Nannochloropsis sp. memiliki bilangan
penyabunan yang rendah dan masuk dalam pengendalian mutu biodiesel yang
ditetapkan oleh ASTM D6751.
Analisa Bilangan Iodium
Bilangan iodium pada biodiesel menunjukkan tingkat ketidak jenuhan
senyawa penyusun biodiesel. Di satu sisi, keberadaan senyawa lemak tak jenuh
meningkatkan performansi biodiesel pada suhu rendah karena senyawa ini
memiliki titik leleh (melting point) yang lebih rendah sehingga berkorelasi dengan
cloud point and pour point yang juga rendah (Knothe, 2005).
Biodiesel dengan bilangan iodium tinggi akan menghasilkan ester dengan
daya aliran dan pemadatan pada suhu rendah. Biodiesel yang memiliki derajat
ketidakjenuhan tinggi tidak cocok digunakan sebagai biodiesel karena molekul

tidak jenuh akan bereaksi dengan oksigen dari atmosfer dan terkonversi menjadi
peroksida dan mengakibatkan terjadinya ikatan silang pada sisi tidak jenuh dan
menyebabkan biodiesel terpolimerisasi membentuk material serupa plastik,
terutama jika suhu meningkat. Sebagai akibatnya mesin diesel akan rusak (Azam
et al., 2005).
Biodiesel yang dihasilkan dari lipid fitoplankton Nannochloropsis sp.
memenuhi standar mutu bilangan iodium ASTM D6751 sebesar 16,6437g I2/100
g yang tidak lebih dari 115g I2/100 g.
2.2.2.3 Kesimpulan

(Produksi

Biodiesel

dari

Lipid

Fitoplankton

Nannochloropsis sp. Melalui Metode Ultrasonik)

Lipid Nannochloropsis sp dapat diisolasi melalui ekstraksi ultrasonik
dimana kandungan lipid Nannochloropsis sp. adalah sebesar 20,6558 % BK
biomassa.
Kuantitas biodiesel yang disintesis dari lipid fitoplankton Nannochloropsis
sp. melalui metode ultrasonik adalah sebesar 8,5291 gram dengan berat rendamen
48,33 %. Kualitas biodiesel dari fitoplankton Nannochloropsis sp. sebagian besar
belum memenuhi standar ASTM D6751 American Society for Testing and
Materials (ASTM D6751). Adapun parameter yang belum memenuhi adalah nilai
densitas, viskositas, dan kadar asam lemak bebas (% FFA).

BAB III
PENUTUP

3.1 Kesimpulan
Adapun kesimpulan dari makalah ini yaitu:
1. Biotransformasi adalah proses pengubahan suatu senyawa menjadi senyawa
turunannya yang strukturnya berbeda dari senyawa asalnya akibat aktivitas
metabolisme suatu mikroba. Bioenergi adalah energi yang diperoleh/
dibangkitkan yang berasal dari biomassa.
2. Tahap biotransformasi yaitu pembuatan (sintesis) suatu senyawa maupun
menghilangkan senyawa tersebut berdasarkan sel biologis (bakteri). Tahap
bioenergi tergantung pada sumber yang dimanfaatkan, yaitu pati/ gula
mengalami hidrolisis akan menghasilkan glukosa/ fruktosa/ sukrosa,
kemudian di fermentasi menghasilkan bioetanol. Tanaman berligniselulosa
mengalami hidrolisis akan menghasilkan glukosa/ xylosa dll, kemudian di
fermentasi menghasilkan bioetanol. Minyak pada tanaman mengalami
transesterifikasi menghasilkan biodiesel. Biomassa atau limbah organik
mengalami proses hidrolisis, pengasaman, perubahan menjadi asam asetat
dan pengubahan menjadi gas metana dengan bantuan bakteri dari jenis
archae methanogens
3. Contoh biotransformasi yaitu transformasi -pinena dengan bakteri
Pseudomonas aeruginosa atcc 25923. contoh bioenergi yaitu produksi
biodiesel dari lipid fitoplankton Nannochloropsis sp. melalui metode
ultrasonik.

DAFTAR PUSTAKA

De Man, J. M. (1997). Kimia Makanan. Bandung: ITB pres.

Desmafianti, G., 2013, Pengertian Bio-diesel, http://gitadesfianti.blogspot.com,
Diakses Pada Tanggal 16 Mei 2015.
ESDM,
2011,
Tantangan
Pengembangan
Biogas
Di
Indonesia,
http://www.esdm.go.id/news-archives/323-energi-baru-danterbarukan/4177tantangan-pengembangan-biogas-di-indonesia-.html, Diakses pada 16 Mei
2015.
Girindra, A., 1990, Biokimia, Jakarta,Gramedia.
Kwangdinata, R., Raya, I., Zakir, M., 2013, Produksi Biodieseldari Lipid
Fitoplankton Nannochloropsis sp.Melalui Metode Ultrasonik, Marina
Chemica Acta, 14(2): 28-36.
Sastrohamidjojo, H., 2001,Spektroskopi. Yogyakarta, Liberty
Sari D. A., 2013, Proses Produksi Bioenergi Berbasiskan Bioteknologi, Jurnal
Aplikasi Teknologi Pangan, 2 (3): 108-113.
Simanjuntak, M. E., 2005, Beberapa Energi Alternatif yang Terbarukan dan
Proses Pembuatannya, Jurnal Teknik Simetrika, 4 (1): 287 293.
Wijayanti, N., Astuningsih, C., Mulyati, S., Transformasi -Pinena dengan Bakteri
Pseudomonas aeruginosa ATCC 25923, Journal of Biology & Biology Education, 6 (1) :
24-28.

Pertanyaan Bioteknologi
Riska Wulandari (Kelompok )
1. Tabel yang ditampillan pada tabel biotransformasi diperlihatkan kadarkadar yang berbeda, apa yang mempengaruhi perbedaan kadar tersebut?
Jawaban:
Perbedaan kadar-kadar yang muncul dipengaruhi oleh aktivitas bakteri
yang berperan dalam biotransformasi -Pinosa. Makin tinggi perbedaan
konsentrasi maka makin sedikit aktifitas bakteri pada senyawa tersebut.
2. Mengapa hanya pada konsentrasi 2% yang memiliki senyawa baru?
Jawaban:
Senyawa baru tidak hanya muncul pada 2 %, tetapi juga muncul oada
konsentrasi 0,5 %; 1 %, dan 2%, namun hanya pada konsentrasi 2 %
senyawa baru paling banyak terbentuk atau terlihat.
Rifka Saputri (Kelompok V1)
1. Mengapa bukan 1 % konsentrasi yang digunakan? padahal kadar terbesar
-Pinosa berada pada konsentrasi 1 %
Jawaban:
Pada konsentrasi 1 % tidak digunakan sebagai acuan, tetapi yang
digunakan adalah konsentrasi 2% karena pada konsentrasi ini, senyawa
baru yang muncul lebih banyak meskipun kadar -Pinosa lebih sedikit dari
-Pinosa pada kadar 1%.
2. Mengapa 6 senyawa yang muncul pada data terakhir sendangkan,
sepenjang penjelasan yang diperlihatkan hanya 4 senyawa baru?
Jawaban:
Hasil jurnal yang diperlihatkan terdapat 4 senyawa baru, adapun 6
senyawa yang diperlihatkan seperti dibawah ini, merupakan senyawa
perbandingan dari penelitian sebelumnya Lindmark pada tahun 2003.

Baso Agung (Kelompok II)

1. Mengapa pick kecil yg muncul pada senyawa murni tidak ditandai sebagai
senyawa baru mengapa hanya pada konsentrasi 2 %
Jawaban:
Pick kecil yang muncul pada senyawa murni bukan merupakan senyawa
baru tapi memang senyawa yang terdapat pada minyak terpentin hanya
saja kadarnya kecil sehingga tidak diperhitungkan. Adapun pick kecil yang
muncul pada kromatogram diperhitungkan sebagai senyawa baru pada
konsentrasi 2%.
2. Bagaimana penentuan kadar untuk masing-masing senyawa?
Jawaban:
% Kadar =

Luas Area Sampel

Luas Area Standar

Harfianti
1. Apa fungsi penggunaan metode ultrasonik pada pembuatan biodiesel?
Jawab :
Dari beberapa penelitian yang telah dilakukan, penggunaan gelombang
ultrasonik terbukti dapat mempercepat reaksi, mengurangi jumlah katalis
yang dipakai dan mengurangi rasio minyak terhadap alkohol yang dipakai
dibandingkan reaksi tanpa menggunakan bantuan gelombang ultrasonik.
Hal ini disebabkan energi gelombang ultrasonik muncul dari proses
kavitasi akustik (acoustic cavitation) yang terdiri dari pembentukan,
pertumbuhan, dan keruntuhan (implosive collapse) dari gelembung yang
terbentuk. Gelombang ultrasonik menyebabkan efek mekanik pada reaksi
yakni memperbesar luas permukaan melalui pembentukan celah mikro
pada permukaan, mempercepat pelarutan, atau meningkatkan laju transfer
massa.
2. Pada sintesis biodiesel melalui metode ultrasonik yang mana proses
transesterifikasinya?
Jawab :
Ketika lipid murni dicampurkan dengan larutan yang terbuat dari metanol
(perbandingan mol lipid : metanol = 1 : 12) dan katalis KOH (9 % berat
minyak). Dibiarkan selama 3-4 hari hingga terbentuk dua fasa
(transesterifikasi ). Waktu reaksi transesterifikasi yakni sekitar 180 menit
dengan suhu pemanasan 50-60 oC menggunakan alat ultrasonik cleaner
yang dioperasikan pada frekuensi 40 kHz. Kemudian hasil reaksi dibiarkan
selama 3-4 hari hingga terbentuk dua lapisan. Lapisan atas merupakan
lapisan biodiesel yang berwarna hijau jingga keruh, sedangkan lapisan
bawah merupakan lapisan gliserol berwarna coklat kekuningan.
3. Apa aplikasinya produk biotransformasi alpa pinena dan bagaimana bisa
meningkatkan nilai jual dari minyak terpentin

Jawab:
Ada pada produk yang dihasilkan ada beberapa senyawa yang diduga
merupakan biotransformasi dari alpa pinena, salah satunya terpeniol. pada
jurnal sebelumnya dilakukan transformasi alfa pinena menggunakan
katalis asam menghasilkan terpeniol.. terpeniol merupakan salah satu
terpen yang merupakan bahan dasar dari pembuatan parfum dan bahan
kosmetik lainnya.

Sitti Masita
1. Bagaimana komposisi dari media padat dan media cair (broth)!
Jawab:
untuk media cair:
akaudes, daging dan pepton
untuk media padat:
akuades, daging, pepton dan tepung agar