Kilomikron, VLDL dan LDL dihancurkan secara khusus melalui reaksi
enzimatik. Kolesterol yang tertinggal dari fraksi HDL diukur melalui reaksi enzimatik khusus oleh adanya surfactant spesifik HDL. Kombinasi ini membuat lebih spesifik untuk HDL dari metode lain. Cara kerja HDL metode langsung (manual) Disiapkan 3 tabung reaksi untuk blanko reagen (RB), sampel,dan standar. Kemudian pada tabung pertama dipipet 10 l aquadest dan 750 l reagen 1 (R1) campur dengan hati-hati, inkubasi 5 menit pada suhu 37C. setelah itu tambahkan dengan reagen 2 (R2) sebanyak 250 l, campur dengan hati-hati kemudian inkubasi selama 5 menit. Selanjutnya pada tabung kedua dipipet standar sebanyak 10 l dan reagen 1 (R1) sebanyak 750 l kemudian campur dengan hati-hati, inkubasi selama 5 menit pada suhu 37C. Setelah diinkubasi tambahkan reagen 2 (R2) sebanyak 250 l, campur dengan hati-hati kemudian inkubasi selama 5 menit pada suhu 37C. dan yang terakhir pada tabung ketiga, dipipet sampel sebanyak 10 l dan reagen 1 (R1) sebanyak 750 l kemudian dicampur dengan hati-hati, diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37C. Setelah diinkubasi ditambahkan reagen 2 (R2) sebanyak 250 l, campur dengan hati-hati kemudian diinkubasi selama 5 menit pada suhu 37C. Setelah ketiga tabung diinkubasi selama 5 menit, dibaca blanko, standar dan sampel berurutan pada panjang gelombang 578 nm.