Assalamualaikum wr.

wb

Profil Lipid
Kelompok 5

Anggi Agustira
31113005
Mia Fitriana 31113029
Ms Rohmatin 31113031
Rani Yunda L 31113038
Siti Nuraeni 31113048

PRINSIP PERCOBAAN
Prinsip kolesterol :

K olesterol ditentukan setelah hidrolisa

enzimatik dan oksidasi. Indikator
quinoneimin terbentuk dari
hidrogen
peroksida dan 4 amino antipyrin
dengan
adanya phenol dan peroksida.

Metode : CHOD-PAP (Cholesterol Oxidase Phenol

Aminoantypirine).
Ester kolesterol + H2O

Kolesterol + asam lemak

Kolestenon H2O2

kolesterol esterase

Koleserol + H2O kolesterol oksidase

H2O2 + fenol + 4 Aminoantypirin

peroksidase

quinonimin + H2O

Prinsip HDL : Kilomikron, VLDL dan LDL dihancurkan secara

khusus melalui reaksi enzimatik. Kolesterol yang

tertinggal dari
fraksi HDL diukur melalui reaksi
enzimatik khusus oleh
adanya surfactant spesifik
HDL. Kombinasi ini membuat lebih
spesifik
untuk HDL dari metode lain.

Metode HDL : CHOD-PAP (Cholesterol Oxidase Phenol

Aminoantypirine).

Prinsip Trigliserida :

Metode

Penentuan kadar trigliserida setelah hidrolisis

enzimatik dengan enzim lipase. Terciptalah bentuk
quinon imine dari hidrogen peroksida, 4aminoantipirin dan 2-klorofenol adalah karena
adanya proses katalitik yang memngaruhi reaksi
peroksidase.

: CHOD-PAP (Cholesterol Oxidase Phenol

Aminoantypirine).
Glicerol+ATP Glicerol kinase
Glicerol -3 phosfat + ADP
Glicerol -3 phosfat + O2 Glycerol -3-P oksidase Dihydroxyacetone phosfat + H2O2
2H2O2 + 4 Aminophenazone + 4-chlorophenolfenol
HCl

Peroxydase

Quinineimin + H2O +

Prinsip LDL : Chylomikron, VLDL dan LDL diendapkan dengan

menambahkan asam fosfotungstat dan magnesium

klorida. Setelah di centrifugasi cairan supernatan
mengandung fraksi LDL yang mana diperiksa sebagai
LDL kolesterol dengan menggunakan kolesterol
liquicolor test.

Metode LDL : CHOD-PAP (Cholesterol Oxidase Phenol

Aminoantypirine).

PROSEDUR
1. KOLESTEROL

Siapkan 3 buah tabung reaksi

Pipet masing masing campuran seperti pada tabel ke dalam tiap
tabung reaksi tersebut

Kuvet

Blanko

Standar

Sampel

Seru

10 l

Standar

10 l

Aquades

10 l

Pereaksi

1000 l

1000 l

1000 l

Dicampurkan, kemudian diinduksi pada suhu 20-250 C selama 20

menit atau pada suhu 370 C selama 10 menit
Kemudian dibaca hasilnya.

2. TRIGLISERIDA

Siapkan 3 buah tabung reaksi

Pipet masing masing campuran seperti pada tabel ke dalam tiap
tabung reaksi tersebut
Kuvet
Serum
Standar

blanko
-

standar
-

Sampel
10 l

10 l

Aquadest

10 l

Pereaksi

1000 l

1000 l

1000 l

Dicampurkan, kemudian diinduksi pada suhu 20-250 C selama 20

menit atau pada suhu 370 C selama 10 menit
Kemudian dibaca hasilnya.

3. HDL
Pipet sampel dari tabung apentrof sebanyak 200l,
masukkan ke tabung apentrof yang baru

Sampel direaksikan dengan reagen HDL, Precipitant sebanyak 500 l

Inkubasi selama 15 menit, sentrifugasi pada kecepatan 2500 rpm

selama 20 menit, inkubasi selama 2 jam

Diambil supernatant (bagian atas) sebanyak 100 l,

tambahkan reagen kolesterol 1000 l. Inkubasi selama 10 menit.
Spektofotometri pada 246

4. LDL

Pipet sampel dari tabung apentrof sebanyak 100l,

masukkan ke tabung apentrof yang baru

Sampel direaksikan dengan reagen LDL, Precipitant sebanyak 100 l

Inkubasi selama 15 menit, sentrifugasi pada kecepatan 2500 rpm

selama 20 menit, inkubasi selama 1 jam
Diambil supernatant (bagian atas) sebanyak 100 l,
tambahkan reagen kolesterol 1000 l. Inkubasi selama 10 menit.
Spektofotometri pada 546 nm

PERHITUNGAN DAN HASIL

KOLESTEROL
Absorban standar
Absorban sampel
C standar
Kadar Total Kolsterol

: 0.250
: 0.222
: 100 mg/dl
:

TRIGLISERIDA
Absorban standar
Absorban sampel
C standar
Kadar Trigliserida

: 0.188
: 0.291
: 200 mg/dl
:

Trigliserida Normal : 150 mg/dl

HDL
Absorban standar : 0.188
Absorban sampel : 0.291
C standar : 200 mg/dl
Kadar supernatan :

Kadar HDL = kadar supernatan (HDL) kadar total

kolesterol
= 296,02 mg/dL 177,6 mg/dL
= 118,42 mg/dL (Normal)
HDL Normal <60 mg/dL

LDL
Absorban standar
Absorban sampel
C standar
Kadar supernatan :

:
:
:

0.137
0,057
200 mg/dL

Kadar LDL = kadar total kolesterol kadar supernatan

= 177,6 mg/dL 83,2116 mg/dL
= 94,3884 mg/dL
LDL Normal < 100

DATA HASIL

Data Hasil

Absorbansi
Sampel

Absorbansi
Standar

Kolesterol

0.222

0.250

Hasil
Perhitungan
(mg/dL)
177,6

Trigliserida

0.291

0.188

305,9

HDL

0.291

0.188

118,42

LDL

0,057

0,137

94,3884

PEMBAHASAN

KESIMPULAN