Mikropropagasi adalah praktek cepat mengalikan bahan saham pabrik untuk memproduksi

sejumlah besar tanaman keturunan , menggunakan metode kultur jaringan tanaman modern.
Budidaya digunakan untuk memperbanyak tanaman yang mulia seperti yang telah
dimodifikasi

secara

genetik

atau

dibiakkan

melalui

metode

pemuliaan tanaman

konvensional . Hal ini juga digunakan untuk memberikan jumlah yang cukup planlet untuk
menanam dari tanaman saham yang tidak menghasilkan biji , atau tidak merespon dengan
baik untuk reproduksi vegetatif .
Cornell University botani Frederick Campion Steward ditemukan dan merintis budidaya dan
kultur jaringan tanaman di akhir 1950-an dan awal 1960-an .
Metode (Tahapan budidaya)
Pembentukan
Kultur in vitro tanaman dalam lingkungan steril dikendalikan.
Mikropropagasi dimulai dengan pemilihan bahan tanaman yang akan diperbanyak. Jaringan
tanaman dikeluarkan dari pabrik utuh dalam kondisi steril. bahan saham bersih yang bebas
dari virus dan jamur yang penting dalam produksi tanaman sehat. Setelah bahan tanaman
yang dipilih untuk budaya, koleksi eksplan (s) dimulai dan tergantung pada jenis jaringan
yang akan digunakan; termasuk tips batang, kepala sari, kelopak, serbuk sari dan jaringan lain
tanaman. Bahan eksplan kemudian disterilkan permukaannya, biasanya dalam beberapa
kursus pemutih dan alkohol mencuci, dan akhirnya dibilas dengan air steril. sebagian kecil ini
dari jaringan tanaman, kadang-kadang hanya satu sel, ditempatkan pada media pertumbuhan,
biasanya mengandung sukrosa sebagai sumber energi dan satu atau lebih zat pengatur tumbuh
(hormon tanaman). Biasanya medium dikentalkan dengan agar-agar untuk membuat gel yang
mendukung eksplan selama pertumbuhan. Beberapa tanaman yang mudah tumbuh pada
media sederhana, tetapi yang lain membutuhkan media yang lebih rumit untuk pertumbuhan
yang sukses; jaringan tanaman tumbuh dan berdiferensiasi menjadi jaringan baru tergantung
pada media. Misalnya, media yang mengandung sitokinin yang digunakan untuk membuat
tunas bercabang dari tunas tanaman.
Perkalian
Perkalian adalah pengambilan sampel jaringan yang dihasilkan selama tahap pertama dan
meningkatkan jumlah mereka . Setelah pengenalan dan pertumbuhan jaringan tanaman yang

sukses , tahap pembentukan diikuti oleh perkalian . Melalui siklus berulang dari proses ini ,
sampel eksplan tunggal dapat ditingkatkan dari satu ke ratusan dan ribuan tanaman .
Tergantung pada jenis jaringan tumbuh , perkalian dapat melibatkan metode yang berbeda
dan media . Jika bahan tanaman tumbuh adalah jaringan kalus , dapat ditempatkan dalam
blender dan dipotong-potong kecil dan recultured pada jenis yang sama dari media kultur
tumbuh lebih jaringan kalus . Jika jaringan ditanam sebagai tanaman kecil yang disebut
planlet , hormon sering ditambahkan yang menyebabkan planlet untuk menghasilkan banyak
cabang kecil . Setelah pembentukan beberapa tunas , tunas tersebut akan ditransfer ke rooting
media dengan auksin tinggi rasio \ sitokinin . Setelah perkembangan akar , planlet dapat
digunakan untuk pengerasan
Pretransplant
planlet pisang ditransfer ke tanah (dengan kascing) dari media tanam. Proses ini dilakukan
untuk aklimatisasi planlet ke tanah karena mereka sebelumnya ditanam di media tanam.
Setelah tumbuh selama beberapa hari planlet dipindahkan ke lapangan.
Tahap ini melibatkan mengobati planlet / tunas yang dihasilkan untuk mendorong
pertumbuhan akar dan "pengerasan." Hal ini dilakukan in vitro, atau dalam "tabung"
lingkungan yang steril.
"Pengerasan" mengacu pada penyusunan tanaman untuk lingkungan pertumbuhan alami.
Sampai tahap ini, planlet telah ditanam di "ideal" kondisi, yang dirancang untuk mendorong
pertumbuhan yang cepat. Karena sifat dikendalikan pematangan mereka, planlet sering tidak
memiliki penutup kulit yang berfungsi penuh. Hal ini menyebabkan mereka menjadi sangat
rentan terhadap penyakit dan tidak efisien dalam penggunaan air dan energi. Dalam kondisi
vitro yang tinggi kelembaban, dan tanaman tumbuh di bawah kondisi ini sering tidak
membentuk kutikula bekerja dan stomata yang menjaga tanaman dari kekeringan. Ketika
dibawa keluar dari budaya, planlet perlu waktu untuk menyesuaikan diri dengan kondisi
lingkungan yang lebih alami. Pengerasan biasanya melibatkan perlahan menyapih planlet dari
kelembaban tinggi, cahaya rendah, lingkungan yang hangat untuk apa yang akan dianggap
lingkungan pertumbuhan yang normal untuk spesies yang bersangkutan.

Transfer dari budaya

kultur jaringan yang ditanam di sebuah bank benih USDA, Pusat Nasional untuk Sumber
Daya Genetik Preservation.
Pada tahap akhir dari budidaya tanaman, planlet dikeluarkan dari media tanaman dan
dipindahkan ke tanah atau (lebih umum) pot kompos untuk pertumbuhan lanjutan dengan
metode konvensional.
Tahap ini sering dikombinasikan dengan tahap "pretransplant".
Metode Micro-propagasi
Budaya meristem
Dalam budaya Meristem yang Meristem dan primordial daun subtending beberapa
ditempatkan ke dalam media tanam yang cocok. Sebuah platelet berakar memanjang
diproduksi setelah beberapa minggu, dan ditransfer ke tanah ketika telah mencapai ketinggian
yang cukup. Sebuah pabrik bebas penyakit dapat diproduksi dengan metode ini. Hasil
eksperimen juga menunjukkan bahwa teknik ini dapat berhasil dimanfaatkan untuk perkalian
cepat dari berbagai Tanaman herba.
Budaya kalus
Sebuah kalus adalah massa sel parenkim terdiferensiasi. Ketika jaringan tanaman hidup
ditempatkan dalam media tumbuh buatan dengan kondisi lain yang menguntungkan, kalus
terbentuk. Pertumbuhan kalus bervariasi dengan tingkat homogen auksin dan Cyotkininn dan
dapat dimanipulasi oleh pasokan endogen zat pengatur tumbuh tersebut dalam media kultur.
Pertumbuhan kalus dan organogenesis atau embryogenesis dapat disebut menjadi tiga
tahapan yang berbeda.
Tahap I: produksi cepat kalus setelah menempatkan eksplan di media kultur
Tahap II: Kalus dipindahkan ke medium yang mengandung zat pengatur tumbuh lainnya
untuk induksi organ adventif.
Tahap III: The plantlet baru kemudian terkena secara bertahap dengan kondisi lingkungan.

Budaya suspensi
Sebuah kultur suspensi sel mengacu pada sel-sel dan atau kelompok sel tersebar dan
berkembang di media kultur cair aerasi (Street, 1997, Thorpe1981) ditempatkan dalam media
cair dan dikocok dengan kuat dan dosis yang seimbang hormon. Suezawa et al. (1988)
melaporkan Cyotkininn diinduksi tunas adventif dalam buah kiwi dalam budaya budaya
suspensi sub selama sekitar satu minggu.
Budaya embrio
Dalam kultur embrio, embrio dipotong dan ditempatkan dalam media kultur dengan nutrisi
yang tepat dalam kondisi aseptik. Untuk mendapatkan pertumbuhan yang cepat dan optimal
menjadi planlet, itu ditransfer ke tanah. Hal ini sangat penting untuk produksi antarspesies
dan hibrida intergenerik dan untuk mengatasi aborsi embrio.
Budaya protoplas
Dalam budaya protoplas, sel tumbuhan dapat diisolasi dengan bantuan dinding enzim
merendahkan dan pertumbuhan dalam media kultur yang cocok dalam kondisi terkontrol
untuk regenerasi plantlet. Dalam kondisi yang cocok protoplas mengembangkan dinding sel
diikuti dengan peningkatan pembelahan sel dan diferensiasi dan tumbuh menjadi tanaman
baru. protoplas adalah budaya tinju di media cair pada 25-28 C dengan intensitas cahaya dari
100 sampai 500 lux atau dalam gelap dan setelah menjalani pembelahan sel yang besar,
mereka dipindahkan ke padat menengah menyenangkan atau morfogenesis dalam banyak
tanaman hortikultura respon dengan baik untuk budaya protoplas .
Keuntungan
Budidaya memiliki sejumlah keunggulan dibandingkan teknik perbanyakan tanaman
tradisional:
Keuntungan utama dari budidaya adalah produksi banyak tanaman yang klon dari satu
sama lain.
Budidaya dapat digunakan untuk menghasilkan tanaman yang bebas penyakit.
Hal ini dapat memiliki tingkat kesuburan yang sangat tinggi, menghasilkan ribuan
propagul sedangkan teknik konvensional mungkin hanya menghasilkan sebagian kecil dari
nomor ini.

Ini adalah satu-satunya metode yang layak regenerasi sel rekayasa genetika atau sel setelah
fusi protoplas.
Hal ini berguna dalam mengalikan tanaman yang menghasilkan biji dalam jumlah tidak
ekonomis, atau ketika tanaman steril dan tidak menghasilkan biji layak atau saat benih tidak
dapat disimpan (lihat biji bandel).
Budidaya sering menghasilkan tanaman yang lebih kuat, yang menyebabkan percepatan
pertumbuhan dibandingkan dengan tanaman sejenis yang dihasilkan oleh metode
konvensional - seperti biji atau stek.
Beberapa tanaman dengan biji yang sangat kecil, termasuk yang paling anggrek, yang
paling andal tumbuh dari benih dalam budaya steril.
Sejumlah besar tanaman dapat diproduksi per meter persegi dan propagul dapat disimpan
lama dan di daerah yang lebih kecil.
kekurangan
Budidaya tidak selalu berarti sempurna mengalikan tanaman. Kondisi yang membatasi
penggunaannya meliputi:
Hal ini sangat mahal, dan dapat memiliki biaya tenaga kerja lebih dari 70%. [Klarifikasi
diperlukan]
Sebuah monokultur diproduksi setelah budidaya, mengarah ke kurangnya ketahanan
penyakit keseluruhan, karena semua tanaman keturunan mungkin rentan terhadap infeksi
yang sama.
Sampel tanaman terinfeksi dapat menghasilkan keturunan yang terinfeksi. Ini jarang terjadi
sebagai tanaman saham secara hati-hati disaring dan diperiksa untuk mencegah tanaman
kultur terinfeksi virus atau jamur.
Tidak semua tanaman bisa berhasil jaringan berbudaya, sering karena media yang tepat
untuk pertumbuhan tidak diketahui atau tanaman menghasilkan bahan kimia metabolik
sekunder yang menghambat atau membunuh eksplan.
Kadang-kadang tanaman atau kultivar tidak terwujud untuk mengetik setelah jaringan
berbudaya. Hal ini sering tergantung pada jenis bahan eksplan digunakan selama fase inisiasi
atau hasil dari usia sel atau propagul line.
Beberapa tanaman yang sangat sulit untuk mendisinfeksi organisme jamur.

Keterbatasan utama dalam penggunaan budidaya bagi banyak tanaman adalah biaya
produksi; untuk banyak tanaman penggunaan benih, yang biasanya bebas penyakit dan
diproduksi dalam jumlah yang baik, mudah menghasilkan tanaman (lihat benih ortodoks)
dalam jumlah yang baik dengan biaya lebih rendah. Untuk alasan ini, banyak pemulia
tanaman tidak memanfaatkan budidaya karena biaya yang mahal. peternak lain
menggunakannya untuk menghasilkan tanaman saham yang kemudian digunakan untuk
perbanyakan benih.
Mekanisasi proses dapat mengurangi biaya tenaga kerja, namun telah terbukti sulit untuk
dicapai, meskipun upaya aktif untuk mengembangkan solusi teknologi.