Kemas M.

Abiyyu

1405223

1. Pengertian cDNA
CDNA adalah kependekan dari Complementary DNA yang berarti DNA
beruntai tunggal (single strain) buatan atau sintetik hasil salinan dari untai
mRNA melalui teknin PCR dan menggunakan bantuan aktivitas enzim
Reverse Transkriptase. Enzim Reverse Transkriptase tersebut biasanya
dimiliki oleh virus. Pembuatan Complementary DNA dilakukan dengan
dengan teknik in vitro menggunakan cetakan untuk untai pertama berupa
mRNA, karena pada mRNA hanya terdapat ekson.
Complementary DNA sangat banyak digunakan dalam analisis ekspresi
gnenetik dan transkriptomika. MRNA berkas tunggal atau transkriptom

bersifat tidak stabil karena mudah dicerna dan dilebur dalam sel. Pengubahan
mRNA berkas tunggal menjadi cDNA membuatnya lebih mudah dianalisis
karena DNA lebih stabil (tidak mudah dilebur).

2. Proses dan Mekanisme Cdna

Hal pertama yang dilakukan adalah mengisolasi mRNA. Ketika mRNA
berhasil diisolasi, selanjutnya diperlukan beberapa reagen yang sangat
penting dalam proses konversi tersebut seperti dNTPs, primer, dan enzyme
Reverse Transcriptase, enzim tersebut akan mengkatalis sintesis single strain
dari DNA dari cetaka mRNA dengan menggunakan bantuan dari primer oligo
dT, lalu mRNA akan didegradasi dengan enzim ribonuklease.
 Selanjutnya dilakukan pencampuran mRNA dengan reagen reagent
tersebut agar dapat membuat untai DNA komplementer atau sintesis untai
pertama, lalu mRNA harus dihilangkan kemudian untai kedua DNA dapat
disintesis.

Gambar 1. Proses Sintesis DNA Komplementer (anonym)

 Daftar Pustaka

Campbell, N.A., Reece, J.B. Urry, L.A., Wasserman, S.A., Minorsky, P.V., dan
Jackson, R.B. (2008). Biologi Jilid 1 (Edisi Kedelapan). Jakarta: Erlangga

Yassier. (2008). Isolasi dan Karakterisasi Fragmen Cdna dari Gen Penyandi
Metallothionein dari Kedelai. [Online]. Tersedia :
https://core.ac.uk/download/pdf/32346675.pdf. [27 Maret 2017]

Anonim. (tanpa tahun). Reverse Transcription. [Online]. Tersedia :

https://www.neb.com/applications/cloning-and-synthetic-biology/dna-
preparation/reverse-transcription-cdna-synthesis. [28 Maret 2017]

Anonim. (Tanpa tahun). Complementary DNA. [Online]. Tersedia :

http://humangenes.org/cdna-complementary-dna. [28 Maret 2017]

Anonim. (2002). cDNA Synthesis System. [Online]. Tersedia di:

https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/18267.pdf. [28 Maret 2017]