MAKALAH ANALISIS FARMASI

UJI JARAK LEBUR DAN CEMARAN SEJENIS

AMITRIPTILIN HIDROKLORIDA

KELOMPOK 3
Kelas Analisis Farmasi B

Agnes Aurora Paramitha 1606930092

Agustyan Fadillah 1606930110
Alvina Wijaya Puteri 1206224672
Khansa Nursatyani 1206220560
Wiranti Anggraini 1206219956

PROGRAM PROFESI APOTEKER

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS INDONESIA
DEPOK
2016
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan ke hadirat Allah, Tuhan Yang Maha Kuasa
karena atas kehendak-Nya, makalah ini dapat terselesaikan tepat pada waktunya.
Penulisan makalah ini ditujukan untuk memenuhi tugas mata kuliah Analisis Farmasi.
Selain itu, tujuan penulisan makalah ini adalah untuk meningkatkan wawasan
mahasiswa terkait pemahaman mengenai uji jarak lebur dan cemaran sejenis.
Penyelesaian penulisan makalah ini tidak terlepas dari bantuan yang
diberikan kepada tim penyusun. Oleh karena itu, tim penyusun mengucapkan ucapan
terima kasih kepada:
1. Allah, Tuhan Yang Maha Kuasa, atas karunia-Nya,
2. Bapak Dr. Hayun, M.Si, Apt selaku dosen pembimbing mata kuliah
Analisis Farmasi,
3. Semua pihak yang terkait dalam pembuatan makalah ini yang tidak
semuanya dapat disebutkan satu-persatu.
Tim penyusun menyadari bahwa makalah ini masih banyak kekurangan.
Oleh karena itu, tim penyusun sangat mengharapkan adanya kritik dan saran agar
makalah ini menjadi lebih baik dan berguna di masa yang akan datang. Atas
perhatiannya tim penyusun makalah ini mengucapkan terima kasih.

Depok, September 2016

Tim Penyusun

ii
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL.i
KATA PENGANTAR ................................................................................................. ii
DAFTAR ISI ............................................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ....................................................................................................... v
BAB 1 PENDAHULUAN ............................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang .................................................................................................... 1
1.2 Tujuan Penulisan ................................................................................................. 2
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................... 3
2.1 Parameter Uji ...................................................................................................... 3
2.1.1 Jarak Lebur ................................................................................................... 3
2.3 Cemaran Senyawa Sejenis .................................................................................. 6
2.3.1 Pengertian Cemaran Senyawa Sejenis ......................................................... 6
2.2 Monografi Bahan Baku ....................................................................................... 7
2.2.1 Amitriptilin Hidroklorida ............................................................................. 7
2.2.2 Diazepam.................................................................................................... 10
2.2.3 Gemfibrosil ................................................................................................ 12
2.2.4 Ketoprofen.................................................................................................. 16
BAB 3 METODOLOGI .............................................................................................. 18
3.1 Jarak Lebur ........................................................................................................ 18
3.1.1 Cara Kerja .................................................................................................. 18
3.1.2 Metode Penentuan Jarak Lebur Lainnya .................................................... 19
3.2 Uji Cemaran Sejenis.......................................................................................... 21
3.3 Amitriptilin Hidroklorida .................................................................................. 21
3.3.1 Jarak Lebur ................................................................................................. 21
3.3.2 Cemaran Senyawa Sejenis ......................................................................... 23

iii
 3.4 Diazepam (Farmakope Indonesia IV) ............................................................... 24
3.4.1 Penetapan Jarak Lebur ............................................................................... 24
3.4.2 Uji Senyawa Sejenis Diazepam ................................................................. 25
3.5 Gemfibrozil (Farmakope Indonesia IV) ............................................................ 26
3.5.1 Penetapan Jarak Lebur ............................................................................... 26
3.5.2 Uji Cemaran Sejenis................................................................................... 27
3.6 Ketoprofen ........................................................................................................ 29
3.6.1 Penetapan Jarak Lebur ............................................................................... 29
3.6.2 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Ketoprofen ................................................ 30
BAB 4 PEMBAHASAN ............................................................................................. 32
4.1 Jarak Lebur ........................................................................................................ 32
4.2 Pembahasan Hasil ............................................................................................. 35
4.2.1 Penentuan Jarak Lebur Amitriptilin Hidroklorida ..................................... 35
4.2.2 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Amitriptilin Hidroklorida ......................... 36
4.2.4 Penentuan Jarak Lebur Diazepam .............................................................. 37
4.2.4 Uji Senyawa Sejenis Diazepam ................................................................. 37
4.3.5 Penentuan Jarak Lebur Gemfibrosil ........................................................... 38
4.2.6 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Gemfibrosil ............................................... 39
4.2.7 Penentuan Jarak Lebur Ketoprofen ............................................................ 40
4.2.8 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Ketoprofen ................................................ 40
BAB 5 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 42

iv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2. 1 Alat Pengukuran Jarak Lebur ...............................................................................5

Gambar 2. 2 Alat Penentuan Jarak Lebur ..................................................................................5
Gambar 2. 3 Hasil Pengamatan Penentuan Jarak Lebur ............................................................6
Gambar 2. 4 Struktur Kimia Amitriptilin Hidroklorida .............................................................7
Gambar 2. 5 Struktur Kimia Diazepam ...................................................................................10
Gambar 2. 6 Struktur Kimia Gemfibrozil ................................................................................12
Gambar 2. 7 Struktur Kimia Ketoprofen .................................................................................16
Gambar 4. 1 Pipa kapiler yg telah terisi dan Termometer .......................................................34
Gambar 4. 2 Memasukkan sampel dengan koin ......................................................................34
Gambar 4. 3 Perangkat Mel Temp ...........................................................................................35
Gambar 4. 4 Struktur Kimia Cemaran A sampai I dari Gemfibrozil .......................................40
Gambar 4. 5 Struktur Kimia Cemaran A sampai I dari Ketoprofen ........................................41

DAFTAR TABEL

Tabel 3. 1 Masing-masing cemaran dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari batas
yang ditentukan .......................................................................................................23
Tabel 4. 1 Masing-masing cemaran dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari batas
yang ditentukan .......................................................................................................36

v
 BAB 1
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pembuatan obat memerlukan bahan-bahan aktif dan non aktif yang berkualitas
baik agar diperoleh obat yang bermutu, aman, dan berkhasiat. Bahan-bahan yang
akan dibuat menjadi obat harus diperhatikan keasliannya, kemurniannya, dan
kualitasnya sebelum diformulasi. Untuk memastikan ketiga hal tersebut, banyak uji
yang dapat dilakukan seperti identifikasi zat, uji cemaran umum, rotasi optik,
kemurnian kromatografi, titik/jarak lebur, uji cemaran senyawa sejenis, uji batas
cemaran, penetapan pH, dan penetapan kadar. Apabila suatu zat berhasil memenuhi
syarat ujinya, maka zat tersebut dapat dinyatakan asli, murni,dan berkualitas, serta
layak digunakan dalam formulasi obat.
Titik lebur suatu senyawa merupakan temperatur dimana zat padat berada
dalam kesetimbangan dengan bentuk cairnya. Zat padat akan berubah menjadi bentuk
cairnya ketika molekul dari zat padat tersebut mendapatkan energi yang cukup untuk
memecah ikatan intermolekulernya. Suhu lebur suatu zat tergantung pada struktur
molekulnya. Sementara itu, jarak lebur didefinisikan sebagai rentang temperatur atau
suhu pada saat bentuk padat tersebut mulai melebur hingga keseluruhan sampel
melebur semua.
Uji jarak lebur yang tertera pada masing-masing monografi digunakan untuk
identifikasi dan karakterisasi suatu senyawa. Apabila dua sampel memiliki suhu lebur
yang berbeda, dapat dikatakan bahwa kedua molekul sampel tersebut berbeda baik
secara struktur atau bentuk konfigurasinya. Kedua sampel tersebut dapat diperkirakan
merupakan isomer struktur. Apabila suhu lebur antara dua sampel sama, struktur
molekul kedua zat tersebut diperkirakan sama.
Uji jarak lebur juga dapat digunakan untuk menguji kemurnian zat. Suatu zat
dapat dikatakan murni bila memiliki titik lebur yang sama dengan standar zat tersebut
atau jarak lebur yang sempit (1-2oC atau kurang). Sebaliknya apabila suatu zat

1
memiliki suhu lebur yang berbeda atau jarak lebur yang melebar terhadap standar,
maka dapat dikatakan bahwa zat tersebut tidak murni.
Pemahaman mengenai kemurnian berubah dari waktu ke waktu dan tidak
dapat dipisahkan dari perkembangan dalam kimia analisis. Cemaran merupakan
perubahan dari suatu senyawa yang dulunya murni namun kemudian ditemukan
bahwa senyawa tersebut menghasilkan senyawa baru, baik yang telah dikenali
maupun tidak
Senyawa sejenis merupakan senyawa yang memiliki struktur kimia
yanghampir sama dengan senyawa obat. Senyawa ini merupakan cemaran atau
produk samping, baik yang diketahui senyawanya maupun tidak, yang dihasilkan
selama proses sintesis atau selama poroses penyimpanan senyawa obat.

1.2 Tujuan Penulisan

Tujuan penulisan makalah ini adalah sebagai berikut :
1. Untuk mengetahui tujuan dari penetapan jarak lebur dan cemaran sejenis
terhadap analisis senyawa
2. Untuk mengetahui prosedur uji penetapan jarak lebur dan cemaran sejenis pada
senyawa-senyawa yang dianalisis
3. Untuk mengetahui contoh-contoh zat yang memiliki persyaratan uji jarak lebur
dan cemaran sejenis

2
 BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Parameter Uji

2.1.1 Jarak Lebur
Titik lebur suatu senyawa merupakan temperatur dimana zat padat berada
dalam kesetimbangan dengan bentuk cairnya. Zat padat akan berubah menjadi bentuk
cairnya ketika molekul dari zat padat tersebut mendapatkan energi yang cukup untuk
memecah ikatan intermolekulernya. Suhu lebur suatu zat tergantung pada struktur
molekulnya.
Sementara itu, jarak lebur didefinisikan sebagai rentang temperatur atau suhu
pada saat bentuk padat tersebut mulai melebur hingga keseluruhan sampel melebur
semua. Dalam Farmakope, jarak lebur atau suhu lebur zat padat didefinisikan sebagai
rentang suhu atau suhu pada saat zat padat menyatu dan melebur sempurna, kecuali
didefinisikan lain. Alat yang digunakan untuk penetapan titik lebur harus diperiksa
ketepatan dan kebenarannya secara berkala dengan satu atau lebih dari enam Baku
Pembanding Suhu Lebur BPFI, lebih baik digunakan satu baku yang melebur paling
dekat dengan suhu lebur senyawa yang ditetapkan seperti yang tertera pada Baku
Pembanding.
Manfaat penetapan titik lebur atau jarak lebur, yaitu :
1. Suhu lebur sebagai indikator kemurnian
Suatu zat dapat dikatakan murni bila memiliki titik lebur yang sama
dengan standar zat tersebut atau jarak lebur yang sempit (1-2oC atau kurang).
Sebaliknya apabila suatu zat memiliki suhu lebur yang berbeda atau jarak
lebur yang melebar terhadap standar, maka dapat dikatakan bahwa zat tersebut
tidak murni.
2. Suhu lebur sebagai alat untuk identifikasi dan karakterisasi
Untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi suatu senyawa, senyawa
tersebut harus dalam bentuk zat aktif murni dan dibandingkan dengan standar
yang memang telah terbukti kemurniannya. Apabila dua sampel memiliki

3
 suhu lebur yang berbeda, dapat dikatakan bahwa kedua molekul sampel
tersebut berbeda baik secara struktur atau bentuk konfigurasinya. Kedua
sampel tersebut dapat diperkirakan merupakan isomer struktur. Apabila suhu
lebur antara dua sampel sama, struktur molekul kedua zat tersebut
diperkirakan sama.
Contoh alat penetapan jarak lebur yang sesuai terdiri dari:
1. Wadah gelas untuk tangas cairan dilengkapi dengan pengaduk dan diisi cairan
yang cocok. Sebagai cairan umumnya digunakan silicon cair.
2. Alat pengaduk yang sesuai
3. Termometer yang akurat
4. Kaca pembesar yang cocok.
5. Pipa kapiler berukuran panjang lebih kurang 10 cm dan diameter dalam 0,8
mm sampai 1,2 mm dengan ketebalan dinding 0,2 mm sampai 0,3 mm.
6. Sumber panas yang terkendali
a. Panas didapat dari api bebas atau listrik.
b. Cairan dalam tangas dipilih dengan melihat suhu yang dikehendaki, tetapi
umumnya digunakan parafin cair dan silikon cair yang baik untuk rentang
suhu yang lebih tinggi.
c. Cairan dalam tangas mempunyai kedalaman yang cukup sehingga
thermometer dapat tercelup dengan pencadang raksa tetap berada lebih
kurang 2 cm diatas dasar tangas.

4
Gambar 2.1. Alat Pengukuran Jarak Lebur

Gambar 2.2. Alat Penentuan Jarak Lebur

5
 Gambar 2.3. Hasil Pengamatan Penentuan Jarak Lebur

2.3 Cemaran Senyawa Sejenis

2.3.1 Pengertian Cemaran Senyawa Sejenis
Pemahaman mengenai kemurnian berubah dari waktu ke waktu dan tidak dapat
dipisahkan dari perkembangan dalam kimia analisis. Jika sebuah senyawa yang dulunya
dikatakan murni namun kemudian ditemukan bahwa senyawa tersebut menghasilkan
senyawa baru, baik yang telah dikenali maupun tidak, senyawa tersebut dapat didefinisi
ulang sebagai cemaran.
Senyawa sejenis merupakan senyawa yang memiliki struktur kimia yang hampir
sama dengan senyawa obat. Senyawa ini merupakan cemaran atau produk samping, baik
yang diketahui senyawanya maupun tidak, yang dihasilkan selama proses sintesis atau
selama poroses penyimpanan senyawa obat.
Penentuan uji cemaran senyawa sejenis merupakan pengujian yang mengacu
pada uji umum untuk analisa pengotor berupa produk samping dari senyawa obat, baik
yang telah dikenali maupun yang belum, yang dihasilkan selama proses sintesis atau
penyimpanan. Baku pembanding cemaran perlu diadakan dalam pengujian cemaran
sejenis yang senyawa cemarannya masih belum dikenali.

6
2.2 Monografi Bahan Baku
2.2.1 Amitriptilin Hidroklorida

Gambar 2.4. Struktur Kimia Amitriptilin Hidroklorida

Nama kimia :10,11-Dihidro-N,N-dimetil-5H-dibenzosikloheptana-

propilamina hidroklorida
Rumus molekul : C20H23N.HCl
Berat molekul : 313,86
Persyaratan kadar : 98,0% - 102,0%
Pemerian :Serbuk hablur atau hablur kecil, putih atau hampir
putih; tidak berbau atau hampir tidak berbau
Kelarutan :Mudah larut dalam air, dalam etanol, dalam
klororform dan dalam metanol, tidak larut dalam eter
Baku pembanding : Amitriptilin hidroklorida BPFI, lakukan pengeringan
0
dengan tekanan tidak lebih 5 mmHg pada suhu 60
hingga bobot tetap sebelum digunakan. Simpan dalam
wadah tertutup rapat.
Identifikasi
a. Spektrum serapan inframerah zat yang telah dikeringkan dan didispersikan
dalam kalium bromida P, menunjukkan maksimum hanya pada bilangan
gelombang yang sama seperti pada Amitriptilin Hidroklorida BPFI.
b. Waktu retensi relatif puncak utama kromatogram Larutan Uji sesuai dengan
Larutan Baku seperti Penetapan Kadar.

7
 c. Menunjukkan reaksi Klorida cara A,B dan C seperti yang tertera pada Uji
Identifikasi Umum.
Jarak lebur : Antara 195oC dan 199oC
pH : Antara 5 dan 6
Susut pengeringan : Tidak lebih dari 0,5%; lakukan pengeringan dengan
tekanan tidak lebih dari 5 mmHg pada suhu 600C
hingga bobot tetap
Sisa pemijaran : Tidak lebih dari 0,1%
Logam berat : Tidak lebih dari 10 bpj (Metode III)
Penetapan Kadar
Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi
Asam fosfat encer Campuran asam fosfat P-air (1:10).
Dapar : Larutkan 1,42 g natrium fosfat dibasa P dalam 1000 ml air. Atur pH
hingga 7,7 dengan penambahan Asam fosfat encer.
Fase gerak : Buat campuran metanol P-Dapar (7:3). Saring dan awaudarakan.
Larutan baku : Timbang saksama sejumlah Amitriptilin Hidroklorida BPFI,
larutkan dalam Fase gerak hingga kadar lebih kurang 0,2 mg per ml.
Larutan uji persediaan : Timbang saksama sejumlah zat, larutkan dalam Fase
gerak hingga kadar lebih kurang 1 mg per ml.
Larutan uji : Encerkan Larutan uji persediaan dalam Fase gerak (1:5).
Larutan A persediaan : Timbang saksama sejumlah Senyawa Sejenis A
Amitriptilin BPFI, larutkan dengan metanol P hingga kadar lebih kurang 1 mg
per ml.
Larutan B persediaan : Timbang saksama masing-masing sejumlah
Amitriptilin Hidroklorida BPFI, Senyawa Sejenis B Amitriptilin BPFI,
Siklobenzaprin Hidroklorida BPFI, dan Nortriptilin Hidroklorida BPFI dan
larutkan dalam Fase gerak hingga kadar berturut-turut lebih kurang 0,4 mg
per ml; dan 0,6 mg per ml.

8
 Larutan kesesuaian sistem : Encerkan sejumlah volume Larutan A persediaan
dan Larutan B persediaan dengan Fase gerak hingga kadar amitriptilin
hidroklorida, senyawa sejenis A amitriptilin, senyawa sejenis B amitriptilin,
siklobenzaprin hidroklorida dan nortriptilin hidroklorida berturut-turut lebih
kurang 1g per ml; 0,5 g per ml; dan 1,5 g per ml.
Sistem kromatografi : KCKT dilengkapi dengan detektor 215 nm dan kolom
4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi L7 dengan ukuran partikel 5 m. Laju
alir 1,5 ml/menit. Suhu kolom pertahankan pada 45o. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak seperti yang tertera pada Prosedur: waktu retensi relatif senyawa
sejenis tertera pada Tabel dalam Senyawa sejenis; resolusi, R, antara puncak
senyawa sejenis B amitriptilin dengan puncak nortriptilin tidak kurang dari
1,5. Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram dan
ukur respons puncak seperti tertera pada Prosedur: simpangan baku relatif
pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%.
Prosedur : Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 20
l) Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, lakukan
kromatografi selama 40 menit, rekam kromatogram dan ukur respons puncak
utama. Hitung persentase amitriptilin hidroklorida, C20H23N.HCl, dalam zat
dengan rumus:
100

CS adalah kadar Amitriptilin Hidroklorida BPFI dalam mg per ml

Larutan baku; CU adalah kadar amitriptilin hidroklorida dalam mg
per ml Larutan uji; rU dan rS berturut-turut adalah respons puncak
Larutan uji dan Larutan baku.

9
2.2.2 Diazepam

Gambar 2.5. Struktur Kimia Diazepam

Nama kimia : 7-Kloro-1,3-dihidro-1-metil-5-fenil-2H-1

4-benzodiazepin-2-on
Rumus molekul : C16H13CIN20
Persyaratan kadar : Diazepam mengandung tidak kurang dari 98,5 % dan
tidak lebih dari 101,0% C16H13CIN20 dihitung
terhadap zat yang telah dikeringkan
Pemerian : Serbuk hablur, hampir putih sampai kuning; praktis
tidak berbau
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air; mudah larut dalam
kloroform; larut dalam etanol
Identifikasi
a. Spektrum serapan infra merah zat yang telah dikeringkan dan didispersikan
dalam kalium bromida P, menunjukkan maksimum hanya pada panjang
gelombang yang sama seperti pada diazepam BPFI
b. Larutan 5 mg zat per ml aseton P menunjukkan reaksi seperti yang tertera
pada Identifikasi secara Kromatografi lapis tipis <281>, dalam bejana
kromatografi yang tidak dijenuhkan dengan fase gerak etil asetat P-n-heptana
P(1:1)
Jarak lebur : <1021> metode 1 antara 131 dan 135

10
Susut pengeringan : <1121>Tidak lebih dari 0,5 %; lakukan pengeringan
dalam hampa udara diatas fosfor pentoksida P pada
suhu 60 selama 4 jam
Sisa pemijaran : <301> tidak lebih dari 0,1%
Logam berat : <371> metode III tidak lebih dari 20 bpj
Senyawa sejenis
Larutan uji : Timbang seksama 1,0 gr, masukkan kedalam labu tentukur 10
ml, larutkan dan encerkan dengan aseton P sampai tanda
Larutan baku (1) : Larutan 2- metil-amino-5-klorobenzofenon BPFI dalam
aseton P(1 dalam 100.000)
Larutan baku (2) : Larutan 3-Amino-6-kloro-1-metil-4-fenilkarbostiril BPFI
BPFI dalam aseton P(1 dalam 100.000)
Larutan baku (3) : Larutan 7-Kloro-1,3-dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazpin-
2-on BPFI dalam aseton P (3 dalam 10.000)
Prosedur : Lakukan seperti yang tertera pada kromatografi <931>. Totolkan
secara terpisah masing-masing 10 l larutan uji, larutan baku 1,2,3 pada jarak
yang sama, 2,5 cm dari tepi bawah lempeng kromatografi campuran silika gel
P 20 cm x 20 cm setebal 0,25 mm. Masukkan lempeng kedalam bejana
kromatografi yang berisi fase gerak etil setat P dan n-heptana P (1:1) hingga
merambat 15 cm diatas garis penotolan. Angkat lempeng, biarkan fase gerak
menguap, amati bercak dibawah sinar uv 254 nm dan semprot dengan larutan
campuran segar (1:1) larutan besi (III) klorida P (1 dalam 10) dan kalium
heksasianoferat (III) P (1 dalam 20). Tidak ada satupun bercak selian bercak
utama yang lebih besar ukuran atau intensitasnya dibandingkan dengan bercak
utama.
Larutan baku : Harga Rf semua bercak larutan uji sesuai dengan larutan baku
yang menunjukkan tidak lebih dari 0,01 % -metilamino-5-klorobenzofenon,
tidak lebih dari 0,1 % 3-amino-6-kloro-1-metil-4-fenilkarbostiril dan tidak
lebih dari 0,3 % 7-kloro-1,3-dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazepin-2-on

11
 Penetapan kadar : Timbang saksama 800 mg larutkan dalam 75 ml anhidrida
asetat P dalam labu erlenmeyer 250 ml. Titrasi dengan assm perklorat 0,1 N
LV secara potensiometri, dengan menggunakan elektroda kaca dan elektroda
kalomel yang berisi litium klorida P jenuh dalam asam asetat glasial P seperti
yang tertera pada titrimetri. Lakukan penetapan blanko
Wadah dan penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat, tidak tembus cahaya

2.2.3 Gemfibrosil

Gambar 2.6. Struktur Kimia Gemfibrosil

Nama kimia : Asam 2,2-Dimetil-5-(2,5-xililoksi)valerat

Rumus molekul : C15H22O3
Berat molekul : 250,33
Persyaratan kadar : 98,0% - 102,%
Baku pembanding : Gemfibrosil BPFI; lakukan pengeringan di atas silika
gel P selama 4 jam sebelum digunakan. Simpan dalam
wadah tertutup rapat. Senyawa Sejenis A Gemfibrosil
BPFI, [2,2-dimetil-5- [2,5-dimetil-4-(propen-1-
il)fenoksi] asam valerat] (C18H26O3 BM 290,40); tidak
boleh dikeringkan. Simpan dalam wadah tertutup rapat,
pada suhu ruang.

12
Pemerian : Hablur padat serupa lilin; putih.
Kelarutan : Larut dalam etanol, metanol dan kloroform; praktis
tidak larut dalam air.
Identifikasi : Spektrum serapan inframerah zat yang didispersikan
dalam kalium bromida P menunjukkan maksimum
hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti pada
Gemfibrosil BPFI.
Jarak lebur : Antara 58 dan 61.
Air : Metode I Tidak lebih dari 0,25%.
Logam berat :Tidak lebih dari 20 bpj (Metode III)
Senyawa sejenis : Senyawa sejenis A gemfibrosil tidak lebih dari 0,1%;
cemaran tidak spesifik tidak lebih dari 0,1% dan jumlah
semua cemaran tidak lebih dari 0,5%. Lakukan
penetapan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi
seperti tertera pada Kromatografi.

Metode
Fase gerak : Tambahkan 10 ml asam asetat glasial P ke dalam labu tentukur
1000-ml yang berisi 750 ml metanol P, encerkan dengan air sampai tanda dan
saring.
Larutan kesesuaian sistem : Timbang saksama sejumlah Gemfibrosil BPFI,
Senyawa Sejenis A Gemfibrosil BPFI dan 2,5-dimetilfenol, larutkan dan
encerkan dengan Fase gerak hingga kadar berturut-turut lebih kurang 0,2; 0,05
dan 0,05 mg per ml.
Larutan baku : Timbang saksama masing-masing 10 mg Gemfibrosil BPFI
dan Senyawa Sejenis A Gemfibrosil BPFI. Masukkan ke dalam labu tentukur
100-ml, larutkan dan encerkan dengan metanol P sampai tanda. Pipet 5 ml
masing-masing larutan ini ke dalam labu tentukur 50-ml dan encerkan dengan
Fase gerak sampai tanda.

13
 Larutan uji : Timbang saksama lebih kurang 100 mg zat, masukkan ke dalam
labu tentukur 10-ml, larutkan dan encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.

Prosedur Sistem kromatografi

Lakukan seperti tertera pada Kromatografi. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 276 nm dan kolom 4,0 mm x 25 cm berisi bahan
pengisi L1. Laju alir lebih kurang 1 ml per menit. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak seperti tertera pada Prosedur
Waktu retensi relatif untuk 2,5 dimetilfenol; gemfibrosil dan senyawa sejenis
A gemfibrosil berturut-turut adalah lebih kurang 0,35; 1,0 dan 2,1; simpangan
baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 3,0%.
Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 100 l)
Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram
untuk paling sedikit tiga kali waktu retensi gemfibrosil dan ukur respons
puncak.
Hitung persentase senyawa sejenis A gemfibrosil dalam zat yang digunakan
dengan rumus:

C adalah kadar Senyawa sejenis A Gemfibrosil BPFI dalam mg per

ml Larutan baku;
W adalah bobot zat dalam mg dari Larutan uji; ri dan
rS berturut-turut adalah respons puncak senyawa sejenis A
gemfibrozil Larutan uji dan Larutan baku. Hitung persentase
cemaran lain dalam zat yang digunakan dengan rumus:

14
 CS adalah kadar Gemfibrosil BPFI dalam mg per ml Larutan baku;
W adalah bobot zat dalam mg, dari Larutan uji;
ri adalah respons puncak masing-masing cemaran dari Larutan uji;
rS adalah respons puncak gemfibrosil dari Larutan baku.
Penetapan kadar : Lakukan dengan cara Kromatografi cair kinerja tinggi
seperti tertera pada Kromatografi.

Metode:
Fase gerak: Tambahkan 10 ml asam asetat glasial P pada 800 ml metanol P
dalam labu tentukur 1000-ml, encerkan dengan air sampai tanda, campur,
saring melalui penyaring membran.
Larutan baku: Timbang saksama sejumlah Gemfibrosil BPFI, larutkan dalam
metanol P hingga kadar lebih kurang 1 mg per ml. Pipet 5 ml larutan tersebut
ke dalam labu tentukur 25-ml, encerkan dengan Fase gerak sampai tanda.
Larutan uji: Timbang saksama lebih kurang 100 mg zat, masukkan ke dalam
labu tentukur 100-ml, larutkan dan encerkan dengan metanol P sampai tanda.
Pipet 5 ml larutan tersebut ke dalam labu tentukur 25-ml, encerkan dengan
Fase gerak sampai tanda.
Larutan kesesuaian sistem : Buat larutan lebih kurang 0,2 mg Gemfibrosil
BPFI dan 0,05 mg 2,5-xilenol per ml dalam Fase gerak.

Prosedur
Sistem kromatografi Lakukan seperti tertera pada Kromatografi .
Kromatograf cair kinerja tinggi dilengkapi dengan detektor 276 nm dan kolom
3,9 mm x 30 cm berisi bahan pengisi L1. Laju alir lebih kurang 0,8 ml per
menit.

15
 Lakukan kromatografi terhadap Larutan baku, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak seperti tertera pada
Simpangan baku relative pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 2,0%.
Lakukan kromatografi terhadap lebih kurang 10 l Larutan kesesuaian sistem:
resolusi, R, antara gemfibrosil dan 2,5-xilenol tidak kurang dari 8,0.
Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 10 l) Larutan
baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram dan ukur
respons puncak utama.
Hitung jumlah dalam mg gemfibrosil, C15H22O3, dengan rumus:

C adalah kadar Gemfibrosil BPFI dalam g per ml Larutan baku;

rU dan rS berturut-turut adalah respons puncak Larutan uji dan
Larutan baku.
Wadah dan penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat.

2.2.4 Ketoprofen (Farmakope Indonesia Edisi V)

Gambar 2.7 Struktur kimia Ketoprofen

Nama kimia :Asam 2-(3-benzoifenil)propionat

Rumus molekul : C16H14O3
Berat molekul : 254,3

16
Pemerian : Serbuk hablur; putih atau hampir putih; tidak atau
hampir tidak berbau
Kelarutan : Mudah larut dalam etanol, kloroform dan eter; praktis
tidak larut dalam air
Identifikasi :
a. Spektrum serapan inframerah zat yang didispersikan dalam kalium bromida P,
menunjukkan maksimum hanya pada bilangan gelombang yang sama seperti
Ketoprofen BPFI.
b. Serapan larutan zat (1 dalam 100.000) dalam metanol P-air (3:1)
menunjukkan maksimum hanya pada panjang gelombang 258 nm. Berbeda
tidak lebih dari 3%, dihitung terhadap zat yang sudah dikeringkan
Jarak lebur : Antara 92,0C - 97,0C.
Susut pengeringan : Tidak lebih dari 0,5%; lakukan pengeringan pada
tekanan tidak lebih dari 5,2 mm Hg, pada suhu 60
hingga bobot tetap, menggunakan 1 g zat.
Sisa pemijaran : Tidak lebih dari 0,2%
Rotasi jenis : Antara +1 dan -1, lakukan penetapan menggunakan 10
mg zat per ml dalam etanol dehidrat P.
Logam berat : Tidak lebih dari 20 bpj.
Senyawa sejenis : Lakukan penetapan dengan cara Kromatografi cair
kinerja tinggi, masing-masing cemaran tidak lebih dari
0,2% dan total cemaran tidak lebih dari 1,0%.
Penetapan kadar : Menggunakan Kromatografi cair kinerja tinggi.
Ketoprofen mengandung tidak kurang dari 98,5% dan
tidak lebih dari 101,0% C16H14O3, dihitung terhadap zat
yang telah dikeringkan.

17
 BAB 3
METODOLOGI

3.1 Jarak Lebur

Berdasarkan Farmakope Indonesia V, jika tidak disebutkan lain maka metode
yang digunakan adalah metode III.

3.1.1 Alat dan Bahan

a. Alat:
Wadah gelas untuk tangas cairan transparan.
Alat pengaduk.
Termometer.
Sumber panas.
Pipa kapiler berukuran panjang 10 cm dan diameter dalam 0,8 1,2
mm dengan ketebalan dinding 0,2 0,3 mm.

b. Bahan :
Bahan uji
Parafin cair/silikon cair

3.1.2 Cara Kerja

1. Gerus senyawa uji menjadi serbuk sangat halus. Keringkan di atas bahan
pengering selama tidak kurang dari 16 jam.
2. Isi pipa kapiler kaca yang salah satu ujungnya tertutup dengan serbuk kering
secukupnya hingga membentuk kolom di dasar tabung dengan tinggi 2,5 mm
hingga 3,5 mm setelah diisi semampat mungkin.
3. Panaskan tangas hingga suhu lebih kurang 10o C dibawah suhu lebur yang
diperkirakan, naikkan suhu dengan kecepatan 1o0,5o per menit.
4. Masukkan kapiler, lanjutkan pemanasan hingga melebur sempurna.

18
 5. Catat jarak lebur. Suhu pada saat kolom zat uji yang diamati terlepas sempurna
dari dinding kapiler didefinisikan sebagai permulaan melebur, dan suhu pada
saat zat uji mencair seluruhnya didefinisikan sebagai akhir peleburan.

3.1.3 Metode Penentuan Jarak Lebur Lainnya

a. Metode I
Gerus senyawa yang diuji menjadi serbuk yang sangat halus dan
kecuali dinyatakan lain. Jika mengandung air hidrat, keringkan pada suhu
yang tertera dimonografi, jika tidak mengandung air hidrat keringkan diatas
bahan pengering yang sesuai. Caranya : isi pipa kapiler kaca yang salah satu
ujungnya tertutup, dengan serbuk kering hingga 2,5 mm 3,5 mm setelah
diisi kemudian mengetukan pada permukaan padat. Panaskan tangas hingga
suhu 30 dibawah suhu lebur yang diperkirakan. Angkat termometer dan
secepatnya tempelkan tabung kapiler pada thermometer dengan membasahi
keduanya dengan tetesan cair dari tangas atau sebaliknya. Tempatkan
termometer dan lanjutkan pemanasan dengan pengadukan tetap hingga suhu
naik 3/ menit jika suhu 3 dibawah dari batas bawah jarak lebur yang
diperkirakan, kurangi pemanasan hingga naik 1 - 2/ menit. Suhu pada saat
kolom uji yang diamati terlepas sempurna dari dinding kapiler didefinisikan
sebagai permukaan melebur, dan suhu pada saat zat uji mencair seluruhnya
didefinisikan suhu lebur. Kedua suhu tersebut berada dalam batas jarak lebur.
b. Metode II
Letakan zat uji pada wadah tertutup, dinginkan hingga 10 atau lebih
rendah selama tidak kurang dari 2 jam. Tanpa diserbuk sebelumnya, sisihkan
bahan yang sudah dingin kedalam pipa kapiler seperti metode I. Kemudian
segera letakaan kapiler yang telah diisi kedalam desikator hampa, keringkan
pada tekanan tidak lebih dari 20 mmHg selama 3 jam. Segera keluarkan dari
desikator, lebur tutup ujung terbuka kapiler, dan sesegera mungkin lanjutkan
penetapan jarak sebagai berikut : panaskan tangas hingga suhu 10 1
dibawah rentang lebur yang diperkirakan. Kemudian masukkan kapiler yang

19
 berisi zat uji dan panaskan dengan kenaikan suhu 3 0,5/ menit hingga
melebur sempurna. Catat jarak lebur seperti yang tertera pada metode I. Jika
ukuran partikel terlalu besar untuk kapiler dinginkan lebih dulu zat uji seprti
diatas, gerus partikel dengan hati-hati denga tekanan rendah hingga sesuai
dengan kapiler dan segera isikan kedalam kapiler.
c. Metode IV
Lebur hati-hati senyawa yang akan ditetapkan pada suhu serendah
mungkin, masukkan kedalam pipa kapiler yang kedua ujungnya terbuka,
hingga ke dalam 10 mm. Dinginkan kapiler yang telah terisi zat uji pada suhu
10/ lebih rendah selama 24 jam, atau tempelkan pada es selama tidak kurang
dari 2 jam. Kemudian tempelkan tabung pada thermometer dengan cara yang
sesuai, atur dalam panas air sehingga ujung atas dari zat uji 10 mm dibawah
permukan air dan panaskan seperti metode I, kecuali sampai 5 dari suhu lebur
yang diperkirakan, atur suhu 0,5 - 1,0/ menit. Suhu pada saat senyawa
diamati dalam pipa kapiler menaik dalam suhu lebur.
d. Metode V
Lebur perlahan zat uji, sambil diaduk sehingga suhu 90 - 92.
Pindahkan sumber panas dan biarkan leburan senyawa mendingin sehingga
8- 10 diatas suhu lebur yang diperkirakan. Dinginkan pencadang raksa
hingga suhu 5, bersihkan hingga kering, dan suatu masih dingin celupkan
leburan senyawa hingga lebih kurang separuh bagian bawah pencadang
terendam. Ambil secepatnya, dan tahan secara vertikal dari panas hingga
permukaan menjadi buram, kemudian celupkan selama 5 menit kedalam
tangas air pada suhu tidak lebih 16. Letakkan erat termometer dalam tabung
reakasi sehingga ujung terendam 15 mm diatas dasar tabung reaksi. Celupkan
tabung reaksi dalam tangas air yang telah diatur pada suhu 16 dan naikan
suhu tangas 2/ menit hingga suhu 30, kemudia turunkan suhu 1/ menit dan
catat suhu pada saat tetesan senyawa pertama meleleh lepas dari senyawa
yang dilelehkan. Jika variasi 3 kali penetapan kurang dari 1 gunakkan hasil
rata-rata ketiga penetapan tersebut sebagai suhu lebur. Jika variasi 3 kali

20
 penetapan lebih besar 1, lakukan 2 penetapan tambahan dan gunakan hasil rata-
rata dari 5 penetapan sebagai suhu lebur.
e. Metode VI
Siapkan alat dan bahan dan masukkan zat uji ke dalam pipa kapiler seperti
pada metode I. Operasikan alat sesuai petunjuk pabrik. Panaskanpotongan logam
sampai suhu dibawah 30o dari yang diperkirakan. Masukkan pipa kapiler dan
lanjutkan pemanasan dengan kenaikan suhu1o 2o per menit hingga melebur
sempurna.

3.2 Uji Cemaran Sejenis

Beberapa pengujian cemaran senyawa sejenis dapat dilakukan dengan
menggunakan metode:
1. Kromatografi Gas, merupakan pemisahan atau deteksi senyawa yang mudah menguap
dalam suatu campuran. Pemisahan dapat dilakukan secara isothermal (suhu tetap) dan
dengan suhu yang terprogram (gradient suhu).
2. Kromatografi Lapis Tipis, merupakan pemisahan berdasarkan daya elusi fase gerak
terhadap sampel.
3. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, merupakan pemisahan berdasarkan perbedaan
distribusi komponen at terhadap fase gerak dan fase diam. Pengujian uji cemaran
sejenis ini dimaksudkan untuk menghindari adanya senyawa-senyawa cemaran yang
berpotensi toksik yang berbahaya jika dikonsumsi dan untuk mengetahui ada tidaknya
pengaruh senyawa-senyawa cemaran tersebut terhadap aktivitas senyawa obat.

3.3 Amitriptilin Hidroklorida

3.3.1 Jarak Lebur
a. Alat
Alat pada penetapan jarak lebur yang sesuai terdiri dari wadah gelas untuk
tangas cairan transparan, alat pengaduk yang sesuai, termometer yang akurat dan
sumber panas yang terkendali. Cairan dalam tangas dipilih dengan melihat suhu
yang dikehendaki, tetapi umumnya digunakan paraffin cair dan silikon cair yang
baik untuk rentang suhu yang lebih tinggi. Cairan dalam tangas mempunyai

21
 kedalaman yang cukup sehingga termometer dapat tercelup dengan pencadang
raksa tetap berada lebih kurang 2 cm di atas dasar tangas. Panas di dapat dari api
bebas atau listrik. Pipa kapiler berukuran panjang lebih kurang 10 cm dan diameter
dalam 0,8 mm sampai 1,2 mm dengan ketebalan dinding 0,2 mm sampai 0,3 mm.
b. Bahan
Amitriptilin Hidroklorida, Amitriptilin Hidroklorida BPFI.
c. Metode
Jika tidak dinyatakan lain di dalam monografi maka jarak lebur Amitriptilin
Hidroklorida menggunakan Metode III.

Metode III :
1. Gerus Amitriptilin Hidroklorida menjadi serbuk sangat halus
2. Masukkan serbuk Amitriptilin Hidroklorida yang telah halus ke dalam pipa
kapiler kaca yang salah satu ujungnya tertutup hingga membentuk kolom
didasar tabung dengan tinggi 2,5 mm hingga 3,5 mm setelah diisi semampat
mungkin dengan cara mengetukkan secukupnya pada permukaan padat.
3. Panaskan tangas hingga suhu 10 oC dibawah suhu lebur yang diperkirakan
(1950C). Naikkan suhu dengan kecepatan 1o 0,5o per menit.
4. Masukkan kapiler, angkat termometer dan secepatnya tempelkan tabung
kapiler pada termometer hingga tinggi bahan dalam kapiler setinggi
pencadang raksa. Tempatkan kembali termometer dan lanjutkan pemanasan
dengan pengadukan tetap secukupnya.
5. Bila suhu mencapai 5oC dibawah suhu terendah yang diperkirakan, lanjutkan
pemanasan hingga melebur sempurna.
6. Catat jarak lebur.

22
3.3.2 Uji Cemaran Senyawa Sejenis
Tabel 3.1 Masing masing cemaran dan jumlah semua cemaran tidak lebih
dari batas yang ditentukan
Cemaran Waktu Retensi Relatif Batas (%)
Senyawa sejenis A 0,35 0,05
Amitriptilin
Senyawa Sejenis 0,52 0,15
B Amitriptilin
Nortriptilin 0,60 0,15
Hidroklorida
Siklobenzaprin 0,76 0,15
Hidroklorida
Amitriptilin 1,0 -
Hidroklorida
Cemaran lain - Masing-masing 0,1
Jumlah semua cemaran - 1,0

Lakukan penetapan dengan cara KCKT. Asam fosfat encer, Dapar, Fase
gerak, Larutan kesesuaian sistem, Larutan baku dan Sistem kromatografi
Lakukan seperti tertera pada Penetapan Kadar.
Larutan uji : Gunakan Larutan uji persediaan seperti tertera pada Penetapan
kadar.
Prosedur : Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama lebih kurang 20
l Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam
kromatogramdan ukur respons puncak utama. Hitung persentase masing-
masing senyawa sejenis amitriptilin dalam zat yang digunakan dengan rumus:

100
ri adalah respons puncak masing-masing senyawa sejenis amitriptilin
dari Larutan uji; rS adalah respons puncak senyawa sejenis amitriptilin
dari Larutan baku; CS adalah kadar masing-masing senyawa sejenis
amitriptilin dalam mg per ml Larutan baku; CU adalah kadar
amitriptilin hidroklorida dalam mg per ml Larutan uji.

23
3.4 Diazepam (Farmakope Indonesia IV)
3.4.1 Penentuan Jarak Lebur
a. Alat
Alat pada penetapan jarak lebur yang sesuai terdiri dari wadah gelas untuk
tangas cairan transparan, alat pengaduk yang sesuai, termometer yang akurat dan
sumber panas yang terkendali. Cairan dalam tangas dipilih dengan melihat suhu
yang dikehendaki, tetapi umumnya digunakan paraffin cair dan silikon cair yang
baik untuk rentang suhu yang lebih tinggi. Cairan dalam tangas mempunyai
kedalaman yang cukup sehingga termometer dapat tercelup dengan pencadang
raksa tetap berada lebih kurang 2 cm di atas dasar tangas. Panas di dapat dari api
bebas atau listrik. Pipa kapiler berukuran panjang lebih kurang 10 cm dan diameter
dalam 0,8 mm sampai 1,2 mm dengan ketebalan dinding 0,2 mm sampai 0,3 mm.
b. Bahan
Diazepam, Diazepam BPFI.
c. Metode
Jarak Lebur diazepam berada diantara 131 dan 135 dengan menggunakan
Metode I.

Metode I :
1. Gerus diazepam menjadi serbuk sangat halus
2. Masukkan serbuk diazepam yang telah halus ke dalam pipa kapiler kaca yang
salah satu ujungnya tertutup hingga membentuk kolom didasar tabung dengan
tinggi 2,5 mm hingga 3,5 mm setelah diisi semampat mungkin dengan cara
mengetukkan secukupnya pada permukaan padat.
3. Panaskan tangas hingga suhu 30 oC dibawah suhu lebur yang diperkirakan
(1480C).
4. Masukkan kapiler, angkat termometer dan secepatnya tempelkan tabung
kapiler pada termometer dengan membasahi keduanya dengan tetesan cairan
dari tangas atau sebaliknya dan atur hingga tinggi bahan dalam kapiler
setinggi pencadang raksa. Tempatkan kembali termometer dan lanjutkan
pemanasan dengan pengadukan tetap secukupnya hingga menyebabkan suhu

24
 naik 3 o permenit. Pada saat suhu 3 o dibawah dari batas bawah jarak lebur
o o
yang diperkirakan, kurangi pemanasan sehingga suhu naik 1 hingga 2
per menit
5. Lanjutkan pemanasan hingga melebur sempurna
6. Suhu pada saat kolom zat uji yang diamati terlepas sempurna dari dinding
kapiler didefinisikan sebagai permulaan melebur dan suhu pada saat zat uji
mencair seluruhnya didefinisikan sebagai akhir pelebutan ataua suhu lebur.
Kedua suhu tersebut berada dalam batas jarak lebur.

3.4.2 Uji Senyawa Sejenis Diazepam

Metode : Kromatografi Lapis Tipis
Persyaratan : Harga Rf semua bercak larutan uji sesuai dengan larutan baku
yang menunjukkan tidak lebih dari 0,01 % 2-metilamino-5-
klorobenzofenon, tidak lebih dari 0,1 % 3-amino-6-kloro-1-
metil-4-fenilkarbostiril dan tidak lebih dari 0,3 % 7-kloro-1,3-
dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazepin-2-on
Bahan : diazepam, larutan baku 1,2,3
Larutan uji :Timbang seksama 1,0 gr, masukkan kedalam labu tentukur 10
ml, larutkan dan encerkan dengan aseton P sampai tanda.
Larutan baku (1) :Larutan 2- metil-amino-5-klorobenzofenon BPFI dalam aseton
P(1 dalam 100.000).
Larutan baku (2) :Larutan 3-Amino-6-kloro-1-metil-4-fenilkarbostiril BPFI BPFI
dalam aseton P(1 dalam 100.000).
Larutan baku (3) :Larutan 7-Kloro-1,3-dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazpin-2-on
BPFI dalam aseton P (3 dalam 10.000).
Prosedur :
1. Lakukan seperti yang tertera pada kromatografi <931>.
2. Totolkan secara terpisah masing-masing 10 l larutan uji, larutan baku 1,2,3
pada jarak yang sama, 2,5 cm dari tepi bawah lempeng kromatografi
campuran silika gel P 20 cm x 20 cm setebal 0,25 mm.

25
 3. Masukkan lempeng kedalam bejana kromatografi yang berisi fase gerak etil
setat P dan n-heptana P (1:1) hingga merambat 15 cm diatas garis penotolan.
4. Angkat lempeng, biarkan fase gerak menguap, amati bercak dibawah sinar uv
254 nm dan semprot dengan larutan campuran segar (1:1) larutan besi (III)
klorida P (1 dalam 10) dan kalium heksasianoferat (III) P (1 dalam 20). Tidak
ada satupun bercak selain bercak utama yang lebih besar ukuran atau
intensitasnya dibandingkan dengan bercak utama. Harga Rf semua bercak
larutan uji sesuai dengan larutan baku yang menunjukkan tidak lebih dari 0,01
% 2-metilamino-5-klorobenzofenon, tidak lebih dari 0,1 % 3-amino-6-kloro-
1-metil-4-fenilkarbostiril dan tidak lebih dari 0,3 % 7-kloro-1,3-dihidro-5-
fenil-2H-1,4-benzodiazepin-2-on

3.5 Gemfibrozil (Farmakope Indonesia IV)

3.5.1 Penentuan Jarak Lebur
a. Alat
Alat pada penetapan jarak lebur yang sesuai terdiri dari wadah gelas untuk
tangas cairan transparan, alat pengaduk yang sesuai, termometer yang akurat dan
sumber panas yang terkendali. Cairan dalam tangas dipilih dengan melihat suhu
yang dikehendaki, tetapi umumnya digunakan paraffin cair dan silikon cair yang
baik untuk rentang suhu yang lebih tinggi. Cairan dalam tangas mempunyai
kedalaman yang cukup sehingga termometer dapat tercelup dengan pencadang
raksa tetap berada lebih kurang 2 cm di atas dasar tangas. Panas di dapat dari api
bebas atau listrik. Pipa kapiler berukuran panjang lebih kurang 10 cm dan diameter
dalam 0,8 mm sampai 1,2 mm dengan ketebalan dinding 0,2 mm sampai 0,3 mm.
b. Bahan
Gemfibrosil BPFI; lakukan pengeringan di atas silika gel P selama 4 jam
sebelum digunakan.
c. Metode
Jarak lebur Gemfibrozil antara 580 dan 610 . Jika tidak dinyatakan lain di
dalam monografi sehingga jarak lebur Gemfibrozil menggunakan Metode III.

26
 Metode III :
1. Gerus Gemfibrozil menjadi serbuk sangat halus
2. Masukkan serbuk Gemfibrozil yang telah halus ke dalam pipa kapiler kaca
yang salah satu ujungnya tertutup hingga membentuk kolom didasar tabung
dengan tinggi 2,5 mm hingga 3,5 mm setelah diisi semampat mungkin dengan
cara mengetukkan secukupnya pada permukaan padat.
3. Panaskan tangas hingga suhu 10 oC dibawah suhu lebur yang diperkirakan
(580C). Naikkan suhu dengan kecepatan 1o 0,5o per menit.
4. Masukkan kapiler, angkat termometer dan secepatnya tempelkan tabung
kapiler pada termometer dan atur hingga tinggi bahan dalam kapiler setinggi
pencadang raksa. Tempatkan kembali termometer dan lanjutkan pemanasan
dengan pengadukan tetap secukupnya.
5. Bila suhu mencapai 5oC dibawah suhu terendah yang diperkirakan, lanjutkan
pemanasan hingga melebur sempurna.
6. Catat jarak lebur

3.5.2 Uji Cemaran Sejenis

Alat : Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Bahan : Gemfibrosil BPFI, asam asetat glasial P, methanol P, 2,5
dimetilfenol
Metode :
Fase gerak : Tambahkan 10 ml asam asetat glasial P ke dalam labu tentukur
1000-ml yang berisi 750 ml metanol P, encerkan dengan air sampai tanda dan
saring.
Larutan kesesuaian system : Timbang saksama sejumlah Gemfibrosil BPFI,
Senyawa Sejenis A Gemfibrosil BPFI dan 2,5-dimetilfenol, larutkan dan
encerkan dengan Fase gerak hingga kadar berturut-turut lebih kurang 0,2; 0,05
dan 0,05 mg per ml.
Larutan baku : Timbang saksama masing-masing 10 mg Gemfibrosil BPFI
dan Senyawa Sejenis A Gemfibrosil BPFI. Masukkan ke dalam labu tentukur

27
 100-ml, larutkan dan encerkan dengan metanol P sampai tanda. Pipet 5 ml
masing-masing larutan ini ke dalam labu tentukur 50-ml dan encerkan dengan
Fase gerak sampai tanda.
Larutan uji : Timbang saksama lebih kurang 100 mg zat, masukkan ke
dalam labu tentukur 10-ml, larutkan dan encerkan dengan Fase gerak sampai
tanda.
Prosedur
Sistem kromatografi
Lakukan seperti tertera pada Kromatografi. Kromatograf cair kinerja tinggi
dilengkapi dengan detektor 276 nm dan kolom 4,0 mm x 25 cm berisi bahan
pengisi L1. Laju alir lebih kurang 1 ml per menit. Lakukan kromatografi
terhadap Larutan kesesuaian sistem, rekam kromatogram dan ukur respons
puncak seperti tertera pada Prosedur
Waktu retensi relatif untuk 2,5 dimetilfenol; gemfibrosil dan senyawa sejenis
A gemfibrosil berturut-turut adalah lebih kurang 0,35; 1,0 dan 2,1; simpangan
baku relatif pada penyuntikan ulang tidak lebih dari 3,0%.
Suntikkan secara terpisah sejumlah volume sama (lebih kurang 100 l)
Larutan baku dan Larutan uji ke dalam kromatograf, rekam kromatogram
untuk paling sedikit tiga kali waktu retensi gemfibrosil dan ukur respons
puncak.
Hitung persentase senyawa sejenis A gemfibrosil dalam zat yang digunakan
dengan rumus:

C adalah kadar Senyawa sejenis A Gemfibrosil BPFI dalam mg per

ml Larutan baku;
W adalah bobot zat dalam mg dari Larutan uji; ri dan

28
 rS berturut-turut adalah respons puncak senyawa sejenis A
gemfibrozil Larutan uji dan Larutan baku.
-Hitung persentase cemaran lain dalam zat yang digunakan dengan
rumus:

CS adalah kadar Gemfibrosil BPFI dalam mg per ml Larutan baku;

W adalah bobot zat dalam mg, dari Larutan uji;
ri adalah respons puncak masing-masing cemaran dari Larutan uji;
rS adalah respons puncak gemfibrosil dari Larutan baku

3.6 Ketoprofen
3.6.1 Penentuan Jarak Lebur
Berdasarkan Farmakope Indonesia Edisi V, penentuan jarak lebur untuk
Ketoprofen menggunakan Metode I.
a. Alat :
Wadah gelas untuk tangas cairan transparan
Alat pengaduk
Termometer
Sumber panas
Pipa kapiler berukuran panjang 10 cm dan diameter dalam 0,8 1,2 mm
dengan ketebalan dinding 0,2 0,3 mm.
b. Bahan :
Bahan uji

c. Prosedur kerja
1. Gerus senyawa yang diuji menjadi serbuk yang sangat halus, dan kecuali
dinyatakan lain, jika mengandung air hidrat ubah menjadi anhidrat dengan

29
 pengeringan pada suhu yang tertera pada monografi, atau, jika senyawa tidak
mengandung air hidrat, keringkan diatas bahan pengering yang sesuai selama
tidak kurang dari 16 jam.
2. Isi pipa kapiler kaca yang salah satu ujungnya tertutup, dengan serbuk kering
secukupnya hingga membentuk kolom di dasar tabung dengan tinggi 2,5 3,5
mm setelah diisi semampat mungkin dengan cara mengetukkan secukupnya
pada permukaan padat.
3. Panaskan tangas hingga suhu 30C dibawah suhu lebur yang diperkirakan
4. Angkat termometer dan secepatnya tempelkan tabung kapiler pada
termometer dengan membasahi keduanya dengan tetesan cair dari tangas atau
sebaliknya
5. Tempatkan termometer dan lanjutkan pemanasan dengan pengadukan tetap
hingga suhu naik 3C/menit jika suhu 3C dibawah dari batas bawah jarak
lebur yang diperkirakan, kurangi pemanasan hingga naik 1C-2C/menit.
6. Suhu pada saat kolom uji yang diamati terlepas sempurna dari dinding kapiler
didefinisikan sebagai permukaan melebur, dan suhu pada saat zat uji mencair
seluruhnya didefinisikan sebagai suhu lebur. Kedua suhu tersebut berada
dalam batas jarak lebur.

3.6.2 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Ketoprofen

Metode : Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Persyaratan : Masing-masing cemaran tidak lebih dari 0,2% dan total
cemaran tidak lebih dari 1,0%.
Bahan :
Fase gerak
Buat campuran larutan amonium asetat P 1%-metanol P-aetonitril P
(55:30:15), atur pH hingga 6,5 dengan penambahan asam asetat glasial P,
awaudarakan. (Buat semua larutan segar)
Larutan baku

30
 Timbang saksama sejumlah 3-Asetil-benzofenon BPFI, larutkan dalam Fase
grak hingga diperoleh kadar 0,0025%.
Larutan uji
Timbang saksama sejumlah zat, larutkan dalam Fase gerak hingga diperoleh
kadar 0,50%.
Enceran larutan uji
Encerkan sejumlah volume Larutan uji dengan Fase gerak hingga diperoleh
kadar 0,0010%
Sistem kromatografi :
Detektor : 233 nm
Kolom : 4,6 mm x 20 cm berisi bahan pengisi L1
Laju alir : 1,0 ml/menit

Prosedur :
1. Suntikkan secara terpisah sejumlah Larutan baku, Larutan uji dan Enceran
larutan uji ke dalam kromatografi, rekam kromatogram dan ukur luas puncak.
2. Lanjutkan kromatografi selama lima kali waktu retensi ketoprofen.
3. Puncak Larutan uji sesuai dengan puncak Larutan baku luasnya tidak lebih
besar dari luas puncak Enceran larutan uji, luas dari puncak sekunder lain
tidak lebih besar dari dua setengah kali luas puncak Enceran larutan uji dan
tidak lebih dari tiga puncak semacam ini mempunyai luas lebih besar dari luas
puncak Enceran larutan uji. Lanjutkan kromatografi selama lima kali waktu
retensi ketoprofen.

31
 BAB 4
PEMBAHASAN

4.1 Penentuan Jarak Lebur

Jarak lebur atau suhu didefinisikan sebagai rentang suhu atau suhu pada saat
zat padat menyatu atau melebur sempurna. Panas yang diabsorbsi ketika satu gram
padatan melebur dikenal sebagai panas peleburan. Panas tambahan selama proses
peleburan tidak memberikan perubahan temperatur, sampai seluruh padatan hilang,
karena panas ini dirubah menjadi energi molekuler yang potensial untuk mengubah
seluruh padatan menjadi cairan. Suhu lebur juga didefinisikan sebagai suhu dimana
cairan murni dan padatan berada dalam kesetimbangan. Dengan kata lain, suhu
kesetimbangan pada tekanan luar 1 atm disebut sebagai titik beku atau titik lebur
normal.
Perubahan titik lebur terhadap tekanan dapat diperoleh dengan menggunakan
persamaan Clapeyron, yaitu :
T Vt Vs
T
P Hf
Dimana Vt dan Vs adalah volume molar cairan dan padatan, Hf adalah panas
peleburan molar, T adalah perubahan suhu lebur yang terjadi karena perubahan
tekanan P. titik lebur sebenarnya tidak mengalami perubahan yang signifikan
dengan adanya perubahan tekanan. Contohnya pada air, kenaikan tekanan 1 atm
menurunkan titik beku air sekitar 0,0075oK, atau kenaikan atm sebesar 133 atm akan
menurunkan titik beku 1o.
Hal-hal yang mempengaruhi jarak lebur suatu senyawa adalah berat molekul
dan struktur simetris molekul, serta kuatnya ikatan antar unsur dalam senyawa
tersebut. Semakin kuat ikatan tersebut, semakin besar energi yang dibutuhkan untuk
memutuskan ikatan, sehingga semakin tinggi pula titik lebur senyawa tersebut. Titik
lebur hidrokarbon jenuh akan naik dengan naiknya berat molekul, karena gaya Van
Der Waals diantara molekul-molekul kristal menjadi lebih besar dengan

32
bertambahnya jumlah atom karbon. Titik lebur alkana dengan jumlah atom karbon
genap lebih tinggi daripada hidrokarbon dengan jumlah atom karbon yang ganjil.
Panas peleburan dapat dianggap sebagai panas yang dibutuhkan untuk menaikkan
jarak antar atom sehingga memungkinkan terjadinya peleburan.
Dengan mengetahui titik lebur atau suhu lebur suatu senyawa, maka dapat
diketahui kemurnian senyawa tersebut. Senyawa kristal organik nonionik yang murni
akan memiliki jarak lebur yang lebih tajam atau sempit (biasanya 0,5o-1o). Adanya
sejumlah kecil cemaran akan menurunkan titik lebur dan perluasan jarak lebur,
misalnya 146o-149o. Melalui jarak lebur, identifikasi dan karakteristik suatu senyawa
juga dapat diketahui. Apabila dua sampel memiliki jarak lebur yang berbeda maka
kedua molekul tersebut berbeda baik secara struktur atau bentuk konfigurasinya.
Kedua senyawa tersebut dapat diperkirakan adalah isomer struktur. Apabila kedua
sampel memiliki jarak lebur yang sama, maka dapat diperkirakan kedua sampel
tersebut memiliki struktur yang sama.
Menurut Farmakope Indonesia, penetapan jarak lebur suatu senyawa, jika
tidak dinyatakan dalam monografi, metode yang digunakan adalah Metode III. Pada
pelaksanaannya, persiapan sampel yang tidak sempurna adalah penyebab utama hasil
yang tidak akurat. Persyaratan utama agar mendapatkan hasil yang baik yaitu sampel
harus berupa serbuk yang sangat halus. Hal tersebut akan menyebabkan transfer
panas ke sampel menjadi lebih efisien. Sampel yang memiliki bentuk kristal harus
digerus menggunakan mortir hingga menjadi serbuk yang sangat halus dan homogen.
Apabila sampel dalam ukuran besar diuji jarak leburnya, maka transfer panas ke
sampel menjadi tidak merata sehingga hasil yang didapatkan menjadi tidak akurat.
Jumlah sampel yang digunakan pada pengujian jarak lebur haruslah tepat. Jumlah
sampel yang terlalu banyak akan menyebabkan jarak lebur menjadi lebuh besar
karena dibutuhkan panas ekstra agar sampel tersebut mencair secara keseluruhan. Hal
tersebut menyebabkan hasil yang didapat menjadi tidak akurat.

Pembahasan Prosedur
Pipa kapiler yang digunakan adalah pipa kapiler yang berdinding tipis (0,2
mm - 0,3 mm) dan salah satu ujungnya harus ditutup agar dapat diisi. Untuk dapat

33
menutup salah satu ujungnya dapat dilakukan dengan membakar salah satu ujungnya
pada pembakar bunsen sambil memutar-mutar pipa kapiler hingga ujungnya tertutup
sempurna. Kemudian, untuk memasukkan serbuk sampel ke dalam pipa kapiler
dilakukan dengan menekan perlahan ujung pipa yang terbuka ke sampel dari arah atas
lalu dipadatkan dengan cara mengetukkan pipa perlahan ke permukaan padat. jika
sampel belum memenuhi pipa kapiler hingga 2,5 - 3mm, sisa sampel dimasukkan
dengan menggunakan koin dengan tepi bergerigi atau cara lain yang lebih efektif.

Gambar 4.1 Pipa kapiler yg telah terisi dan termometer

Gambar 4.2 Memasukkan sampel dengan koin

Farmakope Indonesia mencantumkan alat yang digunakan untuk penetapan

jarak lebur terdiri dari wadah gelas untuk tangas cairan transparan, alat pengaduk

34
yang sesuai, termometer yang akurat dan sumber panas yang terkendali. Seperangkat
alat tersebut lebih dikenal dengan istilah Mel-Temp. Mel-Temp dilengkapi dengan
lensa untuk melihat sampel yang berada pada pipa kapiler agar dapat memastikan
sampel mulai melebur dan seluruh sampel melebur sempurna. Jarak dari mata ke
lensa adalah 15 cm.

Gambar 4.3 Perangkat Mel-Temp

4.2 Pembahasan Hasil

4.2.1 Penentuan Jarak Lebur Amitriptilin Hidroklorida
Amitriptilin Hidroklorida, BM: 313,87 jarak lebur : 195o-199o. Jarak lebur zat
adalah jarak antara suhu awal dan suhu akhir peleburan zat. Suhu awal dicatat pada
saat zat mulai menciut atau membentuk tetesan pada dinding pipa kapiler, suhu akhir
dicatat pada saat hilangnya fase padat sedangkan suhu lebur zat adalah suhu pada saat
zat tepat melebur seluruhnya yang ditunjukkan pada saat fase padat tepat hilang. Titik

35
beku merupakan salah satu karakteristik yang dimiliki suatu senyawa dan
didefinisikan sebagai suhu dimana keadaan padat dan cair berada dalam
kesetimbangan.
Umumnya tinggi rendahnya suhu lebur pada suatu zat padat dipengaruhi oleh
bentuk zat padat tersebut dan kekuatan/jenis ikatan yang ada pada padatan tersebut.
Pada suatu padatan bentuk kristal dan ikatan kovalen maka akan memiliki suhu lebur
yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan padatan lain dengan ikatan van der waals.
Faktor lainnya yang juga berpengaruh terhadap jarak lebur adalah bobot molekul.
Semakin besar bobot molekul suatu senyawa maka semakin tinggi pula titik leburnya.
Amitriptilin Hidroklorida memiliki bobot molekul paling besar dibanding senyawa
lainnya sehingga amitriptilin memiliki titik lebur yang paling tinggi. Selanjutnya,
untuk pemilihan metode penentuan jara lebur dipengaruhi oleh karakteristik senyawa.
Untuk bahan baku yang bersifat higroskopis perlu dilakukan pengeringan terlebih
dahulu. Jadi, metode penetapan kadarnya menggunakan metode 1, yang ada tahapan
pengeringannya.

4.2.2 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Amitriptilin Hidroklorida

Tabel 4.1 Masing masing cemaran dan jumlah semua cemaran tidak lebih
dari batas yang ditentukan
Cemaran Waktu Retensi Relatif Batas (%)
Senyawa sejenis A 0,35 0,05
Amitriptilin
Senyawa Sejenis 0,52 0,15
B Amitriptilin
Nortriptilin 0,60 0,15
Hidroklorida
Siklobenzaprin 0,76 0,15
Hidroklorida
Amitriptilin 1,0 -
Hidroklorida
Cemaran lain - Masing-masing 0,1
Jumlah semua cemaran - 1,0

Cemaran sejenis merupakan cemaran senyawa organik yang keberadaannya

perlu diuji untuk menjamin keamanan senyawa uji. Pada uji cemaran sejenis,

36
umumnya jenis cemaran telah diketahui, sehingga diperlukan baku senyawa cemaran.
Jika cemaran senyawa sejenis ada lebih dari 1, pada umum nya hanya ditentukan 1
atau 2 senyawa sejenis yang diukur presentase cemarannya, dipilih berdasarkan
senyawa yang paling berpengaruh terhadap bahan bakunya (seperti kadarnya yang
besar dan toksisitasnya yang besar). Selanjutnya pemilihan metode penetapan
cemaran senyawa sejenis dingaruhi oelh karakteristik cemaran. Untuk cemaran yang
mudah menguap maka penetapannya dengan menggunakan kromatografi gas.

4.2.4 Penentuan Jarak Lebur Diazepam

Jarak lebur merupakan salah satu parameter dalam uji kemurnian. Keberadaan
kontaminan dalam jumlah yang sedikit dapat menghasilkan peningkatan jarak lebur
dan menyebabkan terjadinya peleburan pada suhu yang lebih rendah dibandingkan
titik lebur senyawa murni (Furniss, Hannaford, Smith, & Tatchell, 1989). Jarak lebur
umumnya terpisah dalam rentang 1 sampai 2 derajat. Namun, beberapa senyawa
dalam farmakope memiliki rentang lebih dari dua derajat, seperti diazepam yang
memiliki rentang empat derajat, yakni dalam rentang 131o-135o. Semakin banyak
ikatan yang dimiliki oleh suatu senyawa, maka jarak lebur yang dihasilkan lebih
tinggi juga. Hal ini disebabkan oleh tingginya energi yang dibutuhkan oleh senyawa
tersebut untuk memutuskan seluruh ikatan yang dimilikinya.
Menurut Farmakope Indonesia IV, metode yang digunakan untuk menentukan
jarak lebur diazepam adalah menggunakan metode I. Metode I digunakan untuk zat
padat mengandung hidrat atau mudah menyerap air. Oleh karena itu, pada saat
pengujian suhu penangas dinaikkan sampai suhu 30 oC karena kandungan uap air
dalam serbuk akan mempengaruhi pengujian sehingga hidrat atau uap air harus
dihilangkan dulu. Senyawa yang akan diuji dengan metode I wajib digerus dan
dikeringkan dulu sebelum dimasukkan ke dalam pipa kapiler.

4.2.4 Uji Senyawa Sejenis Diazepam

Uji cemaran sejenis diazepam menggunakan metode kromatografi lapis tipis.
Kromatografi lapis tipis adalah teknik pemisahan dimana fase diam di lapisan tipis
pada kaca, atau kertas. Larutan dari analit didepositkan di lempeng sebelum proses.

37
Pemisahan ini didasarkan pada adsorpsi, partisi, pertukaran ion atau kombinasi dari
mekanisme ini dan dilaksanakan oleh migrasi (perpindahan) dari diazepam dalam
fase gerak campuran etil setat P dan n-heptana P (1:1) melalui fase diam lempeng
silika gel G. Pemilihan Silika gel G dikarenakan Silika gel G bersifat polar sehingga
mampu menahan pergerakan diazepam. Di buat 3 larutan baku, yakni larutan baku 1
adalah Larutan 2- metil-amino-5-klorobenzofenon BPFI dalam aseton P(1 dalam
100.000), larutan baku 2 adalah larutan 3-Amino-6-kloro-1-metil-4-fenilkarbostiril
BPFI dalam aseton P(1 dalam 100.000) dan larutan baku 3 adalah larutan 7-Kloro-
1,3-dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazpin-2-on BPFI dalam aseton P (3 dalam
10.000). Setelah larutan uji dan larutan baku ditotolkan sesuai prosedur, lempeng
diangkat, diamati dibawah sinar uv 254 nm dan semprot dengan larutan campuran
segar (1:1) larutan besi (III) klorida P (1 dalam 10) dan kalium heksasianoferat (III) P
(1 dalam 20). Pereaksi semprot bertujuan untuk membuat bercak tampak sehingga
dapat ditentukan letaknya dan dihitung Rf- nya. Tidak ada satupun bercak selain
bercak utama yang lebih besar ukuran atau intensitasnya dibandingkan dengan bercak
utama. Harga Rf semua bercak larutan uji sesuai dengan larutan baku yang
menunjukkan tidak lebih dari 0,01 % 2-metilamino-5-klorobenzofenon, tidak lebih
dari 0,1 % 3-amino-6-kloro-1-metil-4-fenilkarbostiril dan tidak lebih dari 0,3 % 7-
kloro-1,3-dihidro-5-fenil-2H-1,4-benzodiazepin-2-on

4.3.5 Penentuan Jarak Lebur Gemfibrosil

Menurut Farmakope Indonesia, penetapan jarak lebur suatu senyawa, jika
tidak dinyatakan dalam monografi, metode yang digunakan adalah Metode III. Pada
pelaksanaannya, persiapan sampel yang tidak sempurna adalah penyebab utama hasil
yang tidak akurat. Persyaratan utama agar mendapatkan hasil yang baik yaitu sampel
harus berupa serbuk yang sangat halus. Hal tersebut akan menyebabkan transfer
panas ke sampel menjadi lebih efisien. Sampel yang memiliki bentuk kristal harus
digerus menggunakan mortir hingga menjadi serbuk yang sangat halus dan homogen.
Apabila sampel dalam ukuran besar diuji jarak leburnya, maka transfer panas ke
sampel menjadi tidak merata sehingga hasil yang didapatkan menjadi tidak akurat.

38
Jumlah sampel yang digunakan pada pengujian jarak lebur haruslah tepat. Jumlah
sampel yang terlalu banyak akan menyebabkan jarak lebur menjadi lebuh besar
karena dibutuhkan panas ekstra agar sampel tersebut mencair secara keseluruhan. Hal
tersebut menyebabkan hasil yang didapat menjadi tidak akurat.

4.2.6 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Gemfibrosil

Pengujian senyawa sejenis dilakukan untuk mengetahui senyawa lain yang
memiliki kemiripan sifat serupa dan diduga terdapat dalam suatu zat yang dapat
menyebabkan bias dalam perhitungan kadar. Pengujian senyawa sejenis juga
berkaitan erat dengan khasiat serta keamanan dalam penggunaan obat. Persyaratan
senyawa senyawa sejenis A gemfibrosil tidak lebih dari 0,1%; cemaran tidak spesifik
tidak lebih dari 0,1% dan jumlah semua cemaran tidak lebih dari 0,5%.Pada British
Pharmacopeia 2009, terdapat rumus molekul dari masing-masing cemaran A, B, C,
D, E, F,G, H,I:

39
Gambar 4.4. Struktur Kimia Cemaran A sampai I dari Gemfibrosil

Penggunaan KCKT dalam uji cemaran senyawa sejenis merupakan metode

yang selektif dibandingkan metode lainnya. Selain itu, metode ini juga cocok untuk
zat yang tidak mudah menguap.

4.2.7 Penetuan Jarak Lebur Ketoprofen

Pada senyawa ketoprofen, metode jarak lebur yang dilakukan adalah Metode
I. Metode I digunakan untuk zat padat yang mengandung hidrat atau mudah
menyerap air. Oleh karena itu, pada saat pengujian suhu penangas dinaikkan sampa
suhu 30C karena kandungan uap air dalam serbuk akan mempengaruhi pengujian
sehingga hidrat atau uap air harus dihilangkan terlebih dahulu. Senyawa yang akan
diuji dengan metode I wajib digerus dan dikeringkan sebelum dimasukkan ke dalam
pipa kapiler. Selain itu penurunan titik lebur tidak hanya disebabkan oleh adanya zat
pengotor namun juga dapat disebabkan oleh besar dan banyaknya kristal. Setelah
digerus maka luas permukaan akan bertambah dan lebih mudah menyerap panas.
Pada metode I, setelah melebur zat akan mengalami destruksi (menjadi hitam) dan
tidak bisa digunakan kembali.

4.2.8 Uji Cemaran Senyawa Sejenis Ketoprofen

Pengujian senyawa sejenis dilakukan untuk mengetahui senyawa lain yang
memiliki kemiripan sifat serupa dan diduga terdapat dalam suatu zat yang dapat
menyebabkan bias dalam perhitungan kadar. Pengujian senyawa sejenis juga

40
berkaitan erat dengan khasiat serta keamanan dalam penggunaan obat. Persyaratan
senyawa sejenis Ketoprofen dengan kuantitas masing-masing cemaran tidak lebih
dari 0,2% dan jumlah cemaran tidak lebih dari 1,0%. Pada British Pharmacopeia
2009, persyaratan untuk uji cemaran senyawa sejenis Ketoprofen untuk pengotor A,
B, C, D, E, F tidak lebih dari 0,2%. Berikut terdapat rumus molekul dari masing-
masing cemaran A, B, C, D, E, F:

Gambar 4.5. Struktur Kimia Cemaran A sampai F dari Ketoprofen

Penggunaan KCKT dalam uji cemaran senyawa sejenis merupakan metode

yang selektif dibandingkan metode lainnya. Selain itu, metode ini juga cocok untuk
zat yang tidak mudah menguap.

41
 BAB 5
KESIMPULAN

5.1 Kesimpulan
1. Pengujian jarak lebur dan uji cemaran senyawa sejenis dapat digunakan untuk
metode uji kemurnian suatu bahan baku farmasi.
2. Bahan baku Amitriptilin HCl memiliki jarak lebur 195-199 dengan metode
pengujian yang digunakan adalah metode III.
3. Bahan baku Amitriptilin HCl dapat diuji cemaran senyawa sejenis
menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) dengan menghitung
presentase yang diperoleh agar tidak melewati batas yang ditetapkan dalam
standar acuan.
4. Senyawa lain yang dapat dilakukan pengujian jarak lebur dan pengujian
cemaran senyawa sejenis adalah Diazepam, Glibenklamida dan Ketoprofen.

Saran
Metode pengujian jarak lebur dan cemaran senyawa sejenis dilakukan sesuai
dengan standar acuan.
Metode pengujian harus dipelajari lebih lanjut terutama apabila digunakan
pada sediaan yang memiliki kandungan beberapa senyawa.

42
 DAFTAR PUSTAKA

British Pharmacopeia. (2009). British Pharmacopeia, Volume I & II. London:

Medicines and Healthcare Products Regulatory Agency (MHRA)
Kementrian Kesehatan Republik Indonnesia. (2014). Farmakope Indonesia Edisi
Kelima. Jakarta: Direktorat Jenderal Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan.

43