Uji LFL

Bakteri yang ditanam pada media MC dan di inkubasi selama 24 jam pada suhu 37
oc hanya mengubah warna indikator Neutral Red sebagian saja sehingga warna yang
terbentuk merah jambu pucat (warna koloni sama dengan media aslinya). Proses perubhan
warna yang lambat karena dinding sel bakteri hanya terdapat enzim Beta Galaktosidase
saja. Pada uji ini, bakteri Serratia marcescens

Identifikasi kuman gram negative Serratia marcescens

Tujuan : untuk mengetahui jenis kuman dalam sample yang di uji

Alat dan bahan :
1. Strain kuman
2. Media EA,Mc, dan deretan uji biokimia
3. Cat gram A,B,C,D
4. Tetra metyl paraphenilen, kovack, metyl red, FeCl3
5. Ose mata, lampu spirtus, objek glass

Prosedur :
A. Pengecatan gram
1. Bersihkan objek glas dengan kapas alcohol
2. Panaskan ose mata sampai merah membara,tunggu sampai dingin
3. Ambil kuman dengan menggunakan ose tadi lalu oleskan pada objek glass
di buat smear, tunggu sampai kering
4. Fiksasi objek glass tadi untuk melekatkan kuman
5. Genangi dengan cat gram A sampai 3 menit, cuci dengan air mengalir
6. Genangi dengan cat gram B sampai 1 menit, cuci dengan air mengalir
7. Genangi dengan cat gram C sampai 0,5 menit, cuci dengan air mengalir
8. Genangi dengan cat gram D sampai 2 menit, cuci dengan air mengalir
9. Kering udarakan, lalu periksa dengan mikroskop dengan perbesaran kuat
Hasil :

bentuk : Batang
warna : Merah
susunan : Menyebar
sifat : Gram negatif

B. Penanaman pada media EA dan Mc

1. Panaskan ose mata sampai merah membara, dinginkan
 2. Ambil kuman dari sample strain
3. Goreskan pada media plate secara merata pada zona 1, lalu panaskan
kembali ose mata
4. Setelah ose dingin, goreskan ose dari zona 1 ke zona 2 membentuk garis-
garis
5. Panaskan kembali ose, lalu tunggu hingga dingin
6. Goreskan ose dari zona 2 ke zona 3 membentuk garis-garis,
7. Panaskan kembali ose, lalu tunggu hingga dingin
8. Goreskan ose dari zona 3 ke zona 4 membentuk garis-garis,
9. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37C

Hasil Serratia marcescens :

Media Mc
Bentuk : bulat Warna : merah muda
Ukuran : 2 mm Tepi : rata
Elevasi : cembung Konsistensi : lembek
Sifat : LFL (laktosa fermenter lambat)

Media EA
Bentuk : bulat Warna : ungu
Ukuran : 2 mm Tepi : rata
Elevasi : cembung Konsistensi : lembek

C. Penanaman pada media ujibiokimia

1. Panaskan ose mata sampai merah membara, dinginkan
2. Ambil kuman dari media Mc.
3. Tanam terlebih dulu pada media cair, yaitu media glukosa, laktosa, maltosa,
manosa, sukrosa, MR, VP, dengan cara media dimiringkan kemudian
tempelkan ujng ose pada dinding tabung lalu di kocok, kemudian tusukan
pada media SIM
4. Ambil kembali kuman pada media Mc
5. Tanam pada media Urea dan TSIA
6. Ambil kembali kuman pada media Mc
7. Tanam pada media citrat, PAD, LIA

Hasil Serratia marcescens :

1. Glukosa : (+)
1. Laktosa : (+)
2. Maltosa : (+)
3. Manosa : (+)
4. Sukrosa : (+)
5. SIM : indol; tambahkan reagen Kovacks (-) warna tetap kuning,
motil(+)
6. MR : tambahkan Metil red (+) warna coklat muda
7. VP : tambahkan KOH 3% kocok, tambahkan reagen naphtol
(-) warna merah
8. TSIA : K/A, gas (-), H2S (-)
9. Citrat : (+)
10. Urea : (-)
11. LIA : V/V, H2S (-)
12. PAD : Tambahkan FeCl3 (-)