LAPORAN PRAKTIKUM LAHAN BAKTERIOLOGI II

Diajukan sebagai salah satu tugas mata kuliah Bakteriologi Praktikum

Dosen Pengampu:
1. Dra. Diah Lestari, MKM
2. Dra. Mega Mirawati, M.Biomed

Disusun Oleh:
1. Aprilisia Widya Yosinta
2. Ariska Septiana
3. Bety Rahayu Kurniawati
4. Nia Rista E.
P3.73.34.1.19.050
P3.73.34.1.19.051
P3.73.34.1.19.054
P3.73.34.1.19.066

Poltekkes Kemenkes Jakarta III

Jurusan Teknologi Laboratorium Medik
2020
Hari / Tanggal Kamis / 22 Oktober 2020

Nama Isolasi dan Identifikasi Proteus

Pemeriksaan
Alat dan Bahan Alat:
1. Ose
2. Api Bunsen
3. Incubator
4. Kaca objek
5. Rak tabung
6. Korek api
Media:
1. Mac Conkey Agar (MCA)
2. Gula-gula (glukosa, laktosa, maltose, sukrosa)
3. Mannitol
4. MR
5. TSIA
6. SCA
7. VP

Bahan:
1. Kovak’s atau Erlich
2. Metil red
3. Alpha Naftol 5%
4. KOH 40%
Spesimen Biakan Proteus

Prosedur Kerja Cara Kerja:

- Inokulasi pada Media MCA

1. Siapkan alat dan bahan yang dibutuhkan.
2. Sampel Proteus Sp ditanam pada media MCA dengan
metode penipisan. (goreskan di permukaan media MCA )
3. Selanjutnya media diinkubasi pada suhu 37 oC selama 24
jam.
- Proses Pewarnaan Gram
1. Ambil koloni bakteri pada media MCA menggunakan ose
 steril
2. Buat apusan pada objek glass yang bersih dan bebas lemak.
Setelah kering fiksasi sediaan.
3. Warnai sediaan dengan pewarna Gentian Violet selama 1-2
menit kemudian bilas dengan air mengalir.
4. Tetesi sediaan dengan lugol selama 45 detik sampai 1 menit,
lalu bilas dengan air mengalir.
5. Lunturkan sediaan dengan alkohol sampai tidak ada zat
warna yang tersisa, selanjutnya bilas dengan air.
6. Kemudian tetesi sediaan dengan zat warna safranin diamkan
selama 1 menit, lalu bilas dengan air
7. Keringkan sediaan, dan amati dibawah mikroskop dengan
perbesaran objektif 100x.

- Uji Biokimia
1. Uji fermentasi karbohidrat
Cara kerja :
Satu koloni bakteri diambil dan kemudian ditanam pada
media glukosa, laktosa, manitol, maltosa, dan sukrosa lalu
diinkubasi didalam inkubator pada suhu 37°C selama 24
jam.
2. Uji sitrat
Cara kerja :
Sebanyak 1 koloni bakteri ditanam pada media SCA dengan
cara digores pada permukaan yang miring, kemudian
diinkubasi didalam inkubator pada suhu 37°C selama 24
jam.
3. TSIA
Cara kerja :
Diambil 1 koloni bakteri lalu ditanam pada media TSIA
dengan cara digores pada permukaan yang miring, kemudian
 ditusuk bagian tengah agar namun tidak sampai dasar,
kemudian diinkubasi didalam inkubator pada suhu 37°C
selama 24 jam. Hasil yang dapat dilihat : Fermentasi gula-
gula (Glukosa, Laktosa, Sukrosa), H2S, gas.
4. Uji H2S, Indol, dan Motility pada media SIM
Cara kerja :
Jarum penusuk (Nalt) disterilkan diatas api bunsen lalu 1
koloni di inokulasikan pada media SIM dengan cara
menusukan samapi ¾ bagian media, lalu diinkubasi pada
suhu 37° C selama 24 jam.Hasil yang dapat dilihat : H2S,
Indol, Gerak bakteri (Motility)
5. Uji MR dan VP
Cara kerja :
Sebanyak 1 koloni bakteri diinokulasikan pada 2 tabung
yang berisi MRVP, lalu diinkubasi pada suhu 37° C selama
24 jam.
 Uji MR, pada media diteteskan 1-2 tetes Metil Red
 UJi VP, Pada media diteteskan Alpha Naftol 5% dan
KOH 40%

Interpretasi Hasil
1. Uji Biokimia
 Positif : Bila bewarna kuning
 Negatif : Tetap bewarna merah
2. Uji Citrat
 Positif : Bila bewarna Biru
 Negatif : Tetap bewarna hijau
3. Uji TSIA
 Fermentasi karbohidrat ( Glukosa. Laktosa, Sukrosa)
 - K/K : Bila memfermentasi ketiga gula dalam TSIA
- M/K : Bila hanya memfermentasi glukosa
- M/M : Bila tidak memfermentasi semua gula-gula
 H2S
- Positif : bila terdapat gumpalan hitam pada media
- Negatif : Bila tidak terdapat gumpalan hitam pada
media
 Gas
- Postif : Bila terlihat ada ruang kosong
- Negatif : Bila tidak terlihat ruang kosong
4. Uji H2S, Indol, dan Motility pada media SIM
 H2S
- Positif : bila terdapat gumpalan hitam pada media
- Negatif : Bila tidak terdapat gumpalan hitam pada
media
 Indol
- Positif : Bila terbentuk cincin merah
- Negatif : Bila tidak terbentuk cincin merah
 Gerak bakteri (Motility)
- Positif : Bila terlihat pertumbuhan (keruh) di luar
tusukan
- Negatif : Bila tidak terlihat pertumbuhan (keruh) di
luar tusukan
5. Uji MR dan VP
 Uji MR
- Positif : Bila bewarna merah
- Negatif : Bila tidak bewarna merah
 Uji VP (Voges Proskauer)
- Positif : Bewarna merah
- Negatif : Tidak bewarna merah
Hasil 1. Pembacaan koloni pada bakteri pada MCA

Hasil yang diamati Proteus

Bentuk Swarming (menjalar)
Ukuran Besar
Warna Tidak bewarna/merah muda
Elevasi Cembung
Tepi Rata
Kosistensi Berlendir

2. Hasil Uji Biokimia pada pada bakteri

Jenis Uji Proteus

Glukosa -/Gas (-)
Laktosa -/Gas (-)
Sukrosa -/Gas (-)
SCA -
TSIA m/k, gas (-), H 2 S (+)
SIM H 2 S (+), Indol (-), Motil (+)
MR -
VP -
Gambar

Koloni Proteus Pada

Media

Bakteri Proteus pada

pewarnaan gram

Media Gula Gula

Kesimpulan Dari hasil uji biokimiaa yang dilakukan, bakteri yang ditanam adalah
Proteus