Persiapan Asam Salisilat Loaded Nanostructured Lipid

Carriers Menggunakan Box-Behnken Design: Optimasi,

Karakterisasi dan Stabilitas Fisikokimia
I. ABSTRAK
Pembawa lipid berstrukturnano yang mengandung asam salisilat (NLCs-SA)
dikembangkan dan dioptimalkan dengan menggunakan desain eksperimen (DOE). Desain
eksperimental Box-Behnken 3-faktor, 3-level diaplikasikan untuk optimalisasi pembawa
lipid berstrukturnano yang disiapkan dengan metode emulsifikasi. Variabel independen
adalah konsentrasi total lipid (X1), asam stearat terhadap rasio Lexol® GT-865 (X2) dan
konsentrasi Tween® 80 (X3) sedangkan ukuran partikel adalah variabel dependen (Y).
Desain Box-Behnken dapat membuat 15 proses dengan menetapkan pengoptimal respons
sebagai ukuran partikel minimum. Formulasi yang dioptimalkan terdiri dari 10% dari total
lipid, campuran asam stearat dan trigliserida kaprik / kaprilat pada perbandingan 4: 1, dan
25% dari Tween® 80 yang formulasi diaplikasikan untuk membuat salicylic baik yang dimuat
maupun tidak. AC id. Setelah persiapan selama 24 jam, ukuran partikel asam salisilat yang
dimuat dan tidak dibongkar masing-masing adalah 189,62 ± 1,82 nm dan 369,00 ± 3,37
nm. Analisis permukaan respon mengungkapkan bahwa jumlah total lipid adalah faktor
utama yang dapat mempengaruhi ukuran partikel pembawa lipid. Selain itu, studi stabilitas
menunjukkan perubahan signifikan dalam ukuran partikel berdasarkan waktu.
Dibandingkan dengan nanopartikel yang diturunkan, penambahan asam salisilat ke dalam
partikel menghasilkan dispersi yang stabil secara fisik. Setelah 30 hari, sedimentasi
pembawa lipid yang tidak terangkut jelas terlihat. Nilai absolut potensi zeta dari kedua
sistem berada dalam kisaran 3 hingga 18 mV sejak surfaktan non-ionik, Tween® 80,
menyediakan penghalang sterik digunakan. Termogram diferensial menunjukkan
pergeseran puncak endotermik dari 55 ℃ untuk bentuk kristal α dalam sampel yang baru
disiapkan menjadi 60 ℃ untuk bentuk kristal β dalam sampel penyimpanan. Ditemukan
bahwa keberadaan minyak trigliserida kaprik / kaprilat dapat meningkatkan efisiensi
enkapsulasi hingga 80% dan memfasilitasi stabilitas partikel.
II. Pendahuluan
Pembawa lipid berstrukturnano (NLC), yang dapat dicapai dengan mencampurkan lipid
padat dengan lipid cair parsial, telah menjadi sistem pengiriman yang menarik untuk
produk kosmetik dan farmasi setelah pengembangan nanopartikel lipid padat (SLNs).
Struktur khusus dari matriks lipid dapat meningkatkan kapasitas pemuatan tinggi,
terutama untuk obat lipofilik dan pengamatan fisikokimia, yang lebih baik daripada
generasi pertama nanopartikel lipid padat.
Banyak peneliti telah melaporkan manfaat kosmetik terhadap SLN dan NLC terkait
dengan potensi untuk mengontrol pelepasan bahan aktif dari matriks lipid. Sistem ini tidak
hanya dapat meningkatkan kelarutan agen enkapsulasi tetapi juga mengurangi
kemungkinan iritasi kulit dan lainnya. Selain sifat pelepasan terkontrol dari zat aktif
enkapsulasi, NLC meningkatkan stabilitas kimia dari banyak bahan aktif kosmetik; misalnya,
feniletil resorsinol, ascorbyl palmitate dan koenzim Q10. Untuk menerapkan partikel lipid,
yang lebih kecil dari 400 nm, menyebabkan pembentukan film pengemasan partikel padat
pada kulit yang menghasilkan efek penyumbatan dan hidrasi kulit. Lebih lanjut, partikel
NLC mampu meningkatkan Sun Protection Factor (SPF) saat dikombinasikan dengan tabir
surya anorganik; misalnya, titanium dioksida.
Beta hydroxybenzoic acid （BHA）, seperti asam salisilat, telah berhasil digunakan
sebagai agen anti-jerawat, anti-mikroba, dan keratolitik dalam berbagai produk kosmetik.
Penggunaan zat bioaktif ini tampaknya telah dibatasi oleh alasan munculnya iritasi kulit,
yang sebagian besar tergantung pada pH kendaraan, dan kelarutannya yang rendah dalam
sistem air. Dokumen kosmetik ASEAN merekomendasikan agar konsentrasi asam salisilat
dalam sediaan topikal tidak boleh melebihi 2%. Oleh karena itu, teknologi enkapsulasi
untuk sistem pengiriman dapat ditemukan di banyak makalah penelitian untuk mengurangi
efek samping dan meningkatkan efisiensi asam salisilat.
Karena berbagai faktor memainkan peran penting dalam pengembangan menuju
formulasi yang dioptimalkan, perlu untuk mempelajari satu faktor pada satu waktu yang
menyebabkan jalur berlebihan dan bahan-bahan yang boros. Selain itu, karakter pembawa
lipid berstrukturnano dikendalikan oleh jenis lipid dan surfaktan serta konsentrasi relatif
mereka yang variabel-variabel ini sangat mempengaruhi kualitas dispersi nanopartikel.
Untuk merumuskan pra-emulsi, yang cocok untuk pembuatan nanopartikel lipid, dianggap
sulit karena bahan-bahan secara signifikan mempengaruhi sifat fisikokimia akhir dari
partikel lipid. Desain eksperimental statistik adalah cara alternatif yang berguna untuk
memahami hubungan antara faktor-faktor dalam formulasi.
Desain Box-Behnken dari metodologi permukaan respons （RSM） adalah metode
yang menguntungkan untuk dipelajari ketika interaksi variabel sangat rumit. Ini adalah
salah satu desain yang paling efisien dari metodologi permukaan respons （RSM）
berdasarkan desain faktorial 2-level dan desain blok tidak lengkap yang membutuhkan
lebih sedikit pengoperasian daripada semua desain RSM lainnya. Untuk menganalisis
hasilnya, model polinomial orde kedua dihasilkan untuk memperkirakan tingkat variabel
untuk proses optimasi. Desain Box-Behnken mampu mempelajari variabel kuantitatif dan
kualitatif dan juga digunakan secara luas untuk mempelajari 3-faktor, 3-level untuk
menemukan formulasi yang optimal, yang dapat meningkatkan kualitas sistem pengiriman
obat.
Dalam karya penelitian ini, desain BoxBehnken 3-faktor, 3-tingkat dipilih untuk
memeriksa jumlah lipid, surfaktan, dan lipid padat dengan rasio lipid cair yang tepat untuk
menyiapkan pra-emulsi yang mengandung asam salisilat untuk persiapan NLCs yang
memiliki ukuran partikel minimum. NLC yang diperoleh dari formulasi yang dioptimalkan
 dikarakterisasi dan dievaluasi untuk stabilitas fisikokimia selama penyimpanan jangka
panjang.

III. Penelitian
3.1 Bahan
Agen aktif yang digunakan dalam percobaan adalah asam salisilat yang kemurnian
kimianya 99 ％ dari Ajax Finechem （Australia）. Pembawa lipid terdiri dari asam
stearat yang kemurnian kimianya 98 ％ dari Lab Pan Reac （Spanyol） dan campuran
trigliserida kaprik / kaprilat （Lexol® GT865） dibeli dari Inolex Chemical Company （
USA）. Tween® 80 yang memiliki kadar ekstra murni dari Q-Rec （Selandia Baru） dan
etanol absolut yang kemurnian kimianya 99,9 ％ dari Merck （Jerman).
3.2 Persiapan asam salisilat dimuat berstrukturnano dengan pembawa lipid
Asam salisilat yang mengandung nanostructured lipid carrier (NLCsSA) dibuat dengan
metode emulsifikasi menggunakan homogenisasi kecepatan tinggi. Menurut tes
penyaringan awal, fase lipid yang larut dengan baik untuk asam salisilat terdiri dari
asam stearat (p. 69,6 ℃) dan Lexol® GT-865. Fase lipid dilelehkan pada suhu diatas 70-
75 ℃ dan fase lipid cair dicampurkan ke dalam fase air yang dipanaskan yang terdiri
dari Tween® 80 dan 95 ％ etanol pada perbandingan 1: 1. Pra-emulsi dihomogenisasi
oleh homogenizer kecepatan tinggi (Heidolph Silent Crusher M, Jerman) pada
kecepatan 12.000 rpm. selama 10 menit dan ditambahkan tetes demi tetes
menggunakan jarum suntik ke dalam air suling dingin (2-3 ℃) pada perbandingan 1:20.
Campuran secara bersamaan diaduk pada 500 rpm selama 10 menit untuk mencapai
dispersi NLCs. Selain itu, dispersi yang diperoleh disimpan pada 4 ± 1 ℃ untuk evaluasi
stabilitas. Nanopartikel bermuatan asam salisilat dibuat dengan menambahkan jumlah
asam salisilat yang diketahui dalam fase lipid kemudian mengulangi proses yang
disebutkan di atas.
3.3 Desain Eksperimen (DOE)
Desain Box-Behnken dengan 3-faktor, 3-level digunakan untuk menyelidiki efek dari
variabel independen pada variabel dependen ukuran partikel (Y) menggunakan
perangkat lunak MINITAB (Versi Percobaan 17, AS). Variabel independen termasuk
konsentrasi total lipid (X1) lipid padat terhadap rasio lipid cair (X2) dan konsentrasi
surfaktan (X3) dipelajari pada 3 tingkat yang berbeda seperti yang ditunjukkan pada
Tabel 1. Desain eksperimental 3-faktor, 3-level, Box Desain -Behnken secara teoritis
menghasilkan beberapa kombinasi pengobatan dari 15 berjalan, yang umumnya terdiri
dari 3 ulangan di titik pusat untuk estimasi yang lebih seragam dari varian prediksi di
seluruh ruang eksperimental. Untuk penelitian ini, tambahan 2 ulangan memberikan
total 17 run ditugaskan sesuai dengan penelitian yang relevan lainnya. Persamaan
polinomial orde dua berikut diterapkan untuk mengevaluasi efek utama, efek interaksi
dan efek kuadrat dari variabel independen setelah mempertimbangkan besarnya
koefisien.
 di mana Y diprediksi respons, β 0 adalah intersep konstan, β 1, β 2, β 3 adalah koefisien
linier, β 11, β 22, β 33 adalah koefisien kuadrat dan suku kuadrat, β 12, β 13, β 23
adalah interaksi koefisien dan X1, X2, X3 adalah variabel independen, yang dipilih
berdasarkan studi pendahuluan. R2 yang diprediksi dihitung untuk mengevaluasi
kesesuaian model.
3.4 Optimalisasi dan validasi metodologi permukaan respons （RSM）
Dispersi NLC yang ukuran partikelnya ditentukan disiapkan sesuai dengan desain
eksperimental. Semua tanggapan yang diamati diganti dengan perangkat lunak, yang
dapat memperoleh persamaan polinomial. Model yang dipilih dievaluasi berdasarkan
koefisien signifikan secara statistik dan nilai R2. Plot respon permukaan 3D dibuat
untuk menentukan efek interaksi antara dua variabel independen dan respon ketika
variabel lain disimpan secara konstan. Sebagai kriteria untuk pemilihan formulasi yang
dioptimalkan berdasarkan pada ukuran partikel yang diminimalkan, formulasi yang
dioptimalkan dari NLCs-SA berulang kali disiapkan dan dievaluasi untuk ukuran, potensi
zeta dan efisiensi penjebakan sebagai fungsi waktu.
3.5 Karakterisasi partikel
3.5.1 Penentuan ukuran partikel dan potensi zeta
Instrumen DelsaTM Nano C (Beckman Coulter Inc., USA) digunakan untuk
memeriksa karakteristik fisik sampel dengan menerapkan 2 detektor. Dynamic
Light Scattering (DLS) diaplikasikan untuk menentukan rata-rata ukuran partikel
dan Polydispersity Index (PI) dengan mengukur laju fluktuasi intensitas cahaya
laser melalui partikel saat mereka berdifusi di seluruh fluida. Sampel diencerkan
dalam rasio 1: 1 dengan air deionisasi dalam sel kuarsa dan tetap berdiri selama
20 menit sebelum pengukuran pada 25 ℃. Pengukuran dilakukan dalam
rangkap tiga dan diulang tiga kali. Electrophoretic Light Scattering (ELS)
diaplikasikan untuk menentukan pergerakan elektroforesis partikel bermuatan
permukaan di bawah pengaruh medan listrik terapan berdasarkan pergeseran
Doppler dari cahaya yang tersebar. Sampel, sekitar 1 mL, yang diencerkan
dalam perbandingan 1: 1 dengan air deionisasi diisi dengan hati-hati dalam sel
aliran yang menghindari pembentukan gelembung gas dan tetap berdiri selama
20 menit sebelum pengukuran pada 25 ℃. Penentuan potensi zeta juga
dilakukan dalam rangkap tiga dan diulang tiga kali.
3.5.2 Penentuan morfologi partikel
Morfologi dari pembawa lipid berstrukturnano diselidiki dengan menggunakan
mikroskop elektron pemindaian (SEM, LEO 1450VP, UK). Satu tetes sampel
dispersi ditempatkan pada grid berlapis karbon dan disimpan kering dalam
desikator sekitar 1 jam sebelum pengamatan.
 3.5.3 Penentuan kristalisasi dan perilaku termal
Penentuan kristalisasi dan termalasi Pemindaian kalorimetri (DSC Perkin Elmer,
Jepang dan Phoenix, UK) diterapkan untuk menyelidiki perilaku termal dari
pembawa lipid berstrukturnano dalam hal perubahan polimorfisme dan
perilaku leleh. Asam stearat murni dan campuran lipid dalam jumlah besar
(perbandingan asam stearat 4: 1: Lexol® GT-865) digunakan sebagai referensi
yang sebanding dimana sampelnya, sekitar 7-8 mg, ditimbang dalam panci
aluminium dan disegel kedap udara. Pengukuran dioperasikan di bawah gas
nitrogen inert pada laju aliran 70 mL / menit. Aliran pemanasan dilakukan dari
10 hingga 200 ℃ dan didinginkan hingga 10 ℃ dengan laju pendinginan-
pendinginan 10 ℃ atau 5 K / mnt. Panci aluminium kosong digunakan sebagai
referensi. Oleh karena itu, hasil （entalpi） yang diperoleh melalui analisis
grafis dan derajat kristalisasi dihitung sesuai dengan persamaan berikut.
3.6 Penentuan efisiensi enkapsulasi
Efisiensi enkapsulasi NLCs yang mengandung asam salisilat ditentukan dengan metode
ultrafiltrasi. Dispersi NLCs, sekitar 4 g, ditempatkan di ruang atas dari tabung filter
sentrifugal kemudian disentrifugasi pada 10.000 rpm selama 15 menit (25 ℃). Satu
milimeter fase air yang disaring diencerkan dengan campuran etanol / air (1: 9)
sebelum pengukuran spektrofotometri (Cary 1E, UV-Vis Spectrometer, Varian,
Australia) pada panjang gelombang 296 nm. Konsentrasi asam salisilat bebas dalam
setiap sampel dihitung dari kurva konsentrasi standar asam salisilat mulai dari 1 hingga
25 μg / mL. Efisiensi enkapsulasi dihitung menurut persamaan sebagai berikut:
Dimana WT adalah jumlah asam salisilat (g) ditambahkan selama persiapan NLC dan
WF adalah jumlah asam salisilat bebas (g) dalam fase berair yang disaring.
3.7 Analisis statsitik
Perbedaan signifikan pada karakterisasi fisikokimia antara formulasi dievaluasi dengan
uji-t berpasangan dan perbedaan dalam formulasi yang sama sebagai fungsi waktu
dievaluasi oleh ANOVA satu arah pada nilai-p kurang dari 0,05.

IV. Hasil dan pembahasan

4.1 Pengaruh variabel independen pada ukuran partikel
Sejumlah 17 percobaan dihasilkan dari desain Box-Behnken seperti yang ditunjukkan
pada Tabel 2 yang terdiri dari 12 pengaturan eksperimental desain faktorial dan 5 set
titik pusat (run order 1, 4, 5, 7, 14). 17 penyiapan dipersiapkan secara eksperimental
dan semua respons yang diamati secara bersamaan dipasang ke model polinomial orde
kedua. Tanda positif di depan setiap variabel menunjukkan efek sinergis pada respons
sementara tanda negatif menunjukkan hubungan antagonis. Dispersi NLC, yang
disiapkan sesuai dengan desain eksperimental, memberikan kisaran ukuran partikel
dari 1,418,47 nm (run order 2) hingga 196,07 nm (run order 11) yang sesuai dengan
persamaan sebagai berikut:
Berdasarkan analisis varian （ANOVA）, variabel dependen （Y） sangat cocok untuk
model dengan koefisien determinasi tertinggi （R2） yang nilainya 0,8867. Model f-
nilai 6,09 menyiratkan bahwa model ini signifikan secara statistik pada nilai p, yang
kurang dari 0,05. Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 3, ada efek yang signifikan pada
ukuran partikel （p ＜ 0,05） dari variabel independen X1, X3, X22 dan X2X3. Oleh
karena itu, jelas bahwa variabel independen X1 dan X2X3 menunjukkan efek antagonis
dengan koefisien negatif dan X22 menunjukkan efek sinergis dengan koefisien positif.
Kesesuaian model dihitung dengan jumlah kuadrat kesalahan dalam 5 kali percobaan
berulang yang temuannya ditampilkan sebagai 'kurang cocok' '（Tabel 3）. 'Nilai
kekurangan fit' dari 330,00 signifikan pada nilai p kurang dari 0,0001 menyiratkan
terjadinya residu besar. Ini mungkin disebabkan oleh multikolinieritas dari variabel
independen. Multikolinearitas adalah suatu kondisi yang terjadi ketika beberapa
variabel prediktor dalam model berkorelasi dengan variabel prediktor lainnya. Seperti
temuan yang ditunjukkan pada Tabel 3, ada efek yang signifikan pada ukuran partikel
pada nilai p 0,044 dari interaksi antara istilah X2 dan X3. Dengan demikian, dianggap
bahwa konsentrasi surfaktan cenderung mempengaruhi rasio lipid yang menghasilkan
efek dramatis pada pra-emulsi dan ukuran partikel respons NLC.
Plot RSM pada Gambar. 1 （a-c） menjelaskan efek interaksi timbal balik dari dua
variabel independen pada ukuran partikel NLC pada satu waktu. Selain itu, jumlah total
lipid menunjukkan efek paling signifikan dan negatif pada ukuran partikel （Gambar. 1
（a））. Peningkatan konsentrasi asam stearat dapat menyebabkan ukuran partikel
 yang lebih kecil ketika menjaga jumlah Tween® 80 pada 20 ％ w / v karena peningkatan
jumlah lipid padat menghasilkan pembekuan lebih cepat dari pembawa lipid dengan
ukuran partikel yang lebih kecil23）. Di sisi lain, peningkatan konsentrasi terhadap
Tween® 80 menghasilkan peningkatan signifikan dalam ukuran partikel seperti yang
ditunjukkan pada Gambar. 1 （b） dan （c）, yang dapat menjadi hasil dari
menjembatani flokulasi partikel lipid terdekat yang terlibat dalam kemasan padat
molekul surfaktan sebagai lapisan pelindung pada permukaan lipid. Sebaliknya, sebagai
konsentrasi yang lebih tinggi, kisaran total lipid antara 8,5 hingga 10 ％ w / v dengan
rasio lipid padat terhadap cair dari 1,7: 1 hingga 3,6: 1 dapat membuat ukuran
pembawa lipid yang kurang dari 200 nm saat menggunakan hingga 25 ％ w / v dari
Tween® 80. Oleh karena itu, terungkap bahwa agregasi partikel mungkin tidak terjadi
pada kisaran konsentrasi lipid ini karena luas permukaan total partikel yang tersedia
untuk pengendapan molekul surfaktan meningkat.
4.2 Optimasi RSM
Formulasi pra-emulsi yang dioptimalkan diprediksi oleh perangkat lunak berdasarkan
kriteria meminimalkan ukuran partikel yang terdiri dari 10 ％ dari total lipid （rasio
asam stearat 4: 1 dan asam stearat Lexol® GT-865） dan 25 T dari Tween® 80. The
ukuran sebenarnya dari partikel NLCs-SA adalah 189,62 ± 1,82 nm yang dianggap sesuai
dengan ukuran yang dihitung. Lebih lanjut, sifat fisikokimia dari sediaan yang
disebutkan di atas sebagai fungsi waktu ditentukan dengan membandingkan dengan
NLC yang dibongkar.
4.3 Karakterisasi dan study stabilitas
4.3.1 Penentuan ukuran partikel dan morfologi
Formulasi yang dioptimalkan dari NLC-SA dan NLC disiapkan dan dievaluasi
stabilitas selama 90 hari di bawah 4 ± 1 ℃. Data yang diamati dari ukuran
partikel, indeks polidispersitas dan potensi zeta dari sampel NLCs-SA dan NLCs
sebagai fungsi waktu ditunjukkan pada Tabel 4. Ditemukan bahwa ukuran asam
salisat yang dimuat, partikel NLC yang diukur secara berkala lebih kecil daripada
partikel NLC. Foto-foto SEM jelas menunjukkan bentuk bulat dari partikel.
Gambar. 2）. Ukuran partikel NLCs-SA ditemukan meningkat secara signifikan
setelah penyimpanan 30 hari; Namun, indeks polidispersitas tidak lebih besar
dari 0,25 dan sedimentasi tidak dapat diamati selama periode penelitian. Di sisi
lain, ditemukan bahwa partikel NLC yang dibongkar secara signifikan
bertambah ukurannya pada hari ke-7 dan diendapkan sepenuhnya setelah
penyimpanan 90 hari. Pengamatan ini mengungkapkan bahwa penurunan
ukuran dan dispersi yang baik dari partikel NLCs-SA mungkin hasil dari
keberadaan asam salisilat dalam campuran partikel lipid.
4.3.2 Penentuan Zeta Potensial
Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 4, nilai potensial zeta dari NLCs-SA lebih
tinggi dari NLCs; Namun, nilai kedua partikel lipid lebih tinggi dari -20 mV dan
nilai-nilai itu tidak berubah secara signifikan selama periode penelitian.
Kehadiran asam salisilat dalam dispersi mungkin dikaitkan dengan peningkatan
potensi zeta NLCs-SA17, 19）. Secara umum, partikel tersuspensi dianggap
stabil secara fisik ketika nilai absolut potensi zeta berada di atas 30 mV karena
sistem secara dominan distabilkan oleh tolakan elektrostatik. Karena surfaktan
non-ionik, Tween® 80, yang mengandung poli （etilena oksida） bagian
digunakan sebagai penstabil dalam penelitian ini, efek tolakan elektrostatiknya
dapat diabaikan dibandingkan dengan efek tolakan sterik. Oleh karena itu,
ukuran yang lebih kecil dan tolakan sterik yang cukup mungkin menjadi alasan
bahwa partikel NLCs-SA masih tersuspensi secara homogen dalam air meskipun
nilai potensial zeta absolutnya jelas jauh dari 30 mV dan lebih rendah dari nilai
NLC. Dibandingkan dengan NLC yang ukuran awalnya lebih besar dari NLC-SA,
dianggap bahwa lapisan pelindung yang berlebihan pada permukaan partikel
NLC dapat menyebabkan agregasi progresif, yang mengakibatkan
ketidakstabilan sistem.
4.3.3 Penentuan kristalisasi dan perilaku termal
Kurva DSC dari NLCs-SA dan NLCs menunjukkan satu puncak endotermik （
Gambar. 3） antara 50-60 ℃ sedangkan puncak serupa diperoleh dari asam
stearat murni dan bulk lipid massal （dari asam stearat dan Lexol® GT-865）
diamati antara 60-70 ℃. Selain itu, penurunan suhu leleh asam stearat dalam
partikel dibandingkan dengan asam stearat murni atau bulk lipid dikaitkan
dengan ukurannya yang kecil dan adanya surfaktan. Mengambil entalpi asam
stearat pada 220,45 J / g sebagai 100 ％, tingkat kristalinitas NLC berkurang
secara dramatis sekitar 80 ％ ketika 20 Lex dari Lexol® GT-865 ditambahkan.
Pengamatan serupa juga diperoleh dari sampel NLCs-SA （Tabel 5）.
Ditemukan bahwa titik leleh NLC dan NLCs-SA bergeser ke suhu yang lebih
tinggi setelah penyimpanan 60 hari yang menunjukkan transformasi kisi kristal
dari energi permukaan tinggi α-kristal ke bentuk yang lebih stabil dari β-kristal
yang dianggap mampu menstabilkan zat yang dienkapsulasi.
4.3.4 Efisiensi enkapsulasi
Efisiensi enkapsulasi asam salisilat dalam NLCs sekitar 80 ％ disiapkan dengan
metode emulsifikasi. Tidak ada perbedaan yang signifikan dari efisiensi
enkapsulasi antara setiap periode pengujian hingga penyimpanan 90 hari
seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 4. Efisiensi enkapsulasi umumnya
 terkait dengan tingkat kristalinitas nanopartikel lipid. Selain itu, hasil percobaan
menyiratkan bahwa kristalinitas partikel padat mungkin tidak berubah selama
masa studi; karenanya, ini mungkin menjadi alasan bahwa penggabungan
minyak cair dalam matriks lipid padat dapat meningkatkan proporsi amorf
dalam sampel awal yang mengarah pada penurunan kristalinitas partikel
dengan waktu, sehingga meningkatkan stabilitas enkapsulasi. Selain itu,
penggabungan minyak cair, yang merupakan pelarut yang baik dari zat aktif
yang dienkapsulasi, lebih meningkatkan kapasitas enkapsulasi.
V. Kesimpulan
Penerapan desain Box-Behnken untuk mempelajari persiapan NLCs yang mengandung
asam salisilat menunjukkan bahwa itu adalah instrumen yang cocok untuk membangun
hubungan antara faktor-faktor dan atribut yang diharapkan. Formulasi partikel NLC yang
mengandung asam sterat sebagai lipid padat, Lexol® GT-865 sebagai lipid cair dan Tween®
80 sebagai surfaktan dioptimalkan dengan menggunakan desain 3-faktor, 3-level.
Formulasi yang dioptimalkan dari asam salisilat bermuatan NLC menunjukkan efisiensi
penjebakan tinggi dan stabilitas yang baik. Selain itu, analisis DSC menunjukkan bahwa
penambahan minyak trigliserida kaprik / kaprilat dalam partikel dapat meningkatkan
bagian amorf dalam matriks lipid yang menghasilkan efisiensi dan stabilitas enkapsulasi
yang tinggi.