PENDAHULUAN
1
cahaya dan spektrum absorbsi photosensitizer, dosis energi (daya penyinaran dan
waktu pemaparan), jumlah konsentrasi dan spesifikasi photosensitizer dan
lokalisasi sel target. Untuk mencapai penetrasi yang maksimal, secara metodologi
klinis, diperlukan waktu lama inkubasi setelah pemberian photosensitizer. Hal ini
dimaksudnya untuk penyebaran photosensitizer ke seluruh tubuh dan dapat
diserap dengan baik oleh sel [11]. Misal photosensitizer generasi pertama yaitu
porphyrin yang dapat diperoleh dari ALA (5-aminoleivinic acid) Misal ALA (5-
aminoleivinic acid) memerlukan inkubasi selama 3-20 jam yang bergantung pada
jenis sel target [12]. Diperkenalkan sensitizer lain yaitu Chlorophyll yang hanya
membutuhkan 30 menit sampai satu jam inkubasi [13].
Chlorophyll merupakan pigmen penting yang berperan sebagai light
harvesting dalam proses fotosintesis dalam tumbuhan. Dewasa ini chlorophyll
telah dimanfaatkan dalam produksi pangan [14] dan photosensitizer [15].
Penelitian Astuti et al telah melakukan photodynamic dengan laser dioda biru dan
chlorophyll untuk mereduksi Streptococccus mutans diperoleh penurunan 78%
dalam fase planktonic [16]. Penelitian Gomaa et al telah melakukan
photodynamic pada sel tumor payudara (MCF-7) diperoleh 50% reduksi dengan
LED 650nm dan chlorophyll sensitizer[17].
Permasalahan utama dalam photodynamic biofilm adalah penetrasi biofilm.
Penelitian Panhoca et al telah melakukan photodynamic dengan LED biru dan
merah dengan curcumin pada biofilm memberikan reduksi 2 log CFU/mL dengan
prosentase sangat kecil pada Streptococcus mutans biofilm dengan umur 48 jam
[18]. Diperkenalkan metode lain yaitu menggunakan gelombang ultrasound [11].
Gelombang ultrasound telah diketahui memiliki kemampuan dalam
penetrasi yang baik. Penggunaan ultrasound dalam terapi ini disebut sonodynamic
therapy (SDT). SDT merupakan metode pengobatan menggunakan gelombang
ultrasound dan molekul (obat) aktif ultrasound yang disebut sonosensitizer untuk
menyebabkan cavitation [19]. Keunikan dari penggunaan ultrasound dalam terapi
adalah “target and delivery” atau “drug delivery system” yaitu kemampuan
membawa obat dan penetrasi ke sel target. Berdasarkan dari penelitian SDT,
hampir semua photosensitizer dapat menjadi agen sonosensitizer [20]17].
Penelitian Koda et al melaporkan bahwa perbandingan pemaparan ultrasound
dengan frekuensi 20kHz dan 500kHz memberikan hasil bahwa lebih efektif
2
menurunkan bakteri Streptococcus mutan pada frekuensi 500kHz [22]. Penelitian
Carmen et al melaporkan pemaparan ultrasound dengan intensitas 500mW/cm 2
dan gentamicin selama 48 jam memberikan reduksi biofilm bakteri E.coli sebesar
CFU 2,28 log dan P.aeruginosa sebesar 4,15log [23]. Karena keunikan dari
kemampuan ultrasound dalam penetrasi sel target, maka dilakukan kombinasi
PDT dan ultrasound yang disebut sono-photodynamic therapy (SPDT).
Berdasarkan latar belakang ini, penelitian ini merupakan upaya dalam
meningkatkan proses photodynamic therapy dengan menggunakan ultrasound
dalam inaktivasi biofilm.
3
1.5 Batasan Masalah
Dalam penelitian ini terdapat batasan masalah dalam hal melakukan secara
eksperimen. Batasan masalah pada tahap eksperimen meliputi bakteri patogen
yang dipakai adalah bakteri Staphylococcus aureus yang ditumbuhkan dalam
bentuk biofilm selama 48 jam, photosensitizer yang digunakan adalah chlorophyll
sensitizer, dan perlakuan secara in vitro. Untuk batasan pada alat yang akan
digunakan adalah set alat ultrasound dengan frekuensi 1 MHz dan laser dioda
dengan panjang gelombang 405 nm. Selama dilakukan eksperimen, sampel dijaga
dalam ruang gelap dan temperatur ruang. Proses pemberian volumetrik kadar
larutan pada setiap sampel dijaga tetap sama.
4
BAB II
KAJIAN PUSTAKA DAN DASAR TEORI
5
menyerap energi cahaya dan akan melewati beberapa proses dimulai dari
photophysics, photochemistry dan photobiology untuk mencapai kerusakan sel [9].
Keunggulan dari PDT dengan metode pengobatan lain adalah kemampuan dalam
lokalisasi sel target secara selektif dengan cara memfokuskan cahaya pada bagian
yang dituju. Keberhasilan PDT bergantung pada jumlah dosis energi yaitu besar
daya radiasi dan durasi waktu pemaparan, jumlah konsentrasi photosensitizer.
6
Gambar 2. 1 Spektrum serap chlorophyll
(http://www.fondriest.com/environmental-measurements/parameters/water-
quality/algae-phytoplankton-chlorophyll/)
7
selanjutnya yang hasil terakhir dari proses ini adalah penambahan zat besi ke
dalam PpIX oleh ferrochelatase sehingga menghasilkan metal-free PpIX.
Sebagian besar produk PpIX akan membentuk heme kembali namun akan
berbeda dengan tumbuhan dan photosynthetic bacteria. PpIX berbentuk cincin
aromatik yang tidak memiliki ikatan logam pada pusatnya akan bereaksi dengan
ion Mg2+[32].
8
2.2.3 Interaksi Cahaya dan Jaringan
Jaringan memiliki sifat optik sehingga cahaya dapat merambat. Dari
kebanyakan molekul biologis yang rumit, medium yang sesuai untuk morfologi
jaringan adalah turbid media [35]. Perambatan cahaya dapat meliputi penyerapan,
hamburan, refraksi, refleksi dan lain-lain. Dari berbagai sifat tersebut, probabilitas
yang lebih memungkinkan untuk menggambarkan perambatan cahaya dalam
jaringan adalah penyerapan dan hamburan [36].
Perambatan cahaya secara hamburan menggambarkan probabilitas cahaya
saat melewati jaringan. Dalamnya perambatan cahaya secara hamburan
bergantung pada besarnya intensitas dan arah perambatan. Secara umum
hamburan dibagi menjadi dua yaitu elastik yang terdiri dari hamburan Rayleigh
dan hamburan Mie dan inelastik terdiri dari hamburan Brillouin dan hamburan
Raman [36]. Penggambaran fenomena hamburan dalam jaringan lebih rumit
karena memiliki banyak macam molekul biologis yang harus dipertimbangkan.
Diantara macam sifat hamburan, hamburan elastik lebih berperan dalam
perambatan cahaya pada jaringan yang bergantung pada ukuran molekul biologis
dengan panjang gelombang cahaya.
Perambatan cahaya secara absorbsi lebih relevan dalam menggambarkan
hilangnya intensitas cahaya dengan kedalaman jaringan. Dalam turbid media,
fenomena absorbsi dan hamburan terjadi secara simultan [37]. Reduksi intensitas
cahaya serta cara perambatan cahaya dalam jaringan dirumuskan secara matematis
dengan Hukum Lambert-Beer dan koefisien atenuasi adalah penjumlahan dari
koefisien absorbsi dan hamburan [36]:
Ix= I0 exp[−( abs+ sca)x] (2.0)
Dengan Ix adalah intensitas transmisi yang diukur, I0 adalah intensitas awal,
abs adalah koefisien absorbsi, sca adalah koefisien hamburan dan x adalah tebal
kedalaman perambatan.
9
cahaya dengan molekul photosensitizer. Interaksi ini dapat dijelaskan dengan
pendekatan kuantum. Keberhasilan proses photosensitization bergantung lama
waktu saat proses photophysics saat menyerap energi cahaya (foton). Proses
penyerapan ini bergantung pada sifat fisis atom atau molekul ditentukan oleh
distribusi elektron. Dalam penyerapan energi cahaya oleh molekul photosensitizer,
distribusi elektron dalam molekul tersebut akan didorong menuju ke tingkat
energi yang lebih tinggi yang diberikan oleh foton dan pasangan tingkat energi
elektronik yang melibatkan dalam transisi elektronik [38]. Sebagian besar dari
photosensitizer adalah molekul organik yang memiliki level elektronik yang
berada pada keadaan singlet. Selain transisi elektronik, molekul juga terdorong
sekaligus terlibat transisi dipol listrik secara vibrasi akibat gerakan inti saat
penyerapan foton terjadi di keadaan singlet dasar. Besar energi total molekul
untuk bertransisi sama dengan energi cahaya yang diserapnya.
Saat molekul mencapai ke keadaan eksitasi singlet, molekul dalam keadaan
metastabil dan memiliki kecenderungan untuk kembali ke keadaan setimbang.
Cara molekul mengeluarkan energi yang diserap ke lingkungan dapat berupa
energi panas, energi radiatif dan energi non radiatif. Energi radiatif yang
dikeluarkan oleh molekul adalah fluorescence sedangkan energi non radiatif
adalah internal conversion (IC) dan vibration relaxation (VR). Dari penjelasan
diatas diringkas dalam diagram Jablonski pada Gambar 2.2.
Selain internal conversion dan vibrational relaxation, terdapat transisi non
radiatif lain yaitu intersystem crossing (ISC). Proses ini terjadi jika level energi
keadaan eksitasi singlet tumpang tindih dengan level keadaan triplet dan adanya
pembalikan spin elektron dalam molekul. Probabilitas proses ISC sangat kecil
karena proses ini melanggar kaidah seleksi Pauli. Probabilitas dapat terjadi karena
adanya interaksi spin orbit coupling.
Jika proses ISC dapat terjadi, molekul akan berada di keadaan triplet. Masa
hidup keadaan triplet sangat lama karena keadaan ini melanggar aturan Pauli. Di
keadaan triplet, molekul bersifat metastabil sehingga akan menuju ke keadaan
setimbang melalui transisi radiatif yaitu phosphorescence . Selain transisi radiatif,
molekul juga akan berinteraksi dengan molekul di sekitarnya melalui proses
10
photochemical [31]. Proses ini memiliki dua jalur yaitu jalur pertama dan jalur 2
yang diringkas dalam Gambar 2.3.
Gambar 2.2 Diagram Jablonski. Level-level energi dan spektrum dari proses
absorbsi dan emisi cahaya. S1…Sn adalah keadaan singlet; T1…Tn adalah keadaan
triplet dan keadaan spin elektron yang ditunjukkan dalam kotak. Level vibrasi
ditunjukkan oleh garis horizontal tipis; Transisi non radiatif diindikasi oleh tanda
panah bergelombang, yang terdiri atas vibrational relaxation (VR), internal
conversion (IC), dan intersystem crossing (ISC) (Sumber:
http://www.photobiology.info/Photochem.html)
11
oksigen. Photosensitizer yang tereksitasi S* mengoksidasi atau mereduksi
molekul subtrat (R). Subtrat tereduksi (Rred) dan photosensitizer tereduksi (S-)
dapat berubah menjadi superoksida (O2-) melalui reaksi dengan molekul oksigen
yang selanjutnya menyebabkan kerusakan biomolekul tetangganya. Dari proses
tipe 1 photosensitization, sifat eksitasi triplet molekul porphyrin sebagai agen
oksidator atau reduktor akibat transfer elektron dengan molekul di sekitarnya.
Tipe 2, photosensitizer pada keadaan tereksitasi (S*) mentransfer energi ke
molekul oksigen, menjadi oksigen singlet (O*2) yang kemudian bereaksi dengan
bahan molekul (R), menghasilkan produk R’. Oksigen singlet tereksitasi (O* 2)
dihasilkan dari photosensitizer dengan pita energi antara keadaan triplet dasar dan
eksitasi yang lebih besar daripada energi EΔ yang diperlukan untuk eksitasi
oksigen ke keadaan singlet tereksitasi.
Selain proses photophysical dan photochemical yang terjadi akibat
interaksi cahaya dengan porphyrin, terdapat proses lain yaitu photobiology. Proses
photobiology melibatkan reaksi photochemistry dalam perubahan sel membran.
Seperti halnya photochemistry, proses photobiology dibagi menjadi dua jalur yaitu
jalur 1, proses photochemistry tipe 1 menghasilkan lipid membran peroxidasi
dengan alur yang ditunjukkan oleh Gambar 2.4 (a) [31]. Molekul photosensitizer
berada pada keadaan triplet bereaksi dengan phospolipid lineleoyl (LH)
menghasilkan molekul oksidasi lipid radikal (L’) yang kemudian bereaksi molekul
oksigen (O2) stabil menghasilkan radikal bebas (LOO*). Radikal bebas ini akan
bereaksi dengan molekul lipid sehingga menghasilkan lipid superperoksida yang
merupakan enzim antioksidan. Sedangkan jalur 2, proses photochemistry tipe 2
yaitu oksigen singlet bereaksi dengan lipid secara langsung menghasilkan lipid
peroksida yang ditunjukkan Gambar 2.4 (b).
12
(a)
(b)
Gambar 2.4 Mekanisme photobiology (a) jalur 1 dan (b) jalur (2)
Mekanisme laser terdiri dari tiga yaitu absorbsi, emisi spontan dan emisi
terstimulasi yang merupakan interaksi elektron dengan energi foton (Gambar 2.6).
Mekanisme dengan absorbsi dimulai dari elektron dari keadaan level dasar E 1
13
menyerap energi foton hυ dan bergerak ke keadaan level energi yang lebih tinggi
E2. Energi yang berada di keadaan level lebih tinggi memiliki kecenderungan
untuk stabil sehingga elektron akan kembali ke keadaan dasar dengan meluruhkan
energi cahaya yang memiliki arah random dan fase yang diemisikan sehingga
terjadi emisi spontan. Untuk emisi terstimulasi dimulai dari foton awal
menyebabkan elektron di level lebih tinggi meluruh, mengemisikan foton yang
terstimulasi dengan sifat seperti arah, panjang gelombang dan fase sama seperti
foton awal.
14
Klasifikasi gelombang suara yaitu berdasarkan gerakan yang diinduksikan
dalam medium dengan perambatan gelombang suara. Saat gelombang ultrasonic
merambat pada medium tertentu, maka gelombang diklasifikasikan dalam bentuk
arah dan energi ultrasound yang merambat relatif dengan pergerakan partikel.
Sifat ultrasound pada jaringan biologis dipengaruhi oleh molekul-molekul
biologis seperti air, ion, makromolekul, sel dan lain-lain. Perambatan gelombang
direlasikan dengan kecepatan perambatan, impedansi dan atenuasi dalam medium
biologis yang sekaligus menjelaskan mekanisme biofisika.
Perambatan ultrasound dianggap sebagai proses adiabatik sehingga tidak
menimbulkan konduksi panas dalam tubuh. Oleh karena itu kecepatan gelombang
dalam fluida:
BAD g P0
c= = (2.2)
r r
Dimana BAD adalah modulus elastik untuk fluida isotropik, ρ adalah
kerapatan medium, γ adalah rasio spesifik panas dan P0 adalah tekanan ambient
ekuilibrium.
Impedansi akustik spesifik didefinisikan sebagai rasio tekanan akustik pada
kecepatan partikel:
Z=±ρc (2.3)
Dimana nilai + untuk positif gelombang pergi dan nilai untuk negatif
gelombang pergi. Untuk bidang gelombang nilai Z bergantung pada kedua
medium dan jenis gelombang. Medium ini dapat berupa jaringan atau sel-sel
biologis yang terpapar oleh gelombang ultrasound.
Perambatan gelombang akustik dikembangkan persamaan yang didekati dari
persamaan keadaan yang berhubungan dengan perubahan kerapatan pada
perubahan dalam tekanan, persamaan kontinuitas terhubung dengan pergerakan
partikel pada perubahan dalam kerapatan dengan melibatkan persamaan
konservasi massa dan momentum.
Persamaan keadaan, persamaan Kontinuitas dan persamaan Euler yang
berkontribusi dalam persamaan orde satu ditunjukkan :
15
�
u dx
r0 = -�p dengan u =
�t dt (2.4)
1 P2
I=
2 r0 c0 (2.7)
16
absorbsi oleh medium lebih berperan dalam hilangnya energi gelombang. Proses
yang terlibat akibat absorbsi dapat melibatkan hilangnya viskositas, konduksi
termal dan proses relaksasi molekular.
Efek fisika medium seperti liquid yang diakibatkan oleh ultrasound akan
memberikan peristiwa cavitation. Peristiwa ini melibatkan kejadian seperti
munculnya bubble sampai meletusnya bubble tersebut dalam medium. Perilaku
cavitation dapat dibagi menjadi dua yaitu noninertial cavitation dan inertial
cavitation. Pembagian cavitation ini bergantung pada frekuensi, tekanan
amplitudo, jari-jari bubble dan lingkungan.
Dalam perilaku non-inertial cavitation, bubble akan mengalami osilasi
yang memungkinkan untuk difusi akibat peningkatan area bubble. Permukaan
bubble akan lebih besar dalam fase ekspansi daripada fase kompresi. Akibat
tekanan di dalam lebih rendah dari pada tekanan luar, maka difusi gas yang
dihasilkan lebih banyak.
Perilaku inertial cavitation lebih relevan yang terjadi di molekul biologis.
Perilaku ini dikarakterisasi oleh bubble yang dihasilkan dalam waktu yang relatif
lama mengalami peletusan cepat akibat inersia liquid. Fase peletusan tersebut
meningkatkan temperatur yang dikompres selama fraksi volume dan shock yang
dihasilkan dalam gas. Proses ini menyebabkan radikal bebas. Peletusan ini juga
dapat meningkatkan emisi cahaya yang dikenal sonoluminance.
17
mekanisme SDT. Secara singkat, mekanisme SDT dirangkum pada Gambar 2.8
[42].
18
MHz namun ada beberapa frekuensi rendah 20-100kHz juga mampu digunakan
untuk terapi khususnya drug delivery melalui cavitation process [43].
Transducer ultrasound yang sering digunakan untuk terapi adalah transducer
electro-acoustic yang strukturnya dikomposisi oleh bahan viscoelastic dan
piezoelectric. Peralatan ultrasound dapat mengemisikan signal akustik ke jaringan
manusia akibat efek piezoelectrik. Jenis piezoelectric yang digunakan adalah
piezoelektrik keramik. Piezoelectrik dirancang untuk mampu berkerja untuk
sensor stress dan stain sensing Gambar 2.9.
Model piezoelektrik digambarkan dengan luas melintang (A) yang memiliki
ketebalan (d) dan sifat material dielektrik sehingga nilai kapasitansi [44]:
A
C0 = e s (2.11)
d
Dimana εs adalah konstanta dielektrik clamped di bawah keadaan strain nol.
Hukum Hook untuk kapasitor:
T = Cd S - hD (2.12)
Dimana h adalah konstantan piezoelektrik. Cd adalah konstanta kekakuan
yang diperoleh dari konstanta perpindahan D dan medan listik :
AV V
D = esE = es = C0 (2.12)
dA A
Jika tegangan diaplikasikan ke elektrode, maka efek piezoelektrik membuat
gaya ke atas dan ke bawah transducer:
hC0V
F (t ) = TA = [-d (t ) + d (t - d / c] (2.13)
2
Gaya dihasilkan oleh transducer, maka impedansi listrik yang melewati
tegangan terminal terpengaruh. Nilai keseluruhan impedansi listrik:
ZT = Z A - i (1/ wC0 ) = RA ( f ) + i[ X A ( f ) - (1/ wC0 )] (2.14)
Dimana ZA adalah impedansi radiasi, dan RA dan XA adalah bagian nilai real
dan imajiner.
19
Gambar 2.9 Model transducer. (a) diagram ketebalan piezoelektrik yang merambat
ke dalam medium. (b) Respon stress terhadap waktu. (c) Respon frekuensi [44]
20
Secara alamiah, bakteri mampu memilih cara bertahan hidup dari
lingkungan misal dari pengobatan anti mikroba misal antibiotik. Cara yang dipilih
dapat berupa perubahan fase planktonic menjadi biofilm. Perubahan ini ditandai
oleh lapisan tipis extracellular polymer substances (EPS) matriks yang menutupi
permukaan jaringan [2]. Biofilm dijelaskan pertama kali oleh Van Leewenhoek
tentang “animalcules” dalam plak gigi pada abad ke-17. Jalur pembentukan
biofilm dibagi menjadi 5 tahapan yang diringkas dalam Gambar 2.10 [46].
Gambar 2.11 . Terdapat lima tahap pembentukan biofilm yaitu tahap (1) reversible
stage, (2) irreversible stage, (3) maturation stage, (4) biofilm mature dan (5)
detachment stage [46].
Tahap (1) yaitu reversible stage atau reversible adsorption. Tahapan ini
melibatkan sel bakteri fase planktonic dalam mencari tempat ke permukaan
(boundary layer), dapat berupa biomaterial maupun jaringan tubuh dengan
kecepatan aliran sampai menjadi nol [7]. Dalam pencarian ini, bakteri dapat
melakukan kontak fisik dengan permukaan maupun mikroorganisme lain melalui
interaksi skala panjang dan interaksi skala pendek. Interaksi skala panjang
memposisikan sel untuk mendekati permukaan dengan gaya Van der Waals, gaya
elektrostatis dan efek hydrophobic [46]. Pendekatan mikroorganisme dengan
permukaan memicu interaksi skala pendek melibatkan ikatan kovalen dan
hidrogen antara extracellular microorganism moieties dan permukaan tersebut.
Pendekatan skala pendek ini membuat mikroorganisme membentuk ikatan dan
membuat struktur yang permanen dengan permukaan yang mengandung protein
21
seperti fibrinogen atau fibronectin [47]. Dalam tahap ini, antibiotik masih mampu
untuk mereduksi laju pertumbuhan bakteri.
Diikuti dengan keluaran gaya adhesi dari mikroorganisme pada permukaan,
tahap (2) irreversible stage dapat terjadi [46]. Sel akan mulai membentuk lapisan
tipis extracellular polymer substances (EPS). Lapisan EPS mengandung
polisakarida, protein, nuclea acid, phospholipid, amyloid fiber, humic substance
dan extracellular DNA (e-DNA) yang berasal dari sintesis polysaccharide
intercellular adhesin (PIA) [47]. Sebagai penghubung antara mikroorganisme dan
permukaan, melalui interaksi nonspecific hydrophobic dan interaksi elektrostatis
dan interaksi ligand-receptor adalah zat adhesin yang dikeluarkan oleh capsules
dan fimbriae. Lapisan EPS ini berfungsi sebagai adsorbent atau reactant, untuk
mereduksi antimikroba atau antibodi yang direaksi oleh tubuh yang berinteraksi
dengan biofilm. Semakin tebal lapisan EPS semakin sulit agen antimikroba atau
antibodi untuk penetrasi ke dalam biofilm.
Setelah bakteri sudah menempel pada permukaan, mikroorganisme akan
memulai tahap (3) yaitu maturation stage. Mikroorgansime akan memperbanyak
diri dengan membentuk kelompok atau mikrokoloni dengan mengeluarkan sinyal
kimia yang disebut quorum sensing (QS). Sinyal kimia yang dikeluarkan
berdasarkan regulasi gen, misal untuk sesama bakteri Gram (-) mengeluarkan N-
acyl-L-homoserine lactone (AHL) dan sesama bakteri Gram (+) mengeluarkan
autoinducting peptide (AIP), antara bakteri Gram (+) dan (-) mengeluarkan
autoinducer-2 (AI-2) dan untuk fungi mengeluarkan farnesol (aromatic alcohol)
[46].
Tahap (4) biofilm mature memungkinkan sel mikroorganisme untuk
membuat rongga yang berfungsi sebagai transport air, penyerapan nutrisi,
penghubung dengan mikrooganisme lain dan membuang hasil reaksi pembuangan
[46]. Penyerapan nutrisi menjadi faktor utama dalam laju pertumbuhan biofilm
ini. Keberadaan nutrisi untuk biofilm diambil dari hasil aktivitas metabolisme
pada permukaan. Jika nutrisi terbatas, beberapa sel mikroorganisme akan
mengambil keputusan untuk melepaskan diri dari biofilm yang disebut
detachment stage, tahap (5).
22
Tahap (5) dapat terjadi dengan 2 cara yaitu erosi dan pengelupasan. Cara
erosi dapat digambarkan dengan keluarnya sel mikrooganisme dari biofilm
sedangkan cara pengelupasan digambarkan sebagai pemisahan sebagian dari
biofilm tersebut. Faktor terjadinya tahap detachment dipengaruhi oleh gaya
mekanik seperti aliran darah, penghentian produksi bahan biofilm seperti
exopolysaccharide, dan penyempitan akibat surfactant [47]. Dengan dua cara ini
memungkinkan untuk sel mikrooganisme membentuk biofilm baru dengan lokasi
yang berbeda.
Tahap awal pengobatan antimicrobial adalah pemberian antimicrobial
seperti antibiotik. Pada saat pemberian antimicrobial, biofilm mampu mentolerir
sifat obat tersebut sehingga penetrasi obat ke matriks struktur berkurang dengan
adanya efflux pump dan mekanisme enzim modifikasi oleh matriks oleh struktur
fungsional biofilm [6]. Selain itu, pemberian obat yang berlebihan juga mampu
menurunkan aktivitas metabolisme sehingga menurunkan nutrisi yang dibutuhkan
tubuh.
Menurut dari beberapa penelitian melaporkan penyebab resistansi terhadap
antimicrobial:
1. Pada struktur matriks biofilm memperlambat difusi obat. Perlambatan
ini dapat terjadi oleh mekanisme modifikasi enzim yang menghasilkan
β-lactamase-negative strain atau β-lactamase-positif strain (bergantung
pada jenis bakteri) sehingga antimicrobial diserap ke dalam permukaan
matriks [1]. Proses laju antimicrobial penetrasi ke biofilm memiliki
waktu yang lebih lama daripada lifetime obat tersebut sehingga sebelum
penetrasi lebih dalam sudah direduksi oleh tubuh [48].
2. Transmisi gen resistan seperti plasmid, transponson dan elemen genetik
yang lain dapat dikirim antar sel pembentuk biofilm sehingga
membentuk tanda resistan [48].
3. Keberadaan efflux pump juga dipertimbangkan sebagai mekanisme
untuk resistan antimicrobial [1].
4. Selama proses difusi oleh antibiotik, terjadi perubahan konsentrasi ion
logam dan pH sehingga dapat menjadi antagonis untuk antibiotik [48].
5. Keberadaan sifat persister (varian reguler sel yang membentuk koloni
kecil) di dalam inaktivasi sel secara metabolisme menyebabkan sel di
23
dalam biofilm dapat mengganti target antibiotik dengan sintesis protein
atau replikasi DNA. Akusisi dari persister ini ditandai oleh modul
toksis-nontoksis [1,48].
24
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Diagram Alir Penelitian
Tahapan penelitian ini dilakukan beberapa prosedur penelitian. Penjelasan
prosedur digambarkan dalam diagram alir pada Gambar 3.1. Penjelasan setiap
proses akan dibahas pada subbab selanjutnya.
25
3.2 Tinjauan Pustaka
Hal yang pertama dilakukan adalah meninjau pustaka yang terkait dalam
penelitian. Tinjauan pustaka ini meliputi penggambaran penelitian, prosedur
metode eksperimen, dan parameter-parameter yang mendasari penelitian.
26
4. Pembuatan biofilm
Isolat bakteri Staphylococcus aureus ATCC 28923 dibiakkan pada Tryptic
soy agar TSA (Oxoid, UK) selama 24 jam di incubator 38℃. Isolat diambil satu
ose dan dibuat suspensi di Tryptic soy broth TSB (Merk, Jerman) selama 24 jam
di incubator sampai optical density OD pada 600nm 0.5 atau mendekati 10 6
CFU/mL. Suspensi ini akan ditempatkan pada sample yang akan diukur turbiditas
biofilm (CFU/mL) dan distribusi ketebalan biofilm.
Pengukuran turbiditas biofilm menggunakan crystal violet assay. Suspensi
bakteri ditempatkan pada microplate 96-well dengan ukuran dimensi
127,8×85,5×11,4 mm dan berisi 96 sumur berukuran diameter 6,02 mm dan
kedalaman 11,3 mm. Setiap well diberikan suspensi 100 μL dan 20μL 2% sucrose
solution. Sample ditempakan di shaker selama 4 jam sampai terbentuk biomass
pada dinding well. Sample dibersihkan dengan phosphate buffered saline pH 7.4
sebanyak tiga kali. Sample diinkubasi selama 48 jam di incubator. Sample yang
telah diinkubasi, dibersihkan dengan PBS sebanyak tiga kali. Sample diberikan
150μL 2% crystal violet solution dan diinkubasi selama 15 menit. Sample
dibersihkan dengan distilled steril water sebanyak tiga kali dan dibiarkan agak
kering. Sampel diberikan 50μL 33% glacial acetic acid (GAA) dan dapat
langsung diukur dengan microplate reader S/N 17539 dengan panjang gelombang
595nm (OD595nm).
Pengukuran distribusi biofilm digunakan confocal laser scanning
microscophy PO1000 (Olympuss). Tempat sample yang digunakan adalah disk
plate berukuran diameter 6.2 cm dan ketinggian 1 cm. Cover glass berukuran
persegi 15mm×15mm ditempatkan pada collagen solution selama 2 jam. Disk
plate diberikan 3 mL TSA dan dibiarkan menjadi padat. Coverglass yang telah
direndam Collagen, ditempatkan pada disk plate. Suspensi bakteri diberikan 2%
sucrose solution dengan perbandingan 1:5 dan diberikan pada disk plate yang
berisi coverglass dan agar. Sample dibiarkan selama 48 jam di incubator 38℃.
Sample dilakukan pewarnaan dengan 0.2% acridine orange (2mL 2%
acridine orange in H2O (Sigma Aldrich), 100mL distilled steril water dan 1 mL
GAA 33%). Sample (biofilm yang melekat pada coverglasss) dikeluarkan dari
incubator dan dibersihkan dengan 10% PBS pH7.4 (10mL PBS pH 7.4 dan
27
100mL distilled steril water) sebanyak tiga kali. Sample diwarnai dengan 0.2%
acridine orange dan dibiarkan selama 2 jam. Sebelum pengukuran CLSM, sample
ditempatkan pada coverglass yang telah diberikan 20μL (satu tetes) PBS pH7.4.
Hasil pengukuran merupakan fluorescence dari penyinaran laser yang mengenai
sample.
28
Kelompok ini akan diuji dengan dan tanpa
photosensitizer.
29
CFU
(= �koloni �1 f . pengenceran)
mL Vplate (3.3)
Dimana f. pengenceran adalah jumlah pengenceran yang digunakan dan
v.plate adalah volume suspensi biofilm yang dituang pada disk plate untuk
mengetahui viabilitas koloni. Konversi OD dan CFU/mL diberikan pada model
matematis yang disebut dengan McFarland Standard [50]. Penentuan efficacy ini
dibutuhkan nilai logaritma dari CFU/mL.
Data keluaran dari CLSM adalah image dengan ukuran 512 pixel × 512
pixel. Penghitungan distribusi ketebalan biofilm dianalisis secara image
processing dengan ImageJ Comstat 2.1. Langkah analisis diberikan pada Gambar
3.2.
30
Jika terpenuhi kedua uji tersebut, dilakukan uji statistik ANOVA one-way
test dan ANOVA one-way test untuk melihat perbedaan setiap perlakuan dengan
Tukey test. Data statistik dianalisis dengan menggunakan SPSS 19 untuk
windows. Dari hasil analisis keseluruhan dapat ditarik kesimpulan awal yang akan
mengawali proses penulisan laporan.
31
3.8
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
32
Gambar 4. 2 Profil Daya keluaran laser terhadap waktu
Gambar 4. 3 Laju Temperatur terhadap Waktu pada Setiap Level Daya Ultrasound
33
Hasil pengukuran laju temperatur, kenaikan temperatur berkisar antara 29.9
sampai 33℃ sehingga mekanisme ultrasound ini merupakan mekanisme termal
yang tidak menyebabkan hyperthermia (42-46℃) [52]. Perbandingan efisiensi
antara daya dari metode kalorimetri dengan daya dari intensitas setting instrument
ditunjukkan pada Gambar 4.4.
y=8.208x+4.131
Dari hasil profil ini dapat diperlihatkan kelinieran antara intensitas setting
dari switching mode dengan daya ultrasound yang diukur dengan metode
kalorimetri. Nilai konstanta dari kelinieritas dijadikan sebagai kalibrasi nilai ukur
daya kalorimetri sehingga nilai daya ultrasound ditunjukkan pada Tabel 4.1.
Tabel 4. 1 Nilai Daya keluaran Ultrasound
P calorymetry (W) P Calibrating (W)
28.82758326 28.754
37.27388154 36.961
44.0676432 45.169
54.35009328 53.376
61.32747012 61.584
34
alfalfa (K-Link, Indonesia). Spektrum serap dari sensitizer ini ditunjukkan pada
Gambar 4.4.
35
4.1.4 McFarland Standard
Metode McFarland standard merupakan standarisasi yang digunakan untuk
penghitungan koloni dalam bakteri. Koloni bakteri ini diwakili dengan CFU/mL.
Data keluaran dari microplate reader adalah nilai optical density (OD). Konversi
nilai OD dengan CFU/mL akan dibuatkan model. Ada dua model berdasarkan
tanpa sensitizer dan penambahan sensitizer.
Gambar 4.6 menunjukkan McFarland Standard yang akan digunakan dalam
konversi ke log CFU/mL. Gambar 4.6 (a) model konversi OD terhadap CFU/mL
tanpa ada sensitizer. Gambar 4.6 (b) menunjukkan model konversi OD terhadap
CFU/mL dengan sensitizer.
(a) (b)
Gambar 4.6 Profil McFarland Standard. (a) model untuk tanpa penambahan
sensitizer dan (b) model untuk penambahan sensitizer.
36
Gambar 4. 7 Sonodynamic endogen dengan perubahan waktu. Tanda *
menunjukkan nilai significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level
p>0.05.
37
4.1.6 Hasil Analisis untuk Perlakuan Photodynamic Endogen
Perlakuan photodynamic endogen merupakan perlakuan penyinaran cahaya
pada biofilm. Penyinaran ini dilakukan pada setiap variasi waktu penyinaran.
Hasil efficacy photodynamic ditunjukkan berdasarkan dua metode yaitu melalui
crystal violet assay dan clsm. Profil efficacy photodynamic endogen dengan
crystal violet assay ditunjukkan pada Gambar 4.9. Hasil perbandingan dengan
analisis statistik ANOVA dengan Tukey test menunjukkan bahwa setiap perlakuan
tidak memberikan perbedaan.
38
waktu pemaparan 4 menit lebih unggul dibandingkan 3 menit, 5 menit dan 6
menit. Perbedaan perlakuan dari profil pemaparan 61.3 W memberikan hasil pada
waktu pemaparan 3 menit dan 4 menit lebih unggul dibandingkan 5 menit dan 6
menit. Nilai efficacy tertinggi dari hasil profil sono-photodynamic endogen yaitu
perlakuan 53.42 W selama 4 menit sebesar 18.82%.
39
Gambar 4.11 Profil efficacy sono-photodynamic endogen perubahan daya dengan
crystal violet assay. Tanda * menunjukkan nilai significant level p< 0.05 dan **
menunjukkan significant level p>0.05.
40
Gambar 4.12 Hasil analisis efficacy pada perlakuan photo-sonodynamic dalam
perubahan waktu dengan metode crystal violet assay. Tanda * menunjukkan nilai
significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level p>0.05.
41
4.1.9 Hasil Analisis untuk Perlakuan Sonodynamic Eksogen
Perlakuan Sonodynamic eksogen merupakan perlakuan pemaparan
ultrasound pada sample setelah diberikan chlorophyll sensitizer. Pemaparan
ultrasound dilakukan dalam perubahan waktu dan daya ultrasound. Perlakuan
sonodynamic eksogen dalam perubahan waktu ditunjukkan pada Gambar 4. 14.
Hasil analisis statistik ANOVA dengan Tukey test menunjukkan bahwa ada
perbedaan signifikan pada perlakuan pemaparan ultrasound 28.76 W dan 53.42 W.
Perbedaan signifikan pada perlakuan pemaparan ultrasound 28.76 W ditunjukkan
pada waktu 3 menit dan 5 menit lebih efficacy dibandingkan 4 menit dan 6 menit.
Perbedaan signifikan pada perlakuan pemaparan ultrasound 53.42 W ditunjukkan
waktu pemaparan 5 menit paling efficacy. Nilai Efficacy tertinggi pada
Sonodynamic eksogen ditunjukkan pada perlakuan 28.76 W selama 3 menit
sebesar 29.99%.
42
Gambar 4. 15 Hasil analisis efficacy pada perlakuan sonodynamic dalam
perubahan waktu dengan metode crystal violet assay. Tanda * menunjukkan nilai
significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level p>0.05.
43
4.1.11 Hasil Analisis untuk Perlakuan Sono-Photodynamic Eksogen
Perlakuan Sono-Photodynamic (SPDT) eksogen merupakan perlakuan
biofilm diberikan chlorophyll sensitizer dilakukan pemaparan ultrasound dengan
perubahan daya dan waktu dan diikuti dengan perlakuan cahaya selama 75 detik.
Hasil perlakuan SPDT eksogen perubahan waktu ditunjukkan pada Gambar 4.17.
Hasil analisis ANOVA dengan Tukey test menunjukkan bahwa ada perbedaan
signifikan. Perbedaan signifikan pada perlakuan SPDT eksogen ditunjukkan pada
perlakuan daya ultrasound 45.2 W dan 61.63 W selama 4 menit memberikan
efficacy paling besar.
Hasil perlakuan SPDT eksogen perubahan daya ditunjukkan pada Gambar 4.18.
Hasil analisis ANOVA dengan Tukey test menunjukkan bahwa ada perbedaan
signifikan. Perbedaan signifikan pada perlakuan SPDT eksogen ditunjukkan pada
perlakuan daya ultrasound 28.27 W dan 36.37 W selama 4 menit.
44
Gambar 4. 18 Hasil analisis efficacy pada perlakuan sono-photodynamic dalam
perubahan daya dengan metode crystal violet assay. Tanda * menunjukkan nilai
significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level p>0.05.
45
Gambar 4. 19 Hasil analisis efficacy pada perlakuan photo-sonodynamic dalam
perubahan waktu dengan metode crystal violet assay. Tanda * menunjukkan nilai
significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level p>0.05.
46
4.1.13 Hasil Analisis untuk Perbandingan perlakuan cahaya
(Photodynamic) endogen dengan perlakuan ultrasound-cahaya (Sono-
Photodynamic dan Photo-sonodynamic) endogen
Perbandingan perlakuan cahaya dan perlakuan ultrasound-cahaya dilakukan
untuk mengetahui keefektifitas dari perbandingan efficacy. Perbandingan
perlakuan cahaya (photodynamic) dengan perlakuan SPDT ditunjukkan pada
Gambar 4.21. Hasil analisis dengan student t-test menunjukkan bahwa ada
perbedaan PDT dengan SDPT endogen namun keefektifan perlakuan ditunjukkan
pada perlakuan PDT.
47
Gambar 4. 22 Profil Perbandingan PDT endogen dan PSDT endogen. Tanda *
menunjukkan nilai significant level p< 0.05 dan ** menunjukkan significant level
p>0.05.
48
Perbandingan perlakuan cahaya (photodynamic) dengan perlakuan PSDT
ditunjukkan pada Gambar 4.24. Hasil analisis dengan student t-test menunjukkan
bahwa ada perbedaan PDT dengan PSDT eksgen. Keefektifan ditunjukkan pada
PSDT pada daya keluaran 45.2 W, 53.42 W dan 61.67 W.
49
dalam tubuh juga dapat menjadi photosensitizer endogen dengan absorbansi di
wilayah 335nm-435nm [59].
Meskipun hampir semua molekul biologis memiliki absorbansi, tidak belum
tentu dapat menjadi photosensitizer. Hal ini dapat diperlihatkan pada profil
Gambar 4.6. Diperlihatkan dalam profil tersebut bahwa untuk memberikan
efisiensi maksimal diperlukan dosis energi tertentu. Hal ini dapat disebabkan oleh
molekul biologis lain yang ada di dalam mikrooganisme. Carotenoid merupakan
pigmen yang ada di dalam tubuh tumbuhan dan mikroorganisme [60][61].
Carotenoid berfungsi sebagai antioksidan yang dapat melindungi sel dari
kerusakan (necrosis dan apoptosis)[62]. Dalam tumbuhan, carotenoid yang
berperan dalam peredaman radikal bebas yang dihasilkan oleh chlorophyll dalam
proses photosynthesis[63]. Jika di dalam tubuh mikroorganisme, carotenoid pun
juga berperan sama sehingga ROS yang dihasilkan dalam photosensitization
process diredam[64]. Carotenoid di dalam tubuh Staphylococcus aureus adalah
Staphyloxanthin (70-80%) [65]. Absorbansi pita Soret tertinggi dari
Staphyloxanthin adalah 463nm dan 490 nm[66], namun kisaran lebar panjang
gelombang mulai dari 380nm – 520nm [67][68]. Laser dioda yang digunakan
dalam penelitian ini memiliki panjang gelombang 404-425 nm. Dengan
kesesuaian panjang gelombang tersebut, carotenoid diaktifkan namun bukan
sebagai photosensitizer. Energi yang diserap oleh carotenoid digunakan untuk
proses biosintesis carotenoid untuk menghasilkan jenis turunan carotenoid [69].
Jumlah carotenoid dalam fase biofilm semakin bertambah umur semakin
bertambah besar sebanding dengan jumlah lipid atau protein yang dihasilkan
dalam biofilm tersebut[70].
Mekanisme carotenoid dalam aktivitas antioksidan terdapat empat cara yaitu
quenching singlet oksigen (1), transfer elektron (2), abstraksi hidrogen (3) dan
penambahan radikal bebas (4) yang ditunjukkan pada Gambar 4.8 [71]. Saat
carotenoid melakukan aktivitas antioksidan maka ROS akan kembali ke keadaan
dasar sedangkan molekul carotenoid akan mengalami kerusakan[72]. Kerusakan
carotenoid dikeluarkan melalui proses sekresi.
50
Gambar 4.8 Interaksi carotenoid dengan ROS [71]
51
cukup besar. Hal berbeda jika dibandingkan dengan perlakuan photo-
sonodynamic dengan chlorophyll.
52
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
1. Perlakuan SPDT dibandingkan dengan PDT tanpa sensitizer endogen tidak
memiliki perbedaan dan PDT jauh lebih efektif dengan independent test.
Namun jika SPDT dibandingkan PDT dengan sensitizer memiliki
perbedaan dan SPDT memiliki keefektifan dibandingkan PDT melalui
independent test.
2. Dosis energi ultrasound pada SPDT yang memiliki efisiensi dibandingkan
PDT dengan sensitizer adalah 0.243, 0.324, 0.406, 0.487, 0.417, 0.522,
0.626, 0.510, 0.638, 0.87 J/cm2 berdasarkan uji independent test.
3. Masih belum dianalisis.
5.2 Saran
53
(Halaman ini disengaja kosong)
54
DAFTAR PUSTAKA
[1] P. S. Stewart, “Mechanisms of antibiotic resistance in bacterial biofilms.,”
Int. J. Med. Microbiol., vol. 292, no. 2, pp. 107–113, 2002.
[2] R. M. Donlan and J. W. Costerton, “Biofilms: Survival mechanisms of
clinically relevant microorganisms,” Clinical Microbiology Reviews, vol.
15, no. 2. pp. 167–193, 2002.
[3] M. Alhede, P. Jensen, M. Givskov, and T. Bjarnsholt, “Biofilm of Medical
Importance,” Eolss.Net, vol. XII, 1999.
[4] M. Musaddiq, “Biofilm Forming Abilities and Antibiotic Susceptibility
Pattern of Clinical Isolates of Staphylococcus aureus Jayashri Apurva
Dipali Barate,” Indian J. Appl. Res., vol. 3, no. 5, pp. 41–44, 2013.
[5] G. Sahal and I. S. Bilkay, “Multi drug resistance in strong biofilm forming
clinical isolates of Staphylococcus epidermidis,” vol. 544, pp. 539–544,
2014.
[6] P. S. Stewart and J. William Costerton, “Antibiotic resistance of bacteria in
biofilms,” Lancet, vol. 358, no. 9276, pp. 135–138, 2001.
[7] M. G. Paraje, “Antimicrobial resistance in biofilms,” Sci. against Microb.
Pathog. Commun. Curr. Res. Technol. Adv., vol. 2, pp. 736–744, 2011.
[8] A. P. Castano, T. N. Demidova, and M. R. Hamblin, “Mechanisms in
photodynamic therapy: part one—photosensitizers, photochemistry and
cellular localization,” Photodiagnosis and Photodynamic Therapy, vol. 1,
no. 4. pp. 279–293, 2004.
[9] A. P. Castano, T. N. Demidova, and M. R. Hamblin, “Mechanisms in
photodynamic therapy: part two—cellular signaling, cell metabolism and
modes of cell death,” Photodiagnosis and Photodynamic Therapy, vol. 2,
no. 1. pp. 1–23, 2005.
[10] C. H. Sibata, V. C. Colussi, N. L. Oleinick, and T. J. Kinsella,
“Photodynamic therapy: a new concept in medical treatment.,” Braz. J.
Med. Biol. Res., vol. 33, no. 8, pp. 869–80, 2000.
[11] H. Horiuchi, T. Kano, H. Uehara, and T. Okutsu1, “Sono-activatable
Photosensitizer for Photodynamic Therapy,” Chem. Lett, vol. 43, pp. 1423–
1425, 2014.
[12] A. F. Taub, “Cosmetic Clinical Indications for Photodynamic Therapy,”
Cosmet. Dermatology, vol. 25, no. 5, pp. 218–224, 2012.
[13] B. H. Song, D. H. Lee, B. C. Kim, S. H. Ku, E. J. Park, I. H. Kwon, K. H.
Kim, and K. J. Kim, “Photodynamic therapy using chlorophyll-a in the
treatment of acne vulgaris: A randomized, single-blind, split-face study,” J.
Am. Acad. Dermatol., vol. 71, no. 4, pp. 764–771, 2014.
[14] B. Schoefs, “Chlorophyll and carotenoid analysis in food products.
Properties of the pigments and methods of analysis,” Trends Food Sci.
55
Technol., vol. 13, no. 11, pp. 361–371, 2002.
[15] A. S. Brandis, Y. Salomon, and A. Scherz, “Chlorophyll Sensitizers in
Photodynamic Therapy,” in Chlorophylls and bacteriochlorophyls:
biochemistry, biophysics, functions and applications., 2006, pp. 461–483.
[16] S. D. Astuti, A. Zaidan, E. M. Setiawati, and Suhariningsih, “Chlorophyll
mediated photodynamic inactivation of blue laser on Streptococcus
mutans,” AIP Conf. Proc. 1718, vol. 120001, p. 120001, 2016.
[17] I. Gomaa, S. E. Ali, T. a El-Tayeb, and M. H. Abdel-kader, “Chlorophyll
derivative mediated PDT versus methotrexate: an in vitro study using
MCF-7 cells.,” Photodiagnosis Photodyn. Ther., vol. 9, no. 4, pp. 362–368,
2012.
[18] V. Pancoha, F. Flores, N. B. de F. Junior, A. N. de S. Rastelli, J. Tanomaru,
C. Kurachi, and V. Bagnato, “Evaluation of Antimicrobial Photodynamic
Therapy against Streptococcus mutans Biofilm in situ,” J. Contemp. Dent.
Pract., vol. 17, no. 3, pp. 184–191, 2016.
[19] K. Tachibana, L. B. Feril, and Y. Ikeda-Dantsuji, “Sonodynamic therapy,”
Ultrasonics, vol. 48, no. 4, pp. 253–259, 2008.
[20] M. Kinoshita and K. Hynynen, “Mechanism of porphyrin-induced
sonodynamic effect: possible role of hyperthermia.,” Radiat. Res., vol. 165,
no. 3, pp. 299–306, 2006.
[21] K. Sasaki, H. Uenohara, N. Takahashi, M. Yoshida, and T. Yoshimoto,
“Basic Study of Sonodynamic Therapy(SDT) Using Photosensitizers.,”
Neurosonology, vol. 12, pp. 183–186, 1999.
[22] S. Koda, M. Miyamoto, M. Toma, T. Matsuoka, and M. Maebayashi,
“Inactivation of Escherichia coli and Streptococcus mutans by ultrasound at
500 kHz,” Ultrason. Sonochem., vol. 16, no. 5, pp. 655–659, 2009.
[23] J. C. Carmen, B. L. Roeder, J. L. Nelson, R. L. Robison Ogilvie, R. a.
Robison, G. B. Schaalje, and W. G. Pitt, “Treatment of biofilm infections
on implants with low-frequency ultrasound and antibiotics,” Am. J. Infect.
Control, vol. 33, no. 2, pp. 78–82, 2005.
[24] M. Kuroki, K. E. N. Hachimine, H. Abe, and H. Shibaguchi, “Sonodynamic
Therapy of Cancer Using Novel Sonosensitizers,” Anticancer Res., vol. 27,
no. 6A, pp. 3673–3677, 2007.
[25] K. C. Sadanala, P. K. Chaturvedi, Y. O. U. M. I. Seo, J. M. O. Kim, Y. S. A.
M. Jo, Y. K. O. O. Lee, and W. S. Ahn, “Sono-Photodynamic Combination
Therapy : A Review on Sensitizers,” Anticancer Res., vol. 4664, pp. 4657–
4664, 2014.
[26] H. Scheer, “An Overview of Chlorophylls and Bacteriochlorophylls :
Biochemistry , Biophysics , Functions and Applications,” in Chlorophylls
and Bacterioclorophylls: Biochemestry, Biophysics, Function and
Applications, 2006, pp. 1–26.
[27] H. Scheer, Chlorophylls and Carotenoids, 2nd ed. Elsevier Inc., 2013.
56
[28] I. Cakmak and A. M. Yazici, “Magnesium: A Forgotten Element in Crop
Production,” Better Crop., vol. 94, no. 2, pp. 23–25, 2010.
[29] L. Fiedor, A. Kania, B. My??liwa-Kurdziel, ??ukasz Orze??, and G.
Stochel, “Understanding chlorophylls: Central magnesium ion and phytyl
as structural determinants,” Biochim. Biophys. Acta - Bioenerg., vol. 1777,
no. 12, pp. 1491–1500, 2008.
[30] İ. A. Levent, “Chlorophyll : Structural Properties , Health Benefits and Its
Occurrence in Virgin Olive Oils,” Akad. Gıda Acad. Food J., vol. 9, no. 2,
pp. 26–32, 2011.
[31] L. I. Grossweiner, The science of phototherapy - An introduction.
Netherland, 2005.
[32] S. I. Beale, “Biosynthesis of Chlorophylls and Hemes,” in The
Chlamydomonas Sourcebook: Organellar and Metabolic Processes,
Volume 2., D. Stern, Ed. Academic Press, 2009, pp. 731–798.
[33] D. P. Hader and G. Jori, Photodynamic Therapy with ALA A Clinical
Handbook Editors, vol. 6. 2006.
[34] D. von Wettstein, S. Gough, and G. Kannangara, “Chlorophyll
biosynthesis,” Plant Cell, vol. 7, no. July, pp. 1039–1057, 1995.
[35] F. Fanjul-Vélez and J. L. Arce-Diego, “Light Propagation in Turbid Media :
Application to Biological Tissues,” IEEE, pp. 7–10, 2011.
[36] K. Plaetzer, B. Krammer, J. Berlanda, F. Berr, and T. Kiesslich,
“Photophysics and photochemistry of photodynamic therapy: Fundamental
aspects,” Lasers Med. Sci., vol. 24, no. 2, pp. 259–268, 2009.
[37] M. H. Niemz, Laser-Tissue Interactions: Fundamental and Applications,
3rd ed. Berlin Heidelberg, New York, 2007.
[38] B. Wardle, Principles and Applications of Photochemistry, First. UK, 2009.
[39] G. Thomas and R. Isaacs, “Basic principles of lasers,” Anaesth. Intensive
Care Med., vol. 12, no. 12, pp. 574–577, 2011.
[40] W. D. O. Jr, “Ultrasound-biophysics mechanisms,” Prog Biophys Mol Biol,
vol. 93, no. 1–3, pp. 212–255, 2007.
[41] V. F. Humphrey, “Ultrasound and matter-Physical interactions,” Prog.
Biophys. Mol. Biol., vol. 93, no. 1–3, pp. 195–211, 2007.
[42] A. K. W. Wood and C. M. Sehgal, “A Review of Low-Intensity Ultrasound
for Cancer Therapy,” Ultrasound Med. Biol., vol. 41, no. 4, pp. 905–928,
2015.
[43] N. Jabbari, M. H. Asghari, H. Ahmadian, and P. Mikaili, “Developing a
Commercial Air Ultrasonic Ceramic Transducer to Transdermal Insulin
Delivery Physical Characteristics of Ultrasound,” J. Med. Signal Sens., vol.
5, no. 2, pp. 117–122, 2015.
[44] T. L. Szabo, “Transducers,” in Diagnostic Ultrasound Imaging: Inside Out,
2014, pp. 121–165.
57
[45] F. D. Lowy, “Staphylococcus aureus Infections,” N. Engl. J. Med., vol. 339,
pp. 520–532, 1998.
[46] W. C. M. A. Melo and J. R. Perussi, “Innovative strategies to overcome
biofilm resistance,” Microb. Pathog. Strateg. Combat. them Sci. Technol.
Educ., pp. 179–187, 2013.
[47] M. Otto, “Staphylococcal biofilms,” Curr. Top. Microbiol. Immunol., vol.
322, pp. 207–228, 2008.
[48] S. M. Soto, “Importance of Biofilms in Urinary Tract Infections: New
Therapeutic Approaches,” Adv. Biol., vol. 2014, pp. 1–13, 2014.
[49] S. Gao, G. D. Lewis, M. Ashokkumar, and Y. Hemar, “Inactivation of
microorganisms by low-frequency high-power ultrasound: 1. Effect of
growth phase and capsule properties of the bacteria,” Ultrason. Sonochem.,
vol. 21, no. 1, pp. 446–453, 2014.
[50] G. Besciak and J. Surmaez-Górska, “Biofilm As a Basic Life Form of
Bacteria,” pp. 1–8, 2011.
[51] Y. Asakura, “Experimental Methods in Sonochemistry,” in Sonochemistry
and the Acoustic Bubble, Elsevier Inc., 2015, pp. 119–150.
[52] N. P. K. Ellens and K. H. Hynynen, “High-intensity focussed ultrasound for
medical therapy,” in Power Ultrasonics: A Handbook of Applications of
High Power Ultrasound Transducers, Elsevier Ltd., 2014, pp. 661–693.
[53] K. Ramberg, T. B. Melø, and A. Johnsson, “In situ Assessment of
Porphyrin Photosensitizers in Propionibacterium acnes,” Zeitschrift fur
Naturforsch. - Sect. C J. Biosci., vol. 59, no. 1–2, pp. 93–98, 2004.
[54] P. Papageorgiou, A. Katsambas, and A. Chu, “Phototherapy with blue (415
nm) and red\n(660 nm) light in the treatment of acne vulgaris.,” Br J
Dermatol., no. 142(5), pp. 973–8, 2000.
[55] N. L. Leech, K. C. Barrett, and G. A. Morgan, IBM SPSS for Intermediate
Statistics: Use and Interpretation, 5th ed. New York & London, 2015.
[56] Y. Nitzan and M. Kauffman, “Endogenous porphyrin production in bacteria
by delta-aminolaevulinic acid and subsequent bacterial photoeradication,”
Lasers Med. Sci., vol. 14, no. 4, pp. 269–277, 1999.
[57] Y. Nitzan, M. Salmon-Divon, E. Shporen, and Z. Malik, “ALA induced
photodynamic effects on gram positive and negative bacteria.,” Photochem.
Photobiol. Sci., vol. 3, no. 5, pp. 430–435, 2004.
[58] M. Eichler, R. Lavi, A. Shainberg, and R. Lubart, “Flavins are Source of
Visible-Light-Induced Free Radical Formation in Cells,” Lasers Surg.
Med., vol. 37, no. August, pp. 314–319, 2005.
[59] D. R. Cardoso, S. H. Libardi, and L. H. Skibsted, “Riboflavin as a
photosensitizer . Effects on human health and food quality,” Food Funct.,
vol. 3, pp. 487–502, 2012.
[60] G. Sandmann, “Carotenoid biosynthesis in microorganisms and plants,”
Eur. J. Biochem., vol. 24, pp. 7–24, 1994.
58
[61] J. Paniagua-Michel, J. Olmos-soto, and M. A. Ruiz, “Pathways of
Carotenoid Biosynthesis in Bacteria and Microalgae,” in Microbial
Carotenoids from Bacteria and Microalgae: Methods and Protocols,
Methods in Molecular Biology, vol. 892, J.-L. Barredo, Ed. Springer
Science+ business Media, pp. 1–12.
[62] J. T. Landrum, Carotenoids :Physical, Chemical, and Biological Functions
and Properties. 2010.
[63] F. X. Cunningham and E. Gantt, “GENES AND ENZYMES OF
CAROTENOID BIOSYNTHESIS IN PLANTS,” Annu. Rev. Plant
Physiol. Plant Mol. Biol., vol. 49, pp. 557–583, 1998.
[64] I. Krinsky, “Carotenoid chromophore length and protection against
photosensitization,” Photochem. Photobiol, vol. 19, no. 3, pp. 217–222,
1974.
[65] J. H. Marshall and G. J. Wilmoth, “Pigments of Staphylococcus aureus , a
Series of Triterpenoid Carotenoids,” J. Bacteriol., vol. 147, no. 3, pp. 900–
913, 1981.
[66] A. Pelz, K. Wieland, K. Putzbach, P. Hentschel, K. Albert, and F. Go,
“Structure and Biosynthesis of Staphyloxanthin from Staphylococcus
aureus *,” J. Biol. Chem., vol. 280, no. 37, pp. 32493–32498, 2005.
[67] K. J. Scott, “Detection and Measurement of Carotenoids by UV / VIS
Spectrophotometry.” John Wiley & Sons, pp. 1–10, 2001.
[68] L.-Y. ZANG, O. SOMMERBURG, and F. J. G. M. VAN KUIJK,
“ABSORBANCE CHANGES OF CAROTENOIDS IN DIFFERENT
SOLVENTS,” Free Radic. Biol. Med., vol. 23, no. 7, pp. 1086–1089, 1997.
[69] M. Fontes, R. Ruiz-vazquez, and F. J. Murillo, “Growth phase dependence
of the activation of a bacterial gene for carotenoid synthesis by blue light,”
EMBO J., vol. 12, no. 4, pp. 1265–1275, 1993.
[70] Y. Zheng, M. Toyofuku, N. Nomura, and S. Shigeto, “Correlation of
Carotenoid Accumulation with Aggregation and Biofilm Development in
Rhodococcus sp. SD-74,” Anal. Chem., vol. 85, pp. 7295–7301, 2013.
[71] N. I. KRINSKY, S. T. MAYNE, and H. SIES, Carotenoids in Health and
Disease. New York, 2004.
[72] J. Chen, M. Jarvi, P. Lo, K. Stefflova, C. Wilson, and G. Zheng, “Using the
singlet oxygen scavenging property of carotenoid in photodynamic
molecular beacons to minimize photodamage to non-targeted cells †,”
Photochem. Photobiol. Sci., vol. 6, pp. 1311–1317, 2007.
[73] C. Hsu, P. Chao, S. Hu, and C. Yang, “The Antioxidant and Free Radical
Scavenging Activities of Chlorophylls and Pheophytins,” Food Nutr. Sci.,
vol. 2013, no. August, pp. 1–8, 2013.
59
60
LAMPIRAN
4..1 Lampiran I. Karakteristik Laser
Pengukuran daya laser terhadap waktu
8.43E-02 1 8.30E-02 39 8.28E-02 77 8.25E-02 115
61
8.25E-02 153 8.24E-02 196 8.24E-02 239 8.23E-02 282 8.23E-02 325 8.23E-02 368
8.25E-02 154 8.24E-02 197 8.24E-02 240 8.23E-02 283 8.23E-02 326 8.23E-02 369
8.25E-02 155 8.24E-02 198 8.24E-02 241 8.24E-02 284 8.23E-02 327 8.23E-02 370
8.25E-02 156 8.24E-02 199 8.24E-02 242 8.23E-02 285 8.23E-02 328 8.23E-02 371
8.25E-02 157 8.24E-02 200 8.24E-02 243 8.23E-02 286 8.23E-02 329 8.23E-02 372
8.25E-02 158 8.24E-02 201 8.24E-02 244 8.23E-02 287 8.23E-02 330 8.23E-02 373
8.25E-02 159 8.24E-02 202 8.24E-02 245 8.23E-02 288 8.23E-02 331 8.23E-02 374
8.25E-02 160 8.24E-02 203 8.24E-02 246 8.23E-02 289 8.23E-02 332 8.23E-02 375
8.25E-02 161 8.24E-02 204 8.24E-02 247 8.23E-02 290 8.23E-02 333 8.23E-02 376
8.25E-02 162 8.24E-02 205 8.24E-02 248 8.23E-02 291 8.23E-02 334 8.23E-02 377
8.25E-02 163 8.24E-02 206 8.24E-02 249 8.23E-02 292 8.23E-02 335 8.23E-02 378
8.25E-02 164 8.24E-02 207 8.24E-02 250 8.23E-02 293 8.23E-02 336 8.23E-02 379
8.25E-02 165 8.24E-02 208 8.24E-02 251 8.23E-02 294 8.23E-02 337 8.23E-02 380
8.25E-02 166 8.24E-02 209 8.24E-02 252 8.23E-02 295 8.23E-02 338 8.23E-02 381
8.25E-02 167 8.24E-02 210 8.24E-02 253 8.23E-02 296 8.23E-02 339 8.23E-02 382
8.25E-02 168 8.24E-02 211 8.24E-02 254 8.23E-02 297 8.23E-02 340 8.23E-02 383
8.25E-02 169 8.24E-02 212 8.24E-02 255 8.23E-02 298 8.23E-02 341 8.23E-02 384
8.25E-02 170 8.24E-02 213 8.24E-02 256 8.23E-02 299 8.23E-02 342 8.23E-02 385
8.25E-02 171 8.24E-02 214 8.24E-02 257 8.23E-02 300 8.23E-02 343 8.23E-02 386
8.25E-02 172 8.24E-02 215 8.24E-02 258 8.23E-02 301 8.23E-02 344 8.23E-02 387
8.25E-02 173 8.24E-02 216 8.24E-02 259 8.23E-02 302 8.23E-02 345 8.23E-02 388
8.25E-02 174 8.24E-02 217 8.24E-02 260 8.23E-02 303 8.23E-02 346 8.23E-02 389
8.25E-02 175 8.24E-02 218 8.24E-02 261 8.23E-02 304 8.23E-02 347 8.23E-02 390
8.25E-02 176 8.24E-02 219 8.24E-02 262 8.23E-02 305 8.23E-02 348 8.23E-02 391
8.24E-02 177 8.24E-02 220 8.24E-02 263 8.23E-02 306 8.23E-02 349 8.23E-02 392
8.24E-02 178 8.24E-02 221 8.24E-02 264 8.23E-02 307 8.23E-02 350 8.23E-02 393
8.24E-02 179 8.24E-02 222 8.24E-02 265 8.23E-02 308 8.23E-02 351 8.23E-02 394
8.24E-02 180 8.24E-02 223 8.24E-02 266 8.23E-02 309 8.23E-02 352 8.23E-02 395
8.24E-02 181 8.24E-02 224 8.24E-02 267 8.23E-02 310 8.23E-02 353 8.23E-02 396
8.24E-02 182 8.24E-02 225 8.24E-02 268 8.23E-02 311 8.23E-02 354 8.23E-02 397
8.24E-02 183 8.24E-02 226 8.24E-02 269 8.23E-02 312 8.23E-02 355 8.23E-02 398
8.24E-02 184 8.24E-02 227 8.24E-02 270 8.23E-02 313 8.23E-02 356 8.23E-02 399
8.24E-02 185 8.24E-02 228 8.24E-02 271 8.23E-02 314 8.23E-02 357 8.23E-02 400
8.24E-02 186 8.24E-02 229 8.24E-02 272 8.23E-02 315 8.23E-02 358 8.23E-02 401
8.24E-02 187 8.24E-02 230 8.24E-02 273 8.23E-02 316 8.23E-02 359 8.23E-02 402
8.24E-02 188 8.24E-02 231 8.24E-02 274 8.23E-02 317 8.23E-02 360 8.23E-02 403
8.24E-02 189 8.24E-02 232 8.24E-02 275 8.23E-02 318 8.23E-02 361 8.23E-02 404
8.24E-02 190 8.24E-02 233 8.24E-02 276 8.23E-02 319 8.23E-02 362 8.23E-02 405
8.24E-02 191 8.24E-02 234 8.24E-02 277 8.23E-02 320 8.23E-02 363 8.23E-02 406
8.24E-02 192 8.24E-02 235 8.23E-02 278 8.23E-02 321 8.23E-02 364 8.23E-02 407
8.24E-02 193 8.24E-02 236 8.24E-02 279 8.23E-02 322 8.23E-02 365 8.23E-02 408
8.24E-02 194 8.24E-02 237 8.24E-02 280 8.23E-02 323 8.23E-02 366 8.23E-02 409
8.24E-02 195 8.24E-02 238 8.23E-02 281 8.23E-02 324 8.23E-02 367 8.23E-02 410
62
8.23E-02 411
8.23E-02 412
8.23E-02 413
8.23E-02 414
8.23E-02 415
8.23E-02 416
8.23E-02 417
8.23E-02 418
8.23E-02 419
8.23E-02 420
8.23E-02 421
8.23E-02 422
8.23E-02 423
8.23E-02 424
8.23E-02 425
8.22E-02 426
8.23E-02 427
8.23E-02 428
8.23E-02 429
8.23E-02 430
8.23E-02 431
8.22E-02 432
8.23E-02 433
8.22E-02 434
8.23E-02 435
8.22E-02 436
8.22E-02 437
8.22E-02 438
8.22E-02 439
8.22E-02 440
8.22E-02 441
8.22E-02 442
8.22E-02 443
8.22E-02 444
8.22E-02 445
8.22E-02 446
8.22E-02 447
8.22E-02 448
8.22E-02 449
8.22E-02 450
8.22E-02 451
8.22E-02 452
8.22E-02 453
63
8.22E-02 454 8.22E-02 497 8.22E-02 540 8.22E-02 583 8.22E-02 626 8.21E-02 669
8.22E-02 455 8.22E-02 498 8.22E-02 541 8.22E-02 584 8.22E-02 627 8.21E-02 670
8.22E-02 456 8.22E-02 499 8.22E-02 542 8.22E-02 585 8.22E-02 628 8.21E-02 671
8.22E-02 457 8.22E-02 500 8.22E-02 543 8.22E-02 586 8.22E-02 629 8.21E-02 672
8.22E-02 458 8.22E-02 501 8.22E-02 544 8.22E-02 587 8.22E-02 630 8.21E-02 673
8.22E-02 459 8.22E-02 502 8.22E-02 545 8.22E-02 588 8.22E-02 631 8.21E-02 674
8.22E-02 460 8.22E-02 503 8.22E-02 546 8.22E-02 589 8.22E-02 632 8.21E-02 675
8.22E-02 461 8.22E-02 504 8.22E-02 547 8.22E-02 590 8.22E-02 633 8.21E-02 676
8.22E-02 462 8.22E-02 505 8.22E-02 548 8.22E-02 591 8.21E-02 634 8.21E-02 677
8.22E-02 463 8.22E-02 506 8.22E-02 549 8.22E-02 592 8.22E-02 635 8.21E-02 678
8.22E-02 464 8.22E-02 507 8.22E-02 550 8.22E-02 593 8.21E-02 636 8.21E-02 679
8.22E-02 465 8.22E-02 508 8.22E-02 551 8.22E-02 594 8.22E-02 637 8.21E-02 680
8.22E-02 466 8.22E-02 509 8.22E-02 552 8.22E-02 595 8.21E-02 638 8.21E-02 681
8.22E-02 467 8.22E-02 510 8.22E-02 553 8.22E-02 596 8.21E-02 639 8.21E-02 682
8.22E-02 468 8.22E-02 511 8.22E-02 554 8.22E-02 597 8.22E-02 640 8.21E-02 683
8.22E-02 469 8.22E-02 512 8.22E-02 555 8.22E-02 598 8.22E-02 641 8.21E-02 684
8.22E-02 470 8.22E-02 513 8.22E-02 556 8.22E-02 599 8.22E-02 642 8.21E-02 685
8.22E-02 471 8.22E-02 514 8.22E-02 557 8.22E-02 600 8.22E-02 643 8.21E-02 686
8.22E-02 472 8.22E-02 515 8.22E-02 558 8.22E-02 601 8.22E-02 644 8.21E-02 687
8.22E-02 473 8.22E-02 516 8.22E-02 559 8.22E-02 602 8.21E-02 645 8.21E-02 688
8.22E-02 474 8.22E-02 517 8.22E-02 560 8.22E-02 603 8.22E-02 646 8.21E-02 689
8.22E-02 475 8.22E-02 518 8.22E-02 561 8.22E-02 604 8.22E-02 647 8.21E-02 690
8.22E-02 476 8.22E-02 519 8.22E-02 562 8.22E-02 605 8.22E-02 648 8.21E-02 691
8.22E-02 477 8.22E-02 520 8.22E-02 563 8.22E-02 606 8.22E-02 649 8.21E-02 692
8.22E-02 478 8.22E-02 521 8.22E-02 564 8.22E-02 607 8.22E-02 650 8.21E-02 693
8.22E-02 479 8.22E-02 522 8.22E-02 565 8.22E-02 608 8.21E-02 651 8.21E-02 694
8.22E-02 480 8.22E-02 523 8.22E-02 566 8.22E-02 609 8.21E-02 652 8.21E-02 695
8.22E-02 481 8.22E-02 524 8.22E-02 567 8.22E-02 610 8.22E-02 653 8.21E-02 696
8.22E-02 482 8.22E-02 525 8.22E-02 568 8.22E-02 611 8.21E-02 654 8.21E-02 697
8.22E-02 483 8.22E-02 526 8.22E-02 569 8.22E-02 612 8.21E-02 655 8.21E-02 698
8.22E-02 484 8.22E-02 527 8.22E-02 570 8.22E-02 613 8.22E-02 656 8.21E-02 699
8.22E-02 485 8.22E-02 528 8.22E-02 571 8.22E-02 614 8.22E-02 657 8.21E-02 700
8.22E-02 486 8.22E-02 529 8.22E-02 572 8.22E-02 615 8.21E-02 658 8.21E-02 701
8.22E-02 487 8.22E-02 530 8.22E-02 573 8.22E-02 616 8.21E-02 659 8.21E-02 702
8.22E-02 488 8.22E-02 531 8.22E-02 574 8.22E-02 617 8.21E-02 660 8.21E-02 703
8.22E-02 489 8.22E-02 532 8.22E-02 575 8.22E-02 618 8.21E-02 661 8.21E-02 704
8.22E-02 490 8.22E-02 533 8.22E-02 576 8.22E-02 619 8.21E-02 662 8.21E-02 705
8.22E-02 491 8.22E-02 534 8.22E-02 577 8.22E-02 620 8.21E-02 663 8.21E-02 706
8.22E-02 492 8.22E-02 535 8.22E-02 578 8.22E-02 621 8.21E-02 664 8.21E-02 707
8.22E-02 493 8.22E-02 536 8.22E-02 579 8.22E-02 622 8.21E-02 665 8.21E-02 708
8.22E-02 494 8.22E-02 537 8.22E-02 580 8.22E-02 623 8.21E-02 666 8.21E-02 709
8.22E-02 495 8.22E-02 538 8.22E-02 581 8.22E-02 624 8.21E-02 667 8.21E-02 710
8.22E-02 496 8.22E-02 539 8.22E-02 582 8.22E-02 625 8.21E-02 668 8.21E-02 711
64
8.21E-02 712
8.21E-02 713
8.21E-02 714
8.21E-02 715
8.21E-02 716
8.21E-02 717
8.21E-02 718
8.21E-02 719
8.21E-02 720
8.21E-02 721
8.21E-02 722
8.21E-02 723
8.21E-02 724
8.21E-02 725
8.21E-02 726
8.21E-02 727
8.21E-02 728
8.21E-02 729
8.21E-02 730
8.21E-02 731
8.21E-02 732
8.21E-02 733
8.21E-02 734
8.21E-02 735
8.21E-02 736
8.21E-02 737
8.21E-02 738
8.21E-02 739
8.21E-02 740
8.21E-02 741
8.21E-02 742
8.21E-02 743
8.21E-02 744
8.21E-02 745
8.21E-02 746
8.21E-02 747
8.21E-02 748
8.21E-02 749
8.21E-02 750
8.21E-02 751
8.21E-02 752
8.21E-02 753
8.21E-02 754
65
8.21E-02 755 8.21E-02 798 8.21E-02 841 8.21E-02 884 8.21E-02 927 8.21E-02 970
8.21E-02 756 8.21E-02 799 8.21E-02 842 8.21E-02 885 8.21E-02 928 8.21E-02 971
8.21E-02 757 8.21E-02 800 8.21E-02 843 8.21E-02 886 8.21E-02 929 8.21E-02 972
8.21E-02 758 8.21E-02 801 8.21E-02 844 8.21E-02 887 8.21E-02 930 8.21E-02 973
8.21E-02 759 8.21E-02 802 8.21E-02 845 8.21E-02 888 8.21E-02 931 8.21E-02 974
8.21E-02 760 8.21E-02 803 8.21E-02 846 8.21E-02 889 8.21E-02 932 8.21E-02 975
8.21E-02 761 8.21E-02 804 8.21E-02 847 8.21E-02 890 8.21E-02 933 8.21E-02 976
8.21E-02 762 8.21E-02 805 8.21E-02 848 8.21E-02 891 8.21E-02 934 8.21E-02 977
8.21E-02 763 8.21E-02 806 8.21E-02 849 8.21E-02 892 8.21E-02 935 8.21E-02 978
8.21E-02 764 8.21E-02 807 8.21E-02 850 8.21E-02 893 8.21E-02 936 8.21E-02 979
8.21E-02 765 8.21E-02 808 8.21E-02 851 8.21E-02 894 8.21E-02 937 8.21E-02 980
8.21E-02 766 8.21E-02 809 8.21E-02 852 8.21E-02 895 8.21E-02 938 8.21E-02 981
8.21E-02 767 8.21E-02 810 8.21E-02 853 8.21E-02 896 8.21E-02 939 8.21E-02 982
8.21E-02 768 8.21E-02 811 8.21E-02 854 8.21E-02 897 8.21E-02 940 8.21E-02 983
8.21E-02 769 8.21E-02 812 8.21E-02 855 8.21E-02 898 8.21E-02 941 8.21E-02 984
8.21E-02 770 8.21E-02 813 8.21E-02 856 8.21E-02 899 8.21E-02 942 8.21E-02 985
8.21E-02 771 8.21E-02 814 8.21E-02 857 8.21E-02 900 8.21E-02 943 8.21E-02 986
8.21E-02 772 8.21E-02 815 8.21E-02 858 8.21E-02 901 8.21E-02 944 8.21E-02 987
8.21E-02 773 8.21E-02 816 8.21E-02 859 8.21E-02 902 8.21E-02 945 8.21E-02 988
8.21E-02 774 8.21E-02 817 8.21E-02 860 8.21E-02 903 8.21E-02 946 8.21E-02 989
8.21E-02 775 8.21E-02 818 8.21E-02 861 8.21E-02 904 8.21E-02 947 8.21E-02 990
8.21E-02 776 8.21E-02 819 8.21E-02 862 8.21E-02 905 8.21E-02 948 8.21E-02 991
8.21E-02 777 8.21E-02 820 8.21E-02 863 8.21E-02 906 8.21E-02 949 8.21E-02 992
8.21E-02 778 8.21E-02 821 8.21E-02 864 8.21E-02 907 8.21E-02 950 8.21E-02 993
8.21E-02 779 8.21E-02 822 8.21E-02 865 8.21E-02 908 8.21E-02 951 8.21E-02 994
8.21E-02 780 8.21E-02 823 8.21E-02 866 8.21E-02 909 8.21E-02 952 8.21E-02 995
8.21E-02 781 8.21E-02 824 8.21E-02 867 8.21E-02 910 8.21E-02 953 8.21E-02 996
8.21E-02 782 8.21E-02 825 8.21E-02 868 8.21E-02 911 8.21E-02 954 8.21E-02 997
8.21E-02 783 8.21E-02 826 8.21E-02 869 8.21E-02 912 8.21E-02 955 8.21E-02 998
8.21E-02 784 8.21E-02 827 8.21E-02 870 8.21E-02 913 8.21E-02 956 8.21E-02 999
8.21E-02 785 8.21E-02 828 8.21E-02 871 8.21E-02 914 8.21E-02 957 8.21E-02 1000
8.21E-02 786 8.21E-02 829 8.21E-02 872 8.21E-02 915 8.21E-02 958 8.21E-02 1001
8.21E-02 787 8.21E-02 830 8.21E-02 873 8.21E-02 916 8.21E-02 959 8.21E-02 1002
8.21E-02 788 8.21E-02 831 8.21E-02 874 8.21E-02 917 8.21E-02 960 8.21E-02 1003
8.21E-02 789 8.21E-02 832 8.21E-02 875 8.21E-02 918 8.21E-02 961 8.21E-02 1004
8.21E-02 790 8.21E-02 833 8.21E-02 876 8.21E-02 919 8.21E-02 962 8.21E-02 1005
8.21E-02 791 8.21E-02 834 8.21E-02 877 8.21E-02 920 8.21E-02 963 8.21E-02 1006
8.21E-02 792 8.21E-02 835 8.21E-02 878 8.21E-02 921 8.21E-02 964 8.21E-02 1007
8.21E-02 793 8.21E-02 836 8.21E-02 879 8.21E-02 922 8.21E-02 965 8.21E-02 1008
8.21E-02 794 8.21E-02 837 8.21E-02 880 8.21E-02 923 8.21E-02 966 8.21E-02 1009
8.21E-02 795 8.21E-02 838 8.21E-02 881 8.21E-02 924 8.21E-02 967 8.21E-02 1010
8.21E-02 796 8.21E-02 839 8.21E-02 882 8.21E-02 925 8.21E-02 968 8.21E-02 1011
8.21E-02 797 8.21E-02 840 8.21E-02 883 8.21E-02 926 8.21E-02 969 8.21E-02 1012
66
8.21E-02 1013
8.21E-02 1014
8.21E-02 1015
8.21E-02 1016
8.21E-02 1017
8.21E-02 1018
8.20E-02 1019
8.21E-02 1020
8.20E-02 1021
8.21E-02 1022
8.21E-02 1023
8.20E-02 1024
8.21E-02 1025
8.21E-02 1026
8.21E-02 1027
8.21E-02 1028
8.20E-02 1029
8.21E-02 1030
8.21E-02 1031
8.21E-02 1032
8.20E-02 1033
8.20E-02 1034
8.20E-02 1035
8.20E-02 1036
8.21E-02 1037
8.20E-02 1038
8.20E-02 1039
8.21E-02 1040
8.21E-02 1041
8.21E-02 1042
8.21E-02 1043
8.20E-02 1044
8.21E-02 1045
8.21E-02 1046
8.21E-02 1047
8.20E-02 1048
8.21E-02 1049
8.20E-02 1050
8.20E-02 1051
8.20E-02 1052
8.21E-02 1053
8.20E-02 1054
8.21E-02 1055
67
8.21E-02 1056 8.21E-02 1064 8.21E-02 1072 8.20E-02 1080 8.20E-02 1088 8.20E-02 1096
8.20E-02 1057 8.20E-02 1065 8.20E-02 1073 8.20E-02 1081 8.20E-02 1089 8.20E-02 1097
8.20E-02 1058 8.20E-02 1066 8.20E-02 1074 8.20E-02 1082 8.20E-02 1090 8.20E-02 1098
8.20E-02 1059 8.21E-02 1067 8.20E-02 1075 8.20E-02 1083 8.20E-02 1091 8.20E-02 1099
8.21E-02 1060 8.20E-02 1068 8.20E-02 1076 8.20E-02 1084 8.20E-02 1092 8.20E-02 1100
8.21E-02 1061 8.20E-02 1069 8.20E-02 1077 8.20E-02 1085 8.20E-02 1093 8.20E-02 1101
8.20E-02 1062 8.20E-02 1070 8.21E-02 1078 8.20E-02 1086 8.20E-02 1094
8.20E-02 1063 8.20E-02 1071 8.20E-02 1079 8.20E-02 1087 8.20E-02 1095
68
1.42E-02 W
1.42E-02 1.42E-02 W
1.42E-02 W 402
1.13E-02 W
1.13E-02 1.13E-02 W
1.13E-02 W 401
9.71E-03 W
9.72E-03 9.71E-03 W
9.71E-03 W 400
69
4..2 Lampiran 2. Pengukuran Daya Keluaran Ultrasound
Penghitungan Daya Keluaran dari Transducer Ultrasound 1 MHz dengan Metode
Calorimetric
Jika energi ultrasound diberikan melalui sebuah medium seperti air, maka akan
direfleksikan dari batas medium seperti permukaan air dan dinding yang
mengandung air dan gelombang ultrasound tidak akan mentransmisikan ke segala
arah. Energi ultrasound tersebut diserap oleh medium dan diubah dalam bentuk
energi termal. Dari penjelasan ini, energi ultrasound dapat diukur dengan energi
termal yang dikeluarkan ke medium sebagai fungsi waktu pemaparan ultrasound.
Metode ini disebut dengan calorimetric method sebagai penentuan daya
ultrasound (Energi ultrasound per satuan waktu). Jika daya ultrasound P (W)
diberikan pada medium maka diperoleh persamaan:
�DT �
P = Cp.m. � �
�Dt �
Dimana M massa cairan, Cp adalah kapasitas panas cairan dan ∆T/∆t adalah laju
temperatur terhadap waktu.
Prosedur :
Pengukuran daya ultrasound dengan calorimetric
method dapat dilakukan secara langsung yaitu
menempatkan wadah air di atas transducer.
Sebelum ditempatkan di atas transducer, perlu
dilakukan penimbangan massa air yaitu selisih
antara wadah dan air 50 mL dan wadah kosong.
Diberikan gel ultrasound di atas transducer agar
gelombang ultrasound dapat merambat pada
dinding wadah. Selanjutnya wadah ditempatkan di
atas transducer dan diberikan termometer digital.
Hasil
Pada daya ultrasound 1
t 0 1 2 3 4 5 6 7 8
Regression
Model Summary
Model R R Square Adjusted R Square Std. Error of the Estimate
1 .944a .890 .889 .14394
a. Predictors: (Constant), time
Coefficientsa
Unstandardized Coefficients Standardized Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) 303.225 .028 10838.583 .000
time .157 .006 .944 26.746 .000
a. Dependent Variable: temp_u3
Regression
Model Summary
Model R R Square Adjusted R Square Std. Error of the Estimate
1 .946a .895 .893 .18187
a. Predictors: (Constant), time
Coefficientsa
Unstandardized Coefficients Standardized Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) 303.195 .035 8577.356 .000
time .203 .007 .946 27.341 .000
a. Dependent Variable: temp_u4
Regression
Model Summary
Model R R Square Adjusted R Square Std. Error of the Estimate
1 .936a .875 .874 .23644
a. Predictors: (Constant), time
ANOVAb
Model Sum of Squares df Mean Square F Sig.
1 Regression 34.560 1 34.560 618.202 .000a
Residual 4.920 88 .056
Total 39.480 89
a. Predictors: (Constant), time
b. Dependent Variable: temp_u5
Coefficientsa
Unstandardized Coefficients Standardized Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) 303.242 .046 6598.571 .000
time .240 .010 .936 24.864 .000
a. Dependent Variable: temp_u5
Pada ultrasound 4
t 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 303 303.6 303.8 303.9 304.2 304.5 304.9 305.1 305.3
2 303 303.8 304.2 304.3 304.6 304.9 305.1 305.3 305.6
3 303 303.8 304.2 304.3 304.7 305.1 305.1 305.5 305.6
4 303 303.6 303.9 304.2 304.5 304.7 305.1 305.2 305.3
5 303 303.9 304.2 304.3 304.8 304.9 305.2 305.4 305.8
6 303 303.6 303.9 304.1 304.3 304.5 304.8 305.1 305.3
7 303 303.9 304.1 304.3 304.9 304.9 305.3 305.5 305.8
8 303 303.7 304.1 304.3 304.8 304.9 305.3 305.6 305.8
9 303 303.9 303.9 304.1 304.6 304.8 305.2 305.3 305.9
10 303 303.6 303.8 304.1 304.3 304.7 304.9 305.2 305.3
Regression
Model Summary
Model R R Square Adjusted R Square Std. Error of the Estimate
1 .964a .929 .929 .21315
a. Predictors: (Constant), time
Coefficientsa
Unstandardized Coefficients Standardized Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) 303.290 .041 7320.685 .000
time .296 .009 .964 34.054 .000
a. Dependent Variable: temp_u6
Pada ultrasound 5
t 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 303 303.5 303.9 304.3 304.7 304.8 305.2 305.5 305.9
2 303 303.2 303.7 303.9 304.2 304.6 304.9 305.2 305.4
3 303 303.7 304 304.3 304.5 304.9 305.2 305.6 305.8
4 303 303.6 303.9 304.3 304.8 304.9 305.2 305.3 305.8
5 303 303.8 304.1 304.5 304.6 305.2 305.3 305.7 306
6 303 303.6 303.9 304.3 304.6 305 305.2 305.6 305.9
7 303 303.8 304.1 304.4 304.8 305.1 305.3 305.6 305.9
8 303 303.6 304 304.3 304.7 304.9 305.2 305.6 305.8
9 303 303.4 303.9 304.2 304.6 304.8 305.1 305.4 305.8
10 303 303.3 303.8 304.1 304.3 304.6 304.9 305.2 305.4
Regression
Model Summary
Model R R Square Adjusted R Square Std. Error of the Estimate
1 .978a .956 .955 .18769
a. Predictors: (Constant), time
Regression
Model Summary
Std. Error of the Change Statistics
Model R R Square Adjusted R Square Estimate R Square Change F Change df1 df2 Sig. F Change
1 .998a .997 .995 .88122534 .997 867.478 1 3 .000
a. Predictors: (Constant), VAR00002
Coefficientsa
Standardized
Unstandardized Coefficients Coefficients
Model B Std. Error Beta t Sig.
1 (Constant) 4.131 1.448 2.853 .065
VAR00002 8.208 .279 .998 29.453 .000
a. Dependent Variable: VAR00001
79
Proses Tahap II
Model McFarland
80
4..5 Lampiran 5 Uji Toksik Chlorophyll terhadap jumlah
koloni
Konsentrasi Koloni Rerata Uji test-Paired Kesimpulan
Kontrol 36 35.5 NA -
(0) 34
31
41
20% 36 37.5 0.725 Tidak ada perbedaan bermakna
(1.6 g/mL) 37
44
32
40% 45 53.25 0.07 Ada perbedaan bermakna
(3.2 g/mL) 66
56
46
60% 86 90.25 0.001
(4.8 g/mL) 94
94
87
80% 124 122 0.000
(6.4 g/mL) 114
117
133
100% 177 183.5 0.000
(8 g/mL) 174
189
194
81
4..6 Lampiran 6 Data Pengamatan
Proses Sono tanpa Pemberian chlorophyll
I
US 8.28W us 16.73W us 23.52W us 33.80 W us 40.78W
82
12.6 1.93 9.64 1.95 8.71 2.00 6.41 1.99 6.51
1.868 3884 2 5738 2 0394 1 88 9 2335
7.02 1.89 11.1 2.10 1.60 2.08 2.44 2.03 4.73
1.988 6774 9 8906 4 1777 6 3587 7 5181
US
us 16.73W us 23.52W us 33.80 W us 40.78W
I 8.28W
83
3.78 1.56 6.85 1.75
1.6112 E+2 E+2 E+2 E+2
2E+21 7 5 2 4
1.88 1.21 1.39 7.94
5.0961 E+2 E+2 E+2 E+2
5E+27 6 7 6 6
8.23 4.91 1.67 3.98
6.4781 E+2 E+2 E+2 E+2
5 2.18 4.04 4.25 5.71 7.71 8.85 3.78
6E+27 4.9E #REF #RE 7 185. 6 134. 6 114. 6 3E+ 125.
me E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
+27 ! F! 2433 7.61 3276 8728 8.56 26 7599
nit 7 7 6 6 5 5 6
2.8425 4.2E E+2 8.5E E+2
3E+25 +25 0 +23 4
2.54 1.18 7.54
7.9916 E+2 9.3E E+2 E+2
3E+27 6 +23 4 3
1.55 4.83 3.92
6.1009 E+2 E+2 2.5E E+2
8E+27 8 8 +28 8
1.85 2.99 9.63 2.52
4.5199 E+2 E+2 E+2 E+2
6 8.24 2.83 1.98 2.56 1.61 2.84 5.18 5.77
9E+27 #REF #RE 8 70.0 8 5E+ 195. 8 176. 9 111.
me E+2 E+2 E+2 E+3 E+3 E+3 E+2 E+2
! F! 5.79 1827 1.05 30 2262 4.58 4153 4.32 4078
nit 8 8 8 0 0 0 9 9
8.4857 E+2 E+2 E+2 E+2
E+27 8 9 9 9
2.15 1.01 5.87 1.35
3.1033 E+2 E+3 E+3 E+3
8E+29 8 1 0 0
I
US 8.28W us 16.73W us 23.52W us 33.80 W us 40.78W
84
25.753 18.1 27.8 11.5 25.4 19.0 23.5 25.1 24.8 20.9
226 1073 1133 6642 5363 6338 2578 9349 6746 2726
25.167 19.9 25.7 18.2 23.9 23.8 20.9 33.2 24.5 22.0
3
056 7461 18.78 1.10 5.88 1415 3499 17.8 4.42 24.8 5564 2664 18.2 4.63 25.3 8571 7032 20.3 11.0 54.2 1576 456 17.1 5.47 31.8
me
25.336 19.4 37977 5408 4902 24.5 21.8 2079 5382 3269 25.8 17.7 9712 2648 1901 27.0 14.0 1632 1796 3204 28.2 10.1 8914 4019 458
nit
394 3616 8089 385 7046 3795 428 1018 6724 1674
25.909 17.6 25.2 19.6 27.4 12.5 28.6 8.79 26.5 15.6
538 1369 7126 4326 9871 605 8408 1307 2176 6697
24.151 23.2 21.9 30.1 26.7 15.0 26.7 15.0 20.0 36.1
028 0535 7569 2243 1715 4567 1715 4567 7389 697
25.688 18.3 23.7 24.4 22.0 29.7 24.4 22.3 26.2 16.4
4
096 1783 22.87 6.94 30.3 6025 4794 22.7 7.49 32.8 7989 9107 21.8 6.15 28.2 2457 3553 21.1 5.13 24.2 6124 9536 23.0 9.22 39.9
me
25.974 17.4 39884 5011 6204 23.8 24.2 8079 2369 8897 24.3 22.5 2814 7137 0734 25.1 19.8 6543 7192 7162 26.1 16.7 7073 6725 9321
nit
668 0659 2538 4084 4642 8405 9311 9177 9611 0246
21.207 32.5 27.5 12.3 25.1 19.8 22.8 27.3 24.2 22.9
152 6619 7687 1198 9311 9177 354 8873 4221 1541
27.707 11.8 26.2 16.4 27.0 13.8 26.1 16.8 26.8 14.4
126 9778 7427 5394 8188 8592 4401 6814 9951 658
27.811 11.5 27.9 11.2 26.6 15.1 26.2 16.6 26.5 15.4
5
334 6642 13.45 3.75 27.8 1554 3507 15.5 3.08 19.8 911 2851 21.6 9.13 42.2 2216 1962 20.2 4.01 19.8 9992 1845 18.6 4.53 24.2
me
25.453 19.0 10176 0175 8023 25.6 18.5 6342 3563 1289 20.8 33.6 0033 2407 7901 23.9 23.9 1278 1136 4456 24.9 20.7 6989 3828 8417
nit
628 6338 2297 2492 815 0168 2959 0948 3259 2017
27.902 11.2 26.4 16.0 23.9 23.7 24.0 23.4 23.8 24.0
516 7649 0453 3975 6866 8522 7287 5386 7748 7516
27.785 11.6 28.1 10.3 28.6 8.79 28.3 9.70 28.5 9.08
282 4926 8909 6525 8408 1307 975 2539 9289 1244
27.655 12.0 28.2 10.1 28.4 9.45 28.9 7.83 29.4 6.51
6
022 6346 10.28 2.72 26.5 6724 1674 9.73 0.81 8.37 7566 4021 6.84 3.68 53.8 8367 8655 6.34 3.23 50.9 0051 3226 6.38 2.03 31.9
me
27.928 11.1 24142 93 4338 28.7 8.54 3604 5434 7517 29.0 7.71 4583 7667 7717 29.6 5.68 7547 6215 8371 29.6 5.76 8967 87 0969
nit
568 9365 6223 2789 2275 4396 6103 4833 3497 7672
29.491 6.22 28.3 9.90 31.0 1.41 30.7 2.16 30.1 4.19
688 3288 3237 9637 027 8609 6824 4162 2996 3725
85
1.187 1.26E+09 19.05786 21.01426
1.546 3.88E+09 23.7342 1.633083
82.2mW 15 1.23 1.32225 0.159502 12.06293 2.129E+09 1.2E+09 56.5194195 13.71257444 8.6109682 62.79615
1.233 1.45E+09 19.65706 18.53087
1.323 1.93E+09 20.8294 13.67208
1.325 1.94E+09 20.85545 13.56411
1.368 2.22E+09 21.41557 11.24269
82.2mW 30 2.46 1.29025 0.077056 5.972154 1.775E+09 4.07E+08 22.9555707 15.44014418 4.1599726 26.94258
1.188 1.26E+09 19.07089 20.96027
1.28 1.68E+09 20.26928 15.99351
1.061 8.45E+08 17.41659 27.81656
1.385 2.34E+09 21.63701 10.32492
82.2mW 45 3.69 1.303 0.161586 12.40107 1.96E+09 7.46E+08 38.0858733 14.75181561 8.7234655 59.13486
1.372 2.25E+09 21.46767 11.02674
1.394 2.41E+09 21.75424 9.839039
1.304 1.81E+09 20.5819 14.69783
1.247 1.52E+09 19.83942 17.77506
82.2mW 60 4.92 1.33825 0.076212 5.694891 2.063E+09 4.77E+08 23.102498 12.84878957 4.1144166 32.02182
1.396 2.42E+09 21.7803 9.731066
1.406 2.5E+09 21.91056 9.191201
1.155 1.14E+09 18.64103 22.74183
1.245 1.51E+09 19.81337 17.88304
82.2mW 75 6.15 1.2255 0.071561 5.839344 1.445E+09 3.35E+08 23.1822138 18.93577357 3.8633406 20.40234
1.185 1.25E+09 19.03181 21.12223
1.317 1.89E+09 20.75124 13.996
US 8.28mW + L 82.2 mW us 16.73mW + L 82.2 mW us 23.52mW + L 82.2 mW us 33.80 mW + L 82.2 mW us 40.78mW + L 82.2 mW
I
t
86
data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD
kont 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994
- - - - -
rol 25 266 56 25 266 56 25 266 56 25 266 56 25 266 56
2.15 2.15 2.15 2.15 2.15
US 8.28mW + L 82.2 mW us 16.73mW + L 82.2 mW us 23.52mW + L 82.2 mW us 33.80 mW + L 82.2 mW us 40.78mW + L 82.2 mW
I
t
87
data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
1.49E 1.49E 1.49E 1.49E 1.49E
+31 +31 +31 +31 +31
1.83E 1.83E 1.83E 1.83E 1.83E
kont +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88
rol 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052
1 1 1 1 1
5.73E 5.73E 5.73E 5.73E 5.73E
+31 +31 +31 +31 +31
2.63E 3.25E 1.61E 1.22E 2.46E
+27 +27 +25 +28 +26
6.63E 2.48E 2.64E 4.33E 1.16E
3
+26 2.83E 3.62E 128.0 +27 1.02E 1.04E 102.0 +23 2.49E 4.92E 197.6 +25 3.06E 6.07E 198.0 +25 1.14E 1.25E 110.0
meni
1.87E +27 +27 03 1.02E +28 +28 834 9.86E +27 +27 911 3.7E+ +27 +27 374 1.94E +26 +26 044
t
+25 +28 +27 24 +26
7.99E 2.5E+ 6.99E 4.33E 2.5E+
+27 28 +25 +25 24
1.67E 1.55E 3.08E 1.47E 3.15E
+26 +28 +28 +25 +27
1.8E+ 1.25E 1.39E 7.88E 4.73E
4
28 8.77E 9.24E 105.3 +28 8.82E 6.78E 76.84 +26 9.72E 1.45E 149.3 +25 4.21E 2.92E 69.35 +25 2.33E 2.91E 124.8
meni
1.55E +27 +27 893 1.02E +27 +27 404 7.76E +27 +28 906 2.3E+ +25 +25 883 6.1E+ +27 +27 188
t
+28 +24 +27 25 27
1.49E 7.3E+ 1.57E 5.18E 2.6E+
+27 27 +26 +25 25
5.29E 1.15E 1.47E 1.11E 7.99E
+28 +29 +25 +28 +27
3.15E 1.21E 2E+2 1.88E 3.58E
5
+27 2.01E 2.23E 110.6 +27 3.28E 5.54E 169.0 6 4.15E 4.61E 111.1 +26 8.22E 5.36E 65.24 +28 1.55E 1.38E 88.70
meni
1.37E +28 +28 64 1.37E +28 +28 628 3.75E +26 +26 56 1.05E +27 +27 716 6.1E+ +28 +28 035
t
+28 +28 +26 +28 27
1.08E 7.7E+ 1.07E 1.11E 1.22E
+28 26 +27 +28 +28
7.25E 8.95E 1.74E 9.01E 1.38E
+26 +26 +28 +27 +29
4.69E 2.57E 8.6E+ 2.35E 1.09E
6
+28 1.21E 2.32E 191.5 +28 8.99E 1.19E 132.7 29 2.63E 4.01E 152.7 +28 2.11E 1.79E 84.73 +29 6.36E 7.01E 110.2
meni
3.23E +28 +28 315 9.28E +27 +28 027 4.98E +29 +29 482 4.55E +28 +28 4 7.3E+ +28 +28 341
t
+26 +27 +28 +28 27
4.91E 2.45E 1.22E 6.48E 3.64E
+26 +25 +29 +27 +26
US 8.28mW + L 82.2 mW us 16.73mW + L 82.2 mW us 23.52mW + L 82.2 mW us 33.80 mW + L 82.2 mW us 40.78mW + L 82.2 mW
I
t
88
data % eff rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
31.17 31.17 31.17 31.17 31.17
204 204 204 204 204
31.26 31.26 31.26 31.26 31.26
Kont 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880
- - - - -
rol 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837
19 19 19 19 19
31.75 31.75 31.75 31.75 31.75
821 821 821 821 821
27.42 12.80 27.51 12.51 25.20 19.85 28.08 10.69 26.39 16.08
055 901 174 908 613 035 488 661 15 117
26.82 14.71 27.39 12.89 23.42 25.52 25.63 18.48 25.06 20.30
3
136 432 14.61 3.637 24.89 45 185 11.51 1.473 12.79 157 485 18.54 6.002 32.36 599 351 17.38 4.738 27.25 285 597 18.80 3.079 16.37
meni
25.27 19.64 077 784 796 28.00 10.94 465 506 679 27.99 10.98 563 135 414 24.56 21.87 588 222 327 26.28 16.41 451 642 715
t
126 326 672 513 37 655 786 992 729 252
27.90 11.27 28.39 9.702 25.84 17.82 25.63 18.48 24.39 22.41
252 649 75 539 441 079 599 351 852 837
26.22 16.61 28.18 10.36 28.48 9.412 25.16 19.97 27.49 12.56
216 962 909 525 869 602 706 461 871 05
28.25 10.15 28.09 10.65 26.14 16.86 25.89 17.65 25.67 18.35
4
422 816 12.68 3.059 24.11 791 519 14.02 6.441 45.94 401 814 13.57 3.787 27.90 651 511 18.80 1.051 5.590 507 925 15.43 3.882 25.14
meni
28.18 10.36 475 265 765 24.00 23.66 054 732 497 27.88 11.31 528 955 334 25.36 19.35 451 317 771 27.78 11.64 916 784 893
t
909 525 774 096 949 791 245 332 528 926
27.17 13.59 27.86 11.40 26.19 16.70 25.71 18.23 25.41 19.18
306 599 344 074 611 246 415 499 455 764
28.72 8.667 29.06 7.590 25.16 19.97 28.04 10.82 27.90 11.27
315 048 183 137 706 461 58 087 252 649
27.49 12.56 27.08 13.88 26.30 16.37 26.27 16.45 28.55 9.205
5
871 05 10.65 1.595 14.97 188 592 11.62 3.209 27.59 032 11 16.47 2.521 15.30 427 394 12.24 2.803 22.88 382 503 10.70 1.074 10.04
meni
28.13 10.53 519 956 82 28.13 10.53 855 154 719 26.57 15.50 465 841 74 28.01 10.90 985 002 193 27.78 11.64 697 984 005
t
698 093 698 093 386 129 975 371 528 926
28.03 10.86 26.88 14.50 27.02 14.05 28.04 10.82 28.08 10.69
278 229 649 722 977 16 58 087 488 661
26.86 14.59 26.95 14.30 28.24 10.19 27.95 11.11 29.13 7.341
044 006 162 012 119 957 462 081 999 619
28.67 8.832 28.41 9.661 29.93 4.815 28.37 9.785 29.03 7.672
6
105 726 13.56 3.187 23.49 053 119 13.57 4.264 31.41 457 02 7.817 2.284 29.21 145 378 10.33 1.232 11.92 578 976 10.48 3.838 36.59
meni
26.50 15.70 492 677 941 27.96 11.06 528 615 457 28.69 8.749 945 348 929 28.65 8.874 419 133 288 27.86 11.40 951 718 577
t
873 839 765 939 71 887 802 146 344 074
26.69 15.12 25.38 19.27 29.08 7.507 27.81 11.56 26.56 15.54
11 851 85 048 788 298 133 642 084 271
89
data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD
kont 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994 2.124 2.138 0.021 0.994
- - - - -
rol 25 266 56 25 266 56 25 266 56 25 266 56 25 266 56
2.15 2.15 2.15 2.15 2.15
L 82.2 mW + US 8.28mW L 82.2 mW + us 16.73mW L 82.2 mW + us 23.52mW L 82.2 mW + us 33.80 mW L 82.2 mW +us 40.78mW
I
t
90
data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
1.49E 1.49E 1.49E 1.49E 1.49E
+31 +31 +31 +31 +31
1.83E 1.83E 1.83E 1.83E 1.83E
kont +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88 +31 3.26E 1.99E 60.88
rol 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052 4E+3 +31 +31 052
1 1 1 1 1
5.73E 5.73E 5.73E 5.73E 5.73E
+31 +31 +31 +31 +31
2.52E 4.59E 6.94E 3.43E 2.54E
+25 +25 +24 +26 +26
2.91E 4.46E 8.56E 5.75E 2.24E
3
+24 2.89E 2.01E 69.62 +25 3.58E 1.47E 41.14 +24 9.73E 3.97E 40.76 +27 1.75E 2.69E 153.3 +25 1.02E 1.09E 106.7
meni
3.72E +25 +25 107 1.43E +25 +25 347 7.83E +24 +24 745 9.22E +27 +27 241 1.1E+ +26 +26 143
t
+25 +25 +24 +26 26
5.03E 3.84E 1.56E 3.28E 2.3E+
+25 +25 +25 +24 25
7.19E 1.7E+ 2.97E 2.54E 1.85E
+29 29 +27 +26 +28
5.76E 3.94E 7.76E 5.18E 6.52E
4
+23 5.82E 4E+2 68.72 +29 1.84E 1.47E 79.75 +27 3.07E 3.32E 108.2 +25 8.67E 1.62E 186.9 +28 5.24E 5.09E 97.16
meni
6.97E +29 9 658 1.09E +29 +29 794 1.32E +27 +27 885 1.69E +28 +29 782 7.09E +28 +28 038
t
+29 +29 +27 +28 +27
9.14E 6.33E 2.25E 3.3E+ 1.19E
+29 +28 +26 29 +29
1.21E 1.73E 8.64E 3.59E 1.24E
+23 +27 +21 +24 +22
8.29E 9.11E 6.36E 4.67E 2.78E
5
+28 2.07E 4.15E 199.9 +20 4.33E 8.65E 199.8 +20 1.28E 1.93E 151.0 +23 1.07E 1.69E 158.2 +22 5.95E 6.99E 117.4
meni
2.03E +28 +28 922 2.14E +26 +26 95 6.55E +22 +22 264 1.03E +24 +24 347 3.43E +22 +22 567
t
+24 +23 +20 +22 +22
2.8E+ 4.67E 4.11E 2.08E 1.63E
23 +23 +22 +23 +23
9.44E 1.17E 1.49E 3.45E 4.17E
+25 +27 +27 +27 +24
6.06E 5.75E 2.07E 3.86E 1.87E
6
+26 7.2E+ 7.07E 98.20 +27 2.05E 2.49E 121.4 +27 2.43E 1.17E 48.07 +26 2.67E 2.55E 95.35 +25 1.35E 7.54E 56.01
meni
4.49E 26 +26 94 8.43E +27 +27 977 4.13E +27 +27 233 5.92E +27 +27 946 1.06E +25 +24 934
t
+26 +26 +27 +27 +25
1.73E 4.23E 2.01E 9.22E 2.04E
+27 +26 +27 +26 +25
L 82.2 mW + US 8.28mW L 82.2 mW + us 16.73mW L 82.2 mW + us 23.52mW L 82.2 mW + us 33.80 mW L 82.2 mW +us 40.78mW
I
t
91
data % eff rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
31.17 31.17 31.17 31.17 31.17
204 204 204 204 204
31.26 31.26 31.26 31.26 31.26
Kont 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880 322 31.44 0.277 0.880
- - - - -
rol 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837 31.60 884 013 837
19 19 19 19 19
31.75 31.75 31.75 31.75 31.75
821 821 821 821 821
25.40 19.22 25.66 18.40 24.84 21.01 26.53 15.62 26.40 16.03
152 906 204 067 141 01 479 555 453 975
24.46 22.21 25.64 18.44 24.93 20.72 27.75 11.73 25.34 19.39
3
365 127 19.60 1.782 9.095 902 209 18.87 0.767 4.063 259 017 20.61 0.497 2.413 923 21 15.91 4.393 27.60 942 474 17.99 1.659 9.220
meni
25.57 18.69 184 81 118 25.15 20.01 699 103 691 24.89 20.84 662 611 639 26.96 14.25 549 478 505 26.03 17.19 682 33 125
t
086 06 403 603 351 443 464 87 98 95
25.70 18.27 25.58 18.64 25.19 19.89 24.51 22.04 25.36 19.35
112 641 389 918 311 177 576 56 245 332
29.85 5.063 29.23 7.051 27.47 12.64 26.40 16.03 28.26 10.11
642 538 117 681 266 333 453 975 724 674
23.76 24.44 29.59 5.891 27.88 11.31 25.71 18.23 28.81 8.377
4
025 794 9.837 9.741 99.03 59 931 7.258 1.068 14.72 949 791 13.48 2.072 15.36 415 499 12.66 5.503 43.45 434 11 9.371 1.746 18.64
meni
29.84 5.104 153 95 221 29.03 7.672 78 916 584 27.12 13.76 208 19 996 28.22 10.24 404 309 617 27.85 11.44 182 842 058
t
339 958 578 976 096 166 817 099 041 216
29.96 4.732 28.80 8.418 26.35 16.20 29.51 6.140 29.07 7.548
062 181 131 53 242 542 774 449 486 717
23.08 26.60 27.23 13.38 21.93 30.24 24.55 21.92 22.09 29.74
29 176 819 889 661 669 483 134 292 965
28.91 8.045 20.95 33.35 20.80 33.85 23.66 24.73 22.44 28.63
5
854 753 20.69 8.592 41.50 966 316 24.32 8.236 33.86 335 02 31.49 2.830 8.985 907 787 25.62 3.350 13.07 462 132 28.22 1.489 5.276
meni
24.30 22.70 946 257 958 23.33 25.81 368 021 01 20.81 33.80 963 385 454 22.01 29.99 84 728 428 22.53 28.34 748 333 18
t
734 831 039 478 637 878 476 817 58 138
23.44 25.44 23.66 24.73 22.61 28.09 23.31 25.85 23.21 26.18
762 201 907 787 396 286 736 62 316 756
25.97 17.40 27.06 13.92 27.17 13.59 27.53 12.43 24.61 21.71
467 659 885 734 306 599 779 624 996 424
26.78 14.83 27.75 11.73 27.31 13.14 26.58 15.45 25.27 19.64
6
228 858 15.22 1.661 10.91 923 21 13.84 1.525 11.01 635 037 13.02 0.595 4.573 689 987 13.46 1.714 12.73 126 326 20.32 1.009 4.964
meni
26.65 15.25 171 396 465 26.92 14.38 45 608 959 27.61 12.18 647 805 804 27.77 11.69 137 252 46 25.02 20.43 668 201 909
t
202 277 557 296 594 772 226 068 377 023
27.23 13.38 26.62 15.33 27.30 13.18 26.96 14.25 25.31 19.51
819 889 597 561 332 179 464 87 034 9
4..8
4..9 Sonodynamic dengan chlorophyll
US 8.28mW+PS us 16.73mW+PS us 23.52mW+PS us 33.80 mW+PS us 40.78mW+PS
I
t
92
data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD data %eff rerata SD %SD
kont 2.036 2.049 0.011 0.563 2.036 2.049 0.011 0.563 2.036 2.049 0.011 0.563 2.036 2.049 0.011 0.563 2.036 2.049 0.011 0.563
- - - - -
rol 75 558 865 75 558 865 75 558 865 75 558 865 75 558 865
2.062 2.062 2.062 2.062 2.062
US
us us us 33.80 us
8.28mW+
16.73mW+PS 23.52mW+PS mW+PS 40.78mW+PS
I PS
93
data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
5.46846E 5.47E 5.47E 5.47E 5.47E
+28 +28 +28 +28 +28
3.24864E 3.25E 3.25E 3.25E 3.25E
kont +28 4.8E+ 1.4E+ 29.12 +28 4.8E+ 1.4E+ 29.12 +28 4.8E+ 1.4E+ 29.12 +28 4.8E+ 1.4E+ 29.12 +28 4.8E+ 1.4E+ 29.12
rol 6.39314E 28 28 253 6.39E 28 28 253 6.39E 28 28 253 6.39E 28 28 253 6.39E 28 28 253
+28 +28 +28 +28 +28
4.10654E 4.11E 4.11E 4.11E 4.11E
+28 +28 +28 +28 +28
5.15419E 3.51E 5.66E 3.7E+ 4.09E
+24 +21 +25 28 +26
8.77416E 6.97E 1.48E 1.41E 1.19E
3
+23 1.61E 2.38E 147.6 +25 1.11E 1.68E 151.3 +26 1.4E+ 6.25E 44.55 +28 1.36E 1.67E 122.9 +27 6.4E+ 5.13E 80.19
men
2.26559E +24 +24 576 1.54E +26 +26 633 1.48E 26 +25 519 8.05E +28 +28 745 4.25E 26 +26 993
it
+23 +25 +26 +26 +25
1.9379E+ 3.59E 2.08E 2.4E+ 9.17E
23 +26 +26 27 +26
3.27371E 7.73E 8.58E 2.96E 1.5E+
+25 +25 +25 +27 27
9.0377E+ 7.62E 1.41E 1.49E 2.88E
4
25 5.3E+ 2.58E 48.63 +24 6.08E 6.15E 101.2 +26 6.31E 6.27E 99.27 +28 5.81E 6.04E 104.0 +27 1.93E 1.14E 59.20
men
4.83796E 25 +25 529 1.75E +25 +25 223 2.62E +25 +25 158 2.74E +27 +27 313 5.04E +27 +27 981
it
+25 +25 +24 +27 +26
4.03186E 1.41E 2.33E 2.67E 2.81E
+25 +26 +25 +27 +27
2.71856E 1.66E 1.86E 6.89E 1.5E+
+23 +25 +22 +26 27
1.33087E 2.07E 1.56E 6.97E 1.5E+
5
+24 3.2E+ 2.82E 88.27 +24 1.05E 6.98E 66.60 +24 7.2E+ 1.12E 155.8 +25 2.57E 3.08E 119.5 27 8.88E 7.18E 80.78
men
5.15419E 24 +24 051 7.42E +25 +24 046 4.97E 25 +26 96 7.62E +26 +26 655 1.56E +26 +26 385
it
+24 +24 +25 +24 +26
6.02573E 1.58E 2.37E 2.63E 3.88E
+24 +25 +26 +26 +26
3.10759E 8.71E 2.31E 8.84E 1.41E
+25 +26 +26 +27 +28
1.53852E 1.63E 6.61E 2.37E 1.24E
6
+25 1.07E 9.67E 90.68 +27 7.04E 7.03E 99.77 +25 2.79E 4.26E 152.4 +26 8.15E 7.13E 87.48 +26 4.35E 6.55E 150.4
men
1.82549E +26 +25 369 8.36E +26 +26 824 1.81E +27 +27 33 6.14E +27 +27 492 1.32E +27 +27 418
it
+26 +25 +27 +27 +27
1.9738E+ 2.37E 9.07E 1.74E 1.85E
26 +26 +27 +28 +27
94
data % eff rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD data rerata SD %SD
27.15297 13.65 27.15 13.65 27.15 13.65 27.15 13.65 27.15 13.65
394 986 297 986 297 986 297 986 297 986
26.91720 14.40 26.91 14.40 26.91 14.40 26.91 14.40 26.91 14.40
Kon 182 956 13.89 0.136 0.980 72 956 13.89 0.136 0.980 72 956 13.89 0.136 0.980 72 956 13.89 0.136 0.980 72 956 13.89 0.136 0.980
trol 27.22370 13.43 414 251 634 27.22 13.43 414 251 634 27.22 13.43 414 251 634 27.22 13.43 414 251 634 27.22 13.43 414 251 634
557 495 371 495 371 495 371 495 371 495
27.02329 14.07 27.02 14.07 27.02 14.07 27.02 14.07 27.02 14.07
927 219 33 219 33 219 33 219 33 219
22.95623 27.00 19.65 37.50 24.04 23.55 26.97 14.22 24.93 20.70
02 452 542 033 078 59 614 213 672 704
22.15460 29.55 24.13 23.25 24.47 22.16 26.53 15.60 25.42 19.17
3
499 351 29.94 2.191 7.316 509 602 26.77 7.389 27.60 696 896 22.39 0.808 3.608 997 908 16.93 2.479 14.64 005 015 20.84 2.180 10.46
men
21.54159 31.50 71 191 874 23.45 25.43 024 298 265 24.47 22.16 387 032 274 25.24 19.73 042 189 34 23.91 23.96 761 88 106
it
748 273 135 015 696 896 322 243 111 824
21.47086 31.72 24.87 20.89 24.63 21.68 25.73 18.15 25.30 19.54
584 764 777 447 021 165 834 806 216 5
23.79322 24.34 24.18 23.10 24.22 22.95 25.83 17.85 25.52 18.83
123 309 225 608 94 614 265 818 615 279
24.25297 22.88 23.13 26.44 24.45 22.24 26.56 15.53 25.82 17.89
4
686 117 23.76 0.630 2.653 306 225 24.25 1.925 7.937 338 393 24.50 2.561 10.45 354 411 17.34 1.207 6.962 086 566 18.76 1.176 6.266
men
23.97005 23.78 207 596 791 23.51 25.24 875 62 839 22.64 27.97 24 698 489 25.79 17.97 276 45 274 25.03 20.40 719 009 301
it
032 081 029 273 973 914 728 063 102 716
23.88753 24.04 24.45 22.24 23.63 24.83 25.78 18.00 25.80 17.93
007 321 338 393 997 039 55 812 907 315
21.624117 31.24 23.48 25.31 20.40 35.10 25.17 19.95 25.52 18.83
72 033 672 77 989 129 249 734 615 279
22.34322 28.95 22.54 28.31 22.41 28.72 24.13 23.25 25.52 18.83
5
269 375 28.49 2.074 7.280 363 65 26.37 1.398 5.300 395 884 27.26 6.034 22.13 509 602 22.74 2.808 12.34 615 279 20.13 1.596 7.929
men
22.95623 27.00 455 557 539 23.12 26.47 665 004 157 23.98 23.74 692 74 209 23.13 26.44 997 543 526 24.50 22.09 539 638 508
it
02 452 127 973 184 333 306 225 054 399
23.02696 26.77 23.46 25.39 24.68 21.49 24.73 21.34 24.91 20.78
184 961 314 267 916 423 631 429 314 201
23.76964 24.41 25.27 19.61 24.67 21.53 26.32 16.28 26.53 15.60
401 806 859 997 737 171 777 381 997 908
23.45135 25.43 25.56 18.72 24.11 23.33 24.68 21.49 24.39 22.43
6
165 015 23.36 1.843 7.889 151 033 20.70 1.912 9.237 151 099 19.91 3.138 15.75 916 423 17.47 2.751 15.74 444 135 18.89 2.795 14.79
men
24.57126 21.86 848 765 968 24.21 22.99 704 839 624 25.60 18.57 985 462 544 26.16 16.80 396 237 478 25.46 19.02 839 819 396
it
922 908 761 363 867 039 273 86 72 021
24.60663 21.75 24.68 21.49 26.33 16.24 26.63 15.30 25.62 18.53
504 662 916 423 956 632 428 92 046 291
95
2.036 3.24864E+28 26.9172 14.40956
96
rerat rerat rerat rerat %S rerat
data %eff SD %SD data %eff SD %SD data %eff SD %SD data %eff SD data %eff SD %SD
t a a a a D a
2.05 2.05 2.05 2.05 2.05
6 6 6 6 6
2.03 2.03 2.03 2.03 2.03
kon 6 2.04 0.01 0.56 6 2.04 0.01 0.56 6 2.04 0.01 0.56 6 2.04 0.01 0.56 6 2.04 0.01 0.56
- - - - -
trol 2.06 975 1558 3865 2.06 975 1558 3865 2.06 975 1558 3865 2.06 975 1558 3865 2.06 975 1558 3865
2 2 2 2 2
2.04 2.04 2.04 2.04 2.04
5 5 5 5 5
1.71 22.8 1.62 26.7 1.75 20.9 1.80 18.8 1.95 12.1
7 0544 9 6183 8 6212 6 0409 5 052
1.63 26.5 1.85 16.4 1.83 17.6 19.5 1.83 17.5
3
3 8199 24.7 1.71 6.93 8 6622 21.6 4.26 19.7 1 8012 30.3 22.9 75.5 1.79 2343 19.1 0.64 3.34 5 0028 16.1 2.86 17.7
men
1.65 25.7 4992 685 6792 1.76 20.6 1403 9998 5568 1.82 18.0 5855 4567 8225 1.81 18.5 9748 1486 1514 1.85 16.4 8523 5025 0148
it
2 2777 4 9237 2 8475 2 3434 8 6622
1.69 23.8 1.72 22.5 0.78 64.7 1.78 19.9 1.80 18.6
3 8446 3 3569 5 072 1 2807 9 6921
1.54 30.4 27.1 1.68 24.1 1.95 12.1 1.87 15.6
8 0351 1.62 6646 7 5421 5 052 6 5696
1.64 26.1 1.72 22.2 1.58 28.6 1.85 16.4 1.84 17.0
4
3 324 26.7 5.03 18.7 9 6593 27.4 6.50 23.6 8 0515 24.5 2.96 12.0 9 2127 16.6 3.22 19.4 6 0573 16.7 1.51 9.00
men
1.78 19.8 6183 072 9812 1.40 36.7 8117 6378 7577 1.74 21.4 5884 9335 907 1.80 18.8 011 4533 2361 1.80 18.8 9218 1484 1122
it
2 8311 7 4272 7 5667 5 4905 5 4905
1.54 30.6 1.69 23.7 24.0 1.80 19.0 1.87 15.6
3 283 6 4958 1.69 1933 1 2889 6 5696
1.64 25.9 1.25 43.6 1.38 37.5 1.86 15.9 1.68 24.3
8 0761 3 664 8 9694 9 7168 2 79
1.43 35.6 1.46 34.0 1.54 30.4 1.63 26.5 25.3
5
2 1875 29.3 4.42 15.1 6 9014 35.6 5.77 16.2 8 0351 30.3 6.36 20.9 4 3703 26.9 10.7 39.9 1.66 681 23.7 2.28 9.63
men
1.57 29.1 2449 8402 0138 1.55 29.9 5247 7928 0625 1.52 31.2 3607 7531 8997 1.29 41.6 5291 6123 2604 1.67 24.7 0462 4813 8681
it
5 8961 9 0896 9 5773 8 4325 4 3868
1.63 26.5 1.44 34.9 1.73 22.0 1.69 23.6 1.77 20.3
3 8199 7 4436 3 861 8 5966 2 327
1.65 25.4 1.56 29.6 1.66 25.2 1.23 44.5 1.77 20.3
8 5802 4 8416 3 3322 3 6558 1 7766
1.62 26.9 1.60 27.6 1.76 20.7 1.75 20.9 1.78 19.7
6
5 4167 28.4 3.50 12.3 9 6101 27.3 2.29 8.37 3 3733 20.8 3.58 17.1 9 1716 28.9 10.6 36.9 5 4823 20.8 2.30 11.0
men
1.60 27.7 0283 3051 3346 1.60 27.8 5754 1989 7908 1.75 21.0 722 1512 5924 1.69 23.7 1986 759 1547 1.68 24.2 722 5947 4793
it
7 5093 4 858 6 5204 7 0462 5 4413
33.4 1.68 24.1 1.85 16.4 1.63 26.4 1.79 19.1
1.48 6072 6 9917 8 6622 5 9208 9 188
97
US 8.28mW + L 82.2 us 16.73mW + L 82.2 us 23.52mW + L 82.2 us 33.80 mW + L 82.2 us 40.78mW + L 82.2
I mW +PS mW +PS mW +PS mW + PS mW +PS
98
1.16 9.85 9.24 1.82
4.8E E+2 E+2 E+2 E+2
+21 2 2 3 4
1.99 1.31 1.47 2.62
E+2 E+2 6E+ E+2 E+2
3 3 22 0 4
9.01 1.22 4.89 3.36
E+2 7.1E E+2 E+2 E+2
3 +21 5 4 5
1.73 1.49 1.97 3.27
E+2 E+2 E+2 2.7E E+2
4 3 4 +19 5
7.31 4.82 2.66 4.71
E+2 E+2 E+2 2.4E E+2
6 7.33 7.25 1.16 1.62 9.15 7.42 1.12 3.78
3 98.8 3 139. 5 1.5E 163. +25 151. 5 2.7E 71.5
men E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4.58 7969 4.23 8737 2.22 +26 4888 4.77 1988 3.49 +25 3289
it 3 3 4 4 5 4 5 5
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
3 3 5 4 4
1.68 3.58 3.15 9.49 6.79
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
2 4 6 3 5
I
US 8.28mW + L 82.2 mW +PS us 16.73mW + L 82.2 mW +PS us 23.52mW + L 82.2 mW +PS us 33.80 mW + L 82.2 mW + PS us 40.78mW + L 82.2 mW +PS
99
22.8 27.2 23.2 26.1 12.1 61.3 23.9 23.9 24.2 22.9
7371 6692 2737 4237 6966 0332 1111 6824 4119 1866
21.1 32.7 22.0 30.0 22.8 27.4 25.9 17.4 25.0 20.4
6436 0225 1314 0333 0298 9183 6232 4584 3102 0716
22.2 29.1 23.2 25.9 21.6 31.2 24.8 21.0 24.6 21.5
4
8428 4117 29.6 4.19 14.1 981 1746 30.2 5.42 17.9 3591 0285 27.8 2.47 8.89 3062 4441 21.1 2.68 12.6 7737 3171 21.3 1.26 5.90
men
23.9 23.9 6596 4416 3882 19.5 37.9 6572 4762 2378 23.5 25.2 292 5715 6107 24.1 23.0 9435 8489 8494 24.1 23.0 5366 0216 1641
it
229 3075 0217 8764 1029 4273 9403 686 9403 686
21.1 32.8 22.9 27.1 22.8 27.3 24.1 23.2 25.0 20.4
0542 8967 0908 5446 3834 7938 4688 1854 3102 0716
22.3 28.9 17.6 43.7 19.2 38.6 24.9 20.6 22.7 27.6
4322 5375 8672 6033 7819 9985 485 6956 4404 7926
19.7 37.0 20.1 35.7 21.1 32.7 22.1 29.4 22.4 28.5
5
9688 5051 31.8 3.69 11.6 977 7602 37.0 4.81 12.9 6436 0225 32.6 5.30 16.2 7818 7854 29.8 8.97 30.0 8469 0393 27.1 1.90 7.02
men
21.4 31.6 0261 2228 0983 21.2 32.2 7863 7409 9242 20.9 33.4 4602 8997 6231 18.2 42.0 2527 2289 8284 22.6 27.9 1698 4987 507
it
8265 9015 9404 8991 4038 1446 1721 7351 4973 7914
22.1 29.5 19.9 36.4 23.3 25.7 22.9 27.0 23.8 24.3
6639 1602 7371 8824 4525 6752 3265 7949 0501 056
22.4 28.5 21.3 32.1 22.5 28.3 17.4 44.5 23.7 24.3
6111 789 5298 0249 2005 9147 5095 1003 9322 4309
22.0 29.8 21.8 30.4 23.6 24.6 23.6 24.7 23.9 23.8
6
7208 159 31.0 2.92 9.41 8347 1566 30.1 1.91 6.33 9891 4297 24.7 2.98 12.0 5176 9291 31.4 8.90 28.2 5826 183 24.7 1.92 7.76
men
21.8 30.4 3417 0707 1262 21.8 30.6 6264 0971 5555 23.6 24.9 5542 6124 625 22.9 27.1 6524 1148 8883 22.7 27.5 5542 2608 6411
it
5989 9063 2452 0309 1639 0536 2086 1698 794 668
20.3 35.2 22.7 27.5 24.8 21.0 22.1 29.4 24.1 23.2
6274 5123 9119 2932 1883 8189 8997 4105 233 9351
100
1.65 22.5 1.88 11.9 1.83 14.0 1.95 8.61 1.91 10.5
6 5349 3 3733 8 4186 4 686 2 8108
1.79 15.9 1.85 13.3 1.85 13.1 2.02 5.15 1.95 8.38
8 1255 3 4035 7 5328 8 6086 9 3024
1.67 21.5 1.59 25.4 1.71 19.8 1.79 16.2 1.80 15.5
7 7138 3 9982 3 8776 1 3992 6 3841
1.55 27.2 1.72 19.4 1.73 19.0 17.6 1.77 16.9
4
5 7698 23.6 3.20 13.5 3 2009 22.0 2.55 11.6 1 4595 18.2 2.11 11.6 1.76 897 15.9 1.43 8.96 6 4142 16.3 1.31 8.07
me
1.70 20.3 0575 3355 7023 1.66 21.9 0398 795 2495 1.73 18.7 0414 2305 0343 1.80 15.6 5931 1311 8501 1.75 17.8 1007 753 8019
nit
3 5543 9 4552 7 6535 3 7871 7 3
1.59 25.2 1.68 21.1 1.81 15.1 1.83 14.2 1.81 14.9
9 1922 6 5047 5 175 4 2893 9 3043
1.70 20.3 1.51 29.2 1.83 13.9 1.95 8.42 1.94 9.17
3 5543 2 8797 9 9509 8 9791 2 8066
1.68 21.1 1.67 21.8 1.84 13.5 1.95 8.66 1.87 12.4
5
5 9724 23.0 8.67 37.6 2 0521 19.5 7.54 38.4 9 2742 12.7 1.22 9.65 3 3627 11.5 5.39 46.7 3 05 9.72 2.09 21.5
me
1.81 15.1 3285 4814 6279 1.83 14.3 9546 344 9585 1.89 11.4 2068 8697 9048 1.71 19.6 3981 6229 6185 1.98 7.35 7581 4759 3422
nit
4 6427 1 6923 3 6966 9 0716 1 4145
1.38 35.4 1.86 12.9 1.88 11.8 1.93 9.45 1.92 9.97
1 1447 2 1944 4 9056 6 8669 5 3109
1.73 18.9 1.84 13.7 1.82 14.6 1.98 7.07 1.98 7.35
3 5241 4 6125 4 966 7 3541 1 4145
1.80 15.6 1.83 14.3 1.96 8.10 1.72 19.3 1.95 8.61
6
3 7871 16.6 3.31 19.8 1 6923 13.2 5.29 39.8 5 242 12.7 3.26 25.5 4 7332 10.6 6.00 56.4 4 686 8.53 0.97 11.4
me
1.87 12.4 842 1018 4522 1.73 18.9 9358 3724 2165 1.86 12.8 4407 2411 9945 2.00 6.37 2785 2866 8241 1.95 8.42 5017 6808 4471
nit
2 5177 4 0565 3 7268 2 2033 8 9791
1.71 19.6 2.00 6.13 1.81 15.3 1.93 9.69 9.73
8 5392 7 8197 1 0457 1 2506 1.93 9273
101
6.39 6.39 6.39 6.39 6.39
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
8 8 8 8 8
4.11 4.11 4.11 4.11 4.11
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
8 8 8 8 8
6.37 3.45 4.15 4.31 1.06
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
6 5 7 6 8
1.87 4.42 1.87 5.31 1.78
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
3 2.23 2.87 2.44 1.21 1.96 1.25 8.53
6 128. 6 3.4E 71.6 6 162. 6 7.8E 160. 8 #RE #RE
me E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
1.64 468 6.05 +26 9752 1.87 4518 3.84 +27 2187 1.29 F! F!
nit 6 6 6 7 7 8 7
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4 6 6 7 7
6.61 2.77 3.07 2.64 4.37
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
5 6 6 8 7
2.83 3.18 7.23 5.51 8.14
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4 3 4 5 5
1.18 9.38 1.16 2.46 3.73
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4 2.22 2.55 3.89 3.38 4.62 6.22 6.39
3 114. 4 3.9E 100. 5 136. 5 8.1E 76.8 5 #RE #RE
me E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
5.57 5109 +24 0407 1.35 5463 7.53 +25 0614 2.27 F! F!
nit 4 4 4 5 5 5 5
E+2 2.3E E+2 E+2 E+2
4 +24 5 5 5
3.72 3.58 1.03 1.69 1.14
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
3 4 6 6 6
5.57 3.86 1.92 4.26 2.81
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4 2 6 7 7
3.49 2.49 3.74 4.66
E+2 E+2 2.5E E+2 E+2
5 2.73 4.87 1.27 1.66 4.62 2.87 3.21
4 178. 4 130. +26 62.1 7 2.6E 1.9E 72.9 6 #RE #RE
me E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
1016 1.56 1685 7.85 5469 8.45 +27 +27 3523 7.76 F! F!
nit 5 5 6 6 6 6 7
1E+ E+2 E+2 E+2 E+2
26 6 6 4 7
1.27 6.21 1.81
E+2 3.5E E+2 2.4E E+2
1 +26 6 +27 7
6 1.22 1.37 2.13 155. 2.19 3.91 7.57 193. 1.42 2.46 172. 9.07 6.15 6.2E 100. 7.76 4.48 #RE #RE
me E+2 E+2 E+2 1935 E+2 E+2 E+2 4089 1.3E E+2 E+2 9486 E+2 E+2 +27 7718 E+2 E+2 F! F!
nit 5 6 6 6 7 7 +26 7 7 7 7 7 7
7.53 1.56 5.11 9.63 3.84
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
5 6 7 4 7
102
4.54 1.25 3.59 1.34 4.26
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
6 5 6 8 7
8.24 1.53 9.28 2.11 2.06
E+2 E+2 E+2 E+2 E+2
4 8 5 7 7
I
L 82.2 mW + US 8.28mW +PS L 82.2 mW + us 16.73mW+PS L 82.2 mW + us 23.52mW +PS L 82.2 mW + us 33.80 mW +PS L 82.2 mW +us 40.78mW+PS
103
19.1 38.9 24.8 20.9 25.1 20.1 25.7 18.1 25.6 18.5
9566 6225 6598 3195 2533 0728 3834 5806 0867 7039
23.3 25.7 24.6 21.6 24.4 22.3 26.3 16.2 26.2 16.4
4525 6752 5379 0668 1802 5638 3956 4632 6883 7123
24.1 23.1 24.5 22.0 26.0 17.0 23.2 26.1 25.9 17.4
6
7046 4357 23.9 2.65 11.0 0054 9399 21.2 4.24 19.9 8021 7099 20.7 2.61 12.5 3916 0488 19.0 4.81 25.1 5054 8333 17.4 0.78 4.49
me
24.9 20.5 495 3859 8106 23.3 25.7 3183 3044 8436 24.8 20.8 9138 49 7684 26.5 15.6 9518 1438 9713 25.9 17.3 1773 2935 5045
nit
8387 571 5704 3003 7777 9447 1639 8405 9769 3339
23.1 26.3 26.5 15.4 24.2 22.8 25.6 18.3 25.6 18.3
6843 2979 7533 9662 6477 4369 794 4548 6761 8297
104
4..10 Lampiran 7
Uji Statistik setiap Perlakuan
Sonodynamic tanpa sensitizer
Data terdistribusi normal
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
eff
N 60
Normal Parametersa,b Mean 17.11989
Std. Deviation 6.505713
Most Extreme Differences Absolute .081
Positive .081
Negative -.050
Kolmogorov-Smirnov Z .628
Asymp. Sig. (2-tailed) .826
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
106
Normal Std. 7.235011966
Parametersa,b Deviation
Most Extreme Absolute .064
Differences Positive .064
Negative -.041
Kolmogorov-Smirnov Z .569
Asymp. Sig. (2-tailed) .903
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
108
N 80
Normal Parametersa,b Mean 28.05925974
Std. Deviation 6.734134571
Most Extreme Differences Absolute .128
Positive .128
Negative -.103
Kolmogorov-Smirnov Z 1.143
Asymp. Sig. (2-tailed) .146
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
2.225 19 60 .010
Uji kkruskal wallis
109
Test Statisticsa,b menyimpulkan bahwa setiap
data_persen data kelompok memiliki
Chi-Square 53.150
df 19
perbedaan yang signifikan.
Asymp. Sig. .000
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable: kel
110