09e02640 PDF

PENETAPAN KADAR KAPTOPRIL DALAM SEDIAAN TABLET
DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA

KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI
SKRIPSI
Oleh:
FATIMAH PARINDURI
NIM: 060824015
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2009
Fatimah Parinduri : Penetapan Kadar Kaptopril Dalam Sediaan Tablet Dengan Nama Dagang Dan Generik
Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, 2009.
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai

Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Oleh:
FATIMAH PARINDURI
NIM: 060824015
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2009
PENGESAHAN SKRIPSI

Oleh:
FATIMAH PARINDURI
NIM: 060824015
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji

Fakultas Farmasi
Pada tanggal:................................................
Pembimbing I, Panitia Penguji,
(Prof. Dr .rer. nat. E. D. Putra, SU., Apt.) (Prof. Dr. M. T. Simanjuntak, MSc., Apt.)
NIP. 195306191983031001 NIP. 130 535 838
Pembimbing II,
(Prof. Dr .rer .nat. E. D. Putra, SU., Apt.)
NIP. 195306191983031001
(Drs. Muchlisyam, M.Si., Apt.)
NIP. 130 807 700
(Drs. Chairul Azhar D., M.Sc., Apt.)
NIP. 130 809 701
(Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.)

NIP. 130 872 281
Medan, Agustus 2009
Fakultas Farmasi
Dekan,
(Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.)

NIP. 195311281983031002
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah Yang Maha Mulia yang telah
melimpahkan rahmat, karunia, dan ridhoNya, sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi ini yang diajukan sebagai salah satu syarat dalam
memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih dan penghargaan
yang tulus kepada ayahanda Rusli Parinduri dan Ibunda Syamriah Lubis tercinta,
Abang Ali, Efin, Ical, Ipank, Budi, Kakak Ermi, Elmi, Juli, Lisni, Butet dan
keponakan yang lucu-lucu serta seluruh keluarga tersayang, atas doa, kasih
sayang, dorongan, semangat dan pengorbanan baik moril maupun materil yang
tidak terkira harganya.
Penulis juga menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada
Bapak Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, SU., Apt., dan Bapak
Drs. Muchlisyam, M.Si., Apt., yang telah membimbing dengan penuh kesabaran,
tulus dan ikhlas selama penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung.
Tak lupa pula penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada:
1. Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi,
Universitas Sumatera Utara.
2. Ibu Drs. Syahrial Yoenoes, SU., Apt., selaku penasehat akademik yang telah
memperhatikan dan membimbing penulis selama masa perkuliahan.
3. Bapak Prof. Dr. M. T. Simanjuntak, MSc., Apt., Drs. Chairul Azhar D., M.Sc.,
Apt., dan Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah
memberikan masukan dan saran kepada penulis hingga selesainya penulisan
skripsi ini.
4. Bapak/Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi yang telah membina dan mendidik
penulis selama perkuliahan.
5. Sahabat-sahabat terbaik di Fakultas Farmasi, khususnya Farmasi Ekstensi
angkatan 2006, Zaina, Leni, Rini dan yang tidak dapat disebutkan satu persatu,
terima kasih atas semua dukungannya.
Semoga Allah SWT memberikan balasan yang berlipat ganda atas segala
kebaikan dan bantuan yang telah diberikan kepada penulis.
Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih memiliki banyak kekurangan.
Oleh sebab itu, dengan segala kerendahan hati penulis bersedia menerima kritik
dan saran yang membangun untuk skripsi ini. Semoga skripsi ini bermanfaat dan
berguna bagi pengetahuan umum dan ilmu farmasi khususnya.
Medan, Agustus 2009
Penulis,
(Fatimah Parinduri)
ABSTRAK
Kaptopril merupakan obat antihipertensi yang efektif meniadakan
pembentukan Angiotensin Converting Enzym (ACE) II. Kaptopril bekerja
menghambat ACE yaitu vasodilatasi dan berkurangnya retensi garam dan air.
Kadarnya dapat ditentukan secara kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT).
Dalam penelitian ini dilakukan penetapan kadar kaptopril secara

kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) metode fase balik menggunakan kolom
VP-ODS (4,6 mm x 25 mm), fase gerak yang digunakan metanol : campuran air -
asam fosfat (75 : 25), laju alir 1,0 ml/menit, dan deteksi pada panjang gelombang
220 nm dan dengan tekanan kolom 102 kgf/cm2.
Hasil uji identifikasi yang dilakukan terhadap Kaptopril BPFI dan tablet
kaptopril memberikan puncak dengan waktu tambat yang sama 3,49 menit.
Penentuan linieritas kurva kalibrasi kaptopril dihitung berdasarkan luas puncak,
diperoleh hubungan yang linier antara luas puncak dan konsentrasi pada rentang
konsentrasi 200 sampai 600 mcg/ml dengan koefisien korelasi (r) = 0,9997 dan
persamaan regresi Y = 20151,71 X + 347515,71
Hasil penetapan kadar tablet Kaptopril (PT. Dexa Medica) 101,44% ± 0,49;
tablet Kaptopril (PT. Hexpharm Jaya) 105,80% ± 0,64; tablet Kaptopril (PT.
Indofarma) 92,75% ± 0,14; tablet Acepress (PT. Bernofarm) 95,62% ± 2,09;
tablet Captensin (PT. Kalbe Farma) 107,16% ± 2,10; tablet Dexacap (PT. Dexa
Medica) 93,53% ± 0,90; tablet Farmoten (PT. Fahrenheit) 97,74% ± 0,69; tablet
Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific) 94,17% ± 0,23; tablet Tenofax (PT. Prima
AS) 97,97% ± 0,16; tablet Tensicap (PT. Sanbe Bandung) 100,49% ± 1,30.
Semua sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar yang tercantum dalam

United State Pharmacopeia XXX (2007), yaitu mengandung tidak kurang 90,0%
dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.
Kata kunci : KCKT, Kaptopril.
THE DETERMINATION OF CAPTOPRIL IN TABLET BY
HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
ABSTRACT
Captopril is an antihypertency medicine which effectively avoid formation
of Angiotensin Converting Enzym (ACE) II. Captopril is ACE inhibitor, namely
vasodilatation and decrease of salt and water retention. These level can be
determinated by High Performance Liquid Chromatography (HPLC).
In this research is determination of captopril in tablet with HPLC reserve
phase method by using VP-ODS coulomn (4,6 mm x 25 cm), mobile phase used
methanol : mixture of water-phospat acid (75 : 25), flow rate 1,0 ml/minute and
detection of wavelength 220 nm and pressure of coulomn 102 kgf/cm2.
The identification of captopril BPFI and captopril tablet is showed the
peak with the same retention time 3,49 minute. Determination of calibration curva
linearity give a linear correlation between peak area versus concentration from
200 to 600 mcg/ml with the correlation coefficient (r) = 0,9997 and the equation
of regression line is y = 20151,71X + 347515,71.
The result of quantification of tablet Kaptopril (PT. Dexa Medica)
101,44% ± 0,49; tablet Kaptopril (PT. Hexpharm Jaya) 105,80% ± 0,64; tablet
Kaptopril (PT. Indofarma) 92,75% ± 0,14; tablet Acepress (PT. Bernofarm)
95,62% ± 2,09; tablet Captensin (PT. Kalbe Farma) 107,16% ± 2,10; tablet
Dexacap (PT. Dexa Medica) 93,53% ± 0,90; tablet Farmoten (PT. Fahrenheit)
97,74% ± 0,69; tablet Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific) 94,17% ± 0,23; tablet
Tenofax (PT. Prima AS) 97,97% ± 0,16; tablet Tensicap (PT. Sanbe Bandung)
100,49% ± 1,30.
All sample which substance is determinate by calculation method area of
peak fullfil requirement of substance as registered in United State Pharmacopeia
XXX (2007), namely content not less than 90,0% and not more than 110,0% from
value which is showed in label.
Keyword : HPLC, Captopril.
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ........................................................................................................ i
HALAMAN JUDUL ................................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN ......................................................................... iii
KATA PENGANTAR ................................................................................. iv
ABSTRAK................................................................................................... vi
ABSTRACT ................................................................................................ vii
DAFTAR ISI ............................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ....................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah ........................................................................ 3
1.3 Hipotesis ........................................................................................ 3
1.4 Tujuan Penelitian............................................................................ 3
1.5 Manfaat Penelitian .......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 5
2.1 Alopurinol ...................................................................................... 5
2.1.1 Sifat Fisikokimia.................................................................... 5
2.1.2 Farmakokinetik ...................................................................... 5
2.1.3 Efek Samping ........................................................................ 6
2.1.4 Kegunaan............................................................................... 6
2.1.5 Bentuk Sediaan ...................................................................... 6
2.2 Teori Kromatografi......................................................................... 7
2.2.1 Pembagian Kromatografi ....................................................... 8
2.2.2 Migrasi dan Retensi Solut ...................................................... 11
2.2.3 Proses Sorpsi ......................................................................... 11
2.2.4 Profil Puncak dan Puncak Asimetri ........................................ 11
2.2.5 Pemakaian Kromatografi ....................................................... 12
2.2.6 Analisa Kualitatif dan Kuantitatif........................................... 13
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)..................................... 17
2.3.1 Cara Kerja KCKT .................................................................. 18
2.3.2 Komponen KCKT .................................................................. 19
2.3.2.1 Wadah Fase Gerak ..................................................... 19
2.3.2.2 Pompa ........................................................................ 19
2.3.2.3 Injektor ...................................................................... 20
2.3.2.4 Kolom ........................................................................ 21
2.3.2.5 Detektor ..................................................................... 21
2.3.2.6 Pengolahan Data ........................................................ 22
2.3.2.7 Fase Gerak ................................................................. 23
BAB III METODOLOGI PENELITIAN .................................................. 27
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ......................................................... 27
3.2 Alat-alat ......................................................................................... 27
3.3 Bahan-bahan................................................................................... 27
3.4 Pola Penelitian................................................................................ 28
3.4.1 Pembuatan Pereaksi ............................................................... 28
3.4.1.1 Pembuatan Pelarut NaOH 0,1 N ................................. 28
3.4.1.2 Pembuatan Larutan NaOH 0,2 M................................ 28
3.4.1.3 Pembuatan Larutan KH2PO4 0,2 M ............................ 28
3.4.2 Pembuatan Fase Gerak Dapar Fosfat pH 8 ............................ 28
3.4.3 Penyiapan Alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ................. 28
3.4.4 Penentuan Garis Alas ............................................................. 29
3.4.5 Penentuan Kualitatif .............................................................. 29
3.4.6 Penentuan Kuantitatif............................................................. 29
3.4.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Alopurinol ................ 29
3.4.6.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Baku Alopurinol (Baku
Eksternal) ................................................................... 29
3.4.6.3 Penetapan Kadar Sampel ............................................ 30
3.4.6.4 Analisa Data Secara Statistik ...................................... 30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................... 32
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 37
5.1 Kesimpulan .................................................................................... 37
5.2 Saran .............................................................................................. 37
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 38
LAMPIRAN ................................................................................................ 39
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Perkembangan kromatografi ......................................................... 8
Tabel 2. Data kadar alopurinol dalam sediaan tablet yang ditentukan
berdasarkan luas puncak ............................................................... 36
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Eksperimen Tswett terhadap pigmen daun ................................... 7
Gambar 2. Profil-profil puncak ..................................................................... 12
Gambar 3. Pengukuran tinggi puncak ................................................... 14
Gambar 4. Bagan alat KCKT ........................................................................ 19
Gambar 5. Tipe injektor katup putaran .......................................................... 21
Gambar 6. Kromatogram .............................................................................. 22
Gambar 7. Jenis-jenis fase diam untuk tipe kromatografi fase normal............ 25
Gambar 8. Jenis-jenis fase diam untuk tipe kromatografi fase terbalik ........... 26
Gambar 9. Kromatogram hasil penyuntikan larutan baku alopurinol pada
konsentrasi 8 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT pada λ
254 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak
larutan dapar fosfat pH 8, laju alir 2,0 ml/menit ........................... 34
Gambar 10. Kurva kalibrasi baku alopurinol konsentrasi versus luas

puncak pada rentang konsentrasi 4-12 mcg/ml yang dianalisa
secara KCKT pada λ 254 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25
cm), fase gerak larutan dapar fosfat pH 8, laju alir 2,0
ml/menit ...................................................................................... 35
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Kromatogram dari larutan baku alopurinol konsentrasi
4 mcg/ml................................................................................ 40
6 mcg/ml ................................................................................ 42
8 mcg/ml ................................................................................ 44
10 mcg/ml............................................................................... 46
12 mcg/ml............................................................................... 48
Lampiran 6. Perhitungan persamaan regresi dari kurva kalibrasi baku
alopurinol yang diperoleh secara KCKT pada λ 254 nm.......... 50
Lampiran 7. Kromatogram dari larutan Tablet A ......................................... 52
Lampiran 8. Analisa data statistik untuk mencari kadar sebenarnya dari
penyuntikan larutan Tablet A secara KCKT ........................... 54
Lampiran 9. Kromatogram dari larutan Tablet B ......................................... 56
penyuntikan larutan Tablet B secara KCKT ........................... 58
Lampiran 11. Kromatogram dari larutan Tablet C ....................................... 59
penyuntikan larutan Tablet C secara KCKT ........................... 61
Lampiran 13. Kromatogram dari larutan Tablet D ....................................... 63
penyuntikan larutan Tablet D secara KCKT ........................... 65
Lampiran 15. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel ............................ 67
Lampiran 16. Contoh Perhitungan Untuk Mencari Kadar Alopurinol .......... 68
Lampiran 17. Daftar spesifikasi sampel ....................................................... 69
Lampiran 18. Gambar alat-alat .................................................................... 70
Lampiran 20. Surat Informasi Persediaan Alopurinol BPFI ......................... 72
Lampiran 21. Sertifikat Pengujian Baku Alopurinol (PT. Indofarma) .......... 73
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Hipertensi merupakan suatu kelainan, suatu gejala dari gangguan pada
mekanisme regulasi tekanan darah. Kaptopril merupakan turunan prolin yang
efektif meniadakan pembentukan Angiotensin Converting Enzym (ACE) II yaitu
vasodilatasi dan berkurangnya retensi garam dan air. Kaptopril merupakan obat
antihipertensi yang menghambat ACE. Zat ini tidak menimbulkan udema dan
digunakan pada hipertensi ringan sampai berat (Katzung, 1998).
Menurut Undang-undang No. 23 tahun 1992 pasal 40 ayat 1 tentang
kesehatan bahwa obat dan bahan obat harus memenuhi standar farmakope dan
buku standar lain. Salah satu parameter obat tersebut dikatakan memenuhi standar
apabila kadar zat berkhasiat yang terkandung di dalamnya memenuhi persyaratan
Farmakope Indonesia.
Menurut Farmakope Indonesia edisi IV (1995) kaptopril dapat ditetapkan
kadarnya secara kuantitatif dengan cara titrasi menggunakan titran kalium iodat
0,1 N. Selain itu menurut Clarke’s dan USP XXX (2007) kaptopril dapat
ditentukan kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
Metode yang digunakan dalam penetapan kadar kaptopril adalah menurut
USP XXX (2007) menggunakan fase gerak campuran 550 ml methanol dengan
0,5 ml asam fosfat dalam 450 ml air, laju alir 1,0 ml/menit, deteksi pada λ 220
nm, volume penyuntikan 20 μl dan kolom L1-Oktadesil Silana (4,6 mm x 25 cm).
Metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) merupakan metode yang
sangat populer untuk menetapkan kadar senyawa obat baik dalam bentuk sediaan
maupun dalam sampel hayati. Hal ini disebabkan karena KCKT merupakan
metode yang memberikan sensitifitas yang tinggi. Selain itu, KCKT memiliki
banyak keuntungan antara lain cepat, resolusinya baik, mudah melaksanannya,
detektor yang sensitif dan beragam sehingga mampu menganalisa berbagai
cuplikan secara kualitatif maupun kuantitatif, kolom dapat digunakan kembali,
mudah memperoleh kembali cuplikan, ideal untuk molekul besar dan ion
(Rohman, 2007).
Berdasarkan hal tersebut di atas, penulis tertarik menggunakan metode
KCKT untuk menetapkan kadar kaptopril dalam sediaan tablet dengan nama
dagang dan generik yang beredar di pasaran.
1.2 Perumusan Masalah
1. Apakah penetapan kadar tablet kaptopril dapat dilakukan secara
kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT), menggunakan kolom VP-ODS
(4,6 mm x 25 cm) dan fase gerak campuran metanol, air dan asam fosfat.
2. Apakah kaptopril dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar yang
ditetapkan pada United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.
1.3 Hipotesis
1. Diduga penetapan kadar kaptopril dapat dilakukan secara kromatografi
cair kinerja tinggi (KCKT).
2. Diduga kadar kaptopril dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar
yang ditetapkan United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.
1.4 Tujuan Penelitian
1. Melakukan penetapan kadar tablet kaptopril secara kromatografi cair
kinerja tinggi (KCKT).
2. Melakukan pengujian hasil yang diperoleh dengan persyaratan kadar yang
ditetapkan United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.
1.5 Manfaat Penelitian
1. Pengembangan ilmu bahwa penetapan kadar kaptopril dalam sediaan
tablet dapat juga dilakukan dengan kromatografi cair kinerja tinggi
(KCKT) menggunakan kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm) dan fase gerak
campuran metanol, air dan asam fosfat.
2. Aplikasi di lapangan untuk industri farmasi dan Badan Pengawas Obat dan
Makanan (BPOM).
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Kaptopril
2.1.1 Sifat Fisikokimia
Rumus struktur :
Nama Kimia : 1-[2(S)-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl]-L-proline
Rumus Molekul : C9H15NO3S
Berat Molekul : 217,28
Pemerian : serbuk hablur putih atau hampir putih; bau khas seperti
sulfida. Melebur pada suhu 104o sampai 110o.
Kelarutan : mudah larut dalam air, dalam metanol, dalam etanol dan
dalam kloroform (Ditjen POM, 1995).
2.1.2 Farmakokinetik
Resorpsinya dari usus cepat untuk ca (75%), efeknya sudah maksimal
setelah 1,5 jam dan bertahan 12-24 jam tergantung pada dosis. PP-nya 25-30%,
plasma-t½-nya 2-3 jam. Ekskresinya lewat kemih, sparuhnya sebagai metaboli
inaktif dan separuh utuh (Tjay &Raharja, 2002).
2.1.3 Efek Samping
Efek samping yang sering terjadi ialah hilangnya rasa(kadang-kadang juga
pencium, batuk kering, dan exanthema. Efeknya dapat ditiadakan oleh
indometasin dan NSAID lainnya (Tjay &Raharja, 2002).
2.1.4 Bentuk Sediaan
Kaptopril tersedia dalam bentuk tablet 12,5 mg dan 25 mg, dan 50 mg
(Wilmana, 1995).
Menurut Farmakope Indonesia edisi IV (1995) kaptopril dapat ditetapkan
kadarnya secara kuantitatif dengan cara titrasi menggunakan titran kalium iodat
0,1 N. Selain itu menurut Clarke’s dan USP XXX (2007) kaptopril dapat
ditentukan kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.
2.1.5 Kegunaan
Kaptopril merupakan turunan prolin yang efektif meniadakan
pembentukan Angiotensin Converting Enzym (ACE) II yaitu vasodilatasi dan
berkurangnya retensi garam dan air. Kaptopril merupakan obat antihipertensi yang
menghambat ACE. Zat ini tidak menimbulkan udema dan digunakan pada
hipertensi ringan sampai berat (Katzung, 1998).
2.2. Pemakaian Kromatografi
1. Pemakaian untuk tujuan kualitatif mengungkapkan ada atau tidak adanya
senyawa tertentu dalam cuplikan
2. Pemakaian untuk tujuan kuantitatif menunjukkan banyaknya masing-masing
komponen campuran
3. Pemakaian untuk tujuan preparatif untuk memperoleh komponen campuran
dalam jumlah memadai dalam keadaan murni (Gritter, dkk., 1991).
Analisa Kualitatif dan Kuantitatif
a. Analisis Kualitatif
Ada 3 pendekatan untuk analisa kualitatif yakni:
1. Perbandingan antara retensi solut yang tidak diketahui dengan data retensi
baku yang sesuai (senyawa yang diketahui) pada kondisi yang sama.
Untuk kromatografi yang menggunakan kolom (seperti KCKT dan KG),
waktu retensi (tR) atau volume retensi (VR) senyawa baku dan senyawa yang
tidak diketahui dibandingkan dengan cara kromatografi secara berurutan
dalam kondisi alat yang stabil dengan perbedaan waktu pengoperasian antar
keduanya sekecil mungkin.
2. Dengan cara spiking.
Untuk kromatografi yang melibatkan kolom, spiking dilakukan dengan
menambah sampel yang mengandung senyawa tertentu yang akan diselidiki
dengan senyawa baku pada kondisi kromatografi yang sama. Hal ini dilakukan
dengan cara: pertama, dilakukan proses kromatografi sampel yang tidak di
spiking. Kedua, sampel yang telah di-spiking dengan senyawa baku dilakukan
proses kromatografi. Jika pada puncak tertentu yang diduga mengandung
senyawa yang diselidiki terjadi peningkatan tinggi puncak/luas puncak setelah
di-spiking dibandingkan dengan tinggi puncak/luas puncak yang tidak
dilakukan spiking maka dapat diidentifikasi bahwa sampel mengandung
senyawa yang kita selidiki.
3. Menggabungkan alat kromatografi dengan spektrometer massa.
Pada pemisahan dengan menggunakan kolom kromatografi, cara ini akan
memberikan informasi data spektra massa solut dengan waktu retensi tertentu.
Spektra solut yang tidak diketahui dapat dibandingkan dengan spektra yang
ada di data base komputer yang diinterpretasi sendiri. Cara ini dapat dilakukan
untuk solut yang belum ada baku murninya.
b. Analisis Kuantitatif
Untuk menjamin kondisi yang digunakan dalam analisis kuantitatif stabil
dan reprodusibel, baik pada penyiapan sampel atau proses kromatografi, berikut
beberapa syarat yang harus dipenuhi dalam analisis kuantitatif:
a. Analit (solut) harus telah diketahui dan terpisah sempurna dari kompomen-
komponen lain dalam kromatogram
b. Baku dengan kemurnian yang tinggi dan telah diketahui harus tersedia
c. Prosedur kalibrasi yang sudah diketahui harus digunakan.
Untuk kromatografi yang melibatkan kolom, kuantifikasi dapat dilakukan
dengan luas puncak atau tinggi puncak. Tinggi puncak atau luas puncak
berbanding langsung dengan banyaknya solut yang dikromatografi, jika dilakukan
pada kisaran detektor yang linier.
1. Metode tinggi puncak
Metode yang paling sederhana untuk pengukuran kuantitatif adalah
dengan tinggi puncak. Tinggi puncak diukur sebagai jarak dari garis dasar ke
puncak maksimum seperti puncak 1, 2, dan 3 pada gambar 3. Penyimpangan garis
dasar diimbangi dengan interpolasi garis dasar antara awal dan akhir puncak.
Gambar 1. Pengukuran tinggi puncak

Metode tinggi puncak hanya digunakan jika perubahan tinggi puncak linier
dengan konsentrasi analit. Kesalahan akan terjadi jika metode ini digunakan pada
puncak yang mengalami penyimpangan (asimetris) atau jika kolom mengalami
kelebihan muatan.
2. Metode luas puncak
Prosedur penentuan luas puncak serupa dengan tinggi puncak. Suatu
teknik untuk mengukur luas puncak adalah dengan mengukur luas puncak sebagai
hasil kali tinggi puncak dan lebar pada setengah tinggi (W1/2). Teknik ini hanya
dapat digunakan untuk kromatografi yang simetris atau yang mempunyai bentuk
serupa (Johnson & Stevenson, 1991).
Saat ini integrator elektronik telah banyak digunakan untuk mengukur luas
puncak pada kromatografi cair kinerja tinggi dan pada kromatografi gas.
Integrator digital mengukur luas puncak dan mengubahnya dalam bentuk angka
(Rohman, 2007).
Baik tinggi puncak maupun luasnya dapat dihubungkan dengan
konsentrasi. Tinggi puncak mudah diukur, akan tetapi sangat dipengaruhi
perubahan waktu retensi yang disebabkan oleh variasi suhu dan komposisi pelarut.
Oleh karena itu, luas puncak dianggap merupakan parameter yang lebih akurat
untuk pengukuran kuantitatif (Ditjen POM, 1995).
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)
Kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) merupakan sistem pemisahan
dengan kecepatan dan efisiensi yang tinggi. Hal ini karena didukung oleh
kemajuan dalam teknologi kolom, sistem pompa tekanan tinggi, dan detektor yang
sangat sensitif dan beragam. KCKT mampu menganalisa berbagai cuplikan secara
kualitatif maupun kuantitatif, baik dalam komponen tunggal maupun campuran
(Ditjen POM, 1995).
KCKT merupakan teknik pemisahan yang diterima secara luas untuk
analisis dan pemurnian senyawa tertentu dalam suatu sampel pada sejumlah
bidang antara lain; farmasi, lingkungan dan industri-industri makanan.
Kegunaan umum KCKT adalah untuk pemisahan sejumlah senyawa
organik, anorganik, maupun senyawa biologis, analisis ketidakmurnian
(impurities) dan analisis senyawa-senyawa yang tidak mudah menguap
(nonvolatil). KCKT paling sering digunakan untuk: menetapkan kadar senyawa-
senyawa tertentu seperti asam-asam amino, asam-asam nukleat dan protein-
protein dalam cairan fisiologis, menentukan kadar senyawa-senyawa aktif obat
dan lain-lain.
Kelebihan KCKT antara lain:
− Mampu memisahkan molekul-molekul dari suatu campuran
− Resolusinya baik
− Mudah melaksanakannya
− Kecepatan analisis dan kepekaannya tinggi
− Dapat dihindari terjadinya dekomposisi/kerusakan bahan yang dianalisis
− Dapat digunakan bermacam-macam detektor
− Kolom dapat digunakan kembali
− Mudah melakukan rekoveri cuplikan
− Tekniknya tidak begitu tergantung pada keahlian operator dan
reprodusibilitasnya lebih baik
− Instrumennya memungkinan untuk bekerja secara automatis dan kuantitatif
− Waktu analisis umumnya singkat
− Kromatografi cair preparatif memungkinkan dalam skala besar
− Ideal untuk molekul besar dan ion.
Keterbatasan metode KCKT adalah untuk identifikasi senyawa, kecuali
jika KCKT dihubungkan dengan spektrometer massa (MS). Keterbatasan lainnya
adalah jika sampelnya sangat kompleks, maka resolusi yang baik sulit diperoleh
(Munson, 1991).
2.3.1 Cara Kerja KCKT
Kromatografi merupakan teknik yang mana solut atau zat-zat terlarut
terpisah oleh perbedaan kecepatan elusi, dikarenakan solut-solut ini melewati
suatu kolom kromatografi. Pemisahan solut-solut ini diatur oleh distribusi dalam
fase gerak dan fase diam. Penggunaan kromatografi cair membutuhkan
penggabungan secara tepat dari berbagai macam kondisi operasional seperti jenis
kolom, fase gerak, panjang dan diameter kolom, kecepatan alir fase gerak, suhu
kolom, dan ukuran sampel (Rohman, 2007).
2.3.2 Komponen KCKT
detektor
kolom
injektor
pompa oven
Wadah
solven
Data processor
Gambar 2. Bagan alat KCKT
2.3.2.1 Wadah Fase Gerak
Wadah fase gerak terbuat dari bahan yang inert terhadap fase gerak. Bahan
yang umum digunakan adalah gelas dan baja anti karat. Daya tampung wadah
harus lebih besar dari 500 ml, yang dapat digunakan selama 4 jam untuk
kecepatan alir yang umumnya 1-2 ml/menit.
2.3.2.2 Pompa
Untuk mengerakkan fase gerak melalui kolom diperlukan pompa. Pompa
harus mampu menghasilkan tekanan 6000 psi pada kecepatan alir 0,1–10
ml/menit. Pompa ada 2 jenis yaitu pompa volume konstan dan pompa tekanan
konstan. Pompa terbuat dari bahan yang inert terhadap semua pelarut. Bahan yang
umum digunakan adalah gelas baja antikarat dan teflon. Aliran pelarut dari pompa
harus tanpa denyut untuk menghindari hasil yang menyimpang pada detektor.
2.3.2.3 Injektor
Cuplikan harus dimasukkan kedalam pangkal kolom (kepala kolom),
diusahakan agas sesedikit mungkin terjadi gangguan pada kemasan kolom.
Ada tiga jenis dasar injektor, yaitu:
a. Hentikan aliran/stop flow: aliran dihentikan, injeksi dilakukan pada kinerja
atmosfir, sistem tertutup, dan aliran dilanjutkan lagi. Teknik ini bisa
digunakan karena difusi di dalam aliran kecil dan resolusi tidak dipengaruhi.
b. Septum: injektor-injektor langsung ke aliran fase gerak umumnya sama
dengan yang digunakan pada kromatografi gas. Injektor ini dapat digunakan
pada kinerja sampai 60-70 atmosfir. Tetapi septum ini tidak tahan dengan
semua pelarut-pelarut kromatografi cair. Disamping itu, partikel kecil dari
septum yang terkoyak (akibat jarum injektor) dapat menyebabkan
penyumbatan.
c. Katup putaran (loop valve): ditunjukkan secara skematik dalam Gambar 5,
tipe injektor ini umumnya digunakan untuk menginjeksi volume lebih besar
daripada 10 µl dan sekarang digunakan dengan cara otomatis (dengan adaptor
khusus, volume-volume lebih kecil dapat diinjeksikan secara manual). Pada
posisi LOAD, sampel loop (cuplikan dalam putaran) diisi pada tekanan
atmosfir. Bila katup difungsikan, maka cuplikan di dalam putaran akan
bergerak ke dalam kolom.
Gambar 3. Tipe injektor katup putaran
2.3.2.4 Kolom
Kolom adalah jantung kromatografi. Berhasil atau gagalnya suatu analisis
tergantung pada pemilihan kolom dan kondisi percobaan yang sesuai. Kolom
dapat dibagi menjadi dua kelompok:
1. Kolom analitik: diameter khas adalah 2-6 mm. Panjang kolom tergantung
pada jenis kemasan. Untuk kemasan pelikel biasanya panjang kolom 50-100
cm. Untuk kemasan mikropartikel berpori, umumnya 10-30 cm. Dewasa ini
ada yang 5 cm.
2. Kolom preparatif: umumnya memiliki diameter 6 mm atau lebih besar dan
panjang kolom 25-100 cm.
Kolom umumnya dibuat dari stainless steel dan biasanya dioperasikan
pada temperatur kamar, tetapi bisa juga digunakan temperatur lebih tinggi,
terutama untuk kromatografi penukar ion dan kromatografi eksklusi. Kemasan
kolom tergantung pada mode KCKT yang digunakan.
2.3.2.5 Detektor
Suatu detektor dibutuhkan untuk mendeteksi adanya komponen cuplikan
dalam aliran yang keluar dari kolom. Detektor-detektor yang baik memiliki
sensitifitas yang tinggi, gangguan (noise) yang rendah, kisar respons linier yang
luas, dan memberi tanggapan/respon untuk semua tipe senyawa. Suatu kepekaan
yang rendah terhadap aliran dan fluktuasi temperatur sangat diinginkan, tetapi
tidak selalu dapat diperoleh.
Detektor yang paling banyak digunakan dalam kromatografi cair modern
kecepatan tinggi adalah detektor spektrofotometer UV 254 nm. Bermacam-macam
detektor dengan variasi panjang gelombang UV-Vis sekarang menjadi populer
karena mereka dapat digunakan untuk mendeteksi senyawa-senyawa dalam
rentang yang luas. Detektor indeks refraksi juga secara luas digunakan, terutama
dalam kromatografi eksklusi, tetapi umumnya kurang sensitif dari pada detektor
spektrofotometer UV. Detektor lainnya, antara lain: detektor fluometer, detektor
ionisasi nyala, detektor elektrokimia dan lain-lain juga telah digunakan.
2.3.2.6 Pengolahan Data
Komponen yang terelusi mengalir ke detektor dan dicatat sebagai puncak-
puncak yang secara keseluruhan disebut sebagai kromatogram.
Rt
Area
H
W1/2
H1/2
W
Gambar 4. Kromatogram
Guna kromatogram:
1. Kualitatif
Waktu retensi selalu konstan dalam setiap kondisi kromatografi yang sama
dapat digunakan untuk identifikasi.
2. Kuantitatif
Luas puncak proporsional dengan jumlah sampel yang diinjeksikan dan
dapat digunakan untuk menghitung konsentrasi.
3. Kromatogram dapat digunakan untuk mengevaluasi efisiensi pemisahan
dan kinerja kolom (kapasitas ‘k’, selektifitas ‘α’, jumlah pelat teoritis
‘N’, jarak setara dengan pelat teoritis ‘HETP’ dan resolusi ‘R’).
2.3.2.7 Fase Gerak
Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat
bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya elusi dan resolusi. Daya
elusi dan resolusi ini ditentukan oleh polaritas keseluruhan pelarut, polaritas fase
diam, dan sifat komponen-komponen sampel (Johnson & Stevenson, 1991).
Dalam kromatografi cair komposisi pelarut atau fase gerak adalah satu
variabel yang mempengaruhi pemisahan. Terdapat keragaman yang luas dari fase
gerak yang digunakan dalam semua mode KCKT, tetapi ada beberapa sifat-sifat
yang diinginkan yang mana umumnya harus dipenuhi oleh semua fase gerak.
Fase gerak harus:
• Murni; tidak ada pencemar/kontaminan
• Tidak bereaksi dengan pengemas
• Sesuai dengan detektor
• Melarutkan cuplikan
• Mempunyai viskositas rendah
• Mudah rekoveri cuplikan, bila diinginkan
• Tersedia diperdagangan dengan harga yang pantas
Umumnya, pelarut-pelarut dibuang setelah digunakan karena prosedur
pemurnian kembali membosankan dan mahal. Dari semua persyaratan di atas, 4
persyaratan pertama adalah yang paling penting.
Gelembung udara (degassing) yang ada harus dihilangkan dari pelarut,
karena udara yang terlarut keluar melewati detektor dapat menghasilkan banyak
noise sehingga data tidak dapat digunakan (Putra, 2007).
Elusi Gradien dan Isokratik
Elusi pada KCKT dapat dibagi menjadi dua sistem yaitu:
1. Sistem elusi isokratik. Pada sistem ini, elusi dilakukan dengan satu macam
atau lebih fase gerak dengan perbandingan tetap (komposisi fase gerak tetap
selama elusi).
2. Sistem elusi gradien. Pada sistem ini, elusi dilakukan dengan campuran fase
gerak yang perbandingannya berubah-ubah dalam waktu tertentu (komposisi
fase gerak berubah-ubah selama elusi).
Elusi gradien didefinisikan sebagai penambahan kekuatan fase gerak
selama suatu analisis kromatografi berlangsung. Digunakan untuk meningkatkan
resolusi campuran yang kompleks terutama jika sampel mempunyai kisaran
polaritas yang luas. Pengaruh yang menguntungkan dari elusi gradien adalah
memperpendek waktu analisis senyawa-senyawa yang secara kuat ditahan di
dalam kolom (Putra, 2007).
Tipe kromatografi
a. Kromatografi fase normal
Kromatografi fase normal (fase diam lebih polar daripada fase gerak),
kemampuan elusi meningkat dengan meningkatnya polaritas pelarut. Fase
gerak ini biasanya tidak polar. Dietil eter, benzen, hidrokarbon lurus seperti
pentana, heksana, heptana maupun iso-oktana sering digunakan. Halida
alifatis seperti dikloro metana, dikloroetana, butilklorida dan kloroform juga
digunakan. Umumnya gas terlarut tidak menimbulkan masalah pada fase
normal. Tekanan rendah diperlukan untuk menjaga kecepatan aliran yang
memadai, karena pelarut ini kebanyakan kurang kental (Munson, 1991).
Fase diam yang digunakan dapat dilihat pada gambar dibawah ini:
Gambar 5. Jenis-jenis fase diam untuk tipe kromatografi fase normal
b. Kromatografi fase terbalik
Kromatografi fase terbalik (fase diam kurang polar daripada fase gerak),
kemampuan elusi menurun dengan meningkatnya polaritas pelarut.
Kandungan utama fase gerak fase terbalik adalah air. Pelarut yang dapat
campur dengan air seperti metanol, etanol, asetonitril, dioksan, tetrahirofuran
dan dimetilformamida ditambahkan untuk mengatur kepolaran fase gerak.
Dapat ditambahkan pula asam, basa, dapar dan/atau surfaktan. Mutu air harus
tinggi baik air destilasi maupun awamineral.
Fase diam yang digunakan dapat dilihat pada gambar dibawah ini :
Gambar 6. Jenis-jenis fase diam untuk tipe kromatografi fase terbalik
Adsorpsi solut oleh fase diam atau adsorben sangat tergantung pada:
1. Struktur kimia solut atau adanya gugus aktif tertentu yang berinteraksi dengan
adsorben.
2. Ukuran partikel adsorben. Semakin kecil ukuran partikel adsorben, maka luas
permukaannya semakin luas sehingga interaksinya dengan solut juga semakin
luas.
3. Kelarutan solut dalam fase gerak. Solut yang makin mudah larut dalam fase
gerak akan semakin mudah lepas dari fase diam (Munson, 1991).
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
2.1 Waktu dan tempat penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia Farmasi Kuantitatif Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan pada bulan Juni tahun 2009.
2.2 Alat-alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah satu unit alat KCKT
(Shimadzu) yang terdiri dari vacum desagger, pompa, CBM, UV/Vis detektor
(dilengkapi dengan komputer dan printer) , kolom Shimpac VP-ODS (4,6 mm x
25 cm), wadah fase gerak, penyuntik mikroliter (100 µl), neraca listrik (baeco
Germany), membran filter PTFE 0,5 µm, cellulose nitrat membran filter 0,45 µm
dan 0,2 µm dan alat gelas lainnya.
2.3 Bahan-bahan
Bahan – bahan yang digunakan adalah asam posfat p.a (Merck), metanol
p.a (Merck), aquabidestilata (PT. Ikapharmindo Putramas), kaptopril BPFI, tablet
Kaptopril 25 mg (PT. Dexa Medica), tablet Kaptopril 25 mg (PT. Hexpharm
Jaya), tablet Kaptopril 25 mg (PT. Indofarma), tablet Acepress 25 mg (PT.
Bernofarm), tablet Captensin 25 mg (PT. Kalbe Farma), tablet Dexacap 25 mg
(PT. Dexa Medica), tablet Farmoten 25 mg (PT. Fahrenheit), tablet Scantensin 25
mg (PT. Tempo Scan Pasific), tablet Tenofax 25 mg (PT. Prima AS), tablet
Tensicap 25 mg (PT. Sanbe Bandung).
2.4 Prosedur penelitian
2.4.1 Pengambilan sampel
Pengambilan sampel dilakukan secara Probability sampling dimana setiap
anggota populasi mempunyai peluang yang sama dan semua kemungkinan
penggabungannya diseleksi sebagai sampel mempunyai peluang yang sama. Dari
hasil sampling tersebut diproleh tablet Kaptopril 25 mg (PT. Dexa Medica), tablet
Kaptopril 25 mg (PT. Hexpharm Jaya), tablet Kaptopril 25 mg (PT. Indofarma),
tablet Acepress 25 mg (PT. Bernofarm), tablet Captensin 25 mg (PT. Kalbe
Farma), tablet Dexacap 25 mg (PT. Dexa Medica), tablet Farmoten 25 mg (PT.
Fahrenheit), tablet Scantensin 25 mg (PT. Tempo Scan Pasific), tablet Tenofax 25
mg (PT. Prima AS), tablet Tensicap 25 mg (PT. Sanbe Bandung), merupakan
sampel yang digunakan dalam penelitian ini.
2.4.2 Pembuatan fase gerak
Sebanyak 550 ml metanol di saring menggunakan membran filter PTFE
0,45 µm. sebanyak 0,5 ml asam fosfat dilarutkan ke dalam air ebanyak 50 ml,
kocok. Kemudian diencerkan hingga volume 450 ml lalu disaring dengan
cellulose nitrat membran filter 0,45 µm, masing-masing diawaudarakan selama 30
menit.
2.4.3 Penyiapan alat Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Masing - masing unit diatur, menggunakan kolom shimpac VP-ODS (4,6
mm x 25 cm). Sensitivitas 1,000 AUFS dan pengukuran menggunakan detektor
UV/Vis pada panjang gelombang 220 nm. Pada pompa dipilih mode aliran tetap
dengan laju aliran 1,0 ml/menit, dan diatur perbandingan fase gerak methanol :
campuran asam fosfat dengan air (75 : 25). Setelah diperoleh kondisi yang sesuai
maka pompa dijalankan, Fase gerak dibiarkan mengalir selama 30 menit diperoleh
garis alas yang cukup lurus yang menandakan sistem tersebut telah stabil.
2.4.4 Identifikasi
2.4.4.1 Penentuan kualitatif
Kaptopril BPFI dan kaptopril dalam sedian tablet dengan nama dagang
dan generik dengan konsentrasi 1,0 mg/ml masing-masing disuntikkan ke sistem
KCKT dengan volume penyuntikan 20 μl. Puncak yang ditunjukkan diperhatikan
dan dicatat waktu tambatnya kemudian waktu tambat masing-masing tablet
dibandingkan dengan waktu tambat kaptopril BPFI.
2.4.4.2 Penentuan kuantitatif
2.4.4.2.1 Pembuatan larutan induk baku kaptopril BPFI
Ditimbang seksama sejumlah 50,0 mg kaptopril BPFI, dimasukkan ke
dalam labu tentukur 50 ml, dilarutkan dan diencerkan dengan air hingga garis
tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000 mcg/ml dan digunakan
sebagai larutan baku.
2.4.4.2.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi kaptopril BPFI
Dipipet larutan induk baku kaptopril sebanyak 5; 10; 12,5; 15 ml, masing-
masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml, diencerkan dengan air hingga
garis tanda sehingga diperoleh konsentrasi 200, 400, 500, 600, mcg/ml, kemudian
masing-masing konsentrasi diinjeksikan sebanyak 6 kali ke sistem KCKT dengan
volume penyuntikan 20 μl. diukur pada panjang gelombang 220 nm dengan laju
alir 1,0 ml/menit, lalu dicatat luas dan tinggi puncaknya yang ditunjukkan pada
kromatogram dan dibuat kurva kalibrasi serta dihitung persamaan garis
regresinya.
2.4.4.2.3 Penetapan kadar sampel
Ditimbang 20 tablet untuk masing-masing jenis tablet, kemudian digerus
sejumlah serbuk dan ditimbang seksama sejumlah tablet setara dengan lebih
kurang 50 mg kaptopril BPFI, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml
dilarutkan dengan air kocok selama 10 menit, dan diencerkan dengan air hingga
garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000 mcg/ml, disaring,
10ml filtrat pertama dibuang dan filtrat selanjutnya ditampung. Filtrat yang jernih
digunakan sebagai larutan uji. Kemudian larutan ini dipipet 10 ml dan
ditambahkan dengan air hingga garis tanda sehingga diperoleh larutan dengan
konsentrasi 400 mcg/ml. Larutan tersebut diawaudarakan. Diinjeksikan sebanyak
20 μl ke sistem KCKT dideteksi pada panjang gelombang 220 nm, laju alir 1,0
ml/menit kemudian dihitung kadarnya. Dilakukan sebanyak 6 kali.
2.4.5 Penentuan Limit of Detection (LOD) dan Limit of Quantitation (LOQ)
Batas deteksi atau Limit of Detection (LOD) adalah jumlah terkecil analit
dalam sampel yang dapat dideteksi. Batas kuantitasi atau Limit of Quantitation
(LOQ) merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel.
Batas deteksi dapat dihitung berdasarkan pada Standar Deviasi (SD) dari
kurva antara respon dan kemiringan (slope) dengan rumus :
SD =
∑ ( X − Xi) 2
n −1
3 x SD
LOD =
slope
Sedangkan untuk penentuan batas kuantitasi dapat digunakan rumus :
10 x SD
LOQ =
slope
(Harmita, 2004)
2.4.6 Analisis Statistik
2.4.6.1 Penolakan Hasil Pengamatan
Kadar Kaptopril sebenarnya dalam sampel dapat diketahui dengan
menggunakan uji Q test. Cara untuk melakukan analisis terhadap data yang
menyimpang adalah dengan Dixon’s Q-test yang dirumuskan sebagai berikut:
Qhitung nilai yang dicurigai-nilai terdekat
(nilai tertinggi- nilai terendah)
Jika nilai Qhitung lebih kecil dari nilai Qkritis maka hipotesis nol diterima
berarti tidak ada perbedaan antara nilai yang dicurigai dengan nilai-nilai yang lain
(Rohman, 2007).
Hasil pengujian atau nilai Q yang diperoleh ditinjau terhadap daftar harga
Q pada Tabel 1, apabila Q>Q0,99 maka data tersebut ditolak.
Tabel 1 Nilai Qkritis pada Taraf Kepercayaan 99%
Banyak data Nilai Qkritis
4 0,926
5 0,821
6 0,740
7 0,680
8 0,634
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kaptopril mudah larut dalam air, metanol, etanol dan kloroform.
Penetapan kadar kaptopril dapat dilakukan dengan cara titrimetrik,
spektrofotometri uv/vis, kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT). Dalam
penelitian ini penetapan kadar kaptopril dalam sediaan tablet dilakukan dengan
metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) menggunakan kolom 4,6 mm x
25 cm berisi bahan pengisi L1 (Oktadesil Silana), fase gerak metanol : campuran
air - asam fosfat (75 : 25), laju alir 1,0 ml/menit, panjang gelombang 220 nm dan
volume penyuntikan lebih kurang 20 µl.
Sebelum dilakukan penetapan kadar dengan menggunakan metode
kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT), dilakukan orientasi untuk dengan cara
menyuntikkan larutan kaptopril BPFI dengan konsentrasi 1000 mcg/ml
perbandingan fase gerak metanol : campuran air dengan asam fosfat (55 : 45; 45 :
55; 65 : 35; 75 : 25; 85 : 15),
Gambar 1. Kromatogram hasil penyuntikan larutan kaptopril BPFI dengan fase gerak
metanol : campuran air-asam fosfat (55 : 45), waktu tambat 4,84 menit.
Dalam penelitian ini digunakan kolom VP-ODS (Oktadesil Silana 4.6 mm
x 25 cm), fase gerak metanol : campuran air - asam fosfat (75 : 25), laju alir 1,0
ml/menit, dan volume penyuntikan 20 µl, konsentrasi 400 mcg/ml. Diperoleh
kromatogram tunggal dari kaptopril BPFI dengan waktu tambat 3,49 menit.
metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25), waktu tambat 3,49 menit
dengan konsentrasi 400 mcg/ml.
Hasil pengujian sampel diperoleh waktu tambat yang hampir sama dengan
waktu tambat kaptopril BPFI pada konsentrasi 400 mcg/ml. Waktu tambat rata-
rata tablet Kaptopril (PT. Dexa Medica) 3,47 menit, tablet Kaptopril (PT.
Hexpharm Jaya) 3,48 menit, tablet Kaptopril (PT. Indofarma) 3,47 menit, tablet
Acepress (PT. Bernofarm) 3,47 menit, tablet Captensin (PT. Kalbe Farma) 3,47
menit, tablet Dexacap (PT. Dexa Medica) 3,48 menit, tablet Farmoten (PT.
Fahrenheit) 3,49 menit, tablet Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific) 3,48 menit,
tablet Tenofax (PT. Prima AS) 3,48 menit, tablet Tensicap (PT. Sanbe Bandung)
3,48 menit.
Gambar 7. Kromatogram hasil penyuntikan larutan kaptopril (PT. Dexa Medica)

dengan fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25), waktu
tambat 3,47 menit dengan konsentrasi 400 mcg/ml.
Gambar 8. Kromatogram hasil penyuntikan larutan kaptopril (PT. Hexpharm Jaya)

Gambar 9. Kromatogram hasil penyuntikan larutan kaptopril (PT. Indofarma) dengan
fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25), waktu tambat 3,47
menit dengan konsentrasi 400 mcg/ml.
Gambar 10 . Kromatogram hasil penyuntikan larutan Acepress (PT. Bernofarm) dengan

fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25), waktu tambat
3,47 menit dengan konsentrasi 400 mcg/ml.
Gambar 11. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Captensin (PT. Kalbe Farma)
Gambar 12. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Dexacap (PT. Dexa Medica)
Gambar 13. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Farmoten (PT. Fahrenheit) dengan
Gambar 14. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Scantensin (PT. Tempo Scan
Pasific) dengan fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25),
waktu tambat 3,47 menit dengan konsentrasi 400 mcg/ml.
Gambar 15. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Tenofax (PT. Prima AS) dengan
Gambar 16 . Kromatogram hasil penyuntikan larutan Tensicap (PT. Sanbe Bandung)

Penentuan linieritas kurva kalibrasi kaptopril BPFI ditentukan berdasarkan
luas puncak pada rentang konsentrasi 200 sampai 600 mcg/ml, diperoleh
hubungan yang linier dengan koefisien korelasi (r) = 0,9997 dan persamaan
regresi Y = 20151,71 X + 347515,71 dengan data penyuntikan larutan kaptopril
BPFI. Kurva kalibrasi dapat dilihat pada gambar di bawah ini.
Gambar 17. Kurva kalibrasi kaptopril BPFI konsentrasi versus luas puncak
Sesuai dengan teori yang dikemukan oleh Snyder dan Kirkland (1979) yaitu
pengukuran kadar lebih baik dengan cara pengukuran luas puncak dibandingkan dengan
pengukuran tinggi puncak. Kadar sampel dapat dihitung menggunakan persamaan regresi
Y = 20151,71 X + 347515,71 yaitu dengan mensubsitusikan Y dengan harga luas puncak.
Hasil perhitungan diketahui harga X (kadar sampel) disajikan pada tabel 1 di bawah.
Tabel 1. Hasil pengolahan data dari sediaan tablet Kaptopril Generik
Kadar
No Nama Sampel Perlakuan Luas puncak
(%)
1 8562526 101,04
2 8593670 101,42
Tablet Kaptopril 25 mg 3 8601237 101,51
1
(PT. Dexa Medica) 4 8585102 101,32
5 8575394 101,95
6 8591808 101,39
1 8920788 105,45
2 8922267 105,46
2
(PT. Hexpharm Jaya) 4 8952203 105,83
5 8957803 105,89
6 9006875 106,50
1 7888707 92,75
2 7900964 92,89
3
(PT. Indofarma) 4 7895002 92,83
5 7906480 92,97
6 7903966 92,94
Tabel 2. Hasil pengolahan data dari sediaan tablet Kaptopril dengan nama
Dagang
Luas Kadar
No Nama Sampel Perlakuan
puncak (%)
1 8119406 95,59
2 7920048 93,14
Tablet Acepress 25 mg
3 8166538 96,14
1 (PT. Bernofarm)
4 8194793 95,62
5 8197938 96,55
6 8133493 95,76
1 9035232 106,85
2 9058571 107,14
Tablet Captensin 25 mg
3 9111998 107,79
2 (PT. Kalbe Farma)
4 8881198 104,96
5 9194848 108,82
6 9077468 107,37
Tabel 2 (lanjutan)
1 7941829 94,19
2 8005787 94,15
Tablet Dexacap 25 mg
3 8002188 93,50
3 (PT. Dexa Medica)
4 7950050 92,89
5 7899775 93,03
6 7910868 93,40
1 8228793 96,93
2 8312708 97,97
Tablet Farmoten 25 mg
3 8291376 97,70
4 (PT. Fahrenheit)
4 8307778 97,90
5 8300674 97,82
6 8323806 98,10
1 8004567 94,18
2 8018655 94,35
Tablet Scantensin 25 mg 3 8002431 94,14
5
(PT. Tempo Scan Pasific) 4 7991000 94,01
5 7993026 94,03
6 8015855 94,31
1 8311540 97,95
2 8318040 98,03
Tablet Tenofax 25 mg
3 8320740 98,06
6 (PT. Prima AS)
4 8319877 98,05
5 8306540 97,89
6 8301627 97,83
1 8391601 98,94
2 8515735 100,46
Tablet Tensicap 25 mg 3 8569121 101,12
7
(PT. Sanbe Bandung) 4 8540315 100,77
5 8535206 100,70
6 8553768 100,93
Berdasarkan data pada tabel 1 dan perhitungan statistik diperoleh kadar
kaptopril dalam sediaan tablet dengan nama dagang dan generik seperti
ditampilkan pada tabel 3 di bawah ini.
Tabel 3. Data kadar kaptopril dalam sediaan tablet dengan nama dagang dan
generik yang ditentukan berdasarkan luas puncak
No Nama Sediaan Kadar Kaptopril
1. Tablet Kaptopril 25 mg (PT. Dexa Medica) 101,44% ± 0,49
2. Tablet Kaptopril 25 mg (PT. Hexpharm Jaya) 105,80% ± 0,64
3. Tablet Kaptopril 25 mg (PT. Indofarma) 92,75% ± 0,14
4. Tablet Acepress 25 mg (PT. Bernofarm) 95,62% ± 2,09
5. Tablet Captensin 25 mg (PT. Kalbe Farma) 107,16% ± 2,10
6. Tablet Dexacap 25 mg (PT. Dexa Medica) 93,53% ± 0,90
7. Tablet Farmoten 25 mg (PT. Fahrenheit) 97,74% ± 0,69
8. Tablet Scantensin 25 mg (PT. Tempo Scan Pasific) 94,17% ± 0,23
9. Tablet Tenofax 25 mg (PT. Prima AS) 97,97% ± 0,16
10. Tablet Tensicap 25 mg (PT. Sanbe Bandung) 100,49% ± 1,30
Sediaan tablet kaptopril dengan nama dagang dan generik yang ditentukan
kadarnya berdasarkan luas puncak keseluruhannya sesuai dengan persyaratan United
State Pharmacopeia XXX (2007) yaitu mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak
lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.
DAFTAR PUSTAKA
Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Departemen Kesehatan RI.
Jakarta.Hal. 748.
Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Departemen Kesehatan RI.
Jakarta.Hal. 74.
Gritter, R.J, Bobbit, J.M, and Schwarting, A.E. (1985). Introduction of

Chromatography. Penerjemah Kosasih Padmawinata. Pengantar
Kromatografi. Edisi III. Penerbit ITB. Bandung. Hal. 186-239.
Johnson, E.L., and Stevenson, R (1991). Basic Liquid Chromatography.

Penerjemah Kosasih Padmawinata. Dasar Kromatografi Cair. Penerbit
ITB. Bandung. Hal. 1– 40.
Moffat, C.A. (2004). Clarke’s Isolation and Identification of Drugs. Third

Edition. Pharmaceutical Press. London. Page. 327.
Munson, J.W. (1991). Pharmaceutical Analysis Modern Methods. Part B.

Penerjemah Harjana. Analisis Farmasi Metode Modern. Parwa B.,
Penerbit Airlangga University Press. Surabaya. Hal. 14 – 96
Pharmacopeia USP, (2007). The National Formulary. Edition 30 . The United

States Pharmacopeial Convention. Page.1321-1322.
Putra, E.D.L. (2007). Dasar-dasar Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Fakultas

Farmasi USU. Medan. Hal. 40-123.
Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Penerbit Pustaka Pelajar.

Yogyakarta. Hal. 378-388.
Snyder, L.R., and Kirkland, J.J. (1979). Introduction to Modern Liquid

Chromatography. 2nd edition, By Jhon Wiley and Son. London. Page. 554.
Sudjana, (2002). Metoda Statistika. Edisi Keenam. Penerbit Tarsito. Bandung.

Hal. 165, 229, 491.
Tjay & Rahardja. (2002). Obat-Obat Penting. Edisi Kelima. Cetakan Kedua.
Penerbit PT. Gramedia. Jakarta. Hal. 322.
Wilmana, P.F. (1995). Analgesik-Antipiretik, Analgesik Anti-Inflamasi Nonsteroid
dan Obat Pirai. Dalam Farmakologi dan Terapi. Edisi keempat. Bagian
Farmakologi FKUI. Penerbit Universitas Indonesia. Press. Jakarta. Hal.
220-221.
Windholz, M,. (1976). The Merck Index. Edition 2. Merck & CO., Inc. USA.
Page. 279.
BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Kesimpulan
Penetapan kadar kaptopril dalam sediaan tablet dapat dilakukan dengan
metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) menggunakan kolom VP-ODS
(Oktadesil Silana 4,6 mm x 25 cm), fase gerak metanol : campuran air - asam
fosfat (75 : 25), laju alir 1,0 ml/menit, volume penyuntikan 20 µl, dan deteksi
dilakukan pada λ 220 nm.
Sediaan tablet kaptopril dengan nama dagang dan generik yang ditentukan
kadarnya berdasarkan luas puncak. keseluruhannya sesuai dengan persyaratan
United State Pharmacopeia XXX (2007) yaitu mengandung tidak kurang dari
90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.
4.2 Saran
Disarankan kepada peneliti selanjutnya agar dapat meneliti kadar kaptopril
dengan metode KCKT dengan kondisi yang lain.
Lampiran 1. Gambar alat KCKT dan syringe 100 µl
Alat KCKT
syringe 100 µl
Lampiran 2. Gambar alat ultrasonic cleaner dan penyaring
Alat Ultrasonic Cleaner
Penyaring
Lampiran 3. Perbandingan fase gerak pada orientasi yang dianalisa secara KCKT
pada λ 220 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm) dengan laju alir
1,0 ml/menit pada konsentarasi 1000 mcg/ml.
Perbandingan fase gerak Waktu tambat

(Metanol : air fosfat) (menit)
55 : 45 4,84
45 : 55 6,57
65 : 35 3,96
75 : 25 3,51
85 : 15 3,22
Lampiran 4. Kromatogram hasil penyuntikan larutan Kaptopril BPFI pada
konsentrasi 200 sampai 600 mcg/ml, yang dianalisa secara KCKT pada λ 220 nm,
kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak metanol : campuran air-asam fosfat
(75 : 25) laju alir 1,0 ml/menit.
a. Konsentrasi 200 mcg/ml
b. Konsentrasi 400 mcg/ml
c. Konsentrasi 500 mcg/ml
d. Konsentrasi 600 mcg/ml
Lampiran 5. Perhitungan persamaan regresi dari kurva kalibrasi Kaptopril BPFI
yang diperoleh secara KCKT.
Konsentrasi Luas
No
(mcg/ml) Puncak XY X2 Y2
X Y
1 200 4442854 888570800 40000 19738951670000
2 400 8277987 3311194800 160000 68525068770000
3 500 10423805 5211902500 250000 108653710700000
4 600 12503319 7501991400 360000 156332986000000
∑ 1700 35647965 16913659500 810000 353250717100000
Y=aX+b
n(∑ xy ) − (∑ x )(∑ y )
( )
a=
n ∑ x 2 − (∑ x )
2
4 (16913659500 ) − (1700 ) (35647965)

a=
4 (810000 ) − (1700 )
2
67654638000 − 60601540500
a=
3240000 − 2890000
7053097500
a=
350000
a = 20151,71
b=Y-aX
b = 8911992,46 – 20151,71 (425)
b = 8911992,46 – 8564476,75
b = 347515,71
Y=aX+b
Sehingga diperoleh persamaan regresi Y = 20151,71 X + 347515,71. Untuk
mencari hubungan kadar (X) dengan luas puncak (Y) digunakan pengujian
koefisien kolerasi (r)
n(∑ xy ) − (∑ x )(∑ y )
[n(∑ x ) − (∑ x ) ][n(∑ y ) − (∑ y ) ]
r=
2 2 2
4 (16913659500 ) − (1700 ) (35647965)

[(4 (810000) − (1700) )][4(353250717100000) − (3564765) ]
r=
2 2
67654638000 − 60601540500
r=
(3240000 − 2890000) (1413002868000000 − 1270777409000000)
7053097500
r=
49778910650000000000
7053097500
r=
7055417114
r = 0,9997
Lampiran 6. Contoh perhitungan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitasi (LOQ)
Persamaan garis regresi: Y = 20151,71 X + 347515,71
Konsentrasi (mcg/ml)
No X - Xi (X – Xi)2
X
1 200 -225 50625
2 400 -25 625
3 500 75 5625
4 600 175 30625
∑ 1700 87500
∑( X − X ) 2
SD =
n −1
87500
=
4 −1
= 170,78
3 × SD
LOD =
Slope
3 x 209,17
=
20151,71
= 0,0312 mcg/ml
10 × SD
LOQ =
Slope
10 × 209,17
=
20151,71
= 0,1038 mcg/ml
Lampiran 7. Kromatogram dari larutan tablet Kaptopril (PT. Dexa Medica)
c
e
f
A, b, c, d, e, dan f berturut-turut kromatogram hasil penyuntikan 6 kali dari larutan
tablet Kaptopril (PT. Dexa Medica) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
secara KCKT pada λ 220 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase gerak
metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25) laju alir 1,0 ml/menit, kromatogram
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Kaptopril (PT.Dexa Medica) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 101,04 0,40 0,1600
2 101,42 -0,02 0,0004
3 101,51 0,07 0,0049
4 101,32 -0,12 0,0144
5 101,95 051 0,2601
6 101,39 -0,05 0,0025
∑ X = 608,63 ( )
2
∑ X − X = 0,4423
X =101,44
Data yang paling menyimpang adalah 101,95%
∑( X − X ) 2 0,4423
SD = = = 0,2974
n −1 5
Pada interval kepercayaan 99 % dengan nilai α = 0,01, dk = n -1 = 6 – 1 = 5
diperoleh t tabel = 4,0321, Qkritis = 0,740
Dasar penolakan data apabila Q hitung > Q tabel
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min
Xq = kadar paling menyimpang

Xn = kadar yang mendekati Xq
101,95 − 101,51
Q hitung = = 0,4835
101,95 − 101,04
(data diterima)
Jadi, kadar sebenarnya terletak antara:
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,2974
= 101,44 ± 4,0321X
6
= 101,44 ± 0,49
Lampiran 9. Kromatogram dari larutan tablet Kaptopril (PT. Hexpharm Jaya)
c
e

tablet Kaptopril (PT. Hexpharm Jaya) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang
dianalisa secara KCKT pada λ 220 nm, kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm), fase
gerak metanol : campuran air-asam fosfat (75 : 25) laju alir 1,0 ml/menit,
kromatogram diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Kaptopril (PT. Hexpharm Jaya) secara
KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 105,45 -0,35 0,1225
2 105,46 -0,34 0,1156
3 105,67 0,13 0,0169
4 105,83 0,03 0,0009
5 105,89 0,09 0,0081
6 106,50 0,70 0,4900
∑ X = 634,80 ( )
2
∑ X − X = 0,7540
X =105,80
∑( X − X ) 2 0,7540
SD = = = 0,3883
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

106,50 − 105,89
Q hitung = = 0,5810
106,50 − 105,45
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,5810
= 105,80 ± 4,0321X
6
= 105,80 ± 0,64
Lampiran 11. Kromatogram dari larutan tablet Kaptopril (PT. Indofarma)
c
e
f
tablet Kaptopril (PT. Indofarma) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Kaptopril (PT. Indofarma) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 92,75 -0,14 0,0196
2 92,89 0,00 0,0000
3 92,94 0,05 0,0025
4 92,83 -0,06 0,0036
5 92,97 0,08 0,0064
6 92,94 0,05 0,0025
∑ X = 557,32 ( )
2
∑ X − X = 0,0346
X =92,89
∑( X − X ) 2 0,0346
SD = = = 0,0831
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

92,75 − 92,83
Q hitung = = 0,4211
92,94 − 92,75
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,0831
= 92,89 ± 4,0321X
6
= 92,89 ± 0,14
Lampiran 13. Kromatogram dari larutan tablet Acepress (PT. Bernofarm)
c
e
f
tablet Acepress (PT. Bernofarm) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Acepress (PT. Bernofarm) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 95,59 -0,03 0,0009
2 93,14 -2,48 6,1504
3 96,14 0,52 0,2704
4 96,52 0,90 0,8100
5 96,55 0,93 0,8649
6 95,76 0,14 0,0196
∑ X = 573,70 ( )
2
∑ X − X = 8,1162
X =95,62
∑( X − X ) 2 8,1162
SD = = = 1,2741
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

93,14 − 95,59
Q hitung = = 0,7185
96,55 − 93,14
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
1,2741
= 95,62 ± 4,0321X
6
= 95,62 ± 2,09
Lampiran 15. Kromatogram dari larutan tablet Captensin (PT. Kalbe Farma)
b
d
e
f
tablet Captensin (PT. Kalbe Farma) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Captensin (PT. Kalbe Farma) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 106,85 -0,31 0,0961
2 107,14 -0,02 0,0004
3 107,79 0,63 0,3969
4 104,96 -2,20 4,8400
5 108,82 1,66 2,7556
6 107,37 0,21 0,0441
∑ X = 642,93 ( )2
∑ X − X = 8,1331
X =107,16
∑( X − X ) 2 8,1331
SD = = = 1,2754
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

104,96 − 106,85
Q hitung = = 0,4896
108,82 − 104,96
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
1,2754
= 107,16 ± 4,0321X
6
= 107,16 ± 2,10
Lampiran 17. Kromatogram dari larutan tablet Dexacap (PT. Dexa Medica)
c
E
f
tablet Dexacap (PT. Dexa Medica) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Dexacap (PT. Dexa Medica) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 94,19 0,66 0,4356
2 94,15 0,62 0,3844
3 93,50 -0,03 0,0009
4 92,89 -0,64 0,4096
5 93,03 -0,50 0,2500
6 93,40 -0,13 0,0196
∑ X = 561,16 ( )
2
∑ X − X = 1,5001
X =93,53
∑( X − X ) 2 1,5001
SD = = = 0,5477
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

94,19 − 94,15
Q hitung = = 0,0345
94,19 − 93,03
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,5477
= 93,53 ± 4,0321X
6
= 93,53 ± 0,90
Lampiran 19. Kromatogram dari larutan tablet Farmoten (PT. Fahrenheit)
b
c
e
f
tablet Farmoten (PT. Fahrenheit) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Farmoten (PT. Fahrenheit) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 96,93 -0,81 0,6561
2 97,97 0,23 0,0529
3 97,70 -0,04 0,0016
4 97,90 0,16 0,0256
5 97,82 0,08 0,1296
6 98,10 0,36
∑ X = 586,42 ( )2
∑ X − X = 0,8722
X = 97,74
∑( X − X ) 2 0,8722
SD = = = 0,4177
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

96,93 − 97,70
Q hitung = = 0,6581
98,10 − 96,93
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,4177
= 97,74 ± 4,0321X
6
= 97,74 ± 0,69
Lampiran 21. Kromatogram dari larutan tablet Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific)
c
e
f
tablet Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang
penyuntikanlarutan Scantensin (PT. Tempo Scan Pasific) secara
KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 94,18 0,01 0,0001
2 94,35 0,18 0,0324
3 94,14 -0,03 0,0009
4 94,01 -0,16 0,0256
5 94,03 -0,14 0,0196
6 94,31 0,14 0,0196
∑ X = 565,02 ( )
2
∑ X − X = 0,0982
X = 94,17
∑( X − X ) 2 0,0982
SD = = = 0,1401
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

94,35 − 94,31
Q hitung = = 0,1176
94,35 − 94,01
(data diterima)

SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,1401
= 94,17± 4,0321X
6
= 94,17 ± 0,23
Lampiran 23. Kromatogram dari larutan tablet Tenofax (PT. Prima AS)
c
e
f
tablet Tenofax (PT. Prima AS) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang dianalisa
diperkecil 50%.
penyuntikan larutan Tenofax (PT. Prima AS) secara KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 97,95 -0,02 0,0004
2 98,03 0,06 0,0036
3 98,06 0,09 0,0081
4 98,05 0,08 0,0064
5 97,89 -0,08 0,0064
6 97,83 -0,14 0,0196
∑ X = 587,81 ( )
2
∑ X − X = 0,0445
X = 97,97
∑( X − X ) 2 0,0445
SD = = = 0,0943
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

97,83 − 97,89
Q hitung = = 0,2609
98,06 − 97,83
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,0943
= 97,97 ± 4,0321X
6
= 97,97 ± 0,16
Lampiran 25. Kromatogram dari larutan tablet Tensicap (PT. Sanbe Bandung)
c
e
f
tablet Tensicap (PT. Sanbe Bandung) pada konsentrasi 400 mcg/ml, yang
penyuntikan larutan Tensicap (PT. Sanbe Bandung) secara
KCKT
Kadar (%) (X – X) (X – X)2

No
X
1 98,94 -1,55 2,4025
2 100,46 -0,03 0,0009
3 101,12 0,63 0,3969
4 100,77 0,28 0,0784
5 100,70 0,21 0,0441
6 100,93 0,44 0,1936
∑ X = 602,92 ( )
2
∑ X − X = 3,1146
X = 100,49
∑( X − X ) 2 3,1156
SD = = = 0,7895
n −1 5
Xq − Xn
Q hitung =
X max − X min

98,94 − 100,46
Q hitung = = 0,6972
101,12 − 98,94
(data diterima)
SD
μ = X ± t (1−1 / 2α ).dk X
n
0,7895
= 100,49 ± 4,0321X
6
= 100,49 ± 2,09
Lampiran 27. Contoh perhitungan penimbangan sampel
Diketahui:
Berat 20 tablet = 2,5134 g
Kandungan kaptopril pada etiket = 25 mg
Ditanya:
Dibuat larutan uji dengan kadar lebih kurang 1000 mcg/ml.
Ditimbang serbuk setara dengan 50 mg kaptopril, maka berat sampel yang
ditimbang adalah:
2513,4 mg
Berat penimbangan sampel = X 50 mg
20 × 25 mg
= 2513 mg
Sampel yang telah ditimbang dimasukkan dalam labu ukur 50 ml, lalu dilarutkan
dalam pelarut dan cukupkan sampai garis tanda dengan air.
50 mg
Kadar larutan uji = X 1000 = 1000 mcg/ml
50 ml
Kemudian dipipet 10 ml larutan uji, lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25 ml
dan dicukupkan dengan fase gerak hingga garis tanda.
10 ml × 1000 mcg / ml
Kadar larutan uji = = 400 mcg/ml
25 ml
Lampiran 28. Contoh perhitungan kadar perolehan kaptopril
Perhitungan kadar perolehan sampel
Y = 20151,71 X + 347515,71
Luas puncak = 8312708
8312708 − 347515,71
X=
20151,71
7965192,29
X=
20151,71
X = 395,26
395,26
Kadar = X 99,14%
400
= 97,97%
Lampiran 29. Daftar spesifikasi sampel
1. Tablet Kaptopril 25 mg
No. Batch : 806020
Produsen : PT. Dexa Medica
No. Pendaftaran : GKL9705023010 A1
Tgl. Kadaluwarsa : Nov 2010
No. Batch : 3909091
Produsen : PT. Hexapharm Jaya
No. Pendaftaran : GKL . 0408511304A1
No. Batch : 0807123
Produsen : PT. Indofarma
No. Pendaftaran : GKL 9320916010 A1
Tgl. Kadaluwarsa : Agus 2013
4. Tablet Acepress 25 mg
No. Batch : TPH 29237
Produsen : PT. Bernofarm
No. Pendaftaran : DKL 8502310410 A1
Tgl. Kadaluwarsa : Sept 2013
5. Tablet Dexacap 25 mg
No. Batch : 562595
Produsen : PT. Dexa Medica
Lampiran 29. (lanjutan)
6. Tablet Captensin 25 mg
No. Batch : 926319
Produsen : PT. Kalbe Farma
7. Tablet Farmoten 25 mg
No. Batch : MF 1591
Produsen : PT. Fahrenheit
8. Tablet Scantensin 25 mg
No. Batch : 070018
Produsen : PT. Tempo Scan Pasific
9. Tablet Tenofax 25 mg
No. Batch : MH 0151
Produsen : PT. Prima AS
10. Tablet Tensicap 25 mg

No. Batch : HM 1276
Produsen : PT. Tempo Scan Pasific
Lampiran 30. Sertifikat pengujian Kaptopril BPFI

09e02640 PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

09e02640 PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PENETAPAN KADAR KAPTOPRIL DALAM SEDIAAN TABLET

DENGAN NAMA DAGANG DAN GENERIK SECARA

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai

PENETAPAN KADAR KAPTOPRIL DALAM SEDIAAN TABLET

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji

Pembimbing I, Panitia Penguji,

(Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.)

Medan, Agustus 2009

(Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.)

melimpahkan rahmat, karunia, dan ridhoNya, sehingga penulis dapat

memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih dan penghargaan

tidak terkira harganya.

Penulis juga menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada

Universitas Sumatera Utara.

memperhatikan dan membimbing penulis selama masa perkuliahan.

penulis selama perkuliahan.

5. Sahabat-sahabat terbaik di Fakultas Farmasi, khususnya Farmasi Ekstensi

terima kasih atas semua dukungannya.

kebaikan dan bantuan yang telah diberikan kepada penulis.

Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih memiliki banyak kekurangan.

berguna bagi pengetahuan umum dan ilmu farmasi khususnya.

Medan, Agustus 2009

Dalam penelitian ini dilakukan penetapan kadar kaptopril secara

Semua sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar yang tercantum dalam

Gambar 10. Kurva kalibrasi baku alopurinol konsentrasi versus luas

1.1 Latar Belakang

Hipertensi merupakan suatu kelainan, suatu gejala dari gangguan pada

mekanisme regulasi tekanan darah. Kaptopril merupakan turunan prolin yang

efektif meniadakan pembentukan Angiotensin Converting Enzym (ACE) II yaitu

digunakan pada hipertensi ringan sampai berat (Katzung, 1998).

Menurut Undang-undang No. 23 tahun 1992 pasal 40 ayat 1 tentang

apabila kadar zat berkhasiat yang terkandung di dalamnya memenuhi persyaratan

Menurut Farmakope Indonesia edisi IV (1995) kaptopril dapat ditetapkan

ditentukan kadarnya dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.

Metode yang digunakan dalam penetapan kadar kaptopril adalah menurut

nm, volume penyuntikan 20 μl dan kolom L1-Oktadesil Silana (4,6 mm x 25 cm).

Metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) merupakan metode yang

banyak keuntungan antara lain cepat, resolusinya baik, mudah melaksanannya,

detektor yang sensitif dan beragam sehingga mampu menganalisa berbagai

cuplikan secara kualitatif maupun kuantitatif, kolom dapat digunakan kembali,

Berdasarkan hal tersebut di atas, penulis tertarik menggunakan metode

dagang dan generik yang beredar di pasaran.

1.2 Perumusan Masalah

1. Apakah penetapan kadar tablet kaptopril dapat dilakukan secara

kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT), menggunakan kolom VP-ODS

2. Apakah kaptopril dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar yang

ditetapkan pada United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.

1. Diduga penetapan kadar kaptopril dapat dilakukan secara kromatografi

cair kinerja tinggi (KCKT).

2. Diduga kadar kaptopril dalam sediaan tablet memenuhi persyaratan kadar

yang ditetapkan United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.

1.4 Tujuan Penelitian

1. Melakukan penetapan kadar tablet kaptopril secara kromatografi cair

kinerja tinggi (KCKT).

ditetapkan United State Pharmacopeia XXX tahun 2007.

1.5 Manfaat Penelitian

1. Pengembangan ilmu bahwa penetapan kadar kaptopril dalam sediaan

tablet dapat juga dilakukan dengan kromatografi cair kinerja tinggi

(KCKT) menggunakan kolom VP-ODS (4,6 mm x 25 cm) dan fase gerak

campuran metanol, air dan asam fosfat.

2.1.1 Sifat Fisikokimia

Nama Kimia : 1-[2(S)-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl]-L-proline