Journal Reading

A New Challenge in Forensic Toxicology Exemplified by

a Case of Murderunder the Influence of a Synthetic
Cannabinoid – AM-2201

Sebastian Rojek, Małgorzata Kłys, Martyna Maciów-Głą b, Karol Kula Department of Forensic Medicine, Jagiellonian
University Medical College, Grzegórzecka 16 St., 31-531 Kraków, Poland

Oleh:

Annisa Ikhsani 1410311070

Aulya Dwi Febryan 1840312672
Diana Ismail 1840312744
Intan Nabilah 1840312668
Muhammad Gilang D P 1840312667
Muhammad Givanda Melky 1840312766
Nurul Izzah Binti M 1210314001
Yori Erjani 1840312670
Vicky Berlian O 1840312671

Preseptor :

dr. Taufik Hidayat, M.Sc, Sp.F

BAGIAN ILMU KEDOKTERAN FORENSIK DAN MEDIKOLEGAL

RSUP DR M.DJAMIL PADANG
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS ANDALAS
2019
 KATA PENGANTAR

Alhamdulillahirabbil’alamiin, puji dan syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT

dan shalawat beserta salam untuk Nabi Muhammad S.A.W, berkat rahmat dan
karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan tugas journal reading dengan judul “A
New Challenge in Forensic Toxicology Exemplified by a Case of Murderunder the
Influence of a Synthetic Cannabinoid – AM-2201” yang merupakan salah satu tugas
dalam kepaniteraan klinik Ilmu Kedokteran Forensik dan Medikolegal Fakultas
Kedokteran Universitas Andalas RSUP Dr. M. Djamil Padang.
Dalam usaha penyelesaian tugas journal reading ini, penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada bapak dr. Taufik Hidayat, M.Sc, Sp.F
selaku pembimbing dalam penyusunan tugas ini.
Kami menyadari bahwa di dalam penulisan ini masih banyak kekurangan.
Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati penulis menerima semua saran dan
kritik yang membangun guna penyempurnaan tugas journal reading ini. Akhir kata,
semoga referat ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.

Padang, 22 Agustus 2019

Penulis

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 1

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 1
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 2
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 3
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 4
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 5
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 6
Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 7
Tantangan Baru Dalam Toksikologi Forensik Yang Dicontohkan
Oleh Kasus Pembunuhan Di Bawah Pengaruh Kanabinoid Sintetis
– AM-2201

Abstrak
Di antara zat baru psikoaktif (NPS) yang tersedia di pasar narkotika, sejumlah besar
terdiri dari cannabinoid sintetis yang dikenal sebagai "spice" dan "K2", dan yang
secara hukum diperlakukan sebagai alternatif hukum untuk ganja. Sedikitnya
informasi tentang farmakologi dari zat yang beredar di pasaran ini telah
menciptakan tugas mendesak di antara penyedia layanan kesehatan untuk
mempelajari zat yang terdapat dalam kasus ini, baik dari segi konsekuensi
pengunaan zat tersebut, dan dalam metode deteksi. Subjek laporan ini adalah
analisis multi-parameter dari kasus pidana seorang laki-laki berusia 18 tahun yang
didakwa dengan pembunuhan saudara perempuan dan percobaan pembunuhan
terhadap dua korban lainnya dengan menusuk. Terdakwa mengaku bersalah, tapi ia
mengklaim bahwa ia telah bertindak tanpa kemauan, karena ia berada di bawah
pengaruh dari cannabinoid sintetis AM-2201, yang telah dibeli dari penjual sebagai
paket 10 g berlabel “Mr Green - No bad trip”. Metode analisis termasuk gas
chromatography – electron ionization – quadrupole ion trap mass spectrometry
(GC-EI-QIT/MS) dan liquid chromatography, electrospray ionization, tandem
massspectrometry (LC-ESI-MS-MS) dikembangkan untuk menentukan
keberadaan AM-2201 di Mr Green - No bad trip dan dalam darah pelaku. Temuan
toksikologis dibahas dalam konteks efek merugikan terhadap psikoaktif dan fisik
dihasilkan dari kehadiran AM-2201 dalam tubuh manusia; observasi juga dianalisis
bersama dengan data dari literatur.

Keywords : AM-2201, synthetic cannabinoids, new psychoactive substances (NPS)

1. Pendahuluan
Cannabinoids sintetis, umumnya dikenal sebagai smokable herbal “spice”
dan “K2”, adalah obat racikan paling populer.1,2,3 Meskipun label mereka secara
resmi ditulis “bukan untuk konsumsi manusia”, dalam praktiknya zat-zat tersebut
digunakan untuk mencapai efek psikologis yang meniru efek Δ9-THC.4 Tidak ada

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 8

kesamaan struktural dalam cannabinoids sintetis dengan Δ9-THC; Namun, mereka
adalah agonis kuat reseptor cannabinoid CB1 dan CB2, serta reseptor N-metil-
D'Aspartat.5 CB1 dan CB2 reseptor terutama ditemukan dalam SSP, tetapi juga
terletak pada jaringan perifer.6 Ikatan cannabinoids sintetis lebih tinggi dari Δ9-
THC.7,8 yang menyiratkan potensi yang lebih besar, efek samping yang lebih kuat,
dan mungkin durasi aksi yang lebih lama.
Sejumlah penyelidik dari subjek mengantisipasi meningkatnya penggunaan
spice tidak hanya mengingat efek biologis yang diharapkan, tetapi juga karena
keterjangkauan, aksesnya yang mudah dan penghindaran deteksi dalam tes obat
yang terstandarisasi.9
Mengingat terbatasnya pengetahuan tentang toksisitas cannabionid sintesis,
baik efek klinis dan efek perilaku dari pengunaan zat ini pada tubuh manusia,
menjadikannya topik penting untuk diteliti. Subjek laporan ini sejalan dengan
agenda ini, dalam hal ini menyajikan analisis multi-parameter dari kasus pidana
seorang laki-laki 18 tahun yang didakwa dengan pembunuhan kerabat wanitanya
dan percobaan pembunuhan dengan menikam dua korban lainnya. Terdakwa
mengaku bersalah, tapi ia mengklaim dia telah bertindak di bawah sadar, karena ia
telah berada di bawah pengaruh dari cannabinoid sintetis AM-2201 yang dibeli dari
penjual sebagai paket 10 g bermerek Mr Green – No bad trip.
Metode analitik, termasuk gas chromatography – electron ionization –
quadrupole ion trap mass spectrometry (GC-EI-QIT/MS) dan liquid
chromatography – electrospray ionization – tandem mass spectrometry (LC-ESI-
MS-MS) dikembangkan untuk menentukan AM-2201 dalam bukti materi Mr Green
– No bad trip dan dalam darah pelaku masing-masing. Temuan toksikologis dibahas
dalam konteks efek fisik dan psikoaktif merugikan yang dihasilkan dari kehadiran
AM-2201 dalam tubuh manusia.

2. Sejarah Kasus
Menurut laporan polisi, pada saat kejadian, sekitar pukul 6:10 malam,
seorang wanita berinisial JG terbunuh, pelaku kejahatan adalah seorang pria berusia
18 tahun berinisial AG, yang menikam korban dengan pisau sebanyak 20 kali.
Setelah itu, AG, dalam keadaan kepanikan, melukai suami korban dan kenalan
prianya, yang pada saat itu sedang berkunjung dengan Tuan dan Nyonya G. Setelah

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 9

melakukan tindakan ini, pelaku masih dalam kepanikan dan meninggalkan tempat
kejadian. Pelaku ditahan di tempat kerja ibunya dan didakwa melakukan
pembunuhan dan dua tuduhan percobaan pembunuhan.
Pada saat interograsi, ibu pelaku mengakui putranya telah
menyalahgunakan narkoba. Kira-kira dua tahun sebelumnya, dia mengujinya untuk
pertama kalinya karena penyalahgunaan narkoba; tes mendeteksi terdapat
kanabinoid di dalam urin.
Ketika ditanya tentang motif di balik kejahatan itu, AG memberikan
penjelasan berikut: "Saya tidak tahu mengapa saya melakukannya, ini adalah bibi
saya, saya tidak punya motif untuk membunuhnya. Saya bukan diriku sendiri.
Ketika saya melihat pisau di dapur, saya membayangkan mengambilnya. Ketika
saya meninggalkan dapur dengan pisau, saya tidak tahu mengapa saya menyerang
bibiku. Itu hanya sesaat. Saya menyesalinya. Saya menyerang paman saya dan
orang ini karena saya tidak tahu apa yang akan terjadi. Saya tidak ingin membunuh
mereka; Saya hanya ingin melarikan diri. Saya tidak tahu berapa banyak pisau yang
masuk ke bibi saya. Mataku tertutup. Saya tidak menyadari bahwa saya bisa
membunuhnya dan melukainya. Untuk pertama kalinya saya merasakan hal ini,
setelah meminum obat-obatan; Saya tidak pernah merasa bahwa saya bisa
membunuh seseorang. Saya tidak tahu luka seperti apa yang dialami paman saya;
Aku melambaikan pisau ke arahnya seperti orang gila. Saya menyesal dan meminta
maaf (tersangka menangis) ”. Selanjutnya, selama persidangan, AG menyatakan:
"... Saya mengaku bersalah karena didakwa ... Saya tidak mengendalikan diri. Saya
dicampakkan. Saya tidak tahu apa yang saya lakukan. Jika saya tidak
mengambilnya, hal seperti ini tidak akan terjadi ”.
Setelah diberikan foto-foto persiapan, tersangka mengenali sebuah paket
yang dibungkus dengan kertas aluminium berlabel Mr Green – No bad trip dan
menyatakan inilah yang telah diambilnya.
Menurut laporan interogasi resmi DK - dealer obat-obatan perancang yang
darinya AG membeli persiapan selama satu setengah bulan - DK telah memesan
obat-obatan desainer di Internet. Totalnya kira-kira sekitar 12 paket, masing-masing
beratnya sekitar 20 g. Dia awalnya memesan adalah satu bungkus yang terdiri dari

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 10

dua paket. Masing-masing beratnya sekitar 10 g. Salah satu paket berisi obat
desainer bernama Mr Green – No bad trip dan the other Old School.
Dalam pendapat psikiatris-hukum yang dirumuskan setelah periode
pengamatan beberapa minggu, para ahli setuju, menyatakan bahwa tidak ada
keterbelakangan mental didiagnosis di AG. Tidak ada defisit intelijen yang diamati,
atau tanda-tanda kerusakan organik dari sistem saraf pusat. Namun, ia
menunjukkan kepribadian abnormal dan diduga gangguan psikotik sementara
kriminis, dan didiagnosis dengan kecanduan zat psikoaktif (cannabinoid dan hukum
tertinggi), serta gangguan kepribadian yang belum matang. Saat melakukan
tindakan seperti yang dituduhkan, AG, karena cacat mental, sepenuhnya atau
sebagian tidak dapat menghargai sifat dan kualitas tindakannya dan mengendalikan
tingkah lakunya.
Dalam pengumpulan sampel darah dari tersangka, yang terjadi pada pukul
19:50, sekitar 1,5 jam setelah pembunuhan, dokter mencatat zona eritematik kecil
di wilayah kelenjar susu, kulit pucat, sialore, produksi dahak bersih yang melimpah,
meludah, dan dislalia. Tersangka tidak komunikatif, tenang, gerakan motornya
lamban, pupil matanya lebar dan lambat bereaksi terhadap cahaya, badan
terhuyung-huyung, dan mengambil objek dari lantai sulit dan tidak terkoordinasi;
tidak ada alkohol yang tercium dalam napasnya. Kesimpulannya, dokter
menyatakan bahwa subjek yang diperiksa mungkin berada di bawah pengaruh zat
narkotika atau psikotropika.
Pada saat yang sama dengan pengumpulan sampel darah, AG dijadikan
subjek tes breathalyzer. Tes ini tidak mendeteksi etil alkohol di udara yang
dihembuskan (0,00 mg / l).
Bahan bukti yang dikumpulkan menunjukkan hubungan sebab akibat antara
adanya konsentrasi efektif kanabinoid sintetis dalam darah dan disfungsi
psikosomatis yang terdeteksi pada terdakwa selama pemeriksaan medis. Ini
mendukung anggapan bahwa ketika melakukan tindakan sebagaimana dituntut; dia
berada di bawah pengaruh AM-2201. Tidak dapat disangkal bahwa efek
psikotropika yang ditimbulkan oleh AM-2201 juga diperkuat oleh kehadiran
komponen aktif ganja, yaitu, Δ9-tetrahydrocannabinol, yang mungkin masih ada di
tubuh AG pada saat kejahatan itu dilakukan.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 11

3. Bahan dan metode
3.1. bahan non-biologis dan biologis
 Barang-barang bukti dibungkus dengan aluminium foil dan diberi label Mr
Green – No bad trip, yang dimasukan ke dalam sembilan kantong plastik
ritsleting yang dapat ditutup kembali, barang disita oleh Kantor Kejaksaan
dan serahkan untuk analisis identifikasi.
 Sampel darah lengkap vena dikumpulkan dari tersangka pada pukul 7:50
malam. sekitar 1,5 jam setelah dia melakukan pembunuhan dan 3 jam
setelah dia merokok Mr Green – No bad trip. Sampel dibekukan (−20 ° C)
sampai analisis dilakukan.
 Sampel whole blood untuk pengembangan dan validasi metode analitik
diambil dari subyek sehat yang dibeli di Donor Darah Pusat Regional di
Kraków.
3.2. Standar dan bahan kimia

Larutan standar AM-2201 dan JWH-073-d9 pada konsentrasi 1 mg / ml

dibeli dari LGC (Dziekanów Leśny, Łomianki, Polandia).
Amonium format, natrium bikarbonat, natrium klorida, asam format,
asetonitril, n-heksana, etil asetat, dan metanol untuk LC-MS dibeli dari Sigma-
Aldrich (Poznań, Polandia).
Untuk calibrator samples, tiga working solutions disiapkan dalam metanol
pada konsentrasi berikut: 0,001, 0,01, dan 0,1 ng AM2201/μl. Selain itu, methanolic
solutions disiapkan untuk sampel kontrol kualitas (QC) pada konsentrasi 0,001,
0,01, dan 0,1ng / μl untuk AM-2201. Calibrator dan QC working solutions dibuat
dari berbagai sumber. Semua working solutions disimpan pada suhu -20 ° C saat
tidak digunakan. calibration samples harian disiapkan dengan memperkuat 0,2 ml
blank blood dengan jumlah AM-2201 yang diketahui pada konsentrasi mulai dari
0,05 hingga 2,5 ng / ml. Spesimen QC rendah, sedang dan tinggi juga disiapkan
setiap hari pada konsentrasi 0,075, 0,75, dan 2,25 ng / ml untuk AM-2201. Untuk
standar internal deuterasi (IS), working solution 0,01 ng JWH-073-d9 / μl dalam
metanol disiapkan dan disimpan pada suhu -20 ° C saat tidak digunakan. Lima
puluh mikroliter dari working solution ini ditambahkan ke setiap sampel sebelum
ekstraksi, memberikan konsentrasi IS akhir yang dideuterasi sebesar 2,5 ng / ml.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 12

3.3. prosedur analitis
3.3.1. identifikasifi Studi kasi bukti
Untuk identifikasi ekstrak metanol Mr Green – No bad trip, analisis GC-
MS dilakukan pada Thermo Electron TRACE GC gas chromatograph yang
dihubungkan dengan Thermo Electron POLARIS Q quadrupole ion trap mass
spectrometer. Injeksi Splitless digunakan dengan sistem autosampler Thermo
Scientific TriPlus ™. Pemisahan analit dicapai dengan kolom HP-5MS-UI (30 m ×
0,25mm i.d., ketebalan 0,25 m film) dengan helium (6,0) sebagai gas pembawa
pada tekanan konstan 19,0 psi. Temperatur kolom awal 50°C ditahan selama 1.0
menit, diikuti oleh peningkatan hingga 290°C pada 10°C / menit dengan penahanan
20 menit. MS dioperasikan dalam mode ionisasi elektron. Antarmuka MS, sumber,
dan suhu perangkap ion quadrupole adalah masing-masing 290°C, 200°C dan
200°C, masing-masing. Pemantauan pemindaian ion ganda digunakan dengan total
skala 0,53 detik. Spektrum massa diukur dalam kisaran 35-550 amu. File data
pindaian penuh yang diperoleh oleh sistem GC-MS dievaluasi dengan dekonvolusi
spektral massa otomatis dan sistem identifikasi (AMDIS) dalam mode sederhana.
Pustaka target yang digunakan dari zat psikoaktif baru (NPS), yang dikembangkan
oleh penulis berdasarkan analisis standar bersertifikasi.10
3.3.2. Tes skrining awal
Tes skrining termasuk enzim-linked immunosorbent assay (ELISA),
(diproduksi oleh Neogen, Ayr, Skotlandia, UK) darah untuk amfetamin,
metamfetamin, opiat, kokain, kanabinoid, barbiturat, benzodiazepin, antidepresan
trisiklik, cannabinoid sintetis (JWH- 018), dan metode Penyaringan Toksik HPLC-
DAD (MTSS, dikembangkan dan dipasok oleh Merck, Darmstadt, Jerman) untuk
keberadaan obat-obatan asam, netral, dan basa dalam darah.
Hasil tes ELISA positif untuk cannabinoid asli dan sintetis. Analisis HPLC-
DAD membuka jalan untuk analisis lebih lanjut
3.3.3. Ekstrasi
Lima puluh mikroliter larutan IS yang bekerja ditambahkan ke 0,2 ml
alikuot kalibrator, QC, blank blood, dan sampel subjek, bersama dengan 0,2 ml
larutan natrium bikarbonat jenuh, dan campuran brie flvortex. 0,2 ml natrium
klorida jenuh ditambahkan, dan sampel dicampur pusaran sebelum penambahan 3

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 13

mL pelarut ekstraksi (heksana / etil asetat, 99: 1, v / v). Sampel dicampur selama
20 menit pada mixer berputar kemudian disentrifugasi selama 5 menit pada 4.500
rpm. Lapisan organik atas dipindahkan ke tabung yang bersih dan berlabel dan
diuapkan sampai kering di bawah nitrogen pada suhu 40 ° C. Sampel dilarutkan
dengan campuran 0,1 ml (fase 95% A + fase 5% B), dan 15 μl ekstrak biologis
diinjeksikan ke dalam sistem LC-ESI-MS-MS.

3.3.4. Studi kuantisasi AM-2201 dalam sampel darah forensik

Sebuah Agilent Technologies 1200 liquid chromatograph (Santa Clara, CA,
USA) yang dilengkapi dengan pompa biner (G1312 A) dan autosampler (G1329 A)
digunakan dalam mode gradien. Pemisahan kromatografi dilakukan dengan kolom
Poroshell 120 C18 (100 mm × 3 mm, 2,7μm, Agilent, USA). Fase A adalah air,
yang mengandung asam format 0,2% dan 2 mM format amonium dan fase B adalah
asetonitril dengan asam format 0,2% dan 2 mM format ammonium. Gradien untuk
sampel yang mengandung AM-2201 diprogram sebagai berikut: 95% [A] dan 5%
[B] pada laju aliran 0,5ml / menit, diikuti oleh perubahan linier menjadi 10% [A]
dan 90% [B] pada laju aliran 1 ml / menit dalam 10 menit.
6410 triple quadrupole mass spectrometer (Agilent Technologies, Santa
Clara, CA, USA), sumber ion electrospray (ESI), dioperasikan dalam mode positif.
Parameter operasional sumber ESI adalah sebagai berikut: suhu penguapan 350 °
C; tekanan gas nebulising 40 psi; aliran gas pengering 9 L / mnt; potensial kapiler
3,5 kV. Paragrafparameter dari senyawa yang dianalisis pada tabel 1.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 14

4. Validasi metode LC-ESI-MS-MS
4.1. selektivitas
Untuk mengevaluasi kemurnian dan selektivitas, sampel blank blood (tanpa
analit atau ditambahkan IS) dianalisis setiap batch untuk diperiksa puncak yang
mungkin mengganggu deteksi AM-2201 atau JWH-073-d9. Untuk menilai
kemungkinan campur tangan dari cannabinoid sintetis lainnya, masing-masing
sampel QC dibubuhi dengan 100 ng / ml campuran cannabinoid sintetis asli dan
cannabinoid sintetis. Tidak ada gangguan dengan senyawa tersebut.

4.2. Sensitivitas, linearitas, batas kuantitasi dan deteksi

Kurva kalibrasi dibangun setelah analisis darah bebas obat yang
mengandung sejumlah AM-2201. Untuk menyiapkan standar ini, sampel darah
dibubuhi dengan senyawa yang diteliti dengan konsentrasi berikut: 0,05, 0,1, 0,5,
1,0 dan 2,5 ng / ml untuk darah. Setiap level dipersiapkan tiga kali. Sampel
diekstraksi sesuai dengan prosedur yang dijelaskan. Kurva kalibrasi dibangun
dengan memplot rasio area puncak analit (AM-2201) / standar internal (JWH-073-
d9).
Sampel validasi disiapkan dalam rangkap tiga pada konsentrasi berikut:
0,005, 0,01, 0,025, 3, 5 dan 10 ng / ml AM-2201 untuk menilai akurasi metode di
atas dan di bawah kurva kalibrasi. Sampel kontrol kualitas negatif dianalisis setelah
setiap sampel linearitas untuk mengevaluasi kemungkinan carry-over. Batas deteksi
(LOD) metode ditentukan dengan menganalisis sampel validasi (n = 5) untuk
menentukan apakah kriteria penerimaan dipenuhi untuk setiap analit. LOD
didefinisikan sebagai konsentrasi terendah di mana rasio sinyal-to-noise analit ion
(ditentukan oleh ketinggian puncak) adalah ≥10 / 1, dan kromatografi (bentuk dan
resolusi puncak) dan waktu retensi relatif (± 2% dari target RT) ) dapat diterima.
LOQ didefinisikan sebagai konsentrasi terendah yang memenuhi kriteria LOD dan
memiliki kuantifikasi analit dalam ± 20% dari nilai target

4.3. Akurasi dan presisi

Data akurasi dan presisi inter dan intra-uji untuk AM-2201 ditentukan
dengan sampel QC rendah, sedang dan tinggi. Data intra- assay dinilai dengan
membandingkan data dari dalam satu run (n = 5) dan data inter-assay ditentukan

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 15

antara lima berjalan terpisah (n = 15). Data dievaluasi menggunakan analisis varian
satu arah dengan hari sebagai variabel pengelompokan. Akurasi, dinyatakan
sebagai persentase, dihitung dengan mengambil perbedaan antara konsentrasi rata-
rata yang dihitung dan konsentrasi target, dibagi dengan rata-rata yang dihitung dan
dikalikan dengan 100 untuk tiga konsentrasi QC (0,075, 0,75 dan 2,25 ng / ml).
Presisi, dinyatakan sebagai deviasi standar deviasi (% R.S.D.), Ditentukan dengan
menghitung rasio persentase dari standar deviasi dibagi dengan konsentrasi rata-
rata yang dihitung dikalikan 100.

4.4 Efisiensi ekstraksi, Efek matriks, Efisiensi Proses

Efisiensi ekstraksi, efek matriks, dan efisiensi proses dievaluasi melalui tiga
kelompok sampel (n = 5 untuk setiap kelompok). Efisiensi ekstraksi untuk setiap
analit diukur pada setiap konsentrasi QC. blank blood (5 lot berbeda) telah
difortifikasi dengan larutan QC dan IStd sebelum dan sesudah SPE. Hasil
persentase efisiensi ekstraksi darah dinyatakan sebagai bidang analit rata-rata
sampel (n = 5) difortifikasi dengan larutan kontrol sebelum dilakukan ekstraksi
dibagi dengan rata-rata area sampel (n = 5) dengan larutan kontrol ditambahkan
setelah SPE. Efek matriks dinilai dengan membandingkan daerah puncak analit
dalam 10 spesimen blank blood yang berbeda diekstraksi yang difortifikasi dengan
solusi QC dan IStd setelah SPE ke daerah puncak sampel pada konsentrasi nominal
yang sama disiapkan dalam campuran 95: 5 fase gerak A dan fase gerak B (murni).
Penekanan atau peningkatan matriks dihitung sebagai berikut: (100 × daerah
puncak rata-rata darah yang difortifikasi setelah SPE / daerah puncak rata-rata
murni) - 100. Dalam efisiensi proses meneliti efek keseluruhan dari efisiensi
ekstraksi SPE dan efek matriks pada kuantifikasi analit yang penting. Hal ini
ditentukan dengan membandingkan rata-rata puncak analit dari lima sampel yang
ditentukan sebelum SPE dengan puncak rata-rata lima sampel murni yang disiapkan
dalam fase gerak pada konsentrasi yang sama.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 16

5. Hasil
Dalam Analisis kuantitatif yang dilakukan terhadap Mr-Green – No Bad
Trip Situation dengan adanya AM-2201 pada konsentrasi 4,85% (48,5mg/g). Hasil
foto ditunjukkan pada Gambar. 1.

Gambar 1. Bukti material yang dilindungi oleh polisi mengandung AM-2201.

Tahapan analisis yang dikembangkan adalah dengan cara parameter validasi

ditentukan dengan metode LC-ESI-MS-MS untuk AM-2201. Terdapat pada Tabel
1-4. Sampel darah tepi yang diambil dari tersangka menjadi sampel analisis
toksikologis. Pada konsentrasi 0,48 ng / ml terdapat AM-2201. Selain itu, dalam
sampel darah menunjukkan adanya asam 11-nor-9-carboxy-Δ9-
tetrahydrocannabinolic (THC-COOH) pada konsentrasi 23 ng / ml (Tabel 2)
(Gambar 2). Hasil analisis dari hasil untuk darah pelaku pembunuhan terdapat pada
Gambar. 3.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 17

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 18
Gambar 3. Multiple reaction monitoring (MRM) chromatogram dan MS/MS mass
spectra setelah analisis forensic pada sampel darah (atas untuk AM-2201, bawah
untuk JWH-073-d9)

6. Diskusi
Laporan kasus ini menjelaskan studi psikologis dari pelaku pembunuhan
dan sumber informasi tentang bagaimana keracunan menurut undang-undang yang
disebabkan oleh zat psikoaktif sintetik pada tubuh manusia. Ini menjadi contoh
tantangan yang signifikan dengan munculnya kanabinoid sintetis yang
menimbulkan toksikologi kontemporer dan juga terkait metodologi pengobatan.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 19

 Masalah pertama terkait dengan deteksi dan identifikasi pembuat obat
dalam matriks biologis. Menurut ibu terdakwa, AG telah menggunakan narkoba
setidaknya dua tahun sebelum melakukan tindakan kejahatan, kebanyakannya
adalah ganja tetapi juga designer drugs. Dengan pengecualian terhadap mendeteksi
ganja dalam urin, semua tes pada anaknya melalui pemeriksaan terhadap
penyalahgunaan narkoba tidak menunjukkan hasil positif karena keterbatasannya
tes yang mampu mendeteksi designer drugs yang kemungkinan besar telah diambil
oleh AG. Dalam situasi seperti ini satu-satunya informasi yang bisa didapatkan
yaitu dari selebaran pada paket berisi persiapan yang digunakan meskipun hanya
nama dagang tidak disertai dengan komposisi kimia yang tidak informatif. Dengan
demikian diperlukan suatu analisis yang memungkinkan identifikasi komponen
aktif dari persiapan yang memerlukan pengembangan metode yang tepat.
Situasi serupa juga dihadapi oleh seorang klinisi-toksikologi di instalasi
gawat darurat ketika berhadapan dengan pasien yang mabuk namun tidak dapat
menentukan jenis obat yang memabukkan yang telah digunakan. Masalahnya
adalah bahwa designer drugs tidak dapat dideteksi oleh prosedur rumah sakit jalur
cepat yang tidak memiliki prosedur analisis yang mungkin menjadi dasar dari
penentuan tersebut.
Penulis saat ini telah mengembangkan metode untuk mengisolasi
cannabinoid sintetis AM-2201 dari darah dan untuk mengoptimalkan parameter
validasi. Hal ini dapat dilakukan karena Kantor Kejaksaan yang menyediakan
sampel darah pelaku bersama-sama dengan Mr-Green – No Bad Trip Situation yang
diduga telah dihisap oleh terdakwa sebelum dia melakukan pembunuhan.
Produk ganja pertama biasanya mengandung JWH-018 dan JWH-073,
tetapi ketika mereka sebagai legal drugs turunan lainnya muncul segera seperti
JWH-081, JWH-122, JWH-210, dan AM-2201. Meskipun terdapat sedikit
perbedaan dalam komposisi kimianya, semua cannabinoid sintetik dapat larut
dalam lemak, non-polar, dan sangat mudah menguap, yang sifatnya menyerupai
aksi Δ9-THC.3
Cannabinoid yang diturunkan dari senyawa AM, termasuk AM-2201 [1-(5-
fluoropentyl)-3-(1-naphthoyl)-1H-indol-3-yl](1-naphthyl)methanone] disintesis
oleh Alexandros Makriyannis di Northeastern University di Boston.11 Tujuan dari

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 20

penemu adalah untuk meningkatkan afinitas reseptor yang membuat analog ini
bermanfaat secara terapi sebagai obat untuk perawatan nyeri, glaukoma, epilepsi,
dan mual yang berhubungan dengan kemoterapi pada manusia dan hewan. Namun,
gagasan itu tidak dapat diaplikasikan dalam praktik dengan demikian menjadi zat
psikoaktif yang baru dalam kelompok hukum tertinggi.
Farmakokinetik kanabinoid sintetik masih belum jelas begitu juga informasi
mengenai volume distribusinya. Namun, dengan mempertimbangkan lipofilisitas
tinggi dari cannabinoid sintetis yang ditemukan dalam campuran herbal, terdapat

kesamaan parameter ini dengan Δ9-THC(∼10L/kg) yang menunjukkan risiko

akumulasi setelah konsumsi berulang. Sebagai konsekuensinya, ada kemungkinan

pendeteksian cannabinoid sintetis dalam sampel darah atau urin yang lebih lama
setelah penggunaan yang terus menerus.12 Selain itu, penggunaan lama cannabinoid
sintetis dapat mengakibatkan intoleransi dan sakau setelah penghentian obat.13
Metabolisme cannabinoid sintetis telah dilakukan selidiki dalam berbagai
penelitian pada model manusia dan hewan. Studi-studi ini menunjukkan bahwa
biotransformasi sebagian besar senyawa ini termasuk monohydroxylation serta
oksidasi lebih lanjut dari metabolit terhidroksilasi dan N-dealkylation kemudian
akan membentuk konjugat asam glukuronat. Analisis kinetik menggunakan
mikrosom hati manusia dan enzim manusia rekombinan mengidentifikasi CYP 2C9
dan CYP1A2 sebagai enzim P450 utama yang terlibat dalam oksidasi JWH-018 dan
AM-2201.14
Pada senyawa lain, metabolisme yang dikatalisis oleh isoenzim CYP lain
mungkin memainkan peranan yang penting. Ditemukan bahwa dalam kasus
konsumsi AM-2201 metabolit JWH-018 juga ada, mungkin terjadi setelah
defluorinasi enzimatik AM-2201.15,16 Peneliti subjek menekankan fakta bahwa
biotransformasi kompleks cannabinoid sintetis dapat menyebabkan efek
farmakodinamik yang tidak dapat diprediksi, karena beberapa metabolit juga
mengikat reseptor CB1 dengan cara agonistik, agonistik terbalik, atau antagonis.
Selain potensi cannabinoid sintetis yang lebih tinggi dibandingkan dengan Δ9-THC,
beberapa dari mereka memiliki waktu paruh yang lama dan / atau menghasilkan
produksi metabolit aktif yang dapat menginduksi tachyphylaxis.17,18Metabolisme
AM-2201 terdapat pada Gambar 2.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 21

 Gambar 2. Metabolisme AM-2201
Dalam kasus ini , AG diperkirakan menghisap AM-2201 sekitar 1,5 jam
sebelum ia melakukan tindakan pembunuhannya dan terdeteksi 0.48ng/ml AM-
2201 dan 23ng/ml THC-COOH setelah 3 jam pengambilan sampel darahnya.
Evaluasi keadaan psikosomatis dilakukan oleh dokter pada saat mengumpulkan
sampel darah menunjukkan bahwa AG tampak kulit pucat, sialorea, produksi
sputum yang meningkat, air liur keluar terus menerus, dyslalia, dan pupil lebar yang
bereaksi lambat terhadap cahaya. Tersangka tampak banyak diam, tidak
komunikatif, gerakan motorik tampak lambat dan sempoyongan.
Satu setengah jam sebelumnya ketika dia melakukan kejahatan, dia bersikap
agresif dan ketika dia bersaksi sendiri dia tidak menyadari apa yang dia lakukan,
merasa seperti di rasuki, tidak dapat mengendalikan diri, panik dan menjadi bagian
dari film. Obat Mr.Green – No Bad Trip yang telah digunakannya untuk pertama
kali yang menimbulkan efek seperti itu setelah sekitar 1–1,5 jam. Dengan demikian
dapat diduga bahwa serangan kerasukan seperti itu dikombinasikan dengan
tindakan pembunuhan adalah respon terhadap puncak dari efek biologis yang
berkembang setelah 1-1,5 jam setelah menghisap AM-2210.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 22

 Seperti yang terlihat dari investigasi remaja pria memiliki risiko lebih besar
menggunakan ganja.18,19 Selain itu, penyalahgunaan ganja dapat dikelompokkan ke
dalam tiga kategori yaitu penggunaan narkoba sebelumnya, perokok ganja,
pengguna narkoba pertama yang berusaha menghindari hukum, dan peneliti naif
narkoba. Pusat Pemantauan Narkoba dan Kecanduan Narkoba Eropa
mengumpulkan informasi tentang pola penggunaan ganja sebagian besar melalui
forum Internet di mana pengguna sering berbagi pengalaman mereka (EMCDDA,
2009).3
Laporan kasus ini berfokus terhadap efek cannabinoid sintesis yang
menggambarkan bermacam-macam efek psikoaktif mulai dari euforia yang
diinginkan hingga kegelisahan, psikosis, dan gangguan kemampuan kognitif.3,21
Gambaran klinis yang muncul mulai dari mual hingga gejala simpatomimetik yang
lebih serius, seperti agitasi psikomotor, diaforesis dan palpitasi.19,20Selain itu, efek
subyektif dan fisiologis dari ganja juga dapat sangat bervariasi tergantung pada
jenis produk ganja yang digunakan.21
Tidak ada informasi tentang penggunaan kronis dan toksisitas canabinoid
sintetis namun kita tahu bahwa penggunaan ganja berat yang berkepanjangan telah
dikaitkan dengan peningkatan risiko psikosis pada pengguna yang lebih muda.22
Penggunaan ganja berat dalam jangka panjang dapat menyebabkan lesi otak, yang
berhubungan dengan efek negatif pada memori dan proses emosional.3
Dalam kasus AG mungkin menemukan konfirmasi efek negatif
ketergantungan ganja selama 2 tahun akan tetapi perilakunya tidak memiliki unsur
agresi. Menurut kesaksian teman dan keluarganya dia agak tertutup dan tidak
komunikatif saat berada di bawah pengaruh ganja. Namun demikian, mengambil
Δ9-THC berhubungan dengan keinginan untuk memperkuat efeknya, untuk meraih
obat yang direkomendasikan oleh forum internet atau dealer seperti yang terjadi
dalam kasus instan.
Perbandingan data literatur dan catatan yang menggambarkan kasus
tersebut mengarah pada kesimpulan bahwa pengamatan klinis dan uji toksikologi,
membentuk gambaran logis dan koheren yang dapat menciptakan studi psikologis
yang unik bawah pengaruh AM-2201. Masalahnya adalah bahwa kasus yang
dijelaskan bukan eksperimen atau kasus keracunan dengan konsekuensi yang tidak

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 23

signifikan. Di sini, merokok legal high menjadikan menjadi mimpi buruk bagi
kehidupan para pelaku, korbannya, dan keluarga mereka.
Pencarian untuk pengalaman baru yang mengarah pada realitas yang
tampaknya lebih baik, dengan latar belakang rezim penegakan hukum hukuman,
menghasilkan peningkatan permintaan di seluruh dunia untuk zat-zat psikoaktif
baru, dan industri bawah tanah, tidak diatur untuk memenuhi permintaan ini. Oleh
karena itu, kebutuhan mendesak agar penyedia layanan kesehatan terbiasa dengan
efek psikoaktif baru seperti AM-2201.7 Ini adalah alasan bahwa dokter layanan
primer dan komunitas toksikologi medis harus mengembangkan strategi yang cepat
dan gesit untuk mengenali dan melaporkan "legal high" baru.

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 24

 Daftar Pustaka

1. D. Favretto, J.P. Pascali, F. Tagliaro, New challenges and innovation in forensic

toxicology: Focus on the “New Psychoactive Substances”, J. Chromatogr. A
1287 (2013) 84–95. 

2. C.R. Harris, A. Brown, Synthetic cannabinoids intoxication: a case series and re-
view, J. Emerg. Med. 44 (2013) 360–366. 

3. K.A. Seely, J. Lapoint, J.H. Moran, L. Fattore, Spice drugs are more than
harmless herbal blends: A review of the pharmacology and toxicology of
synthetic canna- binoids, Prog. Neuro Psychopharmacol. Biol. Psychiatry 39
(2012) 234–243. 

4. H.J. Penn, I.J. Langman, D. Unold, J. Shields, J.H. Nichols, Detection of
synthetic cannabinoids in herbal incense products, Clin. Biochem. 44 (2011)
1163–1165. 

5. R.G. Pertwee, A.C. Howlett, M.E. Abood, et al., International union of basic and
clinical pharmacology. LXXIX. Cannabinoid receptors and their ligands: beyond
CB1 and CB2, Pharmacol. Rev. 62 (2010) 588–631. 

6. V. Di Marzo, M. Bifulco, L. De Petrocellis, The endocannabinoid system and its
therapeutic exploitation, Nat. Rev. Drug Discov. 3 (2004) 771–784. 

7. C.D. Resenbaum, S.P. Carreiro, K.M. Babu, Here today, gone tomorrow and
back again? A review of herbal marihuana alternatives [K2, spice], synthetic
cathinones [bath, salts], kratom Salvia divinorum, methoxetamine, and
piperazine, J. Med. Toxicol. 8 (2012) 15–32. 

8. J. Cohen, S. Morrison, J. Greenberg, et al., Clinical presentation of intoxication
due to synthetic cannabinoids, Pediatrics 129 (2012) e1064–e1067. 

9. L. Fattore, W. Fratta, Beyond THC: the new generation of cannabinoid designer
drugs, Front Behav. Neurosci 5 (2011) 60–66. 

10. M. Maciów-Głą b, S. Rojek, K. Kula, M. Kłys, “New designer drugs” in aspects
of forensic toxicology, Arch. Med. Są d. Krym. 64 (1) (2014) 20–33. 

11. A. Makriyannis, H. Deng, WO Patent 200128557. Cannabinomimetic idole
deri- vatives, granted 2001-06-07. 

12. M. Hermanns-Clausen, S. Kneisel, M. Hutter, et al., Acute intoxication by
synthetic cannabinoids – four case reports, Drugs Test. Anal. 5 (2013) 790–794.
13. U.S. Zimmermann, P.R. Winkelman, M. Pilhatsch, J.A. Nees, R. Spanagel, K.
Schulz, Withdrawal phenomena and dependance syndrome after the
consumption of “Spice Gold”, Dtsch. Artzebl. Int. 106 (2009) 464–467. 

14. K.C. Chimalaconda, K.A. Seely, S.M. Bratton, L.K. Brents, C.L. Moran, G.W.
Enres, L.P. James, P.F. Hollenberg, P.L. Prather, A. Radominska, Pandya, J.H.
Moran, Cytochrom P450-mediated oxidative metabolism of abused synthetic
cannabinods found in “K2/Spice”. Identification of novel cannabinoid receptor
ligands, Drug Metab. Dispos. 40 (2012) 2174–2184. 


Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 25

15. T. Sobolevsky, I. Prasolov, G. Rodchenkov, Detection of unirary metablites of
AM- 2201 and UR-144, two novel synthetic cannabinoids, Drug Test. Anal., 10
2012 10. 1002/dta.1418 

16. M. Jang, W. Yang, H. Choi, H. Chang, H, S. Lee, E. Kim, H. Chung, Monitoring
of urinary metabolites of JWH-018 and JWH-073 in legal cases, Forensic Sci.
Int. 231 (2013) 13–19. 

17. L.K. Brents, E.E. Reichard, S.M. Zimmerman, J.H. Moran, W.E.
Fantegrossi,
 P.L. Prather, Phase I hydroxylated metabolites of the K2 synthetic
cannabinoids JWH-018 retain in vitro and in vivo cannabinoid 1 receptor affinity
and activity, PLos One 6 (2011) e 21917. 

18. L.K. Brents, A. Gallus-Zawada, A. Radominska Pandya, T. Vasiljevik,
 Y.E.
Prisinzano, W.E. Fantegrossi, et al., Monohydroxylated metabolites of the K2
synthetic cannabinoid JWH-073 retain intermediate to high cannabinoid 1
receptor (CB1R) affinity and exhibit neutral antagonist to partial agonist activity,
Biochem. Pharmacol. 83 (2012) 952–961.
19. D. Castellanos, S. Singh, G. Thornton, M. Avila, A. Moreno, Synthetic
cannabinod 
 use: a case series of adolescents, J. Adolesc. Health 49 (2011)
347–349. 

20. M.B. Forrester, K. Kleinschmidt, E. Schwarz, A. Young, Synthetic cannabinod
ex- 
 posures reported to Texas poison centers, J. Addict. Dis. 30 (2011) 351–
358. 

21. I. Vardakou, C. Pistos, C. Spiliopoulou, Spice drugs as a new trend: mode of
action, 
 identification and legislation, Toxicol. Lett. 197 (2010) 157–162. 

22. J. McGrath, J. Welham, J. Scott, D. Varghese, L. Degenhardt, M.R.
Hayatbakhsh, 
 et al., Association between cannabis use and psychosis-related
outcomes using sibling pair analysis in a cohort of young adults, Arch. Gen.
Psychiatry 67 (2010) 440–447. 


Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 26

Fakultas Kedokteran Universitas Andalas 27