Arabian Journal of Chemistry (2020) 13, 3849-3855

Universitas King Saud

Jurnal Kimia Arab

www.ksu.edu.sa
www.sciencedirect.com

ARTIKEL ASLI

Studi farmakokinetik dan bioekivalensi rhein sebagai metabolit

utama diacerein

Samah Abdelsabour Mohammed Sebuah , * , Mona Ahmed Elhabak b , Mohammed Eldardiri c

Sebuah Organisasi Nasional Pengawasan dan Penelitian Narkoba, Dokki, Mesir

b Departemen Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Kanada Alahrm, Giza, Mesir
c Pusat Bioequivalence, Universitas Sains dan Seni Modern, 6 Oktober, Mesir

Menerima 30 Desember 2018; diterima 26 Februari 2019 Tersedia online 6

Maret 2019

KATA KUNCI Abstrak Metode kromatografi cair sederhana, cepat, dan sepenuhnya tervalidasi (RP - HPLC) dengan deteksi fluoresensi

Rhein; Diacerein;
dikembangkan untuk analisis rhein (sebagai metabolit utama diacerein) dalam plasma manusia. Pemisahan dilakukan

Bioekuivalensi; menggunakan ODS C 18 kolom dengan fase gerak terdiri dari asetonitril: metanol: dapar fosfat pH 6,8 dan laju aliran adalah 1,0
HPLCeflimetri mL / menit. Deteksi flimetri dilakukan pada 2 panjang gelombang eksitasi ʎ ex = 440 nm & 338 nm dan satu panjang gelombang
emisi di ʎ em = 520 nm. Metode yang dikembangkan divalidasi sesuai dengan pedoman Food and Drug Administration (FDA)
untuk validasi metode bioanalitik. Parameter farmakokinetik dari tes dan referensi ditentukan dan analisis varians (ANOVA)
antara parameter dari dua merek dihitung. Ketersediaan hayati relatif ditemukan 89%. Metode ini berhasil diterapkan untuk
analisis bioekivalensi rutin diacerein dalam plasma.

2019 Produksi dan hosting oleh Elsevier BV atas nama Universitas King Saud. Ini adalah akses terbuka
artikel di bawah lisensi CC BY-NC-ND ( http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ ).

1. Perkenalan metabolit aktif diacerein "( Tamura dan Ohmori, 2001 ). Ini mengerahkan tindakan farmakologisnya
melalui pengaruhnya terhadap prostaglandin melalui penghambatan sintesis interleukin-1 (IL-1)

Diacerein (DIA) adalah 4,5-Bis (acetyloxy) -9,10-dioxo-2 anthracenecarboxylic acid ( Fig. 1 ). Ini dan pelepasan in vitro ( Spencer dan Wilde, 1997; Debord et al., 1994 ). Ini mengurangi aktivitas

adalah obat antiinflamasi baru yang digunakan untuk pengobatan osteoartritis ( Toegel et al., yang diinduksi IL-1 sehingga menunjukkan efek memodifikasi penyakit - dalam model

2007 ) dan digunakan untuk pengobatan rheumatoid arthritis ketika digunakan dalam kombinasi eksperimental osteoarthritis dan pada subyek manusia dengan osteoarthritis sendi jari dan lutut ( Verbruggen,

dengan obat lain ( Nicolas et al., 1998 ). Diacerein adalah turunan di-acetylated dari rhein ” molekul 2006 ). Rhein ( Fig. 2 ) umumnya ditentukan dalam plasma dengan cairan kromatografi-tandem

dengan cincin antrakuinon yang sebenarnya
* Penulis yang sesuai. Alamat email: samahsabour@gmail.com (SA Mohammed).
Peer review di bawah tanggung jawab King Saud University.
massa LC / MS / MS ( Yi et al., 2006; Jiang et al., 2012; Layek et al., 2008 ). Beberapa penentuan
rhein dikembangkan menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik dengan deteksi
ultraviolet RP-HPLC / UV ( Chakrabarty et al., 2008; Yaroshenkoa et al., 2014; Ojha et al., 2009;
Tang et al., 2007 ) penentuan ini membutuhkan persiapan multi-langkah plasma dan konsumsi
waktu. Untuk studi bioekivalensi, diperlukan waktu analisis yang singkat dan metode ekstraksi
plasma sederhana. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan rhein dalam plasma
manusia dengan HPLC analitik yang sensitif dan sederhana

Produksi dan hosting oleh Elsevier

https://doi.org/10.1016/j.arabjc.2019.02.004
1878-5352 2019 Produksi dan hosting oleh Elsevier BV atas nama Universitas King Saud. Ini adalah artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY-NC-ND ( http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
).
3850
Fig. 1 Struktur kimia diacerein.
Fig. 2 Struktur kimia rhein.
metode dengan jenis deteksi baru dan menerapkan metode ini untuk evaluasi bioekivalensi obat
dalam dua merek. Validasi lengkap dari metode ini dilakukan sesuai dengan persyaratan FDA.
2. Percobaan
2.1. Bahan kimia dan reagen
Standar 99,56% dan ranitidin 100,37% (sebagai standar internal IS) dibeli dari
Sigma-Aldrich (Steinheim, Jerman), Asetonitril dan metanol (kadar HPLC) dibeli dari
E. Merck (Darmstadt, Jerman). Asam fosfat dibeli dari Sigma Aldrich (AS). Air Puri
(18.2 M X / Cm) diproses menggunakan unit pemoles air dan deionisasi ELGA Pure
Lab Classic (Marlow, UK). Plasma kosong manusia dibeli dari VACSERA (Giza,
Mesir) dan disimpan pada suhu 80 C. Semua pelarut fase gerak memiliki tingkat
HPLC dan disaring
0,45 l filter (filter membran HNWP, Millipore).
2.2. Solusi stok
Solusi stok rhein (500,00 m g / mL) dan (IS) ranitidine (1,00 mg / mL) disiapkan
dalam metanol. Kedua solusi disimpan pada 2-8 C.
2.3. Sampel standar kurva kalibrasi dan kontrol kualitas (QC)
Standar sampel rhein dan QC disiapkan dari larutan stoknya (500,00) m g / mL
dalam metanol). Standar untuk
SA Mohammed et al.
kurva kalibrasi disiapkan dalam plasma kosong pada kisaran konsentrasi 0,145-5,00 l
g / mL. Tiga sampel kontrol kualitas (QC) berada di tingkat (0,5, 2,00 dan 4,00 m g /
mL). Sampel standar dan QC disimpan beku pada suhu 80 C dengan sampel klinis
yang akan dianalisis.
2.4. Persiapan sampel
600.00 m L larutan standar ranitidin ditambahkan ke 200 m Larutan plasma rhein,
dihomogenisasi dengan vortex selama 15 menit dan disentrifugasi selama 10 menit
pada 12 10 3 rpm. Lalu, 100 m L supernatan jernih diinjeksikan ke peralatan HPLC
setelah filtrasi. Puncak terdeteksi oleh detektor fluoresensi dan ditafsirkan dalam
bentuk daerah puncak yang dilaporkan. Tanggapan rhein yang disebut ranitidine
dicatat.
2.5. Kondisi kromatografi
Pemisahan dilakukan pada Agilent HPLC 1200 yang dilengkapi dengan autosampler
dan detektor fluoresensi. 100 m L sampel disuntikkan pada sistem menggunakan
ODS C 18 kolom 5 l m (id 4,6 mm
150 mm) yang
dipertahankan di 35 C. Fase gerak adalah asetonitril: metha nol: buffer fosfat pH 6,8
(20:10:70 v / v / v) dan dipompa dengan laju aliran 1,0 mL / menit. Rhein dan IS
terdeteksi pada dua panjang gelombang eksitasi k ex = 440 nm untuk rhein dan 338 nm
untuk IS dan satu panjang gelombang emisi di k em = 520 nm untuk rhein dan IS.
2.6. Validasi metode
Validitas metode diperiksa sesuai dengan item pedoman FDA untuk validasi metode
bio-analitik ( Administrasi Makanan dan Obat AS, 2018 ). Metode ini valid pada
rentang konsentrasi 0.145.00–5.00 m g / mL menggunakan enam standar kalibrasi.
Stabilitas analit diuji menggunakan sampel QC untuk beberapa siklus
pembekuan-mencair, di bangku pada suhu kamar (stabilitas jangka pendek), atau
beku pada 80 C (stabilitas jangka panjang). Pemulihan ekstraksi rhein dihitung
dengan membandingkan daerah puncak standar plasma yang diekstraksi dengan
daerah puncak rhein dalam pelarut pada konsentrasi yang sesuai. Metode spesifik
dievaluasi dengan menyaring enam lot plasma manusia kosong.
2.7. Desain studi klinis
Protokol penelitian telah disetujui oleh Komite Etika Institusional (universitas sains
dan seni modern, 6 Oktober City, Mesir). Komite menegaskan bahwa penelitian ini
dilakukan sesuai dengan pedoman Konferensi Internasional Harmonisasi (ICH)
( ICH, klinisnya bagus
latihan, 1996 ). 24 subyek sehat dengan kelompok usia rata-rata 18-45 tahun dan
berat rata-rata 65,8 ± 6,1 kg dimasukkan dalam penelitian ini. Setiap Subjek diberi
dosis oral tunggal 50 mg diacerein ( Osteorin 50 mg kapsul gelatin keras (Medizen,
Alex., Mesir)) dan kapsul referensi ( Zondar 50 mg kapsul gelatin keras
(Mazalpharmaceutique, Quimper, Prancis)
dalam kondisi puasa. Penelitian dilakukan sebagai 12 2 dosis tunggal, acak, terbuka,
dan desain crossover lengkap dengan periode pencucian satu minggu. Kriteria
pengecualian utama
Studi farmakokinetik dan bioekivalensi rhein 3851

termasuk; penggunaan obat resep atau non-resep, vitamin, atau suplemen makanan
dalam waktu tujuh hari atau lima paruh (mana yang lebih lama) sebelum dosis
pertama obat studi, kecuali untuk acetaminophen dengan dosis 1 g / hari; segala
penyakit yang signifikan secara klinis atau alergi obat; penyakit demam dalam lima
hari sebelum pemberian obat studi pertama; sensitivitas terhadap heparin atau
trombositopenia yang diinduksi heparin; hasil tes positif untuk penyalahgunaan obat;
konsumsi alkohol secara teratur dan penggunaan tembakau atau nikotin yang
berlebihan (setara dengan lima rokok per hari). Sampel darah (5 mL) dikumpulkan
pada 0,00 jam dan 0,33, 0,66, 1,0, 1,33, 1,66,
2.0, 2.5, 3.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0 dan 24.0 jam pemberian obat pasca. Sampel
dikumpulkan dalam tabung liburan 6 mL (BD Diagnostics, Franklin Lakes, NJ)
menggunakan heparin sebagai antikoagulan dan kemudian disentrifugasi pada
4.500 rpm selama 5 menit. untuk memisahkan plasma. Sampel plasma dipindahkan
ke 2 mL tabung kriogenik polipropilen (masing-masing diberi label sampel retensi
dan analisis) dan segera disimpan di 80 C.
2.8. Analisis farmakokinetik dan statistik
Analisis farmakokinetik non kompartemen dilakukan dengan menggunakan
perangkat lunak Kinitica versi 5 dan parameter farmakokinetik berikut ini dihitung:
konsentrasi plasma maksimum = C maks, waktu untuk mencapai C maks pemberian obat
berikut = T maks,
area di bawah plasma
kurva konsentrasi-waktu = AUC 0 t, area di bawah kurva waktu konsentrasi plasma dari
waktu 0 (administrasi) diekstrapolasi ke infinitas = AUC 0-inf, konstanta laju eliminasi
terminal = K e, dan waktu paruh eliminasi = t Hai. Untuk tujuan analisis bioekivalensi AUC 0-
t, AUC 0- 1 dan C maks dianggap sebagai variabel primer. Bioequivalence dari dua merek
dinilai dengan menggunakan Analysis Of Variance (ANOVA) untuk desain crossover
dan menghitung interval kepercayaan 90% dari rasio tes / referensi menggunakan
data Ln-transformed. Formulasi dianggap bioekuivalen ketika perbedaan antara dua
parameter yang dibandingkan ditemukan secara statistik tidak signifikan ( p> 0,05)
dan interval kepercayaan untuk ini
parameter jatuh dalam 80-125% ( Panduan untuk Industri, 2001; Bolton dan Bon,
2009 ).
3. Hasil dan Pembahasan
3.1. Pengembangan metode
Karena uji obat dalam plasma manusia adalah masalah penting untuk studi
bioekivalensi, prosedur sederhana berdasarkan curah hujan protein langsung
diterapkan untuk penentuan rhein dalam plasma manusia. Banyak campuran pelarut
diuji untuk ekstraksi rhein dari plasma dengan presipitasi, seperti asetonitril, dietil
eter-klorometana (4: 1), etil asetat, dan metanol. Semua dievaluasi untuk pemulihan
dan pembersihan sampel. Persentase yang lebih tinggi dari rhein yang diekstraksi
dari plasma diperoleh dengan menggunakan metanol yang menghindari
penggunaan alkana yang diklorinasi atau senyawa iritan toksik lainnya seperti dalam
metode tetra butil etil etil eter yang dilaporkan sebelumnya ( Yaroshenkoa et al., 2014 ),
etil asetat ( Ojha et al., 2009 ) dietil eter ( Tang et al., 2007 ) ” Untuk mengurangi
langkah-langkah persiapan plasma, larutan stok IS dalam metanol digunakan
sebagai pelarut ekstraksi. Ranitidine dipilih sebagai IS karena memiliki panjang
gelombang emisi yang sama dengan rhein ( k em = 520 nm) tetapi dengan panjang
gelombang eksitasi yang berbeda ( k ex = 440 nm untuk rhein) dan ( k ex = 338 nm untuk
ranitidine). 600 m L larutan IS (1 mg / mL ranitidin dilarutkan dalam pelarut metanol ''
pelarut ”) telah ditambahkan ke 200 m L plasma, dihomogenkan dengan vortex selama
15 menit dan disentrifugasi selama 10 menit pada 12 10 3 rpm. Lalu, 100 m L
supernatan jernih disuntikkan ke dalam sistem HPLC.
3.2. Kondisi kromatografi
Pemisahan analit yang dapat diionkan seperti asam dan basa tergantung pada pH
fase gerak dan kondisi kromatografi yang digunakan. Untuk mengoptimalkan
efisiensi metode HPLC yang diusulkan, efek dari beberapa parameter kromatografi
diselidiki. Ini termasuk jenis

Fig. 3 Kromatogram pemisahan rhein dan IS dalam plasma manusia.

3852 SA Mohammed et al.

pengubah organik, konsentrasi, dan pH buffer dan rasio pengubah organik
pengubah. Parameter-parameter ini dioptimalkan berdasarkan bentuk puncak,
intensitas puncak / area, resolusi puncak dan waktu retensi untuk analit pada ODS C 18
(150) 4,6 mm, 5 m m) kolom. Resolusi terbaik antara rhein dan IS diperoleh dengan
menggunakan fase gerak yang terdiri dari asetonitril: metanol: 0,05 M dapar fosfat
(pH 6,8 yang disesuaikan dengan asam ortofosfat encer) dengan perbandingan
masing-masing 20:10:70 v / v / v. Fase gerak dipompa pada laju aliran 1,0 mL /
menit. Fluoresensi daripada deteksi UV rhein dipilih untuk meningkatkan sensitivitas
rhein selama pemisahan. [ k ex = 440 nm, untuk rhein dan k ex = 338 nm untuk ranitidine]
dan ( k em = 550 nm untuk rhein dan IS), seperti yang ditunjukkan dalam kromatogram, Fig.
3 . Pilihan cara deteksi ini adalah yang pertama diterapkan di bidang penelitian.
Pencapaian utama untuk aplikasi ini adalah kesempatan untuk menggunakan
banyak standar internal yang memiliki emisi atau eksitasi yang sama dengan bahan
analit. Elusi berada di retensi
waktu 4,7 menit dan 1,8 menit untuk masing-masing rhein dan IS dan total waktu
berjalan adalah 5,50 menit. Waktu jangka pendek ini dianggap sebagai keuntungan dari
metode ini dibandingkan semua metode HPLC-UV yang dilaporkan sebelumnya
(Lari waktu = 12 mnt)
( Chakrabarty et al., 2008 ), 8 mnt ( Yaroshenkoa et al., 2014; Tang et al., 2007 ) 20
mnt ( Ojha et al., 2009 ). Metode analitik divalidasi sesuai dengan pedoman FDA
untuk validasi metode bioanalitik ( Bimbingan industri, 2018 ). Ini dianggap sebagai
keuntungan dari metode yang dikembangkan atas semua metode HPLC yang
dilaporkan karena semua item validasi metode bioanalitik tidak tercakup oleh metode
yang dilaporkan sebelumnya.
( Chakrabarty et al., 2008;
Yaroshenkoa et al., 2014; Ojha et al., 2009; Tang et al., 2007 ). Plot area Peak
versus konsentrasi rhein linier pada rentang konsentrasi 0,146-5,00 m g / mL ( r 2 = 0,9979),
Fig. 4 .

3.3. Validasi metode

3.3.1. Kesesuaian sistem

Semua item parameter kesesuaian sistem sebagai resolusi, faktor tailing dan jumlah
1.8 2 y = 0,3481x - 0,0169
pelat teoritis diuji dan data kesesuaian sistem ditunjukkan dalam Tabel 1 .
1.6 R² = 0,9979
1.4
1.2
3.3.2. Linearitas

0.8 1 Kurva kalibrasi linier pada rentang konsentrasi 0,145-5,00 l g / mL dengan koefisien
Respones

0,6 korelasi ( r) secara konsisten 0,997. Kemiringan kurva kalibrasi adalah 0,3481,
0,4
0,2 Fig. 4 .
0
0 2 4 6 3.3.3. Batas bawah kuantifikasi
Conc (μg / ml)
Batas bawah kuantifikasi (LLOQ) ditemukan
0,145 l g / mL. Ini lebih rendah daripada metode HPLC yang dilaporkan ( Chakrabarty
Fig. 4 Kurva kalibrasi rhein dalam plasma.
et al., 2008 ).

3.3.4. Akurasi dan presisi

Tabel 1 Data kesesuaian sistem. Keakuratan dan presisi intra-dan antar-uji kontrol kualitas rendah (LQC), kontrol
kualitas menengah (MQC) dan konsentrasi sampel kontrol kualitas tinggi (HQC)
Barang Ranitidine (IS) Rhein
ditunjukkan dalam Tabel 2 dan 3 . Semua hasil berada dalam kriteria penerimaan.
N 10.454 42.896 Ketepatan dalam dan antar hari adalah 4,00%
K0 10.57 12.99
Tailing factor (T) 0,89 1,05
% dari RSD dari 6 suntikan 0,605 0,879

(IS) standar internal.

N = Jumlah pelat teoritis. K 0 = Faktor kapasitas.
Tabel 3 Intra dan inter-hari presisi rhein pada tiga konsentrasi sampel kontrol
kualitas yang berbeda.

Ketepatan rhein Intraday

LQC MQC HQC

Meja 2 Akurasi rhein diukur dalam plasma manusia. Pemulihan berarti 0,46 2.20 3,94
SD 0,03 0,08 0,095
Conc. dari rhein ( m g / mL) Mean SD CV% Akurasi%
RSD% 1.94 3.76 2.432
0,145 0,153 0,004 2,847 105.517 Berarti Pemulihan% 92.0 110,00 98.60
0,2 0,221 0,004 1,526 110.5
Ketepatan rhein antar hari
0,3 0,32 0,022 5,909 106.667
0,5 0,529 0,037 7.061 105.8 LQC MQC HQC
1.25 1.212 0,026 2.314 96,96
Pemulihan berarti 0,56 2.29 3.8193
2.5 2.452 0,013 0,517 98.08
SD 0,012 0,096 0,153
3.5 3.413 0,013 0,366 97.5143
RSD% 2.056 3.7 4,008
5 5.056 0,129 2,55 101.12
Berarti pemulihan% 113.00 114.50 95.48
4 3.862 0,089 2,291 96.55
 3853

sukarelawan manusia yang sehat 2,5 jam setelah dosis oral tunggal 50 mg diacerein dengan standar internal. Studi farmakokinetik dan bioekivalensi rhein

Fig. 5 Kromatogram dari (a) ekstrak plasma berduri yang mengandung rhein (5 l g / ml) dan IS; (B) ekstrak plasma kosong dengan standar internal; (c) ekstrak plasma
3854 SA Mohammed et al.

RSD di HQC dan 3,7% RSD untuk semua konsentrasi sampel QC. ( Bimbingan
Tabel 6 Data stabilitas rhein LQC dalam kondisi beku-mencair.
industri, 2018 ).

3.3.5. Selektivitas Konsentrasi analitik (0,500 m g / mL) rhein (LQC)

Fig. 5 menggambarkan kromatogram yang menunjukkan (a) ekstrak plasma berduri Replikasi (N = 3) Konsentrasi rata-rata. Pemulihan

yang mengandung rhein (5 l g / mL) dan IS; (B) ekstrak plasma kosong yang diukur ( m g / mL) (%)
(1) (2) (3)
mengandung IS; (c) ekstrak plasma sukarelawan manusia yang sehat 2,5 jam setelah
dosis oral tunggal 50 mg diacerein. Tidak ada gangguan co-eluting dalam sampel Tanpa waktu 0,58 0,61 0,61 0,60

plasma yang diambil dari sukarelawan manusia yang sehat. Siklus satu 0,56 0,56 0,61 0,58 96.52
Siklus dua 0,56 0,54 0,53 0,54 90,37
Siklus tiga 0,56 0,54 0,53 0,55 90.86

3.3.6. Pemulihan

Efisiensi ekstraksi rhein dari plasma masing-masing adalah 108,98 ± 8,18%, 99,71 ±
4,39% dan 87,41 ± 4,33% masing-masing pada konsentrasi sampel QC rendah,
Tabel 7 Data stabilitas rhein HQC dalam kondisi beku-taw.
sedang dan tinggi.
Tabel 4 .
Konsentrasi analitik (4,00 m g / mL) rhein (HQC)

3.3.7. Stabilitas Replikasi (N = 3) Konsentrasi rata-rata. Pemulihan

Stabilitas sampel plasma yang disimpan pada konsentrasi QC rendah dan tinggi diukur ( m g / mL) (%)
(1) (2) (3)
ditunjukkan pada Tabel 5 . Hasilnya semua dapat diterima sesuai dengan kriteria
penerimaan. Tanpa waktu 3.79 3.66 3.64 3.70
Stabilitas analit ditentukan setelah tiga siklus pembekuan dan pencairan. Tiga Siklus satu 3.79 3.66 3.64 3.70 95,79

alikuot dari masing-masing sampel LQC dan HQC disimpan pada 80 C selama 24 Siklus dua 3.95 4.08 4.06 4.03 104.43
Siklus tiga 3.73 3.73 3.73 3.73 96.74
jam dan dicairkan tanpa bantuan pada suhu kamar. Ketika benar-benar dicairkan,
sampelnya adalah reforozen selama 24 jam dalam kondisi yang sama. Tiga siklus
pembekuan dan pencairan diulang. Hasil yang diperoleh disajikan dalam Tabel 6 dan
di Fig. 6 Konsentrasi puncak maksimum C maks dari kedua merek, waktu yang dicapai
7.
untuk mencapai T maks, saat obat terdeteksi MRT dan parameter farmakokinetik rhein
lainnya untuk dua merek diacerein ditunjukkan pada

3.4. Penerapan studi bioekivalensi

Pentingnya studi bioekivalensi adalah untuk memastikan bahwa formulasi generik
aman dan efektif. Dua formulasi obat dianggap bioequivalent ketika tingkat dan
sejauh mana obat aktif tersedia di tempat kerja obat setara. Chow dan Liu, 1992 ).
Profil waktu konsentrasi plasma rhein dari 24 sukarelawan manusia yang sehat
dalam kondisi puasa ditunjukkan
Tabel 8 . AUC 0-t, AUC 0- 1, adalah parameter penting untuk estimasi bioekivalensi ( Grahnen,
1984 ), bagaimanapun, C maks dan T maks penting untuk penentuan perilaku terapi obat ( Westlake,
1988 ). Bioavailabilitas relatif rhein berdasarkan referensi adalah 89%. Perbandingan
statistik untuk mean dan standar deviasi AUC 0-t, AUC 0- 1 dan C maks dari dua merek tidak
menunjukkan perbedaan yang signifikan. Tidak ada perbedaan yang signifikan
antara hasil setelah penerapan analisis varians (ANOVA) tes untuk dua parameter
ini (AUC dan C maks).

Tabel 4 Data pemulihan absolut diukur untuk tiga sampel QC.

Pemulihan Mutlak (%) SD RSD%

2.5 3

LQC 108,98 8.92 8.18

MQC 99,71 4.38 4.39
HQC 87.41 3.78 4.33
Conc. μg / ml

1.5 2 tes referensi

Tabel 5 Data stabilitas kondisi penyimpanan yang berkepanjangan (80 C) dari rhein.

0,5 1

Contoh no. HQC (4,00 mcg / mL) LQC (0,50 mcg / mL)

Awal 24 jam pada suhu Awal 24 jam pada suhu 0

kamar. kamar. 0 5 10 15 20 25 30 35

saya (jam)
Berarti 3.562 3.569 0,450 0,428
SD 0,047 0,067 0,029 0,026
Fig. 6 Profil konsentrasi-waktu plasma setelah dosis oral tunggal 50 mg diacerein
CV% 1.314 1.871 6.540 6.063
(Osteorin 50 mg kapsul gelatin keras) dan kapsul referensi (Zondar 50 mg kapsul
Akurasi% 89,049 89.225 90.056 85.564
Stabilitas% 100.20 95.011 gelatin keras) kepada 24 sukarelawan manusia yang sehat, dalam keadaan puasa.
Studi farmakokinetik dan bioekivalensi rhein 3855

Referensi
Tabel 8 Parameter farmakokinetik rhein untuk dua merek formulasi diacerein
(rata-rata ± SD) n = 24.
Bolton, S. dan Bon C. (Eds.), 2009. Desain eksperimental dalam klinis
Parameter Zondar 50 mg kapsul Kapsul gelatin keras percobaan. Statistik Farmasi Aplikasi Praktis dan Klinis, vol. 80, ed kelima. Marcel Dekker
farmakokinetik gelatin keras (referensi) Osteorin 50 mg (tes) Inc., New York, hlm. 384–443.
Chakrabarty, AS, Mandal, UD, Bhaumik, U., Chatterjee, B.,
Ghosh, A., Bose, A., Pal, TK, 2008. Arzneimittelforschung 58 (8), 405–409 .
C maks 2,928 ± 0,638 3.084 ± 0.745
*
T maks 2,5 ± 0,689 * 2,25 ± 1,054
Chow, CS, Liu, JP, 1992. Desain dan Analisis Ketersediaan Hayati dan
AUC 0 –t 17.909 ± 5.496 15.859 ± 3.862
Studi Bioequivalence. Marcel Dekker, New York .
AUC 0– 1 14.525 ± 4.091 13.364 ± 3.744
Debord, P., Louchahi, K., Tod, M., Cournot, A., Perret, G., Petitjean,
T 1/2 4.038 ± 2.023 4.409 ± 1.971
O., 1994. Eur. J. Obat Metab. Farmakokin. 19 (1), 13–19 .
K el 0,204 ± 0,078 0,185 ± 0,069
Grahnen, A., 1984. Desain studi bioavailabilitas. Pharm Int. 5,
MRT 7.246 ± 3.644 6.831 ± 2.348
100–103 .
*
Median ± SD (untuk menghitung T maks hanya). Panduan untuk Industri, 2018. Validasi Metode Bioanlytical. KAMI
Departemen Kesehatan dan Pelayanan Kemanusiaan. Administrasi Makanan dan Obat,
Pusat Evaluasi dan Penelitian Obat, CDER, Rockville, Maryland .

Tabel 9 Analisis statistik data transformasi Ln. Bimbingan untuk Industri, 2001. Pendekatan Statistik dalam Pembentukan
Bioequivalence. Rockville, Maryland: Departemen Kesehatan dan Layanan Kemanusiaan
AUC 0 –t AUC 0– 1 C maks
AS. Administrasi Makanan dan Obat, Pusat Evaluasi dan Penelitian Obat, CDER .
AVOVA (nilai-p) 0,354878 0,226654 0,482307

ICH menyelaraskan pedoman tripartit, praktik klinis yang baik, (E6) R1,
1996, AS.
ANOVA diterapkan setelah log-transformasi data, dengan nilai p lebih besar dari 0,5 Jiang, JY, Yang, MW, Qian, W., Lin, H., Geng, Y., Zhou, Zq,

dan interval kepercayaan 90%. Hasil ANOVA menunjukkan bahwa rasio AUC 0-t,
AUC 0- 1 dan C maks dari dua merek berada dalam kisaran yang dapat diterima ''80
–125% ", Tabel 9 .
4. Kesimpulan
Metode yang relatif sederhana, akurat, tepat dan cepat yang cocok untuk digunakan dalam studi
bioekivalensi untuk menentukan rhein sebagai metabolit langsung diacerein dalam plasma
dikembangkan dan divalidasi. Metode ini memiliki beberapa keuntungan dibandingkan dengan
metode yang dilaporkan sebelumnya, seperti ekstraksi rhein dengan presipitasi langsung plasma
protein dan penggunaan IS yang dilarutkan dalam metanol pelarut yang sama. ” yang
mengurangi langkah-langkah ekstraksi. Jangka waktu yang singkat sekitar 5,50 min '' rhein (4,7
min) dan IS (1,8 min) ” dicapai dibandingkan dengan waktu berjalan yang dilaporkan sebelumnya,
waktu yang relatif singkat saat ini memiliki keuntungan memfasilitasi dan meningkatkan efisiensi
pemrosesan sejumlah besar sampel plasma yang diperoleh dari studi farmakokinetik /
bioavailabilitas / bioekivalensi pada subyek manusia sehat. Penggunaan pendeteksian
fluoresensi obat dan IS menggunakan panjang gelombang emisi yang sama dan panjang
gelombang eksitasi yang berbeda diterapkan untuk pertama kalinya dalam pekerjaan ini. Jenis
pengukuran ini memungkinkan penggunaan banyak IS lain yang berbeda dan lebih murah yang
mengurangi biaya keseluruhan studi bioekivalensi.
Xiao, DW, 2012. J. Pharmac. Biomed. Anal 57 (5), 19-25 .
Layek, B., Kumar, TS, Trivedi, RK, Mullangi, R., Srinivas, NR,
2008. Biomed. Chromatogr. 22, 616–624 .
Nicolas, P., Tod, M., Padoin, C., Petitjean, O., 1998. Clin. Farmasi
Cokin. 35, 347–359 .
Ojha, A., Rathod, R., Padh, H., 2009. J. Chromatogr. B 877 (11-12),
1145-1148 .
Spencer, CM, Wilde, MI, 1997. Diacerein. Obat 53 (1), 98-106.
https://doi.org/10.2165/00003495-199753010-00007 .
Tamura, T., Ohmori, K., 2001. Jpn. J. Pharmacol. 85, 101–104 .
Tang, W., Huang, X., Yu, Q., Qin, F., Wan, M., Wang, Y., Liang, M.,
2007. Biomed. Chromatogr. 21, 1186–1190 .
Toegel, S., Huang, W., Piana, C., Unger, FM, Wirth, M., Goldring,
MB, 2007. BMC Mol. Biol. 8. -2199-8-13.1471-2199 .
Administrasi Makanan dan Obat AS, 2018. Panduan untuk Industri:
Validasi Metode Bioanalytical (terakhir diakses pada 02/11/2008).
Verbruggen, G., 2006. Rheumatology (Oxford) 45 (2), 129–138 .
Westlake, WJ, 1988. Ketersediaan hayati dan bioekivalensi farma
formulasi ceutical. Dalam: Perdamaian, KE (Ed.), Statistik Biofarmasi untuk Pengembangan
Obat. Marcel Dekker, New York, hlm. 329–352 .
Yaroshenkoa, IS, Khaimenovb, A.Ya., Grigoriev, AV, Sidorova, A.
A., 2014. J. Anal. Chem 69 (8), 793-799 .
Yi, L., Ping, GJ, Xua, X., Lixin, D., 2006. J. Chromat. 1, 50–55 .