Pengembangan indikator pH dan film pengemasan nanofibre

selulosa antimikroba berbasiskan anthocyanin ubi jalar ungu

dan minyak atsiri oregano
1. Perkenalan

Konsumen menjadi semakin peduli dengan kualitas dan keamanan pangan dengan kemajuan teknologi
dan standar hidup. Kebutuhan akan makanan yang aman, segar, dan alami semakin meningkat. Namun,
pertumbuhan mikroorganisme, cahaya, suhu, oksigen, kelembaban relatif lingkungan, dan faktor-faktor
lain secara serius mempengaruhi kualitas makanan. Penyebaran mikroorganisme adalah penyebab
utama pembusukan dan kerusakan makanan. Saat ini, semakin banyak konsumen yang ingin
mendapatkan informasi yang valid tentang kualitas makanan selama penyimpanan dengan cara yang
sederhana, cepat, dan dapat diandalkan; kemasan cerdas dan kemasan antimikroba menarik minat luas
dari banyak peneliti karena potensi mereka untuk memantau kualitas makanan dan memperpanjang
umur simpan makanan [1, 2].

Kemasan cerdas dapat memantau perubahan kualitas makanan secara real-time selama penyimpanan
berdasarkan interaksi bahan kemasan dengan makanan dan / atau lingkungan langsungnya [3].
Pengemasan indikator pH kolorimetri, yang dapat merespons perubahan pH, disebabkan oleh
pembusukan makanan dan / atau perubahan lingkungan eksternal dan menunjukkan perubahan warna
yang jelas, adalah jenis novel kemasan cerdas. Pertumbuhan mikroorganisme dapat menyebabkan
perubahan pH makanan [4], sehingga kemasan indikator pH dapat memantau dan secara intuitif
menunjukkan kualitas makanan melalui perubahan warna bahan kemasan itu sendiri [5]. Antosianin
adalah sejenis pigmen yang larut dalam air alami yang dapat diekstraksi dari tanaman, dan warna
antosianin dapat berubah dalam berbagai larutan pH [6, 7]. Beberapa peneliti telah berhasil
mengembangkan beberapa film indikator pH kolorimetri untuk memantau dan menunjukkan kualitas
berbagai jenis makanan selama penyimpanan dengan menambahkan anthocyanin, seperti anthocyanin
ubi jalar ungu [8], anthocyanin sekam Vitis amurensis [9], anthocyanin rosela [10, 11], anthocyanin biji
kacang hitam, dan antosianin kol merah [12]. Film-film ini tidak memiliki fungsi antibakteri walaupun
mereka dapat menunjukkan kualitas makanan secara real-time. Film fungsional tunggal tidak dapat
memenuhi kebutuhan produsen makanan dan konsumen untuk kemasan multifungsi.

Film antimikroba dapat disiapkan dengan menambahkan bahan antimikroba ke dalam matriks film [13].
Sebagai agen antimikroba alami, minyak atsiri oregano (OEO) mengandung carvacrol dan timol, dan
sering ditambahkan ke dalam matriks film [14]. Film-film antimikroba disiapkan oleh Liu et al. [15]
menunjukkan efek antimikroba yang sangat baik, dengan penambahan OEO. Bahan biomassa sangat
cocok untuk menjadi matriks film kemasan makanan karena degradabilitas, tidak beracun, dan
terbarukan. Apalagi menggunakan bahan biomassa sebagai matriks untuk mengembangkan film
pengemasan makanan dapat menghindari penggunaan aditif (mis., plasticizer dan stabilisator) yang
bermigrasi dari pengemasan film ke dalam makanan, meningkatkan kualitas dan keamanan pangan, dan
mengurangi polusi lingkungan. Baru-baru ini, bahan biomassa, seperti nanofibre selulosa (CNF) [16],
gelatin [17], kitosan [18, 19], zein [20], pektin [21], pati [22], protein kedelai [23, 24], dan PLA [25],
sangat luas digunakan sebagai matriks film kemasan fungsional oleh para peneliti. Sebagai semacam
polisakarida, selulosa nanofibre terdiri dari unit D-glukopiranosa dan memiliki beberapa gugus hidroksil
pada permukaannya, yang menyebabkan CNFs memiliki biokompatibilitas yang sangat baik [26, 27].
Selain itu, nanofibre selulosa tersedia dari berbagai sumber, ringan, memiliki sifat pembentukan film
yang sangat baik, biodegradabilitas, dan resistensi oksigen [28, 29]. Oleh karena itu, film berbasis bio
yang dibuat oleh nanofibre selulosa akan menjadi bahan kemasan makanan yang menjanjikan.

Dalam penelitian ini, film pH indikator selulosa nanofibre kemasan dengan sifat antimikroba
dikembangkan dengan menggunakan CNF sebagai matriks film, anthocyanin ubi jalar ungu sebagai
pewarna alami, dan minyak atsiri oregano sebagai agen antimikroba. Pertama, variasi warna antosianin
ubi jalar ungu dalam larutan pH yang berbeda (pH 2-12) dianalisis. Kemudian, variasi warna pada nilai pH
yang berbeda (pH 2-12), morfologi permukaan, struktur kimia dan sifat mekanik dari film yang
dikembangkan dikarakterisasi. Akhirnya, Aktivitas antimikroba dari film terhadap bakteri, Escherichia coli
dan Listeria monocytogenes dipelajari.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1 Bahan

Ubi jalar ungu segar dibeli dari pasar petani lokal di Nanning, provinsi Guangxi, Cina. Kentang ungu dicuci
dengan hati-hati, dikupas, dipotong-potong kecil, dikeringkan dalam oven pada suhu 50 ° C, dan
ditumbuk menjadi bubuk untuk ekstraksi antosianin. Papan ampas ampas tebu yang diputihkan
diperoleh dari Pabrik Pulp Guangxi Guitang (Guigang, Guangxi, Cina) dan digunakan sebagai bahan baku.
CNF disiapkan dengan penggerindaan mekanis [30]. Pertama, papan ampas ampas tebu diputihkan
menjadi potongan-potongan kecil, direndam dalam deionisasi air pada 25 ℃ selama 24 jam, dan hancur
oleh serat disintegrator (AG 04, Estanit GmbH, Jerman) selama 30 menit, untuk mendapatkan pulp yang
hancur dengan konsentrasi 2,0% berat. Akhirnya, bubur kertas yang hancur digiling oleh penggiling
ultrafine (MKZA10-15J, Masuko Sangyo, Jepang) dengan jarak disk -100 µm pada kecepatan 1.500 rpm.
Suspensi CNF, dengan kandungan padat 2,58% berat, diperoleh dan disimpan dalam lemari es untuk
digunakan lebih lanjut, setelah tanah 10 kali. Minyak esensial Tween-80 dan oregano dibeli dari Aladdin
(Shanghai, Cina). Strain E. coli (ATCC 25922) dan L. monocytogenes (ATCC 19115) dibeli dari Pusat
Koleksi Budaya Industri China. Semua bahan kimia lainnya memiliki tingkat analitis.

2.2 Ekstraksi antosianin dari ubi ungu

Antosianin dari ubi jalar ungu diekstraksi dengan metode ekstraksi larutan [6]. Sekitar 50 g bubuk ubi
jalar ungu ditambahkan ke dalam 500 mL etanol 40% (v / v) dan diaduk terus menerus pada 60 ° C
selama 13 jam dalam gelap. Larutan yang diekstraksi disaring, dan kemudian diuapkan oleh rotary
evaporator pada 50 ° C dalam gelap. Ekstraksi terakhir dibekukan untuk mendapatkan bubuk
anthocyanin ubi jalar ungu. Serbuk antosianin disiapkan dimasukkan ke dalam botol kaca coklat dan
disimpan dalam lemari es untuk digunakan lebih lanjut.

2.3 Persiapan film sampel

Semua film sampel disiapkan menggunakan metode casting. Pertama, suspensi CNF diencerkan menjadi
0,8% berat dengan air deionisasi dan kemudian didispersikan menggunakan homogeniser geser tinggi
(Unidrive X1000D, CAT Scientific Inc., USA) pada 8.000 rpm selama 3 menit, untuk mendapatkan
suspensi CNF yang terdispersi secara merata. Setelah itu, 60 mL suspensi CNF dimasukkan ke dalam
cetakan Teflon (150 mm × 150 mm) dan dikeringkan dalam gelap pada suhu 30 ° C selama 36 jam untuk
mendapatkan film CNF (CFm), yang bertindak sebagai film kontrol. Konsentrasi OEO dan jumlah
bubuk antosianin yang akan ditambahkan dipilih sesuai dengan hasil pra-percobaan. Sebanyak 0,4 g
bubuk antosianin ditambahkan ke 60 mL suspensi CNF dan diaduk secara magnetis selama 1 jam.
Larutan antosianin / CNF dilemparkan ke dalam cetakan Teflon dan dikeringkan dalam gelap pada suhu
30 ° C selama 36 jam untuk mendapatkan film warna yang ditunjukkan (CIFm). Selanjutnya, OEO (4%
berat, berbasis CNF) dan Tween (40% berat, berbasis minyak atsiri) ditambahkan ke 60 mL suspensi CNF
dan dihomogenisasi selama 5 menit pada 10.000 rpm. Solusi OEO / Tween / CNF dilemparkan dan
dikeringkan seperti dijelaskan di atas untuk mendapatkan film antimikroba (AFm). Sebanyak 0,4 g bubuk
antosianin ditambahkan ke suspensi OEO / Tween / CNF dan diaduk secara magnetis untuk 1 jam, cetak,
dan keringkan seperti dijelaskan di atas untuk mendapatkan film kolorimetri dan antimikroba (CAFm).
Semua film sampel kering disimpan pada suhu 23 ℃ dalam gelap.

2.4 Evaluasi spektrum UV-Vis dan warna

Respon warna antosianin ubi jalar ungu terhadap pH diselidiki oleh spektrometri dan kolorimetri UV-Vis.
Untuk menganalisis spektrum UV-Vis, disiapkan 18,5 mL larutan buffer, mulai dari pH 2 hingga pH 12,
disiapkan. Setelah itu, 1,5 mL ubi jalar ungu

larutan antosianin ditambahkan dan dicampur dengan pengadukan magnetik selama 30 menit. Solusi
dievaluasi dengan spektrofotometri (Specord 50PLUS, Analytik Jena, Jerman) pada kisaran panjang
gelombang 400-800 nm untuk mendapatkan spektrum UV-Vis. Parameter warna L (brightness), a (-green
to + red) dan b (-blue to + yellow), dari larutan antosianin dan film sampel, diukur dengan colorimeter
(CM-3600d,

KM, Jepang) masing-masing dalam mode transmisi dan mode refleksi. Sebelum pengukuran, film sampel
direndam dalam 5 mL larutan buffer antara pH 2 dan 12 selama 15 menit dan

kemudian dikeringkan pada 25 ℃ selama 12 jam. Perbedaan warna total (△ E) dihitung menggunakan
persamaan berikut:

△ E = [(L － L0) 2+ (a － a0) 2+ (b － b0) 2] 1/2 (1),

di mana L, a dan b adalah parameter warna dari larutan antosianin dan film sampel dalam larutan pH
berbeda (2-12); L0, a0 dan b0 adalah parameter warna dari sampel kontrol.

2.5 Karakterisasi CNF

Morfologi CNF dianalisis dengan mikroskop elektron transmisi (TEM). Suspensi CNF diencerkan menjadi
0,008% berat oleh air suling dan kemudian didispersi secara ultrasonik selama 30 menit. Suspensi CNF
yang tersebar diwarnai dengan asam fosfotungstat 1,5% dan diamati oleh TEM (HT7700, Hitachi, Jepang)
pada 100 kV.

Morfologi permukaan mikroskopis dari CNF diamati oleh atomic force microscopy (AFM) (5100N,
Hitachi, Jepang), dalam mode penyadapan, pada ukuran pindaian 1 μm × 1 μm.

2.6 Karakterisasi film

2.6.1 Mikroskop elektron pemindaian emisi lapangan (FESEM)

Morfologi penampang film sampel dievaluasi dengan mikroskop elektron pemindaian emisi lapangan
(SU8220, Hitachi, Jepang) pada tegangan percepatan 5 kV. Semua film sampel dibekukan dan dibelah
dalam nitrogen cair, dan kemudian disemprot dengan lapisan tipis emas,

di bawah vakum, sebelum pengukuran dilakukan.

2.6.2 Spektrum Fourier transform infrared (FTIR)

Spektrum FTIR dari film sampel dievaluasi dengan spektrometri inframerah Fourier-transform infrared
(FTIR) (TENSORII ， Bruker, Jerman) dalam mode refleksi total (ATR) yang dilemahkan. Rentang
pemindaian adalah 4000-400 cm-1, dengan resolusi 4 cm-1.

2.6.3 Difraksi sinar-X (XRD)

Spektra XRD dari film sampel diperoleh dengan difraktometer sinar-X (MiniFlex600, Rigaku Corporation,
Jepang), menggunakan target referensi radiasi Cu kα, dihasilkan pada 40 kV dan 15 mA. Rentang
pemindaian (sudut 2θ) adalah dari 5 ° hingga 60 °, pada kecepatan pindai

2 ° / mnt. Perhitungan indeks kristalinitas (CrI) didasarkan pada rumus empiris Segal [31]:

CrI (%) = (I002 － Iam) / I002 × 100 (2),

di mana I002 adalah intensitas difraksi maksimum (2θ≈22.5 °), dan Iam adalah intensitas difraksi dari
daerah amorf film (2θ≈18 °).

2.6.4 Sudut kontak permukaan

Keterbasahan permukaan film sampel diuji menggunakan penganalisis kontak DSA100 (DSA100, Kruss,
Jerman). Selama pengujian, air suling (5 μL) ditempatkan pada permukaan setiap film di tiga lokasi yang
berbeda.

2.6.5 Transmisi cahaya

Transmisi cahaya dari film diukur dengan spektrofotometer UV-Vis (Specord 50PLUS, Analytik Jena,
Jerman) dengan kisaran panjang gelombang 200-800 nm. Film sampel dipotong menjadi 40,0 × 9,0 mm
persegi panjang.

2.6.6 Sifat mekanik

Ketebalan film diukur menggunakan mikrometer digital (± 0,001 mm, model 11248-001, TMI, Amerika).
Untuk setiap film, delapan posisi acak digunakan untuk pengukuran. Kekuatan tarik (TS, MPa),
perpanjangan putus (EB,%) dan modulus elastis (EM, MPa) dari sampel film ditentukan oleh mesin
pengujian bahan elektronik universal (model 3367, Instron, Amerika). Sebelum pengujian, film dipotong
menjadi strip persegi panjang (100 mm × 10 mm) dan dikondisikan pada 25 ° C dan lingkungan RH 50%
selama 48 jam. Pemisahan grip awal diatur pada 50 mm. Kecepatan cross-head ditetapkan pada 1 mm /
menit, dan 50 N load cell digunakan. Semua pengukuran dilakukan dalam rangkap tiga.

2.6.7 Sifat antimikroba

Sifat antimikroba dari film sampel dievaluasi menggunakan metode laju penghambatan. E. coli dan L.
monocytogenes dikultur dalam kaldu nutrisi dan kaldu jantung infus (BHI), masing-masing, pada suhu 37
° C selama 24 jam, untuk mendapatkan konsentrasi 107 CFU / mL. Sebelum pengujian, kultur bakteri
diencerkan hingga 105 CFU / mL oleh saline, dan film sampel dipotong-potong dan disterilkan dengan
UV selama 1 jam. Setelah itu, 100 mg film dicampur

dengan 5 mL suspensi bakteri E. coli dan L. monocytogenes, dan dikocok dalam bak pengocok pada suhu
37 ° C selama 2 jam untuk mendapatkan suspensi bakteri, dengan film. Kemudian 0,1 mL suspensi
bakteri E. coli (102 CFU / mL) (dengan film) dilapisi koil pada pelat agar-agar nutrisi, dan 0,1 mL L.
monocytogenes suspensi bakteri campuran (102 CFU / mL) (dengan film) adalah dilapisi kumparan pada
piring agar infus jantung otak. Pelat ditempatkan di inkubator pada suhu 37 ° C dan 75% RH selama 24
jam. Properti antimikroba dievaluasi dengan persamaan berikut [32]:

Tingkat penghambatan pertumbuhan (%) = (A － B) / A × 100% (3),

di mana A adalah jumlah bakteri dari kontrol dan B adalah jumlah bakteri dari film sampel. Tiga
percobaan paralel dilakukan dan semua nilai dirata-rata.

2.7 Analisis statistik

Data dilaporkan sebagai mean ± standar deviasi dan dianalisis untuk analisis varians satu arah (ANOVA)
dengan menggunakan SPSS (22.0, perangkat lunak SPSS Statistics, Inc., USA). Perbedaan antara rata-rata
dilakukan oleh uji rentang berganda Duncan (P <0,05).

3. Hasil dan Pembahasan

3.1 Karakteristik CNF

Gambar morfologis CNF ditunjukkan pada Gambar. 1. Seperti yang dapat dilihat, serat kasar dan serat
halus tumpang tindih, panjang CNF yang disiapkan berkisar dari 200 nm hingga beberapa mikron,
diameternya berkisar antara 20-50 nm, dan panjangnya. -diameter ratio lebih dari 50. CNF yang
disiapkan cocok sebagai matriks film berbasis bio.

3.2 Warna dan spektrum UV-Vis anthocyanin dalam larutan pH berbeda

Perubahan warna dan spektrum UV-Vis larutan antosianin dalam larutan berbeda (pH 2-12) dianalisis
dan ditunjukkan pada Gambar. 2. Seperti ditunjukkan pada Gambar. 2 (a), warna larutan antosianin
dalam larutan pH berbeda. menunjukkan variasi yang nyata dan bisa

dikenali dengan mata telanjang. Warna larutan antosianin berubah merah pada pH lebih rendah dari 6,
dan berubah menjadi merah muda secara bertahap dengan pH meningkat dari 6 menjadi 7. Warna
berubah menjadi biru-ungu pada pH 8, hijau pada pH 9-11, dan kuning pada pH 12. Tabel 1
menunjukkan warnanya

parameter (L, a, b, dan △ E) dari larutan antosianin dalam larutan pH 2-12.

Sejalan dengan itu, penurunan dari +23,09 menjadi -1,10 dari nilai parameter a juga menunjukkan
bahwa warna larutan antosianin berubah dari merah menjadi hijau, dan peningkatan dari

+4.24 hingga +24.95 dari nilai parameter b menunjukkan bahwa warna larutan anthocyanin secara
bertahap berubah menjadi kuning. Namun, perubahan kecerahan (L) dari larutan antosianin tidak
diamati oleh mata telanjang karena perubahan warna larutan antosianin pada nilai pH yang berbeda.
Parameter a dan b berbeda secara signifikan (P <0,05) pada pH 2-12; ini lebih lanjut menggambarkan
bahwa anthocyanin ubi jalar ungu sensitif terhadap pH

berubah dan dapat digunakan sebagai pewarna yang sensitif terhadap pH. Sejalan dengan perubahan
warna, puncak penyerapan maksimum dari larutan antosianin bergeser ke arah panjang gelombang
yang lebih panjang, seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 2 (b). Puncak penyerapan maksimum, yang
diperoleh sekitar 525 nm pada pH 2-5, bergeser dari 533 menjadi 541 nm ketika pH meningkat dari 6
menjadi 7, sementara absorbansi menurun. Ketika pH meningkat dari 7 menjadi 9, puncak penyerapan
maksimum bergeser dari 541 ke 603 nm, disertai dengan peningkatan absorbansi. Puncak penyerapan
maksimum bergeser ke nilai sekitar 610 nm, dengan penurunan absorbansi ketika pH meningkat lebih
dari 9. Pergeseran bathokromik berarti bahwa puncak penyerapan maksimum bergeser ke arah panjang
gelombang yang lebih panjang dalam spektrum ultraviolet [33]. Pergeseran puncak penyerapan
maksimum ke panjang gelombang yang lebih panjang, karena kenaikan pH, menunjukkan bahwa
pergeseran bathokromik umumnya ditemukan dalam larutan antosianin.

Perubahan warna dan pergeseran puncak penyerapan yang sesuai dari larutan antosianin pada pH 2-12
terjadi karena transformasi struktur antosianin [34]. Antosianin terutama didominasi oleh kation
flavylium, dan larutan tampak merah ketika pH-nya 2-3. Warna larutan anthocyanin menjadi lebih cerah
karena pembentukan basa quinonoidal atau pseudo-basa karbinol tidak berwarna, setelah kenaikan pH.
Ketika pH lebih tinggi dari 8, warna berubah dari biru-ungu menjadi kuning, menunjukkan bahwa
struktur antosianin adalah dalam bentuk chalcone kuning di bawah kondisi alkali [35].

3.3 Perubahan warna film dalam larutan pH berbeda

Perubahan warna CAFm dan CIFm, direndam dalam larutan pH 2-12, ditunjukkan pada Gambar. 3.
Warna CAFm, yang direndam dalam larutan pH 2, berubah menjadi merah. Warnanya berubah dari
merah muda menjadi coklat, dengan pH meningkat dari 4 menjadi 6. Ketika CAFm direndam dalam
larutan pH (8) yang lebih tinggi, warnanya berubah menjadi ungu. Warna CAFm berubah menjadi hijau
pada pH 10. Warna kuning CAFm menjadi jelas dalam larutan pH 12. Variasi warna CIFm mirip dengan
CAFm dalam larutan pH 2-12. Seperti yang tercantum dalam Tabel 2, dengan pH meningkat dari 2
menjadi 12, nilai parameter warna a, dari CAFm dan CIFm, secara bertahap menurun dari +7,52 ke -1,44
dan +6,70 menjadi -0,13, masing-masing, dan ini menunjukkan bahwa warna film secara bertahap
berubah dari merah menjadi hijau. Nilai parameter warna b dari film secara bertahap meningkat dari
+1.17 ke +4.67 dan +0.91 menjadi +11.62, masing-masing, juga menggambarkan bahwa warna secara
bertahap berubah menjadi kuning. Warna CIFm lebih luar biasa daripada CAFm pada pH 2-10,
menunjukkan bahwa keberadaan OEO variasi warna sedikit terpengaruh. Namun, perubahan warna
CAFm sangat terlihat dengan mata telanjang dalam larutan pH yang berbeda, dan menyarankan bahwa
CAFm yang mengandung OEO menunjukkan respons sensitif terhadap perubahan pH. Perubahan PH
dikaitkan dengan pembusukan dan kerusakan makanan kemasan [36]. Oleh karena itu, CAFm memiliki
potensi untuk menunjukkan kualitas makanan kemasan selama penyimpanan.

3.4 Mikroskop elektron pemindaian emisi lapangan (FESEM)

Gambar FESEM dari penampang diambil untuk mendeteksi dan menganalisis perubahan mikrostruktur
film sampel (Gbr. 4). Seperti yang ditunjukkan pada Gambar. 4, AFm dan CFm, tanpa antosianin,
menunjukkan struktur jaringan kontinu karena pembentukan ikatan hydrogen antar serat. CAFm dan
CIFm menunjukkan mikrostruktur yang homogen dan padat dan tidak memiliki pemisahan fase, dan ini
menunjukkan bahwa ada bio-kompatibilitas yang baik antara anthocyanin dan matriks CNF [37].
Beberapa lubang berlubang dapat dilihat pada CAFm (20,0 K ×), yang dapat disebabkan oleh
hidrofobisitas OEO [38]. Spektrum Fourier transform infrared (FTIR) Struktur kimia film dianalisis dengan
menguji spektrum FTIR. Gambar. 5 menunjukkan spektrum FTIR CAFm, AFm, CIFm, dan CFm. Puncak
karakteristik sekitar 3.330, 2.892 dan 1.031 cm-1, sesuai dengan peregangan O – H, peregangan C – H,
dan getaran dari kerangka cincin C-O-C pyranose dalam spektrum CFm, masing-masing [39].

Pita CNF khas ditemukan dalam spektrum CAFm, AFm, dan CIFm; ini menggambarkan bahwa
penambahan anthocyanin dan OEO tidak mempengaruhi struktur kimia CNF. Dibandingkan dengan
spektrum CFm, intensitas puncak penyerapan pada 1.650 cm-1 dalam spektrum CIFm lebih jelas, dan
puncak penyerapan ini terkait dengan getaran peregangan cincin aromatik C-C. Dapat dilihat dari
spektrum CIFm bahwa intensitas puncak serapan pada 1.650 cm-1, yang berhubungan dengan getaran
peregangan dari cincin aromatik C-C, meningkat relatif terhadap CFm. Peningkatan nyata intensitas
puncak penyerapan menunjukkan bahwa anthocyanin dalam CIFm tergabung dalam matriks CNF [12].
Selain itu, intensitas pita absorpsi antara 3.500 dan 3.200 cm-1 (peregangan O – H) dalam spektrum
CIFm menjadi lebih jelas, yang mengindikasikan bahwa ikatan hidrogen baru terbentuk antara
anthocyanin dan CNF [40]. Dalam spektrum CAFm dan AFm yang mengandung OEO, puncak sekitar
2.922 dan 2.870 cm-1 dianggap berasal dari getaran peregangan simetris dan asimetris dari metilen [41].
Kehadiran OEO, dalam CAFm dan AFm, dapat memperkenalkan kelompok hidrofobik (C – H dari CH3 dan
CH2). Oleh karena itu, penambahan OEO meningkatkan hidrofobisitas CAFm dan CFm. Selain itu, seperti
yang disebutkan dalam bagian 3.7, sudut kontak permukaan CAFm dan AFm terlihat lebih tinggi
daripada CIFm dan CFm, lebih lanjut menunjukkan bahwa OEO meningkatkan hidrofobisitas film.

3,6 X-ray difraksi (XRD)

XRD dilakukan untuk menganalisis efek anthocyanin dan OEO pada kristalinitas film sampel. Seperti
ditunjukkan pada Gambar. 6, semua film menampilkan pola XRD karakteristik selulosa I (sudut difraksi
pada sekitar 15,0 ° dan 22,5 °, sesuai dengan difraksi dari pesawat 101 dan 002, masing-masing);
menunjukkan bahwa penambahan anthocyanin dan OEO tidak mempengaruhi struktur CNF. Indeks
kristalinitas CFm, CAFm, CIFm, dan AFm masing-masing adalah 57,2%, 41,1%, 49,8% dan 44,9%;
penambahan antosianin dan OEO menurunkan indeks kristalinitas film sampel. Perubahan serupa dalam
pola XRD diamati untuk film biopolimer yang mengandung anthocyanin [40, 42]. Penurunan indeks
kristalinitas CAFm, CIFm, dan AFm bisa disebabkan oleh pembentukan kompleks amorf antara CNF dan
anthocyanin atau OEO melalui interaksi intermolekul.

3.7 Sudut kontak permukaan

Hidrofilisitas dapat dianalisis dengan mengukur sudut kontak permukaan (CA). Gambar. 7 menunjukkan
sudut kontak permukaan CAFm, AFm, CIFm, dan CFm. Sudut kontak CFm adalah 49,4 °, karena adanya
beberapa gugus hidrofilik hidrofilik. CA dari AFm adalah 52.9 °; dekat dengan CAFm (57,6 °). Keduanya
lebih tinggi dari CA CFm; ini bisa dikaitkan dengan penambahan OEO. Namun, penambahan anthocyanin
ubi jalar ungu meningkatkan hidrofilisitas CIFm, yang memiliki nilai kontak terendah (30,1 °). Ini karena
antosianin ubi jalar ungu mengandung beberapa kelompok hidroksil. Sudut kontak semua film
ditemukan kurang dari 90 °, yang menunjukkan bahwa CAFm, AFm, CIFm, dan CFm bersifat hidrofilik dan
penambahan anthocyanin dan OEO tidak mengubah hidrofilisitasnya dengan jelas. Namun, hidrofilisitas
bermanfaat untuk CAFm menanggapi perubahan pH.
3.8 Transmisi cahaya

Cahaya dapat ditransmisikan melalui bahan kemasan makanan transparan, seperti plastik dan gelas, dan
merusak nutrisi yang ada dalam makanan, terutama susu, jus buah, dan minyak. Misalnya, cahaya dapat
mengoksidasi vitamin yang ada dalam jus buah yang disimpan dalam wadah transparan. Oleh karena itu,
bahan kemasan makanan perlu memberikan penghalang yang baik untuk cahaya. Transmisi sinar
ultraviolet dan cahaya tampak melalui film sampel ditunjukkan pada Gambar. 8. Transmisi cahaya CFm
tanpa anthocyanin dan OEO adalah yang tertinggi, menunjukkan bahwa CFm adalah penghalang cahaya
yang buruk. Transmisi CIFm dan AFm ke cahaya tampak (380-780 nm) adalah sama, tetapi transmitansi
CIFm ke cahaya ultraviolet (200-350 nm) lebih rendah dibandingkan dengan AFm. Transmisi CAFm ke
sinar ultraviolet dekat dengan CIFm, tetapi transmisi ke cahaya tampak adalah yang terendah dari
semua. Ini menunjukkan bahwa kinerja penghalang CAFm terhadap cahaya adalah yang terbaik.
Transmisi cahaya ultraviolet CAFm dan CIFm yang mengandung anthocyanin sangat rendah, karena
potensi anthocyanin untuk menyerap cahaya ultraviolet [43]. Selain itu, penambahan OEO menurunkan
transmitansi CAFm ke cahaya tampak. Oleh karena itu, CAFm dapat digunakan untuk kemasan makanan
karena berfungsi sebagai penghalang cahaya yang sangat baik.

3,9 Sifat mekanik

Kekuatan mekanik film dievaluasi dengan mengukur kekuatan tarik (TS), sedangkan ketangguhan dan
kekakuan film ditandai dengan mengukur perpanjangan putus (EB) dan modulus elastis (EM), masing-
masing. Ketebalan dan sifat mekanik

dari semua film sampel tercantum dalam Tabel 3. Ketebalan CAFm, AFm, CIFm, dan CFm berturut-turut
menurun, yang disebabkan oleh komposisi yang berbeda. TS CFm adalah yang tertinggi dan mencapai
52,98 MPa, yang dapat dikaitkan dengan CNF yang menghubungkan masing-masing

lain untuk membentuk struktur jaringan tiga dimensi melalui ikatan hidrogen. TS dari CIFm menurun
karena interaksi antar molekul dihancurkan oleh penambahan anthocyanin [12], sedangkan penurunan
TS dari AFm mungkin karena diskontinuitas struktur film, yang disebabkan oleh kehadiran OEO [44] . TS
CAFm terendah adalah hasil dari kombinasi dari dua faktor tersebut di atas. Zhai et al. [10]

melaporkan bahwa EB film kolorimetri meningkat dengan meningkatnya konten antosianin.

Dibandingkan dengan CFm, EB CAFm, AFm, dan CIFm meningkat, dan ini menunjukkan bahwa
penambahan anthocyanin dan OEO meningkatkan ketangguhan film. Hasil ini menunjukkan bahwa film
menjadi lebih homogen dan lebih padat dengan penambahan antosianin, seperti yang ditunjukkan pada
bagian 3.4. Selain itu, penambahan OEO juga meningkatkan EB film, mungkin karena efek plastisisasi
OEO [44]. Perubahan EM dari

film mirip dengan perubahan EB.

3.10 Properti antimikroba

E. coli dan L. monocytogenes adalah jenis bakteri gram negatif dan gram positif yang paling umum, dan
dapat menyebabkan pembusukan makanan. Di sini, sifat antimikroba film terhadap E. coli dan L.
monocytogenes dipelajari. Gambar pertumbuhan bakteri CAFm, AFm, CIFm, dan CFm setelah kultur
ditunjukkan pada Gambar. 9. Seperti yang diharapkan, ada banyak pertumbuhan dan reproduksi kedua
jenis bakteri pada permukaan CIFm dan CFm setelah kultur, dan ini menunjukkan bahwa CIFm dan CFm
tidak memiliki atau relatif miskin

aktivitas antimikroba karena tidak mengandung OEO. Namun, tidak ada pertumbuhan dua jenis bakteri
pada permukaan CAFm dan AFm yang mengandung OEO, dan tingkat penghambatan terhadap E. coli
dan L. monocytogenes CAFm dan AFm keduanya mencapai 99,99%,

menunjukkan bahwa OEO memainkan peran penting dalam menghambat pertumbuhan E. coli dan L.
monocytogenes [45]. Dengan demikian, aktivitas antimikroba CAFm yang sangat baik dapat secara
efektif memperpanjang umur simpan makanan.

4. Kesimpulan

Dalam penelitian ini, film pengemasan nanofibre selulosa, yang dapat bertindak sebagai indikator pH
dan memiliki sifat antibakteri, berhasil dikembangkan. Antosianin ubi jalar ungu sensitif terhadap
perubahan pH. CAFm yang dikembangkan memiliki kinerja indikator pH yang lebih baik dan warnanya
berubah dari merah menjadi kuning dengan pH berubah dari 2 menjadi 12, masing-masing.
Penambahan anthocyanin dan OEO bermanfaat untuk meningkatkan kinerja penghalang CAFm terhadap
sinar ultraviolet dan cahaya tampak. Namun, kekuatan mekanik dan kekakuan CAFm relatif buruk.
Tingkat penghambatan terhadap E. coli dan L. monocytogenes CAFm mencapai 99,99%. Film kemasan
selulosa nanofibre memiliki kinerja kolorimetri yang unggul dan sifat antimikroba yang sangat baik dan
dapat digunakan dalam banyak cara. Film, yang merupakan bio-komposit ramah lingkungan, dapat
digunakan untuk memantau perubahan kualitas makanan selama penyimpanan, sebagai indikator label
pintar di bidang pengemasan cerdas dan memperpanjang usia simpan makanan dengan menunjukkan
pertumbuhan mikroba.