Tanggal Praktikum 10 Februari 2021

Topik Praktikum 1 PERALATAN LABORATORIUM, BEKERJA

ASEPTIK, PERSIAPAN MEDIUM

Nama/ NIM/ P Novita Dwi Cahyaning/ F24190050/ P2

Jawablah pertanyaan berikut dan kumpulkan sebagai tugas individu!

Due date: pada pertemuan kedua di minggu depan.
Pelajari modul, video dan PPT untuk menjawab.

1. Sebutkan fungsi dari beberapa instrumen terkait dengan aktivitas di laboratorium

mikrobiologi berikut:
Inkubator digunakan untuk menginkubasi cawan-cawan petri (tabung reaksi atau
apapun dengan tujuan menumbuhkan mikroorganisme didalamnya) yang telah diberi
sampel

Autoklaf digunakan untuk sterilisasi media analisis (tip pipet ata peralatan lain) dan
sterilisasi peralatan bekas analisis (dekontaminasi) menggunakan uap panas dengan suhu
121 ⸰C dengan waktu 15 menit, autoklaf yang digunakan untuk sterilisasi media analisis
dengan yang digunakan untuk dekontaminasi harus berbeda.

Oven digunakan untuk mensterilisasi cawan petri atau alat gelas lainnya dengan cara
kering menggunakan suhu 150-160⸰C

Stomacher digunakan untuk menghancurkan sampel padatan menjadi bubur,

penghancuran dilakukan selama 30-60 detik tergantung tingkat kekerasan sampel yang
ingin dihancurkan

Shaker digunakan untuk menghomogenkan larutan dengan system getar

PCR real-time digunakan untuk memperbanyak sampel (amplifikasi DNA)

Fermentor berfungsi untuk menyediakan kondisi lingkungan yang cocok bagi mikroba
agar dapat menghasilkan biomassa, enzim, metabolit, dsb

Laminar airflow (alat yang berguna untuk bekerja secara aseptis) digunakan untuk
melakukan analisis dan melindungi pekerjaan dari kontaminasi udara ruangan dan
melindungi analis dari aliran udara dari sampel atau kultur mikroba dengan aliran udara
yang dibuat mengarah menjauhi analis

Praktikum Mikrobiologi Pangan Topik 1

2. Jelaskan kepanjangan medium di bawah ini (untuk yang belum tercantum); fungsinya
untuk analisis pertumbuhan kelompok mikroba apa?:
Contoh: Plate Count Agar (PCA), untuk menghitung total mikroorganisme
a. Eosin Methylene Blue (EMB) Agar, media diferensial untuk Eschereria coli dan
media untuk menumbuhkan bakteri kelompok Enterobactericeae (Awalul et.al.
2019)
b. Lauryl Tryptose Broth (LTB), digunakan pada tahap pre-enrichment E. coli /
coliform
c. Acidified Potato Dextrose Agar (APDA), untuk mengkultivasi kapang dan khamir
serta menghambat pertumbuhan bakteri (Aprintasari et.al. 2012)
d. Violet Red Bile Agar (VRBA), untuk analisis Enterobacteriaceae, menghambat
pertumbuhan beberapa bakteri gram positif dan media diferensial untuk bakteri
fermenter (Tassel et.al. 2012)
e. De Man Rogosa Sharpe Agar (MRSA), untuk memperkaya, menumbuhkan,
mengisolasi BAL (Amarila et.al. 2010)

3. Jelaskan bagaimana cara membuat larutan pengencer berikut:

a. NaCl 0.8%
b. KH 2 PO4
Jawaban :

a. Sebanyak 0.8 g NaCl ditimbang dan memasukkannya kedalam Erlenmeyer 100

ml. Kemudian dilarutan dengan 100 ml air dan dihomogenkan. Selanjutnya
dipanaskan di hot plate sambil diaduk hingga larutan mendidih, ditutup
dengan aluminium foil, lalu disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 800 ⸰C
selama 20 menit.
b. Membuat 10 cotton cap tubes dan 5 cotton Erlenmeyer cap. Sebanyak 3.4 g KH 2 PO4
ditimbang dan dilarutkan ke dalam 60 mL aquades dalam beaker glass, kemudian
pH larutan disesuaikan dengan NaOH menjadi 7.2 dan disejajarkan volumenya
menjadi 100 mL dalam labu ukur. Selanjutnya disterilkan pada suhu 121 oC
selama 15 menit dan larutan stok disimpan di lemari es. Untuk membuat larutan
pengencer, sebanyak 1.25 mL larutan stok diencerkan menjadi 100 0 mL dalam
labu ukur, selanjutnya larutan pengencer dimasukkan ke dalam 20 tabung
(volume 9 mL) dan 5 Erlenmeyer (volume 90 mL) dan disterilisasi.

4. Berikan urutan-urutan yang tepat dari tahap-tahap di bawah ini jika saudara akan
membuat suatu agar miring.
a. Sterilisasi dengan autoklaf
b. Meletakkan tabung reaksi pada posisi miring
c. Penimbangan medium
d. Pengisian medium terlarut ke dalam tabung reaksi
e. Pemanasan untuk melarutkan medium
f. Penambahan air ke dalam media bubuk

Urutan yang benar adalah:

Praktikum Mikrobiologi Pangan Topik 1

 Penimbangan medium - Penambahan air ke dalam media bubuk - Pemanasan
untuk melarutkan medium - Pengisian medium terlarut ke dalam tabung reaksi -
Sterilisasi dengan autoklaf - Meletakkan tabung reaksi pada posisi miring

5. Seorang mahasiswa yang sedang analisis total mikroba dengan menggunakan media
PCA.
Jumlah cawan petri yang diperlukan adalah 6 buah cawan per sampel (tiap cawan
akan diisi sekitar 15 mL media).
Hitunglah berapa gram media PCA yang dibutuhkan untuk kegiatan tersebut!

Jawaban :

PCA = 17.5 g/L

PCA yang dibutuhkan = 17.5 g/L x 6 x 15 mL

1000
= 1.575 g

Daftar Pustaka
Amarila M, Ajitya KH, Mahardika H, Atiek S, Maksum R. 2010. Isolasi dan skrining
molekuler bakteri asam laktat pembawa gen glukasukrase dari makanan dan
minuman mengandung gula. MAKARA SAINS. 14(1): 53-68.
Aprintasari R, Sutrisno CI, Tampoeboelon BIM. Uji total fungi dan organoleptik pada
jerami padi dan jerami jagung yang difermentasi dengan isi rumen ker bau. 2012.
Animal Agrigulture. 1(2) : 311-321
Awalul F, Riri N, Ike A. 2019. Pengujian Salmonella dengan menggunakan media SSA dan
E. coli menggunakan media EMBA pada bahan pangan. J. Indobiosains. 1 (1) : 22 -
29. DOI : http://dx.doi.org/10.31851/indobiosains.v1i1.2206
Tassel JAV, Martin NH, Murphy SC, Wiedman M, Boor KJ, Ivy RA. 2012. Ev aluation of
various selective media for the detection of Pseudomonas species in pasteurided
milk. J. Dairy Sci. DOI: http://dx.doi.org/10.31851/indobiosains.v1i1.2206

Praktikum Mikrobiologi Pangan Topik 1