Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro, Kampus Undip Tembalang Jl. Prof.
Soedarto, SH, Semarang, Indonesia 50275
*E-mail: dhwardhani@che.undip.ac.id
Terima draft: 29 Oktober 2018; Terima draft revisi: 4 Desember 2018; Disetujui: 7 Desember 2018
Abstrak
Koagulasi adalah salah satu proses penting dalam pembuatan keju, dimana, curd akan terpisah
dari whey susu. Koagulasi ini dapat menggunakan enzim rennet, asam, atau kombinasi
keduanya. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari pengaruh jenis agen koagulan terhadap
yield, aktivitas enzim protease, dan tekstur curd pada pembuatan keju lunak. Agen koagulan
yang digunakan yaitu asam asetat, asam sitrat, jeruk nipis, dan jeruk lemon yang
dikombinasikan dengan enzim rennet. Proses diawali dengan susu yang dipasteurisasi dan
dianalisa awal untuk mendapatkan kadar air, densitas, dan pH-nya. Konsentrasi koagulan yang
ditambahkan adalah 25-45% untuk ekstrak asam dengan basis 50 ml susu dan 5 mL enzim
rennet. Sedangkan konsentrasi asam yang digunakan 1-5%. Curd yang terbentuk selanjutnya
dipisahkan dari whey menggunakan kain saring dan dianalisis yield, persen terpisah, nilai
tekstur dan aktifitas enzimatiknya. Koagulan asam asetat dan asam sitrat menghasilkan yield
curd yang lebih tinggi yaitu 94,66% (asam asetat 4%) dan 93,9% (asam sitrat 5%)
dibandingkan yield curd tertinggi yang dapat dihasilkan dengan koagulan jeruk nipis dan jeruk
lemon yaitu 68,72% (jeruk lemon 45%) dan 61,84% (jeruk nipis 45%). Penggunaan asam
sebagai koagulan memberikan persen terpisah yang lebih besar. Tekstur curd yang terbentuk
dengan koagulan jeruk nipis dan jeruk lemon lebih rapuh dibanding tekstur curd dengan
koagulan asam asetat dan asam sitrat. Konsentrasi koagulan berkorelasi positif terhadap
aktifitas enzim, dimana penambahan asam menginduksi aktifitas enzim yang lebih tinggi.
Abstract
Coagulation is an important process in cheese preparation, in which the curd is separated from
the milk whey. Rennet enzyme, acid, or a combination of both, are involved in the coagulation.
This work was aimed to study the effect of coagulant agents on yield, protease enzyme activity,
and curd texture on cheese making. Acetic acid, citric acid, lime and lemon juice were combined
with the enzyme rennet as coagulant agents. The process was began with milk pasteurization
and was analyzed for its moisture content, density and pH. The coagulant of lime and lemon
extract (25-45%) was added in a base of 50 ml of milk and 5 mL of the rennet enzyme.
Concentration acid was varied at 1-5%. The formed curd was separated from the whey using a
filter cloth and was analyzed for its yield, separation percentage, texture and enzyme activity.
The coagulant of acetic acid and citric acid produced a higher yield curd of 94.66% (4% acetic
acid) and 93.9% (5% citric acid) compared to the highest yield of curd produced by lime and
lemon coagulant which was 68.72% (45% lemon) and 61.84% (45% lime). Higher acid
concentration induced more separation percentage. The texture of the curd formed by lime and
lemon juice was more fragile than those of acetic acid and citric acid. Acid concentration had a
positive correlation with the enzme activity, in which acid coagulant induced higher activity.
1. Pendahuluan
Susu merupakan sumber nutrisi bergizi tinggi (Thorning dkk, 2016). Kandungan nutrisi
yang termasuk salah satu bahan makanan yang tinggi ini mudah rusak karena
dengan kandungan gizi yang paling lengkap kandungan kadar air nya yang tinggi hingga
209
Dyah Hesti Wardhani dkk. / Jurnal Rekayasa Kimia dan Lingkungan Vol. 13 No. 2
lebih dari 80% (Benchaar dkk, 2007). yang relatif lebih pendek daripada curd
Kandungan air yang tinggi merupakan kondisi rennet (Farkye, 2017). Bakteri asam laktat
yang mendukung pertumbuhan mikroorga- berfungsi memfermentasikan laktosa dalam
nisme sehingga menyebabkan susu mudah susu menjadi asam laktat. Asam yang
terkontaminasi mikrobia. dihasilkan akan menurunkan pH dan sebagai
akibatnya kasein akan menggumpal hingga
Produksi susu segar Indonesia semakin
terbentuk curd (Bittante, 2007).
meningkat dan mencapai lebih dari 70.000
liter di tahun 2015 (BPS, 2017). Hal ini Untuk menghasilkan curd yang baik secara
membuka peluang untuk mengolah susu efisien, proses koagulasi dilakukan
menjadi produk olahan pangan lain yang
menggunakan kombinasi koagulan. Fermen-
tidak cepat rusak. Salah satu bentuk olahan
tasi maupun penambahan asam bertujuan
dari susu yang banyak dikonsumsi di
Indonesia adalah keju. Awalnya, pembuatan untuk menurunkan pH sehingga mencapai pH
keju merupakan upaya untuk mengawetkan optimum bagi kerja rennet. Proses
protein susu dan kandungan bergizi tinggi pengasaman menggunakan fermentasi mem-
lainnya. butuhkan waktu yang relatif lebih lama
dibandingkan dengan pengasaman dengan
Meskipun produk olahan keju semakin dikenal zat asam langsung. Hal ini disebabkan karena
dan dikonsumsi luas oleh masyarakat, namun pada fermentasi diperlukan waktu yang lebih
proses pembuatan keju masih belum banyak lama bagi pertumbuhan mikroorganisme
di ketahui secara luas. Berbagai kondisi hingga mampu menghasilkan asam yang
proses pembuatan keju akan mempengaruhi akan menurunkan pH hingga sesuai untuk
karakteristik keju yang dihasilkan (Farkye, kerja rennet. Dengan kata lain, penggunaan
2017). Tipe keju sangat bervariasi ditentukan kombinasi asam dan enzim membutuhkan
antara lain dari jenis susu, metode waktu yang lebih singkat dalam proses
pengentalan, temperatur, metode koagulasinya.
pemotongan, pengeringan, pemanasan, juga
proses pematangan keju dan pengawetan. Penggunaan berbagai ekstrak alam sebagai
Berdasarkan proses pematangan dan koagulan keju telah dilaporkan sebelumnya.
pemeramannya, keju dibedakan antara yang Bornaz dkk (2010) melaporkan penggunaan
diproses melalui pemeraman (ripened ekstrak dari buah tin dan artichoke (Cynara
cheese) dan tanpa pemeraman (unripened Scolymus L. cv. Blanca) mempersingkat
cheese). Keju tanpa pemeraman seperti keju waktu gelasi dibandingkan chymosin, namun
cottage, keju krim, dan mozzarella, membutuhkan waktu yang lebih lama dalam
mempunyai tekstur lunak dan total padatan restrukturasi penyelesaian koagulasi. Ekstrak
kurang dari 25% (BPOM, 2016). buah menghasilkan yield koagulasi yang lebih
banyak serta kapasitas retensi air yang lebih
Salah satu tahap yang penting dalam baik. Sánchez-Muñoz dkk (2017) menyim-
produksi keju yaitu koagulasi. Koagulasi pulkan ekstrak biji Moringa oleifera
merupakan proses menggumpalnya protein berpotensi digunakan sebagai koagulan pada
kasein susu yang menghasilkan curd dan pembuatan keju dari susu skim dan susu
whey sebagai produk akhirnya. Curd yang kedelai. Nugroho dkk (2018) mendapatkan
terbentuk selanjutnya akan diproses menjadi yield yang lebih tinggi pada penggunaan
keju. Penggumpalan protein dilakukan ekstrak rosella sebagai koagulan keju segar.
dengan menambahkan agen koagulan Penelitian-penelitian terdahulu tersebut
(Farkye, 2004). Koagulasi bisa juga dilakukan belum mengkaji mengenai aktivitas enzim
menggunakan asam, enzim maupun dengan rennet dan persen terpisah untuk
bantuan starter dalam bentuk bakteri asam pembentukan keju tanpa pemeraman
laktat (Hyslop, 2003). Setiap proses menggunakan koagulan alami. Pada
koagulasi memiliki kelebihan dan kekurangan penelitian ini selain parameter yield dan
masing-masing. Koagulasi enzim mengguna- tekstur, aktivitas enzim dan persen terpisah
kan rennet umum digunakan saat ini. Proses menjadi respon uji yang dikaji pada
koagulasi menggunakan asam (direct pembuatan keju tanpa pemeraman
acidification) berjalan lebih lambat. Akibatnya menggunakan berbagai koagulan, yang
curd asam lebih sulit dipisahkan dengan merupakan kebaruan penelitian ini.
whey. Karenanya penggunaan koagulan
asam akan menghasilkan keju yang lunak Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk
mempelajari pengaruh jenis koagulan asam
dengan kadar air tinggi dengan umur simpan
dan konsentrasinya terhadap yield, aktivitas
210
Dyah Hesti Wardhani dkk. / Jurnal Rekayasa Kimia dan Lingkungan Vol. 13 No. 2
enzim dan tekstur curd pada pembuatan keju Panelis memberikan penilaian dengan
tanpa pemeraman. Tantangan yang dihadapi menuliskan skala berdasarkan tingkat skala
dalam penelitian ini adalah mendesain kondisi curd (Tabel 1) hasil pengamatan.
optimal sehingga didapatkan keju lunak
tanpa pemeraman dengan yield yang tinggi Tabel 1. Skala penilaian tekstur curd
secara efisien.
Skala Tekstur
2. Metodologi
2.1. Bahan dan Alat 1 Lunak mudah pecah
2 Lunak liat
Susu sebagai bahan utama diperoleh dari 3 Keras mudah pecah
perasan pagi unit usaha susu Fakultas 4 Keras liat
Peternakan dan Pertanian Universitas
Diponegoro. Koagulan yang digunakan yaitu 2.6. Uji Aktivitas Enzim
asam asetat, asam sitrat, jeruk nipis, dan
jeruk lemon. Asam sitrat dan asetat di Aktivitas proteolitik curd ditentukan
dapatkan dari Merck. Jeruk nipis dan jeruk berdasarkan metode dari Cupp-Enyard
lemon didapatkan dari jaringan retail (2008). Sebanyak 1 mL ekstrak keju
Superindo. Bahan lain yang digunakan rennet ditambahkan pada substrat kasein 0,65%
tablet merk +Qso. (0,65 gr kasein dalam 100 mL bufer K-Pospat
0,05 M pH 7,5). Campuran reaksi diinkubasi
2.2. Koagulasi Susu pada 37°C selama 10 menit. Terminasi reaksi
dilakukan melalui penambahan 5 mL reagen
Susu cair segar (500 ml) ditempatkan dalam TCA 110 mM, dan diinkubasi kembali pada
erlenmeyer dan dipasteurisasi pada suhu 37°C selama 30 menit. Filtrat (2mL)
60°C selama 15 menit. Agen pengkoagulasi dipisahkan dengan cara sentrifugasi pada
ditambahkan setelah susu mencapai suhu 10.000 rpm selama 10 menit. Sebanyak 5 mL
40oC tambahkan 5 mL enzim rennet. Adapun Na2CO3 dan 1 mL reagen Folin Ciocalteau
konsentrasi ekstrak jeruk nipis dan jeruk ditambahkan ke dalam filtrat dan diinkubasi
lemon yang digunakan adalah 25-45%, pada 37°C selama 30 menit. Absorbansi
sedangkan asam asetat dan asama sitrat campuran diukur menggunakan
adalah 1-5%. Erlenmeyer ditutup dengan spektrofotometer pada panjang gelombang
aluminium foil dan inkubasikan suspensi pada 660 nm. Satu unit aktivitas enzim
suhu tertentu. pH diukur setelah waktu didefinisikan sebagai banyaknya enzim yang
tertentu kemudian dilanjutkan dengan dibutuhkan untuk melepaskan 1µmol tirosin
penyaringan curd. Curd yang dihasilkan pada substrat kasein per menit.
diperas untuk menghilangkan air. Curd yang
telah diperas selanjutnya dianalisis. 3. Hasil dan Pembahasan
Pengujian dilakukan selama 60 menit dengan 3.1 Karakterisasi bahan baku (susu)
pengambilan sampel tiap 5 menit.
Susu sebagai bahan baku keju dianalisis awal
2.3. Yield curd meliputi kadar air, densitas, pH, dan
organoleptik yang dipaparkan pada Tabel 2.
Yield (basis kering) merupakan rasio antara
kandungan padatan pada susu terhadap curd Tabel 2. Hasil analisis bahan baku susu
kering. Curd yang dihasilkan kemudian
diperas selanjutnya dikeringkan dengan oven Parameter Hasil Standar*
sampai berat konstan selanjutnya ditimbang.
analisis
2.4. Uji Persen Terpisah Kadar air (%) 92 -
Densitas (g/ml) 1,042 1,027
Susu yang telah ditambahkan koagulan pH 6,7 6,3-6,8
(sesuai variabel) dan enzim rennet Warna normal normal
dimasukkan kedalam gelas ukur 100 ml, Aroma normal Normal
kemudian diamati persen terpisahnya yaitu
*SNI 3141.1:2011
dengan mengamati perubahan tinggi curd
tiap waktu waktu tertentu selama 60 menit.
Secara kualitas susu yang digunakan dalam
2.5. Uji Tekstur penelitian ini dalam kondisi baik dimana
semua parameter sesuai dengan SNI
Sampel curd satu per satu dibagikan kepada 3141.1:2011 yang mengatur tetang standar
panelis untuk ditentukan score teksturnya. susu sapi segar.
211
Dyah Hesti Wardhani dkk. / Jurnal Rekayasa Kimia dan Lingkungan Vol. 13 No. 2
Yield (%)
jenis jeruk berbanding lurus dengan yield
40
curd yang dihasilkan. Jenis asam yang
digunakan mempengaruhi hasil curd yang
didapatkan. Penambahan asam yang
20
berkonsentrasi sama memungkinkan untuk
mendapatkan tingkat keasaman (pH) akhir
yang berbeda. pH akhir pada penambahan 0
asam sitrat lebih kecil dibanding asam asetat. 25% 30% 35% 40% 45%
pH akhir pada penambahan asam sitrat % ekstrak
berkisar 6,5-5 dan pada asam asetat pada 7- (a)
6. Hasil curd yang didapat lebih besar pada 100
penambahan asam sitrat dikarenakan tingkat asetat
sitrat
keasamannya lebih mendekati titik isoelektrik
80
dari kasein susu. Hal tersebut dimungkinkan
karena ketidakstabilan protein terhadap
Yield (%)
Koagulasi merupakan suatu proses rusaknya asam asetat dan asam sitrat memerlukan
stabilitas dari system emulsi susu yang konsentrasi yang jauh lebih rendah daripada
menghasilkan dua produk yaitu curd dan penggunaan ekstrak jeruk. Hal ini sejalan
whey (Horne & Banks, 2004). dengan pembahasan sebelumnya yang
menyatakan bahwa ekstrak jeruk hanya
Dalam uji persen terpisah dapat diamati mengandung sekitar sekitar 45 g/L asam
kecepatan proses terbentuknya curd dan sitrat (Penniston dkk 2008), sehingga
whey, sehingga bias didapatkan waktu kemampuan koagulasinya kurang efektif
optimum saat curd sudah tidak bertambah dibanding asam. Meskipun begitu,
secara signifikan. Berdasarkan Gambar 2 kesemuannya agen koagulasi memberikan
secara garis besar penggunaan ekstrak kedua tren yang sama. Pembentukan curd berjalan
cepat pada 5-40 menit pertama, dan mulai
jenis jeruk tidak berbeda secara signifikan
stabil setelah 50 menit.
yaitu mencapai maksimum 60-63 persen
terpisah. Hasil maksimal persen terpisah
100
pada ekstrak lemon dicapai pada
penggumpalan menggunakan ekstrak 45%,
80
sedangkan penggunaan ekstrak jeruk nipis
mendapatkan persen pemisahan maksimal
% terpisah
60
pada penambahan 40%.
100 40
konsentrasi 1%
konsentrasi 25%
konsentrasi 2%
konsentrasi 30%
20 konsentrasi 3%
80 konsentrasi 35%
konsentrasi 4%
konsentrasi 40%
konsentrasi 5%
konsentrasi 45%
% Terpisah
60 0
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
40
(a)
20 100
0 80
0 10 20 30 40 50 60 70
% terpisah
Waktu (Menit) 60
(a)
40
100 konsentrasi 1%
konsentrasi 25% konsentrasi 2%
konsentrasi 30% konsentrasi 3%
20
80 konsentrasi 35% konsentrasi 4%
konsentrasi 40% konsentrasi 5%
konsentrasi 45% 0
% Terpisah
60
0 10 20 30 40 50 60 70
Waktu (menit)
40
(b)
koagulan ekstrak jeruk menghasilkan curd preparasi untuk tahap berikutnya. Tahap
lunak liat. Tekstur curd berkaitan dengan kedua dikenal sebagai fase non enzimatik
kesempurnaan koagulasi yang dipengaruhi dimana misel kasein mulai membentuk rantai
oleh kekuatan koagulan. Koagulasi hingga akhirnya terbentuk curd solid (Horne
dipengaruh dari tingkat keasaman pada and Lucey, 2017).
proses pembentukan curd. Jika tingkat
keasaman lebih tinggi maka terjadi pelepasan Aaktivitas enzim pada penelitian ini dianalisa
air dalam keju dan terjadi penggabungan setelah 60 menit dengan tujuan untuk
molekul kasein dan membentuk curd mengetahui kinerja dari enzim rennet dalam
sehingga semakin tinggi tingkat keasaman koagulasi susu dengan mengkombinasikan
maka samakin baik curd yang dihasikan beberapa jenis asam pada beberapa
(Penniston dkk, 2008). konsetrasi. Satu unit aktivitas enzim
didefinisikan sebagai banyaknya enzim yang
4 dibutuhkan untuk melepaskan 1 µmol tirosin
pada substrat kasein per menit.
3
5
jeruk lemon
Nilai tekstur
2
0
Lemon Nipis Asetat Sitrat 1
Jenis koagulan
tinggi dibandingkan dengan asam sitrat. Ardö, Y., McSweeney, P. L., Magboul, A.
Penambahan asam menyebabkan aktifitas A., Upadhyay, V. K., & Fox, P. F.
enzim yang lebih tinggi dbanding penggunaan (2017). Biochemistry of cheese
ekstrak jeruk. Hal ini berarti pH setelah ripening: proteolysis. In Cheese:
penambahan asam mampu mencapai pH Chemistry, Physics and Microbiology
optimum yang lebih sesuai bagi aktifitas (Fourth Edition), Academic Press,
enzim. 445-482.
Aktivitas enzim rennet memiliki hubungan Benchaar, C., Petit, H. V., Berthiaume, R.,
yang erat dengan yield, dimana kenaikan Ouellet, D. R., Chiquette, J., &
aktivitas enzim menyebabkan kenaikan yield Chouinard, P. Y. (2007). Effects of
dari curd yang dihasilkan. Kenaikkan kinerja Essential Oils on Digestion, Ruminal
enzim rennet (aktivitas enzim) dalam Fermentation, Rumen Microbial
memutus kasein menyebabkan curd yang Populations, Milk Production, and Milk
terbentuk semakin banyak (Bittante, 2011). Composition in Dairy Cows Fed Alfalfa
Lingkungan pH yang berbeda mengakibatkan Silage or Corn Silage1. Journal of
terjadinya destabilisasi micelle kasein yang Dairy Science, 90(2), 886-897.
berbeda. Pada pH di bawah 6,7 sebagian
koloid kalsium fosfat tidak larut, sedangkan Bittante, G. (2011). Modeling rennet
pada pH di bawah 5,5 micelle mulai coagulation time and curd firmness of
bergabung akibat menurunnya tekanan milk. Journal of Dairy Science, 94(12),
permukaan. Tekanan permukaan mendekati 5821-5832.
nol pada pH sekitar 5,2, sedangkan pada pH
4,8 hampir semua koloid kasein fosfat BPOM, (2016), Peraturan Kepala Badan
menjadi tidak larut. Pada pH 4,6 kelarutan Pengawas Obat dan Makanan
kasein sudah hilang, sehingga terjadi Republik Indonesia Nomor 21 Tahun
interaksi hidrofobik antara micelle kasein dan 2016 tentang Kategori Pangan,
terjadi presipitasi (Zhang dkk, 2005). Hal ini Badan Pengawas Obat dan Makanan
berarti pH akhir setelah penambahan Republik Indonesia. Jakarta.
koagulan sangat berpengaruh terhadap
aktifitas enzim, yang selanjutnya berakibat Cupp-Enyard, C. (2008). Sigma's non-
terhadap capaian persen terpisah and yield. specific protease activity assay-casein
as a substrate. Journal of Visualized
4. Kesimpulan Experiments: JoVE, 19, 1-2
Koagulan asam asetat dan asam sitrat Farkye, N. Y. (2017). Acid-Heat Coagulated
menghasilkan yield curd yang lebih tinggi Cheeses. In Cheese Chemistry, Physics
yaitu 94,66% (asam asetat 4%) dan 93,9% and Microbiology (Fourth Edition),
(asam sitrat 5%) dibandingkan yield curd Academic Press, 1111-1115.
tertinggi yang dapat dihasilkan dengan
koagulan jeruk nipis dan jeruk lemon yaitu Farkye, N. Y. (2004). Cheese
68,72% (jeruk lemon 45%) dan 61,84% technology. International Journal of
(jeruk nipis 45%). Penggunaan asam sebagai Dairy Technology, 57(2‐3), 91-98.
koagulan memberikan persen terpisah yang
lebih besar. Tekstur curd yang terbentuk Horne, D. S., & Banks, J. M. (2004).
dengan koagulan jeruk nipis dan jeruk lemon Rennet-induced coagulation of milk. In
lebih liat dibanding tekstur curd dengan Cheese: Chemistry, physics and
koagulan asam asetat dan asam sitrat. microbiology, 1, 47-70.
Konsentrasi koagulan berkorelasi positif
terhadap aktifitas enzim, dimana Horne, D. S., & Lucey, J. A. (2017). Rennet-
penambahan asam menginduksi aktifitas Induced Coagulation of Milk.
enzim yang lebih tinggi. In Cheese: Chemistry, Physics and
Microbiology (Fourth Edition),
Ucapan Terimakasih Academic Press, 115-143.
215
Dyah Hesti Wardhani dkk. / Jurnal Rekayasa Kimia dan Lingkungan Vol. 13 No. 2
216