PRAKTIKUM BIOKIMIA

A. Tabel Hasil Percobaan :

Percobaan Hasil pengamatan Keterangan

Uji Glukosa Larutan biru menjadi Menunjukkan adanya zat
Urine + reagen benedict endapan kuning pereduksi dalam urin .
Perkiraan konsentrasi
glukosa dalam urine yaitu
sebesar 1 %.
Uji protein
1. Uji asam Endapan putih
sulfosalisilat
( Urine + asam
sulfosalisilat ) Cincin putih pada Urine mengandung protein
2. Uji Heller permukaan dua cairan
( HNO3 + urine )
3. Uji heat coagulation Koagulum putih
(urine + asam asetat )
Uji Darah Awalnya Berwarna hitam
Benzedine + asam asetat menjadi
glacial + H2O2 Urine mengandung darah
Tabung 1 : ditambah urine 1. Hijau tua
Tabung 2 : ditambah air 2. tetap
Uji garam empedu Bubuk sulphur tenggelam ke Urine mengandung garam
( Urine + bubuk sulphur ) bawah tabung empedu
Uji pigmen empedu
1. Urine + BaCl2 10% Endapan putih Urine mengandung pigmen
2. Ditambah reagen Endapan menjadi hijau empedu
Fouchet
Uji ketone bodies Cincin ungu tua di
Urine + (NH4)2SO4 jenuh + permukaan larutan Urine mengandung aseton
natrium nitroprusside + NH3 dan asam asetoasetat.
kuat

B. Pembahasan
1. Uji glukosa
Adanya glukosa dalam urin disebut glikosuria. Warna endapan
menunjukkan tingkat keparahan glikosuria.
Glukosa dalam urine menunjukkan beberapa penyakit seperti :
a. Diabetes mellitus.
b. Hiperadrenalisme.
c. Glikosuria ginjal
Jika saat diuji berubah menjadi endapan berwarna hijau, kuning,
orange, dan merah bata maka urin positif mengandung glukosa namun dengan
kadar yang berbeda-beda. Endapan hijau menunjukkan kadar glukosa sebesar
0,5% , endapan kuning sebesar 1%, endapan orange menunjukkan 1,5%, dan
endapan merah bata menunjukkan kadar glukosa sebesar 2% atau lebih. Pengujian
dinyatakan positif juga bisa dikarenakan terdapat gula lain yang memiliki sifat
mereduksi.
Jika diuji larutan tidak berubah warna atau tetap berwarna biru maka
dipastikan urine mengandung glukosa dengan kadar <0,5 % atau 0. Urine normal
juga mengandung sedikit glukosa dan glukuronat, tetapi jumlahnya terlalu kecil
untuk menyebabkan penurunan tes Benedict. Pada Diabetes mellitus dan
glikosuria ginjal, glukosa ditemukan dalam urin yang memberi hasil tes positif.

2. Uji protein

Adanya jumlah protein yang terdeteksi dalam urin dikenal sebagai

proteinuria. Urine normal mengandung protein kurang dari 200 mg/day.

Proteinuria terdiri dari dua jenis, yaitu :

- Proteinuria fisiologis: Kurang dari 0,5 gram%. Itu terjadi karena
kehamilan, diet protein tinggi, dll.
- Proteinuria patologis: Terjadi karena kerusakan ginjal
(Glomerulonefritis dan sindrom nefrotik). Pada beberapa pasien
menderita penyakit multipel seperti leukemia lymphosarcoma.
Urine & darah mengandung jenis protein khusus yang disebut
protein Bence Jones. Mereka adalah globulin & memiliki sifat
kelarutan yaitu mereka membeku pada 40-60 0C & masuk ke
larutan pada 80 0C dan muncul kembali setelah pendinginan

Pada uji protein dengan asam sulfosalisilat hasil positif menunjukkan

endapan berwarna putih yang menandakan urine mengandung protein. Pada
uji Heller hasil positif menunjukkan adanya cincin putih pada permukaan dua
larutan. Dan pada heat coagulation menunjukkan adanya koagulum putih yang
menandakan adanya albumin pada urin. Jika pada pengujian negatif maka
urine dalam keadaan sehat dan berfungsi secara normal.

3. Uji Darah
Urine normal tidak mengandung sel darah merah tetapi hanya sedikit
leukosit dan sel epitel yang mungkin ada. Hematuria adalah kondisi di mana
sel darah merah ada dalam urin & terjadi pada nefritis glomeruli akut, batu di
ginjal dan ureter, tuberkulosis ginjal dan karsinoma ginjal.
Hemoglobinuria adalah kondisi di mana terdapat hemoglobin bebas
dalam urin dan terjadi pada malaria, Tifoid, ikterus hemolitik, demam kuning,
hemolisis intravaskular, akibat transfusi darah yang tidak sesuai dan anemia
hemolitik autoimun
Jika saat pengujian hasil larutan berwarna hijau tua maka urin
dinyatakan positif mengandung darah.
Jika saat diuji tidak berubah warna maka urine negatif mengandung
darah dan dinyatakan sehat.
4. Uji Garam Empedu
Garam empedu adalah garam Na + atau K + dari glycocholates &
taurocholates. Ditemukan dalam urin pada ikterus obstruktif & jumlah garam
empedu sebanding dengan derajat obstruksi. Ini ditemukan sampai batas
tertentu pada hepatitis infektif karena obstruksi parsial.Pada penyakit kuning
hemolitik pigmen empedu ditemukan dalam urin tanpa garam empedu. Pada
penyakit kuning obstruktif bilirubin terkonjugasi tidak dapat diekskresikan
melalui saluran normal dan memuntahkan kembali ke aliran darah dan
dikeluarkan melalui urin.
Jika pada pengujian dengan uji Hay, bubuk belerang tenggelam ke
bawah tabung maka urin dinyatakan mengandung garam empedu.
Jika bubuk belerang mengapung pada larutan maka dinyatakan negatif.

5. Uji pigmen empedu

Sel-sel hati yang membentuk bilirubin terkonjugasi mengeluarkannya
ke dalam empedu dan kemudian diekskresikan ke saluran usus melalui saluran
empedu. Di usus kecil bilirubin terkonjugasi ini diubah oleh bakteri usus
menjadi urobilinogen atau stercobilinogen.Meskipun biasanya kadar bilirubin
terkonjugasi dalam darah tidak cukup tinggi untuk menyebabkan jumlah yang
signifikan muncul di urin, bilirubin yang larut dalam air dan terkonjugasi ini
dapat diekskresikan oleh ginjal. Kadar normal bilirubin pada urin kira-kira
sampai 0,02 mg / dl.
Jika pada pengujian Fouchest menghasilkan endapan berwarna hijau,
maka urin dinyatakan positif mengandung bilirubin diatas kadar normal.

6. Keton bodies test

Asam asetoasetat, asam β-hidroksi butirat & aseton secara kolektif
dikenal sebagai badan keton. Urine normal dalam 24 jam mungkin
mengandung badan keton hingga 1 mg. Kelebihan badan keton dalam darah
disebut ketonemia dan ekskresi tinggi badan keton dalam urin disebut
ketonuria dan kondisi keseluruhan disebut ketosis. Badan keton diamati pada
puasa, diabetes mellitus yang tidak diobati, diet tinggi lemak, rendah
karbohidrat, kelaparan berkepanjangan, kehamilan & menyusui.
Produksi dan akumulasi badan keton yang berlebihan dapat
menyebabkan ketosis. Efek fisiologisnya serius karena asam asetoasetat dan
asam β-hidroksibutirat menyumbangkan ion hidrogen berlebih ke darah,
mengakibatkan asidosis - suatu kondisi yang cenderung menurunkan pH
darah. Jika tidak diperbaiki pada waktunya hal ini dapat mengakibatkan
kematian.
Efek fisiologis lain dari akumulasi keton menyangkut zat aseton dan
asam asetoasetat. Keduanya telah ditemukan menjadi racun bagi jaringan otak
bila hadir dalam jumlah yang meningkat di dalam darah. Sehingga kondisi ini
bisa mengakibatkan kerusakan otak permanen.
 Ketika keton terakumulasi dalam darah dan urin, mereka tidak terjadi
dalam konsentrasi yang sama. Asam β-hidroksibutrat hadir dalam konsentrasi
terbesar dan aseton dalam konsentrasi terkecil.
Jika pada pengujian Rothera menghasilkan cincin ungu tua di
permukaan larutan maka dinytakan positif mengandung aseton dan asam
asetoasetat.