Salinan pribadi penulis

Tersedia secara online di www.sciencedirect.com

Teknologi Bioresource 99 (2008) 3949–3964

Ulasan

Imobilisasi mikroalga: Teknik dan penggunaan saat ini

Ignacio Moreno-Garrido *
Lembaga dari Laut Ilmu Pengetahuan dari Andalucı´a (CSIC), Kampus Rı´o San Pedro, s / n 11510, Puerto Nyata, Ca
´diz, Spanyol

Diterima 19 Juli 2006; diterima dalam bentuk revisi 23 Mei 2007; diterima 23 Mei 2007
Tersedia online 9 Juli 2007

Abstrak

Informasi tentang kemajuan teknik imobilisasi dan penggunaan bioteknologi air tawar dan mikroalga laut tersebar. Karya ini
bertujuan untuk menyatukan penelitian utama terkini tentang topik tersebut. Teknik imobilisasi pasif dan aktif yang digunakan pada
mikroalga dicantumkan dan dijelaskan dalam teks. Efek imobilisasi pada pertumbuhan dan metabolisme sel juga ditinjau. Penggunaan
mikroalga yang tidak dapat bergerak saat ini termasuk produksi metabolit, penanganan pengumpulan kultur, memperoleh energi dan
menghilangkan zat yang tidak diinginkan atau berharga dari media (nutrisi, logam, dan agen polutan yang berbeda). Aplikasi mikroalga
yang tidak dapat bergerak dalam penelitian lingkungan akuatik telah ditingkatkan baru-baru ini: penelitian bioteknologi. Penelitian
terbaru menunjukkan keuntungan dari sistem imobilisasi gabungan bakteri-alga di instalasi pengolahan air. Penerapan sistem amobil untuk
produksi energi non-kontaminan (seperti H2 yang diperoleh dari kultur alga) juga merupakan topik penting untuk dieksplorasi di tahun-tahun
mendatang.
© 2007 Elsevier Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang.

Kata kunci: Mikroalga; Fitoplankton; Imobilisasi; Bioteknologi

1. pengantar masalah itu. Penggunaan sel alga amobil dalam proses

pemurnian air telah dilaporkan sejak lama (Robinson et al.,
Mikroalga (sensu lato, artinya termasuk 1988), karena mikroalga merupakan bagian dari organisme
mikroorganisme fotosintetik prokariotik seperti yang tetap dalam filter penyaringan tanaman pengolahan air
cyanobacteria) merupakan organisme yang berperan limbah. Tetapi pada akhir tahun enam puluhan abad yang
penting dalam ekosistem perairan. Diperkirakan sekitar lalu, teknik baru untuk melumpuhkan biokatalis secara umum
40% fotosintesis global dilakukan oleh mikroalga (dari enzim ke seluruh sel) mulai menyebar dalam literatur
(Falkowsky, 1980). Mikroalga membentuk dasar dari (Papageorgiou, 1987), dan penggunaan diversifikasi teknik
sebagian besar rantai akuatik trofik. Di beberapa imunisasi. Alga amobil telah digunakan untuk memperoleh
lingkungan pesisir, biomassa mikrofitobentos dapat biomassa dan menghilangkan unsur hara makro. Kapasitas
menyamai atau bahkan melebihi biomassa bakteri (La akumulasi yang sangat tinggi dari beberapa organisme ini
Rosa dkk., 2001). Penggunaan mikroalga dalam untuk zat yang berpotensi berbahaya (Maeda dan Sakaguchi,
bioteknologi telahtelah meningkat dalam beberapa tahun 1990) juga telah dieksploitasi untuk teknik bioremediasi yang
terakhir, organisme ini diimplikasikan dalam industri diterapkan pada air yang tercemar (khususnya yang
makanan, kosmetik, akuakultur dan farmasi (Borowitzka dan melibatkan logam: Greene dan Bedell, 1990). Kapasitas ini
Borowitzka, 1988), tetapi ukuran kecil sel tunggal juga telah dimanfaatkan untuk memusatkan zat-zat ini
menyiratkan masalah dalam penerapan proses terlebih dahulu dan dengan demikian memfasilitasi
bioteknologi pada organisme tersebut. Teknik imunisasi pengukuran jejak di lingkungan (Carrilho dkk., 2003; Singh
sel telah dikembangkan untuk mengatasinya dan Prasad, 2000). Tingkat pertumbuhan yang lebih rendah
dari sel-sel alga yang tidak dapat bergerak, mungkin karena
pembatasan perbedaan nutrisi ke sel-sel yang tidak dapat
* Tel .: +34 956832612; faks: +34 956834701.
bergerak, serta perlindungan sel-sel yang terperangkap di
Alamat email: ignacio.moreno@icman.csic.es
dalamnya.

0960-8524 / $ - lihat materi depan © 2007 Elsevier Ltd. Semua hak dilindungi undang-undang. doi: 10.1016
/ j.biortech.2007.05.040
3950 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
matriks imobilisasi juga dapat dieksploitasi untuk
memfasilitasi penanganan koleksi budaya (Lukavsky,
1988). Penggunaan sel alga yang tidak dapat bergerak di
lingkungan tidak terbatas pada penghilangan polutan.
Teknik ini baru-baru ini digunakan dalam percobaan
pengukuran toksisitas lapangan (Admiraal dkk., 1999;
Moreira dos Santos dkk., 2002, 2004; Moreira dkk., 2006).
Sebuah bagian penting dari pekerjaan saat ini di bidang
pengukuran toksisitas, bagaimanapun, difokuskan pada
desain bio-sensor berbasis mikroalga (Chouteau dkk.,
2004; Podola dkk., 2004; Sialan dan dkk., 2005).
Penggunaan terbaru dari teknologi mikroalga yang
melibatkan produksi hidrogen (Dante, 2005; Kapdan dan
Kargi, 2006) atau listrik (Kadam, 2002) dapat ditingkatkan
dengan menggunakan teknik imobilisasi. Ulasan yang
sangat terkenal tentang teknik imobilisasi dan penggunaan
tanggal alga dari akhir tahun delapan puluhan (Robinson
dkk., 1986; Codd, 1987; Papageorgiou, 1987). Cassidy dkk.
(1996)membuat revisi aplikasi lingkungan dari sel amobil
(tidak hanya alga). Jen dkk. (1996)diringkas dalam ulasan
teknik baru sampai tahun itu pada hidrogel untuk
imobilisasi sel secara umum. Salah satu ulasan terbaru
tentang topik ini adalah karyaMallick (2002), berpusat
pada penggunaan alga yang tidak bisa bergerak untuk
pembuangan air limbah, nitrogen, fosfor dan logam.
Tetapi sejumlah besar informasi tentang semua ini dan
kegunaan lain dari sel yang tidak bisa bergerak masih
tetap tersebar. Tujuan dari tinjauan ini adalah, dengan
demikian, untuk mengumpulkan semua informasi terbaru
sampai saat ini tentang teknik imobilisasi mikroalga dan
penggunaan saat ini untuk bahan biologis ini, untuk
memfasilitasi tugas peneliti dalam menemukan referensi
yang berkaitan dengan pekerjaan mereka di bidang ini.
2. Teknik imobilisasi untuk sel mikroalga
Sebagian besar teknik imobilisasi yang dirancang untuk
mikroorganisme secara umum dapat diterapkan pada
mikroalga, dengan pembatasan transmisi cahaya jika sel
hidup dimaksudkan untuk diimobilisasi. Teknik imobilisasi
pada dasarnya dapat dibagi menjadi dua kelompok:
imobilisasi '' pasif '' dan '' aktif ''.
2.1. Imobilisasi pasif
Banyak mikroorganisme (termasuk beberapa kelompok
mikroalga) memiliki kecenderungan alami untuk
menempel pada permukaan dan tumbuh di atasnya
(Robinson dkk., 1986). Karakteristik ini dapat
dimanfaatkan untuk melumpuhkan sel pada pembawa
dari berbagai jenis (Codd, 1987). Biasanya, proses tersebut
dengan mudah dapat dibalik dan kontaminasi bahan
dengan sel yang tidak terhindarkan tidak dapat dihindari.
Bahan adsorben (pembawa) untuk imobilisasi pasif bisa
alami atau sintetis. Sehubungan dengan pembawa alami,
baru-baru ini upaya telah dilakukan yang melibatkan
biomassa loofa. Spons Loofa adalah pendukung serat buah
dari spesies yang berbeda dari genus Lu a (L. cylindrica -
kemungkinan sinonim: L. aegypti- aca, L. operculata, L.
acutangula). Spons didapat dari buah kering setelah
jaringan pericarp dikeluarkan. Mobil ini-
rier tidak beracun dan (dikatakan) tidak reaktif, murah,
kuat secara mekanis dan stabil dalam budaya jangka
panjang (Liu dkk., 1998). Akhtar dkk. (2004)menggunakan
biomassa spons loofa untuk melumpuhkan sel Chlorella
sorokiniana, untuk menghilangkan nikel (II) dari larutan
air. Sistem immobi- lisasi ini terbukti mengakumulasi nikel
25% lebih banyak daripada sel bebas setelah eksposisi 20
menit. Teknik imobilisasi menggunakan spons loofa juga
telah digunakan untuk fungus seperti Phanaerochaete
chrysosporium (Iqbal dan Edyvean, 2004, 2005; Ahmadi
dkk., 2006) dalam pengolahan air limbah; bakteri sebagai
Zymomonas nobilis (Vignoli dkk., 2006) untuk produksi
sorbitol; dan bio-sistem mikroba (Nagase dkk., 2006)
untuk degradasi karbendazim dan asam 2,4-
dichlorophenoxyacetic. Untuk sel yang tidak memiliki tren
alami untuk memasang jenis dukungan ini,Ogbonn dkk.
(1996)melaporkan kemungkinan penggunaan bersama
kitosan untuk meningkatkan proses okulasi sel bebas di
atas permukaan toilet. Liu dkk. (1998)membandingkan
kapasitas adsorpsi sel dari kubus spons loofa dan kubus
poliuretan, dan tidak menemukan perbedaan untuk sel
bebas tanaman (Co ff ea arabica). Masalah dalam
merancang penelitian yang melibatkan biomassa spons
loofa adalah keterulangan. Struktur kerangka buah
bervariasi dari satu tanaman ke tanaman lainnya dalam
fungsi kondisi budidaya: setiap spons loofa memiliki
struktur yang berbeda (Liu dkk., 1998). Bagaimanapun,
untuk industri atau tujuan komersial, imobilisasi pasif sel
alga pada spons toilet tampaknya menjadi bidang yang
sangat menjanjikan.
Bahan sintetis juga banyak digunakan dalam
eksperimen yang melibatkan imobilisasi pasif. Urrutia dkk.
(1995)sel Scenedesmus obliquus yang tidak dapat
bergerak dalam polivinil dan poliuretan untuk
menghilangkan nitrat dari air. Kelangsungan hidup sel yang
teradsorpsi dibandingkan dengan sel yang terperangkap
(artinya, sel diimobilisasi dengan imobilisasi '' aktif ''),
dengan mencampurkan sel pekat dengan salah satu
prapolimer. Pertumbuhan sel lebih tinggi untuk sel yang
teradsorpsi daripada yang diukur untuk sel yang
terperangkap, mungkin karena toksisitas dari pra-polimer
(meskipun penulis ini melaporkan bahwa tidak ada efek
toksik yang ditemukan karena adanya sisa reagen pra-
polimer).Yamaguchi dkk. (1999)mencapai degradasi
hidrokarbon yang nyata oleh mikroalga hidrofobik
Prototheca zopfi yang tak berwarna, teradsorpsi ke busa
poliuretan 8 mm kubus dalam reaktor gelembung.
Archambault dkk. (1990)mendeskripsikan sebuah reaktor
di mana sel-sel tumbuhan menempel dengan adhesi alami
pada bahan poliester berserat pendek bernama 7607.
Perekatan perifiton ke permukaan yang berbeda juga
dapat digunakan dalam studi ekologi. Admiraal dkk.
(1999)menggunakan alga mikrobentik dan bakteri yang
menjajah cakram kaca mengukur respons organisme ini
terhadap berbagai tingkat polusi logam. Danilov dan Ekelund
(2001) Bandingkan pola penyelesaian perifiton pada kaca,
kayu dan plastik di danau dengan status trofik yang
berbeda, urutan ini (kaca> kayu> plastik) menjadi
preferensi spesies perifitik untuk ditempelkan. Studi pada
kaca perifiton yang terpasang juga telah digunakan untuk
mengukur pengaruh arus air di aliran pada struktur koloni
alga perifitik (Ghosh dan Gaur, 1998). Lampiran
perifiton ke kaca
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964 3951
campuran. Gel kitosan dengan viskositas tinggi (2% p / v)
slide (terutama diatom) dan pertumbuhan populasi pada menunjukkan stabilitas kimia yang lebih tinggi dalam
jenis permukaan ini telah dipelajari oleh Brandini dkk. percobaan yang dijelaskan oleh
(2001)di muara subtropis selama setahun penuh,
memungkinkan para peneliti untuk membandingkan
perbedaan yang disebabkan oleh kedalaman, cahaya,
suhu, dan tekanan penggembalaan. Nayar dkk. (2005)juga
mempelajari penyelesaian alga perifitik dalam gelas di
muara tropis (Singapura), mengkarakterisasi produksi
dalam hal serapan 14C. Mengikuti penulis tersebut,
spesies diatom planktonik seperti Skeletonema costatum
dan Thalass-iosira rotula, bersama dengan sianofit seperti
Synechococcus sp., Mendominasi kumpulan tersebut.
Lapisan amobilisasi kaca dari Anabaena sp., Juga telah
digunakan dalam eksperimen produksi hidrogen (Robinson
dkk., 1986). Bahan pendukung ini hanya dapat digunakan
dengan sel dari spesies yang menunjukkan kecenderungan
alami untuk menempelkan agregat (terutama atom dan
sianofit), jika bahan sebelumnya tidak
dirawat atau co-okulan tidak digunakan. Pembawa lain
seperti Biolite® (bahan keramik) telah digunakan untuk
imobilisasi bakteri (Prieto dkk., 2002), tetapi tidak ada
referensi terkait dengan mikroorganisme fotosintetik telah
ditemukan.

2.2. Imobilisasi aktif

Mengenai teknik imobilisasi aktif, penggunaan agen

okulan, pelekatan kimiawi, dan penjeratan gel harus
dibedakan.

2.2.1. Agen flokulan

Agen flokulan terutama digunakan untuk menghindari
sentrifugasi yang membosankan dan mahal ketika alga
dimaksudkan untuk dikeluarkan dari media cair. Di antara
fl okulan yang umum digunakan, kitosan adalah yang
paling banyak digunakan. Kitosan adalah amino
polysacchaid linier dari unit bD-glukosamin (2-amino-2-
deoksi-bD-glukan) ! bergabung dengan (1 4) -linkages
(Oungbho dan Mülller, 1997). Itu diperoleh melalui kitin
(diperoleh dari exo-kerangka krustasea) deasetilasi alkali.
Polisakarida ini menyajikan gugus amino bermuatan
positif, memberikan sifat yang sangat menarik untuk
mengadsorbsi partikel bermuatan negatif dan terbukti
berguna untuk sejumlah besar spesies mikroalga (Lubia´n,
1989).Zat ini dapat terurai secara hayati, dan dengan
demikian dapat digunakan dalam pemanenan alga untuk
tujuan nutrisi. Euglena gracilis dalam jumlah besar telah
dihilangkan
media oleh Gualtieri dkk. (1988), mencapai pengurangan
96–98% dari sel tersuspensi dengan 200 mg L — 1 kitosan
pada pH
7.5. Ketidaknyamanan kitosan dalam melumpuhkan
teknologi
niques adalah stabilitasnya yang lemah. Kaya dan Picard
(1996) mencoba untuk memecahkan masalah ini dengan
menggunakan kitosan viskositas tinggi dan konjak fl kami
(glukomanan, diperoleh dari akar umbi pohon konjak -
Amorphophalus konjac) untuk meningkatkan stabilitas fl
okula yang melumpuhkan sel yang hidup dari Scenedesmus
bicelularis untuk menggunakannya dalam pengolahan air
limbah tersier, tetapi menyimpulkan bahwa konjak kami tidak
secara signifikan mengubah sifat reologi dari larutan kitan
 eksperimen
para penulis ini. Tampaknya kandungan anion fosfat dalam iments dijelaskan oleh Blanco dkk. (1999), sel-sel
media membantu menjaga kestabilan kitan gel. Kitosan sebelumnya dikeringkan (dan mati) pada suhu 55 ° C.
dapat mengganggu pertumbuhan alga yang Penulis menyimpulkan
terimobilisasi:Moreira dkk. (2006)menemukan laju
pertumbuhan yang rendah (faktor peningkatan tidak lebih
tinggi dari 4 setelah 3 hari) Phaeodactylum tricornutum
terimobilisasi dalam alginat yang diberi perlakuan kitosan
sebagai pengeras tambahan, sedangkan sel yang
diimobilisasi dalam butiran alginat yang dikeraskan hanya
dengan CaCl2 atau SrCl2 menunjukkan faktor peningkatan
sebesar 31 dan 76 kali lipat. , masing-masing.

2.2.2. Keterikatan kimiawi

Keterikatan kimiawi menghadirkan beberapa kerugian
besar ketika sel-sel hidup dimaksudkan untuk tidak dapat
bergerak, karena interaksi kimiawi (terutama karena ikatan
kovalen, ikatan silang - melibatkan glutaraldehida, misalnya
- atau resin yang dapat dihubungkan dengan fotocross)
menyebabkan kerusakan pada permukaan seluler dan
secara drastis mengurangi kelangsungan hidup sel. Daya
tarik ion tidak begitu berbahaya bagi organisme hidup,
tetapi efektivitas teknik ini bergantung pada pH dan
kekuatan ion dari media sekitarnya (Codd, 1987). Perlu
diingat bahwa pH dalam medium langsung dari mikroalga
hidup dapat mencapai nilai yang sangat tinggi dalam
cahaya, karena proses fotosintesis.metabolisme. Namun
demikian, beberapa eksperimen tidak memerlukan
metabolisme aktif sel, dan organisme tak hidup digunakan
dalam teknik imobilisasi pelekatan kimiawi. Jadi,Seki dan
Suzuki (2002) membandingkan kapasitas adsorpsi dari
dua biosorben tipe oc untuk menghilangkan mikroalga
laut yang '' tidak aktif '' yang mampu mengakumulasi Cd
dan Pb dari media berair. Spesies yang digunakan,
Heterosigma akashiwo, membentuk gelombang merah di
pantai Jepang, sehingga menjadi bahan yang tidak habis-
habisnya dan menarik untuk biosorben, mengikuti para
penulis tersebut. Dua bahan yang dibandingkan adalah
kasein susu (digunakan sebagai protein okulan yang tidak
dapat bergerak dan sebagai biosorben pada saat yang
sama) dan glutaraldehida. Teknik yang dikembangkan
terdiri dari 67% mikroorganisme yang ada dalam kultur.

2.2.3. Jebakan gel

Metode ini adalah teknik yang paling banyak
digunakan untuk imobilisasi alga. BerikutCodd (1987),
penjeratan gel dapat dilakukan dengan menggunakan
polimer sintetik (akrilamida, resin yang dapat
dihubungkan dengan fotocross, poliuretan), protein
(gelatin, kolagen atau putih telur) atau polisakarida alami
(agars, carrageenans atau alginat).

2.2.3.1. Polimer sintetis untuk jebakan gel. Blanco dkk.

(1999)menjelaskan penggunaan polysulphone (bahan
termoplastik) dan sel penjebak resin epoksi dari
cyanobacteria Phormidium laminosum, untuk memeriksa
kapasitas biosorpsi (dan desorpsi, dengan menggunakan
0,1 M HCl) dari Cu (II), Fe (II), Ni (II) dan Zn (II). Resin
epoksi terdiri dari dua komponen yang bereaksi satu
sama lain membentuk bahan inert yang keras. Salah
satunya adalah bisphenol dan yang lainnya adalah
epichlorohydrin. Toksisitas komponen membuat resin
epoksi tidak cocok untuk menjebak sel-sel hidup. Dalam
3952 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964

akumulasi logam dalam manik-manik secara langsung (2004)menggambarkan sebuah bioassay

bergantung pada biomassa cyanobacterial yang
terperangkap. Spesies bakteri siano yang sama telah
digunakan olehGarbisu dkk. (1991)di percobaan yang
dirancang untuk menghilangkan nitrat dari air dengan sel-sel
yang diimobilisasi dalam busa polivinil dan poliuretan. Dalam
kasus yang dijelaskan, polivinil adalah hidrofilik (PV-50) dan
poliuretan dibuat dari Hypol FHP 2002, suatu kelas khusus
dari polieter poliisosianat prapolimer yang dicampur dengan
gugus hidroksil. Jebakan dengan cepat menyebabkan
kematian sel, dan hanya kolonisasi pasif yang lambat dari
busa yang digunakan untuk eksperimen yang melibatkan
penghilangan nitrat. Para penulis ini juga menemukan bahwa
busa yang baru dibuat bersifat toksik bagi sel dan bahkan
menghambat kolonisasi pasif, kemungkinan karena sisa pra-
polimer. Toksisitas menghilang saat busa diautoklaf
sebelumnya. Sel porphyridium cruentum telah diimobilisasi
dalam busa poliuree olehThepenier dkk. (1985)untuk
menghasilkan polisakarida. Setelah imobilisasi, penulis ini
tidak mendeteksi adanya evolusi oksigen, karena tingkat
kerusakan sel yang tinggi selama reaksi imobilisasi.
Setidaknya empat hari harus berlalu sebelum koloni yang
tidak bisa bergerak mulai tumbuh (setelah pembilasan
intensif). Genus Porphyridium menghasilkan exo-
polisakarida dalam jumlah tinggi, yang dapat melindungi
sel-sel dalam koloni atau kelompok seluler dari toksisitas
pra-polimer. Hal yang sama dapat terjadi dengan
cyanobacteria mucilaginous (Streble dan Krauter, 1987),
dilindungi oleh selubung. Selubung ini dapat menempel
satu sama lain membentuk koloni filamen. Jadi, ada
kemungkinan bahwa lapisan dalam dalam suatu koloni
dapat bertahan terhadap toksisitas pra-polimer dari busa
poliuretan dan setelah pembilasan sisa-sisa pra-polimer,
dan kemudian mulai tumbuh dan menjajah busa. Dalam
percobaanThepenier et al. (1985), setelah 10 hari,
produksi oksigen dalam kultur batch mulai menurun
secara dramatis dan stabil pada nilai rendah pada hari ke-
30, tetapi produksi polisakarida mulai meningkat sejak hari
ke-40. Busa ini juga memungkinkan pelepasan sel ke
media. Kawabata dkk. (1990)sel bakteri berhasil
diimobilisasi (Escherichia coli) pada permukaan poli ikatan
silang (N-benzyl-4-vinylpyridi- nium bromide) yang
mengandung stirena (BVPS). Sel-selnya tetap hidup dan
mampu menghasilkan asam L-aspartat dari amonium
fumarat. Meskipun teknik ini belum diterapkan pada
mikroalga, teknik ini tampaknya cocok untuk
melumpuhkan sel-sel alga hidup.Willke dkk. (1994)juga
berhasil melumpuhkan bakteri Paracoccus denitri fi cans
dalam polycarbamoylsulphonate (PCS), matriks hidrogel
toksik yang sangat rendah. Kelangsungan hidup sel
terhadap prosedur imobilisasi lebih besar dari 99%. Jarang,
referensi tentang imobilisasi dengan teknik ini dapat
ditemukan, tetapi ini bisa menjadi teknik yang sangat
cocok untuk menghindari masalah stabilitas gel alginat
(terutama di lingkungan laut, seperti yang akan dibahas
lebih lanjut). Teknik lain, seperti yang dijelaskan
dalamJeon dkk. (2002), menyiratkan alkohol polivinil dan
glutaraldehida. Teknik ini tampaknya tidak
direkomendasikan jika sel-sel hidup dimaksudkan untuk
diimunisasi. Gel silika dapat digunakan untuk
melumpuhkan sel mikroalga.Rangasayatorn dkk.
melibatkan Spirulina platensis untuk memeriksa stabilitas mekanik yang dimiliki matriks berbasis
adsorpsi kadmium sel amobil dalam alginat dan silika karagenan
gel. Teknik terakhir juga disebut teknik sol-gel, dan
dijelaskan dalamWeller (2000) untuk melumpuhkan
antibodi. Gelasi sol terjadi ketika pH alkali silikat
dilakukan di bawah nilai 10. Tetapi dalam kasus yang
dijelaskan olehRangasayatorn dkk. (2004), partikel
silika gel yang diperoleh setelah penghancuran
dikeringkan pada suhu 80 ° C, dan dengan demikian sel
dapat bertahan hidup
bukanlah titik target percobaan. Namun demikian,
adsorpsi kadmium dari sel-sel yang memerangkap gel
silika sama tingginya dengan sel-sel yang terperangkap
alginat (mendekati 100% dari adsorpsi Cd setelah
eksposisi 1 jam, 10 mg L-1 menjadi Cd awal.
konsentrasi). Pengeringan semalam (80 ° C) polisilikat
matriks tampaknya merupakan prosedur umum,
karena juga digunakan oleh Stark dan Rayson (2000)
dalam sebuah karya yang membandingkan kapasitas
pengikatan ion logam dari berbagai bahan yang tidak
dapat bergerak (gambut Sphagnum, tanah pucuk,
gambut, gambut kompos, gambut organik, pengganti
gambut, sel Chlorella vulgaris mati dan sel dari Datura
innoxia - tanaman solanacea). Dalam hal ini, biomassa
dari Chlorella diperoleh dengan biosorben berbasis alga
komersial (Algasorb®), dan bahan ini terbukti sangat
efisien dalam menghilangkan logam (tetapi dilampaui
oleh gambut dan gambut kompos organik) (Singh dan
Prasad, 2000).

2.2.3.2. Protein untuk jebakan gel. Protein tidak banyak

digunakan dalam imobilisasi mikroalga. Dalam
ulasanRob- inson dkk. (1986) dan Papageorgiou (1987),
imobilisasi oleh protein tidak muncul di antara teknik
yang digunakan. HanyaCodd (1987) menyebutkan putih
telur, kolagen dan gelatin sebagai contoh teknik
imobilisasi yang mungkin melibatkan protein.
Organisme lain selain mikroalga telah diimobilisasi
dengan teknik ini (ragi dalam putih telur ayam,
misalnya:Kubal dan D'Souza, 2004). Penggunaan
glutaraldehyde sebagai cross-linker untuk putih telur
tidak memprediksi hasil yang baik dengan mikroalga
hidup, tetapi dapat digunakan untuk sel-sel mati.

2.2.3.3. Polisakarida alami untuk jebakan gel. Jebakan

gel dalam matriks polisakarida alami adalah teknik
imobilisasi yang paling banyak digunakan untuk
mikroorganisme pada umumnya (dan mikroalga pada
khususnya). Diantaranya, karagenan, agar dan alginat
adalah yang paling banyak digunakan.
Karagenan adalah istilah kolektif untuk polisakarida
yang dipersiapkan dengan ekstraksi basa air dari
beberapa Rhodophy- ceae (alga merah), terutama dari
famili Gigartinacieae dan Solieriaceae. Karagenan
terdiri dari unit 3-linked-bD-galactopyranose dan 4-
linked-a-D-galactopiranose secara bergantian. Ini
mengendap sebagai gel dengan adanya senyawa
kationik: ion logam, amina, turunan asam amino dan
pelarut organik yang larut dalam air (Tosa dkk., 1979).
Berbagai bentuk isomer karagenan dapat ditemukan,
dalam fungsi asal spesifik alga. Misalnya, i, j dan k-
karagenan terutama diproduksi oleh Aghardhiella
subulata dan masing-masing gametofit dan
tetrasporiofit dari Chondrus crispus (Burdin dan Bird,
1994). Proses pengerasan untuk meningkatkan
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964 3953
memeriksa apakah sel yang tidak bisa bergerak itu hidup atau
juga telah dirancang: Chamy dkk. (1990)menjelaskan tidak.
teknik pengerasan untuk amobilisasi j-karagenan Gel polisakarida yang paling banyak digunakan untuk
Saccharomyces cerevisiae dengan pengobatan dengan Al menjebak sel hidup adalah alginat. Alginat merupakan
(NO3) 3. Perlakuan ini mengungkapkan untuk keluarga
meningkatkan retensi sel, evakuasi gas yang lebih baik dari
reaktor di mana sel-sel yang tidak dapat bergerak
dibudidayakan dan peningkatan produktivitas etanol
sebesar 20% dengan ragi yang tidak bergerak. Bakteri juga
telah berhasil diimobilisasi (dan disimpan selama
bertahun-tahun) dalam matriks karagenan (Cassidy dkk.,
1997). Travieso dkk. (1996)membandingkan kapasitas
penghilangan nutrisi dari tiga spesies mikroalga (C.
vulgaris, Chlorella kessleri dan Scenedesmus quadricauda)
yang diimobilisasi dalam matriks yang berbeda (termasuk
j-karagenan yang dikeraskan dengan 0,3 M KCl). Tetapi
stabilitas manik-manik j-karagenan cukup rendah
dibandingkan manik-manik Ca-alginat pada kondisi
percobaan. Manik-manik j-karragenan sebagian hancur
setelah satu minggu, sel-selnya dibebaskan dari manik-
manik dan kehilangan struktur manik-manik.ture
dilaporkan setelah waktu ini. Dengan demikian, penulis
memilih Ca-alginat daripada j-karagenan untuk percobaan
penghilangan nutrisi yang dijelaskan.
Agar adalah galaktan sulfat yang diperoleh dari
beberapa spesies alga merah (terutama dari genus
Gelidium, Pterocladia atau Gracilaria) (Burdin dan Bird,
1994). Agar adalah gel termo-reversibel. Komponen
pembentuk gel utama agar (agarosa) terdiri dari rangkaian
linier dari (1–3) - unit terkait-bD-galaktopiranosil dan (1-4)
-kaitan dengan unit 3,6-anhidro-aD-
galaktopiranosil.Robinson dkk. (1986), Codd (1987) dan
Papageorgiou (1987)mengutip polimer ini yang cocok
untuk melumpuhkan sel mikroalga. Matriks agar-agar
untuk melumpuhkan sel-sel hidup memberikan batasan
besar: seperti yang telah dikatakan, agar adalah gel termo-
reversibel. Larut pada konsentrasi yang akan
menghasilkan struktur mekanis yang baik, agar-agar
meleleh sekitar 85 ° C dan
suhu antara 35 dan 40 ° C. Spesies mampu bertahan dalam
waktu singkat
kejut termal pada tingkat ini harus dipilih untuk imobilisasi
agar. Memperhatikan pengalaman kami, suhu di atas 30 °
C dapat merusak berbagai (setidaknya) mikroalga laut
(kecuali cyanophytes dan beberapa ganggang eukariotik
yang beradaptasi dengan baik di lingkungan rawa dan
rawa garam, seperti beberapa spesies dari genus
Dunaliella, Nannochloropis atau Tetraselmis). Agarose
telah digunakan sebagai alas tetap tipe matriks imobilisasi
untuk C. vulgaris dalam percobaan biosorpsi Cu (II) (Aksu
dkk., 1998). Di agarose tersebut
pembentukan partikel yang dijelaskan oleh penulis,
larutan agarosa yang mengandung sel C. vulgaris
dijatuhkan ke dalam minyak cair pada suhu 40 ° C,
meskipun suhu menurun setelah turun hingga 15 ° C.
Partikel-partikel tersebut kemudian dihilangkan dari fasa
berminyak ke air dengan penambahan larutan bufer
fosfat. Para penulis ini melaporkan bahwa kapasitas
adsorpsi logam dari agarosa dan sistem mikroorganisme
agarosa
lebih rendah dari yang dilaporkan untuk Ca-alginate dalam
kondisi yang sama. Namun demikian, keberadaan sel amobil
meningkatkan kapasitas serapan logam dari kedua matriks.
Tidak ada upaya yang dilakukan selama percobaan ini untuk
kopolimer biner bercabang dari asam 1–4-linked-bD-
mannu- ronic dan asam aL-guluronat dalam proporsi
yang berbeda dan urutan (Smidsrød dan Skja˚k-Braek,
1990), di fungsi organisme dan jaringan tempat mereka
diisolasi. Alginat komersial diekstraksi dari alga coklat,
terutama spesies yang berbeda dari genus Laminaria (L.
hyperborea, L. digitata, L. japonica) spesies
Macrocystispyrifera.dll, Ascophyllum nodosum, Lesonia
negrescens atau spesies dari genus Sargassum, meskipun
semua alga coklat mengandung alginat dalam proporsi yang
berbeda mencapai hingga 40% dari berat kering (Ertesva˚g
dan Valla, 1998). Ini zat memiliki fungsi struktural dalam
organisme tersebut. Beberapa bakteri juga dapat
menghasilkan alginat, seperti Azotobacter vinelandii
(Smidsrød dan Skja˚k-Braek, 1990) atau Azotobacter
chroococcum (Ert- esva˚g dan Valla, 1998). Kidambi et
Al. (1995) menggambarkan produksi alginat oleh beberapa
spesies fitopatogen dari genus Pseudomonas sebagai respons
terhadap penambahan garam tembaga. Kapasitas produksi
zat ini tampaknya merupakan strategi evolutif untuk melawan
penggunaan produk fitosanitari berbasis tembaga oleh
manusia (kadar alginat yang tinggi untuk tembaga akan
dibahas lebih lanjut dalam teks:Jang dkk., 1995c), dan
selain itu meningkatkan kemampuan adhesi bakteri ke
permukaan padat (Boyd dan Chakra- barty, 1995).
Keuntungan utama dari penjeratan gel alginat adalah
bahwa sel yang tidak dapat bergerak tidak mengalami
perubahan kondisi fisik-kimia yang ekstrim selama proses
imobilisasi. Permeabilitas, toksisitas nol dan transparansi
matriks yang terbentuk menyiratkan lingkungan yang
sangat lembut untuk sel yang tidak bisa bergerak
(Smidsrøddan Skja˚k-Braek, 1990; Arau´jo dan Andrade
Santana, 1996). Alginat digunakan dalam industri sebagai
bahan pengental, penstabil dan pembentuk gel,
pembentuk film atau pengikat air. agen (Ertesva˚g dan
Valla, 1998).Polimer larut dalam air dingin dan membentuk
gel termostabil. Gelasi garam monovalen dari polisakarida
ini (biasanya Na-alginat) terlarut dalam air terjadi ketika
tetesan campuran sel (atau enzim) dan garam monovalen
alginat dicampur dengan larutan yang mengandung ion
pembentuk gel. Pembentukan gel adalah proses yang
sangat cepat. Kation yang paling umum digunakan untuk
membentuk gel alginat adalah Ca2 +. Jika gel akan
dilarutkan kembali, media dengan natrium sitrat (Hertzberg
dan Jensen, 1989) atau fosfat (heksametafosfat juga dapat
digunakan) dapat digunakan: kation kalsium dapat diserap
oleh anion terlarut atau dapat diganti dalam matriks dengan
kation monovalen untuk membuat struktur tidak stabil. Na-
alginat tidak larut dengan baik di laut atau air
asin.Hertzberg dan Jensen (1989) menjelaskan protokol
untuk melumpuhkan mikroalga laut dalam manik-manik
alginat: Natrium klorida dalam proporsi yang memadai
untuk mencapai nilai salinitas air laut dan Na-alginat
harus sebelumnya (terpisah) dilarutkan dalam air suling
dan dicampur setelah pemecahan. Sel mikroalga laut
kemudian dapat ditambahkan ke Na-alginat asin dan
diteteskan ke larutan Ca2 + air laut. Para penulis ini
(Hertzberg dan Jensen, 1989) mengimobi- lisasi tujuh
spesies mikroalga laut dan memeriksa pertumbuhan sel
yang terperangkap. Pane dkk. (1998)mengembangkan
studi tentang viabilitas Tetraselmis suecica diimobilisasi
3954 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964

dalam manik-manik Ca-alginat dan membandingkan juga telah dikembangkan dengan penggunaan bersama alginat
pertumbuhan seluler sel amobil dan sel bebas, dan polrolisis (Jen dkk., 1996). Mikroenkapsulasi lainnya
menemukan bahwa yang terakhir lebih tinggi, meskipun
kandungan klorofil per sel dalam sel amobil lebih tinggi,
mungkin sebagai respons terhadap kondisi naungan yang
disediakan oleh imobilisasi. Moreno-Garrido dkk.
(2005)memeriksa pertumbuhan sel amobil dan stabilitas
manik Ca-algi- dalam percobaan 17 hari yang melibatkan
11 mar- Pada spesies mikroalga, menemukan bahwa
kestabilan manik-manik juga dapat bergantung pada spesies
yang tidak dapat bergerak. Memperhatikan ketahanan
spesies terhadap racun, tingkat pertumbuhan ketika
diimunisasi dan pemeliharaan struktur manik, penulis
tersebut memilih T. suecica sebagai organisme target yang
baik untuk percobaan akumulasi racun dan P. tricornutum
atau Chaetoceros gracilis sebagai organisme target yang baik
untuk bioassay toksisitas yang melibatkan sel mikroalga
amobil Ca-alginate. Kehilangan stabilitas merupakan batasan
untuk penggunaan matriks Ca-algi- nate di laut, muara dan
perairan payau. Kation monovalen terlarut (terutama
natrium) dalam media dapat menggantikan kation divalen
dan mengakibatkan hilangnya struktur matriks. Saat
pengocokan diterapkan, butiran Ca-alginat berukuran 3–5
mm dapat larut dalam air laut dalam 24 jam (data tidak
dipublikasikan).Moreira dkk. (2006)melakukan studi
pemeriksaan stabilitas manik alginat proporsi yang
berbeda dari dua jenis alginat (diisolasi dari M. pyrifera
dan L. hyperborea) yang dikeraskan dengan Ca2 + atau Sr2
+, sel imobilisasi P. tricornutum. Kation divalen strontium,
serta Ba2 + (Santos-Rosa dkk., 1989), telah diusulkan
sebagai pengeras untuk alginat yang menghasilkan gel
yang lebih stabil dalam media yang diperkaya natrium dan
fosfat. Dalam sebuah penelitian yang dilakukan
olehWiderøe dan Danielsen (2001), viabilitas sel yang
terperangkap di Ba, Ca dan Sr-alginat diperiksa pada garis
sel T leukemia manusia. Ba-alginat memberikan tingkat
pertumbuhan sel yang lebih rendah, sementara sel yang
terpapar kalsium dan strontium tumbuh dengan cara yang
sama. Bagaimanapun, penghambatan pertumbuhan sel
yang terpapar barium kurang dari 20% dibandingkan
dengan yang lain. Untuk mendukung pekerjaan yang
dijelaskan dalamMoreira dkk. (2006), para penulis
tersebut menegaskan bahwa manik-manik yang dibuat
menggunakan 4,9% alginat dari L. hyperborea dan
dikeraskan dengan larutan strontium 4% ditemukan paling
stabil dan paling cocok untuk pertumbuhan mikroalga
ketika mereka terkena kondisi lapangan alami. Manik-
manik kecil Ca-alginate encapsulating bahan bioaktif dapat
diproduksi dengan emulsi fi kasi dan internal-gelasi
ionotropik (Poncelet dkk., 1999). Metode ini mengusulkan
dispersi alginat dan campuran garam kalsium (citrate) dalam
minyak kanola dengan diaduk. Kemudian, volume minyak
kanola tertentu yang mengandung asam asetat glasial
ditambahkan ke emulsi. Setelah beberapa menit, suspensi
manik-minyak ini ditambahkan ke larutan kalsium klorida
untuk menstabilkan manik-manik dan minyak dihilangkan
dengan mencuci dengan surfaktan. Teknik ini juga telah
digunakan untuk DNA yang mengandung Ca-alginate (Quong
dkk., 1998) dan ditingkatkan oleh Chan dkk. (2002)untuk
menghindari kemungkinan penggumpalan mikrosfer dan
limbah garam kalsium yang berlebihan. Mikroenkapsulasi
Strategi untuk mikroalga dijelaskan oleh Joo dkk. (2001): dengan baik pada percobaan tersebut, sedangkan Emiliania
campuran 2% natrium karboksimetil selulosa, 2% CaCl2 huxleyi, Amphydinium carterae dan
dan mikroalga diaduk dalam 0,8% natrium alginat
sampai kapsul terbentuk. Setelah dicuci, kapsul
direndam dalam 2% CaCl2 selama 20 menit untuk
pengerasan. Para penulis tersebut menegaskan bahwa
kapsul memiliki ketahanan yang lebih baik bila
dibandingkan dengan manik-manik yang diproduksi
dengan cara '' tradisional '' (garam natrium dilarutkan
dan diteteskan dalam larutan kalsium), tetapi tidak
melaporkan data numerik. Algi- nate relatif murah
(secara keseluruhan jika dibandingkan dengan matriks
immobilisasi lainnya), tidak beracun, cukup transparan,
relatif stabil dan mudah digunakan. Karena masalah
stabilitas dalam media kaya natrium atau fosfat telah
dihindari, teknik imobilisasi ini tampaknya menjadi alat
yang sangat menjanjikan dalam bioteknologi mikroalga.

3. Efek imobilisasi pada sel mikroalga

Toksisitas beberapa teknik imobilisasi pada sel telah

dibahas di atas (Blanco dkk., 1999; Garbisu dkk., 1991;
Thepenier et al., 1985; Rangasayatorn dkk., 2004;
Urrutia et al., 1995). Secara keseluruhan, pra-polimer
dari busa sintetis dan resin sangat beracun bagi
mikroalga. Jika teknik imobilisasi toksik tidak
diterapkan, sel mikroalga yang tidak dapat bergerak
menunjukkan, minimal, periode jeda yang lebih lama
bila dibandingkan dengan sel bebas (Mallick, 2002; V
´ılchez dkk., 1997). Beberapa penulis menganggap ini
mirip dengan yang terjadi di budaya bebas (Lukavsky
dkk., 1986). Setelah periode ini laju pertumbuhan
spesifik (k) bisa sangat mirip dalam sel-sel yang bebas
dan tidak bergerak (Lau dkk., 1998; Mallick, 2002)
meskipun beberapa laporan menegaskan bahwa ini
lebih rendah daripada dalam kasus terakhir: Pane dkk.
(1998)melaporkan fase lag 5-6 hari untuk T. suecica
amobil dalam manik-manik Ca-alginate. Adalah umum
untuk menemukan produksi klorofil yang lebih tinggi
dalam sel yang tidak dapat bergerak (Lau dkk., 1998;
Pane dkk., 1998; Robinson dkk., 1986). Ini adalah
fenomena yang harus diperhitungkan ketika akan
dilakukan estimasi biomassa oleh klorofil.Hertzberg dan
Jensen (1989) menunjukkan bahwa jumlah maksimum
sel dalam kultur bisa lebih tinggi untuk alga yang tidak
bisa bergerak (P. tricornutum, dalam kasus ini)
daripada untuk sel bebas. Jenis alginat dan, secara
keseluruhan, konsentrasi seluler awal tampaknya
sangat penting dalam kepadatan seluler maksimum
yang dapat dicapai dalam kultur yang tidak dapat
bergerak: semakin tinggi kepadatan seluler awal,
semakin tinggi kepadatan seluler akhir yang akan
dicapai. budaya. Fenomena terakhir dapat dijelaskan
karena sel-sel yang tumbuh di dalam matriks imobilisasi
cenderung membentuk koloni. Jumlah maksimum sel
per koloni harus dibatasi oleh beberapa faktor seperti
difusi nutrisi atau cahaya (koloni lebih kecil di bagian
dalam manik-manik daripada di permukaan). Dengan
demikian, semakin tinggi jumlah koloni, semakin tinggi
jumlah sel dalam kultur. Dalam karya yang sama,
penulis menemukan bahwa S.dibutuhkan untuk
mendapatkan kultur yang stabil. Chaetoceros
ceratosporum dan Thalassiosira pseudonana juga tumbuh
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964 3955

Scripsiella trochoidea tidak tumbuh saat tidak dapat Secara umum, perubahan bentuk koloni lebih sering terjadi
bergerak, meskipun beberapa di antaranya tampak aktif daripada perubahan bentuk sel (Mallick, 2002) ketika sel
secara metabolik karena selama periode waktu yang lama mikroalga diimobilisasi. V´ılchez dkk. (1997)mempelajari
ini menunjukkan autoflorensi merah. Moreno-Garrido dkk. kemampuan sel Chlamydomonas reindhartii yang
(2005)melakukan percobaan selama 17 hari pada manik- diimobilisasi agar,
manik Ca-alginat yang melemahkan 11 spesies berbeda
yang termasuk dalam delapan kelas taksonomi mikroalga
yang berbeda: Nannochloropsis gaditana
(Eustigmatophyceae); Heterocapsa sp.
(Dinophyceae);Rhodomonas salina (Cryptophyceae);
Isochrysis a ff. galbana (Prymnesiophyceae); T. pseudonana,
C. gracilis, P. tricor- nutum dan S. costatum
(Bacillariophyceae); Tetraselmis chui (Prasinophyceae); P.
cruentum (Rhodophyceae) dan Dunaliella salina
(Chlorophyceae). Pertumbuhan sel dan kestabilan manik-
manik diperiksa selama pelaksanaan percobaan.
SebagaiHertzberg dan Jensen (1989) belajar dalam
pekerjaan yang dikutip sebelumnya, Moreno-Garrido dkk.
(2005)menemukan bahwa Skeletonema costaum tidak
tumbuh ketika diimobilisasi. Het- erocapsa sp. juga tidak
tumbuh (sejauh yang saya tahu, tidak ada hasil yang baik
dari kelumpuhan dino fotosintetik dalam literatur), dan N.
gaditana menghasilkan manik-manik yang tidak stabil
dalam kondisi percobaan. Sisa spesies yang diuji
menunjukkan pertumbuhan di dalam manik-manik, cepat
atau lambat mencapai jumlah sel yang stabil (fase
kesetimbangan stasioner), kecuali C. gracilis dan I.
galbana, yang pada hari ke-17 masih menunjukkan
pertumbuhan yang berkelanjutan.Joo dkk.
(2001)mengimobi- lisasi empat spesies mikroalga
(Chlorella minutissima, Pavlova lutheri, Haematococcus
pluvialis dan Dunaliella bardawil) dengan dua metode, dan
membandingkan pertumbuhan sel yang tidak bisa
bergerak dan sel bebas. Para penulis mempelajari bahwa
sel-sel yang diimobilisasi dengan enkapsulasi dengan
menggunakan 2% natrium karboksimetil selulosa, seperti
yang dijelaskan sebelumnya, tumbuh lebih baik untuk
empat spesies dalam bioreaktor kolom gelembung.
Penghambattion, peningkatan atau tidak ada perbedaan
pertumbuhan antara sel mikroalga bebas dan tidak bergerak
telah dilaporkan dalam karya yang berbeda, seperti Mallick
(2002). Lukavsky dkk. (1986)mempelajari morfologi sel
amobil dalam agar dan Ca-alginate. Mengikuti para penulis
tersebut, yang merancang percobaan yang melibatkan S.
quadricauda dan C. kessleri, sel mengalami fase lag awal
(dianggap sebanding dengan yang dilaporkan untuk sel
bebas), diikuti oleh satu sampai tiga divisi. Setelah itu,
pembelahan sel berhenti tetapi sel raksasa masuk
C. kessleri (yang, mengikuti penulis ini, umum dalam
suspensi yang terpapar pada kondisi subletal) biasanya
tidak diproduksi: bentuk dan ukuran sel tidak
menunjukkan perubahan yang terlihat, organel dapat
dikenali dan butiran pati muncul di dalam sel. Namun,
pada S. quadricauda, sel-sel raksasa muncul. Dalam kasus
apapun, sel yang diimobilisasi dalam agar tidak terlalu
terpengaruh dibandingkan sel yang diimobilisasi di algi-
nate. Untuk mikroorganisme tidak bergerak lainnya,
banyak perubahan ukuran dan bentuk telah dilaporkan
(Cassidy dkk., 1996). Namun,Hatanaka dkk. (1999)tidak
menemukan perbedaan bentuk atau kandungan klorofil
antara sel tak bergerak dan sel bebas Dunaliella parva.
 dijelaskan olehSantos-Rosa dkk. (1989)dengan
memastikan bahwa pertumbuhan maksimum terlihat di menggunakan strain mutan terimobilisasi Ba-alginat
dekat permukaan manik-manik. Pembagian unsur hara dari C. reindhartii.
juga harus penting, selain cahaya, karena tidak
berfotosintesisorganisme seperti bakteri Nitrosomonas
europea menunjukkan pola pertumbuhan yang sama pada
manik karagenan (Wij ff els dan Tramper, 1989).
MenghadiriV´ılchez dkk. (1997), para penulis ini
menegaskan adanya kulit tipis poli-mer di sekitar koloni
C. reindhartii dan menghubungkan jumlah sel yang
konstan dengan keseimbangan antara pertumbuhan sel
dan pelepasan dari manik-manik. Penggunaan co-
immobilisasi sistem (Mun˜ ons dan Guieysse, 2006) bisa
meningkat pertumbuhan organisme yang tidak bisa
bergerak, menghindari masalah gas yang berbeda di
dalam matriks yang tidak bisa bergerak, seperti yang
akan dibahas di Bagian 4.8.
Zeglinska (2005) (komunikasi pribadi) melaporkan
pelarian aktif dari filamen cyanobacteria (Nodularia
spumigena) dari manik-manik alginat. Biasanya, motilitas
sel tidak cukup kuat untuk melepaskan diri dari manik-
manik, tetapi dalam kasus cyanobacteria filamen yang
merayap, gerakan ini tampaknya memungkinkan alga
untuk melarikan diri dari matriks yang tidak dapat
bergerak.

4. Penggunaan sel mikroalga amobil saat ini

Penggunaan sel alga amobil yang paling sering saat ini

adalah kultur untuk produksi metabolit, perbaikan
penanganan koleksi kultur, perolehan energi (melalui H2
atau tenaga listrik), nutrisi, penghilangan polutan logam
atau organik dari media akuatik, pengukuran toksisitas
dan produksi sistem co-immobilization untuk tujuan yang
berbeda.

4.1. Kultur untuk produksi metabolit

Mikroalga telah banyak digunakan sebagai biokatalis

dalam bio-transformasi dan biosintesis de novo
(Borowitzka dan Borowitzka, 1988). Berbagai jenis
bioreaktor dapat digunakan dalam bioteknologi
mikroalga untuk tujuan yang berbeda (Mallick, 2002),
teknik imobilisasi menjadi respons terhadap masalah
kehilangan biomassa di aliran keluar (Nakasaki dkk.,
1989). Hatanaka dkk. (1999)menjelaskan proses reduksi
yang dimediasi oleh Ca-alginate immobilized
D. parva, dari hidroksiaseton menjadi (R) 1,2-
propanadiol, yang merupakan glikol dengan harga
tinggi. Produksi propanediol oleh sel amobil
ditemukan serupa dengan yang dikonfirmasi untuk sel
bebas.Tripathi dkk. (2002)mendeskripsikan bio-
transformasi senyawa fenilpropanoid menjadi metabolit
rasa vanila yang terdeteksi HPLC oleh sel amobil H.
pluvialis bebas dan Ca-alginat. Akumulasi vanillin dalam
sel amobil lebih tinggi daripada di sel bebas (tidak ada
penjelasan tentang fenomena ini yang diberikan dalam
teks, tetapi referensi dari karya lain dengan
mikroorganisme yang berbeda ditinjau oleh penulis
tersebut menegaskan bahwa ini bukan kasus yang jarang
terjadi). Transformasi nitrit menjadi amonium dalam
media yang mengandung L-metionin-D, L-sulfoksimin
(MSX), dan penghambat sintetase glutamin, telah
3956 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964

Aktivitas volumetrik maksimum adalah 2700 lM jam-1 dalam untuk menghasilkan koloni dari budaya yang tersebar.
reaktor unggun-penuh. Ba-alginat digunakan dalam kasus ini Memperluas rmasi mereka, teknik ini juga dapat digunakan
karena penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa sebagai cara untuk menghasilkan koloni klonal dari kumpulan
kebocoran sel kecil daripada yang ditemukan pada kondisi mikroalga alami untuk mengisolasi sel-sel langka dari
yang sama untuk amenentukan spesies melalui mikromanipulasi posterior. Novel
Ca-alginat. Thepenier dkk. (1985)mempelajari produksi
polisakarida oleh ganggang merah uniseluler P. cruentum
yang diimobilisasi dalam busa poliuretan. Seperti yang
telah disebutkan di Bagian2, koloni jelly mikroalga bisa
bertahan terhadap toksisitas pra-polimer busa. Pada awal
pengujian, tidak ada evolusi oksigen yang teramati dalam
biakan yang teremobilisasi, kemungkinan karena tingkat
kerusakan sel yang tinggi, meskipun setelah banyak
pembilasan, koloni yang bertahan hidup mulai tumbuh
lagi. Ketika kultur mencapai fase diam, produksi
polisakarida terlihat (diukur sebagai peningkatan viskositas
sedang).

4.2. Penanganan koleksi budaya

Penanganan koleksi kultur mikroalga besar adalah tugas

yang membosankan dan memakan waktu. Penyimpanan
jangka panjang merupakan topik yang sangat menarik
terkait dengan penanganan kultur mikroalga,
penyelamatan sumber daya manusia dan ekonomi.Chen
(2001) melaporkan pemeliharaan aktivitas fisiologis dari
sel S. quadricauda Ca- alginate yang terperangkap setelah
tiga tahun disimpan dalam kegelapan pada suhu 4 ° C
tanpa media kultur, dengan satu-satunya gejala kelaparan
dari hilangnya pirenoid. Setelah
mengganti manik-manik yang disimpan dalam jangka waktu
lama di media baru, jumlah coenobia yang tidak dapat
bergerak meningkat hampir 40 kali lipat dalam empat minggu
(dan pyrenoid dibangun kembali). Penulis yang sama (Chen,
2003) mengulangi pengalaman dengan I. galbana, mencapai
hasil yang baik setelah satu tahun penyimpanan. Hertzberg
dan Jensen (1989) disimpan kultur Ca-alginat P. tricornum
selama satu tahun dalam cahaya yang berkurang pada 4 ° C
dan mengkonfirmasi produksi oksigen segera dalam
elektroda tipe Clark ketika manik-manik dipindahkan ke
cahaya. Lukavsky
(1988) melumpuhkan 31 galur sianofit dan ganggang
eukariotik dalam agar 2% (di dalam agar hangat, tidak
diunggulkan di permukaan), dan menyimpan kultur pada
suhu rendah (10 ° C). Setelah 32 bulan sebagian besar
strain masih aktif secara metabolis.Joo dkk.
(2001)melumpuhkan empat spesies mikroalga (D.
bardawil, C. minutissima, P. lutheri dan H. pluvialis) dalam
kapsul dan manik-manik Ca-alginat untuk mendapatkan
kultur yang sangat padat. Para penulis tersebut mencapai
konsentrasi yang lebih tinggi dari sel yang dienkapsulasi
dibandingkan dalam kasus kultur
dengan sel bebas atau sel amobil tipe manik. Tanggapan
dari
D. bardawil dan H. pluvialis dalam reaktor kolom
gelembung sangat tinggi, mencapai nilai lima kali lebih
tinggi dari itu untuk sel gratis. Romo dan Pe´rez-Mart´ınez
(1997) juga disimpan Pseudanabaena galeata dalam manik-
manik Ca-alginate selama 14-18 bulan. Pemulihan sel dalam
kultur segar tidak berbeda dengan yang diperiksa untuk
kultur standar.Hertzberg dan Jensen (1989) juga
menunjukkan bahwa imobilisasi adalah cara yang menarik
teknik telah dikembangkan untuk memfasilitasi 4.4. Penghapusan nutrisi
budidaya alga. Nowak dkk. (2005)merancang sistem
yang didasarkan pada pelat 96-sumur di mana filter Budidaya alga dalam air limbah yang mengandung
membran, yang melumpuhkan strain alga, membentuk nutrisi menawarkan keuntungan gabungan dari
dasar setiap sumur. Sistem ini memungkinkan budidaya pengolahan air dan pro-
beberapa strain mikroalga dengan sedikit usaha, waktu
dan uang.

4.3. Memperoleh energi (listrik atau hidrogen)

Dikatakan bahwa hidrogen adalah bahan bakar masa

depan karena efisiensi konversi yang tinggi, dapat
didaur ulang, dan sifatnya yang tidak berpolusi. (Das
dan Vezirog˘lu, 2001). Bioproduksi dari hidro- gen telah
terbukti ramah lingkungan dan lebih hemat energi bila
dibandingkan dengan proses termokimia dan elektrokimia
(Kapdan dan Kargi, 2006). Beberapa alga mampu
menghasilkan hidrogen dalam kondisi stres (Melis,
2002) seperti perampasan nutrisi sulfur dalam
ganggang hijau, yang menyebabkan penghambatan
proses fotosintesis oksigenik yang reversibel.
Kekurangan sulfur mencegah sintesis protein dan alga
tidak dapat melakukan pergantian protein pusat reaksi
fotosistem-II tertentu. Kemudian, aktivitas fotokimia
dari PSII menurun dengan tidak adanya sulfur dan
oksigen dilepaskan ke media pada tingkat yang lebih
rendah daripada konsumsi O2, mencapai kultur alga
anaerobik dalam gelap jika ditutup dan dihilangkan
sulfur. Hal yang sama terjadi jika O2 langsung
dikeluarkan dari media. Beberapa percobaan yang
berkaitan dengan topik ini baru-baru ini telah
dikembangkan pada C. reindhartii dan spesies lain
(Dante, 2005; Laurinavichene dkk., 2006; Markov dkk.,
2006; Polle dkk., 2002). C. reindhartii tampaknya
menjadi organisme yang menjanjikan untuk studi lebih
lanjut di bidang ini. Menggabungkan biomassa
mikroalga dengan batu bara adalah prosedur
pembangkit listrik lainnya. CO2 yang dihasilkan dari
bahan bakar gas pembangkit listrik dapat digunakan
untuk meningkatkan pertumbuhan mikroalga.
Biomassa mikroalga yang diperoleh dengan cara ini
dibakar lagi di pembangkit listrik yang sama (Kadam,
2002). Ini bisa menjadi cara yang tepat untuk
mengurangi jumlah karbon dioksida yang tinggi (sekitar
26 Gt per tahun, mengikuti penulis yang sama) yang
diproduksi oleh manusia dan membantu negara-negara
penghasil CO2 yang tinggi (Amerika Serikat
menghasilkan 5,7 Gt, artinya sekitar 22% dari emisi
antropogenik di seluruh dunia) untuk mencapai tingkat
CO2 sesuai dengan Protokol Kyoto (van Vuuren dkk.,
2006). Bagaimanapun, produksi molekul hidrogen
tampaknya menjadi target dalam produksi energi
berbasis mikroalga, sepertidaya tahan jangka menengah
dan jangka panjang dari pembangkit listrik termal berbasis
bahan cincin harus dipelajari secara serius oleh ahli
lingkungan dan pemerintah, karena kapasitas polutan
yang diakui dari jenis pembangkit tersebut. Beberapa
upaya juga telah dilakukan selama tahun delapan puluhan
untuk menghasilkan listrik oleh sel fotovoltaik yang
mengandung biokatalis fotosintetik, seperti yang diulas
olehPapageorgiou (1987), tapi tidak referensi terbaru
telah ditemukan sehubungan dengan topik ini.
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964 3957
tahan air laut untuk pengujian depurasi juga merupakan
produksi biomassa alga, yang dapat dieksploitasi secara topik penting.Thakur dan Kumar (1999) memilih D. salina
industri (Mallick, 2002). Batasan dalam proses ini adalah untuk melakukan percobaan serapan hara (amonium, nitrat
tingginya harga dan konsumsi waktu sentrifugasi atau dan fosfat). Alga ini bersifat halotoleran dan dapat digunakan
filtrasi. Teknik imobilisasi telah mencoba menyelesaikan di perairan dengan berbagai salinitas. Dalam percobaan
masalah ini (Proulx dan de la Noue, 1988; Tam dan konkret ini, immo-
Wong, 2000; Travieso dkk., 1996; V´ılchez dan
Vega,1994, 1995; V´ılchez dkk., 2001). P. laminosum yang
tidak dapat bergerak dalam busa poliuretan dan polivinil
telah digunakan dalam reaktor aliran berkelanjutan yang
dirancang untuk menghilangkan nitrat dari air (Garbisu et al.,
1991). Perbandingan dilakukan antara sel yang teradsorpsi
dan yang terperangkap. Seperti yang telah dikatakan, pra-
polimer dari busa poliuretan bersifat toksik bagi sel. Para
penulis tersebut menyimpulkan bahwa penjeratan
bukanlah metode yang sesuai untuk melumpuhkan sel
hidup dalam matriks tersebut, dan eksperimen hanya
dilakukan pada sel yang teradsorpsi. Dalam pekerjaan
yang dijelaskan, hanya nitrat yang dikeluarkan dari media
oleh sel yang teradsorpsi dalam cahaya, dan nitrit atau
amunisi.
nium tidak dilepaskan (kurang dari 1 mg L-1 dari kedua
nutrisi di semua sampel). Menggunakan klorofil sebagai
indikator
biomassa mikroalga (ini dapat menyebabkan kesalahan jika
korelasi antara klorofil dan jumlah sel dilakukan berdasarkan
sel bebas, seperti yang telah dikomentari), P. laminosum yang
tidak dapat bergerak menghilangkan nitrat pada 1,1 lM mg-1
chl h-1, sementara gratis
sel dibuang 2,6 lM mg — 1 chl jam — 1 dalam kultur
batch. Di
reaktor (tidak ada sel bebas yang dapat digunakan di sini),
penghilangan nitrat
memiliki efisiensi 90% selama tiga bulan. Penuliskomentar
bahwa unggun yang dikemas adalah sistem yang lebih
memadai daripada reaktor terfluidisasi, karena pada
tumbukan dan kolisi yang terakhir antar partikel
menghasilkan desorpsi sel. Pada konsentrasi rendah,
konsumsi nutrisi oleh sel mikroalga yang terimobilisasi
dibatasi, kemungkinan karena keterbatasan dalam distribusi
nutrisi melalui matriks imobilisasi. Jadi,Garbayo dkk.
(2000)menemukan bahwa Ca-alginate tidak dapat
bergerak
C. reindhartii sel tidak mengonsumsi nitrat ketika
konsentrasi nutrisi ini di bawah 0,14 mM, sedangkan sel
bebas hampir sepenuhnya mengkonsumsinya. Para penulis
mendalilkan bahwa penghambatan konsumsi nitrat dapat
terjadi karena adanya nitrit.Mallick (2002) meninjau
beberapa karya yang menyatakan bahwa sel mikroalga yang
tumbuh secara eksponensial menghilangkan lebih banyak
nutrisi (nitrat dan fosfat) daripada kultur tua. Strain
Scenedesmus intermedius dan Nannochloris sp. diisolasi
dari berbagai sumber kotoran babi untuk merancang sistem
depurasi untuk menghilangkan makronutrien dari tanah
pertanian air limbah (Jime´nez-Pe´rez et Al.,
2004).Pengambilan nitrogen dan fosfor dari sel amobil
bebas dan Ca-algi- nate dibandingkan dalam penelitian ini,
ditemukan sedikit lebih rendah dalam sistem amobil
(tetapi dalam urutan yang sama besarnya). Namun
demikian, serapan nutrisi oleh spesies asli tersebut jauh
lebih tinggi daripada yang diukur untuk spesies komersial
umum, mungkin karena adaptasi yang lebih baik terhadap
konsentrasi nutrisi yang tinggi. Dalam pemilihan takson
 untuk meningkatkan perolehan tembaga dari media.
sel bilized selalu menghilangkan lebih banyak nutrisi Penambahan natrium polistirenesulfonat (NaPSS) ke
daripada sel bebas. Setelah 36 jam, kadar nitrat, dalam natrium alginat dihasilkan
amonium dan fosfat yang dihilangkan masing-masing
adalah 62%, 42% dan 65% dari konsentrasi awal. Spesies
Dunaliella, dengan demikian, tampaknya menjadi
organisme target yang baik untuk pengujian akumulasi di
perairan variabel salinitas (Melakukan nmez dan
Aksu, 2002). Teknik imobilisasi meningkatkan proses
fikoremediasi yang hemat biaya (Olgu´ın, 2003).
Penghapusan nutrisi dari air limbah hewan merupakan
topik yang sangat menarik karena banyak badan air
bawah tanah di beberapa wilayah dunia berada terancam
menderita eutrofikasi (Travieso Co´r-doba dkk., 1995a, b).
Baru-baru ini, sistem co-immobilized telah dikembangkan
untuk meningkatkan penghilangan nutrisi dari air limbah
(lihat Bagian4.8).

4.5. Penghapusan logam

Biomassa tumbuhan (Spinti dkk., 1995) dan terutama

makro- (Valdman dkk., 2001; Al-Rub dkk., 2004) dan
mikroalga diketahui mengakumulasi logam dalam jumlah
tinggi dari lingkungannya (Stark dan Rayson, 2000;
Travieso dkk., 2002). Kapasitas ini telah dieksploitasi
untuk tujuan yang berbeda (Aksudan Ac¸ikel, 1999; Burdin
dan Bird, 1994; Greene dan Bedell, 1990; Hashim dkk.,
2000). Biomassa alga imobilisasi silika (Pilayella littoralis)
telah diusulkan untuk digunakan sebagai biosorben
untuk prakonsentrasi logam sebelum mengukur dalam
perangkat analitik (spektrometri emisi optik plasma yang
digabungkan secara induktif) (Carrilho dkk., 2003). Tetapi
tujuan utama dari penggunaan logam pengikat alga yang
melumpuhkan adalah detoksifikasi dan pemulihan logam
(Greene dan Bedell, 1990). Yang terakhir ini
dimungkinkan karena sebagian besar logam yang terikat
pada permukaan sel dan sistem imobilisasi dapat
diturunkan melalui pengolahan asam. Resin lainnya,
seperti
Amberlite®, telah digunakan untuk melumpuhkan mikro-
organisme set ke samping untuk logam pemindahan
(Baytak dan Tu¨ rker, 2005). Penyerapan logam pada
alga tampaknya tidak hanya merupakan proses adsorpsi
sederhana, tetapi juga pertukaran ion, di mana Ca2 +
sering diganti (Crist dkk., 1994). Pengikatan logam ke
permukaan alga terjadi pada alga hidup dan tidak
hidup (Greene dan Bedell, 1990), luas permukaan sel
menjadi parameter utama dalam penyerapan logam oleh
mikroalga (Khoshmanesh dkk., 1997). Sel mati bisa
sangat efisien terakumulasi logam (Melakukan nmez et
Al., 1999). Blanco et Al. (1999)biomassa yang digunakan
dari cyanobacterium P. laminosum yang diimobilisasi
dalam manik-manik polysulphone dan resin epoksi untuk
sekuestrasi Cu (II), Fe (II), Ni (II) dan Zn (II). Mereka
menemukanbahwa jumlah logam yang diserap meningkat
dengan biomassa dan jumlah logam yang tersedia. Siklus
biosorpsi-desorpsi (dimediasi asam) dengan sistem
imobilisasi ini mempertahankan efisiensi setelah setidaknya
10 siklus. Tembaga secara selektif diserap oleh alginat
(Alhakawati dan Banks, 2004; Jang dkk., 1995b, c;
Nestle dan Kimmich, 1996). Jang dkk.
(1995a)mempertimbangkan kemungkinan untuk
menambahkan zat penyerap tembaga ke gel alginat
3958 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964

dalam peningkatan adsorpsi tembaga, tetapi penambahan organisme yang terimunisasi untuk menghilangkan Cu dan Cd
sel dari cyanophyte Microcystis sp. menghasilkan hasil dari perairan laut. Setelah eksposisi 24 jam, semua Cu dan 20%
yang lebih baik. Akumulasi logam dengan melumpuhkan Cd dikeluarkan dari media oleh populasi amobil Ca-alginate.
sistem yang mengandung mikroalga tampaknya
menghadirkan dua fase (Malik, 2004). Garnham dkk.
(1992a)mengembangkan eksperimen yang melibatkan
Chlorella salina amobil dalam manik-manik Ca-alginate,
mengakumulasi radioisotop logam (60Co, 54Mn dan
65Zn). Para penulis menemukan biosorpsi cepat yang tidak
bergantung pada cahaya, suhu atau inhibitor metabolik
(karbonilsianida n-klorohidrazon: CCCP), diikuti oleh fase
akumulasi yang lebih lambat tergantung pada
metabolisme seluler. Hasil serupa ditemukan olehMoreno-
Garrido dkk. (1998, 2002): Bagian dari logam yang terkumpul
tidak dapat dicuci dengan larutan yang mengandung EDTA
penyalur konsentrasi tinggi. Seharusnya logam ini diserap ke
dalam sel dengan metode aktif atau pasif (Greene dan
Bedell, 1990) dan tidak teradsorpsi ke permukaan sel atau
matriks imobilisasi. Kolom tempat tidur yang dikemas
berisi sel yang tidak bisa bergerak tampaknya sangat
efisien dalam menghilangkan logam dari media akuatik
(lebih dari reaktor unggun terfluidisasi atau reaktor
pengangkat udara,Moreno-Garrido dkk., 2002). Aksu dkk.
(1998)mempelajari biosorpsi tembaga (II) dalam Ca-alginat
dan agarosa C. vulgaris yang diimobilisasi. Para penulis
tersebut tidak menemukan peningkatan yang signifikan
dalam adsorpsi logam karena adanya alga yang tidak dapat
bergerak. TapiMoreno-Garrido dkk. (2002)menemukan
perbedaan besar dalam sistem manik-manik Ca-alginat
yang melumpuhkan sel N. gaditana jika dibandingkan
dengan sistem tanpa sel yang tidak dapat bergerak:
Manik-manik yang mengandung sel mengakumulasi
hampir semua Cu dalam media (seperti yang dilakukan sel
bebas) dan 80% Zn, sedangkan manik-manik tanpa sel
terakumulasi di dekat sebesar 80% dari Cu tetapi tidak
mengakumulasi jumlah Zn yang dapat diukur. Hasil serupa
dapat ditemukan saat sel mati digunakan: tidak ada Zn
yang dibuang saat sel mati diimobilisasi dalam manik Ca-
alginat.
Mengisolasi strain mikroalga dari air yang tercemar
merupakan alat yang cocok untuk memilih sel yang tahan
logam dan berakumulasi tinggi. Khattar dkk.
(1999)mengisolasi strain Anacystis nidulans dari situs yang
tercemar. Strain ini mampu tumbuh dalam medium hingga
100 lM kromium, mampu mengakumulasi 43 nM Cr per mg
protein mikroalga (sebagai penduga biomassa) yang
diimobilisasi dalam agar (sel bebas mampu mengakumulasi
35 nM Cr) dalam kondisi eksperimental.Akhtar dkk.
(2004)melaporkan pemulihan nikel dari pengaruh industri
pelapisan listrik dengan menggunakan C. sorokiniana yang
diimobilisasi dalam spons loofa oleh nat-
adsorpsi urat. Para penulis ini mencapai biomassa C.
sorokiniana maksimum 261 ± 22 mg g-1 spons kering
setelah 24 hari inkubasi. Adsorpsi selalu lebih tinggi
dalam sistem amobil daripada yang diukur untuk sel
bebas (spons loofa tanpa sel amobil mengadsorpsi
sejumlah kecil logam ini). Setelah adsorpsi,
penambahan asam seperti HCl dan H2SO4
menghasilkan pelepasan lebih dari 99% logam yang
teradsorpsi.Moreno-Garrido dkk. (2005)bekas
Tetraselmis chuii, takson yang sangat tahan stres, sebagai
 dari T. chuii. Rangasayatorn dkk. (2004)menemukan immobilized color-less P. zopfi (Suzuki dkk., 1998;
kapasitas akumulasi Cd maksimum 70,9 mg g-1 Yamaguchi dkk., 1999).
biomassa untuk sel amobil dalam matriks Ca-alginat.
Sel berhasil digunakan selama lima proses berturut-
turut adsorpsi-desorpsi. Selama siklus ini, kapasitas
adsorpsi sistem berkurang dari sekitar 94% menjadi
hampir 66% dari total kadmium. Sel hidup mikroalga
digunakan untuk mengakumulasi jumlah logam yang
lebih tinggi daripada biomassa mikroalga mati
(Moreno-Garrido dkk., 1998). Pertama, kation divalen
menjadi kurang larut pada nilai pH tinggi. Sel aktif
(fotosintetik) menyediakan lingkungan ber-pH tinggi
dalam lapisan permukaan seluler segera, sehingga
meningkatkan adsorpsi ke permukaan seluler. Kedua,
ada proses absorpsi (bergantung pada metabolisme sel)
logam oleh mikroalga (Garnham dkk., 1992a, b; Moreno-
Garrido dkk., 2002), lebih lambat dari proses adsorpsi
yang meningkatkan kapasitas alga hidup untuk
mengakumulasi polutan tersebut. Logam mulia juga
dapat diakumulasikan oleh alga dan dielusi secara
selektif darinya (Guo dkk., 2000). Gee dan Dudeney
(1987) menjelaskan adsorpsi emas dari campuran logam
terlarut oleh C. vulgaris dan S. platensis yang
diimobilisasi dalam Ca-alginat. Dalam hal ini, desorpsi
selektif Fe dan Au dilakukan dengan penyesuaian pH
asam dan penambahan tiourea asam, masing-
masing.Guo dkk. (2000)juga menggambarkan serapan
neodymium, lentha-
noid, dengan hidup dan fosil (570 juta tahun) ganggang.

4.6. Penghapusan polutan organik

Aksu (2005) melakukan tinjauan tentang biosorpsi

polutan organik dan hanya menemukan sedikit data
tentang mikroalga. Di tahun yang sama,Aksu dan
Tezer (2005) mempelajari bio-sorpsi dari tiga
pewarna reaktif ke biomassa C. vulgaris yang mati,
menemukan bahwa penyerapan pewarna sangat
tergantung pada pH: nilai pH optimum untuk
adsorpsi adalah 2,0. Temperatur juga mempengaruhi
proses secara proporsional terbalik.Oh dkk. (2000)sel
ragi yang tidak dapat bergerak dalam busa poliure-
thane untuk menyerap dan mendegradasi minyak di
permukaan air. Beberapa karya yang menjelaskan
kapasitas alga untuk mendegradasi minyak telah
diterbitkan. Makalah terbaru dariChaillan dkk.
(2006)menggambarkan penampilan tikar
cyanobacterial (Phormidium animale) di situs yang
tercemar minyak bumi. Mereka menyimpulkan bahwa
tidak ada bukti biodegradasi minyak mentah oleh sianofit,
tetapi dari organisme lain yang ada dalam lapisan yang
dibentuk oleh Phormidium yang terlibat dalam proses
degradasi, bakteri pembentuk biofil yang menutupi
makroalga juga dapat mendegradasi minyak (Radwan
dkk., 2002).
C. sorokiniana dalam agregasi dengan bakteri
berhasil menghilangkan salisilat dari fotobioreaktor di
percobaan yang dijelaskan oleh Mun˜ onsdkk. (2006).
Peran dari setiap organisme dalam biosistem tidak
cukup jelas, tetapi degradasi tampaknya dilakukan oleh
bagian bakteri dari sistem simbiosis. Biasanya, polutan
organik lebih mudah didegradasi oleh bakteri daripada
alga (Prieto dkk., 2002). Hidrokarbon, bagaimanapun,
telah dilaporkan terdegradasi oleh Ca-alginate
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964 3959
bebas) saat terkena Ni, Zn atau Cd. Dalam pekerjaan ini, tidak
Dalam sistem bebas dan tidak bergerak, 100% merupakan ada pengukur logam-
campuran tetradecane, pentadecane dan hexadecane
(masing-masing 0,1% (v / v)) terdegradasi. Perhatian khusus
dalam desain eksperimental dilakukan untuk memastikan
bahwa penguapan bukanlah penyebab penghapusan
hidrokarbon dari media. Setiap 14 hari, sel dicuci dan
digunakan kembali, menghasilkan respons yang identik dari
sel yang tidak bisa bergerak. Kasus lain penggunaan polutan
organik oleh trofik tampaknya adalah Chryso- phyte
Ocrhomonas danica (Semple dan Cain, 1996; Semple,
1998), yang mampu tumbuh secara heterotrof pada
campuran fenol dan fenol. Tidak ada laporan tentang
imobilisasi spesies ini yang ditemukan.

4.7. Mengukur toksisitas

Karakterisasi kimiawi curah dari air dan sedimen tidak

memberikan informasi tentang toksisitas (Munawar dan
Munawar, 1987), kecuali dalam kasus pencemaran yang
ekstrim. Jadi, bioassay telah dirancang untuk mendeteksi
racun dari pengaruh, sedimen atau zat pada organisme.
Mikroalga telah ditemukan sebagai organisme yang
sensitif terhadap perbedaan polutan (Leo´ndkk., 2001;
Radix dkk., 2000) dalam bioassay toksisitas (Bitton dan
Dutka, 1986), mungkin karena rasio permukaan /
volumenya yang tinggi. Peran kunci mereka dalam jaring
trofik air tawar dan air laut menyiratkan perlunya
mengembangkan uji toksisitas yang sesuai untuk
menghitung dengan alat yang efisien untuk digunakan
oleh peneliti dan pihak berwenang bila diperlukan.
Eksperimen in situ memilikitelah dirancang untuk
meningkatkan relevansi lingkungan dari uji toksisitas
(Moreira dos Santos dkk., 2002, 2004; Moreira dkk., 2006;
Munawar dan Munawar, 1987), karena manipulasi sampel
saat dibawa ke laboratorium dihindari dan kondisi cahaya
alami, suhu atau fluktuasi pH dipertahankan. Bozeman
dkk. (1989), dalam sebuah karya perintis, membandingkan
toksisitas tujuh polutan yang berbeda asal (Cd, Cu,
Glifosat, Hydrothol, Paraquat, pentachlorophenol dan
natrium dodesil sulfat) dengan sel bebas dan tidak
bergerak dari mikroalga hijau Selenastrum capricornutum
(sekarang Pseud- okirchneriella) subcapirchneriella ,
menyarankan kemungkinan penggunaan sistem amobil
dalam percobaan toksisitas in situ. Mengikuti penulis
tersebut, perbedaan toksisitas untuk ganggang bebas dan
tidak bergerak bervariasi dari tidak ada perbedaan yang
signifikan untuk tembaga dan pentaklorofenol ke sekitar
empat kali lebih sensitif untuk sel bebas dalam kasus
Glifosat atau Paraquat.Admiraal dkk. (1999)melakukan
percobaan pada pasir dan kumpulan mikrobentik yang
menempel pada kaca alam dari alga dan bakteri dalam
aliran logam yang tercemar di sungai Dommel (Belgia).
Para penulis membandingkan sensitivitas kumpulan
tersebut terhadap seng, menemukan sensitivitas yang
berbeda dalam fungsi asal perakitan (asal paling tercemar,
sensitivitas lebih rendah). Perlindungan terhadap
toksisitas dalam sel yang tidak bisa bergerak dilaporkan
dalam berbagai penelitian (Cassidy dkk., 1996). Awasthi
dan Rai (2005) menunjukkan penghambatan penyerapan
nitrat yang lebih rendah
S. quadricauda tidak bisa bergerak (sehubungan dengan sel
 mikroalga telah dirancang untuk mendeteksi polutan di
materi dilakukan di media, dan penjelasan termudah lingkungan. Lukavsky dan Marsˇa´lek (1997) tidak bisa
adalah pemindahan bagian logam dengan matriks bergerakS. capricornutum dalam agar 2% untuk digunakan
penjebakan, sehingga kurang tersedia untuk sel. Tetapi sebagai biosensor untuk toksisitas Cr6 +. Sensitivitas
penghilangan racun dengan melumpuhkan matriks tidak biosensor ini pun sama
akan menjelaskan semua kasus toksisitas yang lebih
rendah dari sel yang tidak bisa bergerak. Surfaktan tidak
teradsorpsi secara selektif oleh Ca-alginat.Moreno-
Garrido dkk. (2007)menemukan toksisitas yang lebih
rendah untuk sel-sel yang diimunisasi dari P. tricornutum
yang terpapar sedimen yang dibubuhi surfaktan lineal
alkylbenzene sulphonate (LAS) dibandingkan dengan sel-
sel bebas. Perbedaan toksikan yang lebih rendah dalam
manik-manik (Jang, 1993) juga harus menjelaskan,
setidaknya sebagian, toksisitas yang lebih rendah pada
sel yang terperangkap. Spesies ini (P. tricornutum)
tampaknya merupakan spesies mikroalga yang baik
untuk digunakan dalam uji toksisitas yang melibatkan
alga yang tidak dapat bergerak. Ini adalah salah satu
spesies yang disarankan olehISO (1995) untuk menguji
kualitas air dengan menggunakan uji penghambatan
pertumbuhan: ini kosmopolitan, dengan kebutuhan
nutrisi yang rendah, pertumbuhan yang cepat dan
kepekaan yang baik terhadap racun. Selain itu, telah
digunakan oleh beberapa penulis dalam uji toksisitas
gratis dan tidak bergerak (Cid dkk., 1995; Kos- akowska
dkk., 2004; Mayasich dkk., 1986; Moreira dkk., 2006;
Moreira dos Santos dkk., 2002; Morelli dan Pratesi, 1997;
Morelli dan Scarano, 2001; Moreno-Garrido dkk., 2007;
Overnell, 1975; Pavlic 'dkk., 2005; Wiegman dkk., 2002).
Imobilisasi dengan jebakan gel juga menjadi topik yang
sangat menarik untuk desain percobaan mikroalga in situ
karena memberikan perlindungan terhadap mikroalga di
depan pemakan rumput (Cassidy dkk., 1996; Faafeng
dkk., 1994). Penggembala mikroalga tidak dapat dengan
mudah dihilangkan dari perairan atau sedimen karena
ukurannya yang kecil yang dapat dicapai organisme
tersebut: nematoda dan, secara keseluruhan, amuba
atau ciliata dapat mendahului sel mikroalga yang sedikit
lebih kecil dari mereka.Twist dkk.
(1997)mengembangkan metode biomontoran in situ
menggunakan Ca-alginate immobilized Scenedesmus
subspic- kepada kami untuk penilaian eutrofikasi di
perairan permukaan. Keuntungan yang jelas dari teknik ini
adalah bahwa fl ora lokal dapat diisolasi dan digabungkan ke
biomonitor. Tentu saja, ketika Ca-alginate digunakan di alam
(atau mikro dan lingkungan simulasi alam), batasan dari
teknik ini adalah degradasi manik-manik. Di aliran air tawar,
batasan ini sepertinya hanya beberapa minggu. Di
lingkungan laut (Faafeng dkk., 1994), durasi manik-manik
cukup pendek (beberapa hari) (Moreira dos Santos dkk.,
2002). Perbaikan dalam fabrikasi manik mencoba untuk
menghindari masalah tersebut (Moreira dkk., 2006). Alga
perifitik yang secara alami terbentuk pada slide kaca
telah digunakan dalam uji toksisitas in situ yang
dilakukan untuk menguji dampak logam berat yang
disuspensi kembali oleh pekerjaan pengerukan pada
mikroalga (Nayar dkk., 2003). Konsentrasi Zn yang tinggi
(hingga
17.240 mg L-1), Cu (sampai 11 mg L-1) dan Cd (sampai
1,8 mg L-1) ditemukan, sebagai hasil dari pengerukan,
dalam fase air, mengurangi biomassa perifiton antara
95% dan 100% untuk perairan yang tercemar.
Biosensor dari berbagai jenis yang melibatkan sel
3960 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
ditemukan untuk bioassay lainnya, termasuk uji
penghambatan pertumbuhan. Frense dkk.
(1998)menggunakan S. subspicatus yang diimobilisasi pada
kertas filter dan ditutup dengan alginat dalam biosensor
optik berbasis fluoresensi klorofil sebagai penanda polutan
dalam air dan ekstrak tanah, sebagai protokol pemilihan
awal sebelum mengirimkan sampel ke analisis standar
berbiaya tinggi . C. vulgaris juga telah digunakan dalam
biosensor optik untuk menentukan toksisitas herbisida
(Naessens dkk., 2000) seperti atrazine, simazine dan
diuron, yang umum digunakan dalam kultur sereal. Dalam
kasus ini, imobilisasi alga dilakukan pada GF / C
Whatmanfilter. Disk kertas saring yang melumpuhkan alga
juga telah digunakan olehSanders dkk. (2001)di biosensor
yang dirancang untuk mendeteksi agen perang kimia.
Bukan optik, tetapi sensor berbasis alga amperometika
juga telah dirancang (Sialan dan dkk., 2005),
memanfaatkan variasi oksigen yang diproduksi secara
fotosintesis. Batasan pengujian toksisitas menggunakan
mikroalga bebas atau melumpuhkan dibatasi pada
toksikan yang memengaruhi struktur yang ada dalam sel
alga. Artinya, polutan yang memengaruhi perkembangan
tulang atau sistem saraf tidak akan mudah dideteksi
dengan bioassay berbasis mikroalga. Sebaliknya, racun
yang mempengaruhi fotosintesis (seperti ion tembaga
atau herbisida) akan lebih tepat terdeteksi dengan
bioassay sel vegetal (seperti mikroalga). Studi toksisitas
akuatik yang memadai harus mencakup organisme dari
tingkat yang berbeda, tetapi mikroba tidak boleh
dilupakan karena posisi basalnya dalam rantai trofik.
4.8. Sistem co-immobilized
Upaya terkini telah dibuat di bidang ko-imobi- lisasi
(Nagase dkk., 2006). De-Bashan dkk. (2002a, b,
2004)Chlorella yang tidak dapat bergerak bersama dengan
bakteri pemacu pertumbuhan mikroalga (Azospirillum
brasiliense) dalam manik-manik Ca-alginat. Bakteri ini
tidak bisa dihilangkannutrisi dari air limbah, tetapi
meningkatkan pertumbuhan alga yang terimunisasi. Sistem
biologis co-immobilized menghilangkan persentase nutrisi
yang lebih tinggi dari air limbah (100% amonium, 15% nitrat,
dan 36% fosfor) jika dibandingkan dengan sel alga yang tidak
dapat bergerak tanpa bakteri (75% amonium, 6% nitrat, dan
19% fosfor).Mun˜ ons dan Guieysse (2006) ditinjau interaksi
antara alga dan bakteri dalam proses yang dirancang
untuk pengobatan kontaminan berbahaya. Produksi
oksigen oleh alga meningkatkan degradasi zat yang harus
didegradasi secara aerob. Baik bakteri maupun alga
bisamenghasilkan zat pelindung terhadap organisme co-
immobi- lized lainnya. Peningkatan nilai pH karena
fotosintesis dan peningkatan oksigen dalam media juga dapat
memperlambat pertumbuhan bakteri saat diimobilisasi
bersama dengan alga. Di sisi lain, konsumsi CO2 dan produksi
materi ekstraseluler (seperti eksopolisakarida) oleh alga
dapat meningkatkan laju pertumbuhan bakteri, demikian
pula produksi CO2 dan zat pemacu pertumbuhan oleh bakteri
dapat meningkatkan pertumbuhan mikroalga. Penulis yang
sama mengakui bahwa teknik imobilisasi yang paling banyak
digunakan melibatkan
matriks lemah dan mahal (bila digunakan dalam skala
besar), dan mengusulkan pendekatan lain seperti
fotobioreaktor dengan mikrokosmos bakteri-alga
terpasang di dinding reaktor.
5. Perspektif masa depan
Teknik imobilisasi dapat digunakan dalam biologi
molekuler, karena stabilitas plasmid dalam sel amobil
telah dilaporkan (Cassidy dkk., 1996). Risiko mutasi yang
tidak diinginkan berkurang ketika sel-sel diimobilisasi
(Codd, 1987). Manipulasi genetik cyanobacteria yang tidak
dapat bergerak (gen negatif hidrogenase) juga dapat
meningkatkan pembentukan hidrogen proses (Das dan
Vezirog˘lu, 2001). Mikroalga yang terimunisasi baru-baru ini
digunakan sebagai alat untuk mengontrol kualitas air dalam
budidaya ikan. Chen (2001) mempelajari bahwa
konsentrasi amonium menurun pada kultur ikan nila yang
mengandung sel-sel S. quadricauda (kultur air tawar) yang
tidak dapat bergerak dan kultur kerang (Chen, 2003)
mengandung I. gal- bana (kultur air laut). Dalam kasus
terakhir, pembebasan sel yang lambat dari manik-manik
yang melumpuhkan memberikan masukan makanan
secara terus menerus untuk menyaring kerang. Hal ini
dapat mengurangi biaya budidaya kerang jika
dibandingkan dengan metode tradisional.
Penggunaan mikroalga dalam desain biosensor adalah
topik yang sangat baru dan menarik dalam bioteknologi.
Chou- teau dkk. (2004)merancang sebuah biosensor
konduktometri dengan
C. vulgaris sel (penulis menunjukkan bahwa penggunaan
sel utuh lebih murah daripada penggunaan enzim yang
diisolasi) untuk mengukur penghambatan aktivitas alkali
fosfatase sebagai bio-indikator stres toksik. Senyawa
volatil (seperti formaldehida) juga telah dideteksi dengan
menggunakan chip sensor alga regangan ganda yang
dirancang olehPodola dkk. (2004). Organisme yang
dimodifikasi secara genetik juga dapat digunakan dalam
sensor, seperti strain Synechococcus yang digunakan
olehSchreiter dkk. (2001): organisme ini memiliki gen yang
menyandikan luciferase dari Vibrio harveyi di bawah
kendali promotor fosfatase alkali yang dapat diinduksi,
yang dapat diinduksi oleh pembatasan fosfor. ''
CyanoSensor '' yang dihasilkan mampu mendeteksi 0,3–
8 lM PO3— dan menanggapi sumber fosfor organik lainnya.
Sensor ini4juga dapat disimpan selama tiga minggu pada
suhu 4 ° C.
Kombinasi energi matahari dan imobilisasi alga
teknologi dapat berhasil digunakan dalam proses industri
(Mallick, 2002). Dengan cara yang sama, studi tentang
produksi energi melalui H2 yang dihasilkan secara
fotosintesis adalah bidang penelitian baru-baru ini yang
menjanjikan yang telah direduksi hingga saat ini menjadi
ganggang air tawar hijau. Kelompok taksonomi lain harus
diuji untuk mengoptimalkan produksi molekul hidrogen.
Ucapan Terima Kasih
Pekerjaan ini telah diberikan oleh Rencana Riset Sains
dan Teknologi Nasional Spanyol, di bawah proyek ''
Penggunaan sistem tak bergerak untuk mikroalga laut
dalam penggabungan dan evaluasi zat beracun dalam
ekosistem laut '' (REN2001-2095 / MAR) dan '' A baru
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
secara ekologis alat yang relevan dalam toksikologi
lingkungan: microphytobenthos untuk penilaian
kualitas lingkungan dari muara dan sedimen pantai
(MECASEC) '' (CTM2006-01473 / MAR).
Referensi
Admiraal, W., Blanck, H., Buckert-de Jong, M., Guasch, H., Ivorra, N.,
Lehmann,V., Nystrom, BAH, Paulsson, M., Sabater, S., 1999. Toksisitas
jangka pendek seng terhadap ganggang mikrobentik dan bakteri dalam
aliran logam yang tercemar. Res air. 33, 1989–1996.
Ahmadi, M., Vahabzadeh, F., Bonakdarpour, B., Mehranian, M., 2006.
Pemodelan empiris pengolahan air limbah pabrik minyak zaitun
menggunakan toilet crysosporium Phanaerochaete yang tidak bisa
bergerak. Proses Biokimia. 41, 1148– 1154.
Akhtar, N., Iqbal, J., Iqbal, M., 2004. Penghapusan dan pemulihan nikel
(II) dari larutan air oleh loofa spons imobilisasi biomassa Chlorella
sorokiniana: studi karakterisasi. J. Hazard. Mater. B 108, 85–94.
Aksu, Z., 2005. Penerapan biosorpsi untuk menghilangkan polutan
organik: tinjauan. Proses Biokimia. 40, 997–1026.
Aksu, Z., Ac¸ikel, U¨., 1999. Proses bioseparation satu tahap untuk
penghilangan tembaga (II) dan krom (VI) secara simultan dengan
menggunakan C. vulgaris. Proses Biokimia. 34, 589–599.
Aksu, Z., Egrtli, G., Kutsal, T., 1998. Sebuah studi perbandingan
biosorpsi tembaga (II) pada Ca-alginat, agarosa dan C. vulgaris
amobil dalam kolom tempat tidur yang dikemas. Proses Biokimia.
33, 393–400.
Aksu, Z., Tezer, S., 2005. Biosorpsi pewarna reaktif pada alga hijau
Chlorella vulgaris. Proses Biokimia. 40, 1347–1361.
Alhakawati, MS, Banks, CJ, 2004. Penghapusan tembaga dari larutan air
oleh Ascophyllum nodosum diimobilisasi dalam busa poliuretan
hidrofilik. J. Lingkungan. Mengelola. 72, 195–204.
Al-Rub, FAA, El-Naas, MH, Benyahia, F., Ashour, I., 2004. Biosorpsi nikel
pada manik-manik alginat kosong, sel alga bebas dan tidak bergerak.
Proses Biokimia. 39, 1767–1773.
Arau´jo, A A, Andrade Santana, MH, 1996. Aerobik tidak bisa bergerak
sel dipartikel gel alginat dengan kerapatan variabel. Appl. Biochem.
Bioteknologi. (57/58), 543–550.
Archambault, J., Volesky, B., Kurz, WGW, 1990. Pengembangan
bioreaktor untuk kultur sel tumbuhan imobilisasi permukaan.
Biotechnol. Bioeng. 35, 702–711.
Awasthi, M., Rai, LC, 2005. Toksisitas nikel, seng, dan kadmium terhadap
pengambilan nitrat dalam sel bebas dan tidak bergerak dari
Scenedesmus quadricauda. Ecotox. Mengepung. Aman 61, 268–272.
Baytak,S., Tu¨rker, AR, 2005. Penggunaan Agrobacterium tumefaciens yang
diimobilisasi pada Amberlite XAD-4 sebagai biosorben baru untuk kolom
prekonsentrasi besi (III), kobalt (II), mangan (II) dan kromium ( AKU AKU
AKU). Talanta 65, 938–945.
Bitton, G., Dutka, BJ (Eds.), 1986. Uji Toksisitas Menggunakan
Mikroorganisme.
CRC Press, Boca Raton, FL.
Blanco, A., Sanz, B., Llama, MJ, Serra, JL, 1999. Biosorpsi logam berat
terhadap biomassa Phormidium laminosum amobil. J. Biotechnol.
69, 227–240.
Borowitzka, MA, Borowitzka, JL, 1988. Bioteknologi mikro-alga.
Cambridge University Press, Cambridge.
Boyd, A., Chakrabarty, AM, 1995. Biofilm Pseudomonas aeruginosa:
peran eksopolisakarida alginat. J. Ind. Microbiol. 15, 162– 168.
Bozeman, J., Koopman, B., Bitton, G., 1989. Pengujian toksisitas
menggunakan mikroalga amobil. Aquat. Toksikol. 14, 345–352.
Brandini, FP, da Silva, ET, Pellizari, FM, Fonseca, ALO, Fernan- des, LF,
2001. Produksi dan akumulasi biomassa diatom perifitik yang
tumbuh pada slide kaca selama siklus 1 tahun di muara subtropis
lingkungan Hidup (Teluk dari Paranagua´, selatan Brazil). Merusak.
Biol. 138, 163–171.
Burdin, KS, Burung, KT, 1994. Berat akumulasi logam oleh karagenan
dan agar-agar penghasil alga. Bot. 37 Maret 467–470.
3961
Carrilho, ENVM, No´brega, JA, Gilbert, TR, 2003. Itu menggunakan
dari silika-alga coklat imobilisasi (Pilayella littoralis) untuk
prakonsentrasi logam dan penentuan dengan spektrometri emisi
optik plasma yang digabungkan secara induktif. Talanta 60, 1131–
1140.
Cassidy, MB, Lee, H., Trevors, JT, 1996. Aplikasi lingkungan dari sel
amobil: tinjauan. J. Ind. Microbiol. 16, 79–101.
Cassidy, MB, Lee, H., Trevors, JT, 1997. Kelangsungan hidup dan aktivitas
lac-lux menandai sel Pseudomonas aeruginosa UG2Lr yang
dienkapsulasi dalam j-karagenan selama empat tahun pada 4 ° CJ
Microbiol. Metode 30, 167– 170.
Chaillan, F., Gugger, M., Saliot, SEBUAH., Coute´, SEBUAH., Oudot,
J., 2006. Wewenang dari cyanobacteria dalam biodegradasi minyak
mentah oleh tikar cyanobacterial tropis. Kemosfer 62, 1574–1582.
Chamy,R., Nun˜ez, MJ, Lema, JM, 1990. Optimalisasi pengobatan
pengerasan biopartikel S. cerevisiae. Mikroba Enzim. Tech. 12, 749–754.
Chan, LW, Lee, HY, Heng, PWS, 2002. Produksi mikrosfer alginat
dengan gelasi internal menggunakan metode emulsi fi kasi. Int. J.
Pharm. 242, 259–262.
Chen, Y.-C., 2001. Mikroalga terimobilisasi Scenedesmus quadricauda
(Chlorophyta, Chlorococcales) untuk penyimpanan jangka panjang
dan aplikasi untuk pengendalian kualitas air dalam budidaya ikan.
Akuakultur 195, 71–80.
Chen, Y.-C., 2003. Imobilisasi Isochrysis galbana (Haptophyta) untuk
penyimpanan jangka panjang dan aplikasi untuk kontrol kualitas
pakan dan air dalam budidaya kerang (Meretrix lusoria). J. Appl.
Phycol. 15, 439–444.
Chouteau, C., Dzyadevych, S., Chovelon, JM, Durrieu, C., 2004.
Pengembangan biosensor konduktometri baru berdasarkan mikroalga
Chlorella vulgaris seluruh sel yang telah terimobilisasi. Biosen.
Bioelektron. 19, 1089–1096.
Cid, A., Herrero, C., Torres, E., Abalde, J., 1995. Toksisitas tembaga pada
mikroalga laut Phaeodactylum tricornutum: efek pada fotosintesis dan
parameter terkait. Aquat. Toksikol. 31, 165–174.
Codd, GA, 1987. Mikro-alga dan cyanobacteria yang tidak dapat
bergerak. Br.
Phycol. Soc. Newslett. 24, 1–5.
Crist, RH, Martin, JR, Carr, D., Watson, JR, Clarke, HJ, Crist, DR, 1994.
Interaksi logam dan proton dengan alga. 4. Model pertukaran ion
vs. adsorpsi dan penilaian ulang plot scatchard; tingkat pertukaran
ion dan kesetimbangan dibandingkan dengan kalsium alginat.
Mengepung. Sci. Technol. 28, 1859–1866.
Danilov, RA, Ekelund, NGA, 2001. Perbandingan kegunaan tiga jenis
substrat buatan (kaca, kayu dan plastik) ketika mempelajari pola
penyelesaian perifiton di danau dengan status trofik yang berbeda. J.
Microbiol. Metode 45, 167–170.
Dante, RC, 2005. Hipotesis untuk aplikasi sel bahan bakar PEM langsung
dari hidrogen yang dihasilkan fotobioproduksi oleh Chlamydomonas
reindhartii. Int. J. Energi Hidrogen 30, 421–424.
Das,D., Vezirog˘lu, TN, 2001. Produksi hidrogen dengan proses biologis:
survei literatur. Int. J. Energi Hidrogen 26, 13-28.
De-Bashan, LE, Bashan, Y., Moreno, M., Lebsky, VK, Bustillos, JJ,
2002a. Peningkatan pigmen dan kandungan lipid, variasi lipid, dan
ukuran populasi sel mikroalga Chlorella sp. ketika diimobilisasi
bersama dalam manik-manik alginat dengan bakteri pemicu
pertumbuhan mikroalga Azospirillum brasilense. Bisa. J. Microbiol.
48, 514–521.
De-Bashan,LE, Moreno, M., Herna´ndez, JP, Bashan, Y., 2002b. Penghapusan
ion amonium dan fosfor dari limbah sintetis- air oleh mikroalga Chlorella
vulgaris coimmobilized dalam manik-manik alginat dengan bakteri
pemacu pertumbuhan mikroalga Azospirillum brasiliense. Res air. 36,
2941–2948.
De-Bashan,LE, Herna´ndez, JP, Morey, T., Bashan, Y., 2004. Bakteri pemacu
pertumbuhan mikroalga sebagai '' pembantu '' untuk mikroalga:
pendekatan baru untuk menghilangkan amonium dan fosfor dari air
limbah kota. Res air. 38, 466–474.
Melakukan nmez,G., Aksu, Z., 2002. Penghapusan kromium (VI) dari air
limbah garam oleh spesies Dunaliella. Proses Biokimia. 38, 751–762.
Melakukan nmez, GC, Aksu, Z., O¨ ztu¨ rk, A., Kutsal, T., 1999. Sebuah
studi komparatif tentang karakteristik biosorpsi logam berat dari
beberapa alga.
Proses Biokimia. 34, 885–892.
3962 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
Ertesva˚g, H., Valla, S., 1998. Biosintesis dan aplikasi alginat.
Polym. Degrad. Stabil. 59, 85–91.
Faafeng, BA, mobil van Donk, E., Ka¨llqvist, T., 1994. Di situ
pengukuran daripotensi pertumbuhan alga di ekosistem perairan oleh
alga yang tidak bisa bergerak. J. Appl. Phycol. 6, 301–308.
Falkowsky, PG, 1980. Produktivitas primer di laut. Masuk: Falkowski,
PG (Ed.), Penelitian Ilmu Lingkungan, vol. 19. Pleno Press, New York /
London.
Frense, D., Mu¨ ller, SEBUAH., Beckmann, D., 1998. Deteksi dari
ling kung an polutan menggunakan biosensor optik dengan sel alga
yang tidak dapat bergerak. Sens. Accumul. B 51, 256–260.
Garbayo, I., Vigara, AJ, Conchon, V., Martins, R., Dos Santos, VAP,
Vilchez, C., 2000. Perubahan konsumsi nitrat yang disebabkan oleh
jebakan alginat sel Chlamydomonas reindhartii. Proses Biokimia.
36, 459–466.
Garbisu, C., Gil, JM, Bazin, MJ, Hall, DO, Serra, JL, 1991. Penghapusan
nitrat dari air dengan Phormidium laminosum yang diimobilisasi
busa dalam bioreaktor batch dan aliran kontinyu. J. Appl. Phycol.
3, 221–234.
Garnham, GW, Codd, GA, Gadd, GM, 1992a. Akumulasi kobalt, seng dan
mangan oleh mikroalga hijau muara Chlorella salina diimobilisasi
dalam mikrobead alginat. Mengepung. Sci. Technol. 26, 1764–1770.
Garnham, GW, Codd, GA, Gadd, GM, 1992b. Kinetika pengambilan dan
lokasi intraseluler kobalt, mangan dan seng di ganggang hijau muara
Chlorella salina. Appl. Mikrobiol. Bioteknologi. 37, 270–276.
Wah, AR, Dudeney, AWL, 1987. Adsorpsi dan kristalisasi emas pada
permukaan biologis. Dalam: Simposium Internasional tentang
Biohidrometalurgi. Warwick, Inggris.
Ghosh, M., Gaur, JP, 1998. Kecepatan saat ini dan pembentukan
komunitas perifiton alga sungai. Aquat. Bot. 60, 1–10.
Greene, B., Bedell, GW, 1990. Gel alga atau alga amobil untuk pemulihan
logam. Dalam: Akatsuka, I. (Ed.), Pengantar Phycology Terapan. SPB
Academic Publishing BV, The Hague, The Netherlands, hlm. 137– 149.
Gualtieri, P., Barsanti, L., Passarelli, V., 1988. Kitosan sebagai okulan
untuk pemekatan kultur Euglena gracilis. Ann. Inst. Pasteur Microbiol.
139, 717–726.
Guo, P., Wang, J., Li, X., Zhu, J., Reinert, T., Heitmann, J., Spemann, D.,
Vogt, J., Flagmeyer, RH, Butz, T., 2000 Studi bioakumulasi logam
dengan analisis microprobe nuklir fosil alga dan sel alga hidup.
Nucl. Instrum. Metode B 161–163, 801–807.
Hashim, MA, Tan, HN, Chu, KH, 2000. Biomassa alga laut amobil untuk
beberapa siklus adsorpsi dan desorpsi tembaga. Sep. Purif. Technol.
19, 39–42.
Hatanaka, Y., Kudo, T., Miyataka, M., Kobayashi, O., Higashihara, M.,
Hiyama, K., 1999. Reduksi asimetris hidroksiaseton menjadi
propanediol dalam mikroalga Dunaliella parva halotoleran
diamobilisasi.
J. Biosci. Bioeng. 88, 281–286.
Hertzberg, S., Jensen, A., 1989. Studi mikroalga laut amobil alginat. Bot.
32 Maret 267–273.
Iqbal, M., Edyvean, RGJ, 2004. Biosorpsi ion timbal, tembaga dan seng
pada biomassa terimobilisasi spons loofa dari Phanaerochaete
chrysosporium. Buruh tambang. Eng. 17, 217–223.
Iqbal, M., Edyvean, RGJ, 2005. Loofa sponge immobilized fungal
biosorbent: sistem yang kuat untuk kadmium dan penghilangan
logam terlarut lainnya dari larutan air. Kemosfer 61, 510–518.
ISO, 1995. ISO 10253: 1995 (E). Kualitas air - Uji penghambatan
pertumbuhan alga laut dengan Skeletonema costatum dan
Phaeodactylum tricor- nutum. hlm. 1–8.
Jang, LK, 1993. Perbedaan Cu2 + dalam manik-manik gel kalsium
alginat.
Bioteknologi. Bioeng. 43, 183–185.
Jang, LK, Nguyen, DV, Kolostyak, K., Geesey, GG, 1995a. Penambahan
zat penyerap tembaga ke gel alginat untuk meningkatkan
perolehan tembaga dari media berair. Air. Res. 29, 2525–2529.
Jang, LK, Nguyen, D., Geesey, GG, 1995b. Pengaruh pH terhadap
absorpsi Cu (II) oleh gel alginat. Air. Res. 29 (1), 315–321.
Jang, LK, Nguyen, D., Geesey, GG, 1995c. Selektivitas gel alginat untuk
air Cu vs. Co. Res. 29 (1), 307–313.
Jen, AC, Wake, MC, Mikos, AG, 1996. Review: hidrogel untuk imobilisasi
sel. Biotechnol. Bioeng. 50, 357–364.
Jeon, C., Park, JY, Yoo, YJ, 2002. Imobilisasi baru asam alginat untuk
penghilangan logam berat. Biochem. Eng. J. 11, 159–166.
Joo, DS, Cho, MG, Lee, JS, Park, JH, Kwak, JK, Han, YH,
Bucholz, R., 2001. Strategi baru untuk budidaya mikroalga
menggunakan mikroenkapsulasi. J. Microencapsul. 18, 567–576.
Jime´nez-Pe´rez,MV, Sa´nchez-Castillo, P., Romera, O., Ferna´ndez-
Moreno, D., Pe´rez-Mart´ınez, C., 2004. Pertumbuhan dan penghilangan
nutrisi dalam ganggang hijau planktonik bebas dan tidak bergerak yang
diisolasi dari kotoran babi. Mikroba Enzim. Tech. 34, 392–398.
Kadam, KL, 2002. Implikasi lingkungan dari pembangkit listrik melalui ko fi
ring batubara-mikroalga. Energi 27, 905–922.
Kapdan, IK, Kargi, F., 2006. Produksi bio-hidrogen dari bahan limbah.
Mikroba Enzim. Technol. 38, 569–582.
Kawabata, N., Nishimura, S., Yoshimura, T., 1990. Metode baru
imobilisasi sel mikroba dengan menangkap pada permukaan resin
tipe Pyridinium yang tidak larut. Biotechnol. Bioeng. 35, 1000–1005.
Kaya, VM, Picard, G., 1996. Stabilitas gel kitosan sebagai matriks
penjeratan sel Scenedesmus bicellularis yang layak diimobilisasi pada
layar untuk pengolahan air limbah tersier. Bioresour. Technol. 56,
147–155.
Khattar, JIS, Sarma, TA, Singh, DP, 1999. Penghapusan ion kromium oleh
agar sel amobil dari cyanobacterium Anacystis nidulans dalam
bioreaktor aliran kontinyu. Mikroba Enzim. Technol. 25, 564–568.
Khoshmanesh, A., Lawson, F., Prince, IG, 1997. Luas permukaan sel
sebagai parameter utama dalam serapan kadmium oleh mikroalga
hijau uniseluler. Chem. Eng. J. 65, 13–19.
Kidambi, SP, Sundin, GW, Palmer, DA, Chakrabarty, AM, Bende, CL,
1995. Tembaga sebagai sinyal sintesis alginat pada Pseudomonas
syringae pv. syringae. Appl. Mengepung. Microb. (Juni), 2172–
2179.
Kosakowska,A., Lewandowska, J., Ston ', J., Burkiewicz, K., 2004. Komposisi
pigmen kualitatif dan kuantitatif di Phaeodacty- lum tricornutum
(Bacillariophyceae) ditekankan oleh besi. BioMetals 17, 45–52.
Kubal, BS, D'Souza, SF, 2004. Imobilisasi katalase dengan penjeratan sel
ragi yang diserap dalam putih telur ayam menggunakan glutaralde-
hyde. J. Biochem. Biof. Metode 59, 61–64.
La Rosa, T., Mirto, S., Mazzola, A., Danovaro, R., 2001. Respon yang
berbeda dari mikroba bentik dan meiofauna terhadap gangguan
tambak ikan di sedimen pantai. Mengepung. Polut. 112, 427–434.
Lau, PS, Tam, NFY, Wong, YS, 1998. Pengaruh imobilisasi karagenan
pada aktivitas fisiologis Chlorella vulgaris. Bioresour. Technol. 63,
115–121.
Laurinavichene, TV, Fedorov, AS, Ghirardi, ML, Seibert, M., Tsygankov,
AA, 2006. Demonstrasi fotoproduksi berkelanjutan dengan sel
Chlamydomonas reindhartii yang tidak bergerak dan kehilangan
sulfur. Int.
J. Energi Hidrogen 31, 659-667.
Leo´n,R., Garbayo, I., Herna´ndez, R., Vigara, J., Vilchez, C., 2001. Toksisitas
pelarut organik dalam mikroorganisme uniseluler fotoautotrofik. Mikroba
Enzim. Technol. 29, 173–180.
Liu, YK, Seki, M., Tanaka, H., Furusaki, S., 1998. Karakteristik spons
loofa (Lu (a cylindrica) sebagai pembawa imobilisasi sel
tumbuhan. J. Fermentasi. Bioeng. 85, 416–421.
Lubia´n,LM, 1989. Mengkonsentrasikan mikroalga laut yang dibudidayakan
dengan kitosan. Akuakultur. Eng. 8, 257–265.
Lukavsky, J., 1988. Pengawetan jangka panjang strain alga dengan imobi-
lisasi. Lengkungan. Protistenkd. 135, 65–68.
Lukavsky,J., Komarek, J., Lukavska´, A., Ludv´ık, J., Pokorny´, J., 1986.
Aktivitas metabolisme dan struktur sel dari sel-sel alga yang tidak dapat
bergerak (Chlorella, Scenedesmus). Lengkungan. Hidrobiol. Suppl. 73,
261–279.
Lukavsky,J., Marsˇa´lek, B., 1997. Evaluasi toksisitas oleh biosensor dengan
alga amobil. Algol. Pejantan. 85, 147–155.
Maeda, S., Sakaguchi, T., 1990. Akumulasi dan detoksifikasi unsur-
unsur beracun oleh alga. Dalam: Akatsuka, I. (Ed.), Pengantar
Phycology Terapan. SPB Academic Publishing BV, The Hague, The
Netherlands.
 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
Malik, A., 2004. Bioremediasi logam melalui sel yang sedang tumbuh.
Mengepung.
Int. 30, 261–278.
Mallick, N., 2002. Potensi bioteknologi ganggang amobil untuk air limbah
N, P dan penghilangan logam: tinjauan. BioMetals 15, 377–390.
Markov, SA, Eivazova, ER, Greenwood, J., 2006. Fotostimulasi
produksi H2 di alga hijau Chlamydomonas reindhartii pada
photoinhibition dari sistem yang berkembang O2. Int. J. Hidrogen.
Energi 31, 1314–1327.
Mayasich, JM, Karlander, EP, Terlizzi Jr., DE, 1986. Respon pertumbuhan
Nannochloris oculata Droop dan Phaeodactylum tricor- nutum Bohlin
terhadap herbisida atarazine seperti yang dipengaruhi oleh intensitas
cahaya dan suhu. Aquat. Toksikol. 8, 175–184.
Melis, A., 2002. Produksi hidrogen alga hijau: kemajuan, tantangan dan
prospek. Int. J. Energi Hidrogen 27, 1217-1228.
Moreirados Santos, M., Moreno-Garrido, I., Gonc¸alves, F., Soares, AMVM,
Ribeiro, R., 2002. Sebuah bioassay in situ dengan mikroalga untuk
lingkungan muara. Mengepung. Toksikol. Chem. 21, 567–574.
Moreira dos Santos, M., Soares, AMVM, Ribeiro, R., 2004. Sebuah
bioassay in situ untuk lingkungan air tawar dengan mikroalga
Pseudokirchneriella subcapitata. Ecotox. Mengepung. Aman 59, 164–
173.
Moreira, SM, Moreira-Santos, M., Guilhermino, L., Ribeiro, R., 2006.
Imobilisasi mikroalga laut Phaeodactylum tricornutum di alginat
untuk percobaan in situ: stabilitas dan kesesuaian manik. Mikroba
Enzim. Technol. 38, 135–141.
Morelli, E., Pratesi, E., 1997. Produksi fitokelatin di diatom laut
Phaeodactylum tricornutum sebagai respons terhadap paparan
tembaga dan kadmium. Mengepung. Contam. Tox. B 59, 657–664.
Morelli, E., Scarano, G., 2001. Sintesis dan stabilitas fitokelatin yang
diinduksi oleh kadmium dan timbal dalam diatom laut Phaeodactylum
tricornutum. Mar. Lingkungan. Res. 52, 383–395.
Moreno-Garrido,I., Codd, GA, Gadd, GM, Lubia´n, LM, 2002. Akumulasi Cu
dan Zn oleh sel mikroalga laut terimobilisasi kalsium alginat dari
Nannochloropsis gaditana (EUSTIGMATOPHYCEAE). Cienc. 28 Maret 107–
119.
Moreno-Garrido,I., Campana, O., Lubia´n, LM, Blasco, J., 2005. Kalsium
alginat mikroalga laut amobil: Eksperimen pada pertumbuhan dan
akumulasi logam berat jangka pendek. Mar. Pollut. Banteng. 51, 823–
929.
Moreno-Garrido,I., Blasco, J., Gonza´lez-DelValle, M., Lubia´n, LM, 1998.
Perbedaan dalam akumulasi tembaga oleh mikroalga laut
Nannochloropsis gaditana Lubia´n, diserahkan ke dua perlakuan termal
yang berbeda. Ecotox. Mengepung. Restor. 1, 43–47.
Moreno-Garrido,I., Lubia´n, L., Blasco, J., 2007. Uji toksisitas sedimen yang
melibatkan mikroalga tidak bergerak (Phaeodactylum tricornutum Boh-
lin). Mengepung. Int. 33, 481–495.
Munawar, M., Munawar, IF, 1987. Bioassay fitoplankton untuk
mengevaluasi toksisitas kontaminan sedimen in situ. Hydrobiologia
149, 87–105.
Mun˜oz, R., A´ lvarez, MT, Mun˜oz, A., Terrazas, E., Guieysse, B.,
Mattiasson, B., 2006. Penghapusan berurutan ion logam berat dan
polutan organik menggunakan konsorsium alga-bakteri. Kemosfer 63,
903–911.
Mun˜oz, R., Guieysse, B., 2006. Alga-bakteri proses untuk itu
pengobatankontaminan berbahaya: tinjauan. Res air. 40, 2799–2815.
Naessens, M., Leclerc, JC, Tran-Minh, C., 2000. Sensor serat optik
menggunakan Chlorella vulgaris untuk penentuan senyawa toksik.
Ecotox. Mengepung. Aman 46, 181–185.
Nagase, H., Pattanasupong, A., Sugimoto, E., Tani, K., Nasu, M., Hirata,
K., Miyamoto, K., 2006. Pengaruh faktor lingkungan terhadap
kinerja sistem konsorsium yang tidak bergerak untuk degradasi
karbedazim dan asam 2,4-diklorofenoksiasetat dalam kultur
berkelanjutan. Biochem. Eng. J. 29, 163–168.
Nakasaki, K., Murai, T., Akiyama, T., 1989. Pemodelan dinamis dari
reaktor sel amobil. Appl. Biochem. Bioteknologi. 22, 279–289.
Nayar, S., Goh, BPL, Chou, LM, 2005. Penyelesaian ganggang perifit laut
di muara tropis. Estuar. Pantai. Rak S. 64, 241–248.
3963
Nayar, S., Goh, BPL, Chou, LM, Reddy, S., 2003. Mikrokosmos in situ
untuk mempelajari dampak logam berat yang disuspensi kembali
dengan pengerukan pada perifiton di muara tropis. Aquat. Toksikol.
64, 293–306.
Nestle, N., Kimmich, R., 1996. Mikroskopi NMR penyerapan logam berat
dalam manik-manik kalsium alginat. Appl. Biochem. Biotechnol. 56, 9–
17.
Nowak, ECM, Podola, B., Melkonian, M., 2005. Sistem lapisan kembar 96
sumur: pendekatan baru dalam budidaya mikroalga. Protista 156,
239–251.
Ogbonn, JC, Tomiyama, S., Tanaka, H., 1996. Pengembangan metode
untuk imobilisasi sel non-okulasi di spons loofa (Lu ff a cylindrica).
Proses Biokimia. 31, 737–744.
Oh, YS, Maeng, J., Kim, SJ, 2000. Penggunaan busa poliuretan tak
bergerak mikroorganisme untuk menyerap dan mendegradasi minyak
di permukaan air. Appl. Microb. Biotechnol. 54, 418–423.
Olgu´ın, EJ, 2003. Fikoremediasi: masalah utama untuk proses
penghilangan hara yang hemat biaya. Biotechnol. Adv. 22, 81–91.
Oungbho,K., Mu¨ ller, BW, 1997. Spons kitosan sebagai pembawa obat
pelepasan yang berkelanjutan. Int. J. Pharm. 156, 229–237.
Overnell, J., 1975. Pengaruh logam berat pada fotosintesis dan hilangnya
kalium sel pada dua spesies alga laut, Dunaliella tertiolecta dan
Phaeodactylum tricornutum. Mar. Biol. 29, 99–103.
Pane, L., Feletti, M., Bertino, C., Carli, A., 1998. Viabilitas mikroalga laut
Tetraselmis suecica tumbuh bebas dan diimobilisasi dalam manik-
manik alginat. Akuakultur. Int. 6, 411–420.
Papageorgiou, GC, 1987. Mikroorganisme fotosintetik yang tidak dapat
bergerak.
Photosynthetica 21, 367–383.
Pavlic´, Zˇ., Vidakovic´-Cifrek, Zˇ., Puntaric´, D., 2005. Toksisitas permukaan
terhadap mikroalga hijau Pseudokirchneriella subcapitata dan Scene-
desmus subspicatus dan diatom laut Phaeodactylum tricornutum
dan Skeletonema costatum. Kemosfer 61, 1061–1068.
Podola, B., Nowack, ECM, Melkonian, M., 2004. Penggunaan chip sensor
alga beberapa regangan untuk mendeteksi dan mengidentifikasi
senyawa organik yang mudah menguap. Biosens. Bioelektron. 19,
1253–1260.
Polle, JEW, Kanakagiri, S., Jin, ES, Masuda, T., Melis, A., 2002. Ukuran
antena klorofil terpotong dari fotosistem - metode praktis untuk
meningkatkan produktivitas mikroalga dan produksi hidrogen dalam
kultur massal. Int. J. Energi Hidrogen 27, 1257–1264.
Poncelet, D., Babak, V., Dulieu, C., Picot, A., 1999. Sebuah pendekatan
fisika-kimiawi untuk produksi manik-manik alginat dengan gelasi
ionotropik emulsi fi kasi-internal. Coll. Berselancar. J: Physicochem. Eng.
Asp. 155, 171–176. Prieto, MB, Hidalgo, A., Serra, JL, Llama, MJ, 2002.
Degradasi fenol oleh Rhodococcus erythropolis UPV-1 diimobilisasi pada
Biolite® di
reaktor unggun penuh. J. Biotechnol. 97, 1–11.
Proulx, D., de la Noue, J., 1988. Penghapusan makronutrien dari air
limbah oleh mikroalga amobil. Dalam: Moo-Young, M. (Ed.), Enzim
dan Sel Terimobilisasi Bioreaktor. Dasar-dasar dan Aplikasi.
Elsevier Applied Science Publ. Ltd., Essex.
Quong,D., Neufeld, RJ, Skja˚k-Bræk, G., Poncelet, D., 1998. Sumber kalsium
eksternal versus internal selama gelasi manik-manik alginat untuk
enkapsulasi DNA. Biotechnol. Bioeng. 57, 438–446.
Akar,P., Le´onard, M., Papantoniou, C., Roman, G., Saouter, E., Gallotti-
Schmitt, S., Thie¨baud, H., Vasseur, P., 2000. Perbandingan empat kronik
uji toksisitas menggunakan alga, bakteri dan invertebrata dengan enam
belas bahan kimia. Ecotox. Mengepung. Aman 47, 186–194.
Radwan, SS, Al-Hasan, RH, Salamah, S., Al-Dabbous, S., 2002.
Bioremediasi air laut berminyak oleh bakteri yang diimobilisasi dalam
biofilm yang melapisi makroalga. Int. Biodeter. Biodegr. 50, 55–59.
Rangasayatorn, N., Pokethitiyook, P., Upatahm, ES, Lanza, GR, 2004.
Biosorpsi kadmium oleh sel Spirulina platensis TISTR 8217
diimobilisasi dalam gel alginat dan silika. Mengepung. Int. 30, 57–
63.
Robinson, PK, Mak, AL, Trevan, MD, 1986. Ganggang tidak bergerak:
tinjauan. Proses Biokimia. (Agustus), 122–126.
Robinson, PK, Reeve, JO, Goulding, KH, 1988. Kinetika serapan fosfor oleh
Chlorella yang tidak dapat bergerak. Biotechnol. Lett. 10, 17–20. Romo,
S., Pe´rez-Mart´ınez, C., 1997. Itu menggunakan dari imobilisasi di
alginat.dll manik-manik untuk penyimpanan jangka panjang
Pseudanabaena galeata (Cyanobacteria)
di laboratorium. J. Phycol. 33, 1073–1076.
3964 I. Moreno-Garrido / Bioresource Technology 99 (2008) 3949–3964
Sanders, CA, Rodr´ıguez Jr., M., Greenbaun, E., 2001. Biosensor berbasis
jaringan stand-o ff untuk mendeteksi agen perang kimia
menggunakan induksi fluoresensi fotosintetik. Biosens. Bioelektron.
16, 439– 446.
Santos-Rosa, F., Galvan, F., Vega, JM, 1989. Fotoproduksi amonium oleh
sel Chlamydomonas reinhardtii diimobilisasi dalam barium alginat:
studi kelayakan reaktor. Appl. Mikrobiol. Biotechnol. 32, 285–290.
Schreiter, PPY, Gillor, O., Post, A., Belkin, S., Schmid, RD, Bachmann,
TT, 2001. Pemantauan bioavailabilitas fosfor dalam air oleh strain
reporter cyanobacterial bercahaya amobil. Biosens. Bioelektron.
16, 811–818.
Seki, H., Suzuki, A., 2002. Adsorpsi ion logam berat ke biosorben tipe
oc. J. Coll. Interf. Sci. 249, 295–300.
Semple, KT, 1998. Pertumbuhan heterotrofik pada campuran fenolik
oleh
Ochromonas danica. Res. Mikrobiol. 149, 65–72.
Semple, KT, Cain, RB, 1996. Biodegradasi fenol oleh alga
Ochromonas danica. Appl. Mengepung. Microb. 62, 1265–1273.
Shitanda, I., Takada, K., Sakai, Y., Tatsuma, T., 2005. Biosensor alga
amperometri kompak untuk evaluasi toksisitas air. Anal. Chim.
Acta 530, 191–197.
Singh, R., Prasad, BB, 2000. Analisis logam jejak: pengayaan sampel
selektif (tembaga II) pada kolom AlgaSORB. Proses Biokimia. 35,
897–905.
Smidsrød,O., Skja˚k-Braek, G., 1990. Alginat sebagai matriks imobilisasi
untuk sel. Tibtech 8, 71–78.
Spinti, M., Zhuang, H., Trujillo, EM, 1995. Evaluasi manik-manik biomassa
amobil untuk menghilangkan logam berat dari air limbah. Lingkungan
Air. Res. 67, 943–952.
Stark, PC, Rayson, GD, 2000. Perbandingan logam-ion yang mengikat
bahan biogenik amobil dalam sistem aliran. Adv. Mengepung. Res. 4,
113–122.
Streble, H., Krauter, D., 1987. Atlas de los mikroorganisme de agua dulce
(Atlas Mikroorganisme Air Tawar). Omega SA, Barcelona.
Suzuki, T., Yamaguchi, T., Ishida, M., 1998. Imobilisasi Prototeka zofi
dalam kalsium alginat veda untuk degradasi hidrokarbon. Proses
Biokimia. 33, 541–546.
Tam, NFY, Wong, YS, 2000. Pengaruh konsentrasi mikroalga amobil pada
pembuangan nutrisi air limbah. Mengepung. Polut. 107, 145–151.
Thakur, A., Kumar, HD, 1999. Pengambilan nitrat, amonium dan fosfat
oleh sel-sel Dunaliella salina yang tidak dapat bergerak. Mengepung.
Contam. Tox. B 62, 70–78.
Thepenier, C., Gudin, C., Thomas, D., 1985. Imobilisasi Porphyri- dium
cruentum dalam busa poliuretan untuk produksi polisakarida.
Biomassa 7, 225–240.
Tosa, T., Sato, T., Mori, T., Yamamoto, K., Takata, I., Nishida, Y.,
Chibata, I., 1979. Imobilisasi enzim dan sel mikroba menggunakan
karagenan sebagai matriks. Biotechnol. Bioeng. 21, 1697–1709.
Travieso,L., Pello´n, A., Ben´ıtez, F., Sa´nchez, E., Borja, R., O'Farrill, NO,
Weiland, P., 2002. Reaktor BIOALGA: studi pendahuluan untuk logam
berat pemindahan. Biochem. Eng. J. 12, 87–91.
Travieso,L., Ben´ıtez, F., Weiland, P., Sa´nchez, E., Dupeyro´n, R., Dom
´ınguez, AR, 1996. Percobaan pada imobilisasi mikroalga untuk
menghilangkan nutrisi dalam pengolahan air limbah. Bioresour. Technol.
55, 181–186.
Travieso Co´rdoba, L., Sa´nchez Herna´ndez, E., 1995a. Terakhir
pengobatan untuk kotoran ternak menggunakan mikroalga amobil. II.
Pengaruh resirkulasi. Resour. Konservasi. Recy. 13, 177–182.
Travieso Co´rdoba, L., Sa´nchez Herna´ndez, E., Weiland, P., 1995b.
Terakhirpengobatan kotoran ternak menggunakan mikroalga
amobil. I. Studi tentang media pendukung. Resour. Konservasi.
Recy. 13, 167–175.
Tripathi, U., Ramachandra, RS, Ravishankar, GA, 2002. Biotrans- formasi
senyawa fenilpropanoid menjadi metabolit rasa vanilla dalam kultur
Haematococcus pluvialis. Proses Biokimia. 38, 419–426.
Twist, H., Edwards, AC, Codd, GA, 1997. Sebuah novel biomonitor in
situ menggunakan alga amobil alginat (Scenedesmus subspicatus)
untuk penilaian eutrofikasi yang mengalir di permukaan air. Res
air. 31, 2066–2067.
Urrutia, I., Serra, JL, Llama, MJ, 1995. Penghapusan nitrat dari air oleh
Scenedesmus obliquus melumpuhkan dalam busa polimer. Mikrofon
Enzim- rob. Technol. 17, 200–205.
Valdman, E., Erijman, L., Pessoa, FLP, Leite, SGF, 2001. Biosorpsi
berkelanjutan Cu dan Zn oleh biomassa limbah terimobilisasi
Sargassum sp. Proses Biokimia. 36, 869–873.
van Vuuren, DP, Cofala, J., Eerens, HE, Oostenrijk, R., Heyes, C.,
Klimont, Z., den Elzen, MGJ, Amann, M., 2006. Menjelajahi
manfaat tambahan dari Protokol Kyoto untuk polusi udara di
Eropa. Energ. Kebijakan 34, 444–460.
Vignoli, JA, Celligoi, MAPC, Silva, RSF, 2006. Pengembangan model
statistik untuk produksi sorbitol dengan Zymomonas mobilis gratis
dan tidak bergerak di spons loofa Lu ff a cylindrica. Proses Biokimia.
41, 240–243.
V´ılchez, C., Vega, JM, 1994. Penyerapan nitrit oleh sel Chlamydomonas
reinhardtii diimobilisasi dalam kalsium alginat. Appl. Mikrobiol.
Biotechnol. 41, 137–141.
V´ılchez, C., Vega, JM, 1995. Penyerapan nitrit oleh sel Chlamydo- monas
reinhardtii amobil yang tumbuh di reaktor pengangkutan udara.
Mikroba Enzim. Technol. 17, 386–390.
V´ılchez, MJ, Vigara, J., Garbayo, I., V´ılchez, C., 1997. Studi
mikroskopis elektron pada sel Chlamydomonas reinhardtii yang
tumbuh tidak bergerak. Mikroba Enzim. Technol. 21, 25–47.
V´ılchez,C., Garbayo, I., Markvicheva, E., Galvân, F., Leo'n, R., 2001. Studi
tentang kesesuaian sel Chlamydomonas reindhartii yang terperangkap
alginat untuk mempertahankan proses konsumsi nitrat. Biore- asam.
Technol. 78, 55–61.
Weller, MG, 2000. Teknik imunokromatografi - tinjauan kritis. Fresen. J.
Anal. Chem. 366, 635–645.
Widerøe, H., Danielsen, S., 2001. Evaluasi penggunaan Sr2 + dalam sel
amobil alginat. Naturwissenchaften 88, 224–228.
Wiegman, S., Termeer, JAG, Verheul, T., Kraak, MHS, De Voogt, P., Laane,
RWPM, Admiraal, W., 2002. Toksisitas tergantung absorbansi UV dari
akridin ke diatom laut Phaeodactylum tricornutum. Mengepung. Sci.
Technol. 36, 908–913.
Wij ff els, RH, Tramper, J., 1989. Kinerja sel Nitrosomonas europea yang
sedang tumbuh diimobilisasi dalam j-karagenan. Appl. Mikrobiol.
Biotek- nol. 32, 108–112.
Willke, B., Willke, T., Vorlop, KD, 1994. Poli (karbamoylsulfonat) sebagai
matriks untuk imobilisasi sel utuh - karakterisasi biologis. Biotechnol.
Tech. 8, 623–626.
Yamaguchi, T., Ishida, M., Suzuki, T., 1999. Sistem sel amobil dalam busa
poliuretan untuk Prototheca zopfi mikro-alga lipofilik. Proses
Biokimia. 34, 167–171.
Zeglinska, L., 2005. Komunikasi pribadi. Institut Oseanologi, Polandia
Akademi dari Ilmu, Powstan´co´w Warszawy 55 (81-712 Sopot,
Polandia).