MAKALAH DESTISTRY UPDATE

Penerapan Nanomaterial Gigi: Potensial Toksisitas ke Sistem Saraf Pusat

Pengampu :

Oleh :

Kelompok 8

M. Ziyad Afif (181610101119)

Salsabila Izdihar (181610101120)

Ahmad Yarham (181610101122)

Syafika Nuring F (181610101123)

Octaviana Putri P.S. (181610101125)

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS JEMBER

2021
 ABSTRAK

Nanomaterials didefinisikan sebagai material dengan satu atau lebih dimensi eksternal
dengan ukuran 1-100 nm. Materi tersebut memiliki sifat yang bergantung pada struktur nano
yang khas (misalnya, kimia, biologi, optik, mekanik, dan magnet), yang mungkin sangat berbeda
dari properti bagian massal mereka. Dalam beberapa tahun terakhir, nanomaterial telah banyak
digunakan dalam produksi bahan gigi, terutama dalam resin komposit polimerisasi cahaya dan
sistem ikatan, bahan pelapis untuk implan gigi, bioceramics, sealer endodontik, dan obat kumur.
Namun, aplikasi gigi dari nanomaterial tidak hanya menghasilkan peningkatan yang signifikan
dalam perawatan klinis tetapi juga meningkatkan kekhawatiran mengenai biosekuriti mereka.
Otak dilindungi dengan baik oleh blood-brain barrier (BBB), yang memisahkan darah dari
parenkim otak. Namun, dalam beberapa tahun terakhir, banyak penelitian telah menemukan
bahwa nanopartikel (NP), termasuk nanocarrier, dapat diangkut melalui BBB dan ditempatkan di
sistem saraf pusat (SSP). Karena SSP mungkin merupakan organ target potensial dari
nanomaterial, penting untuk menentukan efek neurotoksik dari NP. Dalam ulasan ini,
kemungkinan bahan nano gigi dan jalurnya ke SSP dibahas, serta efek neurotoksisitas terkait
yang mendasari penelitian in vitro dan in vivo. Akhirnya, kami menganalisis keterbatasan
metode pengujian saat ini pada efek toksikologi dari nanomaterial. Tinjauan ini berkontribusi
pada pemahaman yang lebih baik tentang risiko terkait nano ke SSP serta pengembangan lebih
lanjut dari sistem penilaian keselamatan. dapat diangkut melalui BBB dan terletak di sistem saraf
pusat (SSP). Karena SSP mungkin merupakan organ target potensial dari nanomaterial, penting
untuk menentukan efek neurotoksik dari NP. Dalam ulasan ini, kemungkinan bahan nano gigi
dan jalurnya ke SSP dibahas, serta efek neurotoksisitas terkait yang mendasari penelitian in vitro
dan in vivo. Akhirnya, kami menganalisis keterbatasan metode pengujian saat ini pada efek
toksikologi dari nanomaterial. Tinjauan ini berkontribusi pada pemahaman yang lebih baik
tentang risiko terkait nanopartikel ke SSP serta pengembangan lebih lanjut dari sistem penilaian
keselamatan.

2
 PENDAHULUAN

Nano material merupakan material atau bahan yang memiliki komponen kurang dari 100
nm dalam satu dimensi, seperti kelompok atom, grain, fiber dan film dengan ketebalan kurang
dari 100 nm. Bahan tersebut memiliki sifat bergantung struktur nano yang khas (misalnya, kimia,
biologi, optik, mekanik, dan magnet), yang membedakannya dari bahan massal. Karena sifatnya
yang baru dan unik, bahan nano menjadi ada di mana-mana di berbagai produk, seperti tabir
surya, kosmetik, perlengkapan medis, pakaian, dan bahan bangunan. Permintaan global untuk
bahan nano dan perangkat yang mendukung nano diperkirakan akan mendekati US $ 1 triliun
pada tahun 2015. Peningkatan luar biasa dalam jumlah produk terkait nanoteknologi telah
berdampak besar bagi masyarakat dan lingkungan.
Manfaat bahan nano untuk pengobatan modern sangat luar biasa. Dalam beberapa tahun
terakhir, bahan nano telah banyak digunakan dalam produksi material kedokteran gigi, termasuk
resin komposit polimerisasi cahaya dan sistem ikatan, bahan pelapis untuk implan gigi,
bioceramics, sealer endodontik, dan obat kumur. Namun, selain menghasilkan perbaikan yang
signifikan dalam perawatan klinis, aplikasi material nano gigi juga telah menimbulkan
kekhawatiran yang berkembang mengenai biosekuriti mereka. Karena bahan nano memiliki
ukuran yang sama dengan molekul DNA, protein, virus, dan molekul biologis, beberapa efek
biologisnya mungkin terletak pada mekanisme interaksi antara makhluk hidup dan lingkungan,
yang belum dipahami secara jelas. Faktanya, nanopartikel (NP) adalah jenis sistem mesoskopik
yang memiliki efek permukaan khusus, efek ukuran kecil, dan efek macroscopic quantum
tunneling. Ketika direduksi menjadi skala nano, banyak bahan jinak mungkin menunjukkan
toksisitas seluler yang cukup besar. Misalnya, TiO2, bahan substrat umum untuk implan gigi,
sebelumnya diklasifikasikan sebagai inert biologis pada manusia dan hewan dan telah digunakan
sebagai partikel kontrol negatif dalam berbagai penelitian toksikologi. Namun demikian,
beberapa kemungkinan efek merugikan dari TiO2 NP pada kesehatan manusia telah ditemukan
baru-baru ini. Selain itu, data in vitro juga telah menunjukkan toksisitas seluler dari nanomaterial
seng oksida (nano-ZnO), yang telah dikembangkan untuk berbagai anti-infeksi. aplikasi.
Memang, nanomaterial pada dasarnya tidak jinak; mereka dapat mempengaruhi perilaku
biologis pada tingkat yang berbeda, termasuk tingkat seluler, subseluler, dan protein. Setelah

3
terpapar, beberapa nanomaterial siap bergerak ke seluruh tubuh, mengendap di organ target,
menembus membran sel, bersarang di mitokondria, dan memicu respons yang merugikan. Dalam
beberapa tahun terakhir, banyak penelitian telah menunjukkan bahwa nanomaterial dapat
menumpuk di jantung, hati, limpa, paru-paru, dan ginjal hewan. Otak berbeda dari organ lain,
karena blood-brain barrier (BBB) dapat mencegah sebagian besar zat memasuki otak. Namun,
penelitian yang ada telah menunjukkan bahwa nanomaterial relatif mudah melintasi BBB ke
otak, dan penyilangan BBB oleh nanomaterial dikaitkan dengan ukurannya yang kecil dan
aktivitas permukaan yang tinggi. Selain itu, bahan nano ini bahkan dapat berpindah ke otak oleh
saraf penciuman dan sensorik. Semua temuan ini menunjukkan bahwa sistem saraf pusat (SSP)
dapat rusak dan berbagai efek patogen dapat dialami setelah terpapar bahan nano.
Para peneliti telah melakukan banyak studi in vivo dan in vitro untuk mengeksplorasi
interaksi antara nanomaterial dan makromolekul biologis, sel, organ, dan jaringan, dan sebagian
besar studi ini telah menemukan bahwa efek toksisitas biologis dari nanomaterial dapat diinduksi
oleh mekanisme stres oksidatif dan reaksi inflamasi. Namun, satu masalah yang muncul adalah
apakah metode dan teknik tradisional yang digunakan dalam analisis toksisitas bahan nano
akurat dan dapat diandalkan. Pertanyaan lebih lanjut telah muncul mengenai apakah sifat
fisikokimia unik dari bahan nano telah memperkenalkan mekanisme baru cedera dan apakah
mekanisme baru ini akan mengarah pada patologi baru. Bahkan jika nanomaterial tidak
memperkenalkan patologi baru, mungkin ada mekanisme baru dari cedera yang membutuhkan
alat khusus, tes, dan pendekatan untuk menilai toksisitasnya. Oleh karena itu, masih terlalu dini
untuk menarik kesimpulan eksplisit mengenai bahaya yang melekat pada nanomaterial, apalagi
mekanisme toksisitasnya yang tepat.

4
 PEMBAHASAN

Kemungkinan Bahan Nano Gigi Komersial

Bersamaan dengan proses industrialisasi nanoteknologi, nanomaterial gigi telah digunakan
secara luas, dan peluang bagi orang untuk memanfaatkan dengan nanomaterial telah meningkat
pesat. Bahan berbasis nanoteknologi telah menghasilkan perbaikan besar dalam perawatan klinis
dan telah mendorong inovasi banyak bahan gigi konvensional. Aplikasi utama dari nanomaterial
di bidang gigi dijelaskan dan disajikan pada Tabel 1.

5
 Table 1 : Ringkasan material nano saat ini di bidang gigi

Resin Komposit Dan Sistem Bonding

Matriks resin komposit tradisional umumnya terdiri dari berbagai jenis pengisi anorganik.
Aplikasi tambalan berukuran nano dalam matriks resin telah mengatasi beberapa keterbatasan
mekanis dan telah meningkatkan kinerja klinisnya secara signifikan. Bahan nano yang umum
digunakan termasuk nano-ZnO, nano-silika, nano-kalsium fosfat dan kalsium fluorida (masing-
masing nano-Ca3 (PO4)2 dan CaF2), dan nano-TiO2. Selain resin komposit, penggunaan bahan
nano dalam perekat gigi juga secara efektif meningkatkan kekuatan ikatan dan sifat mekaniknya.
Misalnya, komposit nano hibrida silsesquioxanes polihedral oligomerik telah dipolimerisasi
dengan bahan nano berbasis silikon untuk membentuk jenis bahan pengikat baru yang memiliki
kekuatan mekanik besar dan termostabilitas yang baik. Lebih lanjut, sifat antibakteri dari bahan
pengikat bisa sangat ditingkatkan dengan memasukkan perak dan kalsium fosfat berukuran nano.
Penambahan lain yang mungkin termasuk nano-hidroksiapatit (nano-HAp) dan nano-silika

Material Pengisi Saluran Akar

Bahan pengisi saluran akar seharusnya efektif membunuh bakteri pada lesi periodikal,
menutup zona apikal dengan rapat, dan mempercepat penyembuhan. Namun, kerapuhan saluran
akar sering meningkat setelah perawatan karena ukuran HAp tradisional yang besar.
Ketidaksesuaian modulus elastisitas antara dentin akar dan tambalan juga menyebabkan
perkolasi. Sebaliknya, nano-HAp mewakili keunggulan unik dalam aspek ini karena strukturnya
mirip dengan tulang anorganik alami. Nano-HAp mampu menginduksi osteogenesis dan lebih
jauh meningkatkan efek bakteriostatik dan antibakteri dari tambalan akar. Mengingat
bioaktivitasnya yang baik, nano-HAp juga digunakan sebagai bahan pengganti yang optimal
dalam perbaikan kerusakan tulang.

Biokeramik Dan Protesa Gigi

Bioceramics berstruktur nano, yang dibuat dengan pelapisan plasma atau proses deposisi
kimiawi, umumnya memiliki sifat mekanis yang ditingkatkan, seperti ketahanan yang lebih baik
terhadap perambatan retak dan peningkatan ketangguhan retakan dan kekerasan Vickers. Selain
itu, penggunaan Ti-, Zn-, dan Ce-oksida berukuran nano telah sangat meningkatkan sifat
mekanik dari silikon elastomer maksilofasial. Perak berukuran nano mungkin merupakan
tambahan yang efektif untuk bahan berbasis gigi tiruan untuk meningkatkan sifat antijamur dan

6
biokompatibilitasnya. Dengan demikian, aplikasi bahan nano memiliki potensi untuk secara
efektif meningkatkan sifat komprehensif, termasuk sifat mekanik, kimia, dan biologi, dari
berbagai jenis bahan gigi konvensional.

Bahan Pelapis Untuk Implan Gigi

Osseointegrasi yang baik pada antarmuka implan-tulang penting untuk keberhasilan
implantasi gigi, tetapi sayangnya, hal ini masih menjadi tantangan yang signifikan. Dalam
beberapa tahun terakhir, sejumlah penelitian telah melaporkan peningkatan tingkat keberhasilan
implan melalui aplikasi lapisan nano pada permukaan, keramik nano, dan bahan tulang nano
buatan. Misalnya, nano-porous alumina, nano-zirconia / nano-Ca3 (PO4) 2, nano-ZnO, dan
nano-HAp telah digunakan untuk meningkatkan bioaktivitas permukaan implan gigi untuk
mencapai osseointegrasi yang superior. Keuntungan dari modifikasi skala nano permukaan
implan gigi telah disajikan dalam review terbaru oleh Mendonca et al.

Pengiriman Target Dan Pencitraan Dalam Kemoterapi Tumor

Masalah utama dalam penggunaan kemoterapi untuk tumor ganas mulut adalah bagaimana
meningkatkan konsentrasi lokal obat sekaligus mengurangi efek samping sistemik. Untuk
mengatasi masalah ini, strategi penghantaran obat baru berbasis NP telah dipelajari di mana NP
adalah pembawa obat yang dapat mengangkut obat antikanker ke lokasi tumor, yang selanjutnya
meningkatkan kemanjuran terapeutik. Misalnya, Lebold et al, mengaplikasikan film silika tipis
mesopori dengan pori-pori berskala nano sebagai pembawa obat yang tergabung dengan
doksorubisin, obat antikanker yang sangat sering digunakan. Material nano silika temaopori
menunjukkan pelepasan obat antikanker yang terkendali dan berkelanjutan membahas
keuntungan dari pembuatan NP polimer (vitamin E d-alpha-tocopheryl polyethylene glycol 1000
succinate) untuk pelepasan terkontrol dari paclitaxel dan obat antikanker lainnya. Penerapan lain
dari terapi bertarget dengan NP baru melibatkan pencitraan tumor. Oksida besi
superparamagnetik dengan modifikasi permukaan khusus telah digunakan untuk memandu ablasi
laser kanker maksilofasial karena NP yang diproduksi ini aktif-resonansi magnetik dan dapat
dipanaskan secara selektif untuk pencitraan simultan. Demikian pula, nanocarrier liposom juga
memiliki keunggulan khusus dalam penggunaannya untuk radiografi tumor dan pencitraan
karena enkapsulasi obat dan gadolinium yang baik.

7
 Selain penggunaan terapeutik yang disebutkan di atas, banyak nanomaterial, seperti nano-
TiO dan nano-ZnO, telah digunakan dalam produk perawatan gigi sehari-hari, termasuk pasta
gigi dan obat kumur. Mempertimbangkan berbagai aplikasi dari nanomaterial gigi yang
tercantum di atas, kita harus mengakui kontribusi yang luar biasa dari nanomaterials
tomodernmedicine. Sementara itu, risiko material nano terhadap kesehatan manusia juga
meningkat secara signifikan disertai dengan lebih banyak peluang paparan.

Jalur Yang Memungkinkan Untuk Memasuki SSP

Berdasarkan prinsip toksikologi, hampir semua zat berpotensi toksik bagi manusia, dan
kuncinya terletak pada dosis dan cara pemaparan. Orang-orang yang paling mungkin melakukan
kontak dengan nanomaterial gigi adalah staf produksi, penelitian, dan pengembangan, serta staf
gigi dan pasien. Dalam situasi klinis, sebagian besar nanomaterial gigi langsung diaplikasikan di
rongga mulut atau wilayah maksilofasial, memungkinkan nanomaterial dengan mudah masuk ke
aliran darah (atau cairan getah bening) melalui penyerapan melalui mukosa mulut atau melalui
saluran pencernaan setelah tertelan. Selain itu, peluang untuk terpapar material nano juga dapat
terjadi dengan pemanfaatan alat gigi. Saat ini, kawat nano tungsten karbida (WC), yang
merupakan bentuk baru dari nano-WC, telah diterapkan dalam produksi bor mikro karbida,
termasuk dalam latihan gigi dan gerinda. Dengan demikian, staf gigi dan pasien mungkin
menghadapi NP abrasif secara langsung selama proses penggilingan atau pemolesan, terutama
mengingat banyak bahan prostetik gigi juga mengandung nano-metal (misalnya, Co, Cr, Au, Ag,
Ti), resin (Si), dan keramik (misalnya, Zr, Al, Li, Mg, Fe). Setelah NP ini diserap ke dalam aliran
darah kita, mereka dapat didistribusikan ke berbagai organ, termasuk hati, limpa, ginjal, jantung,
paru-paru, dan otak. Dibandingkan dengan organ lain, zat ini masih diperlukan untuk melewati
penghalang BBB atau blood-cerebrospinal fluid (CSF) untuk mencapai otak. Selain jalur
sistemik, material nano dapat langsung berpindah ke otak melalui saraf.

Jalur BBB
BBB terutama terdiri dari endotel serebrovaskular, yang ditutup dengan sambungan rapat
(TJ). Struktur tambahan, seperti pericytes, astrocyte end-feet, dan discontinuous basal
membrane, adalah sel yang mendukung BBB. Semua struktur ini yang terkait dengan neuron di
sekitarnya merupakan "unit neurovaskular" yang kompleks dan fungsional (Gambar 1).
Karakteristik struktural unik dari BBB adalah TJ intraseluler dan tidak adanya badan Weibel-

8
Palade, yang secara signifikan berbeda dari sel endotel vaskular lainnya dan dapat mencegah
sebagian besar zat masuk ke dalam SSP. Selain hambatan fisik ini, BBB juga memiliki beberapa
hambatan metabolik untuk pengiriman agen terapeutik. Pertama, endothelia dari BBB
kekurangan vesikula pinositik, dan dengan demikian, mereka hanya memungkinkan untuk
pinositosis rendah pada substrat tertentu. Kedua, serangkaian enzim intra dan ekstraseluler yang
diekspresikan oleh komponen seluler akan membatasi pengangkutan suatu zat melalui BBB.
Interaksi kompleks antara obat-obatan dan sistem enzim ini sering menyebabkan kegagalan
terapi. Akhirnya, sistem pembuangan (seperti P-glikoprotein) dari sel endotel juga memainkan
peran penting peran dalam penghapusan molekul endogen dan eksogen berbahaya. Struktur
terkait lainnya yang berfungsi untuk mencegah zat yang berpotensi berbahaya memasuki otak
dikenal sebagai sawar darah-CSF. Sawar ini dibentuk oleh sel epitel plexus koroid yang memiliki
TJ serupa tetapi luas permukaannya lebih kecil dibandingkan dengan endotel BBB. Penghalang
darah-CSF membantu mencegah makromolekul menembus ke dalam CSF, dan fungsi ini
selanjutnya diperkuat oleh sistem transpor aktif, yang secara aktif menghilangkan asam organik
terapeutik dari CSF.

Terlepas dari keterbatasan ini, banyak penelitian telah menunjukkan bahwa nanomaterial,
termasuk nanomaterial yang telah digunakan sebagai pembawa obat, dapat melintasi BBB (atau
sawar darah-CSF) ke dalam SSP. Oleh karena itu, pembawa berbasis nanoteknologi telah
dieksploitasi sebagai pendekatan yang efektif untuk pengiriman obat di SSP. Saat ini, sebagian
besar strategi yang dijelaskan untuk lewatnya nanomaterial (sebagai pembawa obat) melalui
BBB melibatkan mekanisme yang ditunjukkan pada Gambar 2, yang meliputi berikut ini: 1) NP
membantu memungkinkan obat untuk menembus BBB dengan membuka TJ di antara sel endotel
; 2) NP ditranssitosis melalui lapisan sel endotel; 3) NP diendositosis oleh sel endotel dan
melepaskan obat di dalam sel; 4) agen pelapis NP, seperti polisorbat, menghambat sistem
pembuangan transmembran; dan 5) NP dapat menyebabkan efek toksik lokal pada pembuluh
darah otak, yang menyebabkan peningkatan terbatas dalam permeabilitas sel endotel saraf.
Dalam kondisi tertentu, otak lebih rentan terhadap material nano gigi saat paparan terjadi dalam
tahap perkembangannya. Banyak fakta yang menunjukkan struktur itu dan fungsi dewasa BBB
tahap demi tahap di samping ontogenesis hewan. Akibatnya, dibandingkan dengan otak orang
dewasa, otak janin mungkin lebih mudah terpengaruh oleh zat-zat yang dibawa melalui darah,
termasuk nanomaterial, karena perkembangan BBB di otak janin tidak sempurna. Yamashita dkk

9
menemukan bahwa nano-silika dan nano-TiO menyebabkan komplikasi pada kehamilan saat
mereka disuntikkan secara intravena ke tikus hamil. NP ini terakumulasi di plasenta, otak janin,
dan hati janin. Studi toksisitas lainnya juga menunjukkan bahwa nanomaterial dapat melewati
penghalang plasenta pada tikus hamil dan setelah itu menyebabkan efek neurotoksisitas pada
keturunannya. Oleh karena itu, perhatian khusus harus diberikan pada pemanfaatan nanomaterial
gigi pada pasien hamil, terutama pada awal kehamilannya. Meskipun banyak penelitian telah
meneliti mekanisme NP yang telah diangkut melalui BB, mekanisme tersebut masih belum
sepenuhnya dijelaskan, sebagian karena dosis tinggi khusus yang telah diterapkan secara in vitro
dan mungkin tidak dapat dicapai dalam kondisi in vivo. Selain itu, masih ada pertanyaan yang
belum terjawab apakah NP yang melewati BBB terlokalisasi di parenkim otak, masuk ke sel
endotel dari pembuluh darah SSP, atau keduanya.

10
Jalur translokasi saraf sensorik
Jalur penciuman terdiri dari epitel penciuman, saluran penciuman, inti penciuman
anterior, korteks piriform, amigdala, dan hipotalamus. Jalur ini dapat menjadi jalur utama
penyampaian terapi SSP agen setelah pemberian intranasal. Ada sejumlah besar bukti yang
menunjukkan bahwa NP yang dihirup atau ditanamkan secara intranasal dapat masuk ke SSP
melalui epitel olfaktorius dan neuron terkaitnya, masuk langsung ke lobus olfaktorius otak, dan
kemudian menyebabkan efek terkait inflamasi yang signifikan. Rute ini melibatkan sistem saraf
penciuman atau trigeminal, yang dimulai dari bagian otak dan berakhir di rongga hidung di epitel
olfaktorius atau epitel pernapasan, yang semuanya melewati BBB. Penelitian lain telah mencoba
untuk fokus pada kecepatan konduksi saraf dalam material nano. Misalnya, De Lorenzo
melaporkan bahwa NP emas (berukuran 50 nm) ditranslokasi oleh saraf olfaktorius setelah
pemberian nasal pada squirrel monkey, dan kecepatan transfer 2,5 mm / jam. Namun, dalam
penelitian ini, kerusakan serabut saraf dan dampaknya pada neuron normal serta fungsi saraf
dalam proses translokasi tidak diteliti lebih lanjut. Selain itu, jalur yang sering diabaikan tetapi
penting yang menghubungkan saluran hidung ke SSP melibatkan saraf trigeminal, yang
menginervasi epitel pernapasan dan penciuman dari saluran hidung. Tiga cabang saraf trigeminal
(divisi oftalmikus, divisi rahang atas, dan divisi mandibula) bergabung di ganglion trigeminal,
memasuki SSP di pons, dan berakhir di nukleus trigeminal tulang belakang di batang otak.
Mempertimbangkan bahwa sebagian kecil dari saraf trigeminal juga berakhir di bulbs

11
olfaktorius, cross talk antara rute trigeminal dan olfaktorius dari pengiriman obat ke otak dapat
terjadi.

Jadi, seringkali sulit untuk menentukan apakah obat yang diberikan secara intranasal
mencapai bulbus olfaktorius dan area otak rostral lainnya melalui jalur trigeminal atau
olfaktorius atau jika keduanya terlibat. Namun, karena perbedaan anatomis dan fisiologis,
serapan saraf sensorik dari NP yang diusulkan dalam model tikus mungkin tidak cukup
memprediksi paparan manusia. Translokasi NP melalui jalur saraf penciuman manusia ke otak
lebih sulit daripada tikus, dan jumlah yang terlibat dalam translokasi juga jauh lebih rendah.
Namun, ini tidak mengesampingkan kemungkinan pemanfaatan jalur saraf pada manusia.
Oberdorster dkk pernah dilaporkan bahwa translokasi partikel 20 nm dua sampai sepuluh kali
lebih tinggi pada bola penciuman manusia daripada pada tikus. Menurut terbatasnya data yang
tersedia, masih sulit untuk mengevaluasi sejauh mana akumulasi di otak melalui transpor
aksonal, walaupun ini kemungkinan yang realistis. Lebih penting lagi, penelitian masa depan
harus mempertimbangkan aspek tambahan, seperti evaluasi mekanisme pengambilan NP dan
translokasi aksonal, perubahan kimia permukaan NP selama transpor saraf, dan kinetika
distribusi dan jalur eliminasi di SSP.

Studi in vivo tentang potensi toksisitas bahan nano di CNS

Paparan NP melalui jalur pengiriman obat yang berbeda

Dalam situasi klinis, material nano dapat memasuki tubuh melalui rute yang berbeda.
Misalnya, bahan yang digunakan dalam perbaikan tulang, pasta penutup periodontal, pasta
saluran akar, dan pelapis permukaan implan dapat terlihat terkontaminasi dengan darah, sehingga
memungkinkan NP dengan cepat memasuki aliran darah dalam jangka pendek dan akhirnya
mencapai SSP melalui transportasi melintasi BBB. Selanjutnya, ketika bahan sedang digiling dan
dipoles secara mekanis di klinik atau laboratorium, partikel bahan restorasi gigi dapat menyebar
di udara dan masuk ke SSP melalui inhalasi paru atau sepanjang jalur translokasi saraf
olfaktorius / trigeminal. Akhirnya, proses abrasi dan pelarutan tambalan nano dan bahan
restoratif serta penggunaan pasta gigi dan obat kumur semuanya dapat menyebabkan paparan NP
di mukosa mulut, serta penyerapan lebih lanjut di saluran pencernaan setelah tertelan. Di sini,
kami fokus pada jalur utama di mana nanomaterial memasuki SSP. Ringkasan contoh yang
ditemukan dalam naskah ini disajikan pada Tabel 2.

12
 Dalam studi terbaru yang dilakukan oleh Vilella et al, penulis menemukan bahwa NP
tersebar luas di seluruh wilayah otak 6 jam setelah injeksi intraperitoneal pada tikus C57Bl6
(Gambar 3). Penemuan ini selanjutnya dikonfirmasi oleh hasil dari studi toksisitas lain di mana
konsentrasi seng dalam otak tikus meningkat secara signifikan setelah injeksi intravena suspensi
NP ZnO selama 14 hari berturut-turut. Studi tersebut juga menemukan bahwa konsentrasi
neurotransmiter di otak, seperti norepinefrin dan epinefrin, tetap tidak berubah. Pengamatan ini
menunjukkan bahwa injeksi intravena akut dari ZnO NP mungkin tidak mempengaruhi
konsentrasi neurotransmitter pada tikus dewasa. Sebaliknya, dalam penelitian Zhang et al,
peningkatan regulasi yang signifikan dari partikel Ti di korteks serebral dan striatum dilaporkan
ketika mencit ditanamkan secara intranasal dengan berbagai jenis NP TiO; ini menyebabkan
perubahan morfologi yang jelas pada neuron dan menciptakan gangguan yang signifikan pada
tingkat neurotransmitter monoamine. Penelitian ini menyoroti peran penting modifikasi
permukaan NP dalam neurotoksisitasnya. Faktanya, nanomaterial dengan komposisi kimia yang
sama berbeda dalam sifat toksikologinya menurut bentuk, ukuran, muatan permukaan, jenis
bahan pelapis, dan reaktivitasnya. Li et al meneliti pengaruh sistematis potensial dari NP TiO
pada tikus setelah penanaman intratrakeal selama 4 minggu. Hasilnya menunjukkan bahwa TiO
NP dapat ditransfer melalui BBB dan kemudian menyebabkan cedera otak dengan aktivasi
respon stres oksidatif. Dalam studi toksisitas lain dari NP TiO pada tikus yang dilakukan oleh Ze
et al NP TiO ditranslokasi dan terakumulasi di otak melalui pemberian nasal, dan ini
menyebabkan stres oksidatif dan serangkaian perubahan patologis, seperti overproliferasi sel glia
dan apoptosis sel hipokampus.

Para penulis selanjutnya mencatat beberapa perubahan signifikan pada gen yang mungkin
menjadi penanda potensial toksisitas otak. Temuan serupa juga dilaporkan oleh Kwon et al yang
menemukan bahwa paparan NP Al memodulasi ekspresi gen dan protein dari protein kinase yang
diaktivasi oleh mitogen dan aktivitasnya. Marano dkk baru-baru ini membahas generasi spesies
oksigen reaktif (ROS) yang diinduksi NP dan aktivasi jalur pensinyalan yang melibatkan
berbagai protein kinase. Sebuah studi in vivo baru-baru ini menyelidiki efek toksik nano-TiO,
nano-ZnO, dan nano-Al O pada tikus melalui paparan oral (500 mg / kg) selama 21 hari berturut-
turut. NP ini menghasilkan stres oksidatif yang signifikan di otak, terbukti dari peningkatan
kadar ROS dan aktivitas enzim antioksidan yang berubah. Perubahan ini juga didukung oleh
penghambatan CuZnSOD and MnSOD.

13
Efek neuritoksik terkait dengan perilaku hewan
Dampak material nano pada perilaku hewan memiliki perhatian yang cukup besar dalam
beberapa tahun terakhir. Aktivitas yang bergantung pada perubahan sinaptik, umumnya disebut
plastisitas sinaptik (long-term potentiation - LTP), terlibat dalam berbagai bentuk fungsi
kognitif, termasuk pembelajaran dan memori. Long-term potentiation adalah peningkatan
kekuatan sinaptik yang terus menerus setelah stimulasi frekuensi tinggi dari sinapsis kimiawi
(Paradiso dan Connors, 2007). Fasilitasi atau stabilisasi kejadian plastisitas sinaptik dapat

14
mengarah pada potensi peningkatan fungsi kognitif dalam kondisi patologis dan bahkan
fisiologis. Chen et al melaporkan bahwa suntikan intraperitoneal dari fullerene (C60)
nanocrystals (Nano C60) meningkatkan LTP dan memori spasial tikus. Para penulis
menunjukkan bahwa efek dua arah pada plastisitas sinaptik jangka panjang merusak
keseimbangan antara stabilitas dan fleksibilitas kognisi. Temuan ini konsisten dengan studi yang
lebih baru tentang toksisitas nanoMnO yang dilakukan oleh Li et al. Selain pengaruh pada
kemampuan belajar hewan, penelitian juga menyoroti efek toksik dari nanomaterial pada
perilaku terkait emosi pada hewan dewasa. Misalnya, Kim et al meneliti efek TiO 2NPs pada
perilaku kompleks laki-laki tikus setelah injeksi intracerebroventricular. Dalam studi tersebut,
mereka mengamati induksi malaise dan retardasi motorik umum pada tikus. Studi toksisitas lain
yang dilakukan oleh Cui et al mencoba untuk mengevaluasi dampak pajanan prenatal terhadap
TiO2NPs pada perkembangan otak keturunan. Para penulis menemukan bahwa stres hidup janin
akibat paparan prenatal terhadap TiO2NPs menyebabkan perilaku seperti depresi pada tikus
dewasa.

Gambar Distribusi G7 NP pada beberapa daerah otak dan populasi sel.

15
 Penjelasan : gambar diatas adalah gambar mikroskopik confocal dari cryosection otak
pada tikus 6 jam setelah injeksi intraperitoneal NP G7. Dengan label DAPI (biru), NP G7
(merah), dan sejumlah antibodi (hijau). Pembesaran rendah pada gambar (A-D) dan pembesaran
tinggi pada gambar (E - H). Gambar dari korteks serebral ( A dan E), Corpus callosum ( B dan
F), pleksus koroid ( C dan G), dan organ subfornical ( F dan H). Gambar perbesaran tinggi (E -
H) diambil dari kotak putus-putus yang ditunjukkan dalam (A-D). Gambar perbesaran tinggi (I -
L) yang menunjukkan sel tunggal dari formasi hippocampal. Skala = 50 μ m (A - D) dan 10 μ
m ( E - L). NP adalah nanopartikel; G7 NPs adalah glycopeptides-modified poly-lactide-co-
glycolide NPs; DAPI adalah 4 ′, 6-diamidino-2-fenilindol.

Selain itu, terdapat bukti peran ROS dalam apoptosis neuronal, mekanisme kunci dalam
perkembangan otak (Sorce et al., 2009). Generasi ROS yang diturunkan dari Nox2 dapat
berkontribusi pada fungsi LTP dan memori (Massaad dan Klann, 2011). Otak sangat rentan
terhadap stres oksidatif karena kebutuhan energinya yang tinggi, tingkat antioksidan yang
rendah, dan konsentrasi protein dan lipid seluler yang tinggi. Dengan demikian, gangguan
perilaku pada hewan setelah paparan material nano sebagian besar mungkin disebabkan oleh
produksi ROS yang berlebihan. Selain itu, ROS dapat mengatur saluran ion saraf, kinase, dan
faktor transkripsi (Schappi et al., 2008; Thomas et al., 2007), semuanya dianggap sebagai faktor
penting dalam fungsi otak. Beberapa penelitian lain mengungkapkan pengaruh nanomaterial
pada tingkat neurotransmitter yang terkait dengan memori dan perilaku belajar (Okada et al.,
2013;Hu et al., 2020).

Neurotoksisitas pada neuron

Garis sel saraf yang biasa digunakan untuk penelitian in vitro meliputi:
1. Sel saraf PC12 tikus, yang diturunkan dari pheochromocytoma adrenal tikus sumsum
belakang; Garis sel PC12 biasanya digunakan untuk penilaian neurobiologis dan
neurokimia dari neurotoksisitas yang diinduksi NP;
2. Garis sel neuroblastoma SHSY5Y manusia, yang dianggap sebagai model sel yang
sesuai untuk penilaian neurotoksisitas karena memiliki banyak sifat biokimia dan
fungsional neuron. Selain itu, garis sel kultur primer juga telah digunakan dalam
evaluasi neurotoksisitas NP; garis-garis ini termasuk sel saraf kortikal manusia

16
 (HCN-1A), neuron dopaminergik tikus (N27), sel saraf primer tikus, sel-sel granul
cerebellar tikus striatumor embrionik, dan neuron CA1 dan CA3 hipokampus.

Sekarang telah dikonfirmasi bahwa beberapa nanomaterial dapat mengeksploitasi jalur

endositosis baik untuk melintasi endotel BBB in vivo dan untuk memasuki neuron atau sel glial
secara in vitro. Misalnya, Vilella dkk menemukan bahwa ada serapan NP di neuron hipokampus
yang dibuat dari tikus pada hari embrionik 18 atau 19. Selain akumulasi intraseluler, ada juga
bukti bahwa NP oksida logam yang berbeda mempengaruhi potensi membran neuron dan
meningkatkan laju pembakaran neuron sebesar mengubah respons saluran kalium. Temuan ini
konsisten dengan studi toksisitas nano-CuO pada neuron hipokampus CA1 yang dilakukan oleh
Xu et al. Selain itu, efek toksik ini mungkin memiliki dampak fisiologis pada perilaku hewan,
yang ditunjukkan pada tikus dengan menguji kemampuan kognisi spasial mereka. Baru-baru ini,
dampak material nano pada SSP, khususnya sel saraf hipokampus, telah diilustrasikan dalam
tinjauan komprehensif oleh Yang et al.

Studi tentang komunikasi sel ke sel

SSP terdiri dari jaringan padat neuron dan sel glial yang sangat saling berhubungan. Oleh
karena itu, komunikasi sel-ke-sel merupakan faktor penting dalam memelihara organisasi
fungsional. Dalam beberapa tahun terakhir, tunneling nanotubes (TNTs) dilaporkan sebagai
prinsip baru komunikasi sel ke sel. Sebagai bentuk kontinuitas membran, TNT mungkin
merupakan terowongan komunikasi yang efisien yang memfasilitasi pertukaran informasi dan
material. Komunikasi semacam itu bahkan dapat terjadi dalam jarak yang relatif jauh. Mengingat
bahwa NP dapat diangkut secara intra dan interseluler di dalam vesikel setelah internalisasi oleh
vesikel, transpor sel-ke-sel ini dapat dimediasi oleh struktur mirip TNT dalam sel glial dan
neuron secara in vitro. Selanjutnya, pengangkutan bergantung pada F-aktin dan ditingkatkan
dengan induksi struktur mirip TNT. Namun demikian, pengaruh material nano pada komunikasi
sel-ke-sel di SSP masih belum jelas; dengan demikian, diperlukan studi yang lebih mendalam.

Masalah lain dan penelitian masa depan sulit dikendalikan dan dapat dipengaruhi oleh
berbagai hal prospek
Di samping kemajuan pesat dalam pengembangan bahan berbasis nanoteknologi, menjadi
penting untuk menjelaskan toksisitas TN. Namun, sistem evaluasi keamanan material nano
tertinggal jauh di belakang pengembangan dan aplikasi mereka yang muncul. Meskipun peneliti

17
telah memperoleh beberapa informasi penting, risiko eksposur NP tidak dipahami secara
memadai untuk memungkinkan pengembangan penilaian risiko berbasis sains. Karena
investigasi terhadap kemungkinan efek berbahaya dari NP baru dilakukan selama beberapa
tahun, tidak mengherankan bahwa banyak studi mengalami kekurangan. Oleh karena itu, sistem
pengujian dan evaluasi yang lebih baik sangat dibutuhkan. Keterbatasan metode pengujian
Sitotoksisitas in vitro biasanya diperkirakan dengan uji kolorimetri. Namun, Monteiro-Riviere
dkk menentukan bahwa uji MTT dan uji merah netral, dua uji berbasis pewarna klasik, dapat
menghasilkan hasil yang tidak valid dalam pengujian viabilitas sel bila diterapkan dengan
nanomaterial karena interaksi dan / atau adsorpsi produk pewarna / pewarna. Selain itu, bahan
nano karbon dapat berinteraksi dengan penanda pengujian untuk menyebabkan hasil variabel
dalam studi toksikologi klasik. Temuan ini sejalan dengan hasil Griffiths et al. Untuk alasan ini,
interaksi tersebut dalam uji sitotoksisitas harus dipertimbangkan. Tantangan lain dari metode
pengujian terletak pada deteksi akurat material nano pada objek biologis. Saat ini, aliran
sitometri, spektroskopi massa plasma gabungan yang diinduksi, mikroskop confocal, teknik
pelacak radioaktif, dan mikroskop elektron transmisi yang dikombinasikan dengan spektroskopi
sinar-X dispersif energi biasanya digunakan untuk mempelajari serapan seluler dari NP. Namun,
tidak ada satu metode pun yang memuaskan dalam memperoleh informasi yang tepat untuk
semua jenis nanomaterial. Oleh karena itu, kombinasi penggunaan metode pengujian yang
berbeda disarankan untuk memberikan hasil yang lebih akurat. Selanjutnya, tes yang berbeda
harus dilakukan sesuai dengan jenis NP tertentu, serta teknik pencitraan. Keterbatasan model
eksperimental Dalam kondisi in vivo, material nano dapat menghasilkan efek yang berbeda
dibandingkan dengan percobaan in vitro. Meskipun pengamatan dari penelitian in vivo lebih
mewakili situasi organisme hidup, dalam beberapa kasus, penelitian ini mungkin memberikan
hasil yang tidak akurat. Tantangan tersebut sebagian besar terkait dengan model eksperimental
(hewan) yang faktor tak terduga. Selain itu, pertimbangan lain, seperti dosimetri, optimalisasi
dispersi NP, evaluasi interaksi antara nanomaterial dan sel, dan biodistribusi, menciptakan lebih
banyak tantangan untuk penilaian toksisitas in vivo. Dibandingkan dengan penelitian pada
hewan, penelitian in vitro lebih murah, ambigu secara etis, dan yang terpenting, lebih mudah
dikendalikan dan berkembang biak. Langkah pertama untuk memahami bagaimana NP akan
bereaksi dalam tubuh sering kali melibatkan studi kultur sel. Peningkatan jumlah studi
sitotoksisitas in vitro dari berbagai bahan nano menggunakan berbagai garis sel, waktu inkubasi,

18
dan uji kolorimetri telah dipublikasikan. Namun, banyak masalah masih ada dalam penelitian
yang dilakukan dalam kondisi in vitro. Pertama, pilihan yang tepat dari satu set garis sel sensitif
dan uji in vitro yang mengukur titik akhir sitotoksisitas yang berbeda sangat penting untuk
memastikan identifikasi yang akurat dari sitotoksisitas material nano. Namun, untuk NP tertentu,
pemilihan garis sel yang paling sesuai masih sulit. Untuk beberapa hal, model sel yang lebih
sensitif diperlukan untuk menentukan sitotoksisitas dari jenis NP tertentu. Salah satu contohnya
adalah dengan penggunaan nano-ZnO. Mayoritas studi toksisitas khusus untuk ZnONP
mengandalkan penggunaan garis sel yang diabadikan, yang menunjukkan kepekaan yang
berubah terhadap bahan asing / bahan kimia karena perubahannya dalam proses metabolisme dan
ketidakstabilan genetik yang signifikan. Namun demikian, toksisitas ZnO NPs pada sel manusia
primer normal dan potensi efek imunomodulatornya sering diabaikan. Selanjutnya, respon
sitotoksik bervariasi dengan berbagai jenis garis sel dan bahan nano, sehingga sulit untuk
mengembangkan model prediksi karena kurangnya penyelidikan yang rinci dan sistematis.
Akhirnya, efek toksik NP pada garis sel tikus (model in vitro yang umum) mungkin tidak dapat
secara akurat mencerminkan efek pada manusia. Penyelidikan in vitro tidak akan dapat
sepenuhnya menentukan situasi in vivo sampai analisis in vivo lebih lanjut telah dilakukan untuk
mengkonfirmasi temuan mereka. Dalam review terbaru oleh Donaldson et al penulis
menyatakan bahwa sel dalam kultur tidak mengalami berbagai perubahan patogen yang mungkin
terjadi dalam kondisi in vivo, yang sebagian terkait dengan masalah translokasi, toksikokinetik,
dan respons jaringan terkoordinasi. Beberapa penelitian lain juga meragukan hasil yang
diperoleh dari model-model in vitromodel, terutama model-model dalam kondisi terendam ketika
NP tersuspensi dalam media yang dapat mempengaruhi dispersi dan disolusi. Tantangan utama
penilaian neurotoksisitas NP dirangkum dalam Gambar 5

19
 Gambar 5 masalah yang ada dalam menilai neurotoksisitas NP. catatan: Skema ini merangkum batasan
utama dari metode pengujian dan model eksperimental. Singkatan: NP, nanopartikel; NR, merah netral;
ICP-MS, spektroskopi massa plasma gabungan yang diinduksi; eDX, spektroskopi sinar-X dispersif
energi; MTT, 3- (4,5Dimethylthiazol-2-yl) -2,5-difeniltetrazolium bromida.

Kemungkinan prospek penelitian di masa depan

Sampai saat ini, pemahaman tentang neurotoksikologi material nano masih sangat terbatas.
Diperlukan penelitian yang mendalam, terutama ketika mempertimbangkan penekanan baru-baru
ini pada penggunaan nanocarrier untuk pengiriman obat di otak. Di sini, kami telah memberikan
beberapa saran tentang prospek penelitian yang memerlukan penyelidikan lebih lanjut. Seperti
yang ditunjukkan oleh Laurent et al, efek korona protein pada interaksi sel NP sering diabaikan
pada antarmuka nano-bio. Karena penelitian biologi in vitro biasanya menggunakan jumlah

20
rendah (pengenceran 10% atau kurang, tergantung pada jenis sel) serum yang diturunkan dari
hewan, yang terdapat dalam penelitian in vivo, korona NP cenderung terbentuk pada rasio
protein-ke-NP yang berbeda antara studi in vitro dan in vivo. Dalam hal ini, model in vitro yang
mengevaluasi NP untuk penyakit terkait otak seharusnya menggunakan NP berlapis korona
untuk mencerminkan situasi in vivo yang sebenarnya, karena korona protein dapat menutupi
kelompok fungsional yang dirancang dan secara signifikan mengurangi kemampuan NP untuk
melewati penghalang sel. Pertimbangan lain sehubungan dengan korona protein muncul dari
evaluasi evolusi strukturalnya dari waktu ke waktu. NP akan berinteraksi dengan jaringan dan sel
dalam organisme hidup, termasuk melewati membran seluler dan diangkut ke lokasi subseluler
terakhir. Oleh karena itu, perubahan rinci dari korona material nano pada tahapan ini dan
implikasinya memerlukan studi lebih lanjut. Selain itu, seperti yang dijelaskan dalam
keterbatasan model in vitromodel, garis sel yang lebih sesuai harus dikembangkan. Takhar dan
Mahant, baru-baru ini menyarankan kemungkinan menggunakan garis sel transgenik yang
membawa gen manusia, yang mungkin lebih prediktif untuk situasi yang melibatkan manusia
daripada sel tikus tradisional.

Berkenaan dengan studi hewan, efek tahapan kehidupan harus dipertimbangkan. Pertama,
kehidupan janin dan masa kanak-kanak merupakan masa yang rentan. Tahapan kehidupan ini
sangat penting untuk pertumbuhan cepat seluruh organisme, diferensiasi sel, dan organogenesis,
dan dalam kasus otak, terlibat dalam proses kritis dalam perkembangan saraf. Jika paparan racun
terjadi pada tahap ini, mereka dapat mengubah lintasan perkembangan otak, yang mungkin
memiliki efek kecil di tahun-tahun awal dan implikasi yang mendalam di kemudian hari. Saat
ini, bukti yang berkembang dari penelitian hewan telah mengkonfirmasi bahwa SSP sangat
rentan terhadap kerusakan kimia selama perkembangannya. Oleh karena itu, perhatian khusus
harus diberikan untuk menentukan pengaruh paparan material nano pada tahap perkembangan
ini. Penuaan juga mungkin merupakan faktor penting dalam kerentanan neurotoksisitas yang
diinduksi NP. Otak tua telah menunjukkan peningkatan sitokin dan aktivasi mikroglial dan lebih
rentan terhadap gangguan lingkungan, terutama pada rangsangan pro-inflamasi. termasuk
berbagai TN. Dalam beberapa tahun terakhir, telah diprediksi bahwa banyak penyakit
neurodegeneratif dapat terjadi akibat paparan kumulatif sepanjang hidup. Temuan ini konsisten
dengan pengamatan dalam penelitian toksisitas lain yang dilakukan oleh Qin et al. Dalam
penelitian hewan ini, peradangan saraf kronis sebagai respons terhadap injeksi tunggal

21
lipopolisakarida intraperitoneal, stimulus inflamasi yang kuat, pada tikus dewasa muda hanya
memuncak pada neurotoksisitas dopaminergik pada hewan tua. Faktor terkait lainnya, seperti
jenis kelamin dan latar belakang genetik, juga harus diselidiki. Baru-baru ini, dilaporkan bahwa
ekspresi diferensial dari enzim paraoxonase 2 (PON2) antara otak laki-laki dan perempuan
mungkin bertanggung jawab atas sejumlah perbedaan jenis kelamin sehubungan dengan
neurotoksisitas. Interaksi gen-nanomaterial juga memainkan peran penting dalam neurotoksisitas
yang diinduksi NP, karena polimorfisme genetik dapat memodulasi kerentanan individu terhadap
nanomaterial. Mengingat peran penting stres oksidatif, perbedaan enzim antioksidan yang
berdasarkan genetika dapat mempengaruhi individu tertentu terhadap neurotoksisitas polusi
udara yang signifikan. Eksposur yang terus menerus dapat menghasilkan akumulasi NP yang
signifikan dalam organ target sekunder. Oleh karena itu, penting untuk mendapatkan data tentang
karakteristik retensi TN baik di organ target primer maupun sekunder, serta jalur eliminasi NP.
Belum ada data tentang eliminasi NP di SSP yang tersedia. Bisa dibayangkan bahwa CSF,
melalui koneksi ke sistem limfatik hidung dan sirkulasi darah, bisa menjadi jalur ekskresi untuk
otak, dan topik ini harus diselidiki dalam penelitian selanjutnya. Segal menyimpulkan bahwa
CSF dapat bertindak tidak hanya sebagai kompartemen untuk distribusi zat ke berbagai wilayah
otak tetapi juga jalur eliminasi produk limbah ke dalam sirkulasi darah karena otak tidak
memiliki limfatik. Namun, ini adalah studi tunggal dan perlu dilengkapi dengan penelitian yang
lebih sistematis tentang eliminasi material nano.

22
 RANGKUMAN

Nanomaterial telah memberikan kontribusi besar bagi kedokteran gigi moern di berbagai
bidang, termasuk resin komposit dan sistem ikatan, bahan pelapis untuk implant gigi, dan
restorasi gigi. Aplikasi luas dari nanonmaterial gigi ini telah menciptakan lebih banyak peluang
paparan ke nanopartikel ini baik pada staf kedokteran gigi maupun ke pasien. Karena SSP
mungkin merupakan organ target potensial dari nanomaterial, penting untuk menentukan efek
neurotoksis dari nanopartikel. Meskipun dampak nanopartikel terhadap SSP telah mendapat
banyak perhatian dalam beberapa tahun terakhir, data dan temuan yang diperoleh dari studi in
vivo dan in vitro masih terbatas. Keterbatasan metode pengujian saat ini dan model
eksperimental juga membuat sulit untuk membangun sistem evaluasi berbasis sains. Sistem
pengujian dan evaluasi yang lebih baik sangat dibutuhkan.

23
 DAFTAR PUSTAKA

Chen L, Miao Y, Chen L, et al. The role of low levels of fullerene C60 nanocrystals on enhanced
learning and memory of rats through persistent CaMKII activation. Biomaterials.
2014;35(34):9269–9279.

Cui Y, Chen X, Zhou Z, et al. Prenatal exposure to nanoparticulate titanium dioxide enhances
depressive-like behaviors in adult rats. Chemosphere. 2014;96:99–104.

Hu R, Gong X, Duan Y, et al. Neurotoxicological effects and the impairment of spatial

recognition memory in mice caused by exposure to TiO2 nanoparticles. Biomaterials.
2010;31(31):8043–8050.

Kim EM, Palmer P, Howard V, et al. Effect of Intracerebroventricular injection of TiO2

nanoparticles on complex behaviour in the rat. J Nanosci Nanotechno.
2013;13(12):8325–8330.

Li T, Shi TT, Li XB, Zeng SL, Yin LH, Pu YP. Effects of Nano-MnO2 on dopaminergic neurons
and the spatial learning capability of rats. Int J Env Res Pub He. 2014;11(8):7918–7930.

Massaad CA, Klann E. Reactive oxygen species in the regulation of synaptic plasticity and
memory. Antioxid Redox Sign. 2011;14(10): 2013–2054.

Okada Y, Tachibana K, Yanagita S, Takeda K. Prenatal exposure to zinc oxide particles alters
monoaminergic neurotransmitter levels in the brain of mouse offspring. J Toxicol Sci.
2013;38(3):363–370.

Paradiso MA, Bear MF, Connors BW (2007). Neuroscience: Exploring the Brain. Hagerstwon,
MD: Lippincott Williams & Wilkins. p. 718. ISBN 978-0-7817-6003-4

Schappi MG, Jaquet V, Belli DC, Krause KH. Hyperinflammation in chronic granulomatous
disease and anti-inflammatory role of the phagocyte NADPH oxidase. Semin
Immunopathol. 2008;30(3):255–271.

Sorce S, Krause KH. NOX enzymes in the central nervous system: from signaling to disease.
Antioxid Redox Sign. 2009;11(10):2481–2504.

24
Thomas MP, Chartrand K, Reynolds A, Vitvitsky V, Banerjee R, Gendelman HE. Ion channel
blockade attenuates aggregated alpha synuclein induction of microglial reactive oxygen
species: relevance for the pathogenesis of Parkinson’s disease. J Neurochem.
2007;100(2): 503–519.

25