PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN

Wayson Stain dimaksudkan untuk secara cepat menunjukkan

bakteri bipolar
Karakteristik pewarnaan Yersinia pestis. Spesimen yang
cocok untuk
Noda Wayson akan mencakup aspirasi bubo, dahak, dan
apusan darah
jaringan dari paru-paru, limpa atau hati. Pewarnaan
polikromatik diferensial ini
dapat dilihat dengan berbagai jenis bakteri dan karenanya
Wayson Stain
sendiri bukan diagnostik untuk Yersinia pestis. Identifikasi
lengkap
Yersinia pestis harus dibuat mengikuti semua pedoman CDC.
RINGKASAN
Wayson Stain memberikan pewarnaan kontras sehingga
bakteri, jaringan, dan
sel-sel darah mudah terlihat di bawah evaluasi mikroskopis.
UNTUK PENGGUNAAN DIAGNOSTIK IN VITRO SAJA
TINDAKAN PENCEGAHAN
Untuk pertimbangan keamanan, analisis sampel dan biakan
harus dilakukan
dilakukan dalam kabinet keamanan biologis Kelas II (BSC)
bersertifikat. Apa saja
prosedur laboratorium yang melibatkan bahan infeksi atau
kultur memerlukan
peralatan keselamatan pelindung pribadi standar, seperti
sarung tangan,
jas laboratorium (atau jas sekali pakai), dan pelindung mata.
Dekontaminasi spora dapat dilakukan secara komersial
tersedia larutan pemutih, diencerkan dengan konsentrasi kerja
yang sesuai.
Countertops, permukaan kerja dan instrumen dapat dihapus
dengan
larutan pemutih. Persediaan lab (pipet, loop, slide mikroskop,
dll.)
harus direndam dalam larutan dekontaminasi dan kemudian
diautoklaf.
Untuk informasi tambahan tentang dekontaminasi biologis
yang diketahui
kultur atau sampel agen patogen, lihat pedoman CDC.
STABILITAS DAN PENYIMPANAN
Solusi pewarnaan stabil selama 18 bulan sejak tanggal
pembuatan.
Lihat tanggal kedaluwarsa yang tercantum pada botol reagen
noda. Simpan
larutan pewarna pada suhu 15-30ºC (suhu kamar) dari cahaya
langsung.
KOLEKSI DAN PENGOLAHAN SPESIMEN
Persiapan apusan untuk pewarnaan
Wayson Stain digunakan untuk penilaian cepat spesimen. Itu
bahan yang sesuai untuk pewarnaan termasuk bubo aspirate,
dahak, darah
apusan, jaringan hati, jaringan paru-paru dan jaringan limpa.
1. Siapkan sediaan apus atau sentuhan tipis pada slide.
Keringkan spesimen pada slide.
2. Perbaiki apusan dalam metanol absolut selama minimal tiga
menit.
3. Keluarkan spesimen dari metanol absolut. Izinkan
metanol yang tersisa pada slide untuk menguap sepenuhnya.
4. Sebagai alternatif, slide mungkin dilengkapi heat-fix.
(Fiksasi metanol akan
menunjukkan lebih banyak kontras pewarnaan daripada
fiksasi panas).
KONTROL KUALITAS PENGGUNA
1. Kontrol Positif: Yersinia spp. atau Pasteurella spp.
(Diinkubasi untuk
72 jam).
2. Kontrol Negatif: Bacillus subtilis (Tumbuh pada SBA 18-
24 jam).
3. Lakukan tes noda dengan suspensi yang diambil dari kultur
sebagai
tercantum di atas. Slide kontrol harus diuji setiap hari
pengujian.
4. Hasil Di Luar Kontrol: Periksa kembali kemurnian dan
identifikasi
strain kontrol yang digunakan. Pastikan Yersinia atau
Pasteurella spp.
ditanam setidaknya selama 72 jam. Ulangi tes noda.
PROSEDUR
Bahan Yang Disediakan: Wayson Stain.
Bahan Tidak disediakan: Slide Mikroskop, Methanol Absolut
dan
Organisme QC.
Prosedur pewarnaan
1. Banjir apusan tetap dengan Wayson Stain. Biarkan saja
5-10 detik. Pewarnaan noda yang berkepanjangan akan
menghasilkan a
latar belakang yang lebih gelap, yang mungkin menutupi sel.
2. Bilas dengan air ledeng.
3. Keringkan apusannya.
4. Lihat di bawah mikroskop cahaya dengan perendaman
minyak.
HASIL YANG DIHARAPKAN
Morfologi "peniti" bipolar yang konsisten dari basil pendek
yang montok
karakteristik Yersinia spp., Pasteurella spp. dan beberapa
lainnya
organisme Semua Yersinia pestis dapat bernoda sebagai sel
bipolar, tetapi semua bipolar
sel pewarnaan bukan Yersinia pestis. Bakteri diambil dari
segar
agar yang diinokulasi atau pertumbuhan kaldu mungkin
menunjukkan sangat sedikit bipolaritas;
Namun, setelah inkubasi yang berkepanjangan, sel akan mulai
menunjukkan
morfologi pin keselamatan bipolar karakteristik. Saat noda
ternoda
menghasilkan morfologi keselamatan pin, spesimen harus
diteruskan ke departemen kesehatan negara bagian Anda
untuk evaluasi.