KEMENTERIAN RISET,TEKHNOLOGI DAN PENDIDIKAN TINGGI

BAGIAN MIKROBIOLOGI FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS MALIKUSSALEH
Jl. H. Meunasah Uteunkot – Cunda Lhokseumawe
Website : fk.unimal.ac.id

PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

BLOK 4.1 (PENYAKIT INFEKSI TROPIS)

dr. Juwita Sahputri, MKT

Dahniar AMK

BAGIAN MIKROBIOLOGI FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS MALIKUSSALEH
CUNDA – LHOKSEUMAWE

NAMA :
NIM :
KELOMPOK :

[Type text]
Blok 4.1 Fakultas Kedokteran Universitas Malikussaleh

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Puji dan syukur kepada Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat, bimbingan,
petunjuk-Nya sehingga dapat selesainya penyusunan Lembar Penuntun Praktikum anaerob
pada blok Penyakit infeksi tropis untuk keperluan praktikum di Laboratorium Mikrobiologi.
Terbitnya lembar penuntun praktikum ini diharapkan mahasiswa/i perlu membaca
terlebih dahulu sebelum melaksanakan kegiatan praktikum, agar setiap kegiatan praktikum
dapat berjalan dengan baik dan lancar. Mahasiswa/i juga dianjurkan untuk membaca bahan
ajar/kuliah yang telah diberikan sebelumnya yang berhubungan dengan topik yang akan
dipraktikumkan.
Banyak terima kasih kami ucapkan kepada staff Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Malikussaleh yang telah berpartisipasi dalam penyusunan/penyempurnaan isi
lembar penuntun ini.
Kami menyadari bahwa lembar penuntun praktikum ini masih banyak kekurangan, oleh
sebab itu kami menerima saran dan kritik yang bersifat membangun dari para pembaca.
Akhir kata kami mengucapkan terima kasih, semoga lembar penuntun praktikum ini dapat
memberikan manfaat di kemudian hari.

Lhokseumawe,

Ka. Bagian Mikrobiologi

FK Unimal

i
Blok 4.1 Fakultas Kedokteran Universitas Malikussaleh

DAFTAR ISI

Kata Pengantar ………………………………………………………………………...i

Daftar Isi ……………………………………………………………………………....ii
Peraturan Bekerja di Laboratorium Mikrobiologi……………………………………...iv
Praktikum Anaerob .. …………………………………………………………………. 1

ii
Blok 4.1 Fakultas Kedokteran Universitas Malikussaleh

PERATURAN BEKERJA DI LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

A. PERATURAN UMUM :
Setiap Praktikan :
1. Harus memakai baju praktikum yang bersih sebelum memasuki Laboratorium.
2. Harus menyediakan : - Kain lap / serbet yang bersih
- Kain flannel kuning yang bersih
- Pensil penulis kaca/spidol permanent
- Buku Penuntun Praktikum Mikrobiologi & Laporan
Praktikum

3. Dilarang merokok, makan atau minum di dalam ruangan laboratorium.

4. Sudah mempersiapkan diri / mempelajari topik praktikum sebelum praktikum.
5. Harus bekerja pada meja / tempat yang telah ditetapkan untuknya dan menggunakan
mikroskop yang telah ditentukan sampai praktikum selesai.

B. PERATURAN KHUSUS :
1. Tas, buku serta alat-alat keperluan praktikum disimpan di dalam laci atau rak buku
yang tersedia, jangan diletakkan di atas meja / tempat bekerja.
2. Alat-alat atau buku-buku yang selalu dipakai pada praktikum harus dijauhkan dari
mulut.
3. Kotoran-kotoran yang mengandung bahan infeksi harus dibuang pada tempat yang
mengandung desinfektan yang tersedia
4. Kotoran yang tidak mengandung bahan infeksi harus di buang pada tempat tertentu
yang tersedia.
5. OSE (inoculating needle) jangan diletakkan di sembarangan tempat dan selalu harus
di ingat bahwa sebelum dan sesudah menggunakan OSE harus di sterilkan dengan
cara memijarkan nya di atas nyala api.
6. Lakukan pengecatan (staining), perendaman (mounting) dan pencucian zat warna
pada bak pencuci.
7. Bila ada perbenihan bakteri yang pecah atau tertumpah agar segera disiram dengan
larutan yang mengandung phenol (desinfektan) dan dilaporkan pada staff bagian
dan staff laboran.

iii
Blok 4.1 Fakultas Kedokteran Universitas Malikussaleh

8. Setiap medium yang telah ditanami supaya diberi label, nama bahan, nomor
kelompok/grup, dan lain sebagainya.
9. Media yang telah ditanam diletakkan atau dieramkan di dalam lemari pengeraman
(INCUBATOR) dalam posisi terbalik.
10. Cucilah tangan dengan antiseptik yang disediakan setelah selesai kegiatan
praktikum.
11. Susun, kembalikan dan bersihkan mikroskop, meja serta alat-alat yang digunakan
pada tempatnya sebelum meninggalkan ruangan laboratorium.
12. Bekerjalah dengan teliti, tertib dan sopan, jangan terlalu banyak bicara/bercanda.
13. Bila ada sesuatu hal yang kurang jelas mohon ditanyakan pada staff bagian dan staff
laboran.

INGATLAH SELALU BAHWA ANDA BEKERJA DENGAN BAKTERI, JAMUR & VIRUS YANG PATOGENIK/INFECTIOUS !!!

iv
 PERTUMBUHAN BAKTERI ANAEROB

dr. Juwita Sahputri

TUJUAN :
Mengetahui tehnik isolasi kuman-kuman anaerob yang sering menyebabkan
penyakit infeksi.

PENDAHULUAN :
Bakteri Anaerob adalah bakteri yang tidak membutuhkan oksigen untuk
partumbuhan dan metabolismne, tetapi memperoleh energinya dari reaksi fermentasi.
Bakteri anaerob tidak akan tumbuh dengan adanya oksigen dan mati oleh oksigen
atau radikal oksigen toksik.

Klasifikasi Bakteri anaerob:

Basil Kokus
Bacteroides Veillonella
Prevotella

Gram Negatif Porphyromonas

Fusobacterium
Actinomyces Peptostreptococcus
Lactobacillus

Gram Positif Propionibacterium

Bifidobacterium
Clostridium

Pembagian bakteri anaerob, yaitu:

- Anaerob Obligat, yaitu bakteri berspora yang hanya bisa tumbuh tanpa O2,
O2 bersifat toksik baginya
 - Anaerob Fakultatif, yaitu bakteri tidak berspora yang dapat tumbuh
dengan atau tanpa adanya O2, menggunakan O2 melalui proses fermentasi
untuk mendapat energi. Bakteri ini tumbuh sama baiknya atau lebih baik
dalam kondisi anaerob dibandingkan aerob.
- Anaerob Aerotoleran, yaitu bakteri yang dapat tumbuh tanpa O2, tapi tidak
mati bila kontak dengan O2..
Pada manusia, bakteri ini umumnya hidup di saluran pencernaan, tetapi
mereka juga dapat ditemukan di luar tubuh, termasuk di tanah, air, dalam makanan,
dan hewan. Infeksi bakteri anaerob umumnya ditandai timbulnya nanah,
pembentukan abses, dan kerusakan jaringan.

Teknik Isolasi :
Teknik isolasi yang paling mudah dilakukan adalah dengan menggunakan bejana
anaerob. Terdapat dua cara menggunakan bejana anaerob, yaitu:
Ada dua cara :
1. Meletakkan gas-pak dalam bejana anaerob, yang berfungsi sebagai
generator H2 dan CO2, serta palladium sebagai katalisator.
2. Dengan bejana yang memiliki teknik evacuation-replacement, udara yang
ada di dalam bejana dikeluarkan dengan bantuan pompa hisap. Kemudian
dimasukkan campuran gas H2 dan CO2 dengan perbandingan 9 : 1 dan
palladium sebagai katalisator.

Cara Kerja Bejana Anaerob menggunakan Gas-Pak:

1. Masukkan perbenihan yang telah ditanamkan ke dalam bejana.
2. Buka pembungkus indikator (disposible anaerobic indicator) dan letakkan
dalam bejana. Indikator segera berubah menjadi biru begitu kontak dengan
udara, tetapi akan hilang warnanya dalam suasana anaerob.
3. Buka generator H2 dan CO2 (gas-pak), diaktifkan (dengan menambahkan 100
ml air) dan letakkan dalam posisi tegak dalam bejana)
 4. Bejana ditutup rapat, lalu diinkubasikan dalam inkubator. Pembacaan koloni
dilakukan 24 jam kemudian. Bila pertumbuhan kurang baik inkubasi ulang
dilakukan untuk 24 jam berikutnya.

Alat dan bahan:

A. Bahan Praktikum
- Biakan murni bakteri anaerob atau spesimen (Clostridium)
- Robertson’s cooked meat medium
- Medium Kaldu thioglycolate
Medium Kaldu thioglycolate dan cook meat medium mengandung bahan
preduksi yang mempertahankan suasana anaerob: kuman anaerob dapat tumbuh pada
bagian dasar media tersebut meskipun tanpa menggunakan bejana anaerob, karenanya
di samping untuk isolasi kuman anaerob kaldu thioglycolate dan cook meat medium
bisa pula digunakan sebagai back up media.
B. Alat Praktikum
- Inkubator
- Gaspack
- Anaerobic jar
- Katalis (paladium)
- Medium (Robertson’s cooked meat medium, Thioglycolate fluid medium,
blood agar)
- Pipet tetes steril
- Cawan petri
- Indikator anaerobic (metilen blue)

Tugas yang dikerjakan:

- Amati koloni pertumbuhan bakteri anaerob
- Amati morfologi sel bakteri dibawah mikroskop
- Buat laporan Praktikum
Referensi:

1. Jawetz, E, Melnick, J.L., Adelberg. E.A. : Review of Medical Microbiology, 25 th

edition. Terjemahan Penerbit Buku Kedokteran EGC, 2010. Mikrobiologi
Kedokteran Jawetz, Melnick, & Adelberg. Edisi 25. Jakarta: EGC.
2. Norris, J. R. & Ribbons, D. W. 1969. Methods in Microbiology. London: academic
Press Inc.
3. Sjah, Rahmat. 2014. Penuntun Mikrobiologi Kedokteran. Medan: Departemen
Mikrobiologi FK-USU.
4. Iswara, R : Penuntun Praktikum Mikrobiologi Kedokteran, Jilid II. Dikeluarkan
oleh Bagian Mikrobiologi FK-USU Medan 1976.