1 Memastikan standar keamanan praktikum telah terpenuhi, seperti memakasi sarung tangan, jas laboratorium, masker, dan sepatu tertutup
2 Mensterilkan tangan dan meja
menggunakan alkohol 70% dan tisu kemudian menyalakan spiritus
3 Mendekatkan jarum ose ke api
spiritus, kemudian memasukkan jarum ose ke alkohol pendingin
4 Mengambil kaca preparat yang
telah direndam dengan alkohol 70% dan mengeringkannya di dekat api spiritus
5 Meneteskan air suling (aquades)
ke atas kaca preparat
6 Mengambil 1 ose biakan dengan Pengambilan dilakukan
menggunakan jarum ose dari perlahan agar tidak terlalu dalam tabung reaksi berisi banyak biakan bakteri yang medium NA miring, pastikan terambil yang dapat kondisi mulut tabung reaksi menyulitkan visualisasi berada dengan spiritus morfologi sel 7 Mensterilkan dan menutup kembali tabung reaksi NA miring 8 Memindahkan 1 ose biakan ke kaca preparat, kemudian mengaduk dengan menggunakan air suling
9 Melakukan fiksasi preparat Bertujuan agar cairan di atas
dengan melewatkan kaca preparat preparat menguap dan hanya di atas nyala api spiritus sebanyak tersisa bakteri serta 2-3 kali melekatkan bakteri pada kaca preparat
10 Meneteskan larutan kristal violet Menghasilkan warna ungu
sebanyak 2 tetes di atas biakan pada preparat pada kaca preparat dan mendiamkan selama 1 menit
11 Melakukan proses dekolorisasi Memudarkan warna bakteri
dengan meneteskan 2 tetes Gram negatif alkohol asetone di atas kaca preparat dan mendiamkan selama 30 detik sebelum membilasnya dengan air 12 Menambahkan 2 tetes pewarna Memberi warna kemerahan safranin di atas kaca preparat dan pada Gram negatif mendiamkannya selama 1 menit sebelum membilas dengan air suling 14 Mengamati bakteri di bawah mikroskop dengan perbesaran 100x
15 Mencatat dan menggambar hasil Bakteri gram positif :
pengamatan berwara ungu Bakteri gram negatif : berwarna kemeraha/pink