NAMA : MARGARITA BATLAJAR

NIM : 18 3145 353 167

Tujuan :Teknik pewarnaan von kossa ini untuk mendemostrasikan

endapan kalsium atau garam kalsium sehingga tidak spsifik
untuk ion kalsium itu sendiri.
Prinsip : pewarnaan perak akan mengantikan kalsium dalam garam
kalsium
Garam perak direduksi menjadi black metallic silver
sehingga dapat dilihat.
Fiksasi : formalin buffer
Pemotongan : blok paraffin

Von Kossa pewarnaan bagian tulang rawan digunakan untuk

mengkonfirmasi keberadaan dari CC. Pasien OA dibedakan dari pasien CC oleh
tidak ada kalsifikasi yang terlihat antara tulang paha dan tibia pada sinar-X,
karenaserta menggunakan pewarnaan von Kossa pada bagian tulang rawan. OA
pasien dan pasien CC memiliki usia yang sama; kontrol yang sehat usia lebih
muda. Sampel ketebalan penuh dibedah dari sebagian besar area tulang rawan
artikular yang dimuat di kompartemen medial dari dataran tinggi
tibialis(Franziska Meye.2021)
Von Kossa pewarnaan sampel tulang rawan manusia dilakukan untuk
menilai lokasi dan jumlah kalsifikasi. Secara umum CC ditandai dengan
apengendapan kristal(Franziska Meye.2021)
Kalsium adalah mineral penting yang paling banyak dibutuhkan oleh
manusia. Kalsium bermanfaat untuk membantu proses pembentukan tulang dan
gigi serta diperlukan dalam pembekuan darah, kontraksi otot, transmisi sinyal
pada sel saraf. Kalsium dapat membantu mencegah terjadinya osteoporosis.
Fungsi utama kalsium adalah sebagai penggerak dari otot-otot, deposit utamanya
berada di tulang dan gigi, apabila diperlukan, kalsium ini dapat berpindah ke
dalam darah.Kalsium terdapat dalam tubuh dengan jumlah yang lebih dari pada
unsur mineral lainnya. Diperkirakan 2% berat badan orang dewasa atau 1,0 – 1,4
kg terdiri dari kalsium, pada bayi 25-30 gram. Setelah usia 20 tahun secara normal
akan terjadi penempatan sekitar 1200 gram kalsium dalam tubuh. Sebagaian besar
kalsium terkonsentrasi dalam tulang rawan dan gigi, sisanya terdapat dalam cairan
tubuh dan jaringan lunak(Prawansa Amran.2018)
Peranan kalsium dalam tubuh adalah membantu membentuk tulang dan
gigi serta mengukur proses biologis dalam tubuh, diantaranya adalah pembekuan
darah, mempertahankan kepekaan normal jantung, otot dan saraf serta dalam
aspek permeabilitas membran yang berlainan(Prawansa Amran.2018)
Umumnya kadar kalsium dalam darah secara hati-hati dikontrol. Ketika
kadar kalsium darah menjadi rendah (hipokalemia), tulang mengeluarkan kalsium
untuk mengembalikkan kadar normal kalsium dalam darah tinggi (hiperkalemia),
kalsium yang berlebih yang disimpan dalam tulang akan dikeluarkan dari tubuh
melalui air seni dan feses, agar kalsium dapat diserap oleh tubuh secara efektif,
kita harus mengkonsumsinya bersama dengan vitamin D(Prawansa Amran.2018)
Pewarnaan Von Kossa dianggap sebagai standar emas dalam pewarnaan
toologisnya untuk mendeteksi kalsium dalam kultur sel dan plak aterosklerotik.16
Namun demikian, pewarnaan Von Kossa tidak spesifik untuk kation kalsium dan
bergantung pada keberadaan kation kalsium. anion garam, yang mungkin
karbonat, fosfat, oksalat, sulfat, klorida atau sulfo sianida.17 Selain itu, pewarnaan
Von Kossa mungkin tidak cukup sensitif untuk mendeteksi lebih kecil dan lebih
banyak(M. Relucenti,dkk.2010)
pewarnaan von Kossa untuk menunjukkan endapan kalsium atau garam
kalsium dan tidak spesifik untuk ion kalsium itu sendiri. Ketika bagian jaringan
diolah dengan larutan perak nitrat, perak diendapkan dengan mengganti kalsium,
direduksi oleh cahaya kuat, dan dengan demikian divisualisasikan sebagai perak
metalik. Metode tambahan terkadang digunakan bersama dengan teknik ini untuk
mengkonfirmasi keberadaan kalsium seperti Alizarin Red, yang mendeteksi
deposit kalsium(M. Relucenti,dkk.2010)
Telah disarankan bahwa dalam technic silver cations menggantikan
kalsium yang terikat dengan kelompok fosfat atau karbonat dan kemudian
dikurangi menjadi perak logam hitam selama paparan cahaya. Namun, dalam
percobaan tabung uji fosfat perak mempertahankan warna kuningnya selama
berhari-hari. Perbedaan antara reaksi kalsium fosfat murni dan endapan kalsium
dalam jaringan sudah ditekankan oleh von Kóssa; dia hanya menganggap
pewarnaan kuning awal diagnostik kalsium untuk kalsium fosfat dan menyesalkan
pencelapkan berikutnya yang disebabkan oleh senyawa organik. Eksperimen Von
Kóssa mudah direproduksi. Sebuah tinjauan literatur menunjukkan bahwa
pengurangan nitrat perak oleh senyawa organik terkenal pada abad ke-19. Untuk
studi histokimia fosfat, dianggap diinginkan untuk menghindari pembentukan
produk by-products hitam. Bagian dari jaringan manusia yang tertanam parafin
terkena solusi nitrat perak dalam cahaya atau kegelapan yang ditundukkan dan
kemudian diobati dengan natrium thiosulfat. Fosfat perak berwarna kuning hingga
coklat kekuningan; struktur jaringan lainnya tetap tidak berwarna. Tidak ada gelap
yang diamati di bagian yang disimpan selama delapan tahun. Senyawa lain yang
membentuk garam perak kuning, misalnya iodida dan periodat, tidak mungkin
terjadi di bagian parafin jaringan manusia(holde puchtler.2019)
Kristal kalsium oksalat dalam bahan patologis dan secara artifisil
mengendap dengan tidak adanya atau adanya asam sitrat dalam model gelatin
diperiksa oleh cahaya terpolarisasi dan diobati dengan nitrat perak di bawah
berbagai kondisi. Ditemukan bahwa intensitas reaksi pewarnaan sebagian besar
proporsional dengan kekuatan larutan perak, dan ditingkatkan dalamstudi in vitro
dengan adanya asam sitrat. Pewarnaan juga dipengaruhi oleh bentuk kristal, yang
sendiri terkait dengan tidak adanya atau adanya asam sitrat(A.J. Chaplin,
dkk.2019)
Metode von Kossa untuk mendeteksi struktur garam kalsium (warna
coklat/hitam) dalam kapsul. Bagian yang sudah di deparafnisasi direndam selama
1 jam dalam larutan perak nitrat 5%. Setelah pencucian dalam air suling, bagian
tersebut direndam dalam 5% natrium tiosulfat selama 5 menit. Selanjutnya irisan
dicuci dengan akuades, diwarnai dengan metode picrosirius-red dan dianalisis di
bawah mikroskop cahaya. Bagian yang tidak diwarnai juga dianalisis di bawah
iluminasi terpolarisasi untuk mengevaluasi keberadaan struktur birefringent
dikapsul(Mateus Machado Delfno,dkk.2020)

Tampak dari bahwa mikroskop dengan perbesaran 100X

 Warna hitam : Bantuan

cahaya.

Ket :
Garam kalsium : warna (hitam atau coklat kehitaman)
Nukleus : warna (merah)
Sitoplasma : warna (merah)
 DAFTAR PUSTAKA

A.J. Chaplin, et all.2019. Calcium Oxalate And The Von Kossa Method With
Reference To The Influence Of Citric Acid. Histocem. J.

Franziska Meye. et all. 2021. Chondrocytes From Osteoarthritic and

Chondrocalcinosis Cartilage Represent Different Phenotypes. Germany:
niversitätsmedizin Göttingen

Holde puchtler.2019.Demonstration Of Phosphates In Calcium Dephosits: A

Medication Of Von Kossa’s Reaction.

M. Relucenti,at all.2010. Detecting Microcalcifications In Atherosclerotic Plaques By

A Simple Trichromic Staining Method For Epoxy Embedded Carotid
Endarterectomies. Vol 54.No 33. European Journal of Histochemistry

Mateus Machado Delfno,et all.2020. Immunoinfammatory response and bioactive

potential of GuttaFlow bioseal and MTA Fillapex in the rat subcutaneous tissue.
Scientific Reports.

Prawansa Amran.2018. Analisis Perbedaan Kadar Kalsium (Ca) Terhadap Karyawan

Teknis Produktif Dengan Karyawan Administratif Pada Persero Terbatas Semen
Tonasa. Vol. 1. Makassar : Politeknik Kesehatan Kemenkes