AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL-AIR DAUN KARI

(Murraya koenigii) SEBAGAI HEPATOPROTEKTOR

PADA TIKUS PUTIH GALUR Sprague Dawley

ISMERI

DEPARTEMEN BIOKIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2011
 ABSTRAK

ISMERI. Aktivitas Ekstrak Etanol-Air Daun Kari (Murraya koenigii) Sebagai

Hepatoprotektor Pada Tikus Putih Galur Sprague Dawley. Dibimbing oleh Hasim
dan Syamsul Falah.

Daun kari (Murraya koenigii), tanaman obat tradisional India merupakan

salah satu tanaman herbal yang secara in vitro dilaporkan memiliki aktivitas
antioksidan yang tinggi. Penelitian ini bertujuan menentukan kandungan fitokimia
dan aktivitas hepatoproteksi ekstrak etanol:air (1:1) daun kari secara in vivo pada
tikus Sprague Dawley yang diinduksi parasetamol dosis toksik. Aktivitas
hepatoproteksi diamati dengan menggunakan parameter uji biokimia, yaitu
mengukur aktivitas enzim alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat
aminotransferase (AST) serum serta mengamati kajian histopatologi hati.
Sebanyak 25 tikus dibagi ke dalam 5 kelompok, yaitu kelompok normal (N),
kontrol negatif (KN) (parasetamol 500 mg/Kg BB), kontrol positif (KP) (Curliv-
plus® 42,86 mg/Kg BB), ekstrak daun kari (ED) dosis 200 mg/Kg BB dan 300
mg/Kg BB. Daun kari yang diekstrak dengan campuran pelarut etanol:air (1:1)
menghasilkan rendemen sebesar 19,2%. Hasil uji fitokimia menunjukkan adanya
kandungan senyawa alkaloid, saponin, steroid, dan tanin. Hasil analisis aktivitas
enzim transaminase serum menunjukkan bahwa induksi ED300 dan KP
memberikan efek yang signifikan (p<0,01) dalam mekanisme perlindungan hati
dibandingkan dengan ED200. Sedangkan kajian histopatologi hati menunjukkan
adanya nekrosis sel hati pada KN, regenerasi sel hati pada KP, vakuolisasi pada
ED200, dan tidak ada kelainan spesifik (normal) pada ED300. Hasil ini
mengindikasikan bahwa antioksidan ekstrak etanol:air (1:1) daun kari memiliki
potensi dalam melindungi sel hati.
 ABSTRACT

ISMERI. Activity of Ethanol-Water Extracts of Curry Leaves (Murraya koenigii)

as Hepatoprotector In Sprague Dawley Rats. Under the direction of Hasim and
Syamsul Falah.

Curry leaves (Murray koenigii), a traditional Indian medicinal plant is one

of the herbal plants that has been reported to have high in vitro antioxidant
activity. This study was designed to investigate phytochemical compound and
hepatoprotective activity of ethanol:water (1:1) extract of curry leaves (EWEC) on
paracetamol toxic dose induced acute liver damage in Sprague Dawley rats in
vivo. Hepatoprotection activity was measured by using biochemical parameters
such as enzymes alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase
(AST) serum level and to observe the histopathology study of liver. Twenty five
rats were divided into 5 groups: normal group (N), negative control group/KN
(paracetamol 500 mg/Kg BB), positive control group/KP (Curliv-plus® 42,86
mg/Kg BB), EWEC groups doses 200 mg/Kg BB and 300 mg/Kg BB. Curry leave
was extracted with a solvent mixture of ethanol:water (1:1) which resulted about
19,2% rendement. Phytochemical test indicates that EWEC contains alkaloids,
saponins, steroids, and tannins. Transaminase enzyme serum analysis shows that
the induction of EWEC 300 and KP treatment gives a significant effect (p<0.01)
on hepatoprotective compared to EWEC 200. However, liver histopathology
shows that there is a necrosis hepatocytes on KN group, regeneration on KP
group, vacuolisation on EWEC 200, and normal cells on EWEC 300. These
results indicate that the antioxidant of EWEC is potential to protect liver cells.
 AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL-AIR DAUN KARI
(Murraya koenigii) SEBAGAI HEPATOPROTEKTOR
PADA TIKUS PUTIH GALUR Sprague Dawley

ISMERI

Skripsi
sebagai salah satu syarat memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Departemen Biokimia

DEPARTEMEN BIOKIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2011
Judul Skripsi : Aktivitas Ekstrak Etanol-Air Daun Kari (Murraya koenigii)
Sebagai Hepatoprotektor Pada Tikus Putih Galur Sprague Dawley
Nama : Ismeri
NIM : G84060438

Disetujui
Komisi Pembimbing

Dr. drh. Hasim, DEA Dr. Syamsul Falah, S.Hut., M.Si.

Ketua Anggota

Diketahui
Ketua Departemen Biokimia

Dr. Ir. I Made Artika, M.App.Sc.

Ketua Departemen Biokimia

Tanggal Lulus :
 PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat,
nikmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini
sebagai salah satu persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada
Departemen Biokimia, Fakultas Matematika & IPA Institut Pertanian Bogor.
Tema yang dipilih pada penelitian ini ialah metabolisme, dengan judul “Aktivitas
Ekstrak Etanol-Air Daun Kari (Murraya koenigii) Sebagai Hepatoprotektor Pada
Tikus Putih Galur Sprague Dawley”. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan
Agustus hingga Oktober 2010 di Laboratorium dan Kandang Hewan Coba
Biokimia, Departemen Biokimia, Institut Pertanian Bogor, Laboratorium Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, dan Laboratorium Patologi
Balai Besar Penelitian Veteriner (BALITVET) Bogor.
Terima kasih penulis ucapkan kepada Dr. drh. Hasim, DEA dan Dr.
Syamsul Falah, S.Hut., M.Si. atas bimbingan, waktu, dan perhatiannya kepada
penulis selama penelitian dan penyusunan karya ilmiah. Ucapan terima kasih juga
penulis sampaikan kepada Laboran departemen biokimia dan drh. Yulvian Sani,
Ph.D yang telah banyak membantu dalam teknis pelaksanaan penelitian ini,
kepada kedua orang tua dan seluruh keluarga tercinta atas segala doa, dukungan,
kasih sayangnya, dan selalu memberi inspirasi kepada penulis untuk selalu
berjuang keras dan menjadi lebih baik, dan kepada Farah Meutia selaku rekan
kerja, teman-teman Biokimia 43, SainTeker’s 2009, Umul, Marsudi, Feni, April,
Valen, Hery, Igoy, Izha, Luky ILKOM 43, Tuti STK 44, serta teman-teman
PPSDMS Nurul Fikri regional 5 Bogor atas dukungan dan bantuannya selama
penelitian dan penyusunan skripsi. Semoga karya ilmiah ini dapat bermanfaat bagi
pembaca dan ilmu pengetahuan, khususnya dibidang Biokimia dan Farmasi.

Bogor, Maret 2011

Ismeri
 RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Simpang Abung pada tanggal 23 Mei 1987 dari

ayahanda Isnen dan ibunda Asiah sebagai anak ke-6 dari enam bersaudara. Tahun
2006 penulis lulus dari SMA Negeri 2 Bandar Lampung dan pada tahun yang
sama penulis diterima di IPB melalui jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru
(SPMB). Tahun 2007 penulis memilih Mayor Biokimia, Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) dan Manajemen Fungsional, Fakultas
Ekonomi dan Manajemen (FEM) sebagai minor.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah aktif di berbagai organisasi
kemahasiswaan. Tahun 2006-2007 penulis aktif di ROHIS A8 sebagai Ketua
Divisi PSDM. Tahun 2007-2008 penulis aktif di Badan Eksekutif Mahasiswa
(BEM) FMIPA sebagai staf ahli Departemen SAINS. Di tahun yang sama, penulis
juga aktif sebagai anggota Organisasi Mahasiswa Daerah (OMDA) Keluarga
Mahasiswa Lampung (KEMALA) dan aktif di Himpunan Profesi Community of
Research and Education in Biochemistry (CREBs) sebagai Badan Pengawas. Pada
tahun 2009-2010 penulis aktif sebagai Menteri Sains & Teknologi Badan
Eksekutif Mahasiswa (BEM) FMIPA. Disamping itu, penulis juga pernah
mendapat beasiswa SP++ dari Yayasan Damandiri pada tahun 2006-2007,
beasiswa Peningkatan Prestasi Akademik (PPA) pada tahun 2008-2009, beasiswa
BBM pada tahun 2009-2010, dan beasiswa Program Pembinaan Sumber Daya
Mahasiswa Strategis (PPSDMS) Nurul Fikri selama 2 tahun (2008 hingga 2010).
Tahun 2008 dan 2011 penulis mendapat dana hibah penelitian dari DIKTI melalui
Program Kreativitas Mahasiswa bidang Penelitian (PKMP). Selain itu, penulis
juga pernah menjadi finalis berbagai kompetisi tingkat nasional, diantaranya
Lomba Karya Tulis Mahasiswa (KATULISTIWA) Universitas Brawijaya, Lomba
Penelitian Mahasiswa Teknik Kimia Indonesia (LPMTKI) Universitas
Diponegoro, dan Lomba Karya Tulis Ilmiah Al-Qur’an (LKTIA) Institut
Pertanian Bogor. Pada penghujung masa studi di IPB penulis berkesempatan
sebagai penyaji makalah internasional pada Annual Meeting of Science and
Technology Studies (AMSTECS)-Jepang 2011.
Sebagai pengalaman profesi, penulis juga aktif sebagai asisten praktikum
Biologi Dasar untuk mahasiswa Tingkat Persiapan Bersama (TPB) IPB tahun
2008 hingga 2009. Pada semester akhir studi, penulis pernah menjalani Praktik
Lapang (PL) di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) dan menulis laporan
ilmiah yang berjudul “Uji Potensi Amilolitik Isolat Bakteri Asal Saluran Cerna
Manusia”. Pada tahun 2009, penulis juga pernah menjadi tentor Kimia di
Lembaga Bimbingan Belajar SPEKTRUM serta tentor Matematika di Lembaga
Bimbingan Belajar Bintang Pelajar (BP) Bogor pada tahun 2010.
 DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... x
PENDAHULUAN ............................................................................................. 1
TINJAUAN PUSTAKA
Daun kari (Murraya koenigii) Sebagai Obat Herbal Multikhasiat ............. 2
Senyawa Hepatoprotektor ........................................................................... 3
Parasetamol Sebagai Hepatotoksik ............................................................. 3
Senyawa Antioksidan ................................................................................. 4
Fisiologi dan Fungsi Hati ........................................................................... 6
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat ........................................................................................... 8
Metode Penelitian ....................................................................................... 8
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi dan Penapisan Fitokimia ............................................................. 10
Keadaan Hewan Coba Selama Perlakuan ................................................... 11
Keadaan Hewan Coba Sebelum Perlakuan................................................. 12
Aktivitas Enzim Transaminase .................................................................. 12
Gambaran Histopatologi Hati ..................................................................... 15
SIMPULAN DAN SARAN ............................................................................... 17
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 17
LAMPIRAN ..................................................................................................... 21
 DAFTAR TABEL

Halaman

1 Uji fitokimia ekstrak etanol:air (1:1) daun kari (Murraya koenigii) ............... 11
2 Peningkatan bobot badan hewan coba selama perlakuan ............................... 12
3 Aktivitas enzim ALT dan AST serum darah tikus pada hari ke-0 .................. 12
4 Perubahan aktivitas enzim ALT darah tikus pada hari ke-14 dan -21
dibandingkan dengan kelompok normal.......................................................... 14
5 Perubahan aktivitas enzim AST darah tikus pada hari ke-14 dan -21
dibandingkan dengan kelompok normal.......................................................... 15
6 Hasil uji Kruskal-Walis kelainan histopatologi hati ....................................... 17

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1 Daun kari (Murraya koenigii) ........................................................................ 3

2 Jalur metabolik parasetamol pada hati normal (a) dan glutation <30% (b) ... 5
3 Mekanisme reaksi pada pengukuran aktivitas ALT ....................................... 9
4 Bobot badan hewan coba selama perlakuan................................................... 12
5 Aktivitas enzim ALT selama perlakuan ......................................................... 13
6 Aktivitas enzim AST selama perlakuan ......................................................... 13
7 Gambaran sel hati tikus .................................................................................. 16
 2

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1 Gambaran umum penelitian ........................................................................... 22

2 Rancangan perlakuan hewan coba ................................................................. 23
3 Pengukuran kadar enzim ALT dan AST ........................................................ 24
4 Perhitungan dosis ........................................................................................... 25
5 Pembuatan sediaan histopatologi hati ............................................................ 26
6 Pewarnaan Haematoxylin-Eosin .................................................................... 27
7 Data bobot tikus selama perlakuan ................................................................ 28
8 Aktivitas ALT serum darah tikus selama perlakuan ..................................... 30
9 Hasil uji analisis statistik aktivitas ALT serum darah tikus ........................... 31
10 Aktivitas AST serum darah tikus selama perlakuan ..................................... 32
11 Hasil uji analisis statistik aktivitas AST serum darah tikus ........................... 33
12 Data skoring lesio pada pengamatan histopatologi hati ................................. 34

PENDAHULUAN
Organ hati adalah organ yang berperan
mengatur homeostasis dalam tubuh. Organ ini
terlibat dalam hampir semua jalur biokimia
yang berhubungan dengan pertumbuhan,
memerangi penyakit, suplai gizi, penyediaan
energi dan reproduksi (Walker & Edward
1999; Stockham & Scott 2008). Menurut
Shahani (1999), hati adalah organ yang
memainkan peran yang sangat penting dalam
mengatur berbagai proses fisiologis di dalam
tubuh. Hal ini terlihat dalam beberapa fungsi
vital, seperti metabolisme, sekresi, dan
penyimpanan sehingga hati menjadi sangat
rentan terhadap kerusakan. Berbagai
penelitian terdahulu melaporkan bahwa
terdapat beragam faktor yang dapat
menyebabkan kerusakan hati, antara lain
kelebihan konsumsi alkohol, bakteri, jamur,
virus, senyawa kimia, infeksi, dan gangguan
autoimun.
Hepatitis merupakan salah satu contoh
jenis penyakit hati yang sering kali terjadi
pada masyarakat. Di Indonesia, penyakit ini di
derita oleh sekitar 12 juta jiwa dan menduduki
peringkat ketiga di Asia Pasifik (Dalimartha
2005). Hepatitis akibat obat atau toksin dapat
digolongkan menjadi hepatotoksin direct dan
indirect, reaksi hipersensitivitas terhadap obat,
serta idiosinkrasi metabolik. Hal ini ditambah
dengan pengetahuan masyarakat yang kurang
akan konsumsi obat-obatan dapat
meningkatkan resiko timbulnya penyakit
hepatitis. Konsumsi obat-obatan seperti
parasetamol dalam dosis berlebih pada hewan
dan manusia dapat mengakibatkan kerusakan
hati (Lee 2003). Obat-obat lain yang dapat
menyebabkan kerusakan hati adalah obat
anastetik, antibiotik, antiinflamasi,
antimetabolik dan imunosupresif,
antituberkulosa, hormon-hormon, serta obat
psikotropik.
Hepatitis secara umum timbul akibat
inflamasi hati. Salah satu kondisi yang terjadi
adalah oksidasi membran sel oleh radikal
bebas, baik dari luar tubuh (eksogen) maupun
hasil metabolisme tubuh (endogen). Konsumsi
parasetamol dosis tinggi dapat menyebabkan
kerusakan hati secara akut atau nekrosis. Hal
ini terjadi karena pengikatan kovalen pada N-
asetil-p-benzokuinonimina (NAPQI), senyawa
radikal hasil oksidasi parasetamol, dengan
gugus –SH pada protein membran yang
menghasilkan nekrosis sel dan peroksidasi
lipid yang diinduksi oleh penurunan jumlah
glutation (Murugesh et al. 2005). Kerusakan
1
hati dapat didiagnosa oleh beberapa parameter
biokimia, yaitu adanya peningkatan aktivitas
enzim alanin aminotransferase (ALT), aspartat
aminotransferase (AST), alkalin fosfatase
(ALP), gammaglutamil transferase (GGT),
glutation peroksidase (GPx), superoksida
dismutase (SOD), katalase, laktat
dehidrogenase, 5-nukleotidase, bilirubin, dan
TBA-reacting substance (TBARS) (Stockham
& Scott 2008).
Saat ini, belum ada obat yang efektif
dalam merangsang fungsi hati, melindungi sel
hati terhadap kerusakan, dan membantu
meregenerasi sel hati meskipun kemajuan
pengobatan secara modern bekembang dengan
pesat (Chattopadhyay 2003). Di lain sisi,
berbagai upaya pengobatan gangguan fungsi
hati secara klinis memerlukan biaya yang
mahal dan sering kali menyebabkan efek
samping yang merugikan. Oleh karena itu,
masyarakat mulai beralih ke pengobatan
secara tradisional sesuai dengan semboyan
“Back to nature” yang sering kali
memberikan efek yang cukup signifikan.
Hingga saat ini juga masih dilakukan berbagai
penelitian untuk mendapatkan komponen
bahan aktif yang mampu berperan sebagai
hepatoprotektor.
Hepatoprotektor adalah senyawa atau zat
yang berkhasiat melindungi sel sekaligus
memperbaiki jaringan hati yang rusak akibat
pengaruh toksik (Dalimartha 2005). Dilihat
dari strukturnya, senyawa yang bersifat
hepetoprotektor diantaranya meliputi senyawa
golongan fenilpropanoid, kumarin, lignin,
minyak atsiri, terpenoid, glikosida, flavonoid,
asam organik lipid, serta senyawa nitrogen
(alkaloid dan xantin) (Sidik 1988). Beberapa
senyawa antioksidan alami seperti flavonoid,
terpenoid, dan steroid telah diteliti secara
farmakologi memiliki aktivitas hepatoproteksi
(Murugesh et al. 2005). Antioksidan
memainkan peranan penting dalam mengikat
radikal bebas dan mencegah amplifikasi
senyawa radikal bebas. Sumber antioksidan
terbanyak di alam adalah komponen fenolik
atau polifenol, sedangkan sisanya adalah
komponen nitrogen dan karotenoid (Lenny
2006).
Tumbuhan kari (Murraya koenigii)
merupakan salah satu tanaman yang telah
digunakan secara tradisional di Indonesia.
Berdasarkan penelitian secara in vitro yang
dilakukan oleh Ningappa et al. (2008), daun
kari yang selama ini digunakan sebagai
bumbu penyedap makanan ternyata memiliki
aktivitas antioksidan yang tinggi yang terdapat
pada ekstrak etanol-air (1:1) yang termasuk

dalam golongan senyawa polifenol. Pengaruh
pemberian ekstrak daun kari terhadap
kesehatan telah banyak diteliti, diantaranya
dapat memberikan efek antikanker dan
antiinflamasi (to et al. 2005; Muthumani et
al. 2009), antidiabetes (Hougon 2004;
Vinuthan et al. 2004; Arulselvan et al. 2006;
Bhat et al. 2008; Lawal et al. 2008), dan
antibakteri (Ningappa et al. 2010). Selain itu,
ekstrak daun kari memiliki aktivitas
hipoglikemik tanpa efek samping maupun
bersifat toksik (Lawal et al. 2008). Namun,
potensinya sebagai hepatoprotektor belum
dilakukan. Oleh karena itu, aktivitas ekstrak
etanol:air (1:1) daun kari terhadap mekanisme
perlindungan hati perlu diteliti.
Penelitian ini bertujuan menguji
kandungan fitokimia ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari dan menguji aktivitas
hepatoproteksi ekstrak etanol:air (1:1) daun
kari secara in vivo pada tikus Sprague Dawley
yang diinduksi parasetamol dosis 500 mg/kg
BB. Potensi yang diperoleh akan
dibandingkan secara langsung dengan Curliv-
plus® (obat hepatitis komersil) dosis 42.86
mg/kg BB. Adapun parameter uji yang
digunakan adalah analisis kadar enzim ALT
dan AST serum serta kajian histopatologi hati.
Hipotesis pada penelitian ini adalah
kandungan senyawa bioaktif yang terdapat di
dalam daun kari (Murraya koenigii) memiliki
mekanisme perlindungan hati tikus terhadap
kerusakan sel hati yang diinduksi parasetamol.
Senyawa-senyawa tersebut diduga dapat
menghambat atau mencegah terjadinya
pembentukan radikal bebas (peroksida) di
dalam tubuh yang dapat mengakibatkan
kerusakan pada sel-sel hati. Hasil penelitian
ini diharapkan dapat menambah informasi
potensi ekstrak etanol:air (1:1) daun kari
sebagai hepatoprotektor dan dapat dijadikan
sebagai obat hepatitis alternatif sehingga
manfaat daun kari dapat dieksplorasi secara
optimal.
TINJAUAN PUSTAKA
Daun Kari (Murraya koenigii) Sebagai
Obat Herbal Multikhasiat
Tanaman kari (Murraya koenigii) (Gambar
1) merupakan salah satu tanaman rempah
yang tergolong famili Rutaceae (jeruk-
jerukan) yang diperkenalkan oleh seorang ahli
botani asal Swedia dan German, yaitu Johann
Andreas Murray dan Gerhard Koenig
(Seidemann 2005). Secara morfologi pohon
2
kari bisa tumbuh mencapai 4-6 meter,
memiliki tangkai panjang dan setiap tangkai
mengandung 11-21 daun, memiliki bunga
yang kecil dan berwarna putih, serta memiliki
buah yang berwarna coklat-hitam, mengkilap,
dan bisa dimakan namun bijinya beracun.
Tanaman kari umumnya lebih dikenal sebagai
daun kari (curry-leaf tree) yang merupakan
tanaman yang banyak tumbuh di India, Nepal,
Sri Lanka, dan beberapa negara Asia Selatan,
serta paling banyak ditemui hampir diseluruh
wilayah India (Choudhury & Garg 2007). Di
Indonesia daun kari banyak terdapat di
beberapa daerah di Sumatera seperti Aceh dan
Medan. Daun ini banyak digunakan sebagai
bahan rempah-rempah terutama sebagai
bumbu pada berbagai jenis masakan dan juga
digunakan untuk perawatan berbagai jenis
penyakit pada sistem pengobatan tradisional.
Selain sebagai bumbu masak, daun kari
juga sering digunakan sebagai jamu
pengobatan alternatif. Daun kari dipakai
sebagai bahan baku dalam hampir semua obat
tradisional India, yang berkhasiat
menyembuhkan berbagai penyakit antara lain
pusing-pusing, sakit perut, kulit gatal, digigit
serangga, diare, influenza, reumatik, obat
luka, gigitan ular, bahkan diabetes (kong et al.
1986). Selain sebagai obat tradisional, daun
ini juga dapat digunakan sebagai kosmetik
dan obat jerawat, bahkan digunakan sebagai
conditioner bagi rambut yang dapat
mengurangi penipisan dan uban pada rambut
(Choudhury & Garg 2007). Disamping itu,
daun ini pula memiliki aroma yang menyengat
yang disebabkan oleh kandungan minyak
atsiri yang terkandung di dalamnya (Rana et
al. 2004) sehingga daun ini kerap digunakan
pada industri parfum dan sabun. Selain itu,
daun ini kaya akan mineral (Choudhury &
Garg 2007), vitamin A dan B serta
mengandung banyak karbohidrat, protein,
asam amino dan alkaloid (Kong et al. 1986;
Tee & Lim 1991).
Khasiat daun kari dalam bidang kesehatan
telah banyak diteliti, diantaranya dapat
memberikan efek antikanker dan antiinflamasi
(Ito et al. 2005; Muthumani et al. 2009),
antidiabetes (Hougon 2004; Vinuthan et al.
2004; Arulselvan et al. 2006; Bhat et al.
2008; Lawal et al. 2008), dan antibakteri
(Ningappa et al. 2010). Ekstrak daun kari
memiliki aktivitas hipoglikemik tanpa efek
samping maupun bersifat toksik (Lawal et al.
2008). Selain itu, daun ini memiliki
kandungan mineral Cr, V, Mn, Zn, Cu dan Se
yang tinggi yang dikenal memiliki peranan
penting pada proses biokimia terutama

diabetes (Choudhury & Garg 2007). Beberapa
literatur menyebutkan bahwa daun kari
memiliki kandungan essential oils, kumarin,
terpenoid, lutein, karbazol alkaloid,
mahanimbin, murayanol, dan mahanin
(Ramsewak et al. 1999; Tachibana et al. 2001;
Nakahara et al. 2002). Berdasarkan
Palaniswamy (2003), daun kari kaya akan
antioksidan seperti tokoferol, β-karoten,
lutein, dan alkaloid. Berdasarkan penelitian
yang dilakukan oleh Ningappa et al. (2008),
antioksidan tertinggi pada daun kari terdapat
pada ekstrak etanol-air (1:1) yang termasuk
golongan senyawa polifenol, yaitu sebesar
168 ± 5,6 mg/g ekstrak. Selain itu, ekstrak
etanol:air (1:1) daun kari dapat menghambat
lipid peroksida sebesar 76,4 ± 3 % pada
konsentrasi rendah (50 µg/mL), menghambat
superoksida dismutase (SOD) sebesar 93%
pada konsentrasi 200 µg/3 mL, menghambat
radikal DPPH sebesar 92 % pada konsentrasi
20 µg/mL, dan menghambat radikal hidroksil
sebesar 91% pada konsentrasi 20 µg/mL.
Gambar 1 Daun kari (Murraya koenigii)
Senyawa Hepatoprotektor
Hepatoprotektor adalah senyawa atau zat
yang berkhasiat melindungi sel hati terhadap
pengaruh zat toksik yang dapat merusak hati,
bahkan dapat memperbaiki jaringan hati yang
telah rusak (Dalimartha 2005). Secara empiris
telah banyak tanaman yang tumbuh di
Indonesia yang digunakan oleh masyarakat
sebagai obat penyakit hati, seperti brotowali,
kembang merak, rebung bambu, mengkudu,
tomat, jagung, pepaya, wortel, lidah buaya,
akar kuning, temulawak dan kunyit. Namun,
masih sedikit diantara tumbuhan tersebut yang
telah dibuktikan secara ilmiah kebenarannya.
Sebagian besar zat hepatoprotektor tersebut
adalah senyawa yang tergolong antioksidan.
Senyawa ini bekerja dalam menghambat atau
memperlambat proses oksidasi radikal bebas
(Murray 2009).
Sejak tahun 1976 telah dilakukan usaha
untuk menemukan senyawa bioaktif yang
3
berasal dari tumbuhan yang memiliki aktivitas
hepatoprotektor. Pada tahun 1983 ilmuwan
Korea telah melakukan penapisan terhadap 78
jenis tumbuhan yang biasa digunakan rakyat
Korea untuk pengobatan hepatitis dan 21
diantaranya terbukti sebagai hepatoprotektor.
Di Indonesia, penelitian mengenai tanaman
obat yang sering digunakan oleh masyarakat
sebagai obat hepatitis juga telah banyak
dilakukan. Misalnya, penelitian yang
dilakukan oleh Yuningsih (1987) terhadap
ekstrak air temulawak (Curcuma xanthorizha
Robx) dapat menurunkan aktivitas SGOT dan
SGPT darah kelinci dalam keadaan terinfeksi
hepatitis B, Harun & Syahri (1999) yang
meneliti aktivitas daun dewa yang memiliki
sifat antioksidan yang mampu menghambat
sifat hepatotoksik senyawa halotan yang
terpapar di udara, Batubara (2003) dan Adji
(2004) yang berhasil membuktikan aktivitas
ekstrak saponin akar kuning sebagai
hepatoprotektor, Marliana (2005) yang
membuktikan khasiat buah mahkota dewa
sebagai hepatoprotektor, Rustandi (2006)
yang melihat aktivitas ekstrak daun sangitan
dalam peroksidasi lipid serum darah tikus
yang diinduksi parasetamol, dan Panjaitan
(2008) yang menguji aktivitas hepatoprotektor
ekstrak akar pasak bumi, serta Aryadi (2009)
yang membuktikan khasiat ekstrak bunga
rosella sebagai hepatoprotektor terhadap tikus
yang diinduksi parasetamol.
Parasetamol Sebagai Hepatotoksik
Hepatotoksin adalah senyawa yang dapat
menyebabkan gangguan pada jaringan hati.
Hepatotoksin juga merupakan zat yang
mempunyai efek toksik pada hati dengan
dosis berlebihan atau dalam jangka waktu
yang lama. Hepatotoksin yang menyebabkan
gangguan pada jaringan hati, tergantung pada
dosis pemberian, interval waktu pemberian
yang singkat antara pencernaan obat dan
reaksi melawan, serta kemampuan untuk
menimbulkan perubahan yang sama pada
jaringan hati (Dalimartha 2005).
Berdasarkan mekanismenya terhadap
perusakan hati, hepatotoksin dibagi menjadi
dua macam, yaitu hepatotoksin intrinsik dan
ekstrinsik. Hepatotoksin intrinsik merupakan
hepatotoksin yang dapat diprediksi,
tergantung pada dosis dan melibatkan
mayoritas individu yang menggunakan obat
dalam jumlah tertentu. Rentang waktu antara
mulainya dan timbulnya kerusakan hati sangat
bervariasi, dari beberapa jam sampai beberapa
minggu. Salah satu contohnya adalah
parasetamol (acetaminophen) yang

menyebabkan nekrosis hati yang dapat
diprediksi pada pemberian over dosis. Di sisi
lain, hepatotoksin ekstrinsik atau idiosinkratik
merupakan hepatotoksin yang tidak dapat
diprediksi. Hepatotoksin ini terkait dengan
hipersensitivitas atau kelainan metabolisme.
Respon dari hepatotoksin ini tidak dapat
diprediksi dan tidak tergantung pada dosis
pemberian. Tahap inkubasi toksin ini
bervariasi, tetapi biasanya berminggu-minggu
atau berbulan-bulan. Contohnya seperti
sulfonamid, isoniazid, halotan, dan
klorpromazin (Gibson 1991).
Parasetamol atau N-asetil-p-aminofenol
merupakan obat yang berkhasiat analgetik
anatipiretik non narkotik turunan para
aminofenol. Parasetamol cepat diserap secara
sempurna oleh saluran pencernaan dan
tersebar ke seluruh cairan tubuh. Konsentrasi
tertinggi berada pada plasma darah setelah 1-3
jam masuk ke dalam tubuh. Sebanyak 25%
parasetamol berada terikat dengan protein
(Lee 2003). Parasetamol termasuk salah satu
obat yang sering dikonsumsi oleh masyarakat,
dapat menyebabkan kerusakan hati apabila
dikonsumsi 7,5 gram sekaligus, dan pada
pemakaian lebih dari 15 gram sekaligus akan
menyebabkan nekrosis atau kematian sel hati
(Dalimartha et al. 2005). Dosis parasetamol
500 mg/kg BB yang diinduksikan pada tikus
Sprague Dawley mampu membuat kerusakan
membran sel hepatosit (Aryadi 2009),
sedangkan dosis untuk tikus galur Wistar
adalah 750 mg/kg BB (Murugesh et al. 2005).
Di sisi lain, dosis parasetamol pada tikus
Rattus Norvegicus sebesar 2 g/kg BB
(Balamurugan et al. 2008).
Gambar 2 menunjukkan proses
metabolisme parasetamol di dalam tubuh.
Pada dosis normal, parasetamol yang masuk
ke dalam tubuh akan mengalami
biotransformasi di dalam hati dengan
mekanisme konjugasi (metabolisme fase II)
dengan glukuronat sebanyak 40%-67%,
sulfonat 20-46%, serta <5%-nya adalah
sistein, beberapa metabolit terhidroksilasi dan
terdeasetilasi. Hasil reaksi konjugasi ini
menghasilkan senyawa yang larut air
(hydrosoluble) dan tidak toksik sehingga
dapat disekresikan melalui urin (Wong et al.
1981; Lee 2003) (Gambar 2a).
Pada keadaan over dosis, sisa parasetamol
akan dibiotransformasi oksidatif oleh
sitokrom P-450 (metabolisme fase I) sehingga
membentuk suatu metabolit elektrofil N-
asetil-p-benzoikuinonimina (NAPQI) yang
bersifat hepatotoksik dan reaktif. NAPQI
kemudian akan bereaksi dengan biomolekul
4
penyusun membran sel hati, seperti fosfolipid
dan protein bergugus –SH. Detoksifikasi
NAPQI diawali oleh konjugasi dengan
glutation tereduksi (GSH) menjadi asam
merkapturat yang bersifat hydrosoluble non
toxic dan dapat diekskresikan oleh ginjal
(Wong et al. 1981) (Gambar 2a).
Jika laju pembentukan NAPQI lebih besar
dari laju detoksifikasi oleh GSH, maka akan
terjadi oksidasi berbagai biomolekul penyusun
membran seperti lipid atau gugus SH pada
protein (Wong et al. 1981). Proses ini
menyebabkan kandungan GSH hati <30% dari
normalnya, sehingga NAPQI berikatan
dengan makromolekul protein sel hati
membentuk senyawa semikuinon. Senyawa
ini akan mereduksi O2 menjadi O2•, kemudian
membentuk senyawa radikal bebas lagi yang
akan mengoksidasi fosfolipid lain secara
berantai. Hal ini mengakibatkan kerusakan sel
hati sampai timbul nekrosis hati, yaitu
terjadinya gangguan integritas membran
plasma, keluarnya isi sel, dan timbulnya
respon inflamasi (Gambar 2b). Respon ini
menyebabkan banyak sel yang mati (Gibson
& Sket 1991) yang ditandai dengan
peningkatan ALT dan AST, bilirubin, alkalin
fosfatase, gammaglutamil transferase (GGT),
serta dehidrogenase laktat pada serum selama
24 jam setelah pemberian (Firmansyah 2006).
Senyawa Antioksidan
Antioksidan, secara umum dapat
didefinisikan sebagai senyawa yang dapat
menunda, memperlambat dan mencegah
proses oksidasi lipid. Sedangkan dalam arti
khusus, antioksidan adalah zat yang dapat
menunda atau mencegah terjadinya reaksi
oksidasi radikal bebas. Senyawa dikatakan
memiliki sifat antioksidatif bila senyawa
tersebut mampu mendonasikan satu atau lebih
elektron kepada senyawa prooksidan,
kemudian mengubah senyawa oksidan
menjadi senyawa yang stabil (Packer 1995).
Antioksidan, berdasarkan sumbernya
dibagi menjadi 2 kelompok, yaitu antioksidan
sintetik dan antioksidan alami. Beberapa
contoh antioksidan sintetik adalah Butil
Hidroksi Anisol (BHA), Butil Hidroksi
Toluen (BHT), propil galat, tert-butil hidroksi
quinon (TBHQ) dan tokoferol, sedangkan
antioksidan alami berasal dari tumbuhan, yang
pada umumnya adalah senyawa fenolik atau
polifenolik yang dapat berupa golongan
flavonoid. Berdasarkan asal terbentuknya,
antioksidan dibagi menjadi dua kelompok,
yaitu antioksidan endogen dan eksogen.
Sedangkan berdasarkan mekanisme kerjanya,

Gambar 2 Jalur metabolik parasetamol pada hati normal (a) dan glutation <30% (b)
(Sumber: Kavalci et al. 2009)
antioksidan dapat dikelompokkan menjadi 3
kelompok, yaitu: (a) Antioksidan primer
(antioksidan endogen/antioksidan enzimatis),
contohnya enzim superoksida dismutase
(SOD), katalase, dan glutation peroksidase
(GPx). Enzim-enzim ini mampu menekan atau
menghambat pembentukan radikal bebas
dengan cara memutus reaksi berantai dan
mengubahnya menjadi produk lebih stabil; (b)
Antioksidan Sekunder (antioksidan
eksogen/antioksidan non enzimatis), contoh
antioksidan sekunder ialah vitamin E, vitamin
C, β-karoten, isoflavon, asam urat, bilirubin,
dan albumin. Senyawa-senyawa ini dikenal
sebagai penangkap radikal bebas (scavenger
free radical), kemudian mencegah amplifikasi
radikal; (c) Antioksidan Tersier, misalnya
enzim metionin sulfoksida reduktase, yang
berperan dalam perbaikan biomolekul yang
disebabkan oleh radikal bebas (Packer & Ong
1998).
Menurut Ong et al. (1995), terdapat lima
mekanisme kerja antioksidan seluler, yaitu:
(1) Berinteraksi langsung dengan oksidan,
radikal bebas atau oksigen tunggal; (2)
Mencegah pembentukan jenis oksigen reaktif;
(3) Mengubah jenis oksigen reaktif menjadi
kurang toksik; (4) Mencegah kemampuan
oksigen reaktif; (5) Memperbaiki kerusakan
yang timbul.
Penggunaan senyawa antioksidan saat ini
semakin meluas seiring dengan semakin
besarnya pemahaman masyarakat tentang
5
peranannya dalam menghambat penyakit
degeneratif seperti penyakit jantung,
arterisklerosis, kanker, serta gejala penuaan.
Masalah-masalah tersebut berkaitan dengan
kemampuan antioksidan dalam bekerja
sebagai inhibitor (penghambat) reaksi oksidasi
oleh radikal bebas reaktif yang menjadi salah
satu penyebab penyakit-penyakit di atas
(Packer & Ong 1998). Tubuh manusia dapat
menghasilkan senyawa antioksidan secara
alami, tetapi jumlahnya sering kali tidak
cukup untuk menetralkan radikal bebas yang
masuk ke dalam tubuh (Hernani & Rahardjo
2005). Antioksidan alami mampu melindungi
tubuh terhadap kerusakan yang disebabkan
oleh oksigen reaktif dan mampu menghambat
terjadinya penyakit degeneratif serta mampu
menghambat peroksida lipid pada makanan.
Keseimbangan antara antioksidan dan radikal
bebas menjadi kunci utama pencegahan stres
oksidatif dan penyakit-penyakit kronis yang
dihasilkan (Packer et al. 1995).
Stres oksidatif adalah keadaan
ketidakseimbangan antara prooksidan dan
antioksidan. Keaadaan stres oksidatif dapat
disebabkan oleh beberapa faktor, antara lain
adalah kurangnya antioksidan atau kelebihan
produksi radikal bebas. Radikal bebas
sebetulnya diproduksi secara fisiologis oleh
sel sebagai konsekuensi logis pada reaksi
biokimia dalam kehidupan aerobik. Namun,
jika radikal bebas berlebihan dan antioksidan
selluler tetap atau lebih sedikit, maka

kelebihan radikal bebas ini tidak dapat
dinetralkan dan akan berakibat pada
kerusakan sel itu sendiri. Kondisi stres
oksidatif yang berakibat pada kerusakan sel,
dapat menyebabkan terjadinya percepatan
proses penuaan, dan dapat menimbulkan
penyakit jantung, kanker, dan diabetes melitus
(Packer & Ong 1998).
Prof. Bernhard Waltz dari Institute of
Nutritional Physiology (FRNC) Karlshure,
Jerman menyatakan bahwa senyawa fitokimia
memiliki efek biologi yang efektif dalam
menghambat pertumbuhan kanker, berfungsi
sebagai antioksidan, antimikroba, menurunkan
kolesterol darah, menurunkan kadar glukosa
darah, bersifat antibiotik, dan menimbulkan
efek peningkatan kekebalan. Fitokimia yang
bersifat antioksidan aktif adalah karotenoid,
polifenol, fitoestrogen, inhibitor protease, dan
sulfida. Karotenoid seperti lycopene dan
canthaxanthin, adalah jenis antioksidan yang
memiliki kemampuan tinggi dalam
memproteksi oksidasi yang disebabkan oleh
radikal bebas. Sedangkan polifenol dikenal
sebagai antioksidan tanaman yang sangat
superior. Polifenol dari anggur merah dan
flavanol quersetin adalah senyawa fitokimia
yang dapat mencegah oksidasi low density
lipoprotein (LDL) dan kolesterol sehingga
dapat mencegah timbulnya penyakit kronis
(Packer & Ong 1998).
Fisiologi dan Fungsi Hati
Hati merupakan organ tubuh yang besar,
kompleks, dan terdapat di dalam rongga perut
kanan atas, di bawah diafragma kanan, dan
dilindungi tulang iga kanan bawah. Organ ini
berwarna coklat tua dan berbobot antara
1.200-1.600 g atau sekitar 2.5% dari bobot
total orang dewasa. Organ ini terbagi menjadi
dua lobus, lobus kanan besarnya enam kali
bagian kirinya. Setiap lobus terdiri atas ribuan
lobulus yang merupakan unit fungsional.
Setiap lobulus terdiri atas sel-sel hepatosit
yang berbentuk kubus dan tersusun melingkar
mengelilingi vena sentralis. Di antara lobulus
(interlobular) terdapat saluran empedu dan
kapiler (sinusoid) yang merupakan cabang
vena porta dan arteria hepatika (Dalimartha
2005). Sinusoid dibatasi oleh sel Kupffer yang
merupakan sistem retikuloendotelial dan
mempunyai fungsi serupa dengan sel
makrofag (Kaplan & Pesce 1998). Pada tikus,
hati terletak pada bagian anterior ruang
abdominal, memanjang dari tulang belakang
sampai cartilago xiphoidea. Hati tikus
terdapat empat lobus (median, lateral kanan,
lateral kiri, dan kaudal). Bila dilakukan
6
hipatektomi, sel hati mampu melakukan
regenerasi meskipun hanya sebagian sel hati
yang dapat diganti. Tikus tidak memiliki
kantung empedu, saluran empedu dari
beberapa lobus membentuk saluran empedu
umum yang masuk ke deudenum (Fox et al.
1984).
Secara garis besar, fungsi hati dapat
digolongkan menjadi lima besar, yaitu
detoksifikasi, sekresi, penyimpanan cadangan
makanan, hematologis, proteksi, dan juga
berperan dalam proses metabolisme
biomolekul (karbohirat, lipid, asam amino,
hormon dan bilirubin) (Kaplan & Pesce 1998).
Pada metabolisme tubuh, hati berperan dalam
metabolisme karbohidrat, protein, dan lipid
yang dikirim oleh vena porta setelah
diabsorbsi dari usus. Hati dapat menyintesis
lebih dari 1000 protein plasma, seperti
albumin dan globulin secara de novo dari
asam amino esensial dan non esensial. Hati
juga dapat menyintesis asam lemak,
trigliserida, kolesterol, apolipoprotein,
lipoprotein, dan kolesterol ester dalam
fosfolipid. Beberapa bahan hasil metabolisme
ini dapat tersimpan dalam hati, seperti
glikogen, trigliserida, Fe, dan Cu (Stockham
& Scott 2008). Sebagai Haematologis, organ
hati berfungsi mengatur keseimbangan cairan
elektrolit, dan mengatur volume darah dan
bersifat sebagai spons/filter karena semua
makanan dan substansi yang telah diserap
oleh usus halus akan dialirkan ke hati melalui
sistem portal. Fungsi hati lainnya adalah
detoksifikasi toksin dan radikal bebas, yaitu
melalui reaksi konjugasi dengan beberapa
senyawa yang dihasilkan di dalam hati, seperti
glutation, asam glukoronat, glisin, dan asetat.
Hati juga berfungsi sebagai organ pertahanan
tubuh, yaitu dengan adanya sel Kupffer yang
mempunyai kemampuan fagositosis sel-sel
tua, partikel atau benda asing, sel tumor,
bakteri, virus, dan parasit di dalam hati. Hati
memiliki kapasitas cadangan yang besar, yaitu
hanya dengan 10% - 20% jaringan hati yang
masih berfungsi ternyata sudah cukup untuk
mempertahankan hidup pemiliknya.
Kemampuan regenerasi jaringan yang mati
cukup besar sehingga akan cepat digantikan
dengan yang baru (Dalimartha 2005).
Hati merupakan organ yang paling sering
mengalami kerusakan. Ada dua alasan
mengapa hati mudah terkena racun dan
kemudian mengalami kerusakan. Alasan
pertama, hati menerima lebih dari 80% suplai
darah dari vena porta. Vena tersebut
membawa zat-zat toksik dari tumbuhan, fungi,
bakteri, logam mineral, dan zat-zat kimia lain

yang diserap di usus ke darah portal untuk
ditransportasikan ke hati. Kedua, hati
menghasilkan enzim-enzim biotransformasi
untuk berbagai macam zat eksogen dan
endogen untuk dieliminasi di dalam tubuh.
Proses ini mungkin juga mengaktifkan
beberapa zat menjadi bentuk lebih toksik dan
dapat menyebabkan terjadinya perlukaan hati
seperti karbon tetraklorida (Jeon 2003).
Sel hati memiliki bentuk ultrastruktur yang
mencerminkan bahwa sel terlibat dalam
berbagai fungsi metabolik yang luas. Sel ini
mengandung berbagai enzim, yang meliputi
enzim alanin aminotransferase (ALT), enzim
aspartat aminotransferase (AST), alkalin
fospatase (ALP), gamaglutamil transpeptidase
(GGT), laktat dehidrogenase, dan 5-
nukleotidase, bilirubin, lipid, lipid peroksida.
Enzim adalah protein yang dihasilkan oleh sel
hidup dan umumnya terdapat di dalam sel.
Dalam keadaan normal terdapat
keseimbangan antara pembentukan dan
penguraian enzim. Beberapa diantara enzim
tersebut dapat dijadikan sebagai parameter
kerusakan hati (Ganong 2002). Apabila terjadi
kerusakan sel atau peningkatan permeabilitas
membran sel, enzim akan banyak keluar ke
ruang ekstra sel dan ke dalam aliran darah
sehingga dapat digunakan sebagai sarana
untuk membantu diagnostik penyakit tertentu.
Pemeriksaan enzim yang biasa dilakukan
untuk diagnosis kerusakan hati adalah ALT
dan AST (Ratnaningsih 2003).
Enzim ALT dan AST merupakan enzim
intraseluler yang berfungsi untuk mengatalisis
pemindahan gugus amino dari alfa amino ke
asam alfa keto. Enzim AST merupakan enzim
mitokondria yang berfungsi mengatalisis
pemindahan bolak-balik gugus amino dari
asam aspartat ke asam α-oksaloasetat
membentuk asam glutamat dan oksaloasetat.
Enzim ini tidak spesifik untuk disfungsi hati
karena enzim ini juga banyak ditemukan pada
otot rangka, pankreas, jantung dan ginjal.
Kadar enzim AST akan meningkat apabila
terjadi kerusakan sel yang akut seperti
nekrosis hepatoseluler dan infark kardium.
Jumlah AST meningkat secara nyata dalam
gangguan fungsi hati dan saluran empedu,
penyakit jantung dan pembuluh darah, serta
gangguan fungsi ginjal dan pankreas.
Sedangkan ALT merupakan enzim yang
terdapat pada sitosol hati dan terlibat dalam
glukoneogenesis, meningkatnya kadar enzim
ALT dalam darah terutama disebabkan oleh
kerusakan sel hati dan sel otot rangka.
Kerusakan diawali dengan perubahan
permeabilitas membran yang diikuti dengan
7
kematian sel. Enzim ini berperan dalam
mengkatalisis pemindahan gugus amino dari
alanin ke asam α-ketoglutarat membentuk
asam glutamat dan asam piruvat (Kaplan &
Pesce 1998). Menurut Stockham & Scoot
(2008), enzim ALT merupakan indikator
terbaik dalam melihat kerusakan hati. Pada
gangguan sel hati yang ringan maka enzim
sitoplasma akan merembes ke dalam serum
terutama enzim ALT. Oleh karena itu, kadar
enzim ALT bersifat khas dan spesifik
terhadap kerusakan sel hati sehingga sangat
cocok sebagai tes untuk menentukan adanya
gangguan fungsi hati walaupun dalam derajat
ringan. Pada manusia, nilai normal kadar
enzim ALT berkisar antara 5 hingga 25 U/L,
dan AST antara 5 hingga 35 U/L (Baron
1992). Sedangkan pada tikus, nilai normal
kadar enzim ALT berkisar antara 19,3 hingga
68,9 U/L dan AST antara 29,8 hingga 77,0
U/L (Pillchos et al. 2004 di dalam Windyagiri
2006).
Bahan-bahan toksik dapat menyebabkan
berbagai jenis kerusakan hati, diantaranya
degenerasi, perlemakan hati, nekrosis hati,
dan sirosis. Degenerasi suram, berbutir,
albuminoid atau parenkim sering terlihat pada
kejadian keracunan dan bersifat reversibel.
Ciri-ciri sel hati yang mengalami degenersi
adalah hati membesar, tepinya membulat,
konsistensinya rapuh, sedangkan bidang
sayatannya berwarna belang atau beraspek
seperti telah dimasak. Perlemakan hati terjadi
bila hati mengandung berat lipid lebih dari
5%. Beberapa hal yang dapat menyebabkan
perlemakan patologis hati adalah hipoksemi
karena hati tidak dapat membakar lemak, atau
karena adanya toksin yang mengakibatkan
penurunan fungsi lipolitik hati dan terjadi
penimbunan lipid intrasel sehingga sitoplasma
tampak bervakuola (Ressang 1984).
Nekrosis hati adalah kematian sel hati.
Nekrosis dapat bersifat fokal (sentral,
pertengahan, dan perifer) atau masif. Pada
umumnya nekrosis toksopatik hanya
memerlukan waktu singkat untuk
menimbulkan gejala klinis. Biasanya secara
hispatologi terlihat nekrosis setempat, teratur
dan tersebar di seluruh hati, akan tetapi bila
racun sangat kuat maka akan terlihat
gambaran nekrosis terpencar. Sirosis hati
adalah suatu keadaan yang menggambarkan
pangerasan hati. Sirosis dapat disebabkan oleh
berbagai hal tetapi penyebabnya belum
diketahui secara pasti. Pada umumnya bahan-
bahan toksik dan parasit dapat menyebabkan
sirosis hati (Ressang 1984; Price 1995).

BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Hewan percobaan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah tikus putih jantan strain
Sprague Dawley sebanyak 25 ekor dengan
kondisi sehat, memiliki aktivitas normal, dan
berumur 2 bulan dengan bobot badan berkisar
antara 200-250 gram, yang diperoleh dari
Pusat Studi Biofarmaka (PSB) Bogor. Daun
kari (Murraya koenigii) yang digunakan
diperoleh dari koleksi Balai Penelitian
Tanaman Tropis (BALITRO) Bogor.
Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah serbuk daun kari ukuran
40 mesh, parasetamol, kloroform, etanol
absolut (Merck), NaCl 0,9%, NaOH, FeCl3,
xilol, parafin, LiCl, akuades, kit reagen ALT
dan AST (Labkit), metanol 30%, etanol 30%,
70%, 80%, 90%, 96%, pewarna Meyer’s
Haemotoxylin, eosin, dan Curliv-plus® (obat
hepatitis komersil) dan beberapa pereaksi
fitokimia yang meliputi pereaksi Dragendorf,
Meyer, Wagner, serta campuran asam asetat
anhidrida dan H2SO4 pekat sebagai pereaksi
metode Lieberman Buchard.
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian
ini adalah alat-alat gelas, kertas saring biasa
dan whatman No. I, aluminium foil, oven,
mortar, shaker orbital, vacum rotavavor,
penangas air, neraca analitik, freeze dry,
spektrofotometer (BioSystem BTS-330),
mikroskop, dan sentrifus klinis. Peralatan
lainnya adalah corong pisah, pipet tetes, pipet
Mohr, pipet mikro, batang pengaduk, cawan,
mikrotom, syiring, gunting bedah, sonde oral,
vial, Tissue Tec, dan pH meter.
Metode Penelitian
Preparasi Sampel
Daun kari (Murraya koenigii) dikeringkan
dibawah sinar matahari secara langsung dan
menggunakan oven pada suhu 40-50°C.
Setelah daun benar-benar kering, kemudian
dilakukan penggilingan dengan menggunakan
mesin Discmill hingga terbentuk serbuk
berukuran 40 mesh.
Ekstraksi Daun Kari (Murraya koenigii)
(Ningappa 2008)
Ekstraksi daun kari dilakukan dengan
mengacu pada metode Ningappa (2008)
dengan sedikit modifikasi. Sebanyak 300
gram daun kari yang sudah berbentuk serbuk
dimaserasi dengan cara direndam ke dalam
800 mL etanol:air (1:1 v/v) pada suhu kamar
8
selama sehari-semalam. Larutan tersebut
diletakkan pada shaker orbital dengan
kecepatan 250 rpm. Hal ini bertujuan
mempercepat proses ekstraksi. Proses
ekstraksi dilakukan berulang-ulang sampai
filtrat yang dihasilkan jernih. Larutan hasil
maserasi dipisahkan melalui penyaringan
vacum dengan menggunakan kertas saring
biasa kemudian disaring kembali dengan
kertas saring Whatman No. I. Filtrat hasil
penyaringan kemudian dipekatkan dengan
menggunakan vacuum rotavavor pada suhu
50oC. Ekstrak yang diperoleh ditempatkan di
dalam botol tertutup dan disimpan di dalam
lemari es dengan suhu 4-8oC.
Analisis Fitokimia (Harbone 1987)
Uji Alkaloid. Ekstrak daun kari sebanyak
1 gram ditambahkan 10 mL kloroform dan
beberapa tetes NH4OH. Fraksi kloroform
dipisahkan dan diasamkan dengan H2SO4.
Fraksi H2SO4 dimasukkan ke dalam 3 buah
tabung reaksi, lalu ditambahkan pereaksi
Dragendorf pada tabung pertama, pereaksi
Meyer pada tabung kedua, dan pereaksi
Wagner pada tabung ketiga. Terdapatnya
alkaloid ditunjukkan dengan terbentuknya
endapan putih oleh pereaksi Meyer, endapan
merah oleh pereaksi Dragendorf, dan endapan
coklat oleh pereaksi Wagner.
Uji Saponin. Ekstrak daun kari sebanyak
1 gram ditambahkan air secukupnya dan
dipanaskan selama 5 menit. Larutan tersebut
didinginkan kemudian dikocok. Timbulnya
busa sampai selang waktu 10 menit
menunjukkan adanya saponin.
Uji Flavonoid dan Senyawa Fenolik.
Ekstrak daun kari sebanyak 1 gram ditambah
metanol 30% sampai terendam lalu
dipanaskan sekitar 5 menit. Filtratnya
ditambah NaOH 10% (b/v) atau H2SO4 pekat.
Terbentuknya warna merah karena
penambahan NaOH menunjukkan adanya
senyawa fenolik hidrokuinon sedangkan
warna merah yang terbentuk akibat
penambahan H2SO4 pekat menunjukkan
adanya senyawa flavonoid.
Uji Triterpenoid dan Steroid. Ekstrak
daun kari sebanyak 1 gram ditambah 10 mL
eter. Lapisan eter yang terbentuk dipipet lalu
diuapkan pada penangas air. Residu yang
didapat kemudian ditambah pereaksi
Lieberman Buchard (3 tetes asam asetat
anhidrida dan 1 tetes H2SO4 pekat). Warna
merah atau ungu menunjukkan kandungan
triterpenoid pada sampel sedangkan warna
hijau menunjukkan adanya kandungan steroid.

Uji Tanin. Ekstrak daun kari sebanyak 1
gram ditambahkan 10 mL akuades kemudian
dididihkan selama 5 menit. Larutan ini
disaring dan filtratnya ditambah 5 tetes FeCl3
1% (b/v). Warna biru tua atau hitam kehijauan
menunjukkan terdapatnya tanin.
Perlakuan Hewan Coba dan Rancangan
Percobaan
Tikus dikelompokkan menjadi 5 kelompok
dan masing-masing kelompok terdiri atas 5
ekor. Tikus dikandangkan secara individu
beralaskan sekam dan diberi pakan standar
sebanyak 20 g/ekor/hari dengan minum secara
ad libitum. Sebelum percobaan dilakukan,
tikus diaklimatisasi selama 14 hari untuk
menyeragamkan cara hidup dan pola makan,
menghindari risiko timbulnya stress, dan
membiasakan diri dengan lingkungannya.
Kemudian perlakuan pada hewan percobaan
dilakukan selama 3 minggu. Bobot badan dan
jumlah pakan yang digunakan diamati setiap
hari.
Tikus kelompok I merupakan kelompok
kontrol normal (N) yang selama penelitian
hanya diberi pakan standar dan dicekok
akuades. Kelompok II adalah kelompok
hepatotoksik/kontrol negatif (KN) yang
dicekok parasetamol dengan dosis 500 mg/kg
BB. Kelompok III merupakan kelompok
pembanding/kontrol positif (KP) yang
dicekok menggunakan Curliv-plus® (obat
hepatoprotektor komersil) dengan dosis 42,86
mg/kg BB. Sedangkan kedua kelompok
lainnya merupakan kelompok perlakuan.
Kelompok IV dicekok dengan ekstrak daun
kari dengan dosis 200 mg/kg BB dan
kelompok V dicekok dengan ekstrak daun kari
dengan 300 mg/kg BB. Perlakuan pada semua
kelompok percobaan dilakukan selama 3
minggu dan induksi parasetamol dosis 500
mg/kg BB pada kelompok III, IV, dan V
dilakukan pada minggu ke-2. Hal ini bertujuan
untuk mengkondisikan stres oksidatif pada
tikus. Pengambilan darah pada kelima
kelompok dilakukan melalui pembuluh darah
vena ekor (ujung ekor dipotong) sebanyak
empat kali, yaitu pada hari ke-0,-7,-14 dan -21
untuk pengukuran kadar enzim ALT dan AST
serum darah. Sebelum pengambilan darah,
tikus dipuasakan selama 16-18 jam.
Selanjutnya tikus dikorbankan dengan cara
dibius dengan eter yang kemudian dilakukan
nekropsi untuk pengujian histopatologi hati.
Perhitungan dosis pemberian parasetamol,
curliv-plus®, dan ekstrak daun kari dapat
dilihat pada Lampiran 4, dan rancangan
percobaan dapat dilihat pada Lampiran 2.
9
Pengukuran Kadar ALT dan AST
Metode analisis ALT dan AST mengacu
pada International Federation of Clinical
Chemistry (IFCC) (2002). Prinsip pengukuran
aktivitas ALT dan AST adalah mengukur laju
berkurangnya jumlah NADH menjadi NAD+
pada reaksi yang terjadi antara enzim dan
substrat yang dapat diukur pada panjang
gelombang 340 nm. Contoh mekanisme reaksi
yang terjadi dapat dilihat pada Gambar 3.
Sampel darah tikus disentrifugasi pada
kecepatan 3000 rpm selama 15 menit untuk
mendapatkan serumnya. Setelah itu, dilakukan
analisis kadar ALT dan AST. Sebanyak 100
µL serum darah tikus dicampur dengan 1000
µL reagen, kemudian diukur serapannya
dengan menggunakan spektrofotometer
BioSystem BTS-330 pada panjang gelombang
340 nm (Lampiran 3).
Pengukuran aktivitas kedua enzim tersebut
dilakukan dengan cara yang sama, hanya saja
reagen yang digunakan berbeda. Reagen yang
digunakan dalam pengukuran AST
mengandung buffer tris, L-aspartat, α-
ketoglutarat, laktat dehidrogenase, malat
dehidrogenase, dan NADH. Sedangkan
pereaksi yang digunakan dalam pengukuran
ALT mengandung buffer tris, L-alanin, α-
ketoglutarat, laktat dehidrogenase, dan
NADH.
Gambar 3 Mekanisme reaksi pada pengukuran
aktivitas ALT
Pembuatan Preparat Histopatologi Hati
Metode yang digunakan adalah metode
Jusuf (2009) yang terdiri atas 4 tahap, yaitu
fiksasi, dehidrasi, pencetakan (embedding),
dan pewarnaan (staining). Tahap fiksasi
dilakukan dengan memotong organ hati
dengan ukuran 2x2x1 cm, dimasukkkan ke
dalam buffer neutral formalin (BNF) 10%
selama 3x24 jam, kemudian dipotong lagi
dengan ukuran lebih tipis. Potongan-potongan
hati tersebut dilanjutkan ke tahap dehidrasi,
yaitu dengan perendaman menggunakan
etanol bertingkat (etanol 70%, 80%, 96%,
absolut I, absolut 2). Kemudian etanol
dihilangkan dengan xilol I dan II masing-
masing selama 40 menit. Infiltrasi

menggunakan parafin cair dilakukan pada
suhu 60oC selama 4 kali masing-masing
selama 30 menit. Sebelum pencetakan cetakan
dicuci dengan campuran etanol 96%, xilol,
dan air.
Pencetakan dilakukan dengan penuangan
parafin panas dalam blok cetakan sebanyak
setengah cetakan dengan alat Tissue Tec.
Potongan hati dimasukkan secara perlahan-
lahan agar tidak menyentuh dasar cetakan lalu
ditutup lagi dengan parafin cair. Setelah beku,
organ dalam parafin tersebut dipotong dengan
alat mikrotom setebal 4 - 5 μm. Potongan
yang diperoleh dimasukkkan ke dalam air
hangat (40oC) untuk melelehkan parafin,
kemudian diletakkan dalam kaca objek.
Potongan tadi dikeringkan dalam oven
inkubator bersuhu 56oC selama satu malam.
Tahap pewarnaan Haematoxylin Eosin
(HE) dilakukan setelah diparafinisasi, yaitu
preparat direndam menggunakan xilol I dan
xilol II masing-masing selama 2 menit,
rehidrasi dengan etanol absolut selama 2
menit, kemudian dengan etanol 96% dan 80%
masing-masing selama 1 menit, dan dicuci
dengan air mengalir. Kemudian preparat
direndam dalam pewarnaan Mayer’s
Haemotoxylin selama 8 menit, dicuci dengan
air mengalir, dimasukkan ke dalam LiCl
selama 30 detik, dan dicuci lagi dengan air
mengalir. Kemudian irisan preparat diberi
pewarna eosin selama 2-3 menit, lalu dicuci.
Setelah itu, irisan hati dicelupkan dalam
etanol 96% dan absolut I masing-masing
sebanyak 10 kali dan diteruskan dengan etanol
absolut II selama 2 menit, xilol I selama 1
menit dan xilol II selama 2 menit. Setelah
diangin-anginkan beberapa saat, preparat yang
telah diwarnai tersebut kemudian diberi
permounting medium dan ditutup dengan kaca
penutup. Setelah terbentuk sediaan histologi,
kemudian dilakukan pengamatan terhadap
perubahan yang terjadi pada sel-sel hati
dengan menggunakan mikroskop cahaya.
Pengamatan Histopatologi Hati (Kiernan
1990)
Pengamatan kerusakan sel hepatosit yang
meliputi nekrosis, degenerasi butir, degenerasi
lemak, oedema sirosis, dan pendarahan
dilakukan dengan cara pemberian skoring
lesio organ hati, yaitu sebagai berikut:
0: normal (tidak ada perubahan spesifik)
1: kerusakan ≤ 25% dari daerah pandang
2: kerusakan 25-50% dari daerah pandang
3: kerusakan 50-75% dari daerah pandang
4: kerusakan 75-100% dari daerah pandang
10
Analisis Data (Gaspersz 1994)
Pengamatan terhadap kadar enzim ALT
dan AST dilakukan dengan menggunakan
Rancangan Acak Lengkap (RAL), yaitu uji
analysis of Varian (ANOVA) pada tingkat
kepercayaan 95% dan taraf α=0.05.
Sedangkan pengamatan histopatologi jaringan
hati dilakukan dengan menggunakan cara
skoring lesio, selanjutnya data dievaluasi
dengan menggunakan analisis statistik
nonparametrik Kruskal-Wallis yang
dilanjutkan dengan uji Duncan. Seluruh data
tersebut dianalisis menggunakan program
perangkat lunak statistical analysis system
(SAS). Model RAL adalah sebagai berikut:
Yij = µ + τi + εij.
Keterangan:
µ = Pengaruh rataan umum
τi = Pengaruh perlakuan ke-i, i = 1, 2, 3, 4, 5
εij = Pengaruh galat perlakuan ke-i dan ulang-
an ke-j, j = 1, 2, 3, 4
Yij = Pengamatan perlakuan ke-i dan ulangan
ke-j
i = 1 adalah perlakuan pemberian pakan
standar dan cekok akuades
i = 2 adalah perlakuan pemberian pakan
standar, akuades, dan parasetamol dosis
500 mg/Kg BB
i = 3 adalah perlakuan pemberian pakan
standar, akuades, parasetamol, dan
Curliv-plus® dosis 42,86 mg/Kg BB
i = 4 adalah perlakuan pemberian pakan
standar, akuades, parasetamol, dan
ekstrak daun kari dosis 200 mg/Kg BB
i = 5 adalah perlakuan pemberian pakan
standar, akuades, parasetamol, dan
ekstrak daun kari dosis 300 mg/Kg BB
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi dan Penapisan Fitokimia
Rendemen ekstrak etanol:air (1:1) daun
kari yang didapat setelah dipekatkan dengan
menggunakan vacuum rotavavor adalah
19,2%. Nilai tersebut lebih besar jika
dibandingkan dengan hasil penelitian yang
telah dilakukan oleh Ningappa et al. (2008)
yaitu sebesar 12%. Hal ini disebabkan oleh
modifikasi metode maserasi yang dilakukan
yang meliputi lama ekstraksi, jumlah pelarut
yang digunakan, dan cara ekstraksi yang
dilakukan, yaitu dilakukan secara bertingkat
dan dengan bantuan shaker orbital dengan

kecepatan putar 250 rpm sehingga proses
ekstraksi berlangsung optimal dan ekstrak
yang didapat menjadi lebih banyak.
Sedangkan proses ekstraksi oleh Ningappa
hanya dilakukan melalui satu tahap ekstraksi.
Tabel 1 menunjukkan hasil uji fitokimia
ekstrak etanol:air (1:1) daun kari. Berdasarkan
hasil hasil tersebut, ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari menunjukkan adanya kandungan
alkaloid, Saponin, steroid, dan tanin. Hal ini
sesuai dengan beberapa hasil penelitian
terdahulu yang dilakukan oleh Kong et al.
(1986); Tee & Lim (1991); Ramsewak et al.
(1999); Tachibana et al. (2001); Nakahara et
al. (2002); dan Palaniswamy (2003).
Berdasarkan uji secara in vitro yang dilakukan
oleh Ningappa et al. (2008), menyatakan
bahwa ekstrak etanol:air (1:1) daun kari
mengandung senyawa antioksidan yang
merupakan golongan senyawa polifenol.
Menurut Winarti & Nurdjanah (2005),
Senyawa fitokimia merupakan senyawa kimia
yang terkandung dalam tanaman dan memiliki
peranan yang sangat penting bagi kesehatan
dan pencegahan terhadap beberapa penyakit
degeneratif. Beberapa senyawa fitokimia yang
bersifat antioksidan aktif diketahui memiliki
fungsi fisiologis adalah karotenoid, fitosterol,
saponin, glikosinolat, polifenol, inhibitor
protease, monoterpen, fitoestrogen, sulfida,
Tabel 1 Uji fitokimia ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari (Murraya koenigii)
Uji Hasil
Alkaloid +++
Flavonoid - jika dibandingkan dengan kelompok yang
Fenolik - lain. Hal ini disebabkan oleh salah satu efek
Saponin ++++
Steroid +++
Tanin ++++
Triterpenoid - menimbulkan gejala-gejala anoreksia, mual,
Keterangan :
Tanda (-) : Tidak terdeteksi
Tanda (+) : Adanya intensitas reaksi
Alkaloid : Sedikit endapan (+) sampai
banyak endapan (++++)
Flavonoid : Merah (+) sampai merah tua
(++++)
Fenolik : Merah (+) sampai merah tua
(++++)
Saponin : Sedikit busa (+) sampai busa
melebihi larutan (++++)
Steroid : Hijau muda (+) sampai hijau
tua (++++)
Tanin : Hijau (+) sampai hijau
kehitaman (++++)
Triterpenoid : Merah (+) sampai merah tua
(++++)
11
dan asam fitat. Senyawa-senyawa tersebut
banyak terkandung dalam sayuran, tanaman
rempah dan tanaman obat. Menurut Craig
(1999), diet yang menggunakan rempah-
rempah dalam jumlah banyak sebagai
penyedap makanan dapat menyediakan
berbagai komponen aktif fitokimia yang
bermanfaat menjaga kesehatan dan
melindungi tubuh dari penyakit kronis.
Keadaan Hewan Coba Selama Perlakuan
Selama perlakuan secara in vivo, salah satu
syarat pada perlakuan hewan coba adalah
kondisi hewan harus dalam keadaan sehat.
Beberapa parameter yang mudah diamati
untuk mengetahui kesehatan hewan coba
adalah dengan mengamati peningkatan bobot
badan dan konsumsi pakan (Lu 2006).
Kondisi tikus yang sehat ini menjadi faktor
yang penting karena dapat memperkecil nilai
galat percobaan yang terukur ketika memasuki
tahap percobaan.
Gambar 4 menunjukkan grafik bobot
badan (BB) hewan coba selama perlakuan.
Pada gambar terlihat jelas bahwa kelompok
normal terjadi peningkatan BB tikus yang
lebih besar dibandingkan dengan kelompok
yang lain. Fluktuasi pada BB tikus yang
terjadi disebabkan oleh nafsu makan yang
berbeda-beda antar satu tikus dengan tikus
yang lain. Disamping itu, hal ini disebabkan
oleh tikus dipuasakan selama 24 jam sebelum
pengambilan darah sehingga terjadi
penurunan BB yang cukup drastis. Kelompok
KN menunjukkan peningkatan BB terendah
pemberian parasetamol yang dapat
menurunkan nafsu makan. Menurut Gan
(1980), toksisitas parasetamol dapat
muntah, serta sakit perut yang terjadi dalam
24 jam pertama, dan dapat berlangsung terus
menerus selama seminggu atau lebih. Gejala-
gejala inilah yang menyebabkan menurunnya
nafsu makan yang berpengaruh terhadap BB
hewan coba.
Secara keseluruhan, pada semua kelompok
terjadi peningkatan BB hewan coba (Tabel 2).
Peningkatan ini disebabkan oleh kondisi tikus
yang masih berada dalam tahap pertumbuhan
(<6 bulan). Peningkatan BB yang paling
tinggi ditunjukkan oleh kelompok Normal,
yaitu 18,88%. Sedangkan peningkatan
terendah ditunjukkan oleh kelompok KN,
yaitu 7,97%. Sedangkan pada kelompok KP
dan kelompok perlakuan dosis 200 dan dosis
300 terjadi peningkatan bobot tikus secara

berturut-turut yaitu sebesar 13,42%, 11.81%,
dan 12,31%.
Gambar 4 Bobot badan hewan coba selama
perlakuan
Tabel 2 Peningkatan bobot badan hewan coba
selama perlakuan
Bobot (g) Peningkatan
Kelompok
awal akhir (%)
Normal 232,0 275,8 18,88
KN 238,4 257,4 7,97
KP 228,0 258,6 13,42
ED 200 230,4 257,6 11,81
ED 300 234,0 262,8 12,31
Keadaan Hewan Coba Sebelum Perlakuan
Pada hari ke-0 (setelah tikus
diadaptasikan/aklimatisasi selama 14 hari),
dilakukan analisis serum pada kelima
kelompok perlakuan. Hal ini dilakukan untuk
mengetahui keadaan normal aktivitas enzim
ALT dan AST sebelum perlakuan yang
kemudian akan dijadikan keadaan populasi
normal. Aktivitas enzim dinyatakan dalam
satuan U/L yang berarti bahwa satu unit
aktivitas enzim transaminase setara dengan 1
µmol piruvat dan oksaloasetat yang dihasilkan
per menit pada kondisis perlakuan. Hasil uji
aktivitas enzim ALT dan AST pada hari ke-0
menunjukkan hasil yang seragam dengan
rataan aktivitas enzim ALT sebesar 1,96 ±
0,82 U/L dan rataan aktivitas enzim AST
sebesar 1,84 ± 0,33 U/L (Tabel 3). Nilai
tersebut berada pada kisaran yang sangat
rendah. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian
terdahulu yang dilakukan oleh Cabaud (1956),
yang menyatakan bahwa aktivitas normal
enzim ALT berada pada kisaran 1 – 45 U/L
dan aktivitas normal enzim AST berada pada
kisaran 4 – 40 U/L. Hal ini menunjukkan
bahwa pada hari ke-0 tikus pada semua
kelompok percobaan berada pada kisaran
normal sehingga dapat disimpulkan bahwa
semua tikus dalam kondisi sehat dan tidak
terjadi kerusakan pada organ hati.
12
Aktivitas enzim ALT dan AST tersebut,
jika dibandingkan dengan hasil penelitian
yang dilakukan Adji (2004) dan Marliana
(2005) menunjukkan hasil yang jauh berbeda.
Adji (2004) melaporkan bahwa aktivitas
enzim ALT dan AST pada tikus Sprague
Dawley sebelum masa percobaan berkisar
antara 18,29 – 29,23 U/L dan 32,0 – 67,01
U/L. Sedangkan Marliana (2005) menyatakan
bahwa sebelum masa percobaan, kadar enzim
ALT dan AST pada tikus Sprague Dawley
adalah sebesar 16,29 – 28,55 U/L dan 39,23
– 71,53 U/L. Perbedaan hasil analisis tersebut
mungkin disebabkan oleh beberapa faktor,
diantaranya adalah faktor stres yang dapat
terjadi melalui peningkatan aktivitas syaraf
simpatik perifer (Arakawa et al. 1966),
perbedaan bobot tikus, hemolisis, keadaan
fisiologis dan makroenzim yang berbeda, alat
dan metode analisis yang digunakan, bahkan
perbedaan kit reagen yang digunakan juga
dapat mempengaruhi hasil analisis (Hollans &
Logan 1966).
Tabel 3 Aktivitas enzim ALT dan AST serum
darah tikus pada hari ke-0
Kelompok ALT (U/L) AST (U/L)
Normal 2,2 ± 1,10 2,0 ± 0,71
KN 2,8 ± 0,84 2,2 ± 1,10
KP 2,6 ± 0,55 2,0 ± 0,71
ED 200 1,2 ± 0,45 1,6 ± 0,55
ED 300 1,0 ± 0,00 1,4 ± 0,55
Rerata 1,96 ± 0,82 1,84 ± 0,33
n = 25
Aktivitas Enzim Transaminase
Daya hepatotoksik parasetamol terhadap
hati dapat dikaji dari aktivitas enzim ALT dan
AST serum darah setelah pemberian dosis
toksik. Kerusakan hati dapat menyebabkan
produk sekresinya seperti enzim ALT dan
AST bebas keluar sel dan masuk ke pembuluh
darah sehingga kadar ALT dan AST dalam
darah menjadi meningkat bahkan melebihi
batas normal. Pada keadaan kronis, aktivitas
enzim ALT dan AST dalam darah dapat
mengalami peningkatan sebanyak 1-5 kali
lebih tinggi bila dibandingkan dengan keadaan
normal, bahkan menurut Akbar (1995),
peningkatan kadar ALT dan AST dapat
mencapai 5 hingga 10 kali lebih tinggi
dibandingkan dengan keadaan normal.
Gambar 5 dan Gambar 6 menunjukkan
hasil analisis aktivitas enzim ALT dan AST
serum darah tikus selama perlakuan. Aktivitas
enzim ALT pada kelompok normal selama
perlakuan dari hari ke-0 hingga hari ke-21

berkisar antara 2,2 – 48,2 U/L. Sedangkan
aktivitas enzim AST berkisar antara 2,0 –
142,6 U/L. Berdasarkan Pillichos et al.
(2004), nilai aktivitas enzim ALT dan AST
normal pada tikus berkisar antara 19,3 – 68,9
U/L dan 29,8 – 77,0 U/L. Nilai aktivitas
enzim ALT yang diperoleh ini dapat
dikatakan berada pada ambang batas normal.
Namun, pada aktivitas enzim AST
menunjukkan hasil yang jauh berbeda dan
lebih tinggi. Hal ini disebabkan oleh
keberadaan AST yang tidak hanya dijumpai
pada sitosol hati, tetapi juga dijumpai pada
otot rangka, pankreas, jantung dan ginjal.
Selain itu, hal ini juga disebabkan oleh darah
tikus yang mengalami hemolisis yang dapat
dilihat dari warna serum darah yang agak
kemerahan sehingga menyebabkan aktivitas
Gambar 5 Aktivitas enzim ALT selama perlakuan
Gambar 6 Aktivitas enzim AST selama perlakuan
13
enzim AST menjadi lebih tinggi. Hollands &
Logan (1966), menyatakan bahwa fenomena
hemolisis pada serum darah dapat
menyebabkan peningkatan aktivitas enzim
AST secara signifikan namun tidak
berpengaruh terhadap aktivitas enzim ALT.
Menurut Adji (2004), fenomena hemolisis
dapat disebabkan oleh mekanisme biokimia,
fisik maupun kimia. Oleh karena itu, aktivitas
enzim ALT bersifat khas dan spesifik
terhadap kerusakan sel hati sehingga
merupakan indikator terbaik dalam melihat
dan menentukan adanya gangguan fungsi hati
walaupun dalam derajat ringan (Stockham &
Scoot 2002).
Pada kelompok KP dan kelompok
perlakuan, obat curliv sebagai pembanding
dan ekstrak daun kari diberikan selama 7 hari

pertama sebelum hati tikus dirusak oleh
parasetamol. Hal ini bertujuan untuk
mengetahui khasiat ekstrak dalam melindungi
hati terhadap kerusakan akibat pemberian
parasetamol dalam dosis toksik pada minggu
selanjutnya (minggu ke-2). Hasil analisis
menunjukkan bahwa ekstrak daun kari dan
obat curliv yang diberikan tidak bersifat
toksik maupun menyebabkan terjadinya
gangguan fungsi hati. Hal tersebut terlihat dari
aktivitas enzim ALT (Gambar 5) yang secara
statistik menunjukkan hasil yang tidak
berbeda nyata (P<0,01) antara hari ke-0 dan
hari ke-7 jika dibandingkan dengan kelompok
normal (Lampiran 9). Begitu juga dengan
kelompok KN (hepatotoksik) yang diinduksi
parasetamol belum menunjukkan pengaruh
yang nyata (P<0,01) terhadap peningkatan
aktivitas ALT.
Aktivitas enzim ALT meningkat secara
signifikan pada semua kelompok perlakuan
terjadi pada hari ke-14 setelah pemberian
parasetamol pada minggu ke-2 (Gambar 5).
Tabel 4 menunjukkan perubahan aktivitas
enzim ALT pada hari ke-14 dan hari ke-21
jika dibandingkan dengan kelompok normal.
Pada hari ke-14, aktivitas enzim ALT pada
kelompok KN (hepatotoksik) meningkat
secara signifikan sebesar 84,82% atau hampir
2 kali jika dibandingkan dengan kelompok
normal. Sedangkan peningkatan enzim ALT
pada kelompok KP (pembanding), ED200,
dan ED300 yaitu sebesar 32,98%, 48,17%,
dan 36,13%. Nilai tersebut lebih kecil jika
dibandingkan dengan kelompok KN. Secara
statistik, tidak terdapat perbedaan yang nyata
(P<0,01) antara ketiga kelompok perlakuan
(KP, ED200, dan ED300) tersebut dengan
kelompok normal dan berbeda nyata (P<0,01)
jika dibandingkan dengan kelompok KN. Hal
ini menunjukkan bahwa pemberian obat curliv
dan ekstrak daun kari memberikan pengaruh
yang sifnifikan terhadap mekanisme
perlindungan hati dari pengaruh radikal bebas
akibat pemberian parasetamol selama 7 hari
sebelumnya.
Pada minggu terakhir perlakuan, ketiga
kelompok perlakuan (KP, ED200, dan
ED300) kembali dicekok dengan obat curliv
dan ekstrak daun kari. Hal ini bertujuan
melihat mekanisme perlindungan hati setelah
dilakukan pengrusakan dengan parasetamol
dosis toksik selama satu minggu sebelumnya.
Pada kelompok KN tingkat kerusakan hati
semakin bertambah yang ditandai dengan
peningkatan aktivitas enzim ALT sebesar
131,95%. Sebaliknya, pada kelompok
perlakuan menunjukkan peningkatan aktivitas
14
enzim ALT yang menurun dibandingkan
dengan aktivitas enzim ALT minggu
sebelumnya, yaitu sebesar 46,67% pada
kelompok ED200 dan 34,85% pada kelompok
ED300. Bahkan pada kelompok KP, aktivitas
enzim ALT lebih kecil jika dibandingkan
dengan kelompok normal. Hal ini
menunjukkan bahwa adanya pengaruh nyata
(P<0,01) terhadap mekanisme perlindungan
hati yang diberikan oleh obat curliv maupun
ekstrak daun kari. Pengaruh signifikan
tehadap mekanisme perlindungan hati
ditunjukkan oleh obat curliv dan ekstrak daun
kari dosis 300 mg/Kg BB. Walaupun ekstrak
daun kari dengan dosis 200 mg/Kg BB
memberikan pengaruh yang nyata namun,
secara statistik menunjukkan pengaruh yang
tidak signifikan. Oleh karena itu, dapat
disimpulkan bahwa semakin besar dosis daun
kari yang diberikan maka mekanisme
perlindungan hati semakin tinggi (Lampiran
9).
Gambar 6 menunjukkan hasil analisis
aktivitas enzim AST selama perlakuan. Pada
gambar tersebut terlihat bahwa peningkatan
enzim AST secara signifikan mulai terjadi
pada hari ke-7. Tabel 5 menunjukkan
peningkatan aktivitas enzim AST pada hari
ke-14 dan hari ke-21 dibandingkan dengan
kelompok normal. Pada hari ke-14,
peningkatan secara signifikan (P<0,01) terjadi
pada kelompok KN, yaitu sebesar 82,67 %
atau hampir 2 kali jika dibandingkan dengan
kelompok normal. Sedangkan pada kelompok
KP, ED200, dan ED300 terjadi peningkatan
enzim AST sebesar 36,80%, 49,39%, dan
46,73%. Nilai tersebut lebih kecil jika
dibandingkan dengan kelompok KN
(hepatotoksik). Hal ini menunjukkan adanya
pengaruh mekanisme perlindungan hati
terhadap pemberian parasetamol. Namun
secara statistik, pengaruh secara signifikan
(P<0,01) ditunjukkan oleh kelompok KP yang
Tabel 4 Perubahan aktivitas enzim ALT darah
tikus pada hari ke-14 dan -21
dibandingkan dengan kelompok
normal
Peningkatan enzim ALT (%)
Kelompok
Hari ke-14 Hari ke-21
KN 84,82b 131,95c
a
KP 32,98 -0,02a
a
ED200 48,17 46,47b
a
ED300 36,13 34,85ab
Catatan : Huruf yang berbeda pada kolom
yang sama menunjukkan nilai
berbeda nyata (P<0,01) dalam
mekanisme perlindungan sel hati.

diberi obat curliv. Sedangkan kelompok
perlakuan ED200 dan ED300 tidak
memberikan pengaruh yang signifikan
terhadap mekanisme perlindungan hati.
Aktivitas enzim AST pada hari terakhir
perlakuan menunjukkan peningkatan yang
tidak terlalu besar jika dibandingkan dengan
hari ke-14 (Tabel 5). Pada kelompok KN,
aktivitas enzim AST menjadi semakin tinggi
dan meningkat sebesar 40,53% jika
dibandingkan dengan kelompok normal.
Sedangkan pada kelompok perlakuan (KP,
ED200, dan ED300), aktivitas enzim AST
menunjukkan hasil yang lebih rendah jika
dibandingkan dengan kelompok normal,
sehingga menunjukkan peningkatan aktivitas
enzim AST yang menurun dibandingkan
dengan aktivitas enzim AST minggu
sebelumnya. Secara statistik, ketiga kelompok
perlakuan tersebut memberikan pengaruh
yang nyata (P<0,01) dalam mekanisme
perlindungan hati terhadap senyawa radikal
bebas (NAPQI) yang merupakan seyawa hasil
metabolisme parasetamol. Mekanisme
perlindungan tertinggi ditunjukkan oleh
kelompok KP (pembanding) yang diberi obat
culiv, diikuti dengan kelompok ED300 dan
ED200. Hal ini menunjukkan semakin besar
dosis daun kari yang diberikan maka semakin
besar mekanisme perlindungan hati yang
diberikan (Lampiran 11).
Mekanisme perlindungan hati oleh ekstrak
daun kari diduga disebabkan oleh senyawa
aktif yang terkandung didalamnya yang
merupakan golongan senyawa antioksidan.
Senyawa antioksidan tersebut berperan dalam
mengikat maupun menghambat proses
oksidasi radikal bebas (NAPQI) dan
membentuk senyawa yang stabil sehingga
tidak terjadi kerusakan sel hepatosit. Menurut
Muragesh et al. (2005), senyawa antioksidan
alami secara farmakologi memiliki aktivitas
hepatoproteksi.
Tabel 5 Perubahan aktivitas enzim AST darah
tikus pada hari ke-14 dan -21
dibandingkan dengan kelompok
normal
Peningkatan enzim AST (%)
Kelompok
Hari ke-14 Hari ke-21
KN 82,57c 40,53b
b
KP 36,80 - 42,78a
bc
ED 200 49,39 - 12,62a
bc
ED 300 46,73 - 18,65a
Catatan : Huruf yang berbeda pada kolom
yang sama menunjukkan nilai
berbeda nyata (P<0,01) dalam
mekanisme perlindungan sel hati.
15
Gambaran Histopatologi Hati
Hasil uji histopatologi jaringan
menunjukkan adanya kerusakan yang terjadi
terutama pada jaringan hati tikus yang
diinduksi parasetamol (Gambar 7B). Pada
keadaan normal, hati tersusun atas lobulus-
lobulus. Sel hepatosit dalam lobulus tersusun
rapi seperti melingkar (radial) menuju pusat
vena sentralis. Batas antara tiga lobulus yang
berdekatan membentuk segitiga Kiernan yang
terdiri dari vena, saluran empedu, dan arteri
(Gambar 7A).
Berbeda dengan kelompok normal,
kelompok KN (hepatotoksik) yang dicekok
dengan parasetamol mengalami kerusakan
hati yang cukup signifikan. Kerusakan
jaringan hati meliputi degenerasi butir,
nekrosis, vakuolisasi, sel apoptosis,
haemorrhagi, dan degenerasi lemak yang
merata diseluruh jaringan. Terjadinya
degenerasi lemak disebabkan adanya serangan
radikal bebas yang menyebabkan peroksidasi
lipid. Sel hati juga mengalami pendarahan
yang merata diseluruh jaringan dan adanya
kematian sel yang dapat terlihat dari
mengecilnya atau bahkan hilangnya inti sel.
Batas antar sel dan bentuk radial sel hepatosit
dalam lobulus hati juga tidak terlihat dan
seolah-olah menjadi tidak teratur. Hasil
penelitian serupa juga menunjukkan bahwa
metabolit toksik asetaminofen (NAPQI)
menyebabkan kerusakan mitokondria
(Burham & Harman 1991).
Pada kelompok KP (Gambar 7C),
gambaran histologi hati menunjukkan keadaan
yang serupa dengan keadaan normal. Hal ini
menunjukkan bahwa obat curliv memberikan
pengaruh terhadap mekanisme perlindungan
hati. Hal ini terlihat pada gambar yang
menunjukkan adanya regenerasi sel hepatosit.
Selain disebabkan oleh regenerasi secara
alami Perbaikan sel hepatosit diduga
dipengaruhi oleh zat kimia aktif yang terkan-
dung didalam obat curliv, yang meliputi
silymarin, schizandrae, curcuma, radix, kolin
bitartrat, dan vitamin B6. Gambaran
histopatologi hati ini menguatkan analisis
aktivitas enzim ALT dan AST pada akhir
perlakuan yang mencapai batas normal.
Berdasarkan analisis aktivitas enzim ALT
dan AST serum darah tikus, pemberian
ekstrak daun kari menunjukkan adanya
mekanisme perlindungan hati. Namun,
gambaran histologi hati pada kedua dosis
menunjukkan hasil yang berbeda. Pada
ED200 (Gambar 7D) perbaikan sel hepatosit
yang terjadi tidak begitu berarti. Pada
perlakuan ini kerusakan sel hepatosit masih
 16

terlihat adanya degenerasi butir dan
degenerasi lemak, tetapi tidak sebanyak pada
kelompok hepatotoksik. Namun, sebagian sel
hepatosit normal mulai terlihat dari inti sel
yang tampak jelas. Hal ini menandakan bahwa
adanya proses menuju regenerasi walaupun
belum signifikan. Sedangkan pada pemberian
ED300 (Gambar 7E) mampu mengembalikan
sel-sel hepatosit menjadi normal kembali. Hal
ini terlihat dari sel hepatosit yang menjadi
lebih teratur dengan batas antar sel serta
bentuk radial dalam lobulus sudah mulai
terlihat.
Hasil uji statistik Kruskal-Wallis (Tabel 6)
yang dilanjutkan dengan uji Duncan
menunjukkan bahwa efek perlindungan hati
paling baik diberikan oleh ED300 dan obat
curliv. Kolompok KN (hepatotoksik)
memberikan nilai yang sangat berbeda nyata
(P<0,05) jika dibandingkan dengan kelompok
normal. Sebaliknya, tidak terdapat perbedaan
yang nyata (P<0,05) antara kelompok
perlakuan (KP, ED200, dan ED300) dan
kelompok normal. Namun, jika dibandingkan
antara ketiga perlakuan tersebut dengan
kelompok hepatotoksik, kelompok ED300 dan

Gambar 7 Gambaran sel hati tikus. A) Perlakuan normal. Sel hati normal dengan inti sel yang
berukuran normal (n). B) Pemberian parasetamol 500 mg/kg BB. Sel hati mengalami
nekrosis (nk) C) Pemberian curliv-plus® 42,86 mg/kg BB dan parasetamol 500 mg/kg
BB. Regenerasi sel hati (r). D) Pemberian ekstrak daun kari 200 mg/kg BB dan
parasetamol 500 mg/kg BB. Vakuolisasi sel hati (v). E) Pemberian eksrak daun kari
300 mg/kg BB dan parasetamol 500 mg/kg BB. Tidak ada kelainan spesifik dan sel hati
berukuran normal (n). Objektif HE. x200

KP memberikan pengaruh yang signifikan
dalam mekanisme perlindungan hati.
Sedangkan ED200 belum menunjukkan hasil
yang signifikan, walaupun secara statistik
menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata.
Hasil uji histopatologi hati memberikan
informasi yang sama dengan hasil analisis
aktivitas enzim ALT dan AST, yaitu efek
hepatoprotektor dari ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari dapat melindungi sel hati tikus yang
diinduksi parasetamol serta dapat mengurangi
dan memperbaiki kerusakan hati.
Tabel 6 Hasil uji Kruskal-Wallis kelainan
histopatologi hati
Kelompok Skor kerusakan
Normal 11,70 ab
KN 23,00 c
KP 09,80 ab
ED 200 14,50 b
ED 300 06,00 a
Catatan : Huruf yang berbeda pada kolom
yang sama menunjukkan nilai
berbeda nyata (P<0,05)
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Ekstrak etanol:air (1:1) daun kari
mengandung senyawa alkaloid, saponin,
steroid, dan tanin. Pemberian Ekstrak
etanol:air (1:1) daun kari dapat melindungi sel
hati tikus yang diinduksi parasetamol serta
dapat mengurangi dan memperbaiki sel-sel
hepatosit hati yang mengalami kerusakan.
mekanisme perlindungan hati secara
signifikan (P<0,01) terjadi pada pemberian
ekstrak daun kari dosis 300 mg/Kg BB dan
pemberian obat curliv-plus® sebagai
pembanding, diikuti dengan ekstrak daun kari
dosis 200 mg/Kg BB. Dari hasil tersebut dapat
disimpulkan bahwa ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari memiliki aktivitas sebagai
hepatoprotektor dan semakin besar dosis
ekstrak daun kari yang diberikan, maka
semakin tinggi pula efek yang diberikan.
Saran
Perlu dilakukan penelitian serupa dengan
cara penambahan waktu penelitian maupun
penambahan dosis bertingkat untuk
mengetahui dosis yang aman dan berkhasiat
optimal sebagai hepatoprotektor. Selain itu,
perlu diteliti lebih lanjut mengenai senyawa
bioaktif yang terkandung didalam daun kari
yang berpengaruh sebagai hepatoprotektor.
17
Hewan coba lain, seperti kelinci atau satwa
primata juga dapat digunakan untuk
mengetahui pengaruh ekstrak etanol:air (1:1)
daun kari sebelum diaplikasikan pada
manusia.
DAFTAR PUSTAKA
Adji P. 2004. Daya antioksidasi saponin akar
kuning (Archangelisia flava L. Merr)
sebagai mekanisme hepatoproteksi pada
tikus yang diinduksi parasetamol
[Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut
Pertanian Bogor.
Ahmed S et al.. 2000. Evaluation of the
efficacy of Lawsonia alba in the
alleviation of carbon tetrachloride
induced oxidative stress. Abstract. J
Ethnopharmacol. 9: 157-164.
Akbar N. 1995. Diagnostik Hepatitis Akut dan
Kronis. Jakarta: Bagian Ilmu Penyakit
Dalam FKUI/RSCM.
Arakawa H, Kodama H, Matsouka N,
Yamaguchi I. 1996. Stress increases
plasma activity in rats: differential
effects of andrenergic and cholinergic
blockades. J Pharmacol Experiment
Therapeutics. 280: 1296-1303.
Arulselvan P et al.. 2006. Anti-diabetic effect
of Murraya koenigii leaves on
streptozotocin induced diabetic rats.
Pharmazie. 61: 874-877.
Aryadi Q. 2009. Potensi hepatoprotektor
ekstrak rosella (Hibiscus sabdariffa L)
terhadap hati tikus yang diinduksi
parasetamol [skripsi]. Bogor: Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Institut Pertanian Bogor.
Balamurugan M, Parthasarathi K,
Ranganathan LS, Cooper EL. 2008.
Hypothetical mode of action of
earthworm extract with hepatoprotective
and antioxidant properties. J. Zhejiang
Univ. Sci. B. 9: 141-147.
Baron DN. 1992. Kapita Selekta Patologi
Klinik Ed ke-4. Andrianto P, Gunawan J,
penerjemah. Jakarta: EGC. Terjemahan
dari: A Short Textbook of Chemical
Pathology. Hlm 113-231.

Batubara I. 2003. Saponin akar kuning
(Arcangelisia flava (L) Merr) sebagai
hepatoprotektor: ekstraksi, pemisahan,
dan bioaktivasinya [tesis]. Bogor:
Program Pascasarjana, Institut Pertanian
Bogor.
Bhakta T et al.. 1999. Evaluation of
hepatoprotective activity of Cassia
fistula leaf extract. Abstract. J
Ethnopharmacol. 66: 277-282.
Bhat M et al.. 2008. Antidiabetic Indian
plants: a good source of potent amylase
inhibitors. eCAM Adance Access
Published. 411: 07-11.
Burham PC, Harman AW. 1991.
Acetominophen toxicity result in site-
spesific mitochondrial demage in
isolated mouse hepatocytes. J Biol
Chem. 266: 5049-5054.
Cabaud P, Leeper R, Wr6blewski F. 1956.
Colorimetric measurement of serum
glutamic oxaloacetic transaminase.
Amer. J. Clin. Path. 26: 1101-1105.
Chattopadhyay RR. 2003. Possible
mechanism of hepatoprotective activity
of Azadirachta indica leaf extract. J
Ethnopharmacol. 89: 217–219.
Craig WJ. 1999. Health promoting properties
of common herbs. Am. J. Clin. Nutr. 70:
491−499.
Choudhury RP, Garg AN. 2007. Variation in
essential, trace and toxic elemental
contens in Murraya koenigii-A spice and
medicinal herb from different Indian
states. Food Chemistry. 104: 1454-1463.
Dalimartha S. 2005. Ramuan Tradisional
untuk Pengobatan Hepatitis. Jakarta:
Penebar Swadaya.
Firmansyah M. 2006. Khasiat hepatoproteksi
ekstrak daun sangitan (Sumbucus
javanica Reinw. ex Blume.) pada tikus
putih galur Sprague Dawley yang diberi
parasetamol [Skripsi]. Bogor: Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Institut Pertanian Bogor.
Fox JG, Cohen BJ, Loew FM. 1984.
Laboratory Animal Madicine. Orlando:
Academic Pr.
18
Gan S et al.. 1980. Farmakologi dan Terapi.
Ed ke-2. Jakarta: UI Pr.
Ganong F. 2002. Buku Ajar Fisiologi
Kedokteran. Edisi ke-20. Djauhari HM,
penerjemah. Jakarta: EGC. Terjemahan
dari: Review of Medical Physiology.
Gaspersz V. 1994. Metode Rancangan
Percobaan. Bandung: CV ARMICO.
Gibson GG, Sket P. 1991. Pengantar
Metabolisme Obat. Aisyah BI,
penerjemah. Jakarta: UI Pr. Terjemahan
dari: Drugs Metabolisme.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia:
Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Padmawinata K, Sudiro I,
penerjemah. Bandung: ITB Pr.
Terjemahan dari: Phytochemical
Method.
Harun N, Syahri W. 1999. Aktivitas
antioksidan ekstrak daun dewa dalam
menghambat sifat hepatotoksik halotan
dengan dosis subanestesi pada mencit
[skripsi]. Jambi: Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas
Jambi.
Hernani, Raharjo M. 2005. Tanaman
Berkhasiat Antioksidan. Jakarta:
Penebar Swadya.
Hollands MA, Logan JE. 1966. An
examination of commercial kits for the
determination of glutamic oxaloacetic
transaminase (GOT) and glutamic
pyrupic transaminase (GPT) in serum.
Canad. J Med. Ass. 95: 303-307.
Hougon P. 2004. The Curry Tree That Telps
Diabetes. London: British Pharmaceutial
Conference.
International Federation of Clinical Chemistry
(IFCC). 2002. Photometric UV-test for
Determination of Alanin
Aminotransferase (GPT/ALAT) and
Aspartat Aminotransferase (GOT/ASAT).
Jakarta: Rajawali Nusindo.
Ito C et al.. 2005. Induction of apoptosis by
carbazole alkaloids isolated from
Murraya koenigii. Phytomedicine. 13:
359-365.
Jeon et al.. 2003. Antioxidative effect of
chitosan on chronic carbon tetrachloride

induced hepatic injury in rat. Toxicology.
187: 67-73.
Jusuf AA. 2009. Histoteknik Dasar. Jakarta:
UI Pr.
Kaplan LA, Pesce JA. 1998. Clinical
Chemistry: Theory Analysis and
Correlation. Ed ke-3. New York: Mosby
Year Book.
Kavalci C, Kavalci G, Sezenler E. 2009.
Acetaminophen poisioning: case report.
The Int. J. Toxicology. 6: 385-392.
Kiernan JA. 1990. Histological & from Micromelum minurum. J Agric
Histochemial Methods: Theory and
Practice. Ed ke-2. Canada: Pergamon Pr.
Kong YC et al.. 1986. Sourch of the anti-
implantation alkaloid yuehchukene in the
genus Murraya. J Ethnopharmacol. 15:
195-200.
Lawal et al.. 2008. Hypoglycaemic and
hypolipidaemic effects of the aqueous
leaf extract of Murraya koenigii in
normal and alloxan-diabetic rats. Niger J
Physiol Sci. 23: 37-40.
Lee JI et al.. 2003. Apoptosis of hepatic
stellate cells in carbon tetrachloride
induced acute liver injury of the rat:
analysis of isolate hepatic stellate cells. J
Ethnopharmacol. 39: 960-966.
Lenny S. 2006. Senyawa Flavonoid,
Fenilflavonoid, dan Alkaloida. Medan:
USU Pr.
Lu F. 2006. Toksikologi Dasar: Asas, Organ
sasaran, dan Penilaian Risiko. Nugroho,
penerjemah. Jakarta: UI Pr. Terjemahan
dari: Toxicology, Fundamentals, Target
Organs, and Risk Assesment.
Marliana N. 2005. Potensi ekstrak daging
buah mahkota dewa (Phaleria
macrocarpa (Scheff.) Boerl.) sebagai
hepatoprotektor pada tikus putih galur
Sparague Dawley [skripsi]. Bogor:
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor.
Murray RK, Granner DK, Rodwel VW. 2009.
Biokimia Harper. Ed ke-27. Wulandari
N et al., penerjemah. Jakarta: EGC.
Terjemahan dari: Harper’s Illustrated
Biochemistry,27th ed.
19
Murugesh KS, Yeligar VC, Maiti BC, Maiti
TK. 2005. Hepatoprotective and
antioxidant role of Berberis tinctoria
Lesch leaves on paracetamol induces
hepatic damage in rats. IJPT. 41: 64-69.
Muthumani P et al.. 2009. Pharmacological
studies of anticancer, anti inflammantory
activities of Murraya koenigii (Linn)
Spreng in experimental animals. J
Pharm. Sci. Res. 1: 137-141.
Nakahara K et al.. 2002. Antimutagenicity of
some edible thai plant and a bioactive
carbazole alkaloid, mahanine, isolated
Food Chem. 50: 4796-4802.
Ningappa MB, Dinesha R, Srinivas L. 2008.
Antioxidant and free radical scavenging
activities of polyphenol-enriched curry
leaf (Murraya koenigii L.) extracts. Food
Chem. 106: 720-728.
Ningappa MB et al..2009. Potent antibacterial
property of APC protein from curry
leaves (Murraya koenigii L.). Food
Chem. 118: 747-750.
Ong ASH, Niki E, Packer L. 1995. Nutrition,
Lipids, and Desease. Champaign Illinois:
AOCS Pr.
Packer L. 1995. Oxidative stress, antioxidants,
aging and desease. Di dalam: Cutler RG,
Packer J, Bertram A, Mori, editor.
Oxidative Stress and Aging. Basel
Switzerland: Birkhauser Verlag. hlm 1 –
14.
Packer L, Ong ASH. 1998. Biological Oxidant
and Antioxidant: Molecular Mechanism
and Health Effects. Campaign Illinois:
AOCS Pr.
Panjaitan RG. 2008. Pengujian aktivitas
hepatoprotektor akar pasak bumi
(Eurycoma longifolia Jack.) [tesis].
Bogor: Program Pascasarjana, Institut
Pertanian Bogor.
Palaniswamy UR, Caporuscio C, Stuart JD.
2003. A chemical analysis of antioxidant
vitamins in fresh curry leaf (Murraya
koenigii) by reversed phase HPLC with
UV detection. Acta Horticulture. 620:
475-478.
Pilichos C, Perrea D, Demorakou M, Preza A,
Donta I. 2004. Management of carbon

tetrachloride-induced acute liver injury
in rats by syngeneic hepatocyte
transplantation inspleen and peritoneal
cavity. World J Gasroenterol 10: 2099-
2112.
Price SA, Wilson LM. 1995. Patologi Sel
dalam:Patofisiologi. Jakarta: EGC.
Rana et al.. 2004. Chemical constituents of
the volatile of Murraya koenigii leaves.
Int J Aromather 14: 23-25.
Ramsewak RS et al.. 1999. Biologically active
carbazole alkaloids from Murraya
koenigii. J Agri & Food Chem. 47: 444-
447.
Ratnaningsih A. 2003. Pengaruh kadmium
terhadap gangguan patologik pada hati
tikus percobaan. Jurnal Matematika,
Sains dan Teknologi. 4: 9-13.
Ressang AA. 1984. Patologi Khusus Veteriner
Ed ke-2. Bali: Percetakan Bali.
Rustandi MI. 2006. Potensi antioksidasi
ekstrak daun sangitan (Sambucus
javanica Reinw ex Blum) sebagai
hepatoprotektor pada tikus [skripsi].
Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor.
Seidemann J. 2005. World Spice Plants:
Economic Usage, Botany, Taxonomy.
Berlin: Springer-Verlag.
Shahani S. 1999. Evaluation of
hepatoprotective efficacy of APCL-A
polyherbal formulation in vivo in rats.
Ind Drug. 36: 628–631.
Sidik. 1988. Tumbuh-tumbuhan yang
berkhasiat sebagai hepatoprotektor. Di
dalam: Sidik, Hadi S, editor. Hepatitis,
penanggulangan, dan pemanfaatan
tumbuhan obat sebagai hepatoprotektor.
Prosiding symposium dan Diskusi Panel:
22 Oktober 1988, Bandung. Jurusan
Farmasi FMIPA UNPAD Bandung.
Hlm. 23-46.
Stockham SL, Scott MA. 2002. Fundamentals
of Veterinary Clinical Pathology. Ed ke-
1. Iowa: state Pr. Blackwell Publishing
Co. hlm. 433-486.
Tachibana Y, Kikuzaki H, Lajis NH, Nakatani
N. 2001. Antioxidant activity of
20
carbazoles from Murraya koenigii
leaves. J Agri & Food Chem. 49: 5589-
5594.
Tee ES, Lim CL. 1991. Carotenoid
composition and content of Malaysian
vegetables and fruits by the AOAC and
HPLC methods. Food Chem. 41: 309-
339.
Ulfa M. 2008. Efek hepatoprotektif ekstrak
etil asetat daun sambung nyawa (Gynura
procumbens (lour.) Dc.) terhadap mencit
jantan galur Swiss terinduksi
parasetamol [Skripsi]. Surakarta:
Fakultas Farmasi, Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
Vinuthan MK et al.. 2004. Effect of extract of
Murraya koenigii leaves on the levels of
blood glucose and plasma insulin in
alloxan-induced diabetic rats. Indian J
Physiol Pharmacol. 48: 384-352.
Walker R & Edward C, editor. 1999. Hepatic
disease. In. Clinical Pharmacy and
Therapeutics. New York: Churchill
Livingston.
Windyagiri A. 2006. Potensi hepatoprotektor
air rebusan daun sirih merah (Piper
crocatum) pada tikus hiperglikemia
[Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut
Pertanian Bogor.
Winarti C, Nurdjanah N. 2005. Peluang
tanaman rempah dan obat sebagai sumber
pangan fungsional. Jurnal Litbang
Pertanian. 24: 1-9.
Wong et al.. 1981. Pathways of
acetominophen conjugate in the mouse.
Toxicity Lett. 9: 95-111.
 21

LAMPIRAN
 22

Lampiran 1 Gambaran umum penelitian

Daun kari (Murraya koenigii)

Preparasi sampel

Serbuk

Ekstraksi etanol:air (1:1)

Ekstrak kasar Analisis fitokimia

Perlakuan ke hewan coba

Pengukuran kadar enzim AST & ALT

Nekropsi
Analisis data (ANOVA)

Histopatologi Hati

Analisis data Kruskal Walis

 23

Lampiran 2 Rancangan perlakuan hewan coba

25 tikus putih galur Sprague Dawley berumur 2

bulan berbobot ± 200 g kondisi sehat

Aklimatisasi selama 2 minggu

Lima kelompok tikus

I II III IV V

Kontrol Kontrol Negatif Kontrol Positif Ekstrak etanol:air Ekstrak etanol:air

(Normal) Parasetamol Curliv-plus® Daun kari Daun kari
500 mg/kgBB 42,86 mg/gBB 200 mg/kgBB 300 mg/kgBB

HARI KE-0 : Pengambilan darah untuk

mengukur kadar enzim AST & ALT
Hari ke-0 s.d ke-7
Kelompok I : akuades
Kelompok II : parasetamol
Kelompok III, IV, V : curliv, ekstrak D1 & D2

HARI KE-7 : Pengambilan darah untuk

mengukur kadar enzim AST & ALT
Hari ke-8 s.d ke-14 Hari ke-0 s.d 21
Kelompok I : akuades semua kelompok
Kelompok II : parasetamol diberi pakan standar
Kelompok III, IV, V : curliv, ekstrak, + parasetamol

HARI KE-14 : Pengambilan darah untuk

mengukur kadar enzim AST & ALT
Hari ke-15 s.d ke-21
Kelompok I : akuades
Kelompok II : parasetamol
Kelompok III, IV, V : curliv, ekstrak D1 & D2

HARI KE-21 : Pengambilan darah untuk

mengukur kadar enzim AST & ALT
 24

Lampiran 3 Pengukuran kadar enzim ALT dan AST

1 mL darah

Pereaksi 1 Pereaksi 2
Sentrifus 3000 rpm,
15 menit 1 mL 4 mL

Dihomogenkan
100 μL supernatan (serum) simpan dalam botol gelap tertutup
2 – 8 0C

1 mL campuran reaksi

Ukur absorban pada λ = 340 nm

(Spektrofotometer (BioSystem BTS-330))

Aktivitas enzim ALT & AST (U/L)

 25

Lampiran 4 Perhitungan dosis

Dosis pemberian parasetamol

Dosis yang digunakan : 500 mg/Kg BB
Pembuatan larutan stok : 1 tablet @ 500 mg dilarutkan dalam 1 mL akuades
(diasumsikan bahwa volume cekok 1 mL untuk 1 Kg
BB)

Konversi dosis untuk tikus (ex = 200g) = 0,2 mL

Jadi untuk tikus berbobot 200 g, volume cekok yang diberikan untuk setiap hari
adalah 0,2 mL

Dosis pemberian Curliv®

Dosis pengobatan : 3 x 1 tablet @ 1 g perhari
Asumsi bobot badan manusia : 70 Kg
Perhitungan dosis curliv® : 42,86 mg/Kg BB
Pembuatan larutan stok : 42,86 mg dilarutkan dalam 1 mL akuades
(diasumsikan bahwa volume cekok 1 mL untuk
1 Kg BB)
Konversi dosis untuk tikus (ex = 200 g) 0,2 mL

Jadi untuk tikus berbobot 200 g, volume cekok yang diberikan untuk setiap hari
adalah 0,2 mL

Dosis pemberian ekstrak daun kari

Dosis yang digunakan : 200 mg/Kg BB dan 300 mg/Kg BB
Pembuatan larutan stok : 200 mg atau 300 mg ekstrak dilarutkan dalam 1 mL
akuades (diasumsikan bahwa volume cekok 1 mL
untuk 1 Kg BB)

Konversi dosis untuk tikus (ex = 200g) = 0,2 mL

Jadi untuk tikus berbobot 200 g, volume cekok untuk dosis 200 mg/Kg BB
ataupun 300 mg/Kg BB yang diberikan untuk setiap hari adalah 0,2 mL
 26

Lampiran 5 Pembuatan sediaan histopatologi hati

Pengambilan organ hati

Fiksasi
(Perendaman dalam BNF 10% selama 6 – 48 jam)

Dehidrasi
(Penghilangan air dengan etanol 70%, 80%, 96%, absolut I absolut II masing-
masing selama 2 jam)

Clearing
(Penghilangan etanol dengan xilol I dan xilol II)

Embedding
(Penanaman jaringan dalam parafin)

Sectioning
(Pengirisan dengan mikrotom setebal 2 µm)

Mounting
(Penempelan jaringan kaca objek)

Staining
(Pewarnaan Haematoxylin-Eosin)

Permounting
(Penetesan dengan permounting medium lalu ditutup dengan kaca penutup)
 27

Lampiran 6 Pewarnaan Haematoxylin-Eosin

Xilol I (2 menit)

Xilol II (2 menit)

Etanol absolut (2 menit)

Etanol 90% (1 menit)

Etanol 80% (1 menit)

Cuci dengan air (1 menit)

Pewarna mayers-Haematoxylin (8 menit)

Cuci dengan air (30 detik)

LiCl (15-30 detik)

Cuci dengan air (2 manit)

Pewarna Eosin (2-3 menit)

Cuci dengan air (30-60 detik)

Etanol 96% (10 kali celupan)

Etanol absolut II (10 kali celupan)

Etanol absolut I (2 menit)

Xilol I (1 menit)

Xilol II (2 menit)

Angin-anginkan beberapa menit

Cairan permounting + kaca penutup

 29

Lampiran 7 Data bobot tikus selama perlakuan

Bobot tikus hari ke- (gram)
Kelompok
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
N1 237 232 238 241 243 246 250 234 228 220 254 246 256 257 260 256 262
N2 237 236 248 250 257 260 260 246 247 256 268 252 250 250 244 247 246
N3 225 240 248 248 251 253 250 238 247 246 251 250 258 254 250 256 257
N4 237 241 246 248 251 258 264 246 235 254 264 266 270 275 276 276 278
N5 224 233 244 250 254 260 265 244 244 258 265 256 273 284 280 284 288
Rerata 232 236,4 244,8 247,4 251,2 255,4 257,8 241,6 240,2 246,8 260,4 254 261,4 264 262 263,8 266,2
KN 1 262 252 258 260 264 268 270 254 263 256 273 268 272 274 270 272 279
KN 2 217 229 222 233 233 234 242 221 231 232 237 230 243 243 246 248 253
KN 3 222 231 222 230 238 239 236 220 221 220 227 234 235 235 235 238 240
KN 4 249 251 252 237 254 248 254 239 247 248 260 256 254 253 248 257 264
KN 5 242 234 234 233 236 236 232 226 220 212 222 220 229 219 216 215 217
Rerata 238,4 239,4 237,6 238,6 245 245 246,8 232 236,4 233,6 243,8 241,6 246,6 244,8 243 246 250,6
KP 1 228 226 231 228 234 232 232 220 232 228 236 234 230 233 234 232 235
KP 2 219 226 231 228 238 239 242 223 237 234 236 222 230 235 244 245 240
KP 3 236 238 237 247 254 256 256 241 252 250 260 250 254 262 258 251 254
KP 4 230 243 250 247 252 254 252 252 250 250 255 248 248 253 256 256 252
KP 5 227 244 241 250 250 253 256 240 251 250 257 248 242 253 258 252 255
Rerata 228 235,4 238 240 245,6 246,8 247,6 235,2 244,4 242,4 248,8 240,4 240,8 247,2 250 247,2 247,2
ED200 1 226 235 248 244 257 261 264 238 253 254 254 238 235 237 240 247 253
ED200 2 237 240 251 249 254 260 260 240 253 253 260 260 250 244 251 255 258
ED200 3 233 246 248 244 254 255 258 241 253 259 269 264 271 278 279 269 278
ED200 4 230 245 247 248 252 256 254 238 245 251 233 228 228 212 209 199 217
ED200 5 226 227 228 227 230 234 235 219 229 228 231 228 235 231 228 226 233
Rerata 230,4 238,6 244,4 242,4 249,4 253,2 254,2 235,2 246,6 249 249,4 243,6 243,8 240,4 241,4 239,2 247,8
ED300 1 240 247 247 242 255 255 263 244 251 254 258 256 270 265 265 267 273
ED300 2 237 240 246 238 246 247 247 229 240 242 247 248 245 246 243 243 250
ED300 3 224 224 227 227 233 231 235 218 224 225 227 228 228 230 222 224 232
ED300 4 240 240 243 245 251 257 256 242 254 241 243 247 253 253 252 253 254
ED300 5 229 230 232 233 231 229 239 222 235 242 248 248 253 252 255 260 262
Rerata 234 236,2 239 237 243,2 243,8 248 231 240,8 240,8 244,6 245,4 249,8 249,2 247,4 249,4 254,2
Keterangan : N = Normal; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif; ED200 = Dosis 200 mg/kg BB; ED300 = Dosis 300 mg/kg BB

28
 29

Lampiran 7 Data bobot tikus selama perlakuan (lanjutan)

Bobot tikus hari ke- (gram)
Kelompok
17 18 19 20 21
N1 258 260 264 265 264
N2 244 246 255 260 263
N3 258 260 263 267 266
N4 278 264 284 287 286
N5 282 288 295 295 300
Rerata 264 263,6 272,2 274,8 275,8
KN 1 281 278 286 289 286
KN 2 253 254 258 256 259
KN 3 242 242 247 248 246
KN 4 256 252 270 270 268
KN 5 221 220 229 230 228
Rerata 250,6 249,2 258 258,6 257,4
KP 1 236 240 244 247 249
KP 2 250 254 254 260 254
KP 3 260 260 264 273 270
KP 4 252 260 264 267 260
KP 5 258 260 254 259 260
Rerata 251,2 254,8 256 261,2 258,6
ED200 1 252 262 266 272 264
ED200 2 260 262 269 277 274
ED200 3 278 283 287 291 288
ED200 4 220 226 230 232 230
ED200 5 235 237 226 234 232
Rerata 249 254 255,6 261,2 257,6
ED300 1 271 273 278 285 278
ED300 2 251 254 264 268 266
ED300 3 230 235 238 238 240
ED300 4 260 264 267 273 270
ED300 5 258 260 265 269 260
Rerata 254 257,2 262,4 266,6 262,8
Keterangan : N = Normal; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif;
ED200 = Dosis 200 mg/kg BB; ED300 = Dosis 300 mg/kg BB
 30

Lampiran 8 Aktivitas ALT serum darah tikus selama perlakuan

Aktivitas ALT serum darah tikus hari ke- (U/L)
Kelompok
0 7 14 21
N1 4 3 43 65
N2 2 3 27 50
N3 1 5 28 47
N4 2 3 40 44
N5 2 4 53 35
Rerata ± SD 2,2 ± 1,10 3,6 ± 0,89 38,2 ± 10,90 48,2 ± 10,94
KN 1 2 3 61 67
KN 2 4 6 58 102
KN 3 3 3 84 87
KN 4 2 3 74 205
KN 5 3 3 76 98
Rerata ± SD 2,8 ± 0,84 3,6 ± 1,34 70,6 ± 10,58 111,8 ± 53,84
KP 1 3 5 63 42
KP 2 2 1 45 42
KP 3 2 6 43 42
KP 4 3 4 56 63
KP 5 3 6 47 46
Rerata ± SD 2,6 ± 0,55 4,4 ± 2,07 50,8 ± 8,44 47,0 ± 9,11
ED200 1 1 8 52 77
ED200 2 1 2 51 59
ED200 3 1 3 60 76
ED200 4 1 5 60 85
ED200 5 2 5 60 56
Rerata ± SD 1,2 ± 0,45 4,6 ± 2,30 56,6 ± 4,67 70,6 ± 12,50
ED300 1 1 1 67 63
ED300 2 1 3 37 62
ED300 3 1 3 52* 69
ED300 4 1 3 52 66
ED300 5 1 3 52 65
Rerata ± SD 2,2 ± 0,00 2,6 ± 0,89 52,0 ± 10,61 65,0 ± 2,74
Keterangan : N = Normal; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif;
ED200 = Dosis 200 mg/kg BB; ED300 = Dosis 300 mg/kg BB
* = mising data (rataan keempat data yang lainnya)
 31

Lampiran 9 Hasil uji analisis statistik aktivitas ALT serum darah tikus

Tabel ANOVA
Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F

Model 51 111943.2100 2194.9649 13.33 <.0001

Error 48 7903.3800 164.6537

Corrected Total 99 119846.5900

R-Square Coeff Var Root MSE ALT Mean

0.934054 39.83778 12.83175 32.21000

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

perl 4 6930.94000 1732.73500 10.52 <.0001

r(perl) 16 2752.06000 172.00375 1.04 0.4306

wkt 3 88604.83000 29534.94333 179.38 <.0001

r(wkt) 12 2896.92000 241.41000 1.47 0.1704

perl*wkt 12 9665.62000 805.46833 4.89 <.0001

Means with the same letter are Means with the same letter
not significantly different. are not significantly different.

Duncan Grouping Mean N perl Duncan Grouping Mean N wkt

A 47.200 20 paraseta A 68.520 25 21

B 33.250 20 dosis200
B 54.600 25 14
B

C B 31.350 20 dosis300
C 3.760 25 7
C B
C
C B 26.200 20 curliv
C 1.960 25 0
C

C 23.050 20 normal
 32

Lampiran 10 Aktivitas AST serum darah tikus selama perlakuan

Aktivitas AST serum darah tikus hari ke- (U/L)
Kelompok
0 7 14 21
N1 2 33 80 136
N2 1 29 92 144
N3 2 43 95 156
N4 3 28 63 154
N5 2 41 83* 123
Rerata ± SD 2,0 ± 0,71 34,8 ± 6,87 82,6 ± 12,58 142 ± 13,59
KN 1 2 35 168 176
KN 2 4 50 133 154
KN 3 2 26 168 122
KN 4 1 30 134 347
KN 5 2 32 151 203
Rerata ± SD 2,2 ± 1,10 34,6 ± 9,21 150,8 ± 17,25 200,4 ± 87,17
KP 1 2 30 126 60
KP 2 1 29 100 102
KP 3 2 29 117 63
KP 4 2 26 111 106
KP 5 3 46 111 77
Rerata ± SD 2,0 ± 0,71 32,0 ± 7,97 113,0 ± 9,51 81,6 ± 21,48
ED200 1 2 27 102 141
ED200 2 1 23 130 113
ED200 3 2 21 125 117
ED200 4 2 29 130 126
ED200 5 1 23 130 126
Rerata ± SD 1,6 ± 0,55 24,6 ± 3,29 123,4 ± 12,16 124,6 ± 10,78
ED300 1 2 33 145 135
ED300 2 1 17 75 103
ED300 3 1 19 121* 126
ED300 4 1 12 130 116
ED300 5 2 20 135 100
Rerata ± SD 1,4 ± 0,55 20,2 ± 7,79 121,2 ± 27,24 116 ± 14,88
Keterangan : N = Normal; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif;
ED200 = Dosis 200 mg/kg BB; ED300 = Dosis 300 mg/kg BB
* = mising data (rataan keempat data yang lainnya)
 33

Lampiran 11 Hasil uji analisis statistik aktivitas AST serum darah tikus

Tabel ANOVA
Source DF Sum of Squares Mean Square F Value Pr > F

Model 51 382791.0100 7505.7061 14.79 <.0001

Error 48 24367.1800 507.6496

Corrected Total 99 407158.1900

R-Square Coeff Var Root MSE AST Mean

0.940153 31.91823 22.53108 70.59000

Source DF Type III SS Mean Square F Value Pr > F

perl 4 18910.5400 4727.6350 9.31 <.0001

r(perl) 16 6365.8600 397.8663 0.78 0.6953

wkt 3 314994.8300 104998.2767 206.83 <.0001

r(wkt) 12 8663.0200 721.9183 1.42 0.1890

perl*wkt 12 32103.2200 2675.2683 5.27 <.0001

Means with the same letter are Means with the same letter
not significantly different. are not significantly different.

Duncan Grouping Mean N perl Duncan Grouping Mean N wkt

A 97.050 20 paraseta A 133.040 25 21

B 68.550 20 dosis200 A 118.200 25 14

B 65.500 20 normal B 29.280 25 7

B 64.700 20 dosis300 C 1.840 25 0

B 57.150 20 curliv
 34

Lampiran 12 Data skoring lesio pada pengamatan histopatologi hati

Skoring lesio
Kelompok
Degenerasi Nekrosis regenerasi
N1 1 - -
N2 1 - -
N3 1 - -
N4 0 0 0
N5 0 0 0
KN 1 - 2 -
KN 2 - 2 -
KN 3 - 2 -
KN 4 - 2 -
KN 5 - 2 -
KP 1 - - 1
KP 2 - - 1
KP 3 1 - -
KP 4 1 - -
KP 5 - - 1
ED200 1 2 - -
ED200 2 1 - -
ED200 3 1 - -
ED200 4 1 - -
ED200 5 0 0 0
ED300 1 0 0 0
ED300 2 0 0 0
ED300 3 0 0 0
ED300 4 0 0 0
ED300 5 0 0 0
Keterangan : N = Normal; KN = Kontrol Negatif; KP = Kontrol Positif;
ED200 = Dosis 200 mg/kg BB; ED300 = Dosis 300 mg/kg BB