Diterjemahkan dari bahasa Afrikans ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

DISELENGGARAKAN OLEH Tersedia secara online diwww.sciencedirect.com

SainsLangsung

Ilmu Pangan dan Kesehatan Manusia 5 (2016) 57–64

Efek perlindungan dari fraksi flavonoid makanan dariAcanthophora

spesifikpada stres oksidatif yang diinduksi streptozotocin pada tikus diabetes
Lavakumar VuppalapapatiSebuah,Keahlian, Ravichandiran VelayudamB, KFH Nazeer AhmadC,
Sowmya CherukuriD, Bhaskar Reddy KesavanSebuah
SebuahPusat Nanobioteknologi, Sekolah Tinggi Farmasi Sri Venkateswara, RVS Nagar, Chittoor 517127, AP, India
BNIPER, Raja SC Mullick Road, Jadavpur, Kolkata 700032, India
CPusat Penelitian dan Inovasi, Universitas Metropolitan Asia, Cheras 43200, Malaysia
DDepartemen Farmasi, RIPER, Anantapuram 515721, AP, India
Diterima 10 Desember 2015; diterima dalam bentuk revisi 31 Januari 2016; diterima 13 Februari 2016
Tersedia online 21 Februari 2016

Abstrak

Penyelidikan ini dipertimbangkan dalam menyusun aktivitas antidiabetes dan antioksidan dari fraksi makanan yang mengandung flavonoid dari
Acanthophora spicifera(A. spicifera, Keluarga: Rhodomelaceae) pada tikus stres oksidatif yang diinduksi streptozotocin (STZ). Pengujian dilakukan pada tikus
jantan, yang diasingkan menjadi lima kelompok: kelompok kontrol, kelompok diabetes (dosis tunggal 65 mg / kg, streptozotocin (STZ) ip), diabetes dengan
insulin (6 IU), dan diabetes dengan fraksi kaya flavonoid. kelompok (FRF) pada 50 dan 100 mg / kg berat badan, diberikan secara oral selama 21 hari. Kadar
glukosa darah ditentukan pada jeda minggu yang berbeda. Konsekuensi antioksidan FRF pada tikus diabetes yang diinduksi STZ ditentukan oleh perkiraan
penanda stres oksidatif seperti malonyldialdehyde dan enzim antioksidan seperti superoksida dismutase, katalase dan glutathione dalam homogenat jaringan
jantung, hati dan ginjal. Pengobatan FRF tikus diabetes secara signifikan (P<0,05) menurunkan kadar glukosa darah menjadi normal dibandingkan dengan
tikus diabetes. Namun, pemberian FRF, secara signifikan menurunkan malonyldialdehyde (MDA) dan meningkatkan aktivitas superoksida dismutase (SOD),
katalase (CAT) dan tingkat glutathione (GSH) pada tikus diabetes. Hasilnya menunjukkan bahwa fraksi FRF dari ganggang merahA. spiciferaadalah aset anti
diabetes dan antioksidan yang kuat terhadap diabetes yang diinduksi STZ dan kerusakan jaringan oksidatif. © 2016 Akademi Ilmu Pangan Beijing. Produksi
dan hosting oleh Elsevier BV Hak cipta dilindungi undang-undang.

Kata kunci: Acanthophora spicifera; ganggang merah; Streptozotosin; Diabetes; Antioksidan

1. Perkenalan masih belum ditemukan. Keadaannya terutama suram di negara-negara

Diabetes mellitus adalah penyakit metabolik, setua umat manusia
dan kejadiannya dianggap jauh di atas tanah di seluruh dunia.[1]. Ini
juga merupakan akar utama kecacatan dan rawat inap, menghasilkan
beban keuangan yang signifikan[2]. Penatalaksanaan diabetes melitus
merupakan pengobatan yang telaten dan berhasil
KeahlianPenulis yang sesuai di: Pusat Nanobioteknologi, Sekolah Tinggi Farmasi
Sri Venkateswara, RVS Nagar, Chittoor 517127, AP, India.
Telp.: +919494804367.
Alamat email:lavanyalavakumar@gmail.com (L.Vuppalapapati),
Wisnuvardhr@gmail.com (R. Velayudam),drnazeer.ahamed@gmail.com
(H.Nazeer Ahmad),drsowmyariper@gmail.com (S. Cherukuri),
bhaskurra@gmail.com (BR Kesavan).
Tinjauan sejawat di bawah tanggung jawab Akademi Ilmu Pangan Beijing.
pemula seperti India, di mana pertumbuhan ekonomi yang belum pernah
terjadi sebelumnya telah disertai dengan produk sampingan yang tidak
menguntungkan dari kemakmuran itu dalam bentuk diabetes.[3,4]. Hal ini
secara kokoh didukung oleh insiden yang lebih besar dari sebelumnya baik
secara eksperimental maupun klinis. Dikemukakan bahwa stres oksidatif
yang disebabkan oleh hiperglikemia, memainkan peran utama dalam
patogenesis diabetes mellitus (DM). Diabetes biasanya disertai dengan
hiperglikemia dengan amplifikasi besar spesies oksigen reaktif (ROS) dan
gangguan koordinasi pertahanan antioksidan.[5.6]. Stres oksidatif, sebagai
episode faktor oksidan atas mekanisme antioksidan, memainkan peran
terdalam dalam patogenesis dan perkembangan diabetes dan
komplikasinya. Oleh karena itu, ada kemungkinan bahwa zat yang diketahui
dapat mengurangi stres oksidatifin vivoakan memangkas progresi
kerusakan sel pada diabetes klinis. Flavonoid diet (berlimpah pada tanaman,
sayuran dan buah-buahan) memiliki

http://dx.doi.org/10.1016/j.fshw.2016.02.002
2213-4530 / © 2016 Akademi Ilmu Pangan Beijing. Produksi dan hosting oleh Elsevier BV Hak cipta dilindungi undang-undang.
58 L. Vuppalapapati dkk. / Ilmu Pangan dan Kesehatan Manusia 5 (2016) 57–64
telah diperhitungkan memiliki sejumlah efek yang berpotensi
menguntungkan baik dalam hambatan dan pengelolaan penyakit yang
berhubungan dengan oksigen: misalnya, peningkatan pemanfaatan glukosa
pada diabetes tipe II[7]dan pengurangan perkembangan halangan diabetes
[8]. Investigasi di wilayah khusus ini sekarang memberikan wawasan
tentang manfaat potensial pada diabetes. Rumput laut secara tradisional
telah digunakan sebagai bahan makanan dan obat tradisional untuk infeksi
cacing, asam urat dan eksim, terutama oleh kelas pekerja pesisir di
beberapa negara.[9]. Baru-baru ini, banyak perhatian telah diberikan pada
gejolak antikanker rumput laut karena kaya akan fitokonstituennya dan
telah melaporkan bahwa Swedia mentah atau ekstrak organiknya memiliki
pengaruh pada sel-sel pankreas.[10].
rumput lautAcanthophora spicifera (Keluarga:
Rhodomelaceae, Ceramiales) adalah ganggang merah yang
terkenal dan tersebar luas di Teluk Mannar, pantai Rameshwaram,
Tamilnadu, India Selatan yang digunakan sebagai bahan makanan,
kosmetik, dan bahan bakar.[11]. Selain itu, ekstrak metanol dariA.
spiciferatelah menjadi bukti aktivitas anti-bakteri terhadap
Stafilokokus aureusdanBacillus subtilis[12]. Agaran sulfat diisolasi
dari ekstrak airA. spiciferadan barang anti-virus mereka dengan
hubungan aktivitas struktur mereka dicatat[13]. Sifat antioksidan
dariA. spiciferadisengaja dalam berbagai jenisin vitrotes penangkal
radikal bebas[14]. Oleh karena itu, penelitian ini dirancang untuk
memperluas informasi terkini tentang klaim cerita rakyat anti-
diabetes dan efek antioksidan dariA. spiciferadan untuk
menentukan efek perlindungannya pada tikus yang menderita
diabetes tipe I yang tidak terkontrol.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
2.1. Koleksi ganggang laut
Alga merah,A. spicifera(Famili: Rhodomelaceae,
Ceramiales) dikumpulkan dari Mandapam, selama bulan
Maret 2014 dari pantai Rameswaram, Tamil Nadu, India[15]
. Itu diidentifikasi dan disahkan oleh Dr. Krishnamurthy,
Institut Algologi, Annanagar, Chennai. Spesimen voucher
(SVCOP / 14-125) disimpan di Museum Departemen.
2.2. Pembuatan ekstrak etanol dan pemisahan
fraksi kaya flavonoid dari Acanthophora spicifera
Kering, gilingA. spicifera(1 kg) diekstraksi melalui 5 l
etanol dengan alat soxhlet selama 24 jam. Ekstrak
disaring, dan filtratnya diuapkan dengan rotary vacuum
evaporator. Keuntungan dalam hasil ekstrak mentol
ditemukan menjadi 20,22% (b / b). Ekstrak etanol kering
disuspensikan dalam air dan dicampur dengan n-
heksana dalam corong pisah dan bagian n-heksana
dibuang setelah pemisahan. Pada bagian berair,
diklorometana ditambahkan dan bagian diklorometana
dibuang setelah pemisahan dan bagian berair
dikumpulkan dan selanjutnya diekstraksi dengan etil
asetat. Bagian etil asetat dikumpulkan dan dibiarkan
kering untuk menghilangkan pelarut dengan rotavapor
vakum. Rendemen fraksi etil asetat sebesar 2,45% (b/b).
2.3. Estimasi kandungan total fenol dalam FRF
Kandungan total fenolik diperkirakan dengan metode
kolorimetri Folin – Ciocalteu yang dijelaskan sebelumnya[16,17]
dengan sedikit modifikasi. Secara singkat, pengenceran FRF yang
sesuai dioksidasi dengan reagen Folin – Ciocalteu 0,2 N dan
kemudian reaksi dinetralkan dengan natrium karbonat jenuh (75
g / l). Absorbansi warna biru yang dihasilkan diukur pada 760 nm
setelah inkubasi selama 2 jam pada suhu 23 .◦C. Kuantifikasi
dilakukan berdasarkan kurva standar asam galat. Hasil dinyatakan
sebagai gram setara asam galat (GAE) per 100 g berat kering (DW).
2.4. Hewan
Tikus Wistar dewasa yang sehat dari kedua jenis kelamin,
dengan berat 200-250 g, digunakan. Ruang hewan dipertahankan
pada 22±5◦C dengan siklus terang-gelap harian (06:00–18:00
terang) dan kelembaban sekitar 50% –60%. Hewan diberi makanan
dan airad libitum. Semua penelitian dilakukan sesuai dengan
Komite Etika Hewan (SVCOP / 02/2015 / SV0026).
2.5. Studi toksisitas oral akut
Toksisitas akut dilakukan sesuai dengan pedoman Organisasi untuk
Kerjasama Ekonomi dan Pembangunan (OECD 423). Dua kelompok
tikus kontrol (Sebuah=3 pada masing-masing kelompok) diberikan FRF
secara terpisah 2000 mg/kg po sebagai dosis tunggal. Setelah
pemberian oral, hewan diamati terus menerus selama 2 jam untuk
profil yang lebih rendah seperti kewaspadaan, kegelisahan, lekas
marah, aktivitas spontan ketakutan, reaktivitas, respons sentuhan,
respons nyeri, buang air besar dan buang air kecil. Setelah tahap 24
dan 72 jam, hewan diamati untuk tanda-tanda kematian atau kematian.
2.6. Evaluasi tes toleransi glukosa oral (OGTT)
Skrining awal fraksi untuk aktivitas hipoglikemik
dilakukan pada tikus sehat normal dengan melakukan
OGTT. OGTT dilakukan untuk dua dosis FRF yang berbeda
(50 dan 100 mg / kg berat badan per oral) dan kadar
glukosa darah diukur dengan glukometer satu sentuhan
(Accu-check, India). Kadar glukosa diukur pada interval 0,
30, 60, 90 dan 120 menit setelah pemberian sampel uji[18].
2.7. Induksi diabetes pada tikus
Diabetes diinduksi dengan injeksi intra-peritoneal tunggal
streptozotocin (65 mg / kg) yang baru disiapkan dalam 0,1 mol / L
buffer sitrat (pH 4,5) pada tikus yang dipuasakan semalaman. Untuk
mencegah hipoglikemia yang diinduksi obat awal, hewan yang disuntik
STZ diberi air glukosa 5% selama 24 jam. Setelah tiga hari pemberian
STZ, tikus dibagi menurut kadar glukosa darah puasanya yang
menunjukkan >300 mg/dl. Hewan yang tidak menunjukkan kisaran
glukosa darah di atas dikeluarkan dari penelitian[19].
2.8. Desain eksperimental dan pemberian obat
Tikus dibagi menjadi empat kelompok yang masing-masing kelompok terdiri dari enam ekor
tikus. Kelompok I (hewan normal) diperlakukan dengan kendaraan saja, 0,3% CMC
 L. Vuppalapapati dkk. / Ilmu Pangan dan Kesehatan Manusia 5 (2016) 57–64
(v / v). Hewan kelompok II adalah tikus diabetes yang diberi
perlakuan CMC 0,3%. Hewan kelompok III adalah hewan diabetes
yang diberi insulin (6 IU) dan tikus kelompok IV – V adalah hewan
diabetes yang diberi FRF (50 dan 100 mg/kg, per oral) pada hari
ke-3 setelah induksi diabetes. Tikus dipuasakan semalaman dan
sampel darah diambil dari vena ekor pada hari ke-3 perlakuan STZ
sebelum dan pada hari ke-7, 14 dan 21 setelah pemberian FRF.
2.9. Estimasi glukosa darah dan protein
Glukosa darah ditentukan menggunakan glukometer instan satu
sentuhan dengan menggunakan strip glukosa. Pada akhir percobaan,
hewan (Sebuah=3/kelompok) dikorbankan dengan euthanasia, jaringan
seperti jantung, hati dan ginjal diisolasi dan dihaluskan,
dihomogenisasi dengan polytron homogenizer menggunakan larutan
dapar fosfat 20 mmol/L (pH 7,4). Homogenat disentrifugasi pada 1000×
G selama 8 menit pada 4◦C. Supernatan yang diperoleh dengan
sentrifugasi digunakan untukin vitroanalisis protein[20].
2.10. Estimasi hemoglobin terglikosilasi
hemoglobin terglikosilasi diperkirakan dengan metode Eross et al.
[21]. Ke dalam eritrosit (0,5 mL) yang diambil dari darah EDTA utuh,
ditambahkan 0,125 mL air suling dan 0,125 mL karbon tetraklorida,
diaduk rata dan disentrifugasi. Supernatan hemolisat dipisahkan dan
konsentrasi hemoglobinnya diatur hingga 10% dengan air suling. Ke
dalam 2 mL hemolisat, 1 mL asam oksalat 0,3 N ditambahkan ke dalam
tabung reaksi dan dipanaskan pada suhu 100◦C dalam penangas air
selama 60 menit. Setelah dingin ditambahkan 1 mL TCA 40%, dikocok
dengan baik dan disentrifugasi. Ke dalam 2 mL supernatan dipipet
keluar ke dalam satu set tabung reaksi, ditambahkan 0,5 mL 0,05 mol/L
TBA dan diinkubasi pada suhu 37◦C selama 40 menit. Sebuah kosong
dengan 2 mL air suling diperlakukan sama. Warna kekuningan yang
dihasilkan dibaca pada spektrofotometer pada 443 nm. Konsentrasi
HbA1c dihitung dengan asumsi bahwa 1% HbA1c sesuai dengan
absorbansi 0,029 pada 443 nm (koefisien pemadaman milimolar yang
ditentukan secara eksperimental untuk adisi hidroksimetil furfural
TBA-5 adalah 26 pada 443 nm). Hemoglobin dalam RBC (g%)
diperkirakan dengan metode cyanmethemoglobin.
2.11. Analisis biokimia atau antioksidan dari homogenat
jantung, hati dan ginjal
Setelah pengambilan sampel darah, tikus dikorbankan. Jantung,
hati dan ginjal dieksisi, dibilas dengan normal saline sedingin es
diikuti dengan larutan KCl 10% dingin, dihisap, dikeringkan dan
ditimbang. 10% (b / v) organ dihomogenkan secara terpisah dalam
larutan KCl dingin dan disentrifugasi pada 1500 r per menit selama
15 menit pada 4◦C. Supernatan yang diperoleh digunakan untuk
estimasi superoksida dismutase (SOD)[22], katalase (CAT)[23],
glutation (GSH)[24], zat reaktif asam tio-barbiturat (TBARS)[25].
3. Studi Histopatologi
Setelah sampel darah untuk analisis biokimia, hewan-hewan
itu dikorbankan, dengan cepat dibedah. Sebagian kecil dari
59
pankreas dilibatkan dan difiksasi dalam formalin 10%. Spesimen
didehidrasi dalam kadar etanol yang meningkat, bersih dalam
xilena dan bercokol dalam lilin parafin. Segmen dengan ketebalan
6 -m diwarnai dengan hematoksilin dan eosin dan diperiksa secara
mikroskopis.
3.1. Analisis statistik
Data dinyatakan sebagai mean±SEM. Data masing-masing kelompok
dianalisis dengan two way ANOVA dilanjutkan dengan analisis post hoc
- Uji perbandingan Dunnett menggunakan perangkat lunak
statistik PRISM PAD 5, AS. Tingkat kemungkinanP<0,05 danP<
0,01 dianggap signifikan.
4. Hasil
4.1. Studi toksisitas akut
Pada uji toksisitas akut, tikus yang diberi FRF per oral 2000 mg/
kg berat badan, tidak menunjukkan kelainan perilaku dan
mortalitas. Hewan ditoleransi dengan baik dan dilaporkan tidak
beracun dengan dosis 2000 mg/kg berat badan. Dosis 1 / 20 (100
mg / kg) dan 1 / 40 (50 mg / kg) dipertimbangkan untuk evaluasi
farmakologis lebih lanjut. Eksperimen dan fiksasi dosis dirancang
dengan hati-hati untuk meminimalkan penggunaan hewan.
4.2. Pengaruh fraksi FRF pada uji toleransi glukosa oral pada
tikus percobaan
Dalam OGTT (ARA. 1) kelompok investigasi I sebagai kontrol normal,
kelompok II sebagai FRF 50 mg/kg dan kelompok III sebagai FRF 100
mg/kg berat badan. Kadar glukosa darah menunjukkan perubahan
yang signifikan setelah pemberian larutan glukosa secara oral.
Penurunan glukosa darah tergantung dosis diamati pada tikus
(kelompok II dan kelompok III) setelah pengobatan FRF 50 dan 100
mg / kg pada 60, 90 dan 120 menit.
4.3. Pengaruh FRF pada kadar glukosa darah pada tikus diabetes yang
diobati dengan STZ
ARA. 2ilustrasi
diukur pada
ARA. 1. Pengaruh FRF pada kadar glukosa serum darah (TTGO) pada tikus yang dibebani
glukosa. *P<0,05, kontrol vs kelompok II (FRF 100 mg/kg); **P<0,05, kelompok I (kontrol)
vs kelompok II (FRF 50 mg/kg) dan III (FRF 50 mg/kg) (ANOVA satu arah - dilanjutkan
dengan post-test Dunnett).
60 Kesehatan Manusia 5 (201

ARA. 2. Pengaruh FRF dan insulin terhadap kadar glukosa darah tikus diabetes perlakuan
ARA. 4. Pengaruh FRF dan insulin terhadap kadar SOD pada jantung, hati dan ginjal tikus diabetes
STZ. **P<0,01, kontrol diabetes vs kelompok kontrol;@@P<0,01, kelompok perlakuan
yang diberi perlakuan STZ.##P<0,01, kontrol diabetes vs kelompok kontrol;@@P<0,01, kelompok
insulin vs kontrol diabetes;##Kelompok perlakuan FRF vs kontrol diabetes (ANOVA satu
perlakuan FRF vs kontrol diabetes (ANOVA satu arah - diikuti oleh post-test Dunnett).
arah - diikuti oleh post-test Dunnett).

kadar glukosa darah meningkat beberapa kali lipat hingga lebih dari 300
Namun, setelah pemberian FRF (50 dan 100 mg / kg) secara
mg/dl pada tikus yang diberi perlakuan STZ dibandingkan dengan tikus
signifikan membalikkan kadar HbA1c ke kelompok kontrol normal.
kontrol non diabetes (rata-rata 101,8 mg/dl) yang mengindikasikan diabetes
Perlu diperhatikan bahwa, pada akhir penelitian, semua hasil
pada kelompok hewan yang diberi perlakuan STZ. Dengan pemberian
mendekati kelompok yang diberi insulin.
insulin, diamati bahwa cukup (P<0,05) penurunan kadar glukosa darah yang
diukur pada hari ke 3, 7, 14 dan 21 pada hewan perlakuan STZ. Pemberian
4.5. Pengaruh FRF pada kadar SOD di Jantung, hati, dan ginjal
oral FRF (50 dan 100 mg / kg) pada hewan diabetes secara signifikan
tikus yang diobati dengan STZ
menurunkan kadar glukosa darah yang meningkat dari hari ke 7 hingga hari
ke 21 sebagaimana dianalisis dengan perbandingan ganda Tukey dengan
Efek insulin dan FRF pada kadar SOD pada jantung, hati, dan ginjal
kelompok diabetes saja.
tikus ditunjukkan padaARA. 4. Pada kelompok diabetes, penipisan
tingkat SOD diamati di semua organ dibandingkan dengan kelompok
4.4. Pengaruh FRF pada HbA1tingkat c hewan kontrol. Pemberian FRF 50 dan 100 mg/kg secara signifikan (P<
0,05) meningkatkan kadar SOD di semua organ yang diuji pada tikus
Seperti yang ditunjukkan padaAra
diabetes dibandingkan dengan kelompok diabetes saja. Pada kelompok
kadar HbA1c dalam d yang diobati dengan insulin, peningkatan kadar SOD diamati, yang
secara statistik tidak signifikan.

4.6. Pengaruh FRF pada tingkat katalase di jantung, hati dan ginjal
tikus yang diobati dengan STZ

Aktivitas katalase (CAT) pada jantung, hati dan ginjal tikus diabetes
ditunjukkan padaARA. 5. Penurunan yang signifikan (P<0,05) dalam
aktivitas katalase tercatat pada tikus diabetes yang diobati dengan STZ
dibandingkan dengan hewan kontrol non-diabetes. Pemberian FRF 50
dan 100 mg/kg dan insulin, secara signifikan membalikkan penurunan
aktivitas katalase di jaringan hati dan ginjal. Selain itu, tidak ada efek
signifikan yang diamati pada jaringan jantung dibandingkan dengan
kelompok diabetes yang diobati dengan STZ saja.

4.7. Pengaruh FRF pada tingkat LPO di jantung, hati dan ginjal tikus yang
diobati dengan STZ

ARA. 3. Pengaruh FRF pada hemoglobin terglikosilasi.##P<0,0001, kontrol vs kontrol

Efek insulin dan FRF di tingkat TBARS diwakili dalam
diabetes; **P<0,0001, kelompok diabetes yang diobati dengan insulin dan yang diobati ARA. 6. Pada tikus diabetes, peningkatan tingkat
dengan FRF vs kontrol diabetes (ANOVA satu arah - diikuti oleh post-test Dunnett). penanda LPO malonyldialdehyde (MDA) diamati pada
 dan Kesehatan Manusia 5 (201
ARA. 5. Pengaruh FRF dan insulin terhadap kadar katalase (CAT) di jantung, hati dan ginjal tikus
diabetes yang diobati dengan STZ. *P<0,05, kontrol diabetes vs kelompok kontrol;
@, #P<0,05, FRF diperlakukan
dengan post-test Dunnett).
ARA. 6. Pengaruh FRF dan insulin terhadap kadar malonilaldehid (TBARS) pada jantung,
hati dan ginjal tikus diabetes yang diobati dengan STZ. *P<0,05, kontrol diabetes vs
kelompok kontrol;#P<0,05, kelompok diabetes yang diobati insulin vs kontrol diabetes;#P
<0,05, kelompok diabetes yang diobati FRF vs kontrol diabetes (ANOVA satu arah - diikuti
oleh post-test Dunnett).
tisu. Jumlah MDA yang terbentuk di dalam hati sangat tinggi (830±35
-mol / mg protein) lebih tinggi dibandingkan dengan hati kelompok
kontrol (210±45 mol/mg atau protein). Pengobatan dengan FRF (50 dan
100 mg / kg) dan insulin secara signifikan (P<0,05) menurunkan kadar
MDA di semua organ dibandingkan dengan kelompok diabetes.
4.8. Pengaruh FRF pada kadar GSH di Jantung, hati, dan ginjal
tikus yang diobati dengan STZ
Efek insulin dan FRF dalam kadar GSH diwakili dalamARA. 7.
Pada tikus diabetes, signifikan (P<0,001) penurunan tingkat GSH
diamati di semua jaringan. Pengobatan dengan FRF (50 dan 100
mg / kg) secara signifikan (P<0,01) meningkatkan kadar GSH di
semua organ dibandingkan dengan kelompok diabetes.
ARA. 7. Pengaruh FRF dan insulin terhadap kadar GSH pada jantung, hati dan ginjal tikus diabetes
yang diobati dengan STZ. ***P<0,001, kontrol diabetes vs kelompok kontrol;##P<0,05, kelompok
diabetes yang diobati FRF vs kontrol diabetes (ANOVA satu arah-diikuti dengan post-test
Dunnett).
5. Laporan Histopatologi
Fraksi FRF menunjukkan hasil yang nyata pada pankreas yang
dibandingkan dengan kelompok yang diberi insulin. Pada
kelompok kontrol, Pulau Langerhans tersebar di jaringan pankreas
dengan ukuran yang bervariasi pada lobulus yang sama. Diamati
bahwa tidak ada bukti sel inflamasi dengan ruang intraseluler yang
lebih sedikit (ARA. 8SEBUAH). Tetapi dalam kasus kelompok kontrol
diabetes (ARA. 8B) menimbulkan kekacauan sel ke jaringan
eksokrin sekitarnya. Semua kondisi ini seolah kembali normal (ARA.
8D, E) dengan mengurangi ruang intraseluler dan mengembalikan
pulau ke lokasi yang tepat setelah pengobatan fraksi FRF.
6. Diskusi
Penelitian ini menyoroti hasil defensif dari fraksi kaya flavonoid
(FRF) dari sumber lautA. spicifera, ganggang merah pada tikus stres
oksidatif yang diinduksi STZ. Pengaruh FRF pada glukosa darah,
antioksidan jaringan dan penanda stres oksidatif dipertimbangkan
dalam model tikus yang diinduksi STZ. Model teliti hiperglikemia yang
diinduksi STZ ini telah digambarkan sebagai model eksperimental yang
berguna untuk mempelajari aktivitas agen antidiabetes dengan atau
tanpa insulin.[26,27]. Hasil kami telah menjadi bukti untuk pemberian
STZ (65 mg / kg) intraperitoneal secara efektif menginduksi
hiperglikemia pada tikus puasa normal dibandingkan dengan tikus
kontrol salin. Peningkatan kadar glukosa darah bisa karena
penghancuran sel-sel pankreas oleh STZ[28]. Kapasitas FRF untuk
menurunkan peningkatan gula darah ke tingkat glikemik normal
merupakan pemicu penting bagi hati untuk kembali ke homeostasis
normal selama diabetes eksperimental. Pada hasil TTGO, FRF 50 dan
100 mg/kg BB berpengaruh nyata terhadap kadar glukosa darah serum
pada menit ke 30, 60, 90, 120 dibandingkan dengan kontrol. Hasil
pengujian mengungkapkan bahwa FRF 100 mg / kg telah menunjukkan
maksimum
62
ARA. Fotomikrograf jaringan pankreas yang diwarnai dengan hematoxylin dan eosin dari kontrol (A); (B) tikus diabetes yang diobati dengan STZ; (C) kelompok yang diberi insulin; (D) FRF 50 mg/kg
kelompok perlakuan; (E) FRF 100 mg/kg kelompok perlakuan.
aktivitas antihiperglikemik di semua interval waktu dari 50 mg / kg.
Selanjutnya, hasil menegaskan bahwa fraksi flavonoid dari rumput laut
A. spiciferahiperglikemia terkontrol dengan secara signifikan
mengurangi kadar glukosa darah pada tikus diabetes. Ekstrak FRF (50
dan 100 mg / kg) tidak menunjukkan efek anti-diabetes setelah onset
diabetes pada jam ke-48. Namun FRF secara signifikan menurunkan
kadar glukosa darah pada hari ke 7 dan 21 setelah onset diabetes.
Dalam laporan sebelumnya, ganggang merahA. Spiciferamengandung
berbagai fitokimia seperti steroid, flavonoid, dan protein[29]yang
memiliki aktivitas antivirus dan antibakteri[12,13]. Selain itu,
peningkatan tinggi HbA1c pada tikus diabetes menunjukkan kejadian
glikosilasi akibat hiperglikemia. Pemberian ekstrak FRF (50 dan 100 mg/
kg) dan insulin pada tikus diabetes secara signifikan menurunkan kadar
HbA1c. Rasionalisasi di balik ini diasumsikan sebagai peningkatan
sekresi insulin. Ini menunjukkan bahwa ekstrak FRF (50 dan 100 mg /
kg) mungkin memiliki potensi untuk mengatur ulang perkembangan
diabetes dengan hambatan yang terkait.
Ini adalah penyelidikan biokimia pertama bahwa efek perlindungan
organ FRF dari rumput lautA. spiciferadi streptozotocin diinduksi stres
oksidatif hewan diabetes. Ada hubungan yang dapat dimengerti antara
hiperglikemia dan spesies oksigen / nitrogen aktif pada jenis diabetes
eksperimental dan klinis[30]. Mengumpulkan spesies oksigen reaktif
(ROS) karena stres oksidatif juga berperan dalam ekspresi kematian sel,
karena ROS dapat dengan mudah bereaksi dan mengoksidasi
komponen seluler penting seperti lipid, protein, dan DNA.[31]. Organ
vital seperti jantung, hati, dan ginjal sangat rentan terhadap efek ROS
karena integritas poli-tak jenuh dan pertahanan antioksidan
sederhana.[32]. Studi eksperimental telah menunjukkan potensi
kegunaan antioksidan eksogen untuk pencegahan dan pengobatan
diabetes mellitus. Pengobatan anti-oksidan yang berasal dari
tumbuhan telah dilaporkan dapat mengurangi perkembangan
komplikasi diabetes seperti, retinopati, pembentukan katarak,
neuropati, komplikasi vaskular dan nefropati dengan meningkatkan
status antioksidan pada jaringan yang bergantung pada insulin dan
tidak bergantung pada insulin.[33].
Dalam penelitian ini, tampaknya tidak ada mekanisme
kompensasi pada organ viseral untuk mengatasi stres oksidatif
yang diinduksi STZ. Penurunan aktivitas SOD dan CAT di hati, ginjal
dan jantung telah diamati selama diabetes. SOD adalah enzim
pertahanan vital yang mengkatalisis dismutasi radikal superoksida
[34]. CAT adalah hemeprotein yang mengkatalisis reduksi hidrogen
peroksida dan melindungi jaringan dari radikal hidroksil yang
sangat reaktif.[35]. Oleh karena itu, jatuh dalam aktivitas
enzim-enzim ini (SOD, CAT) dapat mengakibatkan sejumlah efek
yang merusak karena akumulasi radikal anion superoksida dan
hidrogen peroksida. Pemberian FRF secara signifikan
meningkatkan kadar SOD di semua organ vital yang diuji. Namun,
peningkatan kadar CAT hanya diamati pada hati dan ginjal tetapi
tidak pada jaringan jantung tikus diabetes. Dari penelitian ini,
cukup menarik untuk diamati bahwa, peningkatan peroksidasi lipid
pada organ vital tikus yang terpapar hiperglikemia dan
redamannya dengan kontrol hiperglikemia dengan pengobatan
FRF. Ini sangat menunjukkan peran protektif FRF, yang mungkin
disebabkan oleh efek antioksidan flavonoid yang ada dalam
ganggang merah, yang bertindak sebagai pemulung radikal
superoksida yang kuat dan pemadam oksigen tunggal.[36].
Pengaruh insulin pada kadar SOD, CAT dan TBARS sesuai dengan
laporan sebelumnya[37,38]. Sangat menarik untuk mengamati
bahwa dosis tinggi FRF secara signifikan meningkatkan tingkat
GSH pada organ vital tikus yang diobati dengan STZ. Enzim kolam
Glutathione seluler memiliki peran kunci dalam sistem pertahanan
enzimatik dan bekerja pada peroksida (H2HAI2, lipid atau peroksida
organik) untuk menghilangkannya. Dalam penyelidikan ini, diamati
bahwa pengobatan FRF dapat secara efektif meningkatkan
aktivitas GSH dan enzim antioksidan lainnya. Kumpulan GSH
seluler terutama dipertahankan oleh oksidasi GSH dan regenerasi
GSH tereduksi masing-masing oleh enzim GSH peroksidase dan
GSSG-reduktase. Di bawah kondisi stres oksidatif, peningkatan
oksidasi GSH oleh GSH-Px dan penurunan regenerasi GSH oleh
GSSG-reduktase telah terlibat sebagai alasan utama penurunan
tingkat GSH. Studi histopatologi juga menopang hasil kami. STZ
seharusnya memusnahkan sebagian pankreas. Tikus diabetes
menunjukkan sel pulau yang terkondensasi (atau) berkurang, yang
dikembalikan normal setelah pengobatan dengan FRF (50 dan 100
mg / kg) dariA. spicifera. Tidak ada variasi seperti itu yang
ditemukan pada tikus normal. Hasil ini menunjukkan bahwa fraksi
FRF alga merahA. spicifera menunjukkan perlindungan pro yang
signifikan terhadap kerusakan oksidatif yang disebabkan oleh STZ
di hati dan ginjal tikus. FRF dapat bertindak sebagai agen
pelindung terhadap kerusakan hati dan ginjal yang diinduksi STZ
dan agen pemulung radikal bebas.
7. Kesimpulan
Studi kami mengkonfirmasi bahwa ekstrak FRF memiliki efek
antidiabetes yang luar biasa, yang dapat dijelaskan, setidaknya sebagian,
oleh aktivitas antihiperglikemik dan antioksidannya pada STZ yang diinduksi.
 L. Vuppalapapati dkk. / Ilmu Pangan dan Kesehatan Manusia 5 (2016) 57–64
tikus diabetes. FRF juga memiliki potensi untuk memperbaiki masalah
diabetes. Namun, FRF tidak berpengaruh pada tikus normal, sehingga tidak
dapat menyebabkan hipoglikemia pada tikus normal. Semua temuan ini
memberikan dasar ilmiah untuk penggunaan alga sebagai obat yang
menjanjikan dalam terapi diabetes mellitus dan komplikasinya. Namun, ada
penelitian terpisah-pisah yang melangkah maju untuk memurnikan dan
mengidentifikasi senyawa bioaktif yang bertanggung jawab atas tindakan
anti-diabetes / anti-oksidatif dalam fraksi kaya flavonoid ini.
Konflik kepentingan
Para penulis menyatakan bahwa tidak ada konflik kepentingan.
Pengakuan
Penulis mengucapkan terima kasih yang tulus kepada kepala sekolah dan
manajemen perguruan tinggi atas dukungan mereka yang konstan dalam
penyelesaian pekerjaan.
Referensi
[1]M. Koyuturk, O. Ozsoy-Sacan, S. Bolkent, R. Yanardag, Pengaruh
glurenorm pada perubahan imunohistokimia dalam sel beta pankreas
atau tikus pada diabetes eksperimental, India J. Exp. Biol. 43 (2005) 268–
271.
[2]AN Nagappa, PA Thakurdesai, N. Venkat Rao, J. Singh, aktivitas
antidiabetes buah Terminalia catappa Linn, J. Ethnopharmacol. 88
(2003) 45–50.
[3]AF Amos, DJ McCarty, P. Zimmet, Meningkatnya beban global diabetes dan
komplikasinya: perkiraan dan proyeksi untuk tahun 2010, Diabetes. Med. 14
(Lampiran 5) (1997) S1 – S85.
[4]H. King, RE Aubert, WH Herman, Beban global diabetes, 1995-2025:
prevalensi, perkiraan numerik, dan proyeksi, Diabetes Care 21
(1998) 1414-1431.
[5]V. Pitozzi, L. Giovannelli, G. Bardini, CM Rotella, P. Dolara, kerusakan DNA
oksidatif pada sel darah perifer pada diabetes mellitus tipe 2: kerentanan
yang lebih tinggi dari leukosit polimorfonuklear, Mutate. Res. 529 (2003) 129–
133.
[6]JW Baynes, Peran stres oksidatif dalam perkembangan komplikasi
diabetes, Diabetes 40 (1991) 405-412.
[7]M. Latha, L. Pari, Pengaruh ekstrak air dariScoparia dulcispada glukosa darah,
insulin plasma dan beberapa enzim jalur poliol pada diabetes tikus
percobaan, Braz. J. Med. Biol. Res. 37 (2004) 577–586.
[8]LR Ribeiro, DM Salvadori, Komponen makanan dapat mencegah
penyakit terkait mutasi pada manusia, Mutat. Res. 544 (2003)
195-201.
[9]CLF de Almeida, HdS Falco, GRdM Lima, CdA Montenegro,
NS Lira, PF de Athayde-Filho, LC Rodrigues, MdFV de Souza, JM
Barbosa-Filho, LM Batista, Bioaktivitas dari Alga Laut dari Genus
Gracilaria, Int. J. Mol. Sci. 12 (2011) 4550–4573.
[10]BR Sharma, DY Rhyu, Efek anti-diabetes dariCaulerpa lentillifera:
stimulasi sekresi insulin di sel beta pankreas dan peningkatan
pengambilan glukosa di adiposit, Asian Pac. J. Trop. Bioma. 4 (2014)
575–580.
[11]F. Thivy, Cara rumput laut untuk tanah yang sempurna dan ladang yang tersenyum, Salt Res.
industri. 1 (1964) 1-4.
[12]MP Gupta, NE Gomez, AI Santana, PN Solis, G. Palacios, Aktivitas
antimikroba berbagai ganggang di pantai Atlantik Panama, Rev. Med.
Panama 16 (1991) 64–68.
[13]ME Duarte, JP Cauduro, DG Noseda, MD Noseda, AG Goncalves,
CA Pujol, EB Damonte, AS Cerezo, Struktur agaran sulfat dari
Acanthophora spicifera(Rhodomelaceae, Ceramiales) dan
63
aktivitas antivirusnya. Hubungan antara struktur dan aktivitas antivirus
dalam agarans, Carbohydr. Res. 339 (2004) 335–347.
[14]P. Ganesan, CS Kumar, N. Bhaskar, Sifat antioksidan ekstrak metanol dan
fraksi pelarutnya diperoleh dari rumput laut merah India pilihan,
Bioresour. teknologi. 99 (2008) 2717–2723.
[15]SKN Kaliaperumal, JR Ramalingam, M. Selvaraj, Percobaan budidaya di
lapanganAcanthophora spiciferadi daerah dekat pantai teluk mannar,
Indian J. Fish. 33 (1986) 476–478.
[16]W. Zheng, SY Wang, Aktivitas antioksidan dan senyawa fenolik dalam herbal
terpilih, J. Agric. Kimia Makanan. 49 (2001) 5165–5170.
[17]M. Liu, XQ Li, C. Weber, CY Lee, J. Brown, RH Liu, Antioksidan dan
kegiatan antiproliferatif raspberry, J. Agric. Kimia Makanan. 50 (2002)
2926–2930.
[18]S. Chakravarty, JC Kalita, Efek antihiperglikemik bungaPhlogacanthus
thyrsiflorusNees pada tikus diabetes yang diinduksi streptozotocin, Asian
Pac. J. Trop. Bioma. 2 (2012) S1357 – S1361.
[19]J. Meenu, S. Sunil, K. Manoj, Evaluasi aktivitas antihiperglikemik daridodonaea
viscosadaun tikus diabetes yang tidak normal dan stz, Int. J. Farmasi.
Farmasi. Sci. 3 (2011) 69–74.
[20]MM Bradford, Sebuah metode halus dan sensitif untuk kuantisasi jumlah
mikrogram protein menggunakan prinsip protein-pewarna mengikat,
Anal. Biokimia. 72 (1976) 248–253.
[21]J. Eross, D. Kreutzmann, M. Jimenez, R. Keen, S. Rogers, C. Cowell,
R. Vines, M. Silink, Pengukuran kolorimetri protein glikosilasi dalam darah
utuh, sel darah merah, plasma dan darah kering, Ann. klinik Biokimia. 21 (Pt
6) (1984) 477–483.
[22]T. Magwere, YS Naik, JA Hasler, Efek pengobatan klorokuin pada enzim
antioksidan pada hati dan ginjal tikus, Radic Bebas. Biol. Med. 22 (1997)
321–327.
[23]A. Clairborne, aktivitas Katalase, Dalam: AR Greenwald (Ed.), Buku Pegangan
Metode Penelitian Radikal Oksigen, CRC Press, Florida, 1989, hlm. 237–242.
[24]DJ Jollow, JR Mitchell, N. Zampaglione, JR Gillette, nekrosis hati yang
diinduksi Bromobenzene. Peran pelindung glutathione dan bukti 3,4-
bromobenzene oxide sebagai metabolit hepatotoksik, Farmakologi 11
(1974) 151–169.
[25]H. Ohkawa, N. Ohishi, K. Yagi, Assay untuk peroksida lipid dalam jaringan hewan
dengan reaksi asam tiobarbiturat, Anal. Biokimia. 95 (1979) 351–358.
[26]A. Junod, AE Lambert, W. Stauffacher, AE Renold, tindakan diabetogenik
streptozotocin: hubungan dosis dengan respon metabolik, J. Clin. Selidiki. 48
(1969) 2129–2139.
[27]SP LeDoux, SE Woodley, NJ Patton, GL Wilson, Mekanisme kerusakan sel
beta yang diinduksi nitrosourea. Perubahan DNA, Diabetes 35 (1986)
866–872.
[28]AM Palmer, CR Thomas, N. Gopaul, S. Dhir, EE Anggard, L. Poston,
RM Tribe, Diet suplemen antioksidan mengurangi peroksidasi lipid
tetapi merusak fungsi vaskular di arteri mesenterika kecil tikus diabetes
streptozotocin, Diabetologia 41 (1998) 148-156.
[29]KSK Ramarao, studi fenologis dariAcanthophora spicifera(Vahl.) Boergs.,
Dan agarophyte, Rumput Laut Res. Utiln. 5 (1982) 25–28.
[30]AK Mohamed, A. Bierhaus, S. Schiekofer, H. Tritschler, R. Ziegler,
PP Nawroth, Peran stres oksidatif dan aktivasi NF-B pada
komplikasi diabetes lanjut, BioFactors (OxfordEngland) 10 (1999)
157-167.
[31]H. Kappus, Stres oksidatif dalam toksisitas kimia, Arch. racun. 60 (1987)
144–149.
[32]D. Donnini, AM Zambito, G. Perrella, FS Ambesi-Impiombato,
F. Curcio, Glukosa dapat menginduksi kematian sel melalui mekanisme yang
diperantarai radikal bebas, Biochem. Biofis. Res. komuni. 219 (1996) 412–417.
[33]WH Habig, MJ Pabst, WB Jakoby, Glutathione S-transferase. Langkah enzimatik
pertama dalam pembentukan asam merkapturat, J. Biol. Kimia 249 (1974)
7130–7139.
[34]BBKJM McCord, I. Fridovich, Sebuah teori berdasarkan enzim
anaerobiosis obligat; fungsi fisiologis superoksida dismutase, Proc.
Natal akad. Sci. AS 68 (1976) 1024–1027.
[35]AJ Searle, RL Willson, Glutathione peroksidase: efek radikal bebas
superoksida, hidroksil dan bromin pada aktivitas enzim,
64 L. Vuppalapapati dkk. / Ilmu Pangan dan Kesehatan Manusia 5 (2016) 57–64

Int. J. Radiasi. Biol. berhubungan pejantan fisik Kimia Med. 37 (1980)
213–217.
[36]P. Sarkhail, S. Rahmanipour, S. Fadyevatan, A. Mohammadirad, G.
Dehghan, G. Amin, A. Shafiee, M. Abdollahi, Efek antidiabetes dari
Phlomis anisodonta: efek pada sel hati, peroksidasi lipid dan enzim
antioksidan pada diabetes eksperimental, Pharmacol. Res. 56 (2007)
261–266.
[37]SA Wohaieb, DV Godin, Perubahan mekanisme pertahanan jaringan radikal bebas
pada diabetes yang diinduksi streptozocin pada tikus. Efek pengobatan insulin,
Diabetes 36 (1987) 1014-1018.
[38]SK Jain, SN Levine, J. Duett, B. Hollier, Peningkatan tingkat peroksidasi lipid dalam sel
darah merah tikus diabetes yang diobati dengan streptozotocin, Metab. klinik
Eks. 39 (1990) 971–975.