Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342

Daftar isi tersedia diSainsLangsung

Jurnal Universitas King Saud – Sains

beranda jurnal: www.sciencedirect.com

Artikel asli

Aktivitas antioksidan dan anti-diabetes dari fraksi bioaktif Carica

pepayaekstrak biji
Ruben Agadasebuah,⇑, Dluya Thagrikib, D. Ester Lydiac, Amir Khusrod,⇑, Jawaher Alkahtanie, Manal
M. Al Shaqhae, Mona S. Alwahibie, Mohamed Soliman Elshikhe
sebuahDepartemen Biokimia, Sekolah Ilmu Hayati, Universitas Teknologi Modibbo Adama Yola, Nigeria
bCSIR-India Institute of Chemical Biology, Kolkata, 4, Raja SC, Mullick Road, Jadavpur, Kolkata 700032, West Bengal, India
cKimia Makanan dan Pengolahan Makanan, Loyola College, Nungambakkam, Chennai 600034, India
dDepartemen Penelitian Biologi dan Bioteknologi Tanaman, Loyola College, Nungambakkam, Chennai 600034, India
eDepartemen Botani dan Mikrobiologi, Sekolah Tinggi Ilmu Pengetahuan, Universitas King Saud, Riyadh 11451, Arab Saudi

info artikel abstrak

Sejarah artikel: Carica pepayamemiliki aplikasi obat yang luar biasa terhadap beragam penyakit sejak zaman kuno. Mempertimbangkan hal
Diterima 29 Agustus 2020 Direvisi tersebut, penelitian ini bertujuan untuk menilaiin vitroaktivitas antioksidan dan anti-diabetes dari fraksi bioaktifC. pepaya
26 Desember 2020 Diterima 7
ekstrak biji. Awalnya, biji matang yang dikeringkan di bawah naunganC. pepayabubuk dan diekstraksi melalui protokol soxhlet
Januari 2021 Tersedia online 13
untuk mendapatkan ekstrak kasar. Ekstrak kasar kemudian difraksinasi menggunakan pelarut yang berbeda yaitu. heksana,
Januari 2021
etil asetat, metanol, dan air. Pecahan yang diperoleh dinilai untuksebuah-glukosidase dan aktivitas penghambatan amilase
menggunakan metodologi standar. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat C (83,66 ± 0,10%) dan D (84,56 ±
Kata kunci:
0,23%) menunjukkan daya hambat maksimum terhadapsebuah-amilase dengan IC50nilai 36,84 dan 36,86 mg/ml, masing-
Antioksidan
masing. Demikian juga fraksi etil asetat C (48,72 ± 0,10%) dan D (51,81 ± 0,45%) menunjukkansebuahpenghambatan
Carica pepayabiji
Diabetes mellitus -glukosidase dengan IC50nilai 83,54 dan 82,33 mg/ml, masing-masing. Fraksi etil asetat C dan D selanjutnya dimurnikan untuk
Kromatografi gas-spektrometri massa mendapatkan subfraksi
K, L, M, dan N dan dievaluasi untukin vitroaktivitas antioksidan dan antidiabetes. Sub-fraksi K menunjukkan aktivitas
antioksidan maksimum terhadap DPPH dan radikal TBA (IC50= 41,37 dan 53,98 mg/ml) masing-masing. Namun, sub-
fraksi K menimbulkan aktivitas anti-diabetes yang paling mencolok terhadapsebuah-amilase (IC50= 156,15 mg/ml)
dan usussebuah-glukosidase (IC .)50= 70,89 mg/ml). Modus inhibisi ditentukan dengan menggunakan plot
Lineweaver- Burk. Sub-fraksi K menunjukkan mekanisme penghambatan kompetitif pada keduanyasebuah-amilase
dansebuah-glukosidase. Profil GC-MS mengkonfirmasi keberadaan beragam metabolit di sub-fraksi dan senyawa
bioaktif utama yang terdeteksi adalah asam heksadekanoat, metil ester, asam 11-oktadesenoat, metil ester, N, N-
dimetil, asam n-heksadekanoat, dan oleat. AC id. Temuan kami menyarankan penggunaan obat cerita rakyat dariC.
pepayabiji sebagai antioksidan yang efektif dan agen anti-diabetes.

- 2021 Penulis. Diterbitkan oleh Elsevier BV atas nama Universitas King Saud. Ini adalah akses terbuka
artikel di bawah lisensi CC BY (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).

1. Perkenalan komponen bioaktif yang sangat besar, ketersediaan mudah, dan toksisitas
rendah (Bhatia dkk., 2019). Saat ini, permintaan akan bahan terapeutik alami
Tanaman obat telah digunakan sebagai agen profilaksis dan terapi semakin meningkat karena bahan ini digunakan sebagai makanan dan obat
alami sejak zaman kuno karena adanya: yang memiliki khasiat terapeutik melalui konstituen fitokimia untuk
menggantikan senyawa sintetik.El Omari dkk., 2019). Hal tersebut
mengharuskan pencarian tanaman obat sebagai antioksidan alami karena
⇑ Penulis yang sesuai.
kemampuannya untuk mengais radikal bebas. Laporan sebelumnya
Alamat email:agabaidu73@gmail.com (R.Agada),armankhan0301@gmail. com
mengungkapkan bahwa stres oksidatif berpartisipasi dalam pergantian
(A.Khusro).
Peer review di bawah tanggung jawab King Saud University.
peristiwa dan patogenesis diabetes mellitus (Oboh dkk., 2014; Sabiu dan
Ashafa, 2016). Pemusnahan stres oksidatif oleh ekstrak tumbuhan obat
mempertahankan pankreasb-sel, melemahkan peroksidasi lipid, dan
peningkatan sensitivitas insulin (Maritim et al., 2003), akibatnya terhenti
Produksi dan hosting oleh Elsevier

https://doi.org/10.1016/j.jksus.2021.101342
1018-3647/- 2021 Para Penulis. Diterbitkan oleh Elsevier BV atas nama Universitas King Saud. Ini adalah
artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk.
perkembangan dan pergerakan ke kompleksitas diabetes (Sabu dan Kuttan,
2009). Sampai saat ini, diabetes mellitus tetap menjadi salah satu penyakit
metabolik yang paling umum dan menghancurkan yang dikenal umat
manusia. Diabetes melitus tipe 1 menyebabkan defisiensi insulin karena
hilangnyab-sel pulau pankreas yang memproduksi insulin. Sedangkan
diabetes melitus tipe 2 ditandai dengan hilangnya respon perifer terhadap
insulin. Jika tidak diobati, diabetes tipe 1 dapat berubah menjadi
ketoasidosis yang fatal. Diabetes tipe 2 merupakan bentuk umum dari
penyakit (Gita, 2013). Menariknya, salah satu pilihan pengobatan yang
efektif untuk diabetes tipe 2 adalah untuk mengurangi hiperglikemia
postprandial dengan menunda pengambilan glukosa melalui
penghambatansebuah-amilase dan usussebuah- aktivitas glukosidase
Dalam hal ini, inhibitor enzim dapat memperlambat penyerapan
karbohidrat, menekan hiperglikemia postprandial, sehingga mengobati
diabetes dan/atau obesitas (Lagu dkk., 2016).
Carica pepaya (Famili – Caricaceae) merupakan tumbuhan obat
yang umumnya tersebar di daerah tropis Afrika. biji dariC. pepaya
biasanya dianggap sebagai bahan limbah setelah pengolahan dan
konsumsi buah-buahan yang dapat dimakan. Bahan limbah ini
menggabungkan peluang tak terbatas untuk obat baru. Aplikasi
terapeutik yang terkait dengan aktivitas antioksidan dikaitkan dengan
mikronutrien esensial yang sangat besar dan beragam metabolit
sekunder yang tertanam di dalamnyaC. pepayabenih tanpa
menimbulkan tanda-tanda keracunan (Delphin dkk., 2014; Zhou dkk.,
2011; Mohamed dkk., 2014). Meskipun beberapa metode untuk
aktivitas antioksidan telah dilaporkan, hanya 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil
(DPPH), daya antioksidan pereduksi besi (FRAP), dan asam
thiobarbiturat (TBA) yang cepat dan andal.El Omari dkk., 2019; Ruoying
dkk., 2016). Studi terbatas telah dilaporkan di masa lalu mengenai sifat
antidiabetesC. pepayabiji (Adeneye dan Olagunju, 2009; Oboh dkk.,
2014). Oleh karena itu, penelitian ini diselidiki untuk mengevaluasiin
vitroaktivitas antioksidan sertasebuah-amilase dan
sebuah-ciri penghambatan glukosidase dari fraksi yang berbeda
C.pepaya - biji. Bagian dari penelitian ini juga berfokus pada identifikasi
senyawa aktif terapeutik utama dalam fraksi kuat menggunakan teknik
analitik kromatografi-massa Gas (GC-MS).
2. Bahan-bahan dan metode-metode
2.1. Koleksi tanaman dan persiapan ekstrak
Buah matang dariC. pepayadikumpulkan dari lahan pertanian
selama musim kemarau, diidentifikasi, dan divalidasi oleh ahli botani di
cabang Ilmu Tanaman, Sekolah Ilmu Hayati, Universitas Teknologi
Moddibo Adama Yola, Nigeria. Benih dikeringkan dan ditumbuk
menjadi bubuk kasar menggunakan blender lab dan mengalami
ekstraksi soxhlet dalam heksana, etil asetat, metanol, dan air suling
secara berurutan untuk mendapatkan ekstrak kasar.
2.2. Fraksinasi
Ekstrak pelarut (heksana, etil asetat, metanol, dan air) dariC. pepaya
biji dipisahkan dengan kromatografi kolom dengan silika gel (60-120
mesh) dan dielusi dengan metanol:etil asetat: heksana (6:2:2), diikuti
dengan metanol:etil asetat:kloroform: n-heksana (3:2:2 :3). Secara
keseluruhan 8 fraksi dikumpulkan dan setiap fraksi disaring untuk
sebuah-amilase dansebuahaktivitas penghambatan glukosidase (
Mohammad dkk., 2015).
2.3. Alfa-amilase (sebuah-amilase) uji penghambatan
C. pepayafraksi benih dinilai untuksebuah-penghambat amilase
sifat menurut metodologiMcCue and Shetty (2004). Properti
penghambatan enzim ditentukan sesuai rumus
2
Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342
disebutkan di bawah ini dan konsentrasi penghambatan 50% (IC50) nilai
diperkirakan dari kurva regresi.
Kontrol perut - Fraksi perut
Inhibisi% - 100 d1TH
Kontrol perut
Abs = absorbansi Blanko dan absorbansi fraksi Untuk cara inhibisi,
sub-fraksi K yang poten diambil pada IC-nya50nilai dan diinkubasi
dengansebuah-amilase. Di sisi lain, larutan pati digunakan pada
konsentrasi yang bervariasi (0,125-1% b/v) untuk menentukan sifat
penghambatan. Produksi gula pereduksi diukur secara
spektrofotometri menggunakan kurva standar maltosa dan diubah
menjadi kecepatan respon (V). Sebuah plot dua lipatan yang sesuai (1/V
versus 1/S) diplot. Jenis penghambatan pecahan padasebuahaktivitas
-amilase dikendalikan dengan memeriksa Lineweaver-Burk dua kali
lipat plot yang sesuai (Lineweaver dan Burk, 1934).
2.4. Alfa-glukosidase (sebuah-glucosidase) uji penghambatan
Pecahan dinilai untuksebuah-sifat penghambatan glukosidase
sesuai dengan metodologiKim dkk. (2005). Dua puluh mikroliter
dengan konsentrasi bervariasi (20–100 mg/ml) fraksi, acarbose, dan 50
akul dari sebuahsebuah-larutan glukosidase dalam dukungan fosfat
0,1 M (pH 6,9) diinkubasi pada suhu 25⁰C selama 10 menit. Tiga puluh
mikroliter larutan 5,0 mM (pNPG) dalam buffer fosfat 0,1 M (pH 6,9)
ditambahkan ke dalamnya. Tabung reaksi yang berisi campuran reaksi
diinkubasi pada suhu 37 -C selama 1 jam dan reaksi dihentikan dengan
menambahkan 1 ml Na 0,1 M.2BERSAMA3. Sifat penghambatan
diperkirakan sesuai dengan rumus yang disebutkan di bawah ini dan IC
50nilai diturunkan dari grafik regresi.
Kontrol perut - Fraksi perut
Inhibisi% - 100 d2TH
Kontrol perut
Untuk mode inhibisi, sub-fraksi potensial K pada IC .-nya50
konsentrasi diinkubasi dengan 50akul larutan alfa-glukosidase
(disiapkan dalam dukungan fosfat 0,1 M; pH 6,9) selama 10 menit pada
25 -C. Selanjutnya, 30akul larutan pNPG (0,625 sampai 5 mM)
ditambahkan ke semua tabung reaksi dari campuran reaksi, diinkubasi
selama 60 menit pada 37 -C, dan kemudian 1 ml Na2BERSAMA3tepat
diperkenalkan untuk menghentikan reaksi. Itupara-Kurva standar
nitrofenol ditentukan dari jumlah gula yang berkurang yang
dikeluarkan menggunakan analisis spektrofotometri. Sebuah plot dua
lipatan yang sesuai (1/V versus 1/[S]) diplot untuk menentukan jenis
penghambatan sub-fraksi padasebuah-glukosidase memanfaatkan
kinetika Michaelis-Menten (Lineweaver dan Burk, 1934).
2.5. Pemurnian fraksi kuat
Kromatografi kolom dan kromatografi lapis tipis (KLT) digunakan
untuk memurnikan fraksi yang menunjukkan sifat penghambatan
potensial. Fraksi kuat dikenai silika gel (60-120 mesh) dan dielusi
dengan campuran metanol, etil asetat, kloroform, dan heksana dengan
peningkatan polaritas (6:4:4:6, 4:1:1:4, dan 3:2:2:3 v/v). Fraksi yang
diperoleh selanjutnya dipisahkan melalui kromatografi kolom berulang
pada silika gel (60-200 mesh) dan dielusi dengan gradien metanol: etil
asetat: heksana (4:2:4) untuk menghasilkan sub-fraksi.
2.6.sebuah-amilase dansebuah-uji penghambatan glukosidase dari sub-fraksi
sebuah-amilase dansebuahSifat penghambatan -glukosidase dari
sub-fraksi dinilai mengikuti metodologiMcCue dan Shetty (2004) dan
Kim et al. (2005), masing-masing seperti yang dijelaskan di atas.
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk. Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342

2.7. Aktivitas antioksidan sub-fraksi- Frac-on A Frac-on B Frac-on C Frac-on D Frac-on E

Frac-on F Frac-on G Frac-on H acarbose
90

% penghambatan-amilase
2.7.1. Uji pemulung radikal DPPH 80
Efek pemulungan radikal DPPH dari sub-fraksi ditentukan mengikuti 70
metodologiSayah dkk. (2017). Absorbansi dicatat pada 523 nm

terhadap blanko. Aktivitas pemulungan DPPH diperkirakan sesuai
dengan persamaan yang diberikan di bawah ini dan IC50nilai
ditentukan.
Kontrol - Uji
DPPH scavberengsel%Þ - 100
Kontrol
2.7.2. Metode asam tiobarbiturat (TBA)
Sekitar 2 ml campuran yang mengandung 20-100 mg/ml subfraksi
dicampur dengan 2 ml asam trikloroasetat 20% dan 2 ml larutan asam
tiobarbiturat 0,67%. Campuran ini disimpan dalam penangas air (100
-C) selama 10 menit dan dibiarkan dingin. Setelah didinginkan,
disentrifugasi pada 3000 rpm selama 20 menit dan absorbansi reaksi
dibaca pada 532 nm (Sayah dkk., 2017). Aktivitas antioksidan TBA
dihitung dengan menggunakan persamaan seperti yang diberikan di
bawah ini:
Kontrol - Uji
Tindakan antioksidanvity%Þ - 100
Kontrol
2.7.3. uji FRAP
Properti FRAP ditentukan sesuai dengan metode:Sayah dkk. (2017).
Satu mililiter sub-fraksi (20-100 mg/ml) ditambahkan ke dalam 1 ml
buffer natrium fosfat 0,2 M (pH 6,6) dan 1 ml kalium ferricyanide 1%
dalam tabung reaksi terisolasi. Setelah inkubasi pada 50 -C selama 20
menit, 1 ml asam trikloroasetat 10% ditambahkan ke campuran reaksi,
dan campuran kemudian disentrifugasi pada 3000 rpm selama 10
menit. Setelah itu, 1 ml supernatan ditambahkan ke dalam 1 ml air
suling dan 200akul 0,1% FeCl3. Absorbansi diperkirakan 700 nm
spektrofotometri dan uji FRAP dihitung sebagai berikut:
Kontrol - Uji
uji FRAP%Þ - 100
Kontrol
2.8. Analisis GC-MS dari sub-fraksi
Metabolit bioaktif yang ada dalam sub-fraksi K ditentukan sesuai
dengan metodologiVenkatadri dkk. (2017)menggunakan GC-MS
(SHIMADZU QP2010).
2.9. Analisis statistik
Data dianalisis menggunakan Paket Statistik untuk Ilmu Sosial
(SPSS, versi 28.0). Hasil dinyatakan sebagai mean ± standard error of
mean (SEM) dan dianalisis lebih lanjut menggunakan Analisis Varians
aktivitas
60
50
40
30
20
d3TH 10
0
20 40 60 80 100
Konsentrasi (mg/ml)
Gambar 1.sebuahsifat penghambatan -amilase dari fraksi.
pankreassebuah-amilase memberikan penghambatan 84,56 ± 0,23%
pada 100 mg/ml. Efek keberuntungan ini sebanding dengan pecahan
lainnya (A - 82,07 ± 0,21%, B - 83,56 ± 0,06%, C - 83,66 ± 0,1%, E - 27,30 ±
0,23%, F - 44,15 ± 1,81%, G - 18,21 ± 0,33% , dan H - 33,05 ± 0,3%) dan
acarbose (obat standar) yang menawarkan 58,69 ± 4,1%sebuah-
penghambatan amilase. IC50nilai pecahan
d4TH A, B, C, D, dan acarbose diperkirakan 37,3, 37,53, 36,84, dan
36,86 mg/ml, masing-masing.
Selanjutnya, efek penghambatan fraksi biji padain vitro
sebuahAktivitas -glukosidase disajikan dalamGambar 2.. Di antara
berbagai fraksi, fraksi etil asetat D pada konsentrasi yang lebih tinggi
menunjukkan 51,81 ± 0,45% penghambatansebuah-glukosidase
dibandingkan dengan acarbose (62,38 ± 3,47%). Fraksi etil asetat D
diamati sebagai fraksi paling kuat (IC50- 82,33 mg/ml).
3.2.sebuah-amilase dansebuah-penghambatan glukosidase dari sub-fraksi
Karena fraksi etil asetat (C dan D) ekstrak biji menunjukkan
penghambatan enzim yang lebih baik (sebuah-amilase dan
sebuah-glukosidase), selanjutnya dimurnikan untuk mendapatkan
d5TH dua sub-fraksi dari masing-masing fraksi etil asetat dan ditetapkan
sebagai sub-fraksi K, L, M, dan N). Semua sub-fraksi dihambatsebuah
aktivitas -amilase tetapi sub-fraksi K menunjukkan sifat penghambatan
maksimum 30,23 ± 1,77% pada konsentrasi tertinggi (100 mg/ml)
seperti yang disajikan padaGambar 3. IC50nilai sub-fraksi K, L, M, N, dan
acarbose masing-masing diperkirakan sebesar 156,15, 173,37, 207,04,
178,32, dan 74,64 mg/ml. Meskipun efeknya bergantung pada
konsentrasi, persentase penghambatan subfraksi lebih rendah dalam
korelasinya dengan acarbose tetapi sub-fraksi K menunjukkan
signifikan (P <0,05) penghambatansebuah-amilase terhadap sub-
fraksi lainnya.
Frac-on A Frac-on B Frac-on C Frac-on D Frac-on E
Frac-on F Frac-on G Frac-on H
%Penghambatan -glukosidase

acarbose
satu arah (ANOVA). Dampak penting dilaporkan pada (P <0,05). 80
70
60
3. Hasil
aktivitas

50

3.1.sebuah-amilase dansebuah-glukosidase penghambatan fraksi

40
30
C. pepayaekstrak biji (heksana, etil asetat, metanol, dan 20
berair) yang terkena KLT dan kromatografi kolom untuk mendapatkan 10
dua fraksi dari masing-masing ekstrak pelarut dan ditetapkan sebagai
0
fraksi heksana (A dan B), fraksi etil asetat (C dan D), fraksi metanol (E
20 40 60 80 100
dan F), dan fraksi berair (G dan H). Gambar 1menunjukkan Konsentrasi (mg/ml)
penghambatansebuahaktivitas -amilase oleh fraksi biji. Fraksi D
secara signifikan menahan aktivitas Gambar 2.sebuah-sifat penghambatan glukosidase dari fraksi.

3
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk. Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342

Subfrac-on K Subfrac-on L Subfrac-on M Subfrac-on N acarbose Sub-frac-on K Sub-frac-on L Sub-frac-on M

70 100 Sub-frac-on N Asam askorbat
% penghambatan -amilase

60
80
50

DPPH % Penghambatan
60
aktivitas

40

30
40
20

10 20

0 0
20 40 60 80 100
20 40 60 80 100
Konsentrasi (mg/ml)
Konsentrasi (mg/ml)

Gambar 3.sebuahsifat penghambatan -amilase dari sub-fraksi. sebuah

Subfrac-on K Subfrac-on L Subfrac-on M Subfrac-on N acarbose

Sub-frac-on K Sub-frac-on L Sub-frac-on M
120
Sub-frac-on N Asam askorbat
100
100
% penghambatan -glukosidase

80 80

FRAP % Penghambatan
60 60
aktivitas

40 40

20
20
0
0
20 40 60 80 100
Konsentrasi (mg/ml) 20 40 60 80 100
Konsentrasi (mg/ml)
Gambar 4.sebuah-sifat penghambatan glukosidase dari sub-fraksi. b

Sub-frac-on K Sub-frac-on L Sub-frac-on M

100 Sub-frac-on N Asam askorbat

90
80
70
TBA% penghambatan

60
50
40
30
20
10
0
20 40 60 80 100
Konsentrasi (mg/ml)
Gambar 5.Plot Lineweaver-Burk dari reaksisebuah-amilase dengan adanya subfraksi K. c
Gambar 7. (a) Pemulungan radikal DPPH, (b) uji FRAP, dan (c) aktivitas penangkapan
radikal TBA dari sub-fraksi.

Juga,sebuahSifat penghambatan -glukosidase dari sub-fraksi seperti K,

L, M, dan N diamati pada konsentrasi yang bervariasi (Gambar 4). Semua
sub-fraksi menunjukkan peningkatan penghambatansebuah-glukosidase
dengan cara yang bergantung pada konsentrasi (20– 100 mg/ml) tetapi sub-
fraksi K secara signifikan menghambat aktivitassebuah-glukosidase (57,01
± 1,44–87,04 ± 0,66%). Aktivitas tersebut selanjutnya didukung oleh IC . yang
lebih rendah50nilai (70,89 mg/ml) dibandingkan dengan sub-fraksi lainnya (L-
82,16 mg/ml, M - 96,08 mg/ml, dan N - 96,54 mg/ml) dan acarbose (71,47
mg/ml).
Untuk menunjukkan mekanisme penghambatan sub-fraksi K pada
enzim (sebuah-amilase dansebuah-glucosidase), plot Lineweaver-
Gambar 6.Plot Lineweaver-Burk dari reaksisebuah-glukosidase dengan adanya Burk ditentukan dari sub-fraksi K. Hal ini menunjukkan bahwa sub-
subfraksi K. fraksi K menunjukkan tipe penghambatan kompetitif

4
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk.
pada kedua enzim (Gambar. 5 dan 6). Vmaksimalnilai tidak terpengaruh
sementara Kmmeningkat dengan adanya inhibitor.
3.3. Efek antioksidan in vitro dari sub-fraksi
Gambar 7a menunjukkan kemampuan menangkap radikal DPPH
subfraksi K, L, M, dan N. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semua
sub-fraksi seperti L (27,91 ± 1,54–74,28 ± 0,41%), M (61,56 ± 0,67–85,82
± 0,05%) dan N (58,03 ± 0,90–83,17 ± 0,04%) menangkap radikal bebas
DPPH di cara yang tergantung dosis tetapi sub-fraksi K menunjukkan
signifikan (P <0,05) aktivitas pemulungan (70,82 ± 0,33–91,66 ± 0,02%)
dibandingkan dengan asam askorbat (8,18 ± 0,34–58,62 ± 0,69%).
Kemampuan scavenging TBA dari sub-fraksi diperlihatkan di Gambar 7b.
Hasil menunjukkan signifikan (P <0,05) penghambatan TBA oleh sub-fraksi K
(50,96 ± 0,73-72,13 ± 0,09%) dibandingkan dengan sub-
Gambar 8.Kromatogram GC-MS subfraksi K.
Gambar 9.Senyawa bioaktif utama hadir dalam sub-fraksi K.
5
Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342
pecahan L (33,92 ± 0,39–66,38 ± 0,53%), M (47,77 ± 0,4–68,03 ± 0,46%),
dan N (23,43 ± 0,59–55,67 ± 0,2%).
Uji FRAP dari sub-fraksi ditunjukkan pada:Gambar 7c. Dengan
meningkatnya konsentrasi (20–100 mg/ml), sifat FRAP subfraksi juga
meningkat (sub-fraksi K - 41,12 ± 0,35–75,43 ± 0,36%; L - 25,52 ± 1,43–
66,05 ± 0,05%; M - 35,49 ± 0,56 –58,83 ± 0,19, dan N - 13,77 ± 0,5–57,23
± 0,23%) penghambatan dibandingkan dengan asam askorbat (90,33 ±
0,04–95,24 ± 0,02%).
3.4. Analisis GC-MS sub-fraksi K
Kromatogram GC-MS dari sub-fraksi K ditunjukkan pada: Gambar 8.
Penelitian ini mengidentifikasi keberadaan 18 senyawa bioaktif pada
sub-fraksi K dan direpresentasikan dengan waktu retensi GC,
kelimpahan relatif (luas), dan nama senyawa dalamTabel 1. Hasil profil
GC-MS ditandai asam heksadekanoat, metil ester
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk. Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342

Tabel 1
Identifikasi senyawa pada sub-fraksi K menggunakan GC-MS.

S/T Waktu retensi Luas (%) Formula molekul Berat Molekul (g/mol) Nama senyawa

1 3.868 0,61 C7H12HAI 112,17 2-Heptenal, (E)-

2 4.988 0,77 C10H14 134.21 4,7-Methanoindene, 3a,4,5,6,7,7a-hexahydro-, endo-9-
3 5.922 0,79 C11H16 148.24 Methylene-tricyclo[4.2.1.1(2,5)]dekana
4 6.675 2.08 C10H8 128.17 4-Phenylbut-3-ene-1-yne
5 10.658 1.38 C11H22HAI2 186,28 Asam dekanoat, metil ester
6 11.466 1.56 C12H24HAI2 200.31 Asam dekanoat, etil ester
7 12,955 1.44 C18H36HAI2 284.48 Asam heksadekanoat, 15-metil-, metil ester
8 13.735 2.23 C11H22HAI2 186,29 Asam oktanoat, 2,6-dimetil-, metil ester Asam
9 15.683 9.18 C17H34HAI2 270,45 heksadekanoat, metil ester
10 17.082 14.60 C16H32HAI2 256,41 n-asam heksadekanoat
11 18.911 13.50 C3H7TIDAK 73.09 N,N-dimetil-
12 18.966 10.12 C19H36HAI2 296,5 11-Octadecenoic acid, metil ester
13 19.316 4.58 C19H38HAI2 298.5 Asam oktadekanoat, metil ester Asam
14 20.151 23.22 C18H34HAI2 282.47 Oleat
15 21.657 3.08 C39H76HAI5 624 Asam oktadekanoat, 2-hidroksi-1,3-propanadiil ester
16 23.528 5.97 C17H36HAI 256,5 6,10,13-Trimethyltetradecanol
17 23.739 2.70 C13H13N3HAI 227.26 1-(6-Metil-2-piridil)-3-fenilurea Asam
18 23,901 2.19 C23H46HAI2 354.61 dokosanoat, metil ester

(9,18%), asam 11-Octadecenoic, metil ester (10,12%), N, Ndimethyl
(13,50%), asam n-Hexadecanoic (14,60%), dan asam oleat (23,22%)
sebagai metabolit bioaktif utama di sub- pecahan. Struktur senyawa
dominan ini ditunjukkan pada Gambar 9.
4. Diskusi
Banyak tanaman obat telah dilaporkan menunjukkan efek penurun
glukosa darah melalui beragam mekanisme yang secara langsung atau
tidak langsung digunakan untuk persiapan banyak obat modern.
Namun, mekanisme ini mirip dengan agen anti-diabetes oral sintetis
tetapi tanaman ini belum diterima sebagai agen obat yang valid dalam
memusnahkan diabetes mellitus karena evaluasi ilmiah yang
terdokumentasi (Campbell-Tofte dkk., 2012). Dalam studi saat ini,
ekstrakC. pepayabiji dimurnikan untuk mendapatkan fraksi bioaktif
sebagai antioksidan dan agen antidiabetes. Diantara fraksi tersebut,
fraksi etil asetat menunjukkan yang paling menonjolin vitroaktivitas
penghambatan terhadap
sebuah-amilase dan usussebuah-glukosidase. Penghambatan enzim ini
memungkinkan sejumlah kecil glukosa untuk diserap ke dalam sirkulasi
darah, sehingga glukosa plasma tidak akan melonjak setelah makan (Chipiti
dkk., 2015).
Karena fraksi (C dan D) yang diperoleh dari ekstrak etil asetatC. pepaya
benih menunjukkan potensi penghambatan paling aktif terhadapsebuah
-amilase dan usussebuah-glukosidase, selanjutnya dimurnikan untuk
mendapatkan sub-fraksi K, L, M, dan N. Diantaranya, sub-fraksi K agak
terhambatsebuah-amilase dan secara signifikan dihambatsebuah
-aktivitas glukosidase dengan IC . yang rendah50nilai-nilai. Temuan kami
setuju dengan laporan dariKrentz dan Bailey (2005)yang mengusulkan
bahwa model obat diabetes mellitus tipe 2 yang efektif sedikit menghambat
pankreassebuah-amilase dengan penghambat kuat usussebuah-
glukosidase. Lebih lanjut, mekanisme kompetitif penghambatan pada kedua
enzim oleh sub-fraksi K menunjukkan bahwa ikatan penghambat dengan
enzim bebas menghambat pembentukan kompleks enzim-substrat.
kekuatan karena kaya beragam metabolit sekunder bioaktif (Sagbo
dkk., 2017; Zhou dkk., 2011). Dalam konteks ini, sub-fraksi K
menunjukkan kemampuan antioksidan yang tinggi yang mungkin
disebabkan oleh adanya metabolit bioaktif dalam biji. Studi sebelumnya
tentang aktivitas penangkal radikal bebas dariC. pepayabiji
menunjukkan bahwa itu menunjukkan aktivitas yang mencolok
dibandingkan dengan asam askorbat standar (Kothari dan Seshadri,
2010; Norshazila dkk., 2010; Contreras-Calderon dkk., 2011).
Kromatogram GC-MS mengungkap adanya senyawa bioaktif yang
berbeda dalam fraksi ekstrak etil asetat dariC. pepayabiji. Senyawa
utama yang ditemukan dalam penelitian ini telah diketahui memiliki
banyak aktivitas farmakologis di masa lalu. Beberapa penelitian telah
mendokumentasikan asam n-hexadecanoic dan asam oleat sebagai
antioksidan yang menjanjikan, anti-inflamasi, dan hipokolesterolemia,
dan 5-sebuahagen aktivitas reduktase inhibitor (Rajeswari dkk., 2012;
Anyasor dkk., 2014; Omotoso dkk., 2014; Gnanavel dan Saral, 2013).
Oleh karena itu, temuan menunjukkan bahwa metabolit aktif iniC.
pepayabiji mungkin telah mempertahankan fungsi sel beta dan
menghambat aktivitassebuah- amilase dan usussebuah-glukosidase
in vitro.
5. Kesimpulan
Penelitian ini mengidentifikasi asam heksadekanoat, metil ester,
asam 11-oktadekanoat, metil ester, N, N-dimetil-, asam
nheksadekanoat, dan asam oleat sebagai senyawa antidiabetes yang
dominan padaC. pepayabiji. Disarankan bahwa senyawa ini dapat
memberikan efek sinergis terhadap sifat anti-diabetes. Hal ini juga
didukung oleh aktivitas antioksidan yang kuat dan mode kompetitif
sebuah-amilase dansebuahpenghambatan -glukosidase, sehingga
mengganggu konversi karbohidrat menjadi glukosa. Singkatnya, hasil
penelitian ini menyarankan lebih lanjut in vivovalidasi dariC. pepaya
benih dalam memperbaiki diabetes dan penyakit metabolik terkait
lainnya.
Pernyataan Kepentingan Bersaing

Radikal bebas merupakan konsekuensi langsung dari hiperglikemia pada
diabetes mellitus, yang secara tidak tepat meningkatkan kerusakan seluler
dan enzim, meningkatkan peroksidasi lipid, dan mengembangkan resistensi
insulin.Brownlee, 2001; Maritim et al., 2003). Mengkonsumsi tanaman
dengan atribut antioksidan yang sangat baik telah dieksplorasi secara
agresif untuk mengobati penyakit secara global dan untuk memperbaiki
aktivitas radikal bebas yang merusak (Sharma et al., 2013).C. pepayabiji telah
dilaporkan memiliki sifat antioksidan yang kuat seperti pengurangan radikal
DPPH, ABTS, NO2, dan pereduksi ion besi
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak mengetahui adanya persaingan
kepentingan keuangan atau hubungan pribadi yang tampaknya dapat
mempengaruhi pekerjaan yang dilaporkan dalam makalah ini.
ucapan terima kasih
Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Dekan
Riset Ilmiah di Universitas King Saud yang telah mendanai pekerjaan ini melalui
kelompok penelitian no. RG-1441-329.

6
R. Agada, D. Thagriki, D. Esther Lydia dkk.
Referensi
Adeneye, AA, Olagunju, JA, 2009. Hipoglikemik awal dan hipolipidemik
kegiatan ekstrak biji berair dariCarica pepayaAir terjun. pada tikus Wistar. Biol. Med.
1, 1–10.
Anyasor, GN, Onajobi, FD, Osilesi, O., Adebawo, OO, 2014. Fitokimia
konstituen dalam fraksi heksana dari Costusafer Ker Gawl. Tangkai. Veda Res. Int.
difitnah. 2, 66–72.
Bhatia, A., Singh, B., Arora, R., Arora, S., 2019. Evaluasi in vitro darisebuah-glukosidase
potensi penghambatan ekstrak metanol tanaman antidiabetes tradisional
digunakan. Alternatif Pelengkap BMC. Med. 19 (1).https://doi.org/10.1186/s12906-
019-2482-z.
Brownlee, M., 2001. Biokimia dan biologi sel molekuler diabetes
komplikasi. Alam 414 (6865), 813–820.
Campbell-Tofte, J., Mølgaard, P., Winther, K., 2012. Memanfaatkan potensi klinis
penggunaan tanaman obat sebagai agen antidiabetes. Botani: Terapi Target. 2, 7– 19
. Rajeswari, G., Murugan, M., Mohan, VR, 2012. Analisis GC-MS bioaktif
Chipiti, T., Ibrahim, MA, Singh, M., ShahidulIslam, MD, 2015.In vitroalfa-
efek penghambatan amilase dan alfa-glukosidase dan aktivitas sitotoksik dari Albasia
antunesianaekstrak. Farmakogni. Mag. 11, 231–236. Contreras-Calderon, J., Calderon-
Jaimes, L., Guerra-Hernández, E., García-Villanova,
B., 2011. Kapasitas antioksidan, kandungan fenolik dan vitamin C dalam pulp, kulit
dan biji dari 24 buah eksotik dari Kolombia. Makanan Res. Int. 44 (7), 2047–2053.
Delphin, DV, Haripriya, R., Subi, S., Jothi, D., Thirumalai, VO, 2014. Fitokimia
penyaringan berbagai ekstrak biji etanol. Dunia J.Pharm. Farmasi. Sci. 7, 1041–1048.
Gita, B., 2013. Hiperglikemia dan hiperlipidemia mengurangi dampak dari
Catharanthus roseus (Sadabahar) ekstrak air daun pada subjek diabetes mellitus tipe
2. J. Ilmu Tanaman. Res. 3, 170-174.
Gnanavel, V., Saral, AM, 2013. Analisis GC-MS dari petroleum eter dan daun etanol
ekstrak dariAbrus precatoriusAir terjun. Int. J. Farmasi. Biosci. 4, 37–44.
Kim, YM, Jeong, YK, Wang, MH, Lee, WY, Rhee, HI, 2005. Efek penghambatan
ekstrak kulit pohon pinus pada aktivitas alfa-glukosidase dan hiperglikemia
postprandialk.Nutrisi 21, 756–761.
Kothari, V., Seshadri, S., 2010. Aktivitas antioksidan ekstrak bijiAnnona
squamosadanCarica pepaya.nutrisi Ilmu Makanan 40 (4), 403–408.
Lineweaver, H., Burk, D., 1934. Penentuan konstanta disosiasi enzim.
Selai. Kimia Perkumpulan 56 (3), 658–666.
Krentz, AJ, Bailey, CJ, 2005. Agen antidiabetik oral: peran saat ini dalam tipe 2
diabetes mellitus. Narkoba 65 (3), 385–411.
Maritim, AC, Sanders, RA, Watkins, JB, 2003. Diabetes, stres oksidatif, dan
antioksidan: ulasan. J. Biokimia. mol. racun. 17 (1), 24-38.
Mccue, P., Shetty, K., 2004. Efek penghambatan ekstrak asam rosmarinic pada babi
amilase pankreasin vitro.Pac Asia J.klin. nutrisi 13, 101–106. Mohammad, NS,
Srinivasulu, A., Chittibabu, B., 2015. Isolasi dan pemurnian
prinsip antibakteri dari Avicennia marina l dalam metanol. Int. J. Farmasi. Farmasi.
Sci. 7, 5–8.
Jurnal Universitas Raja Saud – Sains 33 (2001) 101342
Mohamed, ABD, Saeed, E., Salama, M., 2014. Carica pepaya sebagai sumber alami
obat dan pemanfaatannya pada aplikasi farmasi tertentu. Int. J. Farmasi. Farmasi. Sci.
6, 857–860.
Norshazila, S., Syed Zahir, I., Mustapha Suleiman, K., Aisyah, MR, Kamarul Rahim,
K., 2010. Tingkat antioksidan dan aktivitas benih pilihan buah tropis Malaysia.
Malaysia J. Nutr. 16, 149–159.
Oboh, G., Olabiyi, AA, Akinyemi, AJ, Ademiluyi, AO, 2014. Penghambatan kunci
enzim yang terkait dengan diabetes tipe 2 dan peroksidasi lipid yang diinduksi
natrium nitroprusside pada pankreas tikus oleh fitokimia yang dapat diekstraksi air
dari buah pepaya mentah (Carica pepaya).J. Klinik Dasar. Fisiol. farmasi. 25, 21–34. El
Omari, N., Sayah, K., Fettach, S., El Blidi, O., Bouyahya, A., Faouzi, MEA, Kamal, R.,
Barkiyou, M., 2019. Evaluasiin vitroaktivitas antioksidan dan antidiabetesaristolochia
longaekstrak. Alternatif Pelengkap Berbasis Bukti. Med. 2019, 1–9.
Omotoso, AE, Olorunfemi, EO, Mikailu, S., 2014. Analisis fitokimia
Cnidoscolus aconitifolius (daun Euphorbiaceae) dengan teknik spektrometri. Niger. J.
Farmasi. aplikasi Sci. Res. 3, 38–49.
komponen dariHugonia mystaxL. (Linaceae). Res. J. Farmasi. Biol. Kimia Sci. 3, 301–
308.
Ruoying, M., Youmei, L., Xuetian, R., Jinhong, C., Linhe, W., Zheng, W., Zhang, B.,
2016. Dalam: Analisis aktivitas antioksidan dan senyawa fenolik ekstraksiC. pepaya
sisa biji. Perusahaan Penerbitan Ilmiah Dunia, Singapura, hlm. 596–604.
Sabiu, S., Ashafa, AOT, 2016. Stabilisasi membran dan kinetika karbohidrat
enzim metabolisme (sebuah-amilase dansebuah-glukosidase) potensi penghambatandari
Eucalyptus obliqua L.Her. (Myrtaceae) Ekstrak daun etanolik Blakely: dandalam vitpenilaian
ro. Afrika Selatan J. Botani 105, 264–269.
Sabu, MC, Kuttan, R., 2009. Aktivitas antidiabetes dan antioksidanTerminalia
bellerica.Roxb. India J. Exp. Biol. 47, 270–275.
Sharma, SK, Lalit, S., Suruchi, S., 2013. Tinjauan tentang tanaman obat yang memiliki
potensi antioksidan. India J.Res. Farmasi. Bioteknologi. 1, 404–409. Sagbo, IJ,
Afolayan, AJ, Bradley, G., 2017. Antioksidan, antibakteri dan
sifat fitokimia dari dua tanaman obat terhadap bakteri penyebab luka. Asia Pasifik J.
Tropical Biomed. 7 (9), 817–825.
Sayah, K., Marmouzi, I., NaceiriMrabti, H., Cherrah, Y., Faouzi, MEA, 2017.
Aktivitas antioksidan dan potensi penghambatan ekstrak bagian udara Cistus
salviifolius (L.) dan Cistus monspeliensis (L.) terhadap enzim kunci yang terkait
dengan hiperglikemia. Bioma. Res. Int. 2017, 2789482.
Lagu, YH, Kim, DW, Curtis-Long, MJ, Park, C., Son, M., Kim, JY, Yuk, HJ, Lee, K.
W., Park, KH, 2016. Amida asam sinamat dariTribulus terrestrismenampilkan tidak
kompetitifsebuah- penghambatan glukosidase eur. J. Med. Kimia 114, 201–208.
Venkatadri, B., Khusro, A., Aarti, C., Rameshkumar, MR, Agastian, P., 2017.In vitro
penilaian tentang sifat obat dan komposisi kimia dariMichelia nilagiricakulit pohon.
Pac Asia J. Trop. Bioma. 7, 782–790.
Zhou, K., Wang, H., Mei, W., Li, X., Luo, Y., Dai, H., 2011. Aktivitas antioksidan dari
ekstrak biji pepaya. Molekul 16, 6179–6192.