PEMBUATAN MULTIKOMPONEN KRISTAL

PIPERIN - NIKOTINAMIDA MENGGUNAKAN METODE

SPRAY DRYING

SKRIPSI SARJANA FARMASI

Oleh :

INTAN PUTRI DINANTI

No. BP : 17160012

PROGRAM STUDI FARMASI

UNIVERSITAS DHARMA ANDALAS PADANG
2021
 PERNYATAAN ORISINIL DAN PENYERAHAN HAK CIPTA

Saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Intan Putri Dinanti

No. Bp : 17160012

Judul Skripsi : Pembuatan Multikomponen Kristal Piperin-

Nikotinamida Menggunakan Metode Spray

Drying

Dengan ini menyatakan bahwa:

1. Skripsi yang saya tulis merupakan hasil karya saya sendiri,

terhindar dari unsur plagiarisme, dan data beserta seluruh isi

skripsi tersebut adalah benar adanya.

2. Saya menyerahkan hak cipta dari skripsi tersebut kepada Program

Studi Farmasi Universitas Dharma Andalas untuk dapat

dimanfaatkan dalam kepentingan akademis.

Padang, 30 Agustus 2021

Pernyataan

Intan Putri Dinanti

17160012

ii
 Skripsi ini telah dipertahankan di depan Panitia Ujian Sarjana

Program Studi S1 Farmasi

Universitas Dharma Andalas Padang

Disetujui oleh:

Pembimbing 1 Pembimbing 2

Prof. Dr. apt. Erizal Zaini, M.Si apt. Sefrianita Kamal, M.Farm
NIDN: 0010047304 NIDN: 1007097903

iii
 Program Studi S1 Farmasi

Universitas Dharma Andalas Padang

Pada Tanggal : 30 Agustus 2021

iv
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT yang senantiasa memberikan rahmat dan

nikmat kesehatan lahir maupun batin. Shalawat beriring salam kepada Nabi

Muhammad Saw, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Pembuatan Multikomponen Kristal Piperin-Nikotinamida Menggunkan

Metode Spray Drying”

Penulisan skripsi ini tentunya dapat diselesaikan tidak terlepas dari doa,

semangat dan dukungan yang telah diberikan kepada penulis. Pada kesempatan

ini, izinkan penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada :

1. Orang tua ( Bapak Suardi Joyo dan Ibu Ernawati ) yang selalu memberikan

dukungan moril maupun materil kepada penulis sehingga dapat

menyelesaikan penulisan skripsi ini.

2. Prof. Dr. apt. Erizal Zaini, M.Si, selaku Dosen Pembimbing I

3. apt. Sefrianita Kamal, M.farm, selaku Dosen Pembimbing II

4. Dr. apt. Rustini, M.Si., selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas

Dharma Andalas (UNIDHA) Padang

5. apt. Sefrianita Kamal, M.farm, selaku Dosen Pembimbing Akademik

6. Bapak dan Ibu Staf Pengajar Program Studi Farmasi Universitas Dharma

Andalas (UNIDHA) Padang

7. Rekan-rekan mahasiswa, khususnya mahasiswa Program Studi Farmasi

Universitas Dharma Andalas ( UNIDHA ) Padang, angkatan 2017 yang

telah memberikan dukungan dan motivasi.

v
 Semoga semua bantuan serta do’a yang telah diberikan menjadi amal ibadah

disisi Allah SWT. Penulis telah berusaha menghasilkan karya ini sebaik

mungkin, tetapi jika masih terdapat kekeliruan yang luput dari koreksi, penulis

mengharapkan kritikan dan saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi

ini. Semoga proposal ini bermanfaat bagi kita semua.

Padang, 30 Agustus 2021

Intan Putri Dinanti

vi
 PEMBUATAN MULTIKOMPONEN KRISTAL PIPERIN-
NIKOTINAMIDA DENGAN METODE SPRAY DRYING

ABSTRAK

Piperin secara kimia merupakan golongan alkaloid yang ditemukan pada buah dan
akar tumbuhan Piper nigrum yang merupakan family Piperaceae. Piperin
memiliki aktivitas seperti anti-inflamasi, anti-tumor, dan antidepresan. Piperin
dari sifat fisikokimianya memiliki kelarutan yang rendah dalam air, praktis tidak
larut dalam air, namun larut dalam alkohol dan eter. Karena kelarutan yang rendah
dalam air, dilakukanlah suatu modifikasi untuk menjadikan kelarutan dan disolusi
piperin lebih meningkat dengan pembentukan multikomponen kristal piperin dan
nikotinamida menggunakan metode spray drying. Untuk karakterisasi
multikomponen kristal dilakukan dengan menggunakan Powder X-Ray
Diffraction (PXRD), Differential Scanning Calolymetry (DSC), spektroskopis FT-
IR dan Scanning Electron Microscopy (SEM). Evaluasi multikomponen kristal
yang terbentuk dilakukan dengan uji kelarutan serta disolusi, untuk kelarutan
dilakukan dalam air suling bebas CO2 selama 24 jam dan uji disolusi dilakukan
dengan alat uji disolusi USP tipe II menggunakan medium air suling bebas CO 2.
Hasil karakterisasi multikomponen kristal menunjukkan adanya penurunan titik
intensitas pola difraksi sinar-X yang mengindikasikan terjadinya penurunan
derajat kristalinitas, penurunan titik lebur pada analisis DSC, tidak terjadi
pergeseran bilangan gelombang yang signifikan pada analisis FT-IR. Hasil uji
kelarutan piperin dalam multikomponen kristal menunjukkan peningkatan
kelarutan sebesar 2,792 kali, untuk kadar piperin terdisolusi pada menit ke-60
yaitu 11,502% .

Kata Kunci: piperin, nikotinamida, multikomponen kristal, spray drying,

kelarutan, disolusi

vii
 MANUFACTURE OF MULTICOMPONENT PIPERIN-
NICOTINAMIDE CRYSTALS BY SPRAY DRYING METHOD

ABSTRACT

Piperine is chemically a class of alkaloids found in the fruit and roots of the Piper
nigrum plant which is part of the Piperaceae family. Piperine has anti-
inflammatory, anti-tumor and antidepressant activities. Piperine from its
physicochemical properties has low solubility in water, practically insoluble in
water, but soluble in alcohol and ether. Due to its low solubility in water, a
modification was made to increase the solubility and dissolution of piperine by
forming multicomponent piperine and nicotinamide crystals using the spray
drying method. The multicomponent crystal characterization was carried out using
Powder X-Ray Diffraction (PXRD), Differential Scanning Calolymetry (DSC),
FT-IR spectroscopy and Scanning Electron Microscopy (SEM). Evaluation of
multicomponent crystals formed was carried out by solubility and dissolution
tests, for solubility carried out in CO2-free distilled water for 24 hours and
dissolution tests were carried out with USP type II dissolution test equipment
using CO2-free distilled water medium. The results of the multicomponent crystal
characterization showed a decrease in the intensity of the X-ray diffraction pattern
which indicated a decrease in the degree of crystallinity, a decrease in the melting
point in the DSC analysis, and no significant shift in the wave number in the FT-
IR analysis. The results of the piperine solubility test in multicomponent crystals
showed an increase in solubility of 2,792 times, for piperine dissolution levels in
the 60th minute were 11.502%.

Keywords : piperine, nicotinamide, multicomponent crystal, spray drying,

solubility, dissolution

viii
 DAFTAR ISI

PERNYATAAN ORISINIL DAN PENYERAHAN HAK CIPTA……………ii

HALAMAN PENGESAHAN……………..…………………………………………iii
HALAMAN PERTAHANAN SKRIPSI…………………………………………...iv
KATA PENGANTAR…………………………………………………………............v
ABSTRAK............................................................................................................ vii
ABSTRACT........................................................................................................viii
DAFTAR ISI.........................................................................................................ix
DAFTAR TABEL............................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR...........................................................................................xiv
DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................................xvi
BAB I PENDAHULUAN.......................................................................................1
1.1 Latar Belakang...........................................................................................1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................................3
1.3 Tujuan Penelitian.......................................................................................3
1.4 Hipotesa Penelitian....................................................................................3
BAB II TINJAUN PUSTAKA..............................................................................4
2.1 Piperin........................................................................................................4
2.1.1 Tinjauan Umum..............................................................................4
2.1.2 Tinjauan Farmakokinetik................................................................6
2.1.3 Tinjauan Farmakologi.....................................................................6
2.2 Nikotinamida..............................................................................................7
2.2.1 Tinjauan Umum..............................................................................7
2.2.2 Tinjauan Farmakologi.....................................................................9
2.2.3 Tinjauan Farmakokinetik................................................................9
2.3 Multikomponen Kristal..............................................................................9
2.3.1 Definisi Multikomponen Kristal.....................................................9
2.3.2 Solvat............................................................................................11
2.3.3 Garam............................................................................................11
2.3.4 Ko Kristal......................................................................................11

ix
 2.3.5 Metode Pembuatan Multikomponen Kristal.................................12
2.4 Coformer..................................................................................................15
2.5 Karakterisasi Multikomponen Kristal......................................................16
2.6 Kelarutan..................................................................................................27
2.6.1 Defenisi Kelarutan........................................................................27
2.6.2 Hal Yang Mempengaruhi Kelarutan............................................30
2.7 Disolusi....................................................................................................32
2.7.1 Defenisi Diolusi............................................................................32
2.7.2 Faktor Yang Mempengaruhi Disolusi...........................................33
2.7.3 Metoda Pengujian Disolusi...........................................................33
2.8 Kromatografi Cair Kinerja Tingkat Tinggi (KCKT)...............................35
BAB III METODE PENELITIAN.....................................................................38
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian.................................................................38
3.2 Metoda Penelitian...................................................................................38
3.2.1Alat.................................................................................................38
3.2.2 Bahan............................................................................................39
3.3 Prosedur Peneltian..................................................................................39
3.3.1 Pemeriksaan bahan baku...............................................................39
3.3.2 Preparasi Sampel Spray Dried Piperin - Nikotinamida................39
3.3.3 Karakterisasi Kokristal..................................................................40
3.3.4 Optimasi Fase Gerak.....................................................................41
3.3.5 Validasi metode analisis...............................................................41
3.3.6 Penetapan Kadar Piperin...............................................................43
3.3.7 Pengujian Kelarutan......................................................................44
3.3.8 Penetapan Profil Disolusi..............................................................45
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................46
4.1 Hasil.........................................................................................................46
4.1.1 Pemeriksaan Bahan Baku.............................................................46
4.1.2 Karakterisasi Multikomponen Kristal...........................................47
4.1.3 Optimasi Fase Gerak.....................................................................51

x
 4.1.4 Validasi Metode Analisis..............................................................53
4.1.5 Uji Kelarutan................................................................................57
4.1.6 Uji Disolusi..................................................................................58
4.2 Pembahasan..............................................................................................59

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN...............................................................69

5.1 Kesimpulan..............................................................................................69
5.2 Saran........................................................................................................69
DAFTAR PUSTAKA...........................................................................................70
LAMPIRAN..........................................................................................................75

xi
 DAFTAR TABEL

Tabel Hal

1. Daftar Bilangan Gelombang ...........................................................................24

2. Hasil Pemeriksaann Bahan Baku Piperin.........................................................46
3. Hasil Pemeriksaan Bahan Baku Nikotinamida................................................46
4. Hasil Termogram Pada DSC............................................................................47
5. Hasil Intensitas Puncak Pada Difraktogram Sinar-X.......................................48
6. Hasil Perbandingan bilangan gelombang XRD...............................................49
7. Hasil optimasi fase gerak (metanol:aquabidest).............................................. 51
8. Hasil presisi piperin pada hari pertama............................................................53
9. Hasil presisi piperin pada hari kedua ..............................................................54
10. Hasil presisi piperin pada hari ketiga...............................................................54
11. Hasil penetapan recovery baku piperin............................................................55
12. Hasil perolehan AUC seri baku piperin.................................................... ......55
13. Hasil LOD dan LOQ Piperin ..........................................................................56
14. Hasil penetapan kadar ................................................................................. ....57
15. Hasil Uji Kelarutan Piperin, Multikomponen Kristal .....................................57
16. Hasil Uji disolusi piperin dan multikomponen kristal....................................58
17. Hasil pengujian presisi hari pertama................................................................81
18. Hasil pengujian presisi hari kedua............................................................... ....81
19. Hasil pengujian presisi hari ketiga...................................................................81
20. Hasil penetapan kadar multikomponen kristal ................................................81
21. Hasil pengukuran kelarutan........................................................................... ..82
22. Hasil pengujian disolusi piperin.......................................................................83
23. Hasil pengujian disolusi multikomponen kristal..............................................84
24. Perhitungan Pembuatan multikomponen kristal..............................................85
25. Hasil perolehan nilai LOD dan LOQ ............................................................. .86
26. Perhitungan kelarutan piperin ........................................................................ .88
27. Perhitungan kelarutan multikomponen kristal ............................................... .89
28. Perhitungan disolusi piperin........................................................................... .91

xii
29. Perhitungan disolusi piperin............................................................................93
30. Perhitungan disolusi multikomponen kristal...................................................96
31. Perhitungan disolusi multikomponen kristal................................. .................98
32. Hasil penetapan kadar ...................................................................................101

xiii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Hal

1. Struktur Kimia Piperin......................................................................................5

2. Struktur Kimia Nikotinamid.............................................................................8
3. Klasifikasi Multikomponen Kristal.................................................................10
4. Alat Spray Driying..........................................................................................15
5. Instrumen Difraksi Sinar-X.............................................................................18
6. Difraktogram PXRD.......................................................................................20
7. Instrumen DSC................................................................................................21
8. Termogram DSC.............................................................................................22
9. Skema Alat Spektrofotometer Inframerah......................................................24
10. Spektrum Inframerah......................................................................................26
11. Bentuk Kromatogram KCKT.........................................................................35
12. Diagram KCKT...............................................................................................37
13. Overlay Termogram DSC................................................................................47
14. Difraktogram Sinar-X.....................................................................................48
15. Spektrum FTIR................................................................................................49
16. Hasil SEM Piperin Sebagai Zat Aktif.............................................................50
17. Hasil SEM Nikotinamida Sebagai Koforme....................................................50
18 . Hasil SEM Multikomponen Kristal................................................................51
19. Kromatogram piperin - nikotinamida (80:20).................................................52
20. Kromatogram piperin - nikotinamida (75:25).................................................52
21. Kromatogram piperin - nikotinamida (75:25)................................................52
22. Kurva Kalibrasi Piperin..................................................................................56
23. Profil disolusi piperin .....................................................................................58
24. Hasil Pemeriksaan Bahan Baku Piperin dan NIC...........................................76
25. Penimbangan zat aktif dan coformer .............................................................76
26. Preparasi Spray Drying ..................................................................................76
27. FTIR Multikomponen Kristal.........................................................................77

xiv
28. FTIR Nikotinamida.........................................................................................77
29. FTIR Piperin...................................................................................................77
30. Hasil DSC ......................................................................................................79
31. Hasil X-Ray ...................................................................................................80

xv
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Hal

1. Skema Kerja ......................................................................................................75

2. Data Hasil Penelitian .........................................................................................76
3. Contoh Perhitungan........................................................................................85

xvi
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Piperin secara kimia merupakan golongan alkaloid yang ditemukan pada

buah dan akar tumbuhan dari lada hitam (Piper nigrum) yang merupakan family

Piperaceae. Piperin memiliki aktivitas insektisida, antinflamasi, imunomodulator,

antitumor, antidepresan, dan aktifitas anti-apoptosis. Piperin juga terkenal sebagai

raja rempah rempah dunia karena aromanya yang sangat menyengat. Tanaman

piperin ini telah dikenal sejak ribuan tahun yang lalu di India dimana tanaman ini

digunakan sebagai pengobatan tradisional, di daerah China, piperin dimanfaatkan

sebagai pengobatan nyeri (sakit kepala, nyeri otot), rematik, infeksi seperti radang

tenggorokan dan influenza, serta untuk melancarkan sirkulasi darah (Levita et al,

2019).

Piperin memiliki warna kuning yang berbentuk kristal dan merupakan

basa yang sangat lemah, umumnya obat yang bersifat basa lemah atau asam lemah

memiliki kelarutan yang rendah dalam air. Seperti senyawa piperin, senyawa ini

memiliki kelarutan yang praktis tidak larut dalam air, namun mudah larut dalam

alkohol dan eter (Stojanovic et al, 2019). Berdasarkan hal tersebut, digunakanlah

piperin sebagai zat aktif, dan dilakukan upaya untuk perbaikan kelarutan dari

piperin. Berbagai usaha untuk meningkatkan kelarutan telah dilakukan. Antara

lain pembentukan multikomponen kristal, dispersi padat, pembentukan dan

komplek inklusi nanopartikel (Hairunnisa et al, 2019)

xvii
 Menurut Choiu dan Riegelman (1971) dispersi padat adalah merupakan

produk solid yang paling sedikit dua komponen yang berbeda. Matriks hidrofilik

yang dapat berupa kristal atau amorf dan obat hidrofobik yang akan terdispersi

secara molekular pada partikel matriks baik amorf ataupun kristal sehingga dapat

meningkatkan kecepatan disolusi. Pembentukan kompleks inklusi adalah

merupakan salah satu metode untuk meningkatkan kelarutan dan disolusi suatu zat

dalam air.

Multikomponen kristal yaitu kristal, garam, pelarut dan hidrat merupakan

salah satu teknik rekayasa kristal dalam pembentukan fase baru dan mengubah

sifat fisikokimia suatu obat. Multikomponen kristal terbentuk ketika blebih dari

satu molekul zat berbeda mengkristal bersama di dalam satu kisi kristal dengan

perbandingan stoikiometrik tertentu. Kelebihan dari metode ini mudah dilakukan

dan dengan biaya yang lebih ekonomis (Hairunnisa et al, 2019).

Pembuatan multikomponen kristal piperin digunakan nikotinamida sebagai

koformer, nikotinamida digunakan sebagai koformer karena digunakan sebagai

pembentuk kokristal yang bersifat inert dan mempunyai toksisitas yang rendah

(Alatas dkk, 2014). Pembentukan multikomponen kristal piperin dapat diprediksi

dari terbentuknya ikatan hidrogen, dimana ikatan hidorgen yang dimaksud adalah

pada piperin terdapat atom O yang berasal dari gugus keton akan berikatan

dengan gugus amida aktif dengan elektronegativitas yang tinggi pada

nikotinamida sehingga diprediksi dapat membentuk ikatan hidrogen (Wadhawa S

et al, 2014).

xviii
1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka didapatkan rumusan masalah sebagai

berikut :

1. Apakah multikomponen kristal piperin-nikotinamida dapat meningkatkan

kelarutan piperin ?

2. Apakah multikomponen kristal pipein-nikotinamida dapat meningkatkan

disolusi piperin ?

1.3 Tujuan Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah diatas, maka tujuan penelitian ini adalah:

1. Untuk mengetahui multikomponen kristal piperin-nikotinamida dapat

meningkatkan kelarutan piperin.

2. Untuk mengetahui multikomponen kristal piperin nikotinamida dapat

meningkatkan disolusi piperin.

1.4 Hipotesa Penelitian

Pada pembuatan multikomponen kristal piperin-nikotinamida dengan

metode spray drying, hasil yang diharapkan adalah :

1. Multikomponen tersebut dapat meningkatkan kelarutan piperin

2. Multikomponen tersebut dapat meningkatkan disolusi piperin

xix
 BAB II

TINJAUN PUSTAKA
2.1 Piperin
2.1.1 Tinjauan Umum

Piperin merupakan senyawa yang menarik karena merupakan biomarker

yang baik bersama dengan komponen bioaktif murni lain atau turunannya atau

dengan molekul obat dan terbukti sebagai senyawa obat yang potensial. Piperin

adalah komponen utama alkaloid yang ada pada buah lada hitam (Piper nigrum)

ditemukan pada famili Piperaceae. Piperin, juga merupakan suatu senyawa

nitrogen beraroma tajam dan pedas, yang merupakan alkaloid utama yang

terkandung di dalam tanaman Piper nigrum dan Piper longum. Jumlah piperin

bervariasi pada tumbuhan yang termasuk dalam keluarga Piperaceae yaitu 2%

hingga 7,4 % dari lada hitam (piper nigrum), kandungan piperin pada lada hitam

dapat dipengaruhi oleh banyak faktor lingkungan termasuk iklim, kondisi

pertumbuhan, dan tempat asal (Georgani et al,2017).

Piperin dengan struktur kimia C17H19NO3 dan memiliki berat molekul

285,34 g/mol. Piperin berupa kristal kuning pucat dengan titik lebur 131,5 ℃.

Piperin adalah basa yang sangat lemah dapat membentuk garam hanya dengan

asam mineral. Umunya obat yang bersifat asam lemah atau basa lemah memiliki

kelarutan yang rendah dalam air. Piperin diketahui praktis tidak larut dalam air

(40mg/L pada suhu 18 ℃) namun mudah larut dalam alkohol (1g/15mL) dan eter

(1g/1,7mL). Obat dengan kelarutan rendah namun memiliki permeabilitas yang

xx
baik digolongkan dalam kelas II menurut Biopharmaceutics Clasification System

(BCS). Piperin memiliki nilai pKa 12,22 (Levita dkk,2019).

Identitas dan karakter fisiko kimia piperin adalah sebagai berikut :

Gambar 1 . Struktur Kimia Piperin

Berat molekul : 285,343

Titik Lebur : 131,5 ℃

Densitas : 1,193 g/cm3

pKa : 12,22

Nama Kimia : 1-(5-[1,3-benzodioxol-5-y1]-1-oxo-2,4-pentadienyl)

piperidine

Rumus Kimia : C17H19NO3

Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam

etanol, eter, asam asetat, dan benzene, sangat mudah

larut dalam kloroform

Pemerian : Kristal berbentuk jarum berwarna kuning pucat

(Farmakope Herbal Indonesia edisi III 2017)

xxi
 2.1.2 Tinjauan Farmakokinetik

Pada penelitian sebelumnya, piperin cepat diserap melalui Gastrointestinal

trac (GIT), hasil penyerapan piperin dapat dideteksi dalam plasma pada 15 menit

setelah diberikan pada tikus sebanyak 97 % piperin. Pemberian piperin secara oral

dengan dosis 170mg/kg pada tikus putih jantan, sebanyak 3 % piperin butuh

waktu eksresi sampai 4 hari sebagai piperin dalam kotoran dan tidak terdeteksi

dalam urin. Piperin tidak mengalami perubahan metabolik selama penyerapan dari

usus tetapi dimetabolisme dengan cepat oleh hati dan jaringan lain dan

konsentrasi plasma maksimum tercapai sekitar 6 jam. Ekskresi utama

metabolisme piperin pada tikus putih jantan melalui urin. Waktu paruh yang

didapatkan sekitar 18,24 jam sekitar 36 % dari piperin yang diberikan oral

dieksresikan sebagai fenol terkonjugasi dalam urin dan 62% sebagai metabolit

methylenedioxyphenyl (Wadhwa S, et all , 2014).

2.1.3 Tinjauan Farmakologi

Kandungan piperin pada lada hitam dapat meningkatkan penyerapan

nutrisi dalam tubuh dan mempunyai aktivitas sebagai antibakteri, antiasma,

antioksidan, antiinflamasi dan antidepresan. Piperin juga merupakan agen

bioenchancer yang dapat meningkatkan ketersediaan hayati dan bioefikasi obat

tertentu yang dikombinasikan dengan piperin dan efektiftas obat yang digunakan

xxii
bersama tanpa aktivitas farmakologisnya sendiri pada dosis terapeutik yang

digunakan (Randhawa et all, 2011).

2.2 Nikotinamida
2.2.1 Tinjauan Umum

Nikotinamida (juga dikenal sebagai niacinamide) adalah vitamin B3 aktif

yang larut dalam air, nikotinamida dianggap sebagai koformer yang lebih baik

karena dikategorikan sebagai GRAS (generally recognized as safe) yang mana

telah diakui aman oleh FDA (food and drug administration). Nikotinamida

(vitamin B3) banyak digunakan senbagai koformer hidrofilik dalam kokristal

karena bersifat inert, dan mempunyai toksisitas yang rendah. Sebagai koformer,

nikotinamida memiliki atom nitrogen di kelompok piridin yang dapat membentuk

heterosinton dengan bahan aktif farmasi antara asam karboksilat-piridin, amida-

piridin, atau interaksi lainnya. Adanya gugus amida juga dapat membentuk atau

heterosinton dengan antar amida-amida atau asam karboksilat-amida (hairunnisa

et all,2019).

Nikotinamida mudah larut dalam air, etanol, dan gliserin. Titik lebur

nikotinamid antara 128℃ -131℃ serta memiliki pH 6,0-7,5. Nikotinamida

diketahui sangat mudah larut dalam air (1g/1ml), larut dalam alkohol (1g/1,5ml)

serta mempunyai nilai pKa = 3,35. Nikotinamida mampu meningkatkan kelarutan

berbagai bahan aktif farmasi melalui pembentukan stacking complex.

Pembentukan stacking complex antara nikotinamida dan bahan aktif farmasi

umunya berkaitan dengan interaksi antara donor dan aseptor elektron. Kompleks

terbentuk antara bagian datar hidrofobik (aromatik) bahan pengompleks dan

xxiii
bahan aktif farmasi. Pembentukan kompleks dapat meningkatkan kelarutan obat

dalam air, nikotinamida tahan dengan pemanasan, udara dan oksidan, tetapi

nikotinamida dihidrolisis oleh asam kuat dan larutan alkalis. Nikotinamida

diasumsikan menjadi vitamin larut air yang paling stabil, stabilitas nikotinamida

tetap konstan selama penyimpanan pada suhu 20℃, 30℃ dan 37℃ selama 12

bulan (JSTFI,2020).

Gambar 2 . Struktur Kimia Nikotinamida

Rumus kimia : C6H6N2O

Nama kimia : pyridine-3-carboxamide

Bobot molekul : 122.12 g/mol

Pemerian : Bubuk putih atau padatan kristal. Tidak berbau dan memiliki

rasa pahit

Kelarutan : Sangat larut dalam air dalam etanol , larut dalam gliserin

pKa : 3.35

Titik lebur : 128-131 °C

pH : 6,0-7,5

Nikotinamida mengandung tidak kurang dari 98,5% dan tidak lebih dari

101,5% dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan.

xxiv
(Farmakope Indonesia edisi V 2014)

2.2.2 Tinjauan Farmakologi

Nikotinamida memberikan sifat antiinflamasi yang paten tanpa adanya

resiko menjadi resisten terhadap bakteri dan efek samping sistemik, dan

merupakan terapi yang berpotensial untuk acne vulgaris. Nikotinamida

mempunyain efek antiinflamasi karena pada nikotinamida terdapat penghambat

yang cukup dari polinuklir (ADP-ribosa) polimerase-1 (PARP-1) yang

mengontrol transkripsi yang dimediasi mediator proinflamasi. Nikotinamida juga

dapat menghambat ekspresi MHC-II. Ketersediaan bioavaibilitas yang cukup,

nikotinamida juga memiliki efek berupa antipireutik, antimikrobial, vasoaktif,

photo-protective, sebostatik dan mencerahkan kulit tergantung pada

konsentrasinya (wohlrab 2014).

2.2.3 Tinjaun Farmakokinetik

Nikotinamida langsung diserap disaluran cerna segera setelah penggunaan

oral dan didistribusikan hampir keseluruh jaringan tubuh. Nikotinamida

dimetabolisme menjadi metabolit N-metilnikotinamida, 2-piridon dan 4-piridon,

terkadang juga dimetabolisme menjadi asam nikotinurea. Sebagian kecil

nikotinamida dieksresikan lewat urine dalam bentuk utuh dan meningkat seiring

dengan kenaikan dosis (Sweetman, 2009).

2.3 Multikomponen Kristal

2.3.1 Definisi Multikomponen Kristal

Multikomponen kristal sendiri dapat di artikan sebaga kristal yang terdiri

dari dua atau lebih komponen. Subkategori yang termasuk dalam kelompok

xxv
multikomponen kristal adalah ko-kristal, garam, solvat. Multikomponen kristal

merupakan teknologi yang banyak digunakan dalam pengembangan pembuatan

kristal baru dari zat aktif farmasi untuk mengatasi masalah fisiko kimia seperti

kelarutan, dan disolusi dalam air tanpa mengubah komposisi kimia komponen

(qiao et all ,2011). Teknik ini terdiri dari setidaknya dua komponen yaitu zat aktif

dan koformer yang berinteraksi dalam kisi kristal melalui ikatan nonkovalen

terutama ikatan hidrogen dan dapat mempertahankan aktivitas instrinsik dari zat

aktif farmasi (chadha et all, 2014).

Sebuah zat padat dapat memiliki dua bentuk, antara lain amorf atau kristal.

Dalam bentuk kristal, sediaan padat dapat dalam bentuk polimorf, hidrat, solvat,

atau kokristal (jasud et all). Adapun hal yang dapat membedakan sistem tersebut

salah satunya dari pemerian salah satu komponen, jika salah satu komponen

berupa cairan pada suhu kamar maka akan membentuk solvat dan jika kedua

komponen merupakan padatan pada suhu kamar maka akan membentuk kokristal

atau garam, tentunya dapat mengubah sifat kimia dari bahan aktif yang digunakan

(berry et all,2017).

Gambar 3 . Klasifikasi Multikomponen Kristal

xxvi
 2.3.2 Solvat

Solvat adalah kristal yang terdiri dari molekul dan kloroform atau

setidaknya dua ion. Solvat terbentuk dengan adanya pelarut organik ataupun

campuran pelarut yang digunakan sebagai pelarut untuk mengkristalkan senyawa.

Perubahan aktivitas termodinamik dari padatan melalui hidrat dapat

mempengaruhi sifat dari obat, seperti kelarutan dan stabilitas yang mana hal

tersebut dapat mempengaruhi bioavaibilitas serta kinerja obat (Dachryanus,2004).

2.3.3 Garam

Garam terbentuk ketika senyawa yang terionisasi dalam larutan

membentuk senyawa yang memiliki ikatan ionik yang kuat dengan ion lawan

yang bermuatan berbeda. Bentuk garam menguntungkan karena meningkatkan

sifat fisiko kimia zat aktif obat dan persiapannya relatif sederhana. Garam

merupakan salah satu bagian dari multikomponen kristal yang mana terdiri dari

dua atau lebih ion yang dikombinasikan menjadi satu bentuk kristal yang

melibatkan adanya proses transfer proton. Pembentukan garam ini terjadi karena

adanya transfer proton dari asam ke basa berdasarkan rule of thumb suatu

komponen disebut garam jika ΔpKa antara komponen senyawa aktif dan koformer

lebih dari tiga (clarke et all, 2012)

2.3.4 Ko Kristal

Kokristal diartikan sebagai kristal kombinasi dengan bahan aktif farmasi

dan pembentuk kokristal dengan sifat fisik dan kimia tertentu dapat terbentuk

melalui interaksi nonkovalen yang lemah, misalnya ikatan hidrogen. Untuk

xxvii
meningkatkan kelarutan obat, koformer (pembentuk kokristal) harus memiliki

kriteria diantaranya : diakui aman dan bersifat inert secara farmakologi, memiliki

kelarutan yang tinggi dalam air, mampu berikatan secara kovalen dengan zat aktif,

secara kimia kompatibel dengan zat aktif obat dan tidak membentuk ikatan

kompleks dengan obat (wicaksono et all, 2017). Kokristal dapat terbentuk melalui

interaksi ikatan hidrogen, ikatan pi, ikatan vander waals. Dibandingkan dengan

senyawa induk, bahan aktif farmasi berupa kokristal dapat meningkatkan sifat

yang berbeda seperti perubahan stabilitas, kelarutan, dan ketersediaan hayati.

Kelebihan metode kokristalisasi ini adalah tidak mempengaruhi aktivitas

farmakologi dari zat aktif tetapi hanya meningkatkan sifat fisika seperti kelarutan,

disolusi dan kompresibilitas. Selain itu, kokristalisasi juga memiliki potensi untuk

diterapkan pada semua zat aktif, termasuk asam, basa dan molekul yang tidak

terionisasi (gozali,2012)

2.3.5 Metode Pembuatan Multikomponen Kristal

Solvent Evaporation

Metoda solvent evaporation secara luas digunakan dalam pembuatan

kokristal di bidang farmasi (sopyan et all,2017). Solvent evaporation merupakan

metoda yang paling konvensional dalam pembuatan multikomponen kristal.

Dalam teknik ini, zat aktif dan koformer dicampur dengan pelarut dan diuapkan.

Selama tahap penguapan larutan molekul, diharapkan terjadi berbagai reaksi

ikatan hidrogen. Molekul harus memiliki kemampuan untuk berinterkasi antar

molekul untuk membentuk kokristal (kotak et all, 2015) .

xxviii
Slurry

Merupakan metoda yang digunakan dengan mencampur zat aktif dengan

koformer, kemudian ditambahkan pelarut yang tepat dalam suhu kamar sehingga

dapat campuran seperti bubur. Campuran itu diuapkan sampai semua pelarut

hilang dari campuran padat. Metoda ini dianggap sebagai metoda sintesis yang

sederhana. Pemilihan proses ini sangat tergantung pada stabilitas fisik dan

senyawa zat aktif yang berbentuk padat yang dilarutkan untuk membentuk larutan

(kharisma, 2017). Mekanisme pembentukan kokristal dengan metoda slurry

didasarkan pada tingkat kejenuhan pelarut oleh kedua komponen dalam pelarut

yang ditandai dengan menurunnya kelarutan zat aktif dengan bertambahnya

konsentrasi ligan koformer dalam larutan (alatas et all, 2020).

Liquid Assisted Grinding ( LAG )

Metoda LAG merupakan perpaduan antara solvent evaporation dengan

solid state grinding. Kedua komponen, yaitu zat aktif dan koformer pembentuk

kokristal dengan perbandingan stoikiometri tertentu dicampurkan ke dalam mortir

kemudian diteteskan sedikit pelarut lalu dilakukan penggerusan selama beberapa

menit. Metoda ini dikembangkan dengan tujuan untuk meningkatkan laju

pembentukan kokristal (jung et all, 2010).

Pelarut yang digunakan pada metoda ini bertindak sebagai katalis sebagai

akibat adanya kecepatan komponen pembentuknya (zat aktif dan koformer)

sehingga pemilihan pelarut sangat penting. Pelarut tunggal sering digunakan

untuk pembentukan kristal multikomponen, tetapi pada khasus tertentu dimana

xxix
kedua komponen pembentuknya memiliki kelarutan berbeda di dalam pelarut

organik, maka pelarut campuran dapat digunakan (alatas et all, 2020).

Solid State Grinding

Solid state grinding atau penggilingan zat padat adalah pencampuran,

penekanan dan penghancuran bahan secara manual dengan mortar dan spatula

atau secara mekanik dengan menggunakan suatu mesin penggiling (trask et all,

2005). Dasar pembentukan dengan metoda penggilingan ini adalah mobilitas

molekul dan saling melengkapi antara molekul komponen multikomponen kristal.

Penggilingan akan merusak kisi, pembentukan fase amorf dan pembentukan

polimorf zat aktif sebagai hasil dari tekanan yang diberikan (trask et all, 2005).

Spray Drying

Spray drying adalah salah satu teknik pemrosesan yang mengubah bahan

baku berupa cairan menjadi partikel kering, halus berupa serbuk atau kristal

dengan pengeringan melalui pendispersian larutan ke udara panas dalam bentuk

droplet sehingga luas permukaan kontak antara cairan dengan udara pengering

dapat meningkat yang mengakibatkan laju pengeringan meningkat. Penerapan dari

teknik ini dapat dilakukan pada preparasi partikel nano dan mikro, pembentukan

partikel dispersi padat dan preparasi partikel bahan aktif obat seperti bentuk,

ukuran, kerapatan, sifat permukaan, porositas, dan kristal (abate, 2012).

Prinsip kerja teknik spray drying adalah dengan menyemprotkan bahan

baku cair terlebih dahulu untuk membuat tetesan kemudian diuapkan melalui

media pengeringan yang dipanaskan, biasanya udara atau dengan kata lain proses

ini melibatkan proses fundamental seperti : atomisasi, tahap pengeringan bahan,

xxx
tahap pengumpulan bubuk kering. Teknik ini mempunyai kelebihan seperti

prosesnya dapat dilakukan dengan cepat dan teknologinya yang cukup baik

sehingga dapat mengontrol ukuran partikel dan melakukan variabel proses dengan

baik dan memiliki rentang yang luas terhadap pasangan obat dan koformer

(mufarida,2016).

Gambar 4. Alat Spray Driying

Spray drying ini, menggunakan atomisasi cairan untuk membentuk

droplet, selanjutnya droplet yang terbentuk dikeringkan menggunakan udara

kering dengan suhu dan tekanan yang tinggi. Dalam pengering semprot, bubur

atau larutan didispersikan ke dalam arus gas panas dalam bentuk kabut atau

tetesan halus (domingos,2015).

2.4 Coformer

Agen kokristalisasi disebut juga koformer CCF (Co-Crystal Former)

untuk upaya peningkatan disolusi dan kelarutan obat harus memiliki sifat sebagai

berikut (Mirza S, 2008), tidak toksik dan inert secara farmakologi, dapat mudah

larut dalam air, mampu berikatan secara non-kovalen, contohnya ikatan hidrogen

dengan obat, mampu meningkatkan kelarutan obat dalam air, kompatibel secara

xxxi
kimia dengan obat, tidak membentuk ikatan kompleks dengan obat. Ikatan

hidrogen yang merupakan interaksi nonkovalen adalah suatu kunci dalam

pembentukan ko-kristal (Sekhon, 2009).

Pemilihan koformer didasarkan pada kemampuan koformer untuk

mebentuk interaksi reversible atau non-kovalen dengan bahan aktif farmasi.

Selain itu baik bahan aktif farmasi maupun koformer harus mengandung donor

dan akseptor ikatan hidrogen (19). Koformer yang akan digunakan harus memilik

syarat seperti tidak toksik, memiliki kepolaran yang lebih baik dibandingkan

dengan zat aktifnya, berupa eksipient farmasi atau obat lain dan dapat berikatan

non kovalen dengan zat aktifnya (Mirza S, 2008) .

2.5 Karakterisasi Multikomponen Kristal

Difraksi Sinar - X

Merupakan metoda untuk mengetahui pengaturan interaksi radiasi

elektromagnetik atom atau molekul yang memberikan efek sebanding dengan

struktur panjang gelombang radiasi. Orientasi acak dari suatu kisi kristal dalam

suatu sampel serbuk menyebabkan sinar-X memendar dalam suatu pola yang

dapat dihasilkan kembali dari intensitas puncak pada sudut (Ɵ), relatif terhadap

sinar yang masuk. Untuk senyawa tertentu, tiap pola difraksi ditandai dari suatu

kisi kristal spesifik. Pola difraksi sinar - X dibuat foto pada plat peka yang

diletakkan di belakang kristal, dengan metoda ini bangun kristal dapat diamati.

Dengan mengembangkan modifikasi lebih lanjut dari prinsip ini yang melibatkan

pemantulan pancaran sinar - X dari bidang atom kristal (Billmayer,Textbook

Science 3rd edition).

xxxii
 Apabila seluruh kristal tidak tersedia atau tidak cocok untuk dianalisis,

serbuk zat juga dapat diamati. Suatu bentuk amorf tidak membentuk puncak

spesifik. Campuran bentuk-bentuk kristal yang berbeda dapat dianalisis dengan

menggunakan intensitas yang dinormalkan pada sudut spesifik, yang unik untuk

tiap bentuk kristal. Analisis kristal tunggal sinar - X memberikan identifikasi dan

uraian yang tepat dari zat kristal. Dimensi satuan sel dan sudut-sudut secara

konklusif memantapkan sistem kisi kristal dan memberikan perbedaan spesifik

antara bentuk-bentuk kristal dari suatu senyawa tertentu. Dengan membandingkan

letak dan intensitas garis pada diagram tersebut terhadap garis pada foto sampel

yang sudah diketahui, maka dapat dilakukan analisa kimia kuantitatif dan

kualitatif. Perubahan pola difraksi merupakan informasi terbentuknya

polimorfisme baru. Perbedaan pola difraksi dinar-X multikomponen terhadap

komponen murninya dapat menunjukkan terbentuknya ko-kristal. Penetapan pola

difraksi sinar X serbuk ko kristal dilakukan dengan menggunakan difraktometer

(Billmayer,Textbook Science 3rd edition) .

Komponen-komponen utama yang terdapat pada difraktometer :

 Tabung Elektron

Tabung elekron merupakan tempat pembentukan elektron yang digunakan

untuk menumbuk plat logam sehingga dapat menghasilkan sinar -X. Selanjutnya

sinar-X inilah yang digunakan untuk menumbuk sampel sehingga dapat

menghasilkan spektrum kontinyu maupun garis.

 Monokromator

xxxiii
 Monokromator merupakan tempat untuk mengubah berkas polikromatik

menjadi berkas monokromatik.

 Filter

Filter merupakan tempat untuk menyaring sebagaian berkas cahaya yang

tidak diinginkan serta dapat menggangu analisis data.

 Sampel holder

Sampel holder merupakan tempat untuk meletakkan sampel yang akan

dianalisis.

 Detektor

Detektor merupakan bagian yang bertugas untuk mendeteksi berkas

cahaya yang terdifraksi pada sudut-sudut tertentu dengan nilai intensitas masing-

masing.

 Software

Software berperan untuk menerjemahkan rekaman pada pita menjadi sudut

2Ɵ yang kemudian diubah menjadi pola difraktogram dengan intensitas masing-

masing.

Gambar 5. Instrumen Difraksi Sinar-X

xxxiv
1. Single crystal X-Ray Diffraction

Teknik ini menampilkan karakterisasi dari bahan padat dan menentukan

hasil kokristal. Metoda ini menampilkan ukuran dan kualitas kokristal yang

terlihat dengan jalan menghalangi radiasi monokromatik X-Ray dengan panjang

gelombang yang dapat dibandingkan dengan jarak antar atom. Interaksi radiasi

dengan elektron pada kristal akan tampil pada detektor X-Ray. Data difraksi akan

terkumpul pada gambar dari kristal dan dianalisis struktur 3 dimensi dari kristal

(Issa,2011)

2. Powder X-Ray Diffraction

Pada teknik ini serbuk sampel diberikan untuk merintangi radiasi

monokromatik X-Ray yang akan terekam oleh detektor. Hasil diperoleh pola yang

terplot (Issa,2011).

Single Crystal X-Ray Diffraction (SXRD) digunakan untuk melihat struktur

kristal pada tingkat atom sedangkan Powder X-Ray Diffraction (PXRD)

digunakan untuk tujuan identifikasi kokristal menunjukkan karakteristik puncak

tajam yang berbeda dari puncak komponen penyusun kokristal. PXRD merupakan

teknik yang kuat untuk menentukan adanya polimorf, modifikasi sifat kristal dan

terbentuknya fasa kristal baru. Jika fase kristal baru yang terbentuk berbeda dari

koformer dan zat aktif, perubahan yang signifikan akan terlihat pada difraktogram

dari komponen dan mengindisikan terbentuknya kokristal (Bagde SA,2016).

Contoh gambar difraktogram dapat dilihat pada gambar 6.

xxxv
 Gambar 6. Difraktogram PXRD

Differential Scanning Calorimetry ( DSC )

Merupakan alat yang digunakan untuk mengukur panas yang hilang atau

peningkatan panas karena perubahan-perubahan fisika dan kimia dalam suatu

sampel sebagai fungsi temperatur. Pengukuran dapat kualitatif maupun kuantitatif

tentang perubahan fisika dan kimia yang melibatkan proses endotermis dan

eksotermis atau perubahan dalam kapasitas panas. Contoh proses endotermis

adalah peleburan, pendidihan, sublimasi penguapan dan peruraian kimia.

Sedangkan yang merupakan proses eksotermis adalah kristalisasi dengan

degradasi. Dsc dapat mengukur titik lebur, waktu kristalisasi dan temperatur,

persentasi kristalinalitas, stabilitas termal dan kemurnian (Billmayer,Textbook

Science 3rd edition) .

xxxvi
 Gambar 7. Instrumen DSC

Pengukuran pada DSC dapat bersifat kualitatif maupun kuantitatif tentang

perubahan fisika dan kimia yang melibatkan proses endotermis dan eksotermis

atau perubahan dalam kapasitas panas. DSC merupakan salah satu metode untuk

menentukan sifat kristal. Analisis termal DSC sangat bermanfaat dalam

melakukan karakterisasi interaksi komponen padat (solid state interaction) antara

dua atau lebih material obat. Analisis DSC digunakan untuk mengevaluasi

perubahan-perubahan sifat termodinamika yang terjadi pada saat materi diberikan

energi panas, seperti rekristalisasi, peleburan, desolvasi dan transformasi fase

padat yang ditunjukkan oleh puncak endotermik atau eksotermik pada termogram

DSC (Zaini E, 2010). Contoh gambar termogram hasil pengukuran menggunakan

DSC dapat dilihat pada gambar 8.

xxxvii
 Gambar 8. Termogram DSC

Spektro Inframerah

Spketor Inframerah bekerja berdasarkan molekul yang menyerap frekuensi

spesifik radiasi elektromagnetik dari struktur sampel. Satu spektrum inframerah

diperoleh oleh radiasi penyinaran dengan jangkauan penuh dari frekuensi ( 4000-

659 cm-1 ). Puncak dari satu spektrum absorpsi tampak sesuai dengan frekuensi

vibrasi dari molekul sampel. Spektroskopi inframerah digunakan untuk

mengetahui frekuensi absorbsi dari molekul yang spesifik atau karakteristik

elektromagnetik dari suatu struktur. Dalam studi ini, spektroskopi inframerah

digunakan untuk mendeteksi kemungkinan adanya kokristal. Pada umumnya

signal mengindikasikan adanya kokristal yang dapat dibandingkan oleh spektro

IR pada bahan murni dengan bahan kokristal karena ikatan hidrogen baru akan

muncul diantara koformer (Issa,2011).

Getaran dari ikatan hidrogen juga dapat ditemukan pada spektrum IR.

Ikatan lemah dan memiliki batas serapan yang khas dan ditemukan pada daerah

xxxviii
frekuensi yang rendah. Analisis menggunakan IR ini dibatasi pada range frekuensi

4000-1300cm-1. Dua molekul senyawa yang berbeda struktur kimianya akan

berbeda pada spektrum IR. Hal ini dapat dimengerti, karena seperti ikatan yang

berbeda, frekuensi vibrasinya tidak sama, serta walaupun ikatan sama, tetapi

mereka berada dalam dua senyawa yang berbeda, frekuensi vibrasinya juga

berbeda ( karena kedua ikatan yang sama tersebut berada dalam lingkungan yang

berbeda ) (Issa,2011).

Daerah IR dibagi menjadi 3 sub daerah , yaitu :

1) Sub daerah IR dekat ( χ = 780 nm - 2,5 µm atau u = 14290 - 4000 cm-1 )

2) Sub daerah IR sedang ( χ = 2,5 µm -15 µm atau u = 4000-666 cm-1 )

3) Sub daerha IR jauh ( χ = 15 µm - 50 µm atau u = 666-200cm-1 )

Biasanya dalam spektrum inframerah terdapat banyak puncak, artinya

puncak yang ada jauh lebih banyak daripada puncak yang diharapkan dari vibrasi

pokok, sehingga perlu diperhatikan letaknya (frekuensinya) bentuk (melebar atau

tajam) dan intensitas (kuat atau lemah). Dengan demikian dapat dibedakan bentuk

spektrum serapan dari zat yang satu dengan yang lainnya. Fourier transform

infrared ( FTIR ) sudah sering digunakan untuk mangkarakterisasi interaksi obat-

koformer di dalam kokristal. Interaksi dari radiasi elektromagnetik dengan

resonasi vibrasi atau rotasi dalam suatu struktur molekul merupakan mekanisme

kerja alat ini. Struktur penggunaan secara kualitatif ini adalah penerapan yang

utama dari spektroskopi inframerah dibidang farmasi (Harmita, 2006).

Menggunakan FTIR, spektrum dari kokristal yang dihasilkan, dimana

adanya perubahan bentuk spektrum serapan dapat dilihat dengan membandingkan

xxxix
spektrum serapan masing - masing dari obat dan koformer dengan kokristal yang

dihasilkan. Hal yang dapat menyebabkan perubahan spektrum serapan adalah

munculnya ikatan hidrogen pada kokristal. Adapun komponen dari

spektrofotometer inframerah terdiri dari lima bagian inti yaitu sumber radiasi,

wadah sampel, monokromator, detektor, dan rekorder, (Harmita, 2006).

Gambar 9. Skema Alat Spektrofotometer Inframerah

Tabel 1. Daftar Bilangan Gelombang Dari Berbagai Jenis Ikatan

(Dachriyanus, 2004)

Bilangan gelombang (cm-1) Jenis Ikatan

3750-3000 Regang 0-H, N-H
3000-2700 Regang -CH3, -CH2, -C-H, C-H
2400-2100 Regang -C≡C-, C≡N
1900-1650 Regang C=O (asam, aldehid, keton,
amida, ester, anhidrida)
1675-1500 Regang C=C ( aromatik dan
alifatik), C=N
1475-1300 Bending C-H
1000-650 Bending C=C, Ar-H

xl
 Pengujian dengan spektroskopi FT-IR tidak memerlukan persiapan sampel

yang rumit dan bisa digunakan dalam berbagai fase baik padat, cair maupun gas.

Metode spektroskopi yang digunakan adalah metode spektroskopi adsorbsi yang

didasarkan atas perbedaan penyerapan radiasi inframerah oleh molekul suatu

materi. Syarat terjadi adsorbsi inframerah adalah kesesuaian frekuensi radiasi

inframerah terhadap frekuensi vibrasional dari sampel dan perubahan momen

dipol molekul selama terjadi vibrasi. Terdapat dua jenis vibrasi yang dapat terjadi

pada molekul yaitu stretching (ulur) dan bending (tekuk). Vibrasi ulur

mengakibatkan terjadi pertambahan atau pengukuran jarak pada ikatan antar dua

atom sepanjang sumbu ikatan. Sedangkan vibrasi tekuk adalah pergerakan atom

yang menyebabkan perubahan sudut ikatan antara dua ikatan (Harmita, 2006).

FTIR digunakan untuk mengkaterisasi interaksi antar molekul antara dua

komponen padat. Pergeseran pita transmisi dalam spektrum FT-IR digunakan

untuk menjelaskan pembentukan interaksi antara dua komponen (garam atau

kokristal). Adanya ikatan hidrogen pada kokristal dapat menyebabkan perubahan

spektrum serapan. Contoh spektrum inframerah dapat dilihat pada gambar 10.

Adanya perubahan bentuk spektrum serapan dapat dilihat dengan membandingkan

spektrum serapan masing-masing dari obat dan koformer dengan kokristal yang

dihasilkan. Hal yang dapat menyebabkan perubahan spektrum serapan adalah

munculnya ikatan hidrogen pada kokristal. Spektroskopi inframerah merupakan

teknik yang penting untuk mengetahui konformasi dari kokristal yang dihasilkan

(40)

xli
 Gambar 10. Spektrum Inframerah

Scanning Electron Microscopy (SEM )

Mikroskop elektron adalah sebuah mikroskop yang dapat melakukan

pembesaran objek sampai 2 juta kali. Mikroskop ini menggunakan elektrostatik

dan elektromagnetik untuk mengontrol pencahayaan dan tampilan gambar serta

memiliki kemampuan pembesaran objek serta resolusi yang jauh lebih bagus

daripada mikroskop cahaya. Mikroskop elektron menggunakan jauh lebih banyak

energi dan radiasi elektromagnetik yang lebih pendek dibandingkan mikroskop

cahaya. SEM adalah sebuah mikroskop elektron yang didesain untuk mengamati

permukaan objek solid secara langsung. SEM memiliki perbesaran 10-3.000.000

kali, depth of field 4-0.4 mm dan resolusi sebesar 1-10nm. Kombinasi dari

perbesaran yang tinggi, depth of field yang besar, resolusi yang baik, kemampuan

untuk mengtahui komposisi dan informasi kristalografi membuat SEM

memfokuskan sinar elektron (electron beam) di permukaan obyek dan mengambil

gambarnya dengan mendeteksi elektron yang muncul dari permukaan obyek

(Issa,2011) .

xlii
 Adapun kelebihan SEM yaitu terdapat sistem vakum pada electron optical

column dan sampel chamber yang bertujuan menghilangkan efek pergerakan

elektron yang tidak beraturan karena adanya molekul gas pada lingkungan

tersebut, yang dapat mengakibatkan penurunan intensitas dan stabilitas.

Meminimalisasi gas yang dapat bereaksi dengan sampel atau mengendap pada

sampel, baik gas yang berasal dari sampel ataupun mikroskop, karena apabila hal

tersebut terjadi, maka akan menurunkan kontras dan membuat gelap detail pada

gambar. Pada SEM gambar dibuat berdasarkan deteksi elektron sekunder atau

backscaterred elektron yang muncul dari permukaan sampel ketika permukaan

sampel tersebut dipindai dengan elektron (Issa,2011).

2.6 Kelarutan
2.6.1 Defenisi Kelarutan

Kelarutan merupakan salah satu sifat fisikokimia senyawa obat yang

penting dalam meramalkan derajat absorpsi obat dalam saluran cerna. Obat-obat

yang mempunyai kelarutan kecil dalam air (poorly soluble drugs) seringkali

menunjukkan bioavailabilitas yang rendah dan kecepatan disolusi bertindak

sebagai tahap penentu (rate limiting step) pada proses absorpsi obat (Gozali,

2012). Kelarutan didefinisikan sebagai kesetimbangan termodinamik bahan

terlarut antara dua fase. Tingkat kelarutan dan disolusi adalah faktor kunci dalam

menentukan efektifitas dan aktivitas obat yang baik. Kelarutan dapat pula

didefenisikan dengan jumlah 1 bagian bobot zat padat atau 1 bagian volume zat

cair larut dalam bagian volume tertentu pelarut, dimana akan larut 1 gram zat

padat atau 1 ml zat cair dalam sejumlah pelarut (Thakuria et all, 2013).

xliii
 Kelarutan merupakan hal yang sangat penting dalam penemuan obat.

Bahan yang tidak larut dapat menjadi suatu masalah baru, dan menyebabkan hal

berikut (Siswandono dkk, 1998), absorbsi dan bioavailabilitas yang kurang setelah

pemberian oral, daya larut yang rendah dibandingkan dosis IV, aktivitas yang

rendah, formulasi yang mahal beban terhadap pasien, karena dosis harus

ditinggikan secara berulang.

Sifat kelarutan pada umumnya berhubungan dengan kelarutan senyawa

dalam media yang berbeda dan bervariasi diantara dua hal yang ekstrim, yaitu

pelarut polar seperti air, dan pelarut nonpolar seperti lemak. Sifat kelarutan pada

umumnya berhubungan dengan aktivitas biologi dari senyawa, dan juga

berhubungan erat dengan proses absorbsi obat. Hal ini penting karena intensitas

aktivitas biologis obat tergantung pada derajat absorbsinya. Kelarutan zat didalam

pelarut dipengaruhi oleh beberapa hal, yaitu pelarut bila suatu zat melarut,

kekuatan tarik-menarik antar molekul dari zat terlarut harus diatasi oleh kekuatan

tarik-menarik antara zat terlarut dengan pelarut. Hal ini menyebabkan pemecahan

kekuatan ikatan antara zat terlarut dan pelarut. Dalam hal interaksi antara pelarut

dan zat terlarut, kelarutan disebabkan adanya gaya antarmolekul. Ahli farmasi

mengatakan bahwa air adalah pelarut yang baik untuk garam, gula, dan senyawa

sejenis, sedangkan minyak mineral dan benzena biasanya merupakan pelarut

untuk zat yang hanya sedikit larut dalam air. Penemuan empiris ini disimpulkan

dalam pernyataan: like dissolves like, interaksi solut dan solvent pada kondisi

tertentu, zat mempunyai kelarutan tertentu pula. (Kerns ,2008)

xliv
 Kemampuan berinteraksi antara solute dan solvent sangat bergantung pada

struktur molekulnya seperti perbandingan gugus polar, dan gugus nonpolar dari

molekul. Semakin panjang rantai nonpolar dari alkohol alifatis, semakin kecil

kelarutannya dalam air. Kelarutan zat terlarut dalam pelarut juga dipengaruhi oleh

polaritas atau momen dipol pelarut. Pelarut-pelarut polar dapat melarutkan

senyawa-senyawa ionik serta senyawa-senyawa polar lainnya. Gugus-gugus yang

dapat meningkatkan kelarutan molekul dalam air disebut gugus hidrofilik

(lipofobik atau polar), sedang gugus yang dapat meningkatkan kelarutan molekul

dalam lemak disebut gugus lipofilik (hidrofobik atau nonpolar), pengaruh pH

bentuk terion suatu zat lebih mudah larut dalam pelarut air dari pada bentuk tak

terion. Kelarutan asam dan basa lemah akan turun dengan naiknya pH sedangkan

asam lemah akan meningkat kelarutannya dengan naiknya pH. Suhu, kelarutan

dalam air biasanya menurun jika suhu larutan dinaikkan (Kerns ,2008).

Gelembung-gelembung kecil yang dibentuk bila air dipanaskan adalah kenyataan

bahwa udara yang terlarut menjadi kurang larut pada suhu-suhu yang lebih kecil.

Hal yang serupa, tidak ada aturan yang umum untuk perubahan suhu terhadap

kelarutan cairan-cairan dan padatan-padatan. Laju disolusi, laju pelarutan dari

obat padat merupakan tahapan yang membatasi atau tahap yang mengontrol laju

absorbsi obat-obat yang mempunyai kelarutan rendah, karena tahapan ini

seringkali merupakan tahapan yang paling lambat dari berbagai tahapan yang ada

dalam pelepasan obat dari bentuk sediaannya dan perjalanannya ke dalam

sirkulasi sistemik (Kerns ,2008).

xlv
 2.6.2 Hal Yang Mempengaruhi Kelarutan

Kelarutan zat di dalam pelarut dipengaruhi oleh beberapa hal, yaitu :

Pelarut

Bila suatu zat melarut, kekuatan tarik-menarik antar molekul dari zat

terlarut harus diatasi oleh kekuatan tarik-menarik antara zat terlarut dengan

pelarut. Hal ini menyebabkan pemecahan kekuatan ikatan antar zat terlarut dan

pelarut untuk mencapai tarik-menarik zat pelarut. Dalam hal interaksi antara

pelarut dan zat terlarut, kelarutan disebabkan adanya gaya antar molekul. Ahli

farmasi mengetahui bahwa air adalah pelarut yang baik untuk garam, gula dan

senyawa sejenis, sedangkan minyak mineral dan benzena biasanya merupakan

pelarut untuk zat yang hanya sedikit larut dalam air. Penemuan empiris ini

disimpulkan dalam pernyataan like dissolves like (Thakuria et all, 2013).

Interaksi Solut Dan Solven

Pada kondisi tertentu, zat mempunyai kelarutan tertentu pula. Kemampuan

berinteraksi antara solut dan solven sangat tergantung pada sifat solut maupun

sivat solven, yang dipengaruhi efek kimia, elektrik maupun struktur. Kelarutan

suatu zat juga bergantung pada struktur molekulnya seperti perbandingan gugus

polar dan gugus non polar dari molekul. Semakin panjang rantai non polar dari

alkohol alifatis, semakin kecil kelarutannya dalam air. Kelarutan zat terlarut

dalam pelarut juga dipengaruhi oleh polaritas atau momen dipol pelarut. Pelarut-

pelarut polar dapat melarutkan senyawa-senyawa ionik serta senyawa-senyawa

polar lainnya. Gugus-gugus yang dapat meningkatkan kelarutan molekul dalam

air disebut gugus hidrofilik (lipofilik atau polar) sedang gugus yang dapat

xlvi
meningkatkan kelarutan molekul dalam lemak disebut gugus lipofilik ( hidrofilik

atau nonpolar ) (Kerns ,2008).

Pengaruh pH

Bentuk terion suatu zat lebih mudah larut dalam pelarut air dari pada

bentuk tak terion. Kelarutan basa lemah akan turun dengan naiknya pH sedangkan

asam lemah akan meningkatkan kelarutannya dengan naiknya pH (Thakuria et all,

2013).

Suhu

Kelarutan gas dalam air biasanya menurun jika suhu larutan dinaikkan.

Gelembung-gelembung kecil yang dibentuk bila air dipanaskan adalah kenyataan

bahwa udara yang terlarut menjadi kurang larut pada suhu - suhu yang lebih kecil.

Hal yang serupa, tidak ada aturan yang umum untuk perubahan suhu terhadap

kelarutan cairan-cairan dan padatan-padatan (Thakuria et all, 2013).

Laju Disolusi

Laju pelarutan dari obat padat merupakan tahapan yang membatasi atau

tahap yang mengontrol laju absorpsi obat-obat yang mempunyai kelarutan rendah,

karena tahapan ini seringkali merupakan tahapan yang paling lambat dari berbagai

tahapan yang ada dalam pelepasan obat dari bentuk sediaanya dan perjalannya ke

dalam sirkulasi sistemik (Kerns, 2008). Kecepatan pelarutan adalah jumlah obat

yang terlarut persatuan luas perwaktu, bila suatu tablet atau sediaan obat lainnya

dimasukkan dalam saluran cerna (saluran gastrointestinal) obat tersebut masuk ke

dalam larutan dari bentuk padatannya (Kerns ,2008).

xlvii
 Kalau tablet tersebut dilapisi polimer, matriks padat juga mengalami

disintegrasi menjadi partikel-partikel yang halus. Disintegrasi, degredasi, dan

disolusi berlangsung secara serentak dengan melepasnya obat dari bentuk dimana

obat tersebut diberikan. Efektivitas dari suatu tablet dalam melepas obatnya untuk

absorbsi sistemik agaknya bergantung pada laju disintegrasi dari bentuk sediaan

dan agregasi dari granul-granul tersebut. Laju disolusi dari obat padat merupakan

tahapan yang membatasi atau tahap yang mengontrol laju bioabsorbsi obat-obat

yang mempunyai kelarutan rendah, karena tahapan yang ada dalam penglepasan

obat dari bentuk sediaanya dan perjalanannya ke dalam sirkulasi sistemik

(Kerns ,2008).

2.7 Disolusi
2.7.1 Defenisi Diolusi

Salah satu parameter kinetik yang dapat digunakan untuk menyatakan

jumlah perpindahan atau perubahan bahan aktif obat dari bentuk padat ke fase

pelarut per satuan waktu adalah disolusi, sehingga disolusi dapat dinyatakan

sebagai suatu proses perubahan satu zat padat menjadi terlarut dalam suatu

pelarut. Tahapan yang dapat menentukan laju absorpsi adalah laju disolusi, maka

faktor apapun yang dapat mempengaruhi laju disolusi akan mempengaruhi laju

absorpsi seperti mempengaruhi onset, intensitas, lama respon, serta merupakan

kontrol bioavailabilitas obat (Ansel, 1989). Laju disolusi merupakan laju di mana

solut dari kristal, serbuk, cairan, atau bentuk lain menjadi molekul terdispersi

dalam pelarut (Sinko,2011).

xlviii
 2.7.2 Faktor Yang Mempengaruhi Disolusi

Faktor - faktor yang mempengaruhi laju disolusi diantaranya adalah,

ukuran partikel solut, semakin kecil ukuran partikel, semakin besar luas

permukaannya maka semakin banyak kontak dengan pelarut sehingga,

meningkatkan laju disolusi. Viskositas pelarut, semakin tinggi viskositas suatu

pelarut, maka laju difusi molekul terlarut dari permukaan partikel ke pertengahan

bulk akan berkurang dan mempengaruhi laju disolusi. Suhu, semakin tinggi suhu

maka dapat meningkatkan energi kinetik pelarut dan molekul terlarut, viskositas

dapat berkurang, dan mempercepat proses difusi sehingga terjadi peningkatan laju

disolusi (Sinko,2011).

Kelarutan zat aktif, pada umumnya zat aktif bentuk garam lebih larut air

dari pada bentuk asam atau basanya. Sehingga di dalam lambung, garam ini akan

terionisasi dan asam yang tidak larut akan mengendap sebagai partikel yang

sangat halus dan basah sehingga mudah diabsorpsi.Uji disolusi dilakukan untuk

menentukan kesesuaian dengan persyaratan disolusi yang tertera dalam masing-

masing monografi untuk sediaan yang digunakan secara oral seperti tablet dan

kapsul, kecuali bila dinyatakan dalam masing-masing monografi (Sinko,2011).

2.7.3 Metoda Pengujian Disolusi

Metoda Keranjang ( basket )

Metoda ini terdiri dari sebuah wadah tertutup yang terbuat dari kaca atau

bahan transparan lain yang inert, suatu motor, suatu batang logam yang di

gerakkan oloh motor dan keranjang bentuk silinder. Wadah tercelup sebagian

didalam suatu tangas air yang sesuai berukuran sedemikian, sehingga dapat

xlix
mempertahankan suhu dalam wadah pada 37℃ ± 0,5℃ selama pengujian

berlangsung dan menjaga agar gerakan air dalam tangas air halus dan tetap.

Wadah disolusi dianjurkan berbentuk silinder dengan dasar setengah bola, tinggi

160 mm hingga 175 mm, diameter dalam 98 mm hingga 106 mm dan kapasitas

nominal 1000 ml. Pada bagian atas wadah dapat digunakan suatu tutup yang pas

untuk mencegah penguapan. Batang logam berada pada posisi sedemikian

sehingga sumbunya tidak lebih dari 2 mm pada tiap titik dari sumbu vertikal

wadah, berputar dengan halus dan tanpa goyangan yang berarti. Batas kecepatan

yang memungkinkan untuk memilih kecepatan dan mempertahankan kecepatan

seperti yang tertera dalam masing - masing monografi dalam batas lebih kurang

4% (Farmakope Indonesia Edisi III).

Metoda Dayung ( paddle )

Metoda dayung terdiri atas suatu dayung yang dilapisi khusus, yang

berfungsi memperkecil turbulensi yang disebabkan oleh pengadukan. Dayung

diikat secara vertikal kesuatu motor yang berputar dengan suatu kecepatan yang

terkendali. Tablet atau kapsul diletakkan dalam labu pelarutan yang beralas bulat

yang juga berfungsi untuk meperkecil turbulensi dari media pelarutan. Alat

ditempatkan dalam suhu pada 37℃ ± 0,5℃.Posisi dan kesejajaran dayung

ditetapkan dalam Farmakope Indonesia. Metoda dayung sangat peka terhadap

kemiringan dayung. Pada beberapa produk obat, kesejajaran dayung yang tidak

tepat secara drastis dapat mempengaruhi hasil pelarutan. Standar kalibrasi

pelarutan yang sama digunakan untuk memeriksa peralatan sebelum uji

dilaksanakan (Farmakope Indonesia Edisi III).

l
2.8 Kromatografi Cair Kinerja Tingkat Tinggi (KCKT)

Kromatografi merupakan teknik pemisahan fisik campuran zat-zat kimia

(analit) yang berdasarkan pada perbedaan saat mereka berimigrasi malalui kolom

dengan kecepatan berbeda dan terelusi dari sistem dalam waktu yang berbeda

dimana masing-masing komponen campuran yang terpisah pada fase diam

(stasionary phase) dibawah pengaruh fase gerak (mobile phase), fase gerak dapat

berupa gas atau zat cair dan fasa diam dapat berupa zat cair atau zat padat

(Ghika,2015). Analisa KCKT digunakan untuk kemurnian, uji identitas dan

penetapan kadar dibidang farmasi. KCKT digunakan untuk analisis senyawa-

senyawa yang tidak mudah menguap (nonvolatile). Senyawa yang dapat dianalisis

dengan metoda KCKT adalah senyawa ion anorganik hingga senyawa organik

makromolekul. Hasil yang diperoleh akan berbentuk suatu kromatogram yang

terdiri atas puncak untuk masing-masing senyawa yang terpisah seperti pada

gambar 11 (Susanti, 2017).

Gambar 11. Bentuk Kromatogram KCKT

li
 Berdasarkan fasenya maka KCKT dibedakan menjadi 2 yaitu

(Ghika,2015) :

1. Fase normal (NP), dimana analit dipartisi antara fase diam polar (misalnya :

silika) dan fase gerak nonpolar (misalnya : heksana, kloroform, atau

diklorometana). Interaksi ikatan dipol-dipol dan hidrogen adalah kontributor

utama, analit nonpolar terelusi dengan cepat, sedangkan analit polar berinteraksi

kuat dengan elusi fase diam kemudian.

2. Fase terbalik (RP), dimana polaritas dibalik, dengan fase diam menjadi kurang

polar dibandingkan fase gerak. Analit kutub tetap berada dalam fase gerak yang

menunjukkan sedikit daya tarik ke arah fase diam dan terlelusi lebih awal. Analit

nonpolar ditahan oleh fase diam melalui kombinasi interaksi, termasuk interaksi

hidrofobik nonspesifik.

Kelebihan KCKT antara lain mudah dalam pelaksanaan, memiliki resolusi

yang baik, kecepatan analisis dan kepekaan yang tinggi, mudah dan tidak

menimbulkan kerusakan bahan yang dianalisis (referensi). Komponen yang

terdapat dalam KCKT adalah solven reservior, pompa, injektor, kolom dan

detektor (Susanti, 2017). Prinsip kerja dari KCKT adalah pelarut dari reservoir

dipompa dengan tekanan yang cukup tinggi ke dalam injektor. Bila sampel

dimasukkan ke dalam injektor maka sampel tersebut akan terbawa oleh pelarut

dan masuk ke dalam kolom tersebut. Komponen yang telah dipisahkan dalam

kolom terus mengalir ke dalam kolom dan detektor kemudian sinyal yang

dihasilkan diteruskan ke recorder/inegrator, kemudian ke luar dalam bentuk

kromatogram atau peak sebagai print out ( Khopkar, 1990).

lii
Gambar 12. Diagram KCKT

liii
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan dari Januari-Juni 2021 di Laboratorium

Teknologi Sediaan Padat Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Laboratorium

Kimia Bahan Alam Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Laboratorium Sentral

Fakultas Farmasi Universitas Andalas, Laboratorium Sentral Sekolah Tinggi Ilmu

Farmasi Padang, Laboratorium Fisika Fakultas MIPA Universitas Negeri Padang,

Laboratorium SEM Departemen Teknik Mesin Institut Teknolgi Semarang.

3.2 Metoda Penelitian

3.2.1 Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain Timbangan Digital

( Shimadzu-AUX 220, Jepang ), hot plate, alat uji disolusi ( SR8 Plus Dissolution

Test Station Hanson Virtual Instrumen, USA ) Differential Scanning Calorimeter

(Shimadzu DSC-60 Plus, Jepang), Spektrofotometer IR ( Thermo Scientic, USA),

difraktometer Rigaku tipe RINT-2500, alat uji kelarutan orbital shaker, alat Uji

disolusi tipe 2, Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ) dengan detektor DAD

UV-VIS ( Shimadzu AUX 220, Jepang), kertas saring Whatmann ukuran pori

0,45 µm, desikator, aluminium foil, spinbar, spuit 1ml dan 5ml, Syringe Filter

Nylon 0,2 Mikron dan alat-alat gelas laboratorium.

liv
 3.2.2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain adalah Piperin

(BOC Science), Nikotinamida (Sigma-aldrich, USA), Methanol Grade HPLC

(Merch,Germany), etanol pro analysis, aquabidest, aquadest ( dwipraga ).

3.3 Prosedur Peneltian

3.3.1 Pemeriksaan bahan baku

a. Pemeriksaan bahan baku piperin

Pemeriksaan bahan baku piperin dilakukan dengan cara yang sesuai

dengan literatur meliputi pemeriksaan organoleptis (warna, bau, bentuk) dan titik

lebur.

b. Pemeriksaan bahan baku nikotinamida

Pemeriksaan bahan baku nikotinamida dilakukan berdasarkan persyaratan

yang tertera pada Farmakope Indonesia edisis VI meliputi : bentuk, bau, warna,

titik lebur.

3.3.2 Preparasi Sampel Spray Drying Piperin - Nikotinamida

Preparasi sampel dilakukukan dengan teknik spray drying dalam larutan

etanol PA dengan perbandingan Piperin dan nikotinamida yaitu 1:1 equimol

(piperin : 2,85 g nikotinamida : 1,22 g). Kecepatan feed dari spray dryer yang

digunakan sebagai pengering diatur pada 2 ml/menit, skala pump 6, suhu inlet 80
o
C dan suhu outlet 100oC dan aspirator diset pada 50 m3/ jam. Hasil serbuk kering

dikumpulkan, disimpan dalam desikator, dilakukan uji kelarutan, uji disolusi dan

dikarakterisasi dengan Analisis Difraksi Sinar-X, Fourier transform infrared

lv
Spectrophotometer ( FTIR ), Differential scanning calorimetry ( DSC ) , Scanning

Electron Microscopy ( SEM )

3.3.3 Karakterisasi Kokristal

1. Analisis Difraksi Sinar-X : analisis difraksi sinar-X sampel dilakukan pada

suatu ruang dengan menggunakan alat tipe difraktormeter rigaku RINT-2500.

Kondisi pengukuran sebagai berikut : target logam cu, filter Kα, voltase 40

kV, arus 40 mA, analisis dilkakuan pada rentang 2 thea 5°-50°. Sampel

ditempatkan dan diratakan pada sampel holder (kaca) dan diratakan. Analisis

dilakukan pada sampel piperin, nikotinamida dan multikomponen krsital

piperin-nikotinamida dengan metode spray drying

2. Analisis Differential Scaning Calorimetry (DSC) : analisis termal sampel

dilakukan dengan menggunakan alat DSC yang dikalibrasi suhunya dengan

indium. Sampel sejumlah 3-5 mg diletakkan pada plat aluminium yang

tertutup. Alat DSC diatur pada rentang suhu 30oC sampai 160 oC dengan

kecepatan pemanasan 10 oC permenit. Analisis dilakukan pada sampel

piperin, nikotinamida, multikomponen kristal piperin-nikotinamida dengan

metode spray drying.

3. Analisis FT IR : sampel diukur dengan Fourier Transform Infrared (FTIR)

yang dilakukan dengan mendispersikan sampel diatas kristal ATR hingga

menutupi semua permukaan. Spektrum serapan direkam dengan FTIR pada

bilangan gelombang 4000-500 cm-1. Analisis dilakukan pada sampel piperin,

nikotinamida dan multikomponen kristal dengan metode spray drying.

lvi
4. Analisis Scanning Electron Microscopy (SEM) : sampel serbuk diletakkan

pada sample holder aluminium dan dilapisi dengan emas dengan ketebalan

10nm. Sampel kemudian diamati pada berbagai perbesaran alat SEM (Jeol

tipe JSM-6360LA, Japan). Voltase diatur pada 20kV dan arus mA.

3.3.4 Optimasi Fase Gerak

Komposisi fase gerak dibuat dengan mencampurkan metanol dan

aquabides. Masing-masing komponen fase gerak disaring melalui membrane filter

(Whtaman) berukuran 0,45µm dengan bantuan pompa vakum, selanjutnya gas di

dalam larutan dihilangkan menggunakan sistem penghilang gas (degesser).

Pencampuran kedua komponen fase gerak dilakukan di dalam instrumen KCKT.

Dalam penentuan profil KCKT dilakukan uji kesesuaian sistem terlebih dahulu.

Percobaan KCKT piperin-nikotinamida dengan teknik :

Kolom : Phenomenek / ODS C184,6 x 150mm

Fase Gerak : Methanol : Aquabides

Laju Alir : 1,0 ml/menit

Volume Injeksi : 20 µL

Run time : 10 menit

3.3.5 Validasi Metode Analisis

A. Uji Selektifitas

Sebanyak 20 µL larutan sampel multikomponen kristal piperin-

nikotinamida yang telah disaring diinjeksikan ke KCKT yang telah diatur pada

lvii
kondisi analisis yang sesuai. Resolusi dihitung dengan memasukkan selisih waktu

retensi dan lebar peak ke dalam rumus perhitungan resolusi.

B. Uji Akurasi

Sebanyak 20 µL larutan piperin 8 µg/mL, 10 µg/mL, 12 µg/mL yang telah

disaring, diinjeksikan ke KCKT yang telah diatur pada kondisi analisis yang

sesuai. Pengujian dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan untuk masing-masing

konsentrasi. Konsentrasi baku piperin dihitung dengan memasukkan nilai AUC

yang diperoleh ke dalam persamaan kurva kalibrasi.

C. Uji Presisi

Sebanyak 20 µL larutan piperin 8 µg/mL, 10 µg/mL, 12 µg/mL yang telah

disaring, diinjeksikan ke KCKT yang telah diatur pada kondisi analisis yang

sesuai. Pengujian dilakukan selama 3 hari dengan masing-masing konsentrasi

dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan. Kemudian dilakukan perhitungan standar

deviasi (SD) dan koefisien variasi (VK) pada masing-masing konsentrasi.

D. Uji Lineritas dan Pembuatan Kurva Kalibrasi

Linearitas ditentukan dari kurva kalibrasi larutan standar piperin. Dari

larutan piperin 100 µg/mL dipipet 400 µL, 600 µL, 800 µL, 1000 µL 1200 µL

masing masing larutan dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan dicukupkan

dengan etanol pro analysis sampai tanda batas. Didapatkan lima konsentrasi

larutan piperin yaitu 4 µg/mL, 6 µg/mL, 8 µg/mL, 10 µg/mL, 12 µg/mL. Masing-

masing larutan yang telah disaring diinjeksikan ke KCKT yang telah diatur pada

kondisi analisis yang sesuai. Pengujian dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan

pada setiap konsentrasi. Persamaan kurva kalibrasi ditetapkan dari hasil analisis

lviii
regresi linear antara konsentrasi tiap seri baku dengan AUC rata-rata yang

diperoleh.

E. Penentuan batas deteksi (Limit of detection/ LOD), batas kuantitasi ( Limit of

Quantitacion)

Limit deteksi dan kuantitasi dapat dihitung dengan menggunakan garis

regresi linear yang diperoleh dari kurva kalibrasi dengan menggunakan rumuas :

Simpangan baku residual dapat dihitung dengan menggunakan rumus :

Keterangan :

SB = Simpangan Baku

BD = Batas Deteksi (LOD)

BK= Batas Kuantitasi

n = banyak pasangan data

3.3.6 Penetapan Kadar Piperin

Penetapan kadar piperin dalam multikomponen kristal piperin-

nikotinamida dilakukan dengan menimbang sampel secara seksama sebanyak 10

mg kemudian dilarutkan dengan etanol pro analysis dalam labu ukur 100 mL.

Sehingga didapatkan konsentrasi 100 µg/mL. Lalu dibuat konsentrasi 10 µg/mL

dari larutan 100 µg/mL, kemudian dicukupkan sampai tanda batas. Larutan

standar piperin disaring dengan penyaring nylon 0,22 µm. Dimasukkan kedalam

lix
tabung sampel lalu dimasukkan kedalam alat KCKT dengan fase gerak metanol :

aquabides (75:25). Analisa dilakukan tiga kali pengulangan.

3.3.7 Pengujian Kelarutan

A. Pembuatan Larutan Standar Piperin

Ditimbang seksama 10 mg piperin, kemudian dilarutakan dengan etanol

pro analysis dalam labu ukur 100 mL sehingga didapatkan konsentrasi 100

µg/mL. Larutan disaring dengan penyaring nylon 0,22 µm, setelah penyaringan

sampel dianalisa dengan KCKT menggunakan fase gerak metanol:aquabides

(75:25). Analisa dilakukan dengan tiga kali pengulangan.

B. Uji Kelarutan Piperin

Ditimbang seksama piperin 10 mg. Dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 100

ml, ditambahkan aquades 100 ml, ditutup dengan aluminium voil, pengujian

dilakukan dengan menggunakan orbital shaker, kemudian dibiarkan selama 24

jam menggunakan orbital shaker. Hasil pengujiannya kemudian disaring dengan

penyaring Whatmann ukuran 0,45 µm, kemudian dianalisa dengan menggunakan

KCKT dengan fase gerak metanol 75% aquabides 25%. Analisis dilakukan

dengan tiga kali pengulangan, kemudian dicatat area yang diperoleh, dihitung

kadar yang terlarut.

C. Uji Kelarutan Multikomponen Kristal Piperin-Nikotinamida

Ditimbang setara sampel multikomponen kristal 10 mg. Dimasukkan ke

dalam Erlenmeyer 100 ml, ditambahkan aquades 100 ml, ditutup dengan

aluminium voil, pengujian dilakukan dengan menggunakan orbital shaker,

kemudian dibiarkan selama 24 jam menggunakan orbital shaker. Hasil

lx
pengujiannya kemudian disaring dengan penyaring Whatmann ukuran 0,45 µm,

kemudian dianalisa dengan menggunakan KCKT dengan fase gerak metanol 75%

aquabides 25%. Analisis dilakukan dengan tiga kali pengulangan, kemudian

dicatat area yang diperoleh, dihitung kadar yang terlarut.

3.3.8 Penetapan Profil Disolusi

A. Pembuatan Larutan Standar Piperin

Ditimbang seksama 10 mg piperin, kemudian dilarutakan dengan etanol

pro analysis dalam labu ukur 100 mL sehingga didapatkan konsentrasi 100

µg/mL. Larutan disaring dengan penyaring nylon 0,22 µm, setelah penyaringan

sampel dianalisa dengan KCKT menggunakan fase gerak metanol:aquabides

(75:25). Analisa dilakukan dengan tiga kali pengulangan.

B. Uji Disolusi Multikomponen Kristal Piperin-Nikotinamida

Ditimbang setara 10 mg sampel multikomponen kristal, penimbangan

dilakukan untuk tiga kali pengulangan. Penetapan disolusi serbuk piperin dan

multikomponen kristal piperin-nikotinamida dilakukan dengan metode dayung

dengan kecepatan pengadukan 100 rpm. Labu diisi dengan medium air sebanyak

900 ml dengan suhu diatur pada 37 ℃. Setelah suhu tercapai, sampel dimasukkan

ke dalam labu disolusi, kemudian dipipet larutan sebanyak 5 ml yang berada di

dalam labu pada menit ke 5, 10, 15, 30, 45, dan 60. Pada setiap pemitetan larutan

disolusi diganti dengan medium disolusi dengan volume yang sama dan dilakukan

pada suhu yang sama. Untuk masing-masing larutan disolusi dilakukan analisis

dengan menggunakan KCKT, kemudian dicatat luas area yang diperoleh dan

hitung kadar terdisolusinya.

lxi
 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil
4.1.1 Pemeriksaan Bahan Baku

Pemeriksaan bahan baku dilakukan terhadap piperin dan nikotinamida.

Persyaratan yang digunakan berdasarkan pada Farmakope Inonesia edisi VI dan

Faramkope Herbal Indonesia.

Tabel 2 : Hasil Pemeriksaann Bahan Baku Piperin

N Pemeriksaan Persyaratan Pengamatan
O
1 Pemerian :
A. Bentuk Kristal Kristal
B. Bau Khas Khas
C. Warna Kuning Kuning
2 Titik Lebur 131,5℃ 131,6℃

Tabel 3 : Hasil Pemeriksaan Bahan Baku Nikotinamida

NO Pemeriksaan Persyaratan Pengamatan

1 Pemerian :

A. Bentuk Serbuk hablur Serbuk hablur

B. Bau Tidak berbau Tidak berbau

C. Warna Putih Putih

2 Titik Lebur 128-131℃ 130,5℃

lxii
 4.1.2 Karakterisasi Multikomponen Kristal

1. Analisis Differential Scanning Calorimetry (DSC)

Analisis DSC merupakan analisis termal dimana dilakukan pengukuran

perbedaan panas yang dihasilkan dari sampel yang digunakan.

Tabel 4 : Data Termogram Piperin, Nikotinamida, dan Multikomponen Kristal

Sampel Titik Lebur (℃) Entalpi (J/g)

Piperin 131,63 72,92

Nikotinamida 130,69 386,6

Multikomponen Kristal 106,14 72,85

Gambar 13. Overlay Termogram DSC

lxiii
2 . Analisis Difraksi Sinar-X

Analisis difraksi sinar-X merupakan metode untuk karakterisasi interaksi

antara dua komponen zat padat dan untuk menentukan terbentuk atau tidaknya

fase kristalin baru (Emea,1995).

Gambar 14. Difraktogram Sinar-X

Tabel 5. Data intensitas puncak spesifik piperin, nikotinamida, dan

multikomponen kristal pada difraktogram sinar-X

Intensitas Puncak
Posisi 2Ɵ
Piperin Nikotinamida MK

14,49 739,5769 1661,564 2386,058

15,35 657,2859 3265,281 581,1845

19,64 5915,193 2249,171 1933,528

22,51 29067,87 7533,667 2355,743

27,21 356,2802 3966,026 2318,091

28,26 4624,801 1261,99 1916,328

lxiv
3. Analisis Fourier Transform Infrared (FTIR)

Analisis spektrofotometri IR digunakan untuk identifikasi suatu senyawa

dan identifikasi keberadaan gugus fungsi dari senyawa tersebut (Grothe,2016).

Gambar 15. Spektrum FTIR

Tabel 6. Perbandingan bilangan gelombang piperin, nikotinamida dan

multikomponen kristal piperin-nikotinamida.

Gugus Fungsi Rentang Bilangan Gelombang cm-1

bilangan Piperin Nikotinamida Multikomponen
gelombang Kristal
(cm-1)

N-H 3750-3000 - 3690 3149

-
C-H 3000-2700 2941 2941

C=O 1900-1650 1729 1674 1677

lxv
4. Analisis Scanning Electron Microscopy

Gambar 16. Hasil SEM Piperin Sebagai Zat Aktif

Gambar 17. Hasil SEM Nikotinamida Sebagai Koformer

lxvi
 Gambar 18. Hasil SEM Multikomponen Kristal Piperin-Nikotinamida

4.1.3 Optimasi Fase Gerak

Pemilihan Fase Gerak

Tabel 7. Data hasil optimasi fase gerak (metanol:aquabides)

Fase Gerak Waktu Resolusi Lempeng HETP Asimetris

Retensi Teoritis
(menit)
Metanol : aquabidest 5,878 1,516 2098,759 71,471 1,343
(80:20)
Metanol : aquabidest 7,621 2,258 2315,003 64,795 1,281
(75:25)
Metanol : aquabidest 10,517 3,341 2811,216 53,358 1,212
(70:30)

lxvii
Gambar 19. Kromatogram piperin-nikotinamida menggunakan fase gerak
metanol:aquabidest (80:20)

Gambar 20. Kromatogram piperin-nikotinamida menggunakan fase gerak

metanol:aquabides (75:25)

lxviii
Gambar 21. Kromatogram piperin - nikotinamida menggunakan fase gerak
metanol:aquabidest (70:30)

Berdasarkan hasil optimasi yang dirangkum dalam Tabel 7, maka

diperoleh suatu kondisi analisis Piperin di dalam multikomponen kristal Piperin-

Nikotinamida sebagai berikut :

Fase Gerak : Metanol : aquabides (75:25)

Laju Air : 1,0 mL/menit

Volume Injeksi : 20 µL

Waktu Akuisisi : 10 menit

4.1.4 Validasi Metode Analisis

1. Presisi

Tabel 8. Data presisi piperin dengan analisis HPLC menggunakan fase gerak
metanol:aquabides (75:25) pada hari pertama.

Konsentrasi Area rata-rata Simpangan Koefisien

(µg/mL) Deviasi (SD) Variasi ( %)

8 1552192 10304,01 0.663

10 1879059 5836,81 0.310

12 2256847 18137,78 0.804

lxix
 Tabel 9. Data presisi piperin dengan analisis HPLC menggunakan fase gerak
metanol:aquabides (75:25) pada hari kedua.

Konsentrasi Area rata-rata Simpangan Koefisien

(µg/mL) Deviasi (SD) Variasi (%)

8 591883 1667.66 0.281

10 826841 2814.96 0.340

12 89940 482.18 0.536

Tabel 10. Data presisi piperin dengan analisis HPLC menggunakan fase gerak
metanol:aquabides (75:25) pada hari ketiga.

Konsentrasi Area rata-rata Simpangan Koefisien

(µg/mL) Deviasi (SD) Variasi (%)

8 674195 3712.81 0.550

10 1213800 8260.95 0.680

12 1657521 20998.56 1.266

2.Akurasi

Akurasi adalah ukuran kedekatan dari nilai terukur yang diperoleh dari

hasil analisis terhadap nilai yang sebenarnya. Pengujian akurasi dilakukan dengan

menghitung nilai persentase perolehan kembali (recovery) (Nugraheni B, 2017).

lxx
 Tabel 11. Hasil penetapan recovery baku Piperin

Konsentrasi % Recovery

(µg/mL) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

8 99,89 100,508 101,359

10 98,54 99,03 99,17

12 100,750 101,492 99,767

3.Linearitas dan Kurva Kalibrasi

Linearitas merupakan ukuran seberapa baik metode menghasilkan respon

yang linear dengan konsentrasi analit. Validasi linearitas dilakukan dengan

menggunakan larutan piperin dengan konsentrasi 4, 6, 8, 10, 12 µg/mL dalam

etanol.

Tabel 12. Data perolehan AUC seri baku Piperin

AUC

Konsentrasi

µg/mL

Replikasi1 Replikasi 2 Replikasi 3 AUC rata-rata

4 827108 829514 823903 826841

6 1212827 1223137 1199313 1211759

8 1542474 1551106 1562996 1552192

10 1872472 1881106 1883596 1879059

12 2258525 2274088 2237929 2256847

lxxi
 AUC Rata-Rata
2500000

2000000 f(x) = 176365.55 x + 134415

R² = 0.999211618620516
1500000

1000000

500000

0
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Gambar 22. Kurva Kalibrasi Piperin

4. Limit Deteksi (LOD) dan Limit Kuantifikasi (LOQ)

Limit of detection (LOD) merupakan konsentrasi terendah dari suatu

sampel yang masih dapat terdeteksi oleh metode analisis. Limit of quantification

(LOQ) adalah konsentrasi sampel terendah yang masih dapat dideteksi secara

kuantitatif dengan akurasi dan presisi yag dapat diterima.

Tabel 13. Data LOD dan LOQ Piperin

Konsentrasi
Area (y) y1 (y-y1)2
(µg/ml)

4 826841 839879 169989444

6 1211759 1192611 366645904
8 1552192 1545343 46908801
10 1879059 1898075 361608256
12 2256847 2250807 36481600
Σ 196326801
sy 8089
LOD 0,137

LOQ 0,458

lxxii
5. Penetapan Kadar

Penetapan kadar Piperin dalam multikomponen kristal dilakukan dengan

melarutkannya ke dalam pelarut etanol pro analysis dan kemudian dianalisis

dengan menggunakan KCKT pada kondisi optimumnya. Pengujian dilakukan tiga

kali pengulangan. Hasil pengujian penetapan kadar dapat dilihat pada Tabel 14.

Tabel 14. Hasil penetapan kadar piperin dalam multikomponen kristal.

Sampel Kadar rata-rata % Perolehan kembali rata-rata

Multikomponen 9,8566 98,566%

Kristal

4.1.5 Uji Kelarutan

Uji kelarutan Piperin, dan multikomponen kristal dengan metode spray

drying dilakukan dalam air suling bebas CO2 selama 24 jam menggunkan orbital

shaker. Hal ini dikarenakan piperin tidak stabil dalam air karena mengalami reaksi

hidrolisis (Grag C, 2016). Hasil uji kelarutan piperin, dan mulikomponen kristal

dapat dilihat pada Tabel 15.

Tabel 15 : Hasil Uji Kelarutan Piperin, Multikomponen Kristal

lxxiii
 Sampel Standar AUC Rata-Rata Kadar Peningkatan Kelarutan

9737736 372027
Piperin 9737736 358536 0,378.66 -
9737736 375921
13294653 1443321
MK 13294653 1347033 1,057.33 2,792
13294653 1427723

4.1.6 Uji Disolusi

Data uji disolusi Piperin dilakukan untuk membandingkan laju disolusi

Piperin dengan disolusi multikomponen kristal. Uji disolusi masing-masing

sampel dilakukan dengan alat disolution tester dengan medium 900 mL air suling

bebas CO2 selama 60 menit, pada suhu 37 ± 0,5℃, dan kecepatan 50 rpm.

Tabel 16. Hasil uji disolusi Piperin dan multikomponen kristal dalam medium air
suling bebas CO2.

Waktu Rata-Rata % Terdisolusi

(menit)
Piperin Multikomponen
Kristal
0 0 0
5 1,668 3,136
10 2,284 3,424
15 2,564 4,410
30 3,581 4,821
45 4,946 7,929
60 7,497 11,502

lxxiv
 Chart Title
14000
12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
0 10 20 30 40 50 60 70

Piperin Multikomponen Kristal

Gambar 23. Profil disolusi piperin dalam medium air suling bebas CO2
4.2 Pembahasan

Penelitian pembentukan multikomponen kristal ini menggunakan piperin

sebagai zat aktif dan nikotinamida sebagai koformer. Berdasarkan analisa,

pembentukan multikomponrn kristal diprediksi dari ikatan hidrogen karena

piperin memiliki atom O yang berasal dari gugus keton yang mana dapat

berikatan dengan gugus amida dari nikotinamida (Aakeröy, 2007). Penelitian ini

diawali dengan pemeriksaan bahan baku piperin yang dilakukan secara

organoleptis dan didapatkan sesuai dengan literatur yang digunakan yaitu

Farmakope Herbal Indonesia, dimana bentuk Piperin berupa kristal kuning dan

berbau khas.

Pengukuran titik lebur Piperin dilakukan menggunakan melting point.

Dimana dari hasil pengamatan didapatkan nilai titik lebur dari Piperin adalah

131,6℃. Dari literatur titik lebur piperin adalah 131,5℃, menurut Hart (1999)

kristal yang murni memiliki rentang temperatur yang sempit yaitu 1-2℃. Dalam

pengukuran titik lebur kristal Piperin ini tidak memiliki rentang yang terlalu jauh,

perbedaannya tidak sampai 1℃, jadi dapat dikatakan bahwa perbedaan ini masih

lxxv
masuk dalam rentang yang mana bahan baku Piperin memenuhi persyaratan yang

ada di literatur.

Pemeriksaan nikotinamida dengan acuan Farmakope Indonesia edisi V.

Pada pemeriksaan organoleptis, didapatkan hasil pemeriksaan sesuai dengan

literatur. Berbentuk serbuk hablur, tidak berbau, dan berwarna putih. Penentuan

titik lebur dilakukan dengan melting point yang diperoleh titik leburnya 130,5℃

dimana hasil ini masuk dalam rentang yang ada pada literatur, dan secara

keseluruhan bahan baku nikotinamida telah memenuhi syarat sesuai dengan

rujukan literatur yang digunakan.

Pembuatan multikomponen kristal piperin-nikotinamida dilakukan dengan

menggunakan perbandingan 1:1 equimol (piperin : 2,85 g nikotinamida: 1,22 g).

Perbandingan ini merupakan perbandingan yang sering digunakan untuk

pembuatan multikomponen kristal dan menghasilkan peningkatan kelarutan serta

disolusi yang lebih baik.

Spray drying atau pengering semprot adalah suatu metode pengeringan

dengan waktu yang singkat, menghasilkan produk dengan ukuran partikel yang

relatif seragam karena memiliki teknologi yang baik. Pada proses spray drying,

sampel yang digunakan harus dalam bentuk larutan, piperin dan nikotinamida

dilarutkan terlebih dahulu dalam larutan etanol PA (150 ml) proses pelarutannya

di stirrer selama ± 24 jam sehingga homogen sempurna dan menghasilkan serbuk

yang baik saat di spray drying. Pada saat sampel di spray drying ada beberapa

tahapan yang dilewati, untuk tahapan pertama yaitu atomisasi, pada tahapan ini

merupakan proses yang akan memaksa piperin-nikotinamida yang dalam bentuk

lxxvi
cairan untuk berubah menjadi butiran-butiran kecil. Atomisasi adalah proses

pembentukan butiran-butiran lembut seperti kabut, dan karena hal ini pula sering

disebut proses pengabutan, ini merupakan proses yang paling penting untuk

pengeringan semprot.

Atomisasi akan menghasilkan partikel dengan ukuran yang sangat kecil,

sehingga luas permukaan total dari partikel-partikel tersebut akan menjadi sangat

besar. Setelah melewati proses atomisasi, butiran-butiran halus akan terpapar

dengan panas pada ruang pemanas, yang dengan segera hal tersebut terjadi karena

ukurannya yang kecil, sehingga cairan yang dikandungnya akan mengalami

penguapan dan menghasilkan butiran kering yang akan terkumpul sebagai bubuk

kering. Sekitar 80% cairan akan terevaporasi dalam beberapa detik setelah

partikel keluar dari atomiser (foodreview Indonesia). Setelah penyemprotan dan

pengeringan, bubuk kering dikumpulkan dengan alat pengumpul yang berbentuk

corong (cone-shapped apparatus) dibagian bawah ruang pengering. Bubuk

piperin-nikotinamida dikumpulkan, kemudian disiapkan untuk proses

karakterisasi dan proses pengujian kelarutan, disolusi.

Setelah multikomponen kristal didapatkan, dilakukan karakterisasi

menggunakan Difraksi Sinar-X, Fourier transform infrared Spectrophotometer

(FTIR), Differential scanning calorimetry (DSC), Scanning Electron Microscopy

(SEM) dengan tujuan untuk mengetahui apakah multkikomponen kristal terbentuk

atau tidak, serta pengujian kelarutan dan uji disolusi yang di analisa menggunakan

Kromatografi Cair Kinerja Tingkat Tinggi (KCKT) untuk mengetahui apakah

terjadi peningkatan kelarutan dan peningkatan kadar terdisolusinya.

lxxvii
 Pada analisis DSC, analisis ini digunakan untuk mengetahui perubahan

sifat termodinamika yang terjadi saat kristal diberikan energi panas, misalnya saat

rekristalisasi, peleburan, dan tranformasi fase padat. Hasilnya berupa satu puncak

termogram yang berhubungan dengan titik lebur kokristal yang berbeda dengan

titik lebur komponen asal (piperin-nikotinamida) (Zaini E, 2011).

Pada termogram DSC piperin murni dan nikotinamida memperlihatkan

puncak endotermik tunggal dan tajam pada temperatur 131,63℃ dan 130,69℃

yang merupakan titik lebur dari fase kristalin piperin dan nikotinamida.

Berdasarkan pengamatan analisis termal terjadi penurunan titik lebur pada

multikomponen kristal piperin-nikotinamida (106,14℃). Penurunan titik lebur

tersebut terjadi karena adanya interaksi fisika antara piperin dan nikotinamida

(Grothe, 2016), dimana titik lebur lebih rendah mengindikasikan energi kisi

menjadi lebih rendah sehingga dapat meningkatkan kelarutan dan disolusi (Kotak

U, 2015).

Selain penurunan titik lebur, multikomponen kristal piperin-nikotinamida

juga mengalami penurunan nilai entalpi fusi (heat of fusion). Nilai entalpi

menunjukan jumlah energi yang dibutuhkan untuk pelelehan lebih rendah karena

terjadi penurunan derajat kristalinitas senyawa. Nilai entalpi peleburan piperin dan

nikotinamida adalah 72,97 J/g dan 386,6 J/g, sedangkan entalpi peleburan

multikomponen kristal sebesar 72,85 J/g. Penurunan nilai entalpi ini mendukung

hasil dari analisa difraksi sinar-X yang menunjukkan penurunan puncak interfensi

sehingga terjadi penurunan kristalinitas, dimana dengan semakin rendahnya

lxxviii
tingkat kristalinitas suatu zat, maka tingkat energi yang diperlukan untuk merusak

struktur kristal tersebut akan semakin rendah (Abdullah, 2009).

Analisis difraksi sinar-X merupakan metode untuk karakterisasi interaksi

antara dua komponen zat padat dan untuk menentukan terbentuk atau tidaknya

fase kristalin baru (Emea,1995). Hasil analisis berupa difraktogram yang

menunjukkan posisi 2Ɵ terhadap intensitas puncak yang khas untuk setiap

senyawa. Jika terbentuk fase kristalin baru dari hasil interaksi antar dua

komponen, maka akan teramati secara nyata dari difraktogram sinar-X yang

berbeda dari campuran fisika kedua komponen. Pola difraksi sinar-X untuk

piperin, nikotinamida, dan multikomponen kristalnya dapat dilihat pada Gambar

14 serta intensitas puncak spesifik dapat dilihat pada Tabel 5.

Berdasarkan hasil analisis difraktogram sinar-X menunjukkan bahwa

piperin dan nikotinamid berada dalam bentuk kristal. Hal tersebut ditandai dengan

adanya puncak-puncak khas dan tajam seperti terlihat pada Gambar 14. Seperti

yang tertera pada Tabel 5, piperin memiliki puncak difraksi pada 2Ɵ = 19,64°,

22,51° dan 28,26°, sedangkan untuk nikotinamid adalah 15,35°, 22,51°, 27,21°.

Untuk multikomponen kristalnya, tidak menunjukkan adanya pola difraksi puncak

baru, walaupun tidak terbentuk fase kristalin baru, multikomponen kristal

mengalami penurunan intensitas pola difraksi sinar-X dibandingkan dari senyawa

piperin dan nikotinamida. Hal ini menunjukkan campuran kedua senyawa tidak

membentuk fase kristalin baru, melainkan konglomerasi atau gabungan dari kedua

senyawa dalam bentuk padatan atau disebut sebagai campuran eutetik (Gazeyerly,

200). Campuran eutetik merupakan campuran yang terdiri dari dua bahan yang

lxxix
memiliki sifat unik yaitu memiliki suhu leleh lebih rendah dari senyawa murni,

dan dari hasil karakteristik yang telah dilakukan bahwa tidak adanya terbentuk

kristal baru, namun terjadi peningkatan kelarutan dan perbaikan disolusi dan

disebut juga dengan campuran eutetik.

Analisis spektrofotometri IR digunakan untuk identifikasi suatu senyawa

dan identifikasi keberadaan gugus fungsi dari senyawa tersebut (Setia, 2012).

Analisis pada spektroskopi IR dilihat dengan adanya muncul puncak transmitan

baru serta pergeseran pita transmisi dalam spektrum FTIR. Hal ini

mengindikasikan terjadi interaksi senyawa secara kimiawi (Zaini, 2017).

Selanjutnya data bilangan gelombang dari multikomponen kristal dibandingkan

dengan data senyawa standar yaitu piperin dan nikotinamida murni.

Hasil analisis FTIR pada Tabel 6 menunjukkan bilangan gelombang dari

berbagai sampel. Pada nikotinamida terdapat serapan yang menandakan adanya

ikatan antara atom H dengan N pada bilangan gelombang 3690 cm -1 dimana pada

struktur kimia nikotinamida terdapat gugus fungsi amina, pada sampel

multikomponen kristal juga terdapat gugus N-H yaitu pada bilangan gelombang

3362 cm-1 dan 3149 cm-1. Selanjutnya, gugus fungsi C-H senyawa Piperin (2941

cm-1) namun tidak terdapat pada nikotinamida, sedangkan pada multikomponen

kristal (2941 cm-1). Untuk gugus fungsi C=O senyawa piperin (1729 cm-1) dan

nikotinamida (1674 cm-1), sedangkan pada multikomponen kristal (1677 cm-1)

mendekati nilai bilangan gelombang nikotinamida. Berdasarkan hasil analisis

FTIR menunjukkan tidak adanya pergeseran yang signifikan antar sampel hal ini

menunjukkan tidak terjadi interaksi kimia antara piperin dan nikotinamida.

lxxx
Karakterisasi SEM yang dilakukan, digunakan beberapa perbesaran untuk melihat

kondisi zat aktif, coformer dan multikomponn kristal dalam beberap perbesaran.

SEM digunakan untuk mengkarakterisasi morfologi permukaan dari

partikel dengan mudah dan efesien, dan juga untuk melihat bentuk maupun

struktur mikro permukaan dari suatu objek yang tidak bisa dilihat oleh mata atau

mikroskop optik dengan menggunakan mikroskop elektron ( Jores k et al, 2004).

Dari hasil SEM akan terlihat perbandingan morfologi permukaan piperin murni

dengan piperin di dalam multikomponen krisal piperin-nikotinamida. Dan terlihat

perbedaan bentuk senyawa murni piperin dengan hasil SEM piperin-nikotinamida,

dimana pada campuran piperin nikotinamida terdapat bentuk aglomerasi yang

mengindikasikan bahwa gabungan senyawa tersebut mampu memperbaiki

disolusi dari senyawa murni piperin.

Pada penelitian ini menggunakan KCKT fase terbalik dimana fasa

diamnya bersifat lebih nonpolar dari fase geraknya. Fase diam yang digunakan

adalah oktadesilsilan (C18) sedangkan fase gerak yang digunakan adalah

campuran metanol grade KCKT dan aquabides. Oleh karena itu, senyawa yang

bersifat polar akan terelusi lebih dahulu dibandingkan senyawa nonpolar akan

lebih lama di fase diam. Pemilihan fase gerak metanol dan aquabides didasarkan

karena dapat melarutkan piperin dengan baik sehingga dapat mengelusi piperin

menjadi lebih cepat. Pertimbangan lain dalam fase gerak adalah fase gerak harus

murni (tidak terdapat pengotor), tidak bereaksi dengan wadah, sesuai dengan

detektor, dan melarutkan sampel, memudahkan sampel recovery, dan dapat

diperoleh dengan harga murah (reasonable price) (Dachrianus, 2004).

lxxxi
 Setelah fase gerak didapatkan, tahapan selanjutnya yang dilakukan adalah

memvalidasi metode. Tujuan suatu metode analisis harus divalidasi adalah untuk

melakukan verifikasi bahwa parameter-parameter kinerjanya mampu untuk

mengatasi masalah analisis sehingga hasilnya dapat dipercaya dan dipertanggung

jawabkan (Arikalang, 2018). Parameter penilaian dalam validasi metode analisis

adalah akurasi, presisi, selektivitas, limit deteksi, limit kuantifikasi, linearitas, dan

rentang.

Selektifitas metode adalah kemampuan untuk mengukur sampel secara

tepat dengan adanya komponen lain seperti impuritas, produk hasil degradasi,

ataupun komponen matriks. Penentuan selektifitas metode KCKT dinyatakan

sebagai nilai resolusi (Rs), jika nilai lebih dari 1,5 mengartikan terdapat

pemisahan yang baik antar senyawa (Nugraheni, 2017). Hasil uji selektifitas

metode analisis piperin di dalam multikomponen kristal menunjukkan hasil

resolusi sebesar 2,27. Hasil tersebut telah memenuhi syarat yaitu lebih dari 1,5.

Penunjukkan selektivitas menunjukkan bahwa prosedur tidak dipengaruhi dengan

adanya ketidakmurnian atau zat pembawa.

Presisi merupakan ukuran keterulangan metode analisis yang dinyatakan

sebagai simpangan baku relatif (RSD) atau koefisien variasi (KV). Suatu metode

dinyatakan memenuhi syarat jika memberikan nilai KV<2% (Nugraheni, 2017).

Dari hasil pengukuran presisi dalam penelitian ini adalah memenuhi persyaratan,

dikarenakan hasil dari perhitungan nilai koevisien variasinya kecil dari 2%.

Linearitas merupakan ukuran seberapa baik metode menghasilkan respon

yang linear dengan konsentrasi analit. Validasi linearitas dilakukan dengan

lxxxii
menggunakan larutan piperin dengan konsentrasi 4,6,8,10,12 µg/mL dalam etanol.

Linearitas metode dapat menggambarkan ketelitian pengerjaan analisis suatu

metode yang ditunjukkan oleh nilai koefisien determinasi (r 2) > 0,997 (Nugraheni,

2017). Pada hasil pengujian nilai linearitas dari bebarapa konsentrasi yang sudah

dilakukan, didapatkan hasil kurva yang linear dan nilai determinasi yang masuk

dalam persyaratan, yaitu dimana nilai koefisien determinasinya adalah 0,9992

dengan persamaan regresinya yaitu y = 176366x + 134415 yang akan digunakan

untuk perhitungan nilai LOD dan LOQ -nya. Berdasarkan percobaan, didapatkan

nilai LOD nya sebesar 0,137 dan nilai LOQ nya 0,458. Batas deteksi dan

kuantitasi ini dapat dihitung secara statistik dengan menggunakan garis regresi

linear dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada

persamaan garis linear y=a + bx.

Pengujian kelarutan dilakukan untuk melihat apakah terjadi peningkatan

kelarutan piperin dalam multikomponen dibandingkan dengan senyawa murni

piperin. Karena piperin adalah senyawa dengan kelarutan yang praktis tidak larut

dalam air, berdasarkan hal inilah dilakukan modifikasi terhadap piperin dengan

menambahkan koformer tanpa mengubah sifat farmakologi dari piperin dan

kemudian dilakukan pengujian kelarutan untuk melihat apakah terjadi perubahan

terhadap senyawa piperin murni. Dari hasil uji kelarutan diperoleh kenaikan

kelarutan piperin dalam multikomponen sebanyak 2,7 kali lipat. Terjadinya

peningkatan kelaruatn ini didukung oleh data analisis DSC yang menunjukkan

terjadinya penurunan titik lebur yang mengindikasikan energi kisi menjadi lebih

lxxxiii
rendah dan juga terjadi penurunan nilai entalpi fusi yang menujukan penurunan

derajat kristilinitas senyawa.

Kelarutan merupakan hal yang sangat penting karena merupakan faktor

yang menentukan efektifitas dan aktifitas obat yang baik, bahan yang tidak larut

dapat menyebabkan diantaranya absorbsi dan bioavaibilitas yang rendah setelah

pemberian oral, piperin setelah dilakukan modifikasi mengalami peningkatan

kelarutan yang artinya tentunya menjadikan senyawa piperin memiliki efektifitas

dan aktifitas yang lebih baik serta sejalan dengan absorbsi dan bioavaibilitas yang

lebih baik.

Pada pengujian disolusi yang dilakukan dengan metode dayung dengan

melihat kadar terdisolusi piperin dalam multikomponennya pada menit ke

5,10,15,30,45,60 dan dibandingkan hasilnya dengan senyawa murni piperin untuk

melihat kadar disolusinya. Berdasarkan hasil uji disolusi yang dilakukan

menggunakan medium air suling bebas CO2 dapat terlihat bahwa multikomponen

piperin-nikotinamida dapat mengalami peningkatan kadar terlarut piperin

dibandingkan dengan senyawa murni piperin itu sendiri. Rata-rata persen piperin

yang terdisolusi dalam medium air suling bebas CO2 pada menit ke 60 adalah

7,947% dan multikomponen nya senilai 11,502%. Peningkatan kadar terdisolusi

piperin dalam multikomponen ini didukung oleh data-data seperti megecilnya

ukuran partikel, penurunan titik lebur, penurunan intensitas puncak. Hal ini juga

didukung oleh karakterisasi SEM, dimana pada multikomponen piperin-

nikotinamida ukuran partikel yang dihasilkan lebih kecil dibandingkan dengan

senyawa murni piperin, dan semakin kecil ukuran partikel maka semakin besar

lxxxiv
luas permukaannya yang mempengaruhi terhadap disolusi, sehingga terjadi

perbaikan kadar terdisolusi.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa :

1. Pembentukan multikomponen kristal piperin-nikotinamida terbukti dapat

meningkatkan kelarutan sebesar 2,5 kali lipat.

2. Pembentukan multikomponen kristal piperin-nikotinamida terbukti dapat

meningkatkan persen kadar terdisolusi dari piperin 11,502 % pada menit ke-60.

5.2 Saran

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan uji farmakologis

pada hewan uji.

lxxxv
 DAFTAR PUSTAKA

Aakerö y CB, Salmon DJ, Smith MM, and Desper J. Cyanophenyloximes:

Reliable and versatile tools for hydrogen-bond directed supramolecular
synthesis of cocrystals. Cryst Growth Des. 2006 ;6(4):1033-42.

Abate AR. Spray drying technique. International Food Research Journal.

2012;19(4):1297-1306.

Abdullah M dan Khairurrujal K. Review: Karakterisasi Nanomaterial. Jurnal

Nanosains & Nanotenologi. 2009 ;2(1):1-9.

Alatas F, Azizsidiq FA, Sutarna TH, Ratih H dan Soewandhani SN. Perbaikan
Kelarutan Albendazol Melalui Pembentukan Kristal Multikomponen
dengan Asam Maleat. Jurnal Farmasi Galenika. 2020;6(1):114-123.

Alatas F, Soewandhi SN, dan Sasongko L. Kelarutan dan Stabilitas Kimia

Kompleks Didanosin Dengan Nikotinamida atau L-Arganin. J Sains Mater
Indons. 2014;15(2):94-102.

Ansel HC. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi IV. Jakarta, Indonesia:
Universitas Indonesia Press; 1989.

Arikalang TG, Sudewi S, dan Rorong JA. Penentuan Kandungan Total Fenolik
pada Ekstrak Daun Gedi Hijau (Abelmoschus manihot L .) yang Diukur
dengan Spektrofotometer UV-Vis. Farmako Jurnal Ilmiah Farmasi.
2018 ;7(3):14-21.

Bagde SA. Formulation and Evalution of Co-Crystal of Poorly Water Solute

Drug.Int J Pharm Sci Re. 2016;7(12):88-97.

lxxxvi
Berry DJ and Steed JW. Pharmaceutical Cocrystals, Salts and Multicomponent
Systems; Intermolecular Interactions and Property Based Design.
Advanced Drug Delivery Reviews. 2017; 1(17):3-24.

Billmayer and freed A. Textbook of Polymer Science. 3rd Ed. New York : John
Wiley & Sons, Inc., 1984.

Chadha R, Rani D and Goyal P. Novel Cocrystal of Gliklazide: Characterization

and Evaluation. Cryst Eng Comm .2016.1-19.

Clarke HD. Crystal Engineering of Multi-Component Crystal Forms:The

Opportunities and Challenges in design.New York, US:University of South
Florida Scholar Commons; 2010.
Dachryanus. Analisa Struktur Senyawa Oragnik Secara Spektroskopi. Padang,
Indonesia : Multimedia LPTIK; 2004.

Domingos S and Duarte MT. New forms of old drugs: improving without
changing. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2015;67(6):830-846.

Departemen Kesehatan RI. Farmakope Indonesia, Edisi III. Jakarta, Indonesia:

Direktorat Jendral POM; 1995

El-gazayerly ON. Characterization and Evaluation of Tenoxicam Coprecipitates.

Drug Dev Ind Pharm. 2000.;26(9):30-38.

EMEA. Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology. Amsterdam,

Belanda: European Medicines Agency; 1995.

Garg C, Thakur S, Satija S, Mehta M, and Garg M. Stability indicating HPTLC

studies of piperine through method development and analysis. Int J Pharm
Sci Res. 2016;1(7):24-9.

Georgani L, Mohammadi M, Najafpour GD, and Nikzad M. Piperine-The

Bioactive Coumpound of Black Paper: From Isolation to Medicinal
Formulations.Compr Rev Food Sci Food Staf. 2017;16(1):24-40.

Ghika H, Kaklamanos G, Manesiotis P, and Theodoridis G. Chromatography :

High-Performance Liquid Chromatography. 1st Ed. Amsterdam, Belanda:
Elsevier Ltd; 2015.

Gozali D, Bahti HH, dan Soewandhani SN. Isonikotinamid dan Karakterisasinya.

Jurnal Sains Indonesia. 2012;15(2):3-10.

lxxxvii
Grothe E, Meekes H, and Vlieg E. Solvates, Salts, and Cocrystals: A Proposal for
a Feasible Classification System. Crystal Growth and Design. 2016;
(16):3237-3243.

Hairunnisa, Sopyan I, and Gozali D. Cocrystal: Nicotimide as the coformer.

Journal Science Pharmacy Clinical. 2019;10(2):13-22.

Handayani FW, Muhtadi A, Farmasi F, Padjadjaran U, Dara T, dan Manis K.

Review : Teknik Peningkatan Kelarutan Obat. Jurnal Farmaka. 2013;(4):1-
15.

Harmita, Buku Ajar Analisis Fisikokimia. Depok, Indonesia: Departemen Farmasi

FMIPA Universitas Indonesia ; 2006.

Issa dan Nizar. Towards More Efficieents Screening of Pharmaceutical

Cocrystals. London, US: University Collage London; 2011.
Jasud S, Warad S, Rahul S, Jagdale G, and Zinjad S. Cocrystal a Novel Approach
For Bioavailaibility Enhancement. World Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Science. 2009; 2(6):14-20.

Kerns EH, Di L, and Carter G. In Vitro Solubility Assays in Drug discovery.

Current Drug Metabolism. 2008;9(9): 33-42.

Kharisma R.M and Sopyan I. Dissolution Rate Repairing of Simvastatin as A

New Approach in Cocrystallization. Der Pharmacia Lettre. 2017;9(6):20-
25.

Khopkar SM. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta, Indonesia: UI Press; 1990.

Kotak U, Prajapati V, Solanki H, Jani G and Jha P. Co-crystalization technique its

rationale and recent progress. World J Pharm Sci. 2015;4(4):484-508.

Levita J, Simanjuntak N, and Subarnas A. Review : Biopiperin Terinklusi dan

Aktivitas Antiinflamasi Piperin. Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi
Indonesia. 2019;3(1):1-12.

Mirza S. and Miroshnyk I. Co-crystals an emerging approach for enhancing

property of pharmaceutical solids. Dosis. 2008;24(2):90-96.

Mufarida NA dan Dryer S. Panas & Massa. Jember, Indonesia: CV Pustaka

Abadi; 2016.

Nugraheni B, Nafi’ah N, dan Anggoro B. Validasi Metode Analisis Dan

Penurunan Kadar Infus Ciprofloksasin Yang Dipengaruhi Reaksi Oksidasi
Menggunakan Hplc. Jurnal Ilmiah Farmasi. 2017;2(2):218-227.

lxxxviii
Perlovich GL and Manin AN. Design of pharmaceutical cocrystals for drug
solubility improvment. Russian Journal of General Chemistry.
2014;84(2):407-414.

Qiao NL, Schlindwein M, Malek W, Davies N, and Trappitt G. Pharmaceutical

Cocrystals: An Overview. International Journal of Pharmaceutics.
2011.;4(19):1-11.

Randhawa G, Kullar J, and Rajkumar. Bioenchancers from mother nature and

their applicability in modern medicine. International Journal Application
Basic Medical Research. 2011;1(1):5-11.

Sekhon BS. Pharmaceutical co-crystals-a review. ARS Pharmac. 2009;50(3):99-

117

Setiabudi A, Hardian R, dan Muzakir A. Karakterisasi Kokristal. Bandung,

Indonesia: UPI Press; 2012.
Sinko PJ. Martin's Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 6th Ed. New
York, Us: University of Jersey; 2011.

Siswandono dan Soekardjo. Prinsip-prinsip Rancangan Obat. Surabaya,

Indonesia: Universitas Airlangga Press; 1998.

Sopyan I, Fudholi A, Muchtariadi M., and Sari IP. Simvastatin-nicotinamide co-

crystal: design, preparation and preliminary characterization. Topical Journal
of Pharmaceutical. 2017;16(2):297-303.

Stojanovic-Radic Z, Pejcic M, Dimitrijevic M, Aleksisc A, Anil Kumar NV, and

Salehi B. Piperine-A Major Principle of Black Papper: A Review of its
bioactivity and studies. Appl Sci. 2019;9(20):1-29.

Susanti MD. Kromatografi Cair Kinerja Tingkat Tinggi. Padang, Indonesia:

Lembaga Pengembangan Teknologi Informasi dan Komunikasi (LPTIK)
Universitas Andalas; 2017.

Thakuria R., Delori A, Jones W, Lipert MP, Roy L, and Rodríguez-Hornedo N.

Pharmaceutical cocrystals and poorly soluble drugs. International Journal
of Pharmaceutics. 2013;45(1):101-125.

Traks AV, Shan N, Motherwell WDS, Jones W, Feng S, Tan RBH, and Carpenter
KJ. Selective Polymorph Transformation via Solvent-drop Grinding. Chem
Commun. 2005:880-882.

Wadhawa S, Singhal S, and Rawat S. Bioavaibility enhacement by piperin: a

review. Asian J Biomed Pharm Sci. 2014;(4):1-8.

lxxxix
Wang L, Tan B, Zhang H, and Deng Z. Pharmaceutical cocrystals of diflunisal
with nicotinamide or isonicotinamide. Org Process Res Dev. 2013;17(11):8-
13.

Wohlrab J and Kreft D. Niacinamid-Mechanisms of action and its topical use in

dermatology. Skin Pharmacology and Physiology. 2014;7(2):45-59.

Wicaksono Y, Setyawan D, and Siswandolo. Formation of Ketoprofen-malonic

acid cocrystal by solvent evaporation method. Indones J Chem.
2017 ;17(2):6-17.

Zaini E . Peningkatan Laju Pelarutan Trimetoprim Melalui Metode Ko

Kristalisasi. Jurnal Farmasi Indonesia. 2011;5(4):205-212.

Zaini E, Putri VZ, Octavia MD, dan Ismed F. Peningkatan Laju Disolusi Dispersi
Padat Amorf Genistein dengan PVP K-30. J Sains Farm Klin. 2017;4(1):67-
72.
Zaini E, Riska D, Oktavia MD, Ismed F, and Fitriani L. Improving Dissolution
Rate of Piperine by Multicomponent Crystal Formation with Saccharin. Res
J Pharm Technol. 2020;13(4):1928-1932.

Zaini E, Sumirtapura YC, dan Soewandhi SN. Identifikasi interaksi fisika antara
trimetoprim dan sulfametoksazol dengan metode kontak kofler dan reaksi
kristalisai. J Sains Farm Klin. 2010;21(1):32-39.

xc
Lampiran 1 : Skema Kerja

Skema kerja multikomponen kristal piperin - nicotinamida dengan metoda spray

drying :

Bahan Baku

Piperin Nikotinamida

Pemeriksaan Bahan
Baku

Pembuatan multikomponen kristal piperin-nikotinamida

dengan metoda spray drying dengan perbandingan 1:1 ekuimol

Karakterisasi :
-. Analisa Termal (DSC)
-. Analisa Difraksi Sinar-X (XRD)
-. Analisa FTIR (FTIR)
-. Analisa Ukuran Partikel (SEM)
xci
 Optimasi Profil KCKT

Uji kelarutan
Uji disolusi

Lampiran 2 : Data Hasil Penelitian

A B

Gambar 24 . A.(Piperin) B.(Nikotinamida)

A B

Gambar 25. Penimbangan zat aktif dan coformer A(Piperin) B (Nikotinamida)

xcii
 A B

Gambar 26. Preparasi Spray Drying A (Stirrer MK) B (Proses Spray Drying MK)

(Lanjutan)

Gambar 27. FTIR Multikomponen Kristal

xciii
 Gambar 28. FTIR Nikotinamida

Gambar 29. FTIR Piperin

(Lanjutan)

xciv
 B

Gambar 30. A (DSC MK) B (DSC Piperin) C (DSC Nikotinamida)

xcv
 A

xcvi
 C

Gambar 31 . X-Ray A(piperin) B(Nikotinamida) C(MK)

(Lanjutan)

Tabel 17. Data pengujian presisi hari pertama

Konsentrasi
Luas Area
( µg/mL )
1 2 3 Rata - Rata sd Kv (%)
155110
8 1542474 1562996 1552192 10304.01223 0.66383619
6
188110
10 1872474 1883596 1879058.667 5836.814314 0.310624379
6
227408
12 2258525 2237929 2256847.333 18137.78499 0.803677977
8

Tabel 18. Data pengujian presisi hari kedua

Konsentrasi
Luas Area
( µg/mL )
1 2 3 Rata - Rata sd Kv (%)
8 589972 592636 593042 591883.3333 1667.664635 0.281755633
10 827108 829514 823903 826841.6667 2814.965423 0.34044794
12 90070 90345 89407 89940.66667 482.1891054 0.536119114

xcvii
Tabel 19. Data pengujian presisi hari ketiga

Konsentrasi
Luas Area
( µg/mL )
1 2 3 Rata - Rata sd Kv (%)
8 671059 673233 678295 674195.6667 3712.811513 0.55070237
10 1212514 1206258 1222629 1213800.333 8260.956381 0.680586103
12 1670951 1668290 1633323 1657521.333 20998.56501 1.266865444

Tabel 20. Data hsil penetapan kadar multikomponen kristal

Sampel AUC Konsentrasi Kadar penetapan rata-rata

(µg/mL) (mg/mL) kadar(%) perolehan
kembali
186458 9,81 0,0098 98,1

Multikomponen 3 1 98,56

Kristal 187600 9,87 0,0098 98,7

1 7

187896 9,89 0,0098 98,9

9 9

Tabel 21. Data hasil pengukuran kelarutan

Rata -
Konsentrasi Kadar Peningkatan
Sampel Standar AUC Rata
(µg/ml) (mg) Kelarutan
Kadar

9737736 372027 3,820 0,382

Piperin 0,378.66 -

9737736 358536 3,681 0,368

xcviii
 9737736 375921 3,860 0,386

13294653 1443321 10,856 1,085

MK 13294653 1347033 10,132 1,013 1,057.33 2,792

13294653 1427723 10,739 1,074

Tabel 22. Data hasil pengujian disolusi piperin

Rata -
Wakt Konsentra Kadar Kadar
Standar AUC FK % Disolusi Rata %
u si(µg/mL) (mg) Terdisolusi
terdisolusi

13216892 24563 0,185 0,166 0 0,166 1,665

5 13216892 24323 0,184 0,165 0 0,165 1,656 1,668.00

13216892 24738 0,187 0,168 0 0,168 1,683

0,000
10 13216892 33900 0,256 0,230 0,230 2,309 2,284.67
92

xcix
 0,000
13216892 34777 0,263 0,236 0,237 2,376
91
0,000
13216892 31822 0,240 0,216 0,216 2,169
93
0,001
13216892 36129 0,273 0,245 0,245 2,458
28
0,001
15 13216892 39653 0,300 0,270 0,271 2,713 2,564.67
32
0,001
13216892 36969 0,279 0,2511 0,252 2,523
20
0,001
13216892 51548 0,390 0,351 0,352 3,523
36
0,001
30 13216892 54646 0,413 0,371 0,373 3,732 3,581.00
51
0,001
13216892 51029 0,386 0,347 0,348 3,488
40
0,001
13216892 75527 0,548 0,493 0,495 4,957
95
0,002
45 13216892 72371 0,547 0,492 0,494 4,948 4,946.00
07
0,001
13216892 72175 0,546 0,491 0,493 4,933
93
10870 0,002
13216892 0,822 0,739 0,742 7,425
3 75
10971 0,002
60 13216892 0,830 0,747 0,749 7,498 7,497.33
0 74
11081 0,002
13216892 0,838 0,754 0,756 7,569
6 74

Tabel 23. Data hasil pengujian disolusi multikomponen kristal

Rata-Rata
Kada Kadar %
Wakt Konsentras %
Standar AUC r FK Terdisolus Disolus
u i (µg/mL) Terdisolus
(mg) i i
i
1801236
89028 0,494 0,444 0 0,444 3,130
9
1801236
5 89663 0,497 0,447 0 0,447 3,150 3,136
9
1801236
89097 0,494 0,444 0 0,444 3,130
9
1801236 0,0024
10 97287 0,540 0,486 0,488 3,439 3,424
9 6

c
 1801236 0,0024
95650 0,531 0,477 0,480 3,382
9 8
1801236 0,0024
97635 0,542 0,487 0,490 3,452
9 7
1801236 12523 0,0027
0,695 0,625 0,628 4,424
9 7 1
1801236 12386 0,0026
15 0,687 0,618 0,620 4,372 4,410
9 1 6
1801236 12563 0,0027
0,697 0,627 0,630 4,436
9 4 2
1801236 13688 0,0034
0,759 0,683 0,686 4,834
9 6 9
1801236 13700 0,0034
30 0,760 0,684 0,687 4,840 4,821
9 9 4
1801236 13551 0,0035
0,752 0,676 0,680 4,790
9 3 0
1801236 20734 0,0038
1,151 1,035 1,039 7,321
9 0 1
45 7,929
1801236 23347 0,0038
1,296 1,161 1,164 8,202
9 0 1
1801236 23456 0,0037
1,302 1,170 1,173 8,265
9 1 7
1801236 33293 0,0057
1,848 1,663 1,668 11,753
9 2 7
1801236 33807 0,0064
60 1,876 1,689 1,695 11,940 11,502
9 0 7
1801236 30609 0,0065
1,699 1,529 1,535 10,814
9 0 2

Lampiran 3 : Contoh Perhitungan

1. Perhitungan pembuatan multikomponen kristal piperin-nikotinamida dengan

metode spray drying

Tabel 24. Data pembuatan multikomponen kristal dengan metode spray drying

Zat Jumlah zat (mol) Berat (g)

Piperin 0,01 2,85

ci
 Nikotinamida 0,01 1,22

Keterangan :

a. Berat piperin yang ditimbang (g)

Berat zat (g) = Jumlah zat (mol) x Berat molekul zat (g/mol)

= 0,01 mol x 285,343 g/mol

= 2,85 g

b. Berat nikotinamida yang ditimbang

Berat zat (g) = Jumlah zat (mol) x Berat molekul zat (g/mol)

= 0,01 mol x 122,12 g/mol

= 1,22 g

2. Perhitungan validasi metode analisis

Tabel 25. Data perolehan nilai LOD dan LOQ

Konsentrasi
Area (y) y1 (y-y1)2
(µg/ml)

4 826841 839879 169989444

6 1211759 1192611 366645904
8 1552192 1545343 46908801
10 1879059 1898075 361608256
12 2256847 2250807 36481600
Σ 196326801

cii
 sy 8089
LOD 0,137
LOQ 0,458

a. Perhitungan Limit Deteksi LOD) dan Limit Kuantiikasi (LOQ)

Persamaan regresi linear : y = 176366x + 134415

sy = √ Σ( y − y 1) 2
n−2

=
√196326801
3

= 8089

3. sy
LOD =
b

3.8089
=
176366

= 0,137

10. sy
LOQ =
b

10.8089
=
176366

= 0,458

b. Perhitungan persen recovery piperin

Konsentrasi AUC
1872474
10 1881106
1883596

ciii
Contoh Perhitungan :

Diperoleh nilai :

 AUC = 1872474, kemudian dimasukkan ke dala persamaa kurva kalibrasi

: y = 176366x + 134415

1872474 = 176366x + 134415

X = 9,854

konsentrasi terukur
% Recovery = x 100%
konsentrasi sebenarnya

9,854
= x 100%
10

= 98,54%

 AUC = 1881106, kemudian dimasukkan ke dala persamaa kurva

kalibrasi : y = 176366x + 134415

181106 = 176366x + 134415

X = 9,903

konsentrasi terukur
% Recovery = x 100%
konsentrasi sebenarnya

9,903
= x 100%
10

= 99,03%

 AUC = 1883596, kemudian dimasukkan ke dala persamaa kurva kalibrasi :

y = 176366x + 134415

1883596 = 176366x + 134415

X = 9,917

civ
 konsentrasiterukur
% Recovery = x 100%
konsentrasi sebenarny a

9,917
= x 100%
10

= 99,17 %

3. Perhitungan kadar kelarutan piperin dan multikomponen kristal

Tabel 26. Tabel perhitungan kelarutan piperin

Sampel Standar AUC

372027
9737736
Piperin 358536
9737736
375921
9737736

Contoh perhitungan :

 AUC = 372027

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

372027
x 100 µg/mL = 3,820 µg/mL
9737736

* Kadar : Konsentrasi(µg/mL) x 100 mL x FP

: 3,820 µg/mL x 100 mL x 1

: 0,382 mg

 AUC = 358536

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

cv
 358536
x 100 µg/mL = 3,681 µg/mL
9737736

* Kadar : Konsentrasi (µg/mL) x 100 mL x FP

: 3,681µg/mL x 100 mL x 1

: 0,368 mg

 AUC = 375921

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

375921
x 100 µg/mL = 3,860 µg/mL
9737736

* Kadar : Konsentrasi (µg/mL) x 100 mL x FP

: 3,860 µg/mL x 100 mLx 1

: 0,386 mg

Tabel 27. Tabel perhitungan kelarutan multikomponen kristal

Sampel Standar AUC

1443321
13294653
Multikomponen 1347033
13294653
Kristal 1427723
13294653

Contoh Perhitungan :

 AUC = 1443321

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

1443321
x 100 µg/mL= 10,856 µg/mL
13294653

* Kadar : Konsentrasi (µg/mL) x 100 mL x FP

cvi
 : 10,856 µg/mL x 100 mL x 1

: 1,085 mg

 AUC = 1347033

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

1347033
x 100 µg/mL = 10,1321 µg/mL
13294653

* Kadar : Konsentrasi (µg/mL) x 100 mL x FP

: 10,1321 µg/mL x 100 mL x 1

: 1,013 mg

 AUC = 1427723

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

1427723
x 100 µg/mL = 10,739 µg/mL
13294653

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 100 mL x FP

: 10,739 µg/mL x 100 mL x 1

: 1,074 mg

Rata-rata kadar piperin : 0,37866

Rata-rata kadar mk : 1,05733

ratarata kadar kelarutan mk

Peningkatan kelarutan :
ratarata kadar kelarutan zat aktif

1,05733
:
0,37866

: 2,792293

cvii
4. Perhitungan kadar terdisolusi piperin dan multikomponen kristal

Tabel 28. Tabel perhitungan disolusi piperin

Sampel Waktu Standar AUC

24563
13216892
Piperin 24323
5 13216892
24738
13216892

Contoh perhitungan :

 AUC : 24563

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

24563
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,185 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,185 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,1665 mg

* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,1665 + 0

: 0,1665 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

cviii
 0,1665
: x 100%
10

: 1,665 %

 AUC : 24323

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

24323
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,184 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,184 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,1656 mg

* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,1656 + 0

: 0,1656 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,1656
: x 100%
10

: 1,656 %

 AUC : 24738

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

24738
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,187 µg/mL

cix
* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,187 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,1683 mg

* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,1683 + 0

: 0,1683 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,1683
: x 100%
10

: 1,683 %

Tabel 29. Tabel perhitungan disolusi piperin

Sampel Waktu Standar AUC

33900
13216892
Piperin 34777
10 13216892
31822
13216892

Contoh perhitungan :

 AUC : 33900

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

33900
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,256 µg/mL

cx
* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,256 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,230 mg

* FK :

jumlah sampel yan g diambil(mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium( mL)

5 mL
: x 0,1665
900 mL

: 0,000925 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,230 mg + 0,000925

: 0,2309 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,2309
: x 100%
10

: 2,309 %

 AUC : 34777

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

34777
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,263 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,263 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,2367 mg

cxi
* FK :

jumlah sampel yang diambil (mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium (mL)

5 mL
: x 0,165
900 mL

: 0,00092 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,2367 mg + 0,00092

: 0,2376 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,2376
: x 100%
10

: 2,376 %

 AUC : 31822

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

31822
: x 100 µg/mL
13216892

: 0,240 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,240 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,2160 mg

* FK :

jumlah sampel yang diambil (mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium (mL)

cxii
 5 mL
: x 0,168
900 mL

: 0,000933 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,2160 mg + 0,000933

: 0,2169 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,2169
: x 100%
10

: 2,169 %

Tabel 30. Tabel perhitungan disolusi multikomponen kristal

Sampel Waktu Standar AUC

89028
18012369
Multikomponen
5 89663
18012369
Kristal
18012369 89097
Contoh perhitungan :

 AUC : 89028

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

89028
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,494 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,494 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,4446 mg

cxiii
* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,4446 + 0

: 0,4446 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4446
: x 100%
14,2

: 3,130%

 AUC : 89663

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

89663
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,497 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,497 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,4473 mg

* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,4473 + 0

: 0,4473 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4473
: x 100%
14,2

cxiv
 : 3,150%

 AUC : 89097

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

89097
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,494 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,494 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,4446 mg

* FK :0

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,4446 + 0

: 0,4446 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4446
: x 100%
14,2

: 3,130%

Tabel 31. Tabel perhitungan disolusi multikomponen kristal

Sampel Waktu Standar AUC

97287
18012369
Multikomponen
10
Kristal 95650
18012369

cxv
 18012369 97635

Contoh perhitungan :

 AUC : 97287

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

97287
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,540 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,540 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,486 mg

* FK :

jumlah sampel yang diambil (mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium (mL)

5 mL
: x 0,4446
900 mL

: 0,00247 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,486 mg + 0,00247

: 0,4884 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4884
: x 100%
14,2

: 3,439 %

cxvi
 AUC : 95650

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

95650
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,531 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,531 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,4779 mg

* FK :

jumlah sampel yang diambil (mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium (mL)

5 mL
: x 0,4473
900 mL

: 0,00248 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,4779 mg + 0,00248

: 0,4803 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4803
: x 100%
14,2

: 3,382 %

 AUC : 97635

AUC
* Konsentrasi (µg/mL) : x 100 µg/mL
stndar

cxvii
 97635
: x 100 µg/mL
18012369

: 0,542 µg/mL

* Kadar : Konsentrasi µg/mL x 900 mL x FP

: 0,542 µg/mL x 900 mL x 1

: 0,4878 mg

* FK :

jumlah sampel ya ng diambil (mL)

x kadar terdisolusi sebelumnya
volume medium(mL)

5 mL
: x 0,4446
900 mL

: 0,00247 mg

* Kadar Terdisolusi : kadar (mg) + FK

: 0,4878 mg + 0,00247

: 0,4902 mg

kadar terdisolusi
* Persen terdisolusi : x 100%
berat sampel

0,4902
: x 100%
14,2

: 3,452 %

5. Perhitungan penetapan kadar piperin dalam multikomponen kristal

Tabel 32. Data hasil penetapan kadar piperin dalam multikomponen kristal

Sampel AUC Konsentrasi Kadar penetapan rata-rata

(µg/mL) (mg/mL) kadar(%) perolehan

kembali

1864583 9,81 0,00981 98,1

cxviii
 Multikomponen 98,56

Kristal 1876001 9,87 0,00987 98,7

1878969 9,89 0,00989 98,9

Contoh perhitungan :

Gunakan kurva kalibrasi yang didapatkan dari validasi metode

 AUC = 1864583

* konsentrasi ( µg/mL ) : y = 176366x + 134415

1864583 = 176366x + 134415

1864583-134415 = 176366x

1730167 = 176366x

x = 9,81 µg/mL

*kadar (mg) : konsnetrasi (µg/mL) x 100 µg/mL x FP

: 9,81µg/mL x 100µg/mL x 10/1

: 9,81 mg

kadar sampel (mg)

* % penetapan kadar : x 100%
berat sampel( mg)

9,81(mg)
: x 100%
berat sampel( mg)

: 98,1 %

 AUC = 1876001

* konsentrasi ( µg/mL ) : y = 176366x + 134415

1876001 = 176366x + 134415

1876001-134415 = 176366x

cxix
 1741585 = 176366x

x = 9 ,87µg/mL

*kadar (mg) : konsnetrasi (µg/mL) x 100 µg/mL x FP

: 9,81µg/mL x 100µg/mL x 10/1

: 9,87 mg

kadar sampel (mg)

* % penetapan kadar : x 100%
berat sampel( mg)

9,87(mg)
: x 100%
10(mg)

: 98,7 %

 AUC = 1878969

* konsentrasi ( µg/mL ) : y = 176366x + 134415

1878969 = 176366x + 134415

1878969-134415 = 176366x

1744553 = 176366x

x = 9 ,89 µg/mL

*kadar (mg) : konsnetrasi (µg/mL) x 100 µg/mL x FP

: 9,89 µg/mL x 100µg/mL x 10/1

: 9,89 mg

kadar sampel (mg)

* % penetapan kadar : x 100%
berat sampel( mg)

9,89(mg)
: x 100%
10(mg)

: 98,9 %

cxx
 Rata-rata penetapan kadar (%) :

Rata-rata penetapan kadar = ΣPersen penetapan kadar sampel 1,2,3

3
= 98,56 %

cxxi
cxxii