Machine Translated by Google

STRUKTUR PADA eritrosit berinti

HOWARD G. DAVIES, Ph.D.

Dari Unit Penelitian Biofisika Dewan Riset Medis, Laboratorium Fisika Wheatstone, King's College,
London, Inggris

ABSTRAK

Struktur eritrosit berinti katak dan ayam telah diselidiki dengan mikroskop elektron dan dikorelasikan
dengan distribusi hemoglobin dan bahan yang mengandung DNA yang ditentukan oleh penyerapan
hem dan pewarnaan Feulgen dalam lingkup mikro cahaya. Inti dari kedua spesies ditemukan
mengandung hemoglobin yang terus menerus dengan hemoglobin dalam sitoplasma melalui lubang
atau pori-pori di amplop nuklir. Selain itu nukleus eritrosit katak terkadang mengandung invaginasi
tunggal yang dilapisi oleh selubung nukleus. Struktur selubung nukleus dan pori-pori serta organisasi
nukleus mirip dengan yang telah dijelaskan untuk sel somatik lainnya. Eritrosit berbeda dari sel-sel
yang telah dipelajari sebelumnya dalam hal kontinuitas, melalui pori-pori nukleus, zat kimia di bagian
dalam nukleus dan di dalam sitoplasma dapat ditunjukkan secara langsung. Hal ini disebabkan oleh
fakta bahwa sitoplasma eritrosit sederhana, terutama terdiri dari hemoglobin, dan hemoglobin
mudah dikenali melalui penyerapan spesifiknya. Gambar-gambar statis yang diperoleh dengan
mikroskop elektron telah dilengkapi dengan pengamatan dalam fase-kontras perubahan refraksi isi
sel karena difusi hemoglobin dari nukleus ke dalam sitoplasma selama hemolisis.

PENGANTAR

Dalam makalah ini struktur eritrosit dewasa katak
(Rana pipiens) dan ayam (Gallus domesticus) yang
diamati dengan mikroskop elektron telah dikorelasikan
dengan distribusi bahan kimia.
substansi, nukleoprotein dan hemoglobin, diperoleh
dengan mikroskop cahaya.
Data eksperimental tentang struktur eritrosit berinti
dan kemungkinan adanya hemoglobin di dalam nukleus
terbatas dan terkadang menyesatkan. Menurut tinjauan
terbaru oleh Swift (19) telah terbukti secara praktis
tidak mungkin untuk menunjukkan pori-pori dalam
amplop nuklir eritrosit berinti tertentu, sedangkan
mereka secara universal hadir di tempat lain (kecuali
juga (19) inti piknotik dan ledakan normo). Stern dkk.
(17) menemukan bahwa inti eritrosit ayam diisolasi
dengan menggiling di non
media berair mengandung sekitar 19 persen
hemoglobin. Menurut Maximov dan Bloom (12), inti
eritrosit vertebrata rendah tidak mengandung
hemoglobin. Wilkins dan de Carvalho (24) mengamati
di mikroskop cahaya adanya butiran hemoglobin
dalam inti eritroblas manusia; telah disarankan (23)
bahwa partikel terperangkap dari sitoplasma di dalam
nukleus selama rekonstruksi nuklir.
Data yang diperoleh akan menunjukkan bahwa
eritrosit berinti sesuai dengan pola umum. Nukleus
mengandung hemoglobin, dan pori-pori yang mirip
dengan yang dijelaskan pada tipe sel lain telah
ditemukan di selubung nukleus. Sejauh mana pori-pori
dapat menyediakan jalan untuk pertukaran molekul
makro antara nukleus dan sitoplasma sedang dibahas
(7, 22, 19). Apa yang menarik tentang

67l
Machine Translated by Google
eritrosit berinti adalah bahwa, berbeda dengan sel-sel yang
dipelajari sebelumnya, kontinuitas zat kimia antara
sitoplasma dan bagian dalam nukleus, melalui pori-pori
nuklir, dapat ditunjukkan secara langsung.
BAHAN DAN METODE
Pengamatan telah dilakukan pada darah yang diperoleh
dari jantung katak dewasa, dan anak ayam berumur
beberapa hari. Sel diperiksa secara mikroskopis dalam
serum atau dalam larutan garam fisiologis (Ringer atau
Tyrode), setelah fiksasi, dan selama persiapan untuk
mikroskop elektron. Eritrosit juga dipelajari selama hemolisis
dalam larutan fisiologis baik isotonik atau hipotonik, atau
dalam larutan garam yang mengandung zat hemolisis.
Fiksasi dengan OsO, dilakukan dalam al persen larutan
buffer sampai pH 7,5 (14) dan mengandung 45 mg./ml,
sukrosa (8), pada sekitar 0 °C, untuk periode mulai dari 10
menit sampai 24 jam.
Fiksasi juga dilakukan dalam (a) buffer 1 persen OsO4
yang mengandung 0,1 persen CaC12 selama 1 sampai 2
jam diikuti dengan periode 2 jam dalam uranil asetat
sebelum dehidrasi (16); (b) larutan yang sama seperti pada
(a) tetapi tanpa periode dalam uranil asetat; (c) buffer 1
persen OsO4 dengan Tyrode atau Ringer pada konsentrasi
fisiologis.
Setelah fiksasi, sel mengalami dehidrasi dalam peningkatan
konsentrasi etanol, dan tertanam dalam metakrilat (butil 9
bagian, metil 1 bagian). Dalam satu percobaan uranil nitrat
(21) ditambahkan ke metakrilat. Sel juga tertanam dalam
araldite (10).
Bagian diperoleh dengan mikrotom Huxley, 0,5 sampai
1 # dengan ketebalan untuk mikroskop cahaya, sedangkan
untuk mikroskop elektron mereka berwarna perak muda
sampai abu-abu gelap sebelum menyebar dengan uap
xilena; pewarnaan selama 2 sampai 4 jam dengan 2 persen
uranil asetat.
Distribusi massa total di seluruh sel disimpulkan dari
pengamatan dan foto mikrograf dalam lampu hijau
monokromatik dengan tujuan kontras fase neofluor Zeiss.
Mikroskop interferensi Smith Baker dan Zeiss juga
digunakan.
Distribusi hemoglobin disimpulkan dari fotomikrograf
yang diambil mendekati serapan maksimum gugus hem
pada 4047 A. Cahaya ungu diisolasi dari busur merkuri
dengan menggunakan dua filter, satu larutan yodium dalam
karbon tetra klorida dalam 1 cm. panjang jalur, dan filter
Zeiss BGI2 lainnya untuk menghilangkan sisa lampu merah.
Kon
Konsentrasi yodium dipilih dengan bantuan a
spektroskop kecil sehingga mencapai kemurnian spektral
yang diperlukan. Fotomikrografi dilakukan dengan
672 JURNAL CYTOLOGI BIOPIIYSICAL DAN BIOKIMIA " VOLUME 9, 1961
Zeiss apochromat NA 1.3 dan kondensor aplanatik.
Distribusi asam nukleat deoksiribosa (DNA) diperoleh
dari pewarnaan Feulgen. Semua fotomikrograf dibuat pada
X 330 menggunakan mikrofile Kodak pankromatik 35 mm.
film.
Mikrograf elektron dibuat pada mikroskop Siemens
dengan kondensor pemfokusan ganda dan bukaan objektif
sekitar 25 hingga 30 ~. Bagian dipasang di antara
collodion
lapisan
dan lapisan karbon yang diendapkan dengan penguapan
pada bagian tersebut. Perbesaran primer baik 5.000 atau
40.000 digunakan.
Mikrodensitometri dilakukan dengan Walker
(20) mikrodensitometer.
HASIL
A. Eritrosit Katak
1. Sel Utuh." Eritrosit mendekati bentuk ellipsoid yang
sangat pipih. Akibatnya mereka biasanya berorientasi pada
lapisan tipis sehingga menampilkan aspek yang terlihat
pada Gambar 1 dan 2, di mana penampilan mereka terlihat
serupa apakah sel adalah
baru dipasang dalam protein serum atau dalam larutan
Ringer. Pada fase kontras konvensional, sitoplasma yang
mengandung hemoglobin tampak gelap dan dikelilingi oleh
halo terang, sedangkan nukleus, juga berbentuk kurang
lebih elips, tampak sebagai daerah yang relatif terang. Inti
tidak homogen dan mengandung area yang lebih gelap.
Telah diketahui dengan baik bahwa penampakan objek
dalam fase kontras tergantung pada indeks bias dan
ketebalan (atau produk, yang disebut jalur optik) dan juga
pada ukuran. Oleh karena itu indeks bias sel dan komponen
kadang-kadang dapat disimpulkan dari mikroskop fase.
Pentingnya indeks bias terletak pada kenyataan bahwa itu
sebanding dengan konsentrasi zat lain
daripada air di dalam sel (lihat ulasan (6, 9)). Jika perbedaan
jalur optik karena objek pembiasan (atau difraksi) tidak
terlalu besar, objek yang mengandung konsentrasi lebih
tinggi daripada media di mana mereka direndam tampak
gelap (dalam kontras fase Zeiss konvensional) dikelilingi
oleh lingkaran cahaya, sedangkan kebalikannya berlaku
untuk objek dengan konsentrasi yang relatif lebih rendah.
Khususnya, ketika indeks bias medium di sekitarnya sama
dengan indeks bias objek, yang terakhir muncul dengan
kontras nol, yaitu menghilang.
Akibatnya dapat disimpulkan bahwa indeks bias dan
konsentrasi
sitoplasma eritrosit lebih tinggi dari media perendaman,
yang faktanya tentu saja diketahui.
Machine Translated by Google
Konsentrasi zat di seluruh volume inti rata-rata lebih
rendah daripada konsentrasi hemoglobin di sekitarnya.
Detail inti (Gbr. 3 sampai 5) agak lebih jelas setelah
fiksasi dalam OsO4 (buffered) dan terdiri dari benda
yang relatif ringan berbentuk silinder atau elips dengan
diameter kecil kurang dari sekitar 2 #.
Ini kemudian disebut sebagai badan nuklir dan
dipisahkan oleh daerah yang lebih gelap dan lebih
bias yang kadang-kadang terlihat dilintasi oleh benang
cahaya halus. Inti eritrosit katak bukanlah ellipsoid
biasa; badan nukleus sering menonjol keluar (Gbr. 3
dan 4) dan invaginasi nukleus tunggal yang terletak
di salah satu ujung sumbu panjang sering terlihat
pada mikroskop fase. Sifat diskrit dari badan inti dapat
dilihat dengan jelas ketika mereka fokus secara
bersamaan, seperti pada sel pipih (Gbr. 5).
2. Bagian: Mikroskop Cahaya." Bagian, 1 /~ dengan
ketebalan, dari eritrosit yang difiksasi dalam OsO4
dan tertanam dalam metakrilat mengungkapkan (Gbr.
6 dan 7) rincian lebih lanjut dari struktur nuklir.
inti mengandung daerah gelap berbentuk tidak teratur
yang saling berhubungan satu sama lain dan sering
tampak jelas seolah-olah terhubung ke sitoplasma
melalui banyak saluran silinder gelap.
Gambar 7 menunjukkan dengan jelas suatu invaginasi
yang tampaknya merupakan karakteristik dari eritrosit
katak. Di ujung lain bagian ada badan nuklir yang
sedikit menonjol.
Komposisi dan konsentrasi materi di daerah yang
relatif gelap di dalam nukleus terbukti serupa dengan
yang ada di
materi dalam sitoplasma, yaitu hemoglobin, sebagai
berikut. Pada bagian 1~ dalam fase kontras (Gbr. 8a)
daerah gelap nukleus dan sitoplasma menunjukkan
massa yang relatif tinggi per satuan luas. Pengamatan
dalam kontras interferensi menegaskan hal ini. Dalam
medan terang dengan cahaya ungu (X 4047 A)
kontras (Gbr. 8b) mirip dengan yang terlihat pada
mikroskop fase, sedangkan pada panjang gelombang
yang tidak ada penyerapan hemoglobin ()~ 5461 A)
sel menunjukkan kontras nol (penyerapan diabaikan)
ketika dipasang di media indeks bias yang sesuai.
Oleh karena itu kita
dapat menyimpulkan bahwa daerah nukleus gelap
mengandung kelompok hem dan, untuk menjelaskan
konsentrasi zat yang tinggi, ia terkonjugasi dengan
protein, kemungkinan besar dalam bentuk hemoglobin.
Mikrodensitometri dari film negatif (pada X 4047 A)
telah menunjukkan bahwa kepunahan di daerah
Struktur HG DAv~s dalam Eritrosit Bernukleus
hemoglobin inti tidak pernah lebih besar dari pada
daerah sitoplasma yang berdampingan, biasanya
sama, dan kadang-kadang kurang. Data ini konsisten
dengan hipotesis bahwa konsentrasi hemoglobin inti
mirip dengan yang ditemukan di sitoplasma. Nilai
kepunahan yang relatif lebih rendah di daerah nukleus
yang mengandung hemoglobin dapat dijelaskan
dengan mengandaikan bahwa bagian tersebut berisi
bagian badan nuklir yang tidak menyerap di atas dan
di bawah yang diukur.
daerah. Efek ini diperkirakan akan berkurang dengan
ketebalan bagian dan sebenarnya kecil di 1 # bagian.
Setelah pewarnaan Feulgen (Gbr. 8c) daerah yang
relatif terang pada Gambar. 8a dan 8b menjadi relatif
gelap, menunjukkan bahwa badan inti mengandung
DNA.
3. Bagian: Mikroskop Elektron: Kualitas bagian jika
diamati dalam mikro elektron
lingkup agak bervariasi dalam eksperimen yang
berbeda (18 jumlahnya). Tampaknya tidak ada
korelasi yang jelas dengan kondisi fiksasi (a), (b), dan
(c) yang dijelaskan di atas, uranil nitrat juga tidak
tampak menghasilkan peningkatan penyisipan.
Namun, fakta-fakta tertentu dapat ditetapkan.
Pada bagian yang diwarnai dengan uranil asetat,
area inti (Gbr. 9) mengandung daerah dengan daya
hamburan elektron yang relatif tinggi yang tampak
seperti partikel halus. Daerah lain di dalam nukleus
memiliki kontras yang sama dan
tampak sebagai sitoplasma yang mengandung
hemoglobin. Ini mungkin daerah yang menyerap
cahaya ungu. Pada sel yang tidak diwarnai dalam
mikroskop elektron, kontras relatif dari badan inti dan
daerah yang mengandung hemoglobin dibalik, kontras
tersebut serupa dengan yang telah dicatat pada sel
yang tidak diwarnai dalam mikroskop fase. Pengukuran
kasar pendahuluan dalam mikroskop interferensi yang
dibuat oleh Dr. E. Baeckeland menunjukkan bahwa,
sebagai hasil pewarnaan dengan uranil asetat (2
persen selama 4 jam), ketebalan optik badan inti
meningkat dari sekitar 15 persen di bawah sekitar 15
persen di atas daerah yang mengandung hemoglobin.
Sebelum pewarnaan, struktur partikulat badan inti
sulit dibuat
keluar.
Sitoplasma eritrosit katak yang tampaknya matang
tampaknya sebagian besar terdiri dari hemoglobin,
tetapi kadang-kadang kita melihat organel sitoplasma,
misalnya mitokondria.
Penampilan hemoglobin tipis
573
Machine Translated by Google

bagian bervariasi dan mungkin sebagian tergantung pada
ketajaman pisau. Adalah umum untuk menemukannya
terlihat berbintik-bintik dengan area gelap dengan diameter
sekitar 0,05 (Gbr. 9). Bintik-bintik gelap ini sering memiliki
area yang lebih terang yang berdekatan, kadang-kadang
sejajar dengan tepi pisau, dan kadang-kadang terjadi di
zona dengan ukuran yang cukup untuk dapat dipecahkan
dalam mikroskop cahaya. Tumpukan hemoglobin sering
ditemukan di persimpangan badan inti dengan hemoglobin
(Gbr. 9). Patch tidak beraturan sebenarnya dapat dilihat
dengan mikroskop fase-kontras pada permukaan hanya
bagian tebal, dan patch karena itu dapat dianggap artefak
karena sectioning. Bintik-bintik kecil mungkin merupakan
artefak serupa yang dihasilkan oleh pemotongan. Kesulitan
dalam mendapatkan bagian yang bagus tidak mengherankan. yang ada di bagian dalam nukleus melalui lubang dan
Kita dapat menganggap volume yang mengandung
hemoglobin terdiri dari molekul-molekul bulat yang tersusun
rapat, yang tertahan secara tidak sempurna di ruang oleh
metakrilat terpolimerisasi di antara intersticenya. Di bawah
pengaruh ujung pisau, molekul-molekul ini dengan mudah
meluncur, menghasilkan bintik-bintik gelap dengan area
yang lebih jelas yang berdekatan dari mana bahan telah
diambil.
sekitar 170 A lebar. Kejernihan selubung yang dapat dilihat
bervariasi dan, seperti pada tipe sel lainnya, bergantung
pada ketebalan bagian, menjadi paling jelas ketika selubung
inti dipotong secara normal. Faktor tambahan yang mungkin
mengurangi visibilitas selubung nukleus pada bagian yang
menyimpang dari normal adalah densitas tinggi dari
hemoglobin yang disandingkan dan badan nukleus. Pada
Gambar 10, invaginasi nukleus juga dibatasi oleh selubung
nukleus.
Daerah yang mengandung DNA yang mengikat batas
luar nukleus diinterupsi oleh saluran dengan panjang yang
bervariasi yang berakhir di sebuah lubang (Gbr. 9, panah).
Hemoglobin sitoplasma terlihat bersambungan dengan
saluran. Pori-pori lain yang kurang jelas (Gbr. 9) terdapat di
daerah di mana distorsi terjadi karena tumpukan hemoglobin.
Selubung inti tidak membentang di sepanjang lubang, tetapi
berakhir di tepinya, di mana komponen dalam dan luar
selubung kadang-kadang tampak menyatu. Jadi berbeda
dengan invaginasi tunggal, salurannya banyak dan tidak
dibatasi oleh membran atau selubung. Dimensi lubang yang
tampak berkisar dari sekitar 700 A hingga 1000 A.

Pada bagian yang tidak diwarnai (Gbr. 10, 10i)

hemoglobin dapat dilihat dalam invaginasi nukleus,
Selubung yang membatasi nukleus (Gbr. 11) mirip
dengan yang ditemukan pada sel somatik lain dan itu 4. Sel Hemolisis." Mikroskop Cahaya: Selama hemolisis
muncul sebagai dua garis gelap yang dipisahkan oleh spasi eritrosit berinti,

GAMBAR 1

Persiapan segar eritrosit katak dipasang di protein serum. Fase-kontras, X 2.000.

GAMBAR O

Sediaan segar eritfirosit katak dipasang dalam larutan Ringer. Fase-kontras, X 2.000.

FmulCE 3

Eritrosit katak setelah fiksasi dalam OsO4-sukrosa. Fase-kontras, X 2.000.

GAMBAR 4,

Sel yang sama seperti Gambar 3 pada tingkat fokus yang berbeda.

GAMBAR 5

Eritrosit katak setelah fiksasi di OsO4; diratakan. Fase-kontras, X 2.000.

FmURES 6 dan 7

1 /~ bagian tebal eritrosit katak, difiksasi dalam OsO4-sukrosa dan tertanam dalam metakrilat.
Fase-kontras, X 2.000.

674 JURNAL CYTOLOGI BIOFISIK DAN BIOKIMIA " VOLUME 9, 196l

Machine Translated by Google

SAYA[. G. Struktur DAVIES dalam Eritrosit Bernukleus 675

Machine Translated by Google

konsentrasi hemoglobin menurun karena pengenceran dengan air,
bentuk dan ukuran sel tetap kira-kira konstan. Akibatnya indeks bias
hemoglobin, yang awalnya lebih tinggi, menjadi sama dan akhirnya
turun di bawah badan inti.
Perubahan relatif indeks bias ini
menyebabkan serangkaian perubahan menarik pada citra sel dalam
fase kontras. Perubahan ini mendukung pengamatan pada sel utuh
yang menunjukkan bahwa nukleus mengandung hemoglobin yang
konsentrasinya hampir sama dengan itu
lumayan, tetapi dengan penurunan indeks bias hemoglobin
visibilitas, dalam kontras fase, dari badan nuklir berkurang (tahap
II, Gambar. 12a II). Ketika indeks bias hemoglobin intra dan
ekstranuklear sama dengan indeks bias badan inti (stadium III), inti
hampir menghilang (Gbr. 13a). Beberapa variasi sisa intensitas
pada citra sel dapat diperkirakan karena variasi ketebalan dengan
hasil perubahan jalur optik. Badan nuklir, meskipun hampir tidak
terlihat dalam kontras fase, terlihat jelas sebagai daerah yang tidak
menyerap dalam cahaya violet medan terang (Gbr. 13b).

dalam sitoplasma dan tampaknya dalam kontinuitas dengan

itu.
Pengamatan dilakukan pada sel yang dipasang
antara slide dan kaca penutup dalam larutan Ringer fisiologis atau
hipotonik. Dalam larutan ini, sel-sel mengalami hemolisis perlahan
selama beberapa jam dan tidak mengalami perubahan bentuk yang
terjadi ketika agen hemolitik seperti saponin digunakan.
Sel atau kelompok sel yang sama difoto dalam kontras fase dan
cahaya violet medan terang. Lebih mudah untuk membedakan
enam tahap hemolisis yang sesuai dengan penampilan yang berbeda
dalam kontras fase. Sel dalam satu populasi mengalami hemolisis
pada tingkat yang berbeda, sehingga setiap persiapan mengandung
sel pada tahap yang berbeda. Sel individu tidak diikuti melalui semua
tahap hemolisis, tetapi sel tunggal terlihat melewati beberapa tahap
dan pengamatan ini digunakan saat menetapkan sel ke tahap
tertentu.
Dengan hemolisis lebih lanjut, indeks bias hemoglobin turun
tepat di bawah badan inti (stadium IV), yang kemudian tampak
sebagai daerah yang relatif gelap dikelilingi oleh daerah yang
mengandung hemoglobin yang lebih terang (Gbr. 14a IV).
Hemoglobin sitoplasma, bagaimanapun, masih tampak gelap relatif
terhadap media kurang bias yang mengelilinginya. Sel pada tahap
IV dan saya terlihat sangat mirip.
Pembalikan kontras nuklir pada tahap IV ditunjukkan dengan
perbandingan gambar dalam kontras fase dan dalam cahaya violet
medan terang. Daerah gelap dalam fase kontras (Gbr. 14a IV) dapat
diidentifikasi sebagai daerah non-penyerap (cahaya) dalam cahaya
ungu (Gbr. 14b IV) dan karenanya sebagai badan nuklir. Untuk
memudahkan perbandingan, inti dari salah satu sel pada stadium
IV pada Gambar. 14a dan 14b telah diperbesar lebih lanjut pada
Gambar. 15a dan 15b.

Pada tahap selanjutnya (tahap V) kontras di dalam nukleus

meningkat dan badan nukleus terlihat

Dalam sel utuh (tahap I) badan inti dikelilingi oleh hemoglobin
dengan indeks bias yang lebih tinggi dan karenanya tampak relatif
ringan (Gbr. 12a I). Sel muncul dalam kontras yang sama dalam
cahaya ungu di mana badan inti tidak menyerap (Gbr. 12b I). Pada
tahap awal (II, III) hemolisis, penampakan sel dalam cahaya ungu
(Gbr. 12b II, Gbr. 13b) tidak mengubah
gelap dengan latar belakang terang hemoglobin nuklir (Gbr. 14a V).
Kandungan hemoglobin yang berkurang terlihat jelas ketika
penyerapan cahaya ungu dibandingkan pada sel IV dan V pada
Gambar 14b.
Pada tahap VI, hemoglobin inti dan sitoplasma sepenuhnya
dihilangkan dan tidak ada penyerapan dalam cahaya ungu (Gbr.
12b VI). Di

ANGKA

8a. Bagian 1 t~ dari eritrosit katak yang sama, difiksasi dalam OsO4-sukrosa dan tertanam dalam
metakrilat. Fase-kontras, ~ 5461 A. 8b. Bagian yang sama dengan bidang terang, X 4047 A. 8c.
Bagian yang sama dengan a, diwarnai Feulgen, dalam bidang terang, X 5461 A. Semua X 6.000.

GAMBAR 9

Mikrograf elektron eritrosit katak difiksasi dalam OsO4-sukrosa, tertanam dalam metakrilat, dan diwarnai
dengan uranil asetat. Panah menunjukkan situs pori dan saluran nuklir. X 15.000.

676 JURNAL CYTOLOGI BIOFISIKA DAN BIOKIMIA - VOLUME 9, 1961

Machine Translated by Google

Struktur HG DAVIES dalam Eritrosit Bernukleus 577

Machine Translated by Google
fase-kontras badan nuklir muncul sebagai daerah
gelap yang sangat bias (Gbr. 12a VI). Kontras residual
di dalam nukleus (Gbr. 12b VI) muncul terutama dari
apa yang disebut efek fase-kontras.
Fenomena terkenal ini menyebabkan objek yang
sangat bias dalam sel terlihat dalam iluminasi medan
terang tanpa adanya penyerapan nyata.
Membran plasma (Gbr. 12b VI) dibuat terlihat karena
alasan ini dan muncul sebagai garis ganda, satu
gelap, satu terang. Efek seperti itu ada di semua
pengamatan medan terang, tetapi mereka berkurang
pada tahap lain di mana perbedaan indeks bias lebih
kecil dan ada penyerapan nyata.
Sebuah upaya telah dilakukan pada Gambar. 16
untuk menjumlahkan marise dan memperjelas
perubahan selama hemolisis. Pemisahan garis
merupakan indikasi konsentrasi relatif (zat kering per
satuan volume) dari zat total (kolom A) dan hemoglobin
saja (kolom B) masing-masing disimpulkan dari
mikroskop fase dan mikroskop medan terang (h 4047
A). Penjelasan diberikan dalam deskripsi gambar.
B. Eritrosit Ayam
Eritrosit ayam segar yang diamati pada fase kontras
tampak sama apakah dipasang pada protein serum
(Gbr. 17) atau Tyrode fisiologis (Gbr. 19). Terlepas
dari ukurannya yang lebih kecil, mereka sangat mirip
dengan eritrosit katak, nukleus muncul sebagai daerah
yang relatif terang yang mengandung daerah yang
lebih gelap. Dalam tubuh inti sel hemolisis muncul
dengan kontras terbalik (Gbr. 18). Dalam eritrosit yang
difiksasi dalam buffer OsO4 (Gbr. 20), saluran terlihat
jelas di perimeter luar inti yang tampaknya
menghubungkan bagian dalam inti dengan sitoplasma.
Di bagian tipis (Gbr. 21) diferensiasi nukleus menjadi
daerah terang dan gelap mirip dengan di
GAMBAR 10
Mikrograf elektron dari bagian eritrosit fi'og yang tidak diwarnai. X |5.000.
GAMBAR 10 i
Pembesaran invaginasi nukleus pada Gambar 10 untuk menunjukkan selubung nukleus yang terikat.
X40.000.
GAMBAR 11
Mikrograf elektron eritrosit katak, memperlihatkan selubung inti dan pori. X 80.000.
078 JURNAL SELASA CYTOLOGI BIOFISIKA DAN BIOKIMIA . JILID 9, 1961
eritrosit katak. Bentuk inti eritrosit ayam lebih teratur
dan lebih mendekati elips daripada katak, dan belum
ditemukan invaginasi nukleus.
Pada mikroskop elektron (Gbr. 22 dan 23) saluran
sempit di tepi luar kromatin, yang menghubungkan
bagian dalam nukleus dan sitoplasma, dapat terlihat
dengan jelas, terutama setelah penanaman araldit,
ketika kontras antara badan inti dan hemoglobin lebih
tinggi daripada setelah tertanam dalam metakrilat. Di
persimpangan sitoplasma saluran ada celah atau
lubang di amplop nuklir. Munculnya celah agak
bervariasi. Pada Gambar 24 bagian luar dan dalam
selubung inti tidak menyatu dengan jelas dan terdapat
indikasi garis samar yang memanjang melintasi celah.
Pada sebagian besar sediaan eritrosit ayam,
nukleus sedikit ditarik dari sitoplasma. Efek ini lebih
jarang terjadi pada sediaan eritrosit katak. Ruang
menjadi jelas, seperti yang ditunjukkan oleh
pengamatan mikroskopis, selama dehidrasi dalam
alkohol 90 persen. Dalam fotomikrograf yang
menunjukkan efek ini, jembatan sempit hemoglobin
juga dapat dilihat menghubungkan saluran nukleus
dengan sitoplasma (Gbr. 22 dan 23). Ruang antara
nukleus dan sitoplasma tampaknya terbentuk di antara
dua bagian selubung nukleus (Gbr. 24).
DISKUSI
Sejak penemuan pori-pori inti, telah terjadi diskusi
yang cukup tentang sejauh mana
mereka memungkinkan pertukaran langsung materi
antara bagian dalam nukleus dan sitoplasma. Dalam
makalah terbaru (7, 22, 19) sifat pori-pori telah dipelajari
lebih lanjut di mikroskop elektron dan kemungkinan
transfer antara
Machine Translated by Google

Struktur HG DAVIES dalam Eritrosit Bernukleus 679

Machine Translated by Google

680 JURNAL BIOPIIYSIK DAN BIO(SITOLOGI TIEMIS " VOLUME 9,

Machine Translated by Google

GAMBAR 16 hemoglobin ditunjukkan oleh mikroskop medan

terang pada X 4047 A. Nukleus adalah daerah yang
Kolom A menunjukkan konsentrasi total zat kering
dilingkupi oleh elips yang lebih kecil, dan daerah
yang dideduksi dari salinan mikrokontras fase; kolom
segi empat di dalamnya mewakili hemoglobin.
B menunjukkan konsentrasi
Banyaknya garis diagonal secara kasar menunjukkan besarnya
konsentrasi.
& usia
~~ Saya
I: A. Konsentrasi dalam badan nuklir kurang dari
hemoglobin.
B. Badan inti tidak mengandung hemoglobin,
sedangkan konsentrasi hemoglobin kira-kira sama
dalam nukleus dan sitoplasma.

Tahap
II II: A. Konsentrasi hemoglobin dalam nukleus hanya
sedikit melebihi badan inti, mengurangi visibilitas
mereka dalam kontras fase.

B. Di sini dan pada tahap-tahap selanjutnya, III B

sampai VI B, konsentrasi hemoglobin menurun.

AKU AKU AKU

Sta.¢e III."
A. Konsentrasi dan indeks bias hemoglobin sama
dengan badan inti, dan nukleus menghilang.

B. Nukleus menunjukkan kontras diferensial dalam

cahaya ungu, badan inti tidak menyerap. & usia
IV."

A. Konsentrasi hemoglobin sekarang kurang dari

badan inti, hemoglobin intranuklear relatif ringan
dalam fase kontras.

B. Penampakan dalam cahaya ungu sedikit berubah

dari tahap III B.
Tahap V."
V @ @w@ A. Hemoglobin sangat diencerkan, kromosom muncul
sebagai benda gelap dalam fase kontras.

B. Hemoglobin sangat encer (@ Gbr. 14b V).

Tahap
VI: Sesuai dengan hemolisis lengkap.
A. Hanya kromosom yang tampak sangat reflektif
rapuh.

SEBUAH B B. Kontrasnya hampir nol.

GAMBAR 1~ FmunE 15
12a, Eritrosit katak dalam fase kontras. Tahap I, II, dan VI. 12b. Langit- 15a, 15b. Yang lebih rendah dari dua sel pada
langit yang sama dengan bidang terang, X 4047 A. Semua X 2.000. tahap IV pada Gambar. 14a dan 14b lebih
diperbesar untuk memudahkan perbandingan.
GAMBAR 13

13a. Eritrosit katak dalam fase kontras. Tahap III. 13b. Sel
yang sama dengan a dalam bidang terang, k 4047 A. Semua X 2.000.

GAMBAR 14

14a. Erythroeytes katak dalam fase kontras. Tahap IV dan V. 14b. Sel
yang sama dengan a dalam bidang terang, k 4047 A. Semua X 9.000.

681
Machine Translated by Google

inti dan sitoplasma dibahas. Swift (19) menyimpulkan, dengan
referensi khusus pada RNA, bahwa tidak ada bukti untuk
transfer yang dapat dipecahkan
bahan. Pendapat realistis serupa dipegang oleh Watson (22).
Dari mikroskop elektron terperinci
pengamatan pada jaringan tikus ia percaya bahwa
pori adalah struktur yang kompleks dan setiap lintasan
material yang mungkin terjadi melaluinya mungkin dikendalikan daerah inti tertentu mirip dengan sitoplasma, dan konsentrasi
dan bukan proses acak.
Kami tidak akan membahas di sini berbagai eksperimen
fisiologis yang menguji permeabilitas selubung inti, yang
hasilnya bertentangan. Referensi untuk ini diberikan dalam
makalah yang menarik oleh Merriam (13), yang telah
menunjukkan bahwa inti oosit terisolasi permeabel terhadap
makromolekul besar, kesimpulan yang berbeda dengan
Harding dan Feldherr (ll), yang menyelidiki semipermeabilitas
inti oosit utuh . .
Eritrosit berbeda dari sel-sel yang telah dipelajari
sebelumnya dalam hal kontinuitas zat kimia antara sitoplasma
dan bagian dalam nukleus, melalui pori-pori nukleus, dapat
ditunjukkan secara langsung; pertukaran hemoglobin inti dan
sitoplasma tampaknya merupakan proses acak, yaitu
dikendalikan oleh difusi sederhana.
belum diidentifikasi dengan metode tertentu, meskipun daerah
di dalam nukleus menunjukkan penampilan berbintik yang
sama, yang telah dibahas sebelumnya, seperti sitoplasma.
Hal ini terlihat pada grafik mikro elektron berdaya rendah
(misalnya, Gambar 23). Identifikasi, bagaimanapun,
tergantung pada penyerapan spesifik. Meskipun spektrum
absorpsi yang lengkap belum tersedia, absorpsi cahaya pada
zat kering yang tinggi pada kedua volume menunjukkan
bahwa gugus heme digabungkan dengan protein.
Kontinuitas antara nukleus dan sitoplasma eritrosit melalui
pori-pori nukleus tampak jelas dalam mikrograf elektron.
Fakta bahwa konsentrasi hemoglobin inti dan sitoplasma
tampaknya sama lebih lanjut menunjukkan bahwa ada
kontinuitas dan karenanya difusi bebas antara dua volume
yang mengandung hemoglobin. Dapat dikatakan bahwa
kesetaraan ini hanya kebetulan, bahwa mungkin ada membran
tipis yang menutupi pori-pori yang mencegah difusi bebas
dan tidak terlihat dalam elektron.
mikrograf karena, misalnya, telah menguap dari bagian pada
intensitas sinar tinggi yang digunakan pada perbesaran tinggi.

Bukti untuk ini dirangkum di bawah ini dan (Kemungkinan ini telah dicatat oleh Watson (22) dalam
struktur eritrosit dibandingkan dengan sel somatik lainnya. diskusi tentang visibilitas relatif, pada perbesaran rendah dan
tinggi, bahan seperti membran melintasi pori-pori nuklir di sel
Dalam mikroskop elektron, hemoglobin memiliki lain.)

FmURE 17

Persiapan segar eritrosit ayam dipasang di protein serum. Fase-kontras, X 2.000.

]~ nJURE 18

Eritrosit ayam hemolisis yang dipasang pada protein serum, menunjukkan badan inti yang relatif
gelap. Fase-kontras, X 2.000.

FxcuRE 19

Sediaan segar erythroeytes ayam dipasang di Tyrode fisiologis. Kontras fase, X 2.000.

GAMBAR ~0

Eritrosit ayam setelah fiksasi dalam OsO4-sukrosa. Saluran di kromatin nukleus perifer yang
mengarah dari bagian dalam nukleus ke dalam sitoplasma dapat terlihat dengan jelas. Fase-kontras,
X 2.000.

GAMBAR ~ 1

Bagian l /~ eritrosit ehickma difiksasi dalam OsOa-sukrosa. Kontras fase, >( 2.000.

682 JURNAL BIOFISIKA DAN BIOKIMIA (~YTOLOGI " VOLUME 9, 1961

Machine Translated by Google

HG ]) Struktur AVIES dalam Eritrosit Bernukleus 683

Machine Translated by Google

pengamatan selama hemolisis tidak mendukung
anggapan seperti itu, bagaimanapun, dan konsisten
dengan gagasan bahwa ada difusi bebas hemolisis
globin antara nukleus dan sitoplasma. Difusi hemoglobin
dari nukleus ditunjukkan oleh
fakta bahwa kontras di badan nuklir
menurun, menjadi nol, dan akhirnya berbalik. Kami belum
mengukur tingkat di mana hemoglobin berdifusi ke dalam
sitoplasma, meskipun cara untuk melakukan hal ini
menunjukkan diri mereka sendiri. Difusi melalui membran
plasma dan keluar dari sel adalah proses yang sangat
Pembagian nukleoplasma menjadi dua zona ini persis
seperti yang ditemukan dalam eritrosit. Secara rinci,
daerah berdensitas rendah yang dirujuk oleh Watson
dalam kasus eritrosit diganti dengan daerah berdensitas
tinggi yang mengandung hemoglobin. Swift (18)
sebelumnya telah mengamati, dalam nukleus selain
eritrosit, saluran bahan berdensitas rendah memanjang
dari pori-pori pada selubung nukleus dan telah
menyarankan bahwa material dengan densitas relatif
tinggi yang mengelilingi
saluran adalah kromatin. Kami telah menunjukkan bahwa

lambat di bawah kondisi percobaan kami. Data daerah sekitar saluran dalam eritrosit mengandung DNA.
menunjukkan bahwa difusi di dalam sel adalah
perbandingan yang cepat, dan ini mungkin diperiksa Timbul pertanyaan tentang bagaimana pori-pori yang
secara kuantitatif dengan densitometri fotomikrograf telah ditemukan di selubung inti eritrosit dibandingkan
cahaya ungu dari bagian tipis sel, yang difiksasi pada dengan yang ada di jenis sel lain. Gambaran umum yang
berbagai tahap hemolisis. muncul dari studi yang terakhir adalah sebagai berikut.
Hasil kami tidak membuktikan bahwa difusi hemoglobin Pori-pori berbentuk lingkaran, dengan diameter 500
selama hemolisis hanya terjadi melalui pori-pori di sampai 1000 A, dan dibentuk oleh pertemuan antara
selubung nukleus, tetapi kami pikir ini yang paling mungkin. membran dalam dan luar dari nukleus.

Apa yang mencolok tentang organisasi umum nukleus
eritrosit adalah bahwa dalam hal-hal mendasar tertentu
sangat mirip dengan nukleus sel somatik lain yang
memiliki
telah dipelajari. Watson (22) merangkum pengamatannya
pada inti jaringan tikus sebagai berikut:
Nukleoplasma sel bila dilihat dalam bahan tetap osmium
terdiri dari massa dengan kepadatan sedang yang
dipisahkan oleh daerah dengan kepadatan lebih rendah.
Di dekat selubung inti, bagian nukleoplasma dengan
kepadatan rendah ditempatkan dalam saluran silinder
dengan diameter sekitar 1200 A yang mengarah ke
dalam. menuju pusat nukleus dan secara bertahap
beranastomosis dan kehilangan identitasnya di daerah
yang lebih umum dengan kepadatan rendah. Pada
amplop nuklir, masing-masing saluran ini dikaitkan dengan salah satuyang terlihat pada fotomikrograf.
amplop. Pori nukleus kadang-kadang tampak dilintasi
oleh material yang kerapatannya sebanding dengan
membran nukleus, dan telah dipertimbangkan bahwa ini
mungkin berhubungan dengan sebuah diafragma yang
mungkin mengontrol lewatnya molekul. Penjelasan
alternatif dari penampilan struktur ini baru-baru ini
diusulkan (7, 22), yaitu, bahwa itu hanya mewakili strip
margin pori yang telah dimasukkan dalam bagian
tersebut, dan tidak sesuai dengan brahe laki-laki di
seluruh bagian. pori. Lebih lanjut dikatakan bahwa
ketebalan bagian sebanding dengan dimensi pori dan
karenanya jarang untuk mendapatkan bagian yang tidak
termasuk seperti itu.
potongan membran nuklir di atas dan di bawah pusat pori
seperti
pori-pori."

GAMBAR ~

Mikrograf elektron eritrosit ayam difiksasi dalam OsO4-sukrosa, tertanam dalam metakrilat,
dan diwarnai dalam uranil asetat. X I5, OOO.

t'Im;ltE ~23
Mikrograf elektron eritrosit ayam difiksasi dalam OsO4-sukrosa, ditempelkan pada aral dite,
dan diwarnai dengan uranil asetat. X 15.000.

GAMBAR ~4

Mikrograf elektron eritrosit ayam difiksasi dalam OsO4-sukrosa, tertanam dalam metakrilat,
dan diwarnai dalam uranil asetat. Di sebelah kiri di mana nukleus dan sitoplasma telah ditarik,
dua bagian amplop nuklir terlihat terpisah.
X 80.000.

684 JURNAL CYTOLOGI BIOFISIKA DAN BIOKIMIA • VOLUME 0, 1961

Machine Translated by Google

Struktur HG DAVIES dalam Eritrosit Bernukleus 685

Machine Translated by Google
Fitur lain dari struktur pori bervariasi antara jenis sel sel berdiferensiasi yang tidak memiliki banyak
dan secara umum tidak begitu jelas.
Secara singkat temuan tersebut adalah sebagai
berikut. Amplop nuklir Amoeba proteus terdiri dari
membran ganda dengan pori-pori yang dibentuk oleh
persimpangan dua membran yang mirip dengan yang ditemukan
sel mamalia, tetapi ditumpangkan pada ini adalah
sistem prisma heksagonal yang terdefinisi dengan baik
yang berorientasi tepat terhadap pori-pori di atasnya (15). tentang ada atau tidaknya difusi bebas dari setiap
Pengamatan telah dilakukan pada oosit amfibi dan
echinodermata (misalnya (25), (1)) yang mengarah
pada dugaan adanya struktur seperti tabung yang
melewati pori, memanjang dalam jarak pendek ke
dalam nukleus dan sitoplasma, dan terdiri dari
mikrosilinder. Menurut Andr~ dan Rouiller (5),
bagaimanapun, dalam oosit arakhnida tidak ada struktur jelas harus diturunkan dari kromosom.
tubular, tetapi yang tampak seperti itu hanyalah material Konsentrasi materi di dalamnya adalah
granular padat yang melewati pori-pori dan berkumpul
di sekitar tepinya. Watson (22) menyimpulkan dari
studinya yang cermat tentang pori-pori dalam sel
mamalia bahwa ada ekstrusi melalui pori-pori yang
membentuk korteks yang terdefinisi dengan baik di sisi
sitoplasma, dan bahwa manset sitoplasma ini adalah
kontributor utama annuli yang terlihat pada bagian
tangensial ke amplop nuklir. Kami menganggap bahwa
kontribusi yang dibuat oleh tepi pori pada annuli ini
mungkin telah diremehkan.
Kadang-kadang butiran telah terlihat di dekat pusat
pori, tetapi tidak konsisten, dan karenanya mungkin
tidak disengaja.
Untuk meringkas, temuan kami saat ini, menunjukkan
celah dalam amplop nuklir yang terkait dengan saluran
dalam kromatin, identik dengan fitur inti dan pori-pori
yang dijelaskan dalam berbagai sel mamalia. Meskipun
tampak jelas bahwa pori-pori dalam selubung nukleus
sel mamalia tersebut menyediakan sarana untuk difusi
sederhana antara nukleus dan sitoplasma makromolekul
selain yang terikat pada organel sitoplasma besar,
tidak ada bukti bahwa ini memang terjadi, dan idenya
tidak. diterima secara umum. Salah satu alasan yang
jelas untuk ini adalah bahwa mikrograf elektron hanya
menyajikan gambar-gambar statis yang darinya sulit
untuk mengemukakan proses-proses dinamis. Dalam
kasus eritrosit, bukti dari mikroskop elektron dilengkapi
dengan pengukuran konsentrasi penanda tertentu
(hemoglobin) dalam kompartemen nukleus dan
sitoplasma, bersama dengan pengamatan selama
proses dinamis hemolisis. Eritrosit, bagaimanapun,
adalah
686 JURNAL BIOPITIS DAN BIOCHEMICAL CYTOLOGI ' VOLUME 9, 1961
organisasi sitoplasma yang ditemukan di sel-sel
berdiferensiasi lainnya. Tampaknya tidak ada saran
tentang kemungkinan fungsi nukleus dalam eritrosit
ini, dan, tentu saja, pada mamalia eritrosit fungsional
di
tidak mengandung nukleus. Pengamatan pada eritrosit,
meskipun sangat sugestif, tidak dapat digeneralisasikan.
Yang jelas diinginkan adalah demonstrasi spesifik
komponen tertentu yang diinginkan (misalnya, RNA)
dalam tipe sel lain dengan organisasi sitoplasma yang
lebih kompleks daripada eritrosit.
Sifat dari apa yang disebut badan nuklir di
eritrosit dipertanyakan. Mereka mengandung DNA dan
jauh lebih tinggi daripada yang umumnya ditemukan
di inti somatik antar fase dan sebanding dengan yang
ada di kromosom mitosis. Lebih jauh, ada alasan untuk
percaya bahwa tubuh bukanlah kromatin yang telah
terkondensasi secara acak menjadi sejumlah rumpun
yang bervariasi, tetapi bahwa setiap tubuh berasal dari
kromosom individu. Anderson
dan Norris (4) baru-baru ini menunjukkan bahwa
sekitar 20 badan diskrit terjadi dalam inti eritrosit
Amphiuma , yang memiliki urutan yang sama dengan
jumlah kromosom, 24. Hitungan kasar jumlah badan
dalam inti pipih dari
eritrosit katak (Gbr. 5) menunjukkan bahwa jumlahnya,
kira-kira sekitar 20, juga kira-kira sama dengan jumlah
kromosom diploid, 26. Namun, untuk melakukan
penghitungan yang tepat, diperlukan teknik persiapan
yang lebih baik.
Indikasi lain dari sifat nuklir
tubuh diperoleh dari analisis kimia. Rasio protein
terhadap DNA (P/D) dalam inti sel darah merah ayam
yang diisolasi dalam media tidak berair adalah 2:1
(dibuat penyisihan untuk kandungan hemoglobin (17).
Hal ini dapat dibandingkan dengan P/D sebesar 5,5
(3) untuk inti ginjal ayam dan menunjukkan bahwa
tubuh kekurangan protein dibandingkan dengan inti
somatik fungsional.Namun diketahui bahwa hingga
sekitar setengah dari protein inti inti fungsional
(jumlahnya tergantung pada jenis inti dan keadaan
fungsional ) mudah dikeluarkan dari nukleus dan
tampaknya tidak menjadi bagian dari struktur kromosom
(Allfrey et al. (2), halaman 449). Hampir pasti eritrosit
telah kehilangan protein nukleus ini. Akan tetapi, akan
lebih menarik untuk membandingkan Rasio P/D di
badan inti dengan yang di mitosis (misalnya,
Machine Translated by Google
metafase) kromosom dari spesies yang sama.
Data ini, yang akan membantu membangun hubungan antara
badan inti dan kromosom, tidak tersedia. Pada resolusi yang
lebih tinggi daripada yang diperlukan untuk menunjukkan
keberadaan nuklir
pori-pori, badan inti tampak terdiri dari benang atau pita dengan
ukuran berkisar antara 100 A ke bawah. Ini tidak akan dibahas
di sini.
Pengamatan awal pada spesies lain menunjukkan bahwa
pola umum organisasi eritrosit berinti mungkin serupa di
seluruh kerajaan hewan.
BIBLIOGRAFI
1. AFZELICS, B., Eap. Penelitian Sel, 1955, 8, 147.
2. ALLrREV, V., MIRSKY, AE, dan STERN, H.,
Kemajuan dalam Enzymol., 1955, 16.449.
3. ALLFREY, V., STERN, H., MIRSKY, AE, dan SAETREN,
H., J. Gen. Physiol., 1952, 35, 529.
4. ANDERSON, NG, dan NORRIS, CB, Penelitian Sel Exp,
1960, 19.605.
5. ANDRe., J., dan ROUILLER, CH., dalam Prosiding
Konferensi Stockholm tentang Mikroskop Elektron,
New York, Academic Press, Inc., 1957, 162.
6. BARER, R., dalam Teknik Fisik dalam Penelitian Biologi,
(G. Oster dan AW Pollister, editor), New York, Academic
Press, Inc., 1956, 3, 30.
7. BARNES, BG, dan DAVIS, JM, J. Ultrastruct.
Penelitian, 1959, 3, 131.
8. CAULFIELD, J. B., J. Biofisika. dan Biokimia.
Cytol., 1957, 3, 827.
9. DAVIES, HG, dalam Metode Sitokimia, (JF
Danielli, editor), New York, Academic Press, Inc.,
1958, 55.
10. GLAUERT, AM, dan GLAUERT, RH, atau.
Biofisika. dan Biokimia. Cytol., 1958, 4, 191.
I I.2HARDING, CV, dan FELDHERR, C., J. Gen.
Fisiol., 1959, 42, 1155.
12. MAXlMOV, AA, dan BLOOM, W., A Text-Book
Struktur HG DAVIES dalam Eritrosit Bernukleus
Saya sangat berhutang budi kepada Dr. Keith R. Porter
untuk pertama kali memperkenalkan saya pada metode
mikroskop elektron selama masa tinggal yang menyenangkan
di The Rockefeller Institute, New York, dan kepada Profesor
JT Randall, FRS, atas dorongannya dan untuk menyediakan
fasilitas untuk pekerjaan ini. Dengan senang hati mengakui
diskusi yang bermanfaat dengan Dr. M. Spencer dan juga Dr.
HB Fell, FRS, yang, dengan Dr. MFH
Wilkins, FRS, silakan baca naskahnya. Saya berterima kasih
kepada Miss P. Rush atas bantuan teknisnya dan juga kepada
Miss F. Ticehurst atas bantuannya dalam menyiapkan ilustrasi.
Diterima untuk diterbitkan, 20 Oktober 1960.
Histologi, Philadelphia dan London, WB Saunders
Co., 1948.
13. MERRIAM, RW, J. Biofisika. dan Biokimia.
Cytol., 1959, 6, 353.
14. PALADE, GE, J. Exp. Med., 1952, 95, 285.
15. PAPPAS, GD, J. Biofisika. dan Biokimia. Cytol., 1956, 2,
No. 4, suppl., 431.
16. RYTER, A., dan KELLENBERGER, E., Z.
Naturforsch., 1958, 13b, 597.
17. STERN, H., ALLFREY, V., MIRSKY, AE, dan SAETREN,
H., 3". Gen. Physiol., 1952, 35, 559.
18. SWIFT, H., dalam A Symposium on the Chemical Basis
of Development, (WD McElroy dan B. Glass, editor),
Baltimore, The Johns Hopkins Press, 1958, 174.
19. SWIFT, H., dalam Struktur dan Fungsi Elemen Genetik,
Brookhaven Symposia on Biology, No. 12, 1959, 134.
20. WALKER, PMB, Exp. Penelitian Sel, 1955, 8, 567.
21. PERINGATAN, RT, J. Histochem. dan Cytochem., 1958,
6, 398.
22. WATSON, ML, J. Biofisika. dan Biokimia. Cytol., 1959, 6,
147.
23. WILKINS, MHF, komunikasi pribadi.
24. WILKINS, MHF, dan DE CARVALHO, S., Darah, 1953, 8,
1953.
25. WlSCHNITZER, S., J. Ultrastruct. Penelitian, 1958, 1.201.
687