NO DOKUMEN 128/IK/PM/005-004/2011

INSTRUKSI KERJA
NO. REVISI III
TANGGAL 14 JANUARI 2011
PEMBUATAN MEDIA HALAMAN 1 /1
MAC CONKEY AGAR

I. PELAKSANA : Petugas tehnis di unit Mikrobiologi

II. PRINSIP : 1. Garam empedu (Bile salt) dan kristal violet secara luas menghambat
pertumbuhan microbial golongan gram positif.
2. Indikator neutral red digunakan untuk mendeteksi adanya degradasi lactosa
yang menyebabkan penurunan pH media menjadi asam.

III. FUNGSI : Isolasi (Selektrif media) untuk kuman salmonella, shigella dan coliform dari sampel
tinja, urine, makanan dan air limbah

IV. ALAT-ALAT : Analitic balance, kertas timbang, sendok, instrument, labu Erlenmeyer, autoclave,
cawan Petri diameter 9 cm, laminar air flow, gelas ukur.

V KOMPOSISI : Pepton form easein 17,0gram, peptone form meat 3.0gram, Sodium chloride
5.0gram, lactose 10.0gram. pH media 6.8 ± 0.20 pada suhu 25º C.

VI LANGKAH : 1. Timbang serbuk media Mac Conkey agar.

PEMNBUATAN 2. Masukkan ke dalam labu Erlenmeyer, larutkan dalam 1000ml aquadet.
3. Sterilkan dalam autoclave pada suhu 121ºC, 15 menit, 1 atm.
4. Media didinginkan pada temperatur kamar sampai suhunya 45-50ºC
5. Media dikocok sampai homogen.
6. Media dituang dalam cawan petri steril, ketebalan media agar ±2-5 mm,
hindarkan terjadi buih pada permukaan media agar.
7. Nedia dibiarkan beku pada temperatur kamar.
8. Hasil: Media padat datar, berwarna merah jambu.

1. Sterilitas: media yang sudah selesai dibuat, diinkubasi pada suhu 37ºC
selama 24 jam. Kualitas bmedia dinyatakan baik bila tidak ada
pertumbuhan koloni pada permukaan media agar.
2. Pertumbuhan: Inokulasikan strain kontrol diatas permukaan media agar,
inkubasikan suhu 37ºC selama 24 jam.
- Salmonella typhi: tidak berwarna, keruh, halus.
- E coli: bulat, merah, kering.
VII UJI KUALITAS : - Klebsiella: bulat, merah muda, mukoid.

VI. DAFTAR PUSTAKA : Merek Microbiologyal Manual, Edisi 12

Disahkan oleh : Disetujui oleh : Disusun oleh :

Kepala Balai Laboratorium Kesehatan Kepala Seksie Pelayanan
Provinsi Jawa Tengah

Dr. Yunita Rumprakti S, M.Kes Dr. Ibnu Hidayat Elly Karlina, SKM
NIP 19570603 198801 2 001 NIP: 19560329 200112 1 001 NIP: 19620824 198203 2 004
 NO DOKUMEN 05/IK/MIKRO/pm.7.5.2/2011
INSTRUKSI KERJA
NO. REVISI 0
TANGGAL 14 JANUARI 2011
PEMBUATAN HALAMAN 1 /1
LARUTAN TWEEN 80. 0,1%

I. PELAKSANA : Petugas tehnis di unit Mikrobiologi

II. FUNGSI : Larurtan tween 80. 0,1% untuk bahan pembuatan kultur DST

III. ALAT-ALAT : Tabung reaksi trutup ulir, autoclave, lemari es.

VI LANGKAH : 1. Membuat larutan tween 80. 10%: Ambil larutan tween 80 sebanyak 1 ml
PEMNBUATAN tambahkan aquadest steril 9 ml. Simpan dalam lemari es aaaaaaaaa9
penyimpanan tidak boleh lebih 2 bulan.
2. Membuat larutan tween 80, 0,1%.: Ambil larutan tween 10% ditambah 9,9
ml aquadest steril (larutan tween 0,1% untuk pemakaian DST sebaiknya
dibuat baru).
3. Cara mengisi larutan tween 0,1% dan glass beads kedalam tabung:
1. Isi tabung reaksi tutup ulir Ø 1,5 mm dengan glss beads sebanyak
10-15 butir.
2. tambahkan 2 tetes larutan tween, 0.1%.
3. Tutup rapat.
4. Sterilkan di autoclave suhu 121º C selama 10-15 menit.
5. Bila tidak digunakan simpan dalam almari es.
6. Bila akan digunakan, embun yang ada dalam tabung harus
dihilangkan dengan cara didiamkan pada suhu kamar, karena
dapat mempengaruhi penimbangan.
VI. DAFTAR PUSTAKA : Pelatihan Kultur dan Uji Kepekaan Mycobacterium tuiberculose terhadap Cat lini
pertama di BBLK Surabaya 2010

Disahkan oleh : Disetujui oleh : Disusun oleh :

Kepala Balai Laboratorium Kesehatan Kepala Seksie Pelayanan
Provinsi Jawa Tengah

Dr. Yunita Rumprakti S, M.Kes Dr. Ibnu Hidayat Elly Karlina, SKM
NIP 19570603 198801 2 001 NIP: 19560329 200112 1 001 NIP: 19620824 198203 2 004
 NO DOKUMEN 06/IK/MIKRO/pm.7.5.2/2011
INSTRUKSI KERJA
NO. REVISI 0
TANGGAL 14 JANUARI 2011
PEMBUATAN HALAMAN 1 /1
SKIM MILK 10%

I. PELAKSANA : Petugas tehnis di unit Mikrobiologi

II. FUNGSI : Untuk menyimpan strain kuman TBC

III. ALAT-ALAT : Erlenmeyer, Tabung tutup ulir, lemari es, Gelas ukur, sendok.

VI LANGKAH : 1. Timbang 20 mg serbuk skim milk, tambahkan 200 ml aquades steril.

PEMNBUATAN 2. Campurkan dengan menggunakan magnetic stirrer.
3. Tuang pada tabung yang berisi glass beads sebanyak 2 ml.
4. Sterilkan di autoclav pada suhu 121ºC selama 10-15 menit.
5. Pada sat sterilitas selesai, autoclav harus segera dibuka, agar skim milk
dalam tabung tidak berwarna coklat/caramel.
6. Disimpan dalam lemari es.

VI UJI STERILITAS 1. Tanamlkan skim milk pada media MC, .BA, Saboroud agar.
2. Inkubasi pada suhu 37ºC selama 24 Jam.
3. Bila ada pertumbuhan kuman pada ketiga media tersebut, maka skim milk
tidak dapat digunakan.

VII. DAFTAR PUSTAKA : Pelatihan Kultur dan Uji Kepekaan Mycobacterium tuiberculose terhadap Cat lini
pertama di BBLK Surabaya 2010

Disahkan oleh : Disetujui oleh : Disusun oleh :

Kepala Balai Laboratorium Kesehatan Kepala Seksie Pelayanan
Provinsi Jawa Tengah

Dr. Yunita Rumprakti S, M.Kes Dr. Ibnu Hidayat Elly Karlina, SKM
NIP 19570603 198801 2 001 NIP: 19560329 200112 1 001 NIP: 19620824 198203 2 004