LAPORAN PRAKTIKUM

Kelompok : 4
Materi : Mikrotom

 PENGERTIAN MIKROTOM

Mikrotom berasal dari bahasa Yunani yaitu “Mikrotos” berarti kecil, dan “Temnein”
yang berarti untuk memotong.
Mikrotom adalah mesin untuk mengiris spesimen biologi menjadi bagian yang sangat
tipis untuk pemeriksaan Mikroskop. Pisau mikrotom tergantung pada spesimen yang
sedang diiris dan ketebalan yang diinginkan dari bagian yang dipotong. Ketebalan
sayatan yang dibuat bervariasi antara 1-200 Milimikron.

 JENIS-JENIS MIKROTOM

A. Mikrotom Manual
B. Mikrotom Otomatis

A. Mikrotom Manual
Mikrotom manual adalah jenis mikrotom yang dioperasikan dengan
tangan, bukan menggunakan sistem otomatis atau elektrik. Mikrotom manual
sering digunakan di laboratorium dan pengaturan penelitian di mana presisi dan
kontrol sangat penting.

Jenis-jenis Mikrotom manual:

1) Mikrotom goyang

Alat ini adalah salah satu yang tertua dalam desain, relatif murah, dan hanya
ditujukan untuk pemotongan blok parafin.
 Mikrotom goyang Cambridge adalah nama lain untuk mikrotom goyang. Istilah
"goyang" digunakan karena gerakan mikrotom yang mengayun seperti lengan.
Dalam bentuk mikrotom ini, bilah tetap diam sementara blok jaringan berosilasi
dalam gerakan seperti busur. Ini adalah salah satu desain mikrotom paling awal.
Mikrotom ini cocok untuk pemotongan serial dan dapat memotong bagian tipis
dengan pita. Mikrotom ini memiliki bagian yang sedikit melengkung.
Mikrotom ini memiliki tiga komponen bergerak, sangat dapat diandalkan, dan
membutuhkan perawatan minimal.
Saat jaringan bergerak ke arah pisau (pisau Heiffor yang agak cekung ganda),
yang dipegang dengan kaku, bagian-bagian dipotong dalam bidang melengkung.
Namun, kerapuhan bingkai membuatnya rentan terhadap gerakan selama
pemotongan, dan sulit untuk mendapatkan bagian yang sangat tipis.
Mikrotom yang bergoyang sebagian besar telah digantikan oleh mikrotom putar
yang lebih presisi, tetapi mikrotom yang bergoyang kembali digunakan dalam
cryostat portabel.

2. Mikrotom Putar

Nama mikrotom ini berasal dari aksi putar handwheel yang mengontrol
gerakan pemotongan. Mesin ini adalah mikrotom serba guna yang dirancang
untuk memotong bagian semi-tipis hingga sempit untuk mikroskop cahaya.
Operasi ini didasarkan pada aksi rotasi roda tangan yang mengaktifkan
gerakan balok menuju pisau yang dipegang dengan kuat di tempatnya.
Sehubungan dengan pisau, balok bergerak ke atas dan ke bawah dalam bidang
vertikal, memotong bagian yang rata.
Ini optimal untuk memotong bagian serial karena lebih berat dan karenanya
lebih stabil daripada tipe goyang. Mesin ini dapat memotong blok jaringan
yang lebih besar, dan sudut pemotongan pisau (kemiringan pisau) dapat
disesuaikan.
Karena pisau yang lebih berat dan lebih besar digunakan dengan bentuk
mikrotom ini, kemungkinan getaran selama pemotongan berkurang.
Pada sebagian besar mesin, spesifikasi ketebalan bagian berkisar antara
0.5μm hingga 60μm. Jaringan tertanam dalam lilin parafin biasanya dipotong
dalam kisaran 3 sampai 5 μm, sedangkan bagian resin berkisar 0.5-1 μm.

3. Mikrotom Kereta Luncur

 Mikrotom ini pada awalnya ditujukan untuk memotong massa jaringan yang
sangat besar (misalnya, seluruh otak). Sejak Perang Dunia II, mikrotom kereta
luncur telah menjadi mesin yang populer untuk penggunaan rutin.
Blok dipasang di dalam gerbong baja dalam posisi statis. Pisau meluncur bolak-
balik melintasi permukaan balok. Mikrotom ini sangat ideal untuk bekerja
dengan sampel jaringan besar atau jaringan padat. Biasanya, bagian jaringan
mikrotom sledge dasar tebal (lebih besar dari 10 μm).
Penahan balok diposisikan pada kereta baja yang meluncur bolak-balik di atas rel
melawan pisau yang dipasang secara horizontal.
Mikrotom ini sangat besar dan, sebagai hasilnya, sangat stabil dan tidak
mengalami getaran. Menggunakan pisau besar (panjang 24 cm) dengan mata
pisau berbentuk baji mengurangi kemungkinan getaran dan membutuhkan lebih
sedikit pemurnian.
Lampiran penahan pisau dapat disesuaikan dan memungkinkan penyesuaian
kemiringan dan sudut pisau (kemiringan) relatif terhadap balok dengan mudah.
Tindakannya secara signifikan lebih lambat daripada mikrotom berosilasi atau
putar, yang merupakan kerugian paling signifikan.

4. Mikrotom Geser

Dalam mikrotom ini pisaunya statis, dan balok bergerak secara horizontal di atas
pisau.
Saat menggunakan mikrotom geser, bilah meluncur secara horizontal di sepanjang
bidang miring terhadap balok stasioner.
Meskipun mikrotom geser awalnya dikembangkan untuk memotong bagian yang
disematkan seloidin, mikrotom ini juga dapat digunakan untuk memotong bagian
yang tertanam dalam lilin parafin.
5. Pembekuan Mikrotom / Cryomicrotome

Meskipun mikrotom lain dapat diadaptasi untuk memotong bagian beku, mikrotom
jenis ini secara tradisional dianggap paling efektif dan banyak digunakan.
Silinder karbon dioksida (CO2) dihubungkan ke mesin melalui tabung logam
fleksibel yang diperkuat di area utama. Saat menggunakan mikrotom pembeku,
pisau digerakkan sementara blok jaringan tidak bergerak, membuat proses
pemotongan berbeda dari yang dijelaskan di atas.
Setelah setiap pemotongan, blok memajukan sejumlah mikron tertentu. Namun,
sangat menantang untuk membuat bagian tipis dengan kualitas yang konsisten dan
sangat baik dengan mikrotom jenis ini.
Pembekuan jaringan dengan peralatan ini dimungkinkan tanpa menggunakan
cryogenics seperti karbon dioksida padat atau nitrogen cair. Sebelum adopsi
cryostat secara luas untuk pemotongan beku, teknik ini telah mendapatkan daya
tarik yang cukup besar.
Perangkat ini menggunakan prinsip pemanasan yang tidak merata dari satu logam
dengan arus listrik yang melewatinya secara langsung dan pendinginan logam
lainnya. Angka 12 melambangkan efek 'Peltier', yang menggambarkan fenomena
lain.

6. Mikrotom Getar

Mikrotom getar dikembangkan sebagai alat untuk memotong bagian berkualitas

tinggi dari jaringan tanaman dan hewan hidup yang tidak terfiksasi, dengan
maksud untuk menggantikan mikrotom tangan.
Bidang histokimia enzim dan histokimia ultrastruktur paling diuntungkan dari
kemampuan instrumen ini untuk memotong jaringan segar yang belum diproses.
 Nama alat ini berasal dari getaran frekuensi tinggi yang dihasilkan oleh pisau silet
pengaman, yang berfungsi sebagai sumber energi utama instrumen untuk
memotong.
Amplitudo getaran 'pisau' dapat diubah dengan menyesuaikan voltase yang
diterapkan padanya. Bahan lunak dapat diiris tanpa sobek jika terendam dalam
cairan yang juga membantu menghilangkan panas yang dihasilkan oleh ujung
pisau cukur yang bergetar.

7. Mikrotom Ultra

Untuk mendapatkan irisan ultra tipis untuk mikroskop cahaya dan elektron,
mikrotom ultra digunakan. Merupakan praktik umum untuk menyematkan
sampel jaringan kecil atau produk industri dalam resin keras sebelum
memperkecil ukurannya. Bagian setipis 10 nm dilaporkan telah dijelaskan.
Jenis mikrotom ini menampilkan dua jenis mekanisme lanjutan yang berbeda.
Panas menginduksi ekspansi dalam strip logam yang merupakan dasar dari
mekanisme termal. Sedangkan pada tipe mekanik, mekanisme gerak maju
dikendalikan oleh mikroprosesor yang terhubung dengan motor penggerak yang
presisi.
Motorisasi langkah pemotongan memastikan gerakan yang konsisten dan
berulang yang menjamin ketebalan bagian yang seragam. Kaca, intan, atau safir
adalah bahan standar untuk membuat pisau.
Dengan menggunakan mikroskop, balok tersebut dibawa ke ujung tombak, dan
ketika setiap irisan dibuat, balok tersebut diapungkan ke dalam pemandian
air dekat.

8. Mikrotom Gergaji
 Mikrotom gergaji digunakan untuk menghilangkan pecahan tulang, kaca, atau
keramik yang terkalsifikasi dari bahan lain yang jauh lebih keras.
Sampel, yang sering dibuat dalam resin, didorong dengan sangat lambat ke
gergaji berlapis berlian yang berputar dengan kecepatan sekitar 600 putaran per
menit.
Memproduksi porsi 20 μm atau lebih membutuhkan mata gergaji dalam kondisi
murni. Irisan yang sangat tipis tidak dapat dibuat menggunakan mikrotom
gergaji.

9. Mikrotom Tangan

Mikrotom tangan hanya dapat membagi bahan tanaman yang kaku secara alami,
dan bagian tipis jaringan hewan sulit untuk dicapai.

10. Kriostat
 Bagian tipis (3-5 μm) dari jaringan beku segar yang bebas dari cacat kristal es
diperlukan setelah penemuan prosedur pewarnaan antibodi fluoresen oleh Coons,
Creech, dan Jones pada tahun 1941.
Jaringan harus dibekukan dengan cepat pada suhu yang sangat rendah untuk
memenuhi persyaratan ini. Pertama kali dibangun pada tahun 1938, cryostat
merupakan gagasan dari Linderstrom-Lang dan Mogensen.
Pada tahun 1951, Coons dan rekan-rekannya merevisi desain tersebut. Pada
dasarnya, ini adalah kabinet deep freeze dengan mikrotom di dalamnya (idealnya
yang tidak akan menimbulkan korosi).
Jendela kaca berpanel ganda dan pintu memungkinkan barang disimpan dan
diambil dari kabinet. Kabinet memiliki kipas dan lampu neon agar semuanya tetap
dingin.
Kisaran suhu dari -10 derajat Celcius hingga -40 derajat Celcius. Pemotongan
cepat dapat dicapai dengan menggunakan cryostat apapun daripada mikrotom
beku.
Untuk fungsi khusus ini, mikrotom tertentu telah dibuat dengan tahap pembekuan
cepat di dalam Freon. Setelah jaringan diletakkan pada keempat block holder dan
dibekukan, kemudian dipindahkan ke mikrotom.
Pewarnaan dan pemasangan dapat dilakukan dengan cepat karena bagian-
bagiannya menempel dengan baik pada slide yang hangat. Pengaturan mikrotom
memungkinkan ketebalan irisan 2-16 μm.

B. Mikrotom Otomatis

Jenis-jenis Mikrotom Otomatis:

1. Mikrotom Laser

Mikrotom laser yang ditunjukkan pada Gambar adalah alat presisi untuk
memotong bahan tanpa menyentuhnya.
Ini memiliki teknologi laser femtosecond mutakhir yang terpasang di dalamnya.
Ini memungkinkan pemotongan non-kontak bebas panas di dalam jaringan
biologis dan bahan lainnya. Ketebalan irisan antara sekitar 5 dan 100 μm
dimungkinkan, tergantung pada bahan yang sedang dirawat.
Mikrotom laser ini memiliki banyak manfaat, termasuk kemampuan untuk
memotong jaringan dalam bentuk aslinya dengan presisi sub-mikrometer, lebih
sedikit kerusakan termal, lebih sedikit artefak, dan mengurangi waktu yang
dihabiskan untuk persiapan jaringan.
 2. Mikrotom Komputerisasi

Teknologi cryoscalped dan cryoplate, serta sakelar pembekuan semikonduktor,

disertakan. Mikrotom terkomputerisasi memiliki tujuan ganda, melakukan
bagian parafin konvensional dan bagian pembekuan cepat.
Dengan kelulusan penyesuaian irisan minimum 1 μm dan bagian irisan
maksimum 32 x 32 mm, mikrotom ini dapat mencapai ketebalan irisan 1-25 μm.
Suhu cryo scalpel dan cryoplate berkisar antara 0ºC ~ -18ºC dan -10ºC ~ -40ºC.
 JENIS PISAU MIKROTOM

A. Berdasarkan bahan pisau:

1. Pisau baja
2. Pisau non-korosif untuk cryostat
3. Pisau sekali pakai
4. Pisau karbida tungsten
5. Pisau kaca
6. Pisau berlian
7. Pisau safir

B. Berdasarkan bentuk ujung pisau (Profil):

1. Profil A: Sangat plano-cekung/bikonkaf
2. Profil B: Plano-cekung
3. Profil C: Berbentuk Baji
4. Profil D: Berbentuk Bidang

Cara kerja

1. Pasang blade holder pada Mikrotom

2. Azur sudut pemotongan pirou dan pasang pisau (PASTIKAN HAND WHEEL
TERRONOD pray thermo dapat digunakan pada sadue 12-14 derajat

3. Aktifkan fungsi retraction

4. Pasang kaset spesimen pada spesimen head

5. Atur orientasi kaste specimen dan kencangkan

8. Atur ketebalan pemotongan antara 1-60um. Atur ketebalan dengan memutor knob (1)
dibagian kanan atau kirl alat

a. Putar coarce feed wheel untuk mendekatkan sperimen

dengan say 8. Suka kunel Hand Wheel antuk mulai memotong

9. Trimming atau potong kasar dapat dilakukan dengan menekan tombol trimming
sambil memutor Hand wheel

10. Setelan ketebalan sedion deatur, untuk sectioning (potong halus), putar kand wheel.
Satu putaran penuh akan menghastikan potongan paraffin setebal ukuran. yang tetan
ditentukan.

11. Jika specimen feed sudah mencapai (mm sebelum portei

akhir didepan, maka hada saghal suara pada setrap

butaran hand wheel D. Bersihkan alat dari sesa parappin setiap digunakan dengan kuas
dan kosongkan wadah limbah

Cara Merawat

1. Lepas blade holder dan waste tray

2. Bersihkan sisa paraffin dengan para-gerd

s. Lab mikrotom dengan kain

4. Rakit kembali blade holder

5. Perawatan rutin yang dilakukan oreh teknisi harus dlakukan Satu kan setiap tahun

6- Baterai untuk penghitungan hasil patongan harus diganti setahun sekali.

Kesimpulan
Berdasarkan harll pengamatan bahwa mikrotom merupakan Suatu alat berpresisi tinggi
sehingga harus diperlakukan secara hati-hati. Alat ini digunakan untuk menyayat
jaringan sebelum ditempelkan ke atas permukaan slide. Fungri mikrotom secara umum
yaitu untuk mengiris spesimen biologi mengjadi bagian yang Sangat tipis untuk
pemeriksaan mikroskop.
https://microbiologynote.com/id/jenis-dan-penggunaan-suku-cadang-prinsip-mikrotom/
https://id.wikipedia.org/wiki/Mikrotom
https://www.scribdcom/document/498782861/mikrotom