Pemeriksaan Air, Makanan,

dan Cuci Tangan

Evangga Yudha Perdana

Kedokteran 2020
TIU:
Menjelaskan aplikasi mikrobiologi kedokteran pd
lingkungan

TIK:
1) Kepentingan melakukan pemeriksaan air,
makanan, & udara
2) Cara mengambil spesimen air, makanan, udara
utk pemeriksaan air, makanan, & udara guna
pemeriksaan mikrobiologi
3) Metode pemeriksaan mikrobiologi utk air,
makanan, & udara
 PEMERIKSAANAIR

AIR:
a) Kebutuhan pokok → harus memenuhi standar
fisik, kimia, bakteriologis
b) Sarana penularan penyakit → terkontaminasi
feses manusia →waterborne disease oleh
bakteri, virus, & parasit
 PEMERIKSAANKUANTITATIFAIR
Menghitung jumlah kuman hidup dlm air:
a) Metode filtrasi
b) Metode pengenceran (pour platting)
1 ml sampel air diencerkan bertingkat (10-1, 10-2, 10-3,
dst) → ditanam pada media NA yg masih setengah cair
(45-50oC) → hitung koloni bila 30-300 → x pengenceran

Syarat air sehat menurut WHO → bakteri ≤ 100 /ml

 PEMERIKSAANSEMI KUANTITATIFAIR
Mendeteksi adanya kontaminasi air oleh
feses manusia:
a) Indikator → E. coli, S. faecalis , C. perfringens
b) Cara:
1. Presumptive coliform test
2. Confirm test
3. Complete coliform test
 PRESUMPTIVECOLIFORMTEST
a) Pendugaan kemungkinan adanya bakteri coliform dlm air
b) Tidak memastikan jumlah kuman, hanya most probable number
Prinsip:
Coliformdlm media LB → gas + asam → tabung 5-1-1 →
tabel
Mc.Crady → … . . Coliform / 100ml (MPN)
• @10ml → 5 tabung media lactose broth (LB),
•1ml tabung ke-6,
• 0,1ml tabung ke-7
Hasil:
Perubahan warna media & terbentuk gas pd tabung
durham
Syarat air sehat menurut WHO → ≤ 10 coliform/100ml
CONFIRMCOLIFORMTEST= DIFFERENTIALCOLIFORMTEST
Membedakan apakah bakteri coliform dari
pemeriksaan presumptive merupakan bakteri fekal
(typical) atau non-fekal (atypical)

Cara:
a) Media selektif utk bakteri
b) Inkubasi → hanya bakteri coliform dari feses saja
yg melakukan fermentasi dg membentuk gas

Hasil:
… … faecal coli/ 100 ml (MPN)
 COMPLETETEST
Memastikan bahwa bakteri yg tumbuh adl. E. coli
Sampel → air kran, sungai, sumur/ kolam
Cara:
a) Subkultur pd TSI agar dg pemeriksaan IMViC:
E.coli: TSIagar → asam,gas (+), H2S(-); IMViC → Indol
(+), Metil red (+), Voges Proskauer (-), Citrat (-)
b) Subkultur pd Endo agar & EMB agar:
E.coli: Endoagar → merah muda metalik
EMB agar → merah kebiruan metalik
c) Subkultur pd BGLB & air pepton:
E. coli: BGLB → keruh, kuning gas (+)
Air pepton → membentuk triptofan (uji indol(+))

Hasil:
… … E. coli/ 100 ml (MPN)

Syarat air sehat menurut WHO → 0 E. coli/100ml

 PEMERIKSAANMAKANAN
Susu
✓ dijual eceran dlm botol yg belum dibuka
✓ dlm kontainer → aduk (aseptik) → ambil 125cc dlm botol

Sumber kontaminasi:
a) Sapi (feses, luka)
b) Manusia

Cara mencegah infeksi:

a) Mencegah infeksi pd sapi (tuberculosis, brusellosis)
b) Pengumpulan & penyimpanan sususcr higienis
c) Pemrosesan susu
 MACAM SUSU UTK PEMROSESAN
a) Untreated milk → susu sapi dg uji tuberkulin negatif →
tes reduksi metilen blue > 30’
b) Pasteurized milk → susu telah dipanaskan pd 63-66oC
(30’) atau 72oC (15’) → tes reduksi MB> 6 jam, uji
fosfatase ≤ 10µg/ml, bakteri coliform = 0/ml
c) Ultraheat treated (UHT) → dipanaskan 133oC (1’) →
wadah steril → < 1000 koloni/ml
d) Sterilized milk → dipanaskan 100oC (> 5’)
e) Premium milk → < 15.000 bakteri/ ml dan 0 coliform/ ml
f) Standard milk → < 50.000 bakteri/ml dan 0 coliform/ml
PEMERIKSAANKUANTITATIF

a) Metode agar plate (pour platting) → colony count test

b) Metode mikroskopik langsung (cara Breed)
• 0,01 ml susu →ratakan pd slide seluas 1 cm
→ fiksasi
• cat MB → hitung
 PEMERIKSAANSEMIKUANTITATIF
a) Coliform test
b) Tes reduksi MB
Dasar:
Hidrogen dibebaskan dr metabolisme bakteri akan
mereduksi MB → metilen putih (dekolorisasi)
Cara:
10 mlsusu+ 1 mlMB → kocok→ inkubasi 37oC → amati
setiap 30’
Pengamatan:
Waktu utk terjadi dekolorisasi 4/5 bagian susu(untreated
milk = > 30’; pasteurized milk = > 6 jam)
c) Tes fosfatase
Dasar:
Pemanasan baik → inaktivasi enzim fosfatase dlm susu →
pembebasan p-nitrofenol (warna kuning) dr p-nitrofenol fosfat
menurun

d) Tes turbidimetri
Dasar:
Pemanasan 100oC → semua protein susu membentuk
presipitat jika ditambahkan ammonium sulfat → jernih
e) Pemeriksaan kuman tuberkulosis
✓Sentrifuse 1500rpm, 30’ → sedimen → pengecatan ZN
atau hewan coba

f) Pemeriksaan infeksi Brucella

✓ Kultur
✓ Milk ring test: deteksi antibodi thd Brucella
1ml susu+ 1 tetes suspensiantigen Brucella yg dicat biru
(hematoksilin) → kocok → inkubasi 37oC, 1 jam → cincin biru
di permukaan (+)
 PEMERIKSAANMAKANAN
Makanan/ minuman kaleng
Kaleng bertutup plastik → plastik diambil, tutup kaleng
dibasahi alkohol → flaming → ambil sampel

Padat: Sampel bagian tengah & permukaan → ambil dg

sendok & tanggan steril
Cair: Kocok 25x → ambil dg pipet steril

Pemeriksaan:
a) Colony count test
b) MPN coliform, MPN E. coli
c) Kuman patogen: V. cholerae, Salmonella, Shigella, S.
aureus, C. botulinum
 PEMERIKSAANUDARA
a) Ruang operasi
b) Ruang pemrosesan makanan/ obat-obatan ttt
c) Ruang perawatan (ada letupan kasus infeksi)

Jumlah bakteri di udara pd suatu waktu tergantung pd:

a) Sirkulasi udara
b) Banyak orang, gerakan
c) Sinar matahari
Udara sehat tdk mengandung bakteri patogen
Indikator: S. aureus, S. pyogenes

Standar bakteri udara:

a) Lingkungan umum → 50 bakteri/ menit
b) Kamar operasi biasa → 10 kuman/ menit
c) Kamar operasi bedah saraf → 1 kuman/ menit
Cara pengambilan sampel utk pemeriksaan bakteri udara:
a) Settle down plate → meletakkan 5 media agar darah
atau 3x 4m ruangan dlm waktu ttt (15’, 30’, 1 jam, dst)
→ inkubasi → hitung

b) Slit sample → menggunakan alat pengumpul udara yg

dpt menyedot volume ttt & langsung mengarahkannya pd
media pertumbuhan → inkubasi → hitung
 ANTISEPTIK– CUCI TANGAN

Tujuan:
1) Potensi jenis antiseptik
2) Efektivitas cuci tangan
 PEMERIKSAANPOTENSI ANTISEPTIK
Tujuan:
1) Pemeriksaan & potensi jenis antiseptik

a) Pre and post diberi Antiseptik yg digunakan:

antiseptik pd media a) Fenol 5%
NA b) Iodium 2%
b) Inkubasi 37oC 24 jam c) Sublimat 2%
c) Hitung bakteri yg d) Alkohol 70%
tumbuh
e) Sabun
 PEMERIKSAANPOTENSI
Tujuan: DISINFEKTAN
1) Pemeriksaan & potensi jenis disinfektan

a) KA: spreader glass-rod yg Disinfektan yg digunakan:

telah dicelup suspensi
a) Alkohol 70%
bakteri → ratakan di
media NA berlabel KA b) Povidone iodine 10%
b) Rendam dlm disinfektan c) Fenol 5%
selama 1 menit → ratakan
di media NA berlabel TA d) Klorin 0,5%
c) Inkubasi 37oC 24 jam
d) Hitung & bandingkan jumlah
bakteri yg tumbuh
 CUCI TANGAN
Tindakan hand hygiene guna mencegah penularan infeksi
a) Pre and post cuci
tangan pd media NA/
BA
b) Inkubasi 37oC 24 jam
c) Hitung & bandingkan
jumlah bakteri yg
tumbuh
https://youtu.be/a-K5HBUuKDo
TERIMA KASIH