Modul Media Dan Reagensia

MODUL
MEDIA DAN REAGENSIA
PROGRAM STUDI DIV TEKNOLOGI

LABORATORIUM MEDIK
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA

LUBUK PAKAM
Modul Bahasa Indonesia
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM
Visi
Menjadi Institut yang unggul dan profesional dalam bidang kesehatan di tingkat
nasional dan asia tahun 2028.
Misi
1. Menyelenggarakan pendidikan dan pengajaran yang unggul, berkarakter, dan
kompeten yang adaptif terhadap perkembangan ilmu pengetahuan, teknologi, seni
dan globalisasi;
2. Menyelenggarakan penelitian yang inovatif, produktif dan responsif terhadap ilmu
pengetahuan, teknologi dan kebutuhan masyarakat;
3. Menyelenggarakan kegiatan pengabdian kepada masyarakat berlandaskan nilai
dan tanggung jawab sosial; dan
4. Menjalin kerjasama yang baik dengan stakeholder mulai dari pemerintah, dunia
usaha dan masyarakat sebagai pengguna lulusan.
Program Studi Teknologi Laboratorium Medik

Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra Lubuk Pakam
FAKULTAS FARMASI
Visi
Menghasilkan lulusan yang unggul dan professional dalam mutu pendidikan di bidang
Farmasi Klinis dan Komunitas serta Mikrobiologi Molekuler Klinis yang Mampu Bersaing di
tingkat Nasional dan Asia Tahun 2022.
Misi
1) Menyelenggarakan proses belajar mengajar yang kondusif dengan sistem yang
mendukung pada FF sehingga pembelajaran tersebut menghasilkan prodi yang
dapat menghasilkan alumni berkarakter unggul, kompeten, dan excellent service.
2) Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif dan handal di
berbagai fasilitas pelayanan kesehatan masyarakat.
3) Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian bidang Farmasi Klinis dan
Komunitas dan Mikrobiologi Molekuler Klinis dengan menggunakan pendekatan
riset dalam bidang Farmasi dan Teknologi Laboratorium Medik.
4) Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset
untuk menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Farmasi dan Teknologi
Laboratorium Medik
5) Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi,
dan stakeholders baik dalam maupun luar negeri

PROGRAM STUDI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK
Visi
Menjadi program studi yang unggul dan professional dalam bidang Mikrobiologi Molekuler
Klinis Tahun 2022
Misi
1. Menyelenggarakan pendidikan Teknologi Laboratorium Medik yang unggul dan
excelent service dalam bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis.
2. Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif diberbagai fasilitas
pelayanan kesehatan masyarakat.
3. Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian di bidang Mikrobiologi
Molekuler Klinis dengan menggunakan pendekatan riset dalam bidang Teknologi
Laboratorium Medik.
4. Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset untuk
menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis
5. Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi, dan
stakeholders baik dalam maupun luar negeri

KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Kuasa atas karunia dan izin-
Nya, sehingga kami dapat menyelesaikan Modul yang berjudul “Media dan Reagensia”
Pada kesempatan ini pula, kami mengucapkan terima kasih kepada pihak-pihak yang
mendukung dan mengarahkan kami sehingga Modul ini dapat di selesaikan dengan
baik dan bermanfaat dalam pembelajaran, kami menyadari bahwa dalam penyusunan
modul ini, masih banyak kekurangan yang di temui. Untuk itu, kami mengharapkan
adanya saran dan kritik yang sifatnya membangun demi kesempatan Modul ini.
Akhir kata, semoga Modul ini dapat memberikan manfaat bagi kita semua
terutama bagi para pembaca dan pelajar di bidang Media dan Reagensia.
Lubuk Pakam, 2021
Program Studi Teknologi Laboratorium Medik i

DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ...................................................................................................... i
DAFTAR ISI .................................................................................................................. ii
OVERVIEW/RUANG LINGKUP ..................................................................................... 1
1. DESKRIPSI MATA KULIAH .............................................................................. 1
2. RELEFANSI MATA KULIAH ............................................................................. 2
3. METODE PEMBELAJARAN DAN ALOKASI WAKTU ....................................... 2
4. PENGALAMAN BELAJAR MAHASISWA .......................................................... 4
BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................................... 5
A. LATAR BELAKANG .......................................................................................... 5
B. DEFINISI MEDIA DAN REAGENSIA ................................................................ 5
BAB II.MEDIA DAN REAGENSIA ................................................................................ 17
A. PENGERTIAN MEDIA DAN REAGENSIA ........................................................ 17
BAB III MEDIA REAGENSIA DAN BAHANNYA .......................................................... 23
A. PENGERTIAN REAGENSIA ............................................................................ 23
B. KELAS REAGENSIA ........................................................................................ 23
C. JENIS REAGENSIA ......................................................................................... 23
D. KEUNTUNGAN DAN KERUGIAN REAGENSIA BUATAN SENDIRI ................. 23
E. ETIKET ............................................................................................................ 23
BAB IV.MEDIA DAN REAGENSIA ............................................................................... 27
A. PENGERTIAN MEDIA ...................................................................................... 27

Program Studi Teknologi Laboratorium Medik ii
B. SYARAT – SYARAT MEDIA ............................................................................. 27
C. SECARA UMUM FUNGSI DARI SUATU MEDIA PERBENIHAN ...................... 27
D. BAHAN – BAHAN MEDIA PERTUMBUHAN .................................................... 24
E. JENIS – JENIS PERBENIHAN .......................................................................... 27
BAB V. MEDIA DAN REAGENSIA PADA MEDIA SELEKTIF ...................................... 40
A. PENGERTIAN MEDIA SELEKTIF .................................................................... 40
B. SYARAT – SYARAT MEDIA ............................................................................. 40
BAB VI. MACAM – MACAM REAGEN DILABORATORIUM ........................................ 43
A. PENGERTIAN REAGEN LABORATORIUM ..................................................... 43
BAB VII. UJI KUALITAS REAGEN ............................................................................... 46
A. PENGERTIAN REAGEN .................................................................................. 46
B. PENGERTIAN UJI KUALITAS REAGEN .......................................................... 46
C. UJI KULALITAS REAGEN ................................................................................ 46
D. CARA PENGUJIAN REAGEN .......................................................................... 46
E. MENJAGA KUALITAS REAGEN ....................................................................... 46
F. WAKTU UJI KUALITAS REAGEN ..................................................................... 46
BAB VIII CARA PERHITUNGAN DAN PEMBUATAN REAGEN .................................. 49
A. PENGERTIAN REAGEN .................................................................................. 49
B. MACAM – MACAM REAGEN ........................................................................... 49
C. KEGUNAAN REAGEN ..................................................................................... 49
D. CARA PERHITUNGAN PEREAKSI .................................................................. 49
E. PEMBUATAN REAGEN ................................................................................... 49

BAB IX. REAGEN DILABORATORIUM KLINIK ........................................................... 85
A. MENURUT TINGKAT KEMURNIAN REAGEN/ZAT KIMIA ............................... 85
B. MENURUT CARA PEMBUATAN ...................................................................... 85
C. JENIS REAGEN ............................................................................................... 85
D. KONDISI REAGEN ........................................................................................... 85
BAB X. MEDIA DAN REAGENSIA PADA LABORATORIUM HEMATOLOGI ............. 85
A. PENEGERTIAN MEDIA DAN REAGENSIAN ................................................... 85
B. LABORATORIUM HEMATOLOGI .................................................................... 85
BAB XI. REAGENSIA IODOMETRI .............................................................................. 85
A. PENGERTIAN .................................................................................................. 85
BAB XII. PERSYARATAN REAGENSIA DAN BAHAN ACUAN PADA
LABORATORIUM KIMIA ........................................................................................ 85
A. PERSYARATAN REAGEN DAN BAHAN ACUAN ............................................ 85
BAB XIII. REAGEN BENEDICT .................................................................................... 89
A. PENGERTIAN REAGEN BENEDICT ............................................................... 89
B. BENTUK DAFTAR PUSTAKA .......................................................................... 89
C. PENYUSUNAN DAFTAR PUSTAKA ................................................................ 89
BAB XIV. PEMBUATAN REAGENSIA KUALITATIF KIMIA FARMASI ........................ 89
A. PEMBUATAN DIAZO A DAN DIAZO B ............................................................. 89
B. PEMBUATAN PEREAKSI KIMIA KLINIK .......................................................... 89
C. PEMBUATAN INDIKATOR ............................................................................... 89
D. PEMBUATAN LARUTAN DASAR .................................................................... 89

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................................... 90

OVERVIEW/RUANG LINGKUP
1. DESKRIPSI MATA KULIAH
Mata kuliah Media dan Reagensia merupakan mata kuliah yang bersifat wajib
ditempuh mahasiswa, tujuannya adalah untuk membekali mahasiswa pengetahuan dan
pemahaman tentang sistem prinsip dasar dan utama adalah agar mahasiswa dapat
memahami cara menguji suatu bahan dengan baik. Kegiatan yang ada di laboratorium,
dan sudah seharusnya Anda melakukan dalam menginokulasi mikroba atau biakan
mikroba yang sudah ditentukan dengan baik . Secara garis besar kita mempelajari
pengujian suatu bahan itu dengan baik dan teliti. Evaluasi belajar mahasiswa dilakukan
melalui proses belajar dan pencapaian kompetensi.
Kompetensi:
Pada Akhir perkuliahan mahasiswa mampu:
a. Menjelaskan Media dan konsepnya
b. Menjelaskan Reagensia dan konsepnya
c. Menjelaskan macam – macam reagen dilaboratorium
d. Menjelaskan uji kualitas reagen
e. Menerapkan media dan reagensia pada media selektif
f. Memahami perhitungan dan pembuatan Reagen
g. Memahami reagen dilaboratorium klinik
h. Menjelaskan persyaratan Reagensia dan acuan pada laboratorium kimia
Program Studi Teknologi Laboratorium Medik 1

2. RELEFANSI MATA KULIAH
1. Mampu memahami tentang definisi dan mengenal bahan dari Media dan
Reagensia
2. Mampu memahami tentang Reagensia dan konsepnya
3. Mampu memahami tentang Media dan Reagensia dan bahannya
4. Mampu memahami tentang Media dan Reagensia pada Media selektif
5. Mampu memahami tentang Macam – macam Reagen dilaboratorium
6. Mampu memahami tentang Uji kualitas Reagen
7. Mampu memahami tentang Cara perhitungan dan pembuatan Reagen
8. Mampu memahami Reagen dilaboratorium klinik
9. Mampu memahami tentang Media dan Reagensia pada laboratorium
hematologi
10. Mampu memahami tentang Reagensia Iodometri
11. Mampu memahami tentang Persyaratan Reagensia dan Bahan acuan pada
laboratorium kimia
12. Mampu memahami tentang Reagen benedict
13. Mampu memahami tentang Pembuatan Reagensia kualitatif kimia farmasi
3. METODE PEMBELAJARAN DAN ALOKASI WAKTU
Pertemuan dilaksanakan oleh Tim dosen dengan perincian :
 Pertemuan 1-8 diberikan oleh dosen Pengasuh I
 Sedangkan pertemuan 10-17 diberikan oleh dosen Pengasu II

 Pada pertemuan 1 sampai 6, perkuliahan diberikan dalam bentuk penjelasan
oleh dosen di depan kelas dengan berbagai alat bantu seperti LCD viewer,
Laptop, dan white board.Bahan kuliah berupa

print out Power Point maupun buku ajar diberikan sejak awal kuliah. Selain itu,
untuk memacu mahasiswa belajar, diberikan quiz yang akan diselenggarakan
setiiap dua kali pertemuan (sesuai jadwal).
 Pada pertemuan 7-8, pembelajaran berupa presentasi mahasiswa yang dibagi
dalam 4 kelompok. Pada waktu-waktu tertentu dosen memberikan tugas
(untuk didiskusikan di kelas), mini quiz, dan tugas membuat resume hasil
diskusi yang diberikan selama perkuliahan. Bahan kuliah. Anatomi Fisiologi II
juga dapat diakses melalui internet (eLisa). Materi tugas yang diberikan (untuk
didiskusikan di kelas) berupa pembuatan makalah ataupun powerpoint
mengenai beberapa system yang tidak dibicarakan dalam waktu yang
terjadwal, ataupun mencari materi/bahan terbaru tentang berbagai system
organ tubuh termasuk fungsinya, baik melalui jurnal maupun melalui internet.
Tugas berupa makalah atau powerpoint dikumpulkan pada jadwal yang
ditentukan. Diskusi dilaksanakan melalui mekanisme horse shoe group.
Pembelajar dibagi dalam beberapa kelompok, kemudian tutor memberi
penjelasan secukupnya tentang pokok bahasan yang akan dibuat artikel dan
didiskusikan oleh seluruh kelompok. Saat diskusi, seluruh anggota kelas
berhak untuk mengajukan pertanyaan. Yang menjawab pertanyaan adalah
masing-masing anggota kelompok presentator.

4. PENGALAMAN BELAJAR MAHASISWA
Pengalaman belajar mahasiswa yang diwujudkan dalam deskripsi tugas yang
harus dikerjakan oleh mahasiswa selama satu semester, adalah bentuk kegiatan belajar
mahasiswa yang dipilih agar mahasiswa mampu mencapai kemampuan yang diharapkan
di setiap tahapan pembelajaran. Proses ini termasuk di dalamnya kegiatan asesmen
proses dan hasil belajar mahasiswa.

PENDAHULUAN BAB
I
A. LATAR BELAKANG
Hampir semua proses kimia berlangsung dalam larutan sehingga penting untuk
memahami sifat - sifatnya. Larutan adalah sesuatu yang penting bagi manusia dan
mahluk hidup pada umumnya.
Reaksi – reaksi kimia berlangsung antara dua campuran zat, bukannya antara zat
murni.larutan pada dasarnya adalah fase yang homogen yang mengandung lebih dari
satu komponen.komponen yang terdapat dalam jumlah besar disebut pelarut atau
solvent sedangkan komponen dalam jumlah kecil disebut zat terlarut atau solute.
Konsentrasi dalam suatu larutan didefinisikan sebagai jumlah solute yang ada dalam
jumlah larutan atau pelarut. Konsentrasi dapat dinyatakan dalam beberapa cara antara
lain molaritas, molalitas, normalitas dan sebagainnya.larutan berperan penting dalam
kehidupan sehari hari. Tubuh manusia menyerap mineral , vitamin, dan makanan
dalam bentuk larutan. Obat obatan biasanya merupakan larutan air atau alcohol dari
senyawa fisiologis aktif. Larutan biasanya terdiri dari dua zat atau lebih yang
merupakan campuran homogen.
Konsentrasi adalah kuantitas relative suatu zat tertentu didalam larutan.
Konsentrasi merupakan factor penting yang menentukan cepat atau lambatnya reaksi
berlangsung.larutan yang mengandung sebagai besar solute relatif terhadap pelarut,
berarti larutan tersebut konsentrasi ringgi atau pekat. Sebaliknya bila mengandung
sejumlah kecil solute maka konsentrasinya rendah atau encer.

Media merupakan material nutrien yang dipersiapkan untuk pertumbuhan
mikroorganisme di laboratorium. Media pertumbuhan yang baik adalah media yang
mengandung semua nutrien yang diperlukan oleh organisme yang akan ditumbuhkan.
Nutrisi yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroba diklasifikasikan menjadi dua
kategori yaitu fisikal dan kimiawi. Aspek fisik yaitu temperatur, pH, tekanan osmotik,
kondisi udara. Aspek kimia meliputi sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfor, trace
element, oksigen, dan faktor pertumbuhan organik (Murwani, 2015).
Salah satu media pembiakan yang paling baik dan biasa digunakan adalah media
Sabouraud Dextrose Agar (SDA) karena memilki pH yang rendah (pH 4,5 sampai 5,6)
sehingga menghambat pertumbuhan bakteri yang membutuhkan lingkungan yang
netral dengan pH 7,0 dan suhu optimum untuk pertumbuhan antara 25-300C
(Cappucino, 2014).
Media Sabouraud Dextrose Agar (SDA) merupakan media yang tersusun dari
komponen glukosa 40 g, pepton 10 g dan agar 15 g yang digunakan untuk
menumbuhkan jamur. Media Sabouraud Dextrose Agar(SDA) dibuat oleh pabrik atau
perusahaan tertentu dalam sediaan siap pakai (ready for use), harganya mahal,
higroskopis dan hanya dapat diperoleh pada tempat-tempat tertentu (Aini dan Rahayu,
2015).
Media tumbuh merupakan media yang dipersiapkan untuk digunakan sebagai
media penumbuh mikroba. Berdasarka bentuknya, media tumbuh dapat dibagi
menjadi cair (broth) dan media padat ( agar). Perbedaan dari keduanya yaitu
penambahan tepung adalah untuk memadatkan media. Sedangkan media padat

dibagi menjadi 3 macam yaitu : media agar tegak (deep agar), agar miring (slants
agar), dan lempeng agar (plate agar).
Pada media cair prinsip utama dalam menginokulasi mikroba atau biakan adalah
menumbuhkan mikroba tersebut dan mengamati pola pertumbuhannya.
Media cair merupakan media yang tidak mengandung agar, contohnya LB dan NB.
1. DEFINISI MEDIA DAN REAGENSIA
Media adalah suatu campuran bahan yang mengandung nutrisi untuk pembiakan
atau pertumbuhan, mempertahankan dan menyeleksi bakteri yang dibiakan secara invitro
(diluar tubuh) sehingga dapat dijelaskan bakterinya Sedangkan Reagensia itu sendiri
adalah suatu zat atau senyawa atau larutan dalam
konsentrasi tertentu yang digunakan untuk mengetahui penjelasan dari suatu analisa.
Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrient) yang
digunakan untuk membiakkan mikroba. Media terdapat bermacam-macam yang
Dapat digunakan untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis dan
perhitungan jumlah mikroba maupun untuk transport specimen dari suatu tempat
ke tempat pemeriksaan mikrobiologi. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa
molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dalam pemeriksaan
mikrobiologi, media menjadi suatu hal yang penting agar mikroba yang dapat hidup dan
menentukan bahwa mikroba yang diperiksa adalah benar-benar mikroba yang dicari atau
yang diharapkan.Upaya pembiakan mikroorganisme memerlukan kondisi lingkungan yang
sesuai agar bakteri dapat berkembang dengan baik. Dalam pertumbuhannya,

mikroorganisme memerlukan bahan-bahan organik dan ion-ion pendukung sebagai
sumber energi dan katalis (Morse & Meitzner, 2010).
Faktor-faktor yang penting bagi proses pembiakan mikroorganisme yaitu nutrisi,
oksigen dan gas lain, kelembaban, pH media, suhu, serta kontaminan. Media yang baik
untuk pembiakan mikroorganisme harus mengandung unsur-unsur seperti karbon,
nitrogen, fosfat inorganic, sulfur, logam, air, dan mineral (Zimbro et al. 2009 )



MEDIA DAN REAGENSIA

BAB
II
A. Pengertian Media dan Reagensia
Media dan Reagensia adalah suatu bidang studi yang dalam pembelajarannya
membahas tentang persyaratan – persyaratan dan bagaimana cara menguji suatu
bahan.
1. Pengertian Media
Media merupakan suatu campuran bahan-bahan tertentu dengan aquadest yang
dapat menimbulkan mikro organisme pada derajat keasaman dan inkubasi tertentu,
atau bahan yang di gunakan untuk memperkembangakan mikro organisme di
laboratorium secara invitro. Sebelum di gunakan media harus dalam keadaan steril,
artinya tidak di tumbuhi oleh mikroba lain yang tidak di harapkan.
Persyaratan-persyaratan agar media dapat di tumbuhi dan mikroba dapat berkembang
dengan baik yaitu :
a. Dalam media harus terkandung semua unsur hara yang di perlukan untuk
pertumbuhan dan perkembangbiakan bakteri.
b. Media harus mempunyai tekanan osmosa dan PH yang sesuai dengan
kebutuhan mikroba.
c. Media harus keadaan steril.
2. Pengertian Reagensia

Reagensia adalah larutan zat dalam komposisi dan konsentrasi tertentu yang
digunakan untuk mengenali zat lain yang belum diketahui sehingga diketahui isi zat
lain tersebut. Reagensia yang baik harus memiliki sifat : mudah didapat, bahan murni,
mudah dimurnikan, mudah pembuatannya, stabil, tahan lama, dapat membantu reaksi
kimia, bereaksi sensitif dan spesifik dengan zat uji.
Reagensia merupakan pereaksi yang paling banyak digunakan dalam
Laboratorium Klinik untuk melaksanakan kegiatan analisa hingga didapatkan hasil
kegiatan uji. Untuk itu sebuah laboratorium selayaknya harus mempersiapkan
reagensia berupa larutan atau bubuk yang akan digunakan untuk mereaksikan dengan
bahan uji.
Beberapa Reagensia memiliki komposisi yang unik sehingga perlu teknik atau
proses pelarutan tertentu, ada juga dengan membagi larutan terlebih dahulu kemudian
dicampur larutannya, ada juga yang teknik pelarutan menggunakan katalisator seperti
pemanasan, pembentukan ikatan kompleks dan penggunaan pelarut khusus.
Reagensia yang telah dibuat harus diberi label dalam botolnya supaya tidak
tertukar, disertai dengan pemberian konsentrasi pada label tersebut. Botol yang
umumnya digunakan terbuat dari borosilikat berwarna gelap atau coklat agar terhindar
dari kerusakan akibat cahaya matahari langsung. Konsentrasi yang umum digunakan
misal pada Indikator menggunakan persen (%), atau larutan asam basa menggunakan
normalitas (N) atau molaritas (M).
Apabila reagensia yang telah rusak atau telah lama dibuat, maka perlu dibuang
dan digantikan dengan yang baru. Ada beberapa reagensia yang stabil hingga

bertahun-tahun dan ada juga yang stabil hanya 1 bulan saja. Oleh sebab itu perlu
pengetahuan lebih dalam kestabilan tiap reagensia yang dibuat.

REAGENSIA DAN KONSEPNYA

BAB
III
A. Pengertian
Reagensia adalah larutan zat dalam komposisi dan konsentrasi tertentu yang
digunakan untuk mengenali zat lain yang belum diketahui sehingga diketahui isi zat lain
tersebut. Reagensia yang baik harus memiliki sifat : mudah didapat, bahan murni, mudah
dimurnikan, mudah pembuatannya, stabil, tahan lama, dapat membantu reaksi kimia,
bereaksi sensitif dan spesifik dengan zat uji.
Reagensia merupakan pereaksi yang paling banyak digunakan dalam Laboratorium
Klinik untuk melaksanakan kegiatan analisa hingga didapatkan hasil kegiatan uji. Untuk itu
sebuah laboratorium selayaknya harus mempersiapkan reagensia berupa larutan atau
bubuk yang akan digunakan untuk mereaksikan dengan bahan uji.
Beberapa Reagensia memiliki komposisi yang unik sehingga perlu teknik atau proses
pelarutan tertentu, ada juga dengan membagi larutan terlebih dahulu kemudian dicampur
larutannya, ada juga yang teknik pelarutan menggunakan katalisator seperti pemanasan,
pembentukan ikatan kompleks dan penggunaan pelarut khusus.
Reagensia yang telah dibuat harus diberi label dalam botolnya supaya tidak
tertukar, disertai dengan pemberian konsentrasi pada label tersebut. Botol yang umumnya
digunakan terbuat dari borosilikat berwarna gelap atau coklat agar terhindar dari
kerusakan akibat cahaya matahari langsung. Konsentrasi yang umum digunakan misal
pada Indikator menggunakan persen (%), atau larutan asam basa menggunakan
normalitas (N) atau molaritas (M).

Apabila reagensia yang telah rusak atau telah lama dibuat, maka perlu dibuang
dan digantikan dengan yang baru. Ada beberapa reagensia yang stabil hingga bertahun-
tahun dan ada juga yang stabil hanya 1 bulan saja. Oleh sebab itu perlu pengetahuan
lebih dalam kestabilan tiap reagensia yang dibuat.
B. KELAS REAGENSIA
Berdasarkan kemurniannya, reagensia dibagi menjadi beberapa kelas, yaitu :
a. Kelas Teknis (t)
Kelas ini, kemurnian reagensia sangat rendah, tidak dapat digunakan untuk
analisa laboratorium, hanya digunakan dalam keperluan teknis saja, namun masih
bisa digunakan sebagai pelarut, pemeriksaan kualitatif.
b. Kelas Farmakope (f)
Kelas ini memiliki kemurnian yang disyaratkan oleh farmakope. Reagensia ini
kurang cocok untuk keperluan analisa di laboratorium karena masih kurang murni.
Kelas Chemical Pure (cp)
c. Kelas ini memiliki kemurnian yang sangat tinggi, cocok untuk digunakan dalam
analisa laboratorium. Memiliki kemurnian yang cukup tinggi hingga 99,90%
d. Kelas Pro Analis (pa)
Kelas ini hampir sama dengan kelas chemical pure, merupakan kelas yang sangat
murni, sangat cocok untuk keperluan analisis, memiliki kemurnian diatas 99,99%
hingga mencapai 100%.

C. JENIS REAGENSIA
Berdasarkan jenis reagensia, dikelompok dalam 2 jenis yaitu :
1. Reagensia Komersial
Direkomendasikan sebagai reagen yang digunakan dalam analisa di laboratorium
karena sudah diatur komposisi, ketelitian hingga keakuratan untuk pemeriksaan.
2. Reagensia Buatan Sendiri
Reagensia yang dibuat sendiri karena tidak tersedianya reagensia komersial.
D. KENTUNGAN DAN KERUGIAN REAGENSIA BUATAN SENDIRI
1. Keuntungan
 Dapat dibuat segar sehingga penundaan dan kerusakan, baik dalam transportasi
dan penyimpanan dapat dihindari.
 Penggunaan zat pengawet dapat dihindari.
 Bila timbul masalah mengenai reagen dan standar, dapat diketahui penyebabnya
sebab proses pembuatan diketahui.
 Bila reagensia terkontaminasi atau rusak, dapat segera diganti dengan yang baru
dengan membuat sendiri, tanpa harus menunggu pengiriman reagensia.
 Memberikan penghematan kepada laboratorium.
2. Kerugian
 Sulit di standarisasi
 Biasanya tidak menjamin uji quality control (QC)
 Tidak dapat ditentukan stabilitasnya.

E. ETIKET
Setiap reagensia yang dibuat selalu tercantum tulisan beserta petunjuk yang biasa
disebut sebagai etiket. Etiket yang harus dicantum pada reagensia yang baru saja dibuat
meliputi :
1. Nama Reagensia
2. Konsentrasi (satuan yang digunakan)
3. Tanggal Pembuatan
4. Tanggal Pemakaian
5. Batas kadaluarsa
6. Pembuat Reagensia
7. Petunjuk Lainnya
Sebaiknya etiket terbuat dari bahan yang tidak mudah rusak terutama akibat
terkena reagensia tersebut, merekat kuat, mudah dilepas atau dibersihkan dan mudah
dibaca. Botol yang digunakan sebaiknya terbuat dari kaca, lebih baik berwarna coklat atau
gelap agar tidak dirusak oleh pengaruh sinar matahari.

MEDIA REAGENSIA DAN BAHAN PEMBUATAN

BAB
IV
A. PENGERTIAN MEDIA
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari
campuran zat-zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk
pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-
molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media
pertumbuhan dapat dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur murni dan juga
memanipulasi komposisi media pertumbuhannya sesuai kebutuhan bakteri. Oleh
karena bakteri yang berbeda memerlukan kebutuhan akan nutrisi yang berbeda pula,
sehingga dikembangkan berbagai macam media pertumbuhan untuk digunakan dalam
diagnosa mikrobiologi. Media biakan yang mampu mendukung optimalisasi
pertumbuhan milroorganisine harus dapat memenuhi persyaratan nutrisi bagi
mikroorganisme. Unsur tersebut berupa garam organik, sumber energi (karbon),
vitamin dan zat pengatur tumbuh (ZPT). Selain itu dapat pula ditambahkan komponen
lain seperti senyawa organik dan senyawa kompleks lainnya.
B. SYARAT-SYARAT MEDIA
 Media harus mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroba
 Media harus mempunyai tekanan osmosa, tegangan permukaan dan pH yang
sesuai
 Media tidak mengandung zat penghambat kecuali yang sengaja ditambahkan
dengan pertumbuhannya media selektif atau one-purpose media

 Media harus steril
C. SECARA UMUM, FUNGSI DARI SUATU MEDIA PERBENIHAN
DIANTARANYA:
 Isolasi
 Memperbanyak
 Pengujian sifat-sifat fisiologis atau biokimia
 Perhitungan jumlah mikroba
 Menyimpan mikroba
D. BAHAN-BAHAN MEDIA PERTUMBUHAN
a. Bahan dasar
1. Air (H20) sebagai pelarut
2. Agar (dari rumput laut) yang berfungsi untuk pemadat media. Agar sulit
didegradasi oleh mikroorganisme pada umumnya dan mencair pada suhu 45°C.
3. Gelatin adalah polimer asam amino yang diproduksi dari kolagen.Kekurangannnya
adalah lebih banyak jenis mikroba yang mampu menguraikannya dibanding agar.
4. Silica gel, yaitu bahan yang mengandung natrium silikat. Fungsinya juga sebagai
pemadat media. Silica gel khusus digunakan untuk memadatkan media bagi
mikroorganisme autotrof obligat.
5. Nutrisi atau zat makanan
6. Nikroba dapat menggunakan sumber N anorganik seperti urea. Media harus
mengandung unsur-unsur yang diperlukan untuk metabolisme sel yaitu berupa
unsur makro seperti C, H, O, N, P, unsur mikro seperti Fe, Mg 7.

7. Sumber karbon dan energi yang dapat diperoleh berupa senyawa organik atau
anorganik sesuai dengan sifat mikrobanya.Jasad heterotroph memerlukan sumber
karbon organik antara lain dari karbohidrat, lemak, protein dan asam organik.
8. Sumber nitrogen mencakup asam amino, protein atau senyawa bernitrogen lain
dan sejumlah vitamin.
b. Bahan tambahan
Bahan-bahan tambahan yaitu bahan yang ditambahkan ke medium dengan
tujuan.tertentu, misalnya phenol red (indikator asam basa) ditambahkan untuk
indicator perubahan pH akibat produksi asam organik hasil metabolisme. Antibiotik
ditambahkan untuk menghambat pertumbuhan mikroba nontarget/kontaminan.
c. Bahan lain yang sering digunakan dalam pembuatan media
1. Peptone, peptone adalah produk hidrolisis protein hewani atau nabati seperti otot,
liver, darah, susu, casein, lactalbumin, gelatin dan kedelai Komposisinya
tergantung pada bahan asalnya dan bagaimana cara memperolehnya.
2. Meat extract. Meat extract mengandung basa organik terbuat dari otak.limpa,
plasenta dan daging sapi.
3. Yeast extract. Yeast extract terbuat dari ragi pengembang roti
atau pembuat alcohol. Yeast extract mengandung asam amino yang lengkap &
vitamin (Bcomplex).
4. Karbohidrat. Karbohidrat ditambahkan untuk memperkaya pembentukan asam
amino dan gas dari karbohidrat. Jenis karbohidrat yang umumnya digunakan
dalam amilum, glukosa, fruktosa, galaktosa, sukrosa, manitol, dll. Konsentrasi
yang ditambahkan untuk analisis fermentasi adalah 0,5-1%

E. JENIS MEDIA PERBENIHAN
Oleh karena bakteri yang berbeda memerlukan kebutuhan akan nutrisi yang berbeda
pula, sehingga dikembangkan berbagai macam media pertumbuhan untuk digunakan
dalam diagnosa mikrobiologi.
Media perbenihan terdiri dari dua bentuk yaitu bentuk cair dan padat (agar).
a. Media Perbenihan Padat
Media padat dibuat dengan penambahan bahan pengeras pada campuran bahan
gizi dan air. Biasanya digunakan agarosa yang memiliki sifat cair pada suhu ≥ 95°C
tetapi berbentuk padat pada suhu dibawah 50°C. Dengan kondisi inkubasi yang
sesuai bakteri dapat tumbuh dan berkembang dalam jumlah yang banyak sehingga
dapat dilihat tanpa menggunakan mikroskop. Pertumbuhan bakteri membentuk
kelompok yang terdiri dari satu jenis bakteri yang disebut koloni, dengan kata lain
dalam satu koloni adalah bakteri yang sama genus dan spesiesnya memiliki
karakteristik gen dan fenotip yang sama. Pembiakan bakteri yang terdiri dari satu
macam koloni yang seragam disebut dengan pembiakan murni. Pembiakan yang
murni diperlukan untuk identifikasi bakteri, untuk memudahkan pengambilan koloni
yang sama ketika ditanam pada media identifikasi. Salah satu contoh media padat,
yaitu;
Plate Count Agar (PCA)
PCA digunakan sebagai medium untuk mikroba aerobik dengan inokulasi di atas
permukaan. PCA dibuat dengan melarutkan semua bahan (casein enzymic
hydrolisate, yeast extract, dextrose, agar) hingga membentuk suspensi 22.5 g/L
kemudian disterilisasi pada autoklaf (15 menit pada suhu 121°C). Media PCA ini baik

untuk pertumbuhan total mikroba (semua jenis mikroba) karena di dalamnya
mengandung komposisi casein enzymic hydrolisate yang menyediakan asam amino
dan substansi nitrogen komplek lainnya serta ekstrak yeast mensuplai vitamin B
kompleks.Medium padat memiliki struktur fisik (kaldu tidak memiliki struktur) dan ini
memungkinkan bakteri tumbuh di informatif atau berguna cara fisik (misalnya, sebagai
koloni atau dalam garis). Solid media biasanya digunakan sebagai miring, menusuk,
piring petri. Ilustrasi, medium padat
b. Media Perbenihan Cair
Pada media cair, bahan-bahan gizi dilarutkan dalam air sehingga pertumbuhan bakteri
ditandai dengan perubahan warna madia menjadi keruh, semakin banyak bakteri
tumbuh akan semakin keruh larutan. Salah satu contoh media cair yaitu;
Trypticase Soy Broth (TSB)
TSB adalah media broth diperkaya untuk tujuan umum, untuk isolasi, dan
penumbuhan bermacam mikroorganisme. Media ini banyak digunakan untuk isolasi
bakteri dari spesimen laboratorium dan akan mendukung pertumbuhan mayoritas
bakteri patogen.
Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam amino
dan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi untuk
bermacam mikroorganisme. Dekstrosa adalah sumber energi dan natrium klorida
mempertahankan kesetimbangan osmotik. Dikalium fosfat ditambahkan sebagai buffer
untuk mempertahankan pH biokimia bakteri medium cair pada aplikasi uji.
d. Solid vs media pertumbuhan cair
Escherichia coli atau sel-sel E.coli dapat tumbuh pada padat atau dalam medium

pertumbuhan cair di bawah kondisi laboratorium. Padat dan media cair mungkin
memiliki komposisi yang sama persis kecuali bahwa media padat berisi agar-agar
1.5% ekstra. Klon E.coli yang berbeda mungkin memiliki sifat yang berbeda. Koloni
yang tumbuh pada media padat merupakan klon yang berbeda. Koloni ini digunakan
untuk seleksi klon di kloning DNA dan ekspresi protein dalam studi biologi molekuler.
Sebuah klon E.coli yang dipilih dapat ditanam dalam jumlah besar dalam media cair.
Sebuah media cair sering digunakan untuk DNA plasmid dan produksi protein
rekombinan. E.coli sel memiliki sifat pertumbuhan yang berbeda di dalam media padat
atau cair meskipun mereka memiliki komposisi yang sama kecuali agar. Sebagai
contoh, sel-sel E.coli dapat tumbuh di piring medium padat pada pH 11, tetapi mereka
tidak dapat tumbuh dalam media cair dengan pH 9 atau lebih tinggi. Semua kondisi
pertumbuhan dibahas dibawah ini hanya berkaitan dengan media cair kecuali jika
dinyatakan lain.

MEDIA DAN REAGENSIA PADA MEDIA SELEKTIF

BAB
V
A. PENGERTIAN MEDIA SELEKTIF
Media selektif (selective medium) /media penghambat aalah media yang ditambah
zat kimia tertentu yang bersifat selektif untuk mencegah pertumbuhan mikroba lain
sehingga dapat mengisolasi mikroba tertentu, misalnya media yang mengandung kristal
violet pada kadar tertentu, dapat mencegah pertumbuhan bakteri gram positif tanpa
mempengaruhi bakteri gram negatif.
Media ini selain mengandung nutrisi juga ditambah suatu zat tertentu sehingga media
tersebut dapat menekan pertumbuhan mikroba lain dan merangsang pertumbuhan
mikroba yang diinginkan.Contohnya adalah Luria Bertani medium yang ditambah
Amphisilin untuk merangsang E.coli resisten antibotik dan menghambat kontaminan yang
peka, Ampiciline Salt broth yang ditambah NaCl 4% untuk membunuh Streptococcus
agalactiae yang toleran terhadap garam.Media ini dipakai untuk menyeleksi mikrorganisme
sesuai dengan yang diinginkan, jadi hanya satu jenis mikrorganisme saja yang dapat
tumbuh dalam media ini atau hanya satu kelompok tertentu saja.
Contohnya :
 EMB(Eosin Metilena Biru) Agar
 MacConkeyAgar(MCA)
Media selektif untuk isolasi dan identifikasi bakteri Gram negatif terutama
bakteri yang berasal dari tinja dan urin.
 Salmonella Shigella Agar ( SSA )
Merupakan media yang mempunyai selektif tinggi untuk isolasi salmonella sp

 Thiosulfate Citrate Bilesalt Sucrose ( TCBS )Agar
1. Media selektif untuk isolasi Vibrio sp.\
A. Mac CONKEY agar
 Disimpan pada suhu +15°C hingga +25°C
 pH 6.9 - 7.4
 Termasuk media padat
Media MacConkey Agar membedakan bakteri yang memfermentasi laktosa,
(berkoloni merah muda) dengan yang nonfermentasi (tidak berwarna). NaCl yang
terkandung dpt menghambat koloni bakteri proteus. Koloni salmonella halus dan tak
berwarna. Mempunyai keistimewaan memilah bakteri enteric gram negatif yang
memfermentasi lak-tosa, karena media ini mengandung laktosa, crystal violet dan neutral
red bile salt.
Kemampuan coli memfermentasi laktosa menyebabkan penurunan pH, sehingga
mempermudah absorpsi neutral red untuk mengubah koloni menjadi merah bata. Koloni
lain (S. aureus; P. aeruginosa dan Salmonella), bila tumbuh tidak akan berwarna karena
tidak mampu memfermentasi laktosa. Mikroba lain yang dapat tumbuh pada media ini
antara lain Enterobacter;Proteus; Salmonella; Shigella, Aerobacter; Enterococcus.
B. Coli growth on McConkey agar.

Mac Conkey agar adalah medium kultur yang dirancang untuk tumbuh bakteri gram
negatif dan noda mereka untuk fermentasi laktosa. Dalam media ini Enterobacteriaceae
dan bakteri gram negatif dan membedakan mereka ke dalam fermentor laktosa dan non-
laktosa fermentor. Kehadiran garam empedu dan kristal ungu akan menghambat
pertumbuhan mikroorganisme gram positif. Penggabungan laktosa berfungsi sebagai satu-
satunya sumber karbohidrat. Basil. Gram-negatif yang menghasilkan laktosa ferments
merah tua menjadi merah muda koloni.
C. Media Eosin Methylene Blue
 Simpan pada +15°C hingga +25°C.
 Ph 7.0 - 7.2
Media tidak boleh digunakan jika ada tanda-tanda kontaminasi, kemerosotan (menyusut,
retak, atau perubahan warna) atau jika tanggal kadaluarsa telah berlalu). Termasuk agar
padat
D. Eosin-Metilena Blue Agar
Metilena Eosin-agar biru adalah selektif, diferensial media yang digunakan untuk
isolasi dan identifikasi bakteri gram negatif. Eosin Y dan pewarna biru metilena
menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dan memungkinkan pertumbuhan bakteri
gram negatif. Laktosa dan sukrosa dimasukkan untuk memungkinkan diferensiasi isolat
didasarkan pada fermentasi laktosa.
Fermentasi terdeteksi oleh perubahan warna dan pengendapan pH pewarna seperti
tetes. Sukrosa didirikan sebagai berfungsi sebagai alternatif lain sumber karbohidrat untuk
laktosa lambat fermentor. mempunyai keistimewaan mengandung laktosa dan berfungsi

untuk memilah mikroba yang memfermentasi laktosa seperti E. coli dengan mikroba yang
tidak memfermentasikan laktosa seperti S. aureus; P. aeruginosa dan Salmonella.
Mikroba yang memfermentasi lak-tosa menghasilkan koloni dengan inti berwarna
gelap dengan kilap logam, sedangkan mikroba lain yang dapat tumbuh koloninya tidak
berwarna. Adanya eosin dan methylene blue membantu mempertajam perbedaan
tersebut. Bagaimanapun media ini sangat baik untuk mengkonfirmasi bahwa kontaminan
tersebut adalah E Colli. Pada EMB jika E.coli tumbuh ini akan memberikan kemilau hijau
metalik khas (karena sifat metachromatic pewarna, E.coli gerakan menggunakan flagela,
dan asam kuat produk akhir fermentasi).
Beberapa spesies Citrobacter, dan Enterobacter juga akan bereaksi dengan cara ini
untuk EMB. Coli-jenis koloni sangat gelap, hampir hitam, kalau diamati secara langsung
terhadap cahaya. Oleh pantulan cahaya kemilau hijau dapat dilihat yang disebabkan oleh
pengendapan methylene biru.
E. Coli dalam EMB agar
Contoh pertumbuhan bakteri serta morfologinya pada agar EMB
 Escherichia coli Biru-hitam, gelap yang berpusat koloni dengan hijau, kilau metalik
 Spesies Salmonella tak berwarna atau transparan, terang-ungu koloni
 Coklat berlendir spesies Klebsiella koloni biru-hitam dengan pusat
 Proteus Halus, transparan, tak berwarna koloni
 Klebsiella pneumoniae: pertumbuhan, ungu koloni, tidak ada kemilau
F. Media Thiosulfat Citrate Bile Salt Sucrose Agar (TCBSA)

Dilarutkan kedalam 1000 ml air. Panaskan sampai mendidih. Dinginkan pada 450C –
500 C. Tuangkan tiap 15 – 20 ml kedalam cawan petri. Digunakan untuk menumbuhkan
bakteri Vibrio sp Vibrio sp dalam TCBS agar.
Contoh bakteri yang dpt tumbuh pada agar TCBS beserta karakteristiknya
 cholerae Kuning koloni.
 parahaemolyticus Blue berpusat hijau koloni.
 mimicus, V. damsela hijau koloni.
 vulnificus Hijau (85%) atau kuning (15%).
 hollisae Hijau (pertumbuhan yang sangat miskin).
G. SAMONELLA SHIGELLA AGAR
 Simpan pada +15°C hingga +25°C.
 7.0 - 7.2
Bakteri Salmonella mempunyai karakteristik gram negatif; berbentuk batang, tidak
membentuk spora, aerob/fakultatif an-aerob. Ia dapat memfermentasi glukosa dengan
membentuk asam/gas dan dapat mereduksi nitrat menjadi nitrit.
Mempunyai sifat katalase positif dan oksidase negatif serta mudah tumbuh pada
kebanyakan media. Media Salmonella Shigella Agar Media SSA dilarutkan ke dalam 1000
ml air. Dipanaskan sampai homogen kemudian di tuang ke dalam erlemeyer petridis.
Pengujian Salmonella juga memerlukan tahapan yang cukup panjang dan hanya
dengan pengujian lengkap maka seseorang bisa menyimpulkan keberadaan Salmonella .
Uji Salmonella umumnya didahului dengan tahap pre-enrichment pada medium kaya untuk
meyembuhkan sel Salmonella yang luka ( injured ) , selective-enrichment (pengkayaan
selektif) pada media selektif untuk menghalau bakteri-bakteri non Salmonella.

Morfologi khas kolonial pada Salmonella Shigella Agar adalah :
 E.coli pertumbuhan, merah muda atau merah
 Enterobacter / Klebsiella Sedikit pertumbuhan, pink
 Proteus tak berwarna, biasanya dengan pusat hitam
 Salmonella tak berwarna, biasanya dengan pusat hitam
 Shigella berwarna
 Pseudomonas beraturan, sedikit pertumbuhan.
 Salmonella typhi: tak berwarna koloni, pusat hitam.
H. SAMONELLA SHIGELLA AGAR
Ket :A: Klebsiella pneumoniae
B: Escherichia coli
C: Salmonella sp.
D: Proteus mirabilis
E : Pseudomona aeruginosa.
B. SYARAT MEDIA
 Mengandung semua nutrisi yang dibutuhkan dalam pertumbuhan mikroba.
 Mempunyai pH sesuai, tegangan permukaan dan tekanan osmose.
 Tidak mengandung zat penghambat.
Untuk mencegah terkontaminasinya media oleh mikroorganisme, maka sebaiknya
hal-hal yang perlu diperhatikan:
1. Mencuci tangan dan rambut sebelum praktikum.

2. Menggunakan jas lab dan sarung tangan yang steril.
3. Sebelum dan sesudah praktikum meja kerja dan tangan disemprotkan alkohol
70%.
4. Menggunakan alat dan bahan yang sudah disterilkan.
5. Tidak banyak bercanda dan berbicara saat praktikum berlangsung.
6. Menggunakan masker.
7. Bekerja didekat zona steril (pembakar spirtus).

MACAM – MACAM REAGEN DILABORATORIUM BAB

VI
1. PENGERTIAN REAGEN LABORATORIUM
Reagen laboratorium adalah alat laboratorium yang berupa cairan yang digunakan
untuk mengetahui suatu reaksi kimia atau sebagai reaktan.
Reagen laboratorium adalah zat atau senyawa kimia yang ditambahkan dengan tujuan
untuk membawa tentang reaksi kimia atau ditambahkan untuk melihat jika reaksi terjadi.
Selain istilah reagen, ada juga istilah reaktan namun istilah reaktan diartikan sebagai zat
khusus yang dikomsumsi dalam proses reaksi kimia.
Zat atau dua zat yang dicampurkan tersebut akan membuat, mengukur dan
membangun keberadaan reaksi kimia dengan menggunakan bantuan reagen
laboratorium. Ada beberapa laboratorium alami yaitu : contoh reagen
1. Collins Reagen Laboratorium adalah reagen yang digunakan untuk membantu berbagai
zat yang kompleks dan alkohol yang digunakan untuk mengoksidasi.

2. Fenton Reagen Laboratoriumadalah reagen yang memiliki gaya analitis yang
dimanfaatkan untuk membasmi sesuatu tertentu yang alami dan organic bahan kimia
seperti tetrakloroetilena (PCE) dan trichloroethylene (TCE).
3. Fehling Reagen Laboratorium adalah larutan natrium hidroksida, tembaga sulfat dan
kalium natrium tartrat yang secara khusus digunakan untuk menguji kandungan aldehida
dan gula dalam zat tertentu seperti urin
4. Grignard Reagen Laboratorium adalah reagan untuk dibuat ketika menggunakan respon
yang dihasilkan dari campuran alkil dan magnesium. Hampir semua senyawa organik
memerlukan ini untuk reaksi kimia tertentu untuk membuat ikatan karbon-karbon.
5. Millon Reagen Laboratorium adalah cairan reagen investigasi dalam jenis yang unik
yang dibuat dengan mencairkan logam Merkurius dengan asam nitrat dan kemudian
menyiram turun untuk mendapatkan suatu kepadatan yang diinginkan. Jenis ini adalah zat
yang digunakan untuk mendeteksi larutan protein.
Reaksi kimia itu prosesnya memerlukan pelarut dan katalis. Katalis tetap tidak
akan berubah setelah setiap reaksi namun harus benar-benar mengubah waktu reaksi
akan terjadi. Sedangkan pelarut di sini adalah zat yang mengurangi padat dan

menghasilkan jenis solusi. Fungsi lain dari reagen ini adalah dapat digunakan dalam
pengujian dan menganalisis bahan kimia.
Beberapa contoh berikut ini adalah reagen atau larutan khusus yang ada di
laboratorium:
1. Air barit yang digunakan untuk Reagensia CO2
Cara pembuatannya adalah dengan memasukkan 70 gr dalam 1 liter air yang telah
dididihkan, lalu kocok sampai larutan menjadi jenuh. Setelah jenuh, ambil larutan yang
jernih.
2. Air Brom sebagai oksidator
Masukkan 25 ml Brom dalam 500 ml air, kemudian kocok secara hati-hati hingga
larutan Brom larut. Berhati-hatilah karena air Brom yang terkena tangan dapat
membakar kulit. Gunakan sarung tangan dan kerjakan di tempat terbuka.

3. Air Kanji yaitu reagensia untuk yodium
Cara mendapatkan larutan ini adalah campurkan 2 gr Amilum dengan 0,01 gr dan
tambahkan sedikit air dingin. Kemudian aduk hingga menjadi pasta. Setelah itu
encerkan dengan air mendidih sampai sebanyak 1 liter. Lalu didihkan larutan itu
selama beberapa menit. Setelah itu dinginkan dan simpan larutan dalam botol reagen.
4. Aseto Orsin sebagai pewarna kromosom (untuk bidang biologi)
Cara pembuatan larutan melarutkan 2,2 gram Orsin ke dalam 100 ml Asam Asetat
glasial. Pada pemakaiannya, encerkan 10 ml larutan ini dnegan 12 ml air.
5. Biuret yaitu reagensia untuk urea dan protein
Cukup larutkan 0,75 gram biuret dalam 1 liter larutan NaOH2 M.
6. Aqua Regia untuk melarutkan logam-logam mulia
Cara pembuatan adalah dengan mencampurkan satu bagian pekat dengan tiga
bagian HCI pekat.
7. Hematoksilin yaitu untuk membedakan bagian bagian dari sel dan jaringan
(bidang biologi)adalah dengan melarutkan
8. Lugol yaitu reagensia untuk uji amilum
Caranya 2 gram Hematoksilin dalam 100 ml Alkohol. Lalu tambahkan 100 ml air, 100
ml gliserol, 10 ml Asam asetat glacial, dan kalium aluminium sulfat berlebih. Setelah
itu biarkan dalam botol terbuka di bawah sinar matahari hingga warnanya berubah
merah tua. Biasanya reagen lugol ini dibuat dalam larutan kalium iodide (KI), hal ini
disebabkan karena lod sendiri susah larut di dalam air. Kemudian larutkan 12,7 gram
dan 10 gram KI ke dalam 100 ml air. Lalu larutan yang terjadi dibuat 1 liter dengan
menambahkan air.

9. Molish digunakan untuk tes wol dan karbohidrat
Cara membuatnya pun mudah yaitu larutkan 5 gram Alfanaftol dalam 100 ml Alkohol
atau Kloroform.
10. Schwietzer sebagai pelarut selulosa
Caranya yaitu melarutkan 5 gram ke dalam 100 ml air. Kemudian didihkan larutan
tersebut. dengan menambahkan larutan NaOH, sehingga tida terjadi lagi endapan.
Saring dan cuci endapan sampai bersih. Terakhir, larutkan endapan ini dalam sedikit
larutan amonia 4 M.

UJI KUALITAS REAGEN

BAB
VII
A. PENGERTIAN REAGEN
Kata- kata “ reagen” dan “reaktan” dapat digunakan secara bergantian. Reaksi kimia
dapat terjadi ketika dua atau lebih reaktan digabungkan bersama. Reaktan harus hadir
untuk menciptakan reaksi kimia, tanpa mereka tidak akan ada reaksi. Pelarut dan katalis
tetap tidak berubah setelah setiap reaksi tapi benar-benar mengubah waktu reaksi yang
akan terjadi. Pelarut adalah zat yang mengurangi padat dan menghasilkan jenis solusi.
Reagen dapat digunakan dalam pengujian bahan kimia.
Beberapa reagen digunakan sebagai komponen dasar dalam biologi molekuler yang
spesifik. Beberapa reagen lain juga digunakan dalam kit dan tes yang digunakan untuk
mendeteksi organisme yang lain. Reagen biasanya dimaksudkan untuk tujuan penelitian,
bahan baku dalam biologi molekuler, penggunaan forensic, tesd arah, imunologi dan
farmasi proses.
Reagen adalah bahan yang menyebabkan atau bahan yang dikonsumsi dalam suatu
reaksi kimia dan juga berperan dalam reaksi kimia yang digunakan untuk menunjukkan
kemurnian pada zat kimia yang cukup untuk sebuah percobaan. Tetapi sebuah reagen air
tidak boleh mengandung banyak ketidak murniaan seperti ion natrium, klorida atau bakteri.
Reagen memiliki banyak kegunaan dan sebagian besar melibatkan nyawa aplikasi. Zat
atau dua zat membuat, mengukur, membangun keberadaan reaksi kimia dengan bantuan
reagen.

B. PENGERTIAN UJI KUALITAS REAGEN
Uji Kualitas Reagen adalah kegiatan pencegahan dan pengawasan yang dilaksanakan
oleh setiap laboratorium terhadap reagen secara terus-menerus agar diperoleh hasil
pemeriksaan yang tepat. Pengendalian kualitas reagen seperti semua produk lain yang
digunakan dalam pengujian reagen baik dibeli atau dikupas di laboratorium, harus secara
jelas tanggal dimana mereka pertama kali membuka. Setiap reagen harus diuji untuk
memastikan reaksi yang diharapkan diperoleh. Jika reagen adalah produk langka, mahal,
atau sulit untuk mendapatkan seperti antiserum diagnostik, tidak perlu harus dibuang pada
tanggal kedaluwarsa. Jika memuaskan sensitivitas dan spesifisitas masih dapat diverifikasi
dengan prosedur pengendalian kualitas normal, laboratorium dapat menunjukkan pada
label botol tanggal verifikasi kualitas reagent. Semua reagen harus diuji untuk kualitas
pada interval ditetapkan oleh masing-masing laboratorium untuk memastikan bahwa tidak
ada kerusakan telah terjadi.
C. UJI KUALITAS REAGEN
Reagen yang digunakan di laboratorium ada yang dapat dibuat sendiri dan ada yang
sudah jadi/komersial.Baik reagen yang dibuat sendiri maupun yang komersial mempunyai
persyaratan-persyaratan tertentu.
a. Reagen buatan sendiri
Hal-hal yang perlu diperhatikan adalah:
1) Bahan kimia anhidrat (tidak mengandung molekul air)
Bahan kimia anhidrat (tidak mengandung molekul air)yang digunakan untuk
pembuatan larutan standar kalibrasi dan titrasi harus dikeringkan terlebih dahulu
dalam oven dengan suhu 105°C–110°C minimal 1-2 jam, sebaiknya satu malam.

Kemudian dinginkan sampai suhu kamar dalam desikator, timbang dalam jumlah
yang tepat lalu dilarutkan.
2) Untuk garam hidrat (mengandung molekul air) cukup dikeringkan dalam desikator
akuadest yang dipakai.Air yang mengandung kaporit akan mempengaruhi reagen
untuk pemeriksaan kalsium dan klorida, sedangkan air yang mengandung banyak
logam akan mempengaruhi pemeriksaan logam dan pewarna.
3) Larutan kerja sifatnya tidak tahan lama sehingga harus dibuat secukupnya sesuai
kebutuhan.Untuk penyimpanan sebaiknya dalam bentuk larutan stok
(larutan induk).
4) Wadah reagen perlu diberi label.
Label yang berisikannama reagen (rumus kimia), tanggal pembuatan dan paraf
pembuat.
5) Harus diketahui sifat bahan kimia yang dibuat.
Reagen tertentu tidak boleh disimpan berdekatan atau dicampur karena dapat
bereaksi.
6) Penyimpanan untuk reagen tertentu mempunyai persyaratan khusus
Misalnya tidak boleh terkena paparan cahaya, harus pada suhu ruangan, suhu
dingin atau beku dan sebagainya.
b. Reagen yang sudah jadi/komersial
Hal-hal yang perlu diperhatikan adalah:
1) Etiket/label wadah
Umumnya pada reagen komersial sudah tercantum nama atau kode bahan,
tanggal produksi dan batas kadaluwarsa serta nomor batch reagen tersebut.
2) Batas kadaluwarsa
Perhatikan batas kadaluwarsanya berlaku untuk reagen yang disimpan pada
kondisi baik dan belum pernah dibuka, karena reagen yang wadahnya sudah
pernah dibuka mempunyai masa daluwarsa lebih pendek dari reagen yang belum
dibuka.
3) Keadaan fisik
Kemasan harus dalam keadaan utuh, isi tidak mengeras dan tidak ada perubahan
warna.
D. CARA PENGUJIAN KUALITAS REAGEN.
1. Berdasarkan penampakan fisik.
2. Dengan bahan kontrol assayed yang diketahui nilainya.
3. Menggunakan strain bakteri (khususnya larutan cat)
Bahan kontrol merupakan bahan yang digunakan untuk memantau ketetapan suatu
pemeriksaan di laboratorium atau untuk mengawasi kualitas hasil pemeriksaan sehari-hari.
Macam bahan kontrol:
1. Bahan kontrol unassayed: tidak mempunyai nilai rujukan
2. Bahan kontrol assayed: mempunyai nilai rujukan serta diketahui batas
toleransinya menurut metode pemeriksaan.
Selain upaya untuk menjaga dan menjamin kualitas reagent di laboratorium,
kita juga perlu melakukan upaya pengujian terhadap kualitas reagent yang kita gunakan
Khusus untuk reagent di laboratorium Mikrobiologi berikut adalah daftar jenis larutan
pewarna dan reagen mikrobiologi dengan cara pengujiannya:
1. Pewarna gram
spesimen/media yang digunakan: Sediaan apus
Organisme kontrol dan hasil yang diharapkan:

 Streptococcus = Coccus gram positif
 Coli = Basil gram negatif
2. Pewarna Ziehl neelsen
Spesimen/media yang digunakan: Sediaan apus dahak
 M. tubercolosis = tampak adanya BTA berbentuk batang merah
 Campuran flora tidak tahan asam = tidak ditemukan BTA
3. Pewarna acridine orange
 E.Coli = Basil/cocci
 S. aureus = Berfluoresensi
4. Pewarna Giemsa
Spesimen/media yang digunakan: Hapusan darah tepi
 Parasit malaria = ditemukan parasit malaria
5. Larutan Jodium
Spesimen/media yang di gunakan: tinja yang diawetkan dengan formalin
 Kista entamoeba sp/giardia 1 = terlihat inti kista
6. Pewarna Spora
 Baciles species = spora terwarnai satu warna, Bacillus terwarnai warna
lain/counter stain

7. Basitracin disc
Spesimen/media yang digunakan: Agar darah
 S. pyogenes = ada zona pembatas
 S. faecalis = tidak ada zona pembatas
8. Catalase
Spesimen/media yang di gunakan: Tryptic soy agar
 S. aureus = terlihat adanya bubbles (gelembung)
 S. faecalis = tidak terdapat bubbles
9. ONPG
Spesimen/media yang di gunakan: TSI atau Kliger agar
 Serratia marcescens = berwarna kuning
 E.Coli, S typhymurium, proteus SP = tidak berwarna
10. Optochin disc
Spesimen/media yang digunakan : Blood Agar
 S.pneumoniae = tidak ada pertumbuhan di sekitar disc
 S. Mitis
11. Oxidase
Spesimen/media yang digunakan: Tryptic soy agar

 P. aeruginosa = Warna koloni menjadi merah
 E.Coli = hitam/ungu dalam 20 detik koloni tidak berubah warna
12. Coagulase
 S.aureus = terbentuk gumpalan dalam 4 jam
 S.epidermis = tidak berbentuk gumpalan
13. Indole
 E.coli = Cincin merah pada permukaan
 aerogenes = tidak berbentuk gumpalan
14. Methyl red
 E.Coli = warna merah
 aerogenes = tidak berwarna
15. Voges proskauer
 E.aerogenes = warna merah
 E.Coli = tidak berwarna
16. Oxidase disc
 P.aeruginosa = warna ungu dalam 30 detik
 E.coli = Tidak berwarna dalam 30 detik

E. MENJAGA KUALITAS REAGEN
Untuk menjaga kualitas reagen, hal-hal yang perlu diperhatikan adalah:
1. Bahan kimia anhidrat, tidak mengandung molekul air yang digunakan untuk
larutan standar kalibrasi dan titrasi harus dikeringkan terlebih dahulu dalam oven
suhu 105-1100C selama 1 malam, kemudian didinginkan dalam desikator,
timbang dalam jumlah tepat lalu larutkan.
2. Untuk garam hidrat cukup dikeringkan dalam desikator.
Pada waktu pengenceran harus diperhatikan kualitas aquadest yang dipakai. Air
yang mengandung kaporit akan mempengaruhi reagen untuk pemeriksaan
kalsium, dan klorida sedangkan air yang mengandung banyak logam akan
mempengaruhi pemeriksaan logam dan pewarna.
3. Larutan kerja sifatnya tidak tahan lama, sehingga harus dibuat secukupnya sesuai
kebutuhan untuk penyimpanan sebaiknya dalam bentuk larutan stop.
4. Harus diketahui sifat bahan kimia yang dibuat.
5. Wadah reagen harus diberi etiket sehingga dapat mengetahui rumus kimia
reagen, tanggal pembuatan dan siapa yang membuat reagen tersebut.
F. WAKTU UJI KUALITAS REAGEAN
Uji Kualitas Dilakukan pada saat :
1. Setiap kali BATCH larutan kerja dibuatt
2. Setiap minggu (khususnya untuk Zn).
3. Bila sudah mendekati tanggal kadaluarsa.
4. Bila ditemukan tanda-tanda kerusakan (timbul endapan, kekeruhan, perubahan
warna).
5. Bila terdapat kecurigaan terhadap hasil pemeriksaan.

CARA PERHITUNGAN DAN PEMBUATAN REAGEN

BAB
VIII
A. PENGERTIAN REAGEN
Kata- kata “ reagen” dan “reaktan” dapat digunakan secara bergantian. Reaksi
kimia dapat terjadi ketika dua atau lebih reaktan digabungkan bersama. Reaktan harus
hadir untuk menciptakan reaksi kimia, tanpa mereka tidak akan ada reaksi. Pelarut
dan katalis tetap tidak berubah setelah setiap reaksi tapi benar-benar mengubah
waktu reaksi yang akan terjadi. Pelarut adalah zat yang mengurangi padat dan
menghasilkan jenis solusi. Reagen dapat digunakan dalam pengujian bahan kimia.
Beberapa reagen digunakan sebagai komponen dasar dalam biologi molekuler
yang spesifik. Beberapa reagen lain juga digunakan dalam kit dan tes yang digunakan
untuk mendeteksi organisme yang lain. Reagen biasanya dimaksudkan untuk tujuan
penelitian, bahan baku dalam biologi molekuler, penggunaan forensic, tesd arah,
imunologi dan farmasi proses.
Reagen adalah bahan yang menyebabkan atau bahan yang dikonsumsi dalam
suatu reaksi kimia dan juga berperan dalam reaksi kimia yang digunakan untuk
menunjukkan kemurnian pada zat kimia yang cukup untuk sebuah percobaan. Tetapi
sebuah reagen air tidak boleh mengandung banyak ketidak murniaan seperti ion
natrium, klorida atau bakteri.
Reagen memiliki banyak kegunaan dan sebagian besar melibatkan nyawa
aplikasi. Zat atau dua zat membuat, mengukur, membangun keberadaan reaksi kimia
dengan bantuan reagen.

B. MACAM-MACAM REAGEN
Reagen di bagi menjadi dua :
a. Reagen Alami
Reagen yang sudah ada pada zat tersebut, Contohnya :
1. Fenton Reagen
reagen gaya analitis reagen dimanfaatkan untuk membasmi tertentu alami dan
organik bahan kimia seperti tetrakloroetilena (PCE) dan trichloroethylene (TCE).
2. Grignard Reagen
Reagen ini biasa dibuat ketika menggunakan respon yang di hasilkan campuran
alkil dan magnesium.
3. Fehling Reagen
Larutan ini berupa natrium hidroksida, tembaga sulfat dan kalium natrium tartrat
yang kusus digunakan untuk menguji kehadiran aldehida dan gula dalam zat
tertentu seperti urin.
4. Collins reagen
reagen ini digunakan untuk membantu beberapa zat-zat yang kompleks dan
alkohol untuk mengoksidasi.
b. Reagen Kimia
Reagen yang dibuat oleh tangan manusia untuk kepentingan orang banyak Konsentrasi
larutan.Konsentrasi larutan merupakan ukuran yang digunakan untuk menyatakan
kuantitas zat terlarut dalam suatu pelarut atau larutan. Terdapat berbagai cara yang

digunkan untuk menyatakan konsentrasi larutan, danmasing-masing cara memiliki
berbagai kegunaan masing-masing.
1. Persen massa, Persen Volum, dan Persen massa/Volum
Persen masa dan volum adalah cara paling sederhana untuk menyatakan konsentras
suatu larutan dengan membandingkan massa atau volum masing-masing bagian. Cara
lain untuk menyatakan konsentrasi adalah persen massa/volum.
Contohnya, jika melarutkan 0,9 gram NaCl dalam 100 ml air, maka kita menuliskan larutan
0,9% NaCl. Persen massa/volum dalam bidan medis dan farmasi
2. Bagian per juta, bagian Per Miliar, dan Bagian per triliun
Cara lain untuk menuliskan konsentrasi suatu larutan yang konsentrasinya sangat kecil
adalah dengan per juta, per miliar, per triliun. Prinsip yang digunakan pada dasarnya
adalah persen massa dengan konsentrasi kecil. Cara pernyataan seperti ini banyak
digunakan pada ilmu lingkungan.
3. Fraksi mol dan persen mol
xA = nA atau xB = nB
nA + nB nA + nB
keterangan : xA : fraksi mol zat A
nA : mol zat A
xB : fraksi mol zat B

nB : Mol Zat B
fraksi mol (i) merupakan perbandingan mol dari pelarut atau zat terlarut nilai
total fraksi mol zat terlarut dan pelarut haruslah sama dengan . Sementara itu persen mol
merupakan nilai mol yang dikalikan 100%.
4. Molalitas
1m suatu larutan didefinisikan sebagai 1 mol zat terlarut di dalam 1000 g
pelarut. Larutan molal mempunyai perbandingan yang sama antara jumlah
molekul zat yang dilarutkan dan pelarut,sedangkan pada molar sistem perbandingan ini
berubah-ubah.
Rumus:
m = mol = gram larutan . 1000
kilogram pelarut Mr. gram pelarut
keterangan : m : molalitas
5. Molaritas
Satu molar, atau 1 M suatu larutan didefinisikan sebagai 1 mol suaru zat terlarut di dalam 1
liter larutan, atau 1 mmol zat itu terlarut dalam 1 ml larutan.
Rumus:
M = mol zat terlarut = gram . 1000 = % . p . 10
Volume Mr . Gram volume volume
Keterangan: M : Molaritas (konsentrasi)
p : massa jenis
% : persentase
C. KEGUNAAN REAGEN
1. Untuk pengujian dan menganalisis bahan kimia.
2. Sebagai komponen dasar dalam biologi molekuler.
3. Digunakan untuk mendeteksi organisme lain yang sulit untuk ditemukan dengan
perangkat yang biasa.
4. Sebagai alat diagnosis.
5. Dapat digunakan untuk berbagai tujuan penelitian seperti : tes darah, imunologi,
dan farmasi proses.
D. CARA PERHITUNGAN PEREAKSI ( REAGEN )
1. Tuliskan persamaan reaksi yang setara untuk reaksi kimia
2. Hitung mol yang tersedia dari setiap reaktan dalam reaksi kimia
3. Gunakan persamaan reaksi setara untuk menentukan rasio mol dari reaktan
dalam reaksi kimia
4. Bandingkan mol yang tersedia dari tiap reaktan ke mol yang diperlukan untuk
reaksi lengkap dengan menggunakan rasio mol

5. Reagan pembatan adalah rektan yang benar benar habis digunakan. Akan ada
beberapa mol reaktan yang tersisa setelah reaksi selesai, yang disebut pereaksi
berlebih.
E. PEMBUATAN REAGEN
Pembutan Larutan Asam Encer Dan Basa Encer
a. Pembuatan larutan asam encer
pembuatan sediaan berupa larutan asam encer dari asam pekatnya merupakan
pekerjaan awal dan dapat menyederhanakan pekerjaan selanjutnnya. Sediaan ini
dapat disesuaikan dengan sifatnya, yakni sebagai sediaan baik untuk tujuan kualitatif
ataupun untuk tujuan kuantitatif. Berikut ini konsentrasi dari larutan asam yag sering
dikemas :
Asam asetat 3 M ; 3 N
CH3COOH 17,4 M ; 99-100% (b/b) 172 ml
Akuades 826 ml
Asam fosfat 3 M ; 9 N
H3PO4 14,6 M ; 85% (b/b) 200 ml
Akuades 774 ml
b. Pembuatan larutan basa encer
Larutan basa encer dibuat dari padatan basa (kecuali NH4OH berfasa cair).

Sifat larutan ini mudah menyerap gas CO2 (dari udara), larutan NH4OH mudah
mengurai, dan basa kuat dapat bereaksi dengan kaca. Berikut larutan basa encer
yang dibuat :
Amonium hidroksida 3 M ; 3 N
NH4OH 14,8 M ( atau NH3 28 % ) 102 ml
Akuades 400 ml
Siapkan 400 ml air didalam botol 600 ml kemudian di tuangi dengan 102 ml NH4OH
pekat, tutup rapat. Usahakan botolnya selalu dalam keadaan tertutup,
larutan ini mudah mengurai dengan melepaskan NH3.
c.Pembuatan Larutan /Pereaksi Umum
Contoh pembuatan larutannya adalah:
Amonium klorida 1M; 1N
NH4Cl 26,7 g
Akuades
Larutkan dulu dengan 200 ml akuades, kemudian encerkan sampai volum larutan
500ml.
Barium klorida 0,25M;0,5N
BaCl2.2H2O 30,5 g
Akuades

Masukkan ke dalam gelas ukur 600 ml berskala, tuangi 200 ml akuades,usahakan
(aduk) kristal melarut semua, kemudian encerkan sampai volum larutan menjadi 500
ml. Selanjutnya simpan dalam botol pereaksi.
Pembuatan Larutan/Pereaksi Khusus
Contoh pembuatan larutannya adalah :
Anilin-asam oksalat ; pereaksi
Asam oksalat H2C2O4.2H2O 0,9 g
Akuades 200 ml
Anilin 1,8 m
Masukkan ke dalam gelas kimia yang berukuran 400 ml yang berisi 200 ml akuades
masukkan asam oksalat, aduk agar melarut. Saat melarutkan, tambahkan anilin, dan
sambalpengadukanditeruskan

REAGEN DI LABARATORIUM KLINIK

BAB
IX
A. MENURUT TINGKAT KEMURNIANNYA REAGEN/ZAT KIMIA DIBAGI
MENJADI:
1. Reagen Tingkat Analitis (Analytical Reagent/AR)
Reagen tingkat analitis adalah reagen yang terdiri atas zat-zat kimia yang mempunyai
kemurnian sangat tinggi. Kemurnian zat-zat tersebut dianalisis dan dicantumkan pada
botol/wadahnya. Penggunaan bahan kimia AR pada laboratorium kesehatan tidak
dapat digantikan dengan zat kimia tingkat lain.
2. Zat Kimia Tingkat Lain
Zat kimia lain tersedia dalam tingkatan dan penggunaan yang berbeda, yaitu:
 tingkat kemurnian kimiawi (chemically pure grade). beberapa bahan kimia
organik berada pada tingkatan ini, tetapi penggunaannya sebagai reagen
laboratorium kesehatan harus melewati tahap pengujian yang teliti sebelum
dipakai rutin. Tidak adanya zat-zat pengotor pada satu lot tidak berarti lot-lot
yang lain pada tingkat ini cocok untuk analisis.
 tingkat praktis (practical grade).
 tingkat komersial (commercial grade). merupakan kadar zat kimia yang bebas
diperjual belikan di pasaran misalnya, alkohol 70 %.
 tingkat teknis (technical grade). umumnya zat kimia dalam tingkatan ini
digunakan di industri-industri kimia.

Zat kimia yang digunakan di Laboratorium Klinik ialah zat kimia tingkat analitis atau
beberapa bahan kimia organik pada tingkat kemurnian kimiawi yang telah melewati
tahap pengujian sebelum dipakai rutin. Ketiga jenis tingkatan zat kimia lainnya tidak
boleh digunakan sebagai reagen di laboratorium kesehatan.
B. MENURUT CARA PEMBUATANNYA, DIBAGI MENJADI:
1. reagen buatan sendiri
2. reagen jadi (komersial) reagen jadi adalah reagen yang dibuat oleh
pabrik/produsen.
C. JENIS REAGEN
 Reagen kimia basah (wet chemistry) bentuknya bisa berupa liofilisat, bubuk dan
siap pakai.
 Reagen kimia kering (dry chmeistry) bentuk bisa berupa cip, catridge yang siap
pakai. Perlu diperhatikan kelebihan dan kekurangan dari masing-masing jenis
reagen.
D. KONDISI REAGEN
Hal yang perlu diperhatikan pada reagen sebelum melakukan pemeriksaan antara lain
 Izin edar dari Kementrian Kesehatan RI
 Etiket/label/wadah
 Perhatikan tanggal produksi, nomor batch reagen
 Batas kadaluarsa

 Perhatikan stabilitas reagen. Untuk reagen yang sudah dibuka masa stabilitasnya
menjadi lebih pendek dari reagen yang belum dibuka
 Keadaan fisik dari reagen
 Kemasan harus dalam keadaan utuh, isi tidak mengeras dan tidak ada perubahan
warna
 Suhu penyimpanan

MEDIA DAN REAGENSIA DI LABORATORIUM

BAB
HEMATOLOGI X
A. PENGERTIAN MEDIA DAN REAGENSI
Media dan Reagensia adalah suatu bidang studi yang dalam pembelajaran nya
membahas tentang persyaratan persyaratan dan bagaimana cara menguji suatu
bahan. Media adalah suatu campuran bahan yang mengandung nutrisi untuk
pembiakan atau pertumbuhan. Sedangkan, Reagensia adalah suatu zat atau senyawa
atau larutan dalam konsentrasi tertentu yang digunakan untuk mengetahui penjelasan
dari suatu analisa. Reagensia ini juga disebut pereaksi.
B. LABORATORIUM HEMATOLOGI
Pemeriksaan Hematologi adalah pemeriksaan yang dilakukan untuk mengetahui
keadaan darah dan komponen-komponen nya. Darah terdiri dari bagian padat yaitu
sel darah merah, sel darah putih trombosit dan bagian cairan yang berwarna
kekuningan disebut plasma Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengetahui kelainan dari
kuantitas dan kualitas sel darah merah, sel darah putih, trombosit, serta menguji
perubahan yang terjadi pada plasma yang terutama berperan pada proses
pembekuan darah.
Di Laboratorium Hematologi pemeriksaan yang dilakukan meliputi sampel darah. Pada
sampel darah dilakukan pemeriksaan seperti: LED (Laju Endap Darah), Hb (
Hemoglobin), Hematokrit, Leukosit (White Blood Cells), Eritrosit (Red Blood Cells).
Trombosit (Platelet). Hitung jenis leukosit, Fibrinogen, MCV ( Mean RBC Volume),

MCH (Mean RBC Hb), MCHC (Mean RBC Hb concentration), RDW ( Red Distribution
Width), PDW (Platelet Distribution Width). MPV (Mean Platelet Volume).
Dalam pemeriksaan hematologi diperlukan juga beberapa reagen. Berikut pembahasan
tentang pembuatan reagen dan fungsinya di Laboratorium Hematologi:
1. Pembuatan Reagen Alkohol 70%
. Fungsinya sebagai disinfektan pada saat pengambilan darah. Kapas sebagai alat untuk
mengdisinfektan pada kulit yang akan diambil darah
Komposisi: Alkohol 96% 73 ml dan Aquadest add
Perhitungan :
V1.C1 = V2.C2
100.70% = 96. V2
V2 = 7000/96
V2 = 72,91 ml- 73ml
Cara pembuatan :
 Pipet Alkohol 96% sebanyak 73 ml Masukkan kedalam beaker glass
 Addkan dengan Aquadest sampai 100 ml. homogenkan
 Masukkan ke dalam botol reagen dan beri etiket
2. Pembuatan Reagen NaCl 0,85-0,9 %
Fungsinya untuk pemeriksaan daya tahan osmotik dan sebagai antikoagulan Komposisi:
NaCl 0,9 gram dan Aquadest 100 ml.
Perhitungan: NaCl 0,9% 0,9/100 x 100-0,9 gram Cara pembuatan: - Timbang NaCl 0,9
gram dengan menggunakan neraca elektrik dan gelas arloji

 Masukkan kedalam beaker glass
 Addkan dengan Aquadest sampai 100 ml, homogenkan
3. Pembuatan Reagen Natrium Sitrat 3,8 %
Fungsinya untuk pemeriksaan LED, BSE
Komposisi: Natrium sitrat 3,8 gram dan Aquadest add 100 ml • Perhitungan: Natrium sitrat
3,8 % 3,8/100 x 100 3,8 gram
Cara pembuatan: neraca elektrik dan gelas arloji
 Timbang Natrium sitrat 3,8 gram dengan menggunakan
 Addkan dengan Aquadest sampai 100 ml, homogenkan.
4. Pembuatan Reagen HC1 0,1 N
Fungsinya untuk pemeriksaan Hb.
Komposisi: HCI 8,36 ml dan Aquadest 100 mi
Cara pembuatan
 Pipet HCI 37% sebanyak 8,36 ml sebanyak 80 ml

5. Pembuatan Reagen CuSO4
Fungsinya untuk pemeriksaan Hb.
Komposisi: CuSO, BJ 1053 dan Aquadest 100 ml
Cara pembuatan:
 Timbang CuSO, sebanyak 7,95 gram
 Larutkan ke dalam 50 ml aquadest di dalam labu ukur (untuk BJ 1100)
 Untuk membuat larutan menjadi BJ-1053 maka larutan tadi diambil sebanyak 26
ml
 Masukkan ke dalam labu ukur dan dilarutkan aquadest sehingga 50 ml dan
homogenkan
6. Pembuatan Reagen Turk
Fungsinya untuk pemeriksaan sel darah putih (leukosit)
Komposisi:
 Gentian Violet (serbuk) 1% 1 ml untuk memberi warna pada inti leukosit
 Asam asetat glacial 2% 1 ml untuk melisiskan sel selan leukosit
 Aquadest add 100 ml
Cara pembuatan
 Pipet Gentian violet 1% sebanyak 1 ml dan Asam asetat glasial

7. Pebuatan Reagen Hayem
Fungsinya untuk menghitng jumlah eritrosit
Komposisi:
 Na SO, 2,5 gram
 NaCl 0,5 gram
 HgCl: (Merkuri klorida) 0,25 gram
 Aquadest 100 ml
Cara pembuatan
 Timbang Na2SO4 sebanyak 2,5 gram, NaCl 0.5 gram,HgCl₂ sebanyak 0.25 gram
 Masukkan semua bahan ke dalam beaker glass dan
 Addkan dengan aquadest sampai 100 ml, homogenkan Masukkan ke dalam botol
reagen dan beri etiket
8. Pembuatan Reagen Gowers
Fungsinya untuk menghitung jumlah eritrosit
Komposisi:
 Na:SO4 0,25 gram CH-COOH 16,65 ml
 Aquadest 100 ml
Cara pembuatan:
 Timbang Na₂SO, sebanyak 0.25 gram Masukkan semua bahan ke dalam beaker
glass
 Masukkan sedikit aquadest. homogenkan

 Pipet CH₂COOH sebanyak 16,65 ml kmudian masukkan kedalam beaker glass
yang berisi Na2SO4 tadi
 Addkan dengan aquadest sampai 100 ml, homogenkan

REAGENSIA IODOMETRI
BAB
XI
A. PENGERTIAN
Iodometri adalah analisa titrimetrik yang secara tidak langsung untuk zat yang
bersifat oksidator seperti besi III, tembaga II,Kalium Permanganat dimana zat ini akan
mengoksidasi iodida yang ditambahkan membentuk iodin. Iodin yang terbentuk akan
ditentukn dengan menggunakan larutan baku tiosulfat .Pada titrasi iodometri, analit yang
dipakai adalah oksidator yang dapat bereaksi dengan I- (iodide) untuk menghasilkan I2, I2
yang terbentuk secara kuantitatif dapat dititrasi dengan larutan tiosulfat. Dari pengertian
diatas maka titrasi iodometri adalah dapat dikategorikan sebagai titrasi kembali.
Oksidator lebih jarang ditentukan dibandingkan reduktor.Namin demikian,
oksidator dapat ditentukan dengan reduktor. Reduktor yang lazim dipakai untuk penentuan
oksidator adalah kalium iodida, ion titanium(III), ion besi(II), dan ion vanadium(II). Cara
titrasi redoks yang menggunakan larutan iodium sebagai pentiter disebut iodimetri,
sedangkan yang menggunakan larutan iodida sebagai pentiter disebut iodometri
Dalam proses analitik, iodium digunakan sebagai pereaksi oksidasi (iodimetri) dan
ion iodida digunakan sebagai pereaksi reduksi (iodometri). Relatif beberapa zat
merupakan pereaksi reduksi yang cukup kuat untuk dititrasi secara langsung dengan
iodium.Maka jumlah penentuan iodimetrik adalah sedikit. Akan tetapi banyak pereaksi
oksidasi cukup kuat untuk bereaksi sempurna dengan ion iodida, dan ada banyak
penggunaan proses iodometrik. Suatu kelebihan ion iodida ditambahkan kepada pereaksi
oksidasi yang ditentukan, dengan pembebasan iodium, yang kemudian dititrasi dengan
larutan natrium tiosulfat.Reaksi antara iodium dan tiosulfat berlangsung secara sempurna

Iodium hanya sedikit larut dalam air (0,00134 mol per liter pada 25 0C), tetapi agak
larut dalam larutan yang mengandung ion iodida. Larutan iodium standar dapat dibuat
dengan menimbang langsung iodium murni dan pengenceran dalam botol
volumetrik.Iodium, dimurnikan dengan sublimasi dan ditambahkan pada suatu larutan KI
pekat, yang ditimbang dengan teliti sebelum dan sesudah penembahan iodium.Akan tetapi
biasanya larutan distandarisasikan terhadap suatu standar primer, As 2O3 yang paling biasa
digunakan.
Larutan standar yang dipergunakan dalam kebanyakan proses iodometrik adalah
natrium tiosulfat. Garam ini biasanya tersedia sebagai pentahidrat Na 2S2O3.5H2O.Larutan
tidak boleh distandarisasi dengan penimbangan secara langsung, tetapi harus
distandarisasi terhadap standar primer.Larutan natrium tiosulfat tidak stabil untuk waktu
yang lama.Sejumlah zat padat digunakan sebagai standar primer untuk larutan natrium
tiosulfat.Iodium murni merupakan standar yang paling nyata, tetapi jarang digunakan
karena kesukaran dalam penanganan dan penimbangan. Lebih sering digunakan pereaksi
yang kuat yang membebaskan iodium dari iodida, suatu proses iodometrik
Metode titrasi iodometri langsung (kadang-kadang dinamakan iodimetri) mengacu
kepada titrasi dengan suatu larutan iod standar.Metode titrasi iodometri tak langsung
(kadang-kadang dinamakan iodometri), adlaah berkenaan dengan titrasi dari iod yang
dibebaskan dalam reaksi kimia. Potensial reduksi normal dari sistem reversibel:
I2(solid) 2e 2I-
adalah 0,5345 volt. Persamaan di atas mengacu kepada suatu larutan air yang
jenuh dengan adanya iod padat; reaksi sel setengah ini akan terjadi, misalnya, menjelang
akhir titrasi iodida dengan suatu zat pengoksid seperti kalium permanganat, ketika

konsentrasi ion iodida menjadi relatif rendah. Dekat permulaan, atau dalam kebanyakan
titrasi iodometri, bila ion iodida terdapat dengan berlebih, terbentuklah ion tri-iodida:
I2(aq) + I- I3-
Karena iod mudah larut dalam larutan iodida. Reaksi sel setengah itu lebih baik ditulis
sebagai:
I3- + 2e 3I-
Dan potensial reduksi standarnya adalah 0,5355 volt. Maka, iod atau ion tri-
iodida merupakan zat pengoksid yang jauh lebih lemah ketimbang kalium permanganat,
kalium dikromat, dan serium(IV) sulfat (Bassett, J. dkk., 1994).
Dalam kebanyakan titrasi langsung dengan iod (iodimetri), digunakan suatu
larutan iod dalam kalium iodida, dan karena itu spesi reaktifnya adalh ion tri-iodida, I3-.
Untuk tepatnya, semua persamaan yang melibatkan reaksi-reaksi iod seharusnya ditulis
dengan I3- dan bukan dengan I2, misalnya:
I3- + 2S2O32- = 3I- + S4O62-
akan lebih akurat daripada:
I2 + 2S2O32- = 2I- + S4O62-
Warna larutan 0,1 N iodium adalah cukup kuat sehingga iodium dapat bekerja
sebagai indikatornya sendiri. Iodium juga memberi warna ungu atau merah lembayung
yang kuat kepada pelarut-pelarut sebagai karbon tetraklorida atau kloroform dan kadang-
kadang hal ini digunakan untuk mengetahui titik akhir titrasi.Akan tetapi lebih umum
digunakan suatu larutan (dispersi koloidal) kanji, karena warna biru tua dari kompleks
kanji-iodium dipakai untuk suatu uji sangat peka terhadap iodium.Kepekaan lebih besar
dalam larutan yang sedikit asam daripada larutan netral dan lebih besar dengan adanya
ion iodida .

BAB
PERSYARATAN REAGEN DAN BAHAN ACUAN PADA XII
LABORATORIUM KIMIA
A. PERSYARAT REAGEN DAN BAHAN ACUAN
Persyaratan ini kami rujuk pada Persyaratan Tambahan Akreditasi Laboratorium
Pengujian Kimia KAN K-01.02 . Berikut adalah persyaratan pada bab reagen dan
bahan acuan :
1. Kualitas reagen dan bahan habis pakai lainnya harus sesuai untuk keperluan
penggunaannya. Pertimbangan perlu diberikan pada pemilihan, pembelian,
penerimaan dan penyimpanan reagen.
2. Reagen kimia, pelarut, dan gas umumnya tersedia dalam berbagai kadar dan
kemurnian. Laboratorium harus menggunakan bahan dengan grade/kemurnian
yang sesuai sebagaimana ditentukan dalam metode atau prosedur.
Grade bahan kimia terdiri atas :
a. Bahan kimia teknis
b. Bahan kimia pro analisa
c. Bahan kimia pro HPLC

3. Laboratorium harus membuat prosedur tertulis untuk penyiapan / pembuatan
larutan reagen. Rekaman harus dipelihara untuk dapat digunakan sebagai acuan
selanjutnya jika terjadi hasil uji yang meragukan. Rekaman harus mencakup bobot
dan volume yang diukur, pembacaan buret, pembacaan pH, perhitungan faktor
standardisasi dan konsentrasi larutan
4. Reagen dan bahan acuan yang disiapkan di laboratorium harus diberi label untuk
mengidentifikasi jenis zat, konsentrasi, pelarut (jika bukan air), potensi bahaya,
batasan penggunaan, dan tanggal pembuatan.
5. Personil yang bertanggung jawab atas preparasi reagen harus teridentifikasi baik
dari label maupun dari rekaman.
6. Reagen, standar, dan larutan lainnya, seperti fase gerak diberi label yang jelas
mengenai nama larutan, konsentrasi, tanggal pembuatan, dan identitas orang
yang membuat.
7. Reagen, bahan acuan, dan persediaan lainnya yang disimpan harus berada di
bawah kondisi yang sesuai dan dengan cara yang aman untuk memastikan
pemisahan dengan bahan yang tidak sesuai.

8. Penanganan larutan reagen dan standar mengikuti peraturan nasional dan atau
daerah yang berlaku, jika relevan.Air yang dimurnikan adalah salah satu reagen
yang paling kritis namun paling sering diabaikan yang digunakan dalam operasi
laboratorium. Kegagalan untuk menyiapkan air dengan benar dan menggunakan
air dengan tepat dapat mengakibatkan kinerja buruk dari beberapa metode
analisis.
Untuk Laboratorium yang melakukan penyulingan air :
a. Penyulingan air tidak akan selalu menjamin kualitas. Material/bahan
peralatan penyulingan, dan karakter air baku dapat mempengaruhi
kualitas hasil sulingan. Wadah penyimpanan juga dapat mempengaruhi
kemurnian air secara signifikan, terutama jika airnya disimpan untuk waktu
yang lama sebelum digunakan.
b. High-grade–ion-exchange system dapat menghasilkan air dengan
kemurnian yang sesuai untuk banyak keperluan laboratorium, namun
metode ini tidak dapat menghilangkan beberapa pengotor / impurities.
c. Peralatan penyulingan membutuhkan pembersihan berkala untuk
menghilangkan pengotor. Bila air baku berkualitas buruk karena tingginya
kandungan hardness dan / atau senyawa organik terlarut, mungkin
diperlukan penggunaan kombinasi antara air deionisasi dan sistem
penyaringan karbon aktif sebelum distilasi untuk menghasilkan air dengan
kemurnian yang sesuai.

d. Untuk analisis logam, perlu menggunakan penyulingan air dari sistem
distilasi kaca borosilikat. Sistem air bersih khusus mungkin diperlukan
untuk elemen kelumit, analisis kromatografi dan analisis lainnya.
e. Konduktansi atau resistansi spesifik digunakan sebagai ukuran kualitas
anorganik dari air murni. Air yang dimurnikan dapat didefinisikan sebagai
air yang telah disuling dan / atau deionisasi sehingga memiliki
ketahanan/resistance spesifik lebih dari 500.000 ohm-cm atau
konduktivitas 2,0 mikroohms / cm atau kurang.
9. Certified Reference Material (CRM) adalah bahan acuan yang disertai sertifikat
(misalnya COA) yang dikeluarkan oleh badan otoritas dan memberikan satu atau lebih
nilai tertentu dengan ketidakpastian dan traceabilitas terkait, dengan menggunakan
prosedur yang valid. Nilai yang terkait dengan CRMs (menurut definisi) secara
metrologi dapat tertelus.
10. Bahan acuan adalah material, cukup homogen dan stabil dengan mengacu pada
sifat tertentu, yang telah ditetapkan agar sesuai untuk penggunaan yang dimaksudkan
dalam pengukuran atau dalam pemeriksaan sifat nominal. Nilai yang terkait dengan
RM dapat tidak tertelusur secara metrologi.

REAGEN BENEDICT
BAB
XIII
A. Pengertian Reagen Benedict Reagen
Benedict adalah reagen kimia yang biasa digunakan untuk mendeteksi
adanya gula pereduksi, tapi bahan pereduksi lainnya juga dapat memberikan hasil
positif. Gula pereduksi mencakup monosakarida dan beberapa disakarida,
termasuk laktosa dan maltosa. Larutan Benedict dapat digunakan untuk menguji
adanya glukosa dalam urine. Beberapa gula seperti glukosa disebut gula
pereduksi karena mereka mampu mentransfer hidrogen (elektron) ke senyawa
lain, proses yang disebut reduksi. Ketika gula pereduksi dicampur dengan reagen
benedicts dan dipanaskan maka akan menyebabkan reagen benedicts berubah
warna. Warna ini bervariasi dari hijau sampai merah bata, tergantung pada jumlah
dan jenis gula.
Komposisi Reagen Benedict Bahan Jumlah Tembaga (II) sulfat
(CuSO4.5H2O) 17,3 gram Trinatrium sitrat (Na3C6H5O.2H2O) 173 gram Natrium
karbonat (Na2CO3) anhidrat 100 gram Aquadest s.d. 1000 ml Cara Pembuatan
Reagen Benedict Larutkan trinatrium sitrat dan natrium karbonat di dalam labu
takar 1000 ml yang sudah berisi aquadest sebanyak 800 ml. Tambahkan larutan
tembaga (II) sulfat secara perlahan-lahan dalam larutan tadi sambil dicampur
supaya homogen. Tambahkan aquadest sampai batas volume 1000 ml. Tuang
larutan ke dalam botol bersumbat kaca. Labeli botol dengan nama “Reagen
Benedict” dan tulis tanggal pembuatannya. Interprestasi Hasil Tes Benedict (-)
tidak terjadi perubahan warna / tetap biru jernih (kadar glukosa <0,5%) (+1) terjadi

warna hijau kekuningan (kadar glukosa 0,5% – 1%) (+2) terjadi warna kuning
keruh (kadar glukosa 1% – 1,5%) (+3) terjadi warna jingga / lumpur keruh (kadar
glukosa 2% – 3,5%) (+4) terjadi warna merah bata (kadar glukosa >3,5%)

BAB
PEMBUATAN REAGENSIA KUALITATIF KIMIA FARMASI
XIV
A. Pembuatan Diazo A dan Diazo B
1. Pembuatan Pereaksi Diazo A dan Diazo B Diazo A :
Asam Sulfanilat 1 gr HCL 4 N 60 ml Aquadest 40 ml Asam Sulfanilat dilarutkan
dalam 60 ml HCL 4 N kemudian ditambahkan Aquadest sebanyak 140 ml. Diazo B
: NaNO2 / KNO2 0,7 gr Aquadest 100 ml
2. Pembuatan Pereaksi Marquis Dicampur Formaldehide 40 % sebanyak 2 tetes
dengan H2SO4 sebanyak 3 ml.
3. Pembuatan Pereaksi Molish -NaftolBahan : 1 gr NAOH 6 gr Na2CO3 anh 16 gr
Aquadest 100 ml -Naftol, Reagen ini harus dibuat baru.Dilarutkan NaOH dan
Na2CO3, kemudian ditambahkan
4. Pembuatan FeCl3 Dilarutkan FeCl3 sebanyak 5 gr dalam 100 ml aquadest.
5. Pembuatan Pereaksi Luff Bahan : CuSO4 25 gr Asam sitrat 50 gr Na2CO3 180 gr
Aquadest 1000 ml
6. Pembuatan Pereaksi Benedict. Benedict A : Dilarutkan 17,3 gr CuSO4 dalam 100
ml aquadest. Benedict B : Dilarutkan : Na. Sitrat 173 gr Na2CO3 100 gr Aquadest
500 ml ( panas ) Dicampurkan Benedict A dan B sedikit demi sedikit sambil diaduk
dan ditambahkan aquadest add 1 lt.
7. Pembuatan Pereaksi Barfoed Bahan : Cu Asetat 13,3 gr Asam Asetat 1% 200 ml
8. Pembuatan Pereaksi Mayer Bahan : a. HgCl2 1,358 gr, dilarutkan dalam 60 ml
aquadest b. KI 5 gr, dilarutkan dalam 20 ml aquadest Dicampurkan larutan a dan b
kemudian ditambahkan 100 ml aquadest.

9. Pembuatan Pereaksi Bauchardat Bahan : I2 2,6 gr KI 3,3 gr Dilarutkan dalam 100
ml aquadest
10. Pembuatan Pereaksi Parri - Dilarutkan Kobalt Clorida 2 gr dalam 1 ml HCL pekat
dan tambahkan 100 ml aquadest - Kobalt Nitrat dilarutkan sebanyak 2 gr dalam
100 ml aquadest - Campur
11. Pembuatan Pereaksi Nessler Dilarutkan 5 gr KI dalam 5 ml air, tambahkan
kedalamnya larutan HgCl2 ( 1:2 ) sampai terjadi endapan merah yang tidak hilang
lagi bila di gojok, saring dengan glasswool. Tambahkan kepada filtratnya larutan
dari 15 gr NaOH dalam 30 ml aquadest, encerkan dengan aquadest add 100 ml,
diamkan supaya mengendap, ambil bagian jernihnya.
12. Pembuatan Asam Pikrat Dilarutkan 1 gr Asam Pikrat dalam 100 ml aquadest
panas.
13. Pembuatan Pereaksi DAB HCL Dilarutkan 1 gr DAB dalam 100 ml HCL 4 N.
14. Pembuatan Pereaksi Fehling Fehling A : Larutkan 34,64 gr CuSO4 dalam air yang
mengandung 0,50 ml H2SO4 pekat, encerkan sampai 500 ml. Fehling B : Larutkan
60 gr NAOH dan 173 gr KNaTartrat dalam air, saring dan encerkan filtratnya, add
500 ml.
15. Pembuatan Pereaksi Roux Bahan : Na.Nitroprusid 10 gr Aquadest 100 ml NaOH 2
ml KMnO4 5 ml Dilarutkan Na.Nitroprusid dengan aquadest kemudian
ditambahkan NaOH dan KMnO4, akan terbentuk endapan, disaring, dimasukan
dalam botol cokelat, sebaiknya di buat baru.
16. Pembuatan Pereaksi Zwikker - B Bahan : CuSO4 6 % 4 ml Piridin 1 ml Aquades 5
ml

17. Pembuatan Pereaksi Phenylhydrazin Bahan : Phenylhydrazin 7,5 gr HCL 2,5 gr
Na.Asetat 15 gr Aquadest 100 ml 18. Pembuatan Pereaksi Schiff Ditambahkan 0,2
gr Fuchsin basis kedalam 120 ml aquadest panas, diamkan sampai dingin.
Tambahkan 2 ml larutan NaHSO3 dalam 20 ml aquadest. Kemudian tambahkan 2
ml HCL pekat. Selanjutnya encerkan dengan aquadest hingga volume 200 ml.
Tutup rapat, diamkan 1 malam untuk menghilangkan warna paars.
B. PEMBUATAN PEREAKSI KIMIA KLINIK
1. Pereaksi Benedict Bahan : CuSO4.5H2O 17,3 gr Na.Citrat 173 gr Na2CO3 100 gr
Aquadest add 1000 ml
2. Pereaksi Esbach Bahan : As. Pikrat 1 gr As. Citrat 2 gr Aquadest add 100 ml
3. Pereaksi Rothera Bahan : Na. Nitropruside 5 gr Ammonium sulfat 200 gr Cara : Di
campur dan digerus sampai halus
4. Pereaksi Fouchet Bahan : As. Trichlorasetat 25 gr Aquadest 100 ml FeCl3 10 %
10 ml Cara : As. Trichlorasetat dilarutkan dengan 100 ml aquadest kemudian
ditambahkan FeCl3 10 % 10 ml
5. Pereaksi BaCl2 10 % Dilarutkan 10 gr BaCl2 dengan 100 ml aquadest
6. Pereaksi Ehrlich Bahan ; Paradimethylamino-benzaldehida 2 gr HCl pekat 20 ml
Aquadest add 80ml
7. Pereaksi Lugol Bahan : Iodium 1 gr KI 2 gr Aquadest 300 gr
8. Pereaksi Schlesinger Bahan : Zn. Asetat 10 gr Alkohol 95 % 100 ml Cara : Kocok
kuat-kuat dan biarkan bagian yang tidak larut di dalam botol.

C. PEMBUATAN INDIKATOR
1. K2CrO4 5 % : 5 gr K2CrO4 dilarutkan dalam 100 ml aquadest
2. Metil Orange : 0,04 gr MO dilarutkan dalam 100 ml Etanol 20 %
3. Metil Red : 0,95 ml NaOH 0,05 N dihangatkan dengan 25 mg MR dan 5 ml etanol
95 %. Setelah larut sempurna tambahkan etanol 50 % secukupnya hingga 250 ml.
4. Phenol Ptalein : 200 mg PPT.p dalam 60 ml etanol 90 % ditambahkan aquadest
ad 100 ml
5. Brom Thymol blue : Hangatkan 100 mg BTB p dengan 3,2 ml NaOH 0,05 N dan 5
ml etanol 90 % kemudian dipanaskan. Setelah larut ditambahkan etanol 20 % ad
250 ml
6. Brom Phenol Blue : Hangatkan 100 mg BTB p dengan 3,0 ml NaOH 0,05 N dan 5
ml etanol 95 % . Setelah larut ditambahkan etanol 20 % ad 250 ml
7. Eosin : 6,5 gr Eosin dilarutkan dalam aquadest
8. Ferri Amm. Sulfat : 40 gr Ferri Amm. Sulfat dilarutkan dengan 100 ml aquadest
dan beberapa tetes HNO3 6 N.
9. Phenol Red : 50 mg Phenol Red dihangatkan dengan 2,85 ml NaOH 0,05 N dan 5
ml alkohol 95 % . Setelah larut ditambahkan etanol 20 % ad 250 ml
10. EBT : 100 mg serbuk EBT, 10 ge NaCl / Na2SO4 anhidrit, dicampur dan digerus
sampai halus.
11. Murexide : 100 mg Murexide ditambah 10 gr KNO3 / NaCl, dicampur dan digerus
sampai halus.
12. Kertas Kanji Iodida : Larutan Kanji 0,5 % dalam 100 ml dan KI 0,4% dalam 100 ml
campur. Masukkan kertas buram direndam, angkat dan dikeringkan. 13. Ferroin :
1.485 gr 1.10 Phenantroline monohidrat dan 0,695 gr FeSO4.7H2O, dilarutkan

dalam 100 ml aquadest. 14. Amylum 1 % : 1 gr Amylum dilarutkan dalam 100 ml
aquadest panas. 15. Brom Phenol Blue : 0,1 gr BPB dilarutkan dalam campuran 5
ml etanol 90 % dan 3,0 ml NaOH 0,05 N. Jika perlu dipanaskan, kemudian
diencerkan dengan etanol 20 % sampai 250 ml
D. PEMBUATAN LARUTAN DAPAR
1. Dapar Asetat pH 3,7 larutan Pembuatan : sejumlah 10 gr Na. Asetat anhidrat
dimasukkan ke dalam labu ukur 1000 ml dengan 300 ml air, ditambahkan 1 ml
larutan indikator biru brom fenol dan asam asetat glasial sampai warna indikator
berubah menjadi hijau, kemudian diencerkan dengan air sampai tanda.
Penyimpanan : Dalam botol tertutup.
2. Dapar pH 10, larutan Pembuatan : Kedalam 100 ml larutan Natrium dihidrogen
fosfat 0,2 M ditambah 6 ml larutan Trinatrium fosfat 0,25 M Penyimpanan : dalam
botol tertutup.
3. Dapar Borat Basa pH 9,6, larutan Pembuatan : Sejumlah 50 ml larutan Asam
Borat dan Kalium Klorida 0,2 M dimasukkan kedalam labu ukur 200 ml, ditambah
dengan larutan NaOH 0,2 M dan ditambah dengan air sampai tanda. Pembuatan
larutan Asam Borat dan Kalium Klorida 0,2 M : Sejumlah 12,37 gr Asam Borat dan
14,91 gr KCl, dimasukkan dalam labu ukur 1000 ml , dilarutkan dalam air sampai
tanda. Penyimpanan : Dalam botol kaca bebas alkali dan tertutup. 0,1, larutan
4. Dapar Borat Basa pH 10,5 Pembuatan : Sejumlah 3,1 gr Asam borat dan 3,7 gr
Kalium Klorida ditimbang dan dilarutkan dalam lebih kurang 900 ml air, kemudian
pH 0,1 dengan penambahan NaOH 2 N. Larutandiatur sampai pH 10,5

dipindahkan kedala labu ukur 1000 ml dan ditambah air sampai tanda.
Penyimpanan : dalam botol kaca bebas alkali dan tertutup rapat.
5. Dapar Fosfat pH 5,8, larutan Pembuatan : Sejumlah 27,22 gr Kalium Dihidrogen
Fosfat ditimbang dan dilarutkan dalam air sampai volume 1000 ml. Dipipet 50,0 ml
larutan dimasukkkan ke dalam labu ukur 200 ml, ditambah dengan larutan NaOH
0,2 M dan ditambah air sampai tanda. Penyimpanan : Dalam botol tertutup rapat.
6. Dapar Sitrat pH 4, larutan Pembuatan : Sejumlah 10 gr Natrium Sitrat dan 6,5 gr
Asam Sitrat dilarutkan dalam air sampai volume 100 ml Penyimpanan : Dalam
botol tertutup rapat.

DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2003, Growth Media.http://www.exptec.com/Expression Technologies Bacteria
20growth media.htm diakses tanggal 20/05/2011
Anonim, 2009, Media dan Sterilisasi.http://perdetik.blogspot.com/2009/12/media-dan
sterilisasi.html diakses tanggal 19/05/2011
Anonim, 2009, Mikrobiologi Dasar Media Pertumbuhan. http://ckmon
suurus.blogspot.com/2008/11/bab-2-media-pertumbuhan.html diakses tanggal
19/05/2011
Anonim, 2011, Media Perbenihan. http://rockapolka.blogspot.com/2011/04/media
perbenihan.html di akses tanggal 20/05/2011
Mayang.2012.Uji Kualitas Reagen.nmayang.blogspot.com/2012/05/uji-kualitas-reagen
untukmenjaga.html?m=1(Diakses pada hari Selasa 12 November 2019 puku 3:12)
Reagen.yurrypenceng.blogspot.com/2012/05/pengendalian-uji-kualitas-reagen.html?m=1
(Diakses pada hari Selasa 12 November 2019 pukul 13:12)
Reagen.olinbintisuyadi.blogspot.com/2012/04/reagen-dan-cara-uji-kualitas
reagen.html?m=1(Diakses pada hari Selasa 12 November 2019 pukul 13:12)
Stephen, 1998, Culturing Microbes. http://mansfield.osu.edu/-sabedon/biol4035.htm
di akses tanggal 20/05/2011
Suyadi.2012.Reagen dan Cara Uji Kualitas
Nova.2016.Menjaga Kualitas dan Menguji Reagen.lab nova.blogspot.com/2016/05/
menjaga-kualitas-dan-menguji-reagent.html?m=1(Diakses pada hari Selasa 12
November 2019 pukul 13:12)
Yurry.2012.Pengendalian Uji Kualitas


Modul Media Dan Reagensia

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Modul Media Dan Reagensia

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

MODUL

MEDIA DAN REAGENSIA

PROGRAM STUDI DIV TEKNOLOGI

INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA

INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM

nasional dan asia tahun 2028.

1. Menyelenggarakan pendidikan dan pengajaran yang unggul, berkarakter, dan

kompeten yang adaptif terhadap perkembangan ilmu pengetahuan, teknologi, seni

2. Menyelenggarakan penelitian yang inovatif, produktif dan responsif terhadap ilmu

pengetahuan, teknologi dan kebutuhan masyarakat;

3. Menyelenggarakan kegiatan pengabdian kepada masyarakat berlandaskan nilai

dan tanggung jawab sosial; dan

usaha dan masyarakat sebagai pengguna lulusan.

Program Studi Teknologi Laboratorium Medik

tingkat Nasional dan Asia Tahun 2022.

1) Menyelenggarakan proses belajar mengajar yang kondusif dengan sistem yang

mendukung pada FF sehingga pembelajaran tersebut menghasilkan prodi yang

dapat menghasilkan alumni berkarakter unggul, kompeten, dan excellent service.

2) Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif dan handal di

berbagai fasilitas pelayanan kesehatan masyarakat.

3) Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian bidang Farmasi Klinis dan

Komunitas dan Mikrobiologi Molekuler Klinis dengan menggunakan pendekatan

riset dalam bidang Farmasi dan Teknologi Laboratorium Medik.

4) Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset

untuk menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Farmasi dan Teknologi

5) Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi,

dan stakeholders baik dalam maupun luar negeri

Program Studi Teknologi Laboratorium Medik

PROGRAM STUDI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK

Klinis Tahun 2022

1. Menyelenggarakan pendidikan Teknologi Laboratorium Medik yang unggul dan

excelent service dalam bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis.

2. Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif diberbagai fasilitas

pelayanan kesehatan masyarakat.

3. Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian di bidang Mikrobiologi

Molekuler Klinis dengan menggunakan pendekatan riset dalam bidang Teknologi

4. Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset untuk

menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis

5. Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi, dan

stakeholders baik dalam maupun luar negeri

Program Studi Teknologi Laboratorium Medik

Lubuk Pakam, 2021

Program Studi Teknologi Laboratorium Medik i

KATA PENGANTAR ...................................................................................................... i

DAFTAR ISI .................................................................................................................. ii

OVERVIEW/RUANG LINGKUP ..................................................................................... 1

1. DESKRIPSI MATA KULIAH .............................................................................. 1

2. RELEFANSI MATA KULIAH ............................................................................. 2

3. METODE PEMBELAJARAN DAN ALOKASI WAKTU ....................................... 2

4. PENGALAMAN BELAJAR MAHASISWA .......................................................... 4

BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................................... 5

A. LATAR BELAKANG .......................................................................................... 5

B. DEFINISI MEDIA DAN REAGENSIA ................................................................ 5

BAB II.MEDIA DAN REAGENSIA ................................................................................ 17

A. PENGERTIAN MEDIA DAN REAGENSIA ........................................................ 17

BAB III MEDIA REAGENSIA DAN BAHANNYA .......................................................... 23

A. PENGERTIAN REAGENSIA ............................................................................ 23

B. KELAS REAGENSIA ........................................................................................ 23

C. JENIS REAGENSIA ......................................................................................... 23

D. KEUNTUNGAN DAN KERUGIAN REAGENSIA BUATAN SENDIRI ................. 23

BAB IV.MEDIA DAN REAGENSIA ............................................................................... 27

A. PENGERTIAN MEDIA ...................................................................................... 27

B. SYARAT – SYARAT MEDIA ............................................................................. 27