HEMATOLOGI II
1 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
VISI dan MISI
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM
Visi
Menjadi Institut yang unggul dan profesional dalam bidang kesehatan di tingkat Nasional
dan Asia tahun 2028.
Misi
1. Menyelenggarakan pendidikan dan pengajaran yang unggul, berkarakter, dan
kompeten yang adaptif terhadap perkembangan ilmu pengetahuan, teknologi, seni dan
globalisasi;
2. Menyelenggarakan penelitian yang inovatif, produktif dan responsif terhadap ilmu
pengetahuan, teknologi dan kebutuhan masyarakat;
3. Menyelenggarakan kegiatan pengabdian kepada masyarakat berlandaskan nilai dan
tanggung jawab sosial; dan
4. Menjalin kerjasama yang baik dengan stakeholder mulai dari pemerintah, dunia usaha
dan masyarakat sebagai pengguna lulusan.
2 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
VISI dan MISI
FAKULTAS FARMASI
Visi
Menghasilkan lulusan yang unggul dan professional dalam mutu pendidikan di bidang
Farmasi Klinis dan Komunitas serta Mikrobiologi Molekuler Klinis yang Mampu Bersaing di
tingkat Nasional dan Asia Tahun 2022.
Misi
1) Menyelenggarakan proses belajar mengajar yang kondusif dengan sistem yang
mendukung pada FF sehingga pembelajaran tersebut menghasilkan prodi yang dapat
menghasilkan alumni berkarakter unggul, kompeten, dan excellent service;
2) Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif dan handal di berbagai
fasilitas pelayanan kesehatan masyarakat;
3) Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian bidang Farmasi Klinis dan
Komunitas dan Mikrobiologi Molekuler Klinis dengan menggunakan pendekatan riset
dalam bidang Farmasi dan Teknologi Laboratorium Medik;
4) Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset untuk
menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Farmasi dan Teknologi Laboratorium
Medik; dan
5) Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi, dan
stakeholdersbaik dalam maupun luar negeri.
3 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
VISI dan MISI
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK
Visi
Menjadi program studi yang unggul dan professional dalam bidang Mikrobiologi Molekuler
Klinis Tahun 2022
Misi
1. Menyelenggarakan pendidikan Teknologi Laboratorium Medik yang unggul dan excelent
service dalam bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis;
2. Menyelenggarakan proses praktik laboratorium yang kondusif diberbagai fasilitas
pelayanan kesehatan masyarakat;
3. Mengoptimalkan dan mengimplementasikan penelitian di bidang Mikrobiologi Molekuler
Klinis dengan menggunakan pendekatan riset dalam bidang Teknologi Laboratorium
Medik;
4. Mengimplementasikan program pengabdian kepada masyarakat berbasis riset untuk
menyelesaikan berbagai permasalahan di bidang Mikrobiologi Molekuler Klinis; dan
5. Mengembangkan kerjasama dengan institusi pendidikan, pelayanan, organisasi, dan
stakeholdersbaik dalam maupun luar negeri.
4 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kepada kehadirat Allah SWT, karena atas izin-Nya Modul
dari Mata Kuliah HEMATOLOGI IIini dapat diselesaikan. Modul ini disusun untuk
menambah bahan bacaan mahasiswa dalam mengikuti perkuliahan HEMATOLOGI II
Modul HEMATOLOGI IIini disusun untuk memenuhi kebutuhan mahasiswa Program
Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam dalam menempuh matakuliah HEMATOLOGI II Modul ini disusun dengan
kualifikasi merangkum semua materi teoritis.
Penyusun mengucapkan terima kasih kepada berbagai pihak yang tidak bisa disebutkan
satu per satu atas selesainya modul ini.Penyusun menyadari masih banyak kekurangan
dalam penyusunan modul ini.Oleh karena itu segala masukan dari berbagai pihak sangat
diharapkan guna penyempurnaan modul ini.
5 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
DAFTAR ISI
COVER
VISI dan MISIINSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM ..................... 2
VISI dan MISIFAKULTAS FARMASI .............................................................................. 3
VISI DAN MISI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK .......................................... 4
KATA PENGANTAR ............................................................................................................ 5
DAFTAR ISI........................................................................................................................... 6
BAB I PEMERIKSAAN LED
1.1 Pengertian .......................................................................................................................... 8
1.2 Kondisi Yang Memerlukan Tes Laju Endapan Darah ................................................. 8
1.3 Prosedur Yang Dilakukan Pada Tes Laju Endapan Darah .......................................... 8
1.4 Prinsip Pemeriksaan Laju Endap Darah (Led) ............................................................. 9
1.5 Metode Pemeriksaan (Led) .............................................................................................. 9
1.6 Tahap – Tahap Led ..................................................................................................... 10
1.7 Hal-Hal Yang Perlu Diperhatikan Dalam Pemeriksaan Led ....................................... 10
BAB II PEMERIKSAAN BT
2.1 Pengertian .................................................................................................................... 11
2.2 Metode Bleeding Time ................................................................................................ 11
2.3 Faktor Yang Mempengaruhi Hasil Pemeriksaan Bt .................................................... 12
6 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB VI HITUNG JUMLAH ERITROSIT
6.1 Pengertian ................................................................................................................... 22
6.2 Metode Pemeriksaan Eritrosit ..................................................................................... 22
6.3 Alat .............................................................................................................................. 24
BAB VII HITUNG JUMLAH TROMBOSIT
7.1 Pengertian ................................................................................................................... 25
7.2 Metode ........................................................................................................................ 25
7.3 Alat ..................................................................................................................................... 25
BAB VIII PEMERIKSAAN RETIKULOSIT
8.1 Pengertian ..................................................................................................................... 26
8.2 Metode Dan Tekmik Pemeriksaan ................................................................................ 26
BAB IX INDEKS ERITROSIT
9.1 Pengertian ..................................................................................................................... 28
9.2 Metode Pemeriksaan Indeks Eritrosit ........................................................................... 28
BAB X SADT (SEDIAAN APUS DARAH TEPI)
10.1 Pengertian ................................................................................................................... 30
10.2 Sebab Akibat Apusan Darah Tepi............................................................................... 31
10.3 Metode Sediaan Apus Darah Tepi .............................................................................. 31
10.4 Jenis Apusan Darah..................................................................................................... 32
BAB XI PEMERIKSAAN PT
11.1 Pengertian ................................................................................................................... 33
11.2 Metode Pemeriksaan Pt............................................................................................... 33
11.3 Faktor Yang Dapat Mempengaruhi Hasil Pemeriksaan Pt ......................................... 34
11.4 Prinsip Pengukuran Pt ................................................................................................. 34
BAB XII PEMERIKSAAN APTT
12.1 Pengertian ................................................................................................................... 35
12.2 Indikasi Umum Pemeriksaan Aptt .............................................................................. 35
12.3 Prinsip ......................................................................................................................... 35
BAB XIII PEMERIKSAAN DIFFERENTIAL COUNTING
13.1 Pengertian ................................................................................................................... 36
13.2 Pengukuran ................................................................................................................. 36
13.3 Metode Pemeriksaan ................................................................................................... 37
DAFTAR PUSTAKA
7 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB I
PEMERIKSAAN LED
1.1.PENGERTIAN
Tes laju endap darah digunakan untuk menilai kondisi peradangan atau infeksi pada
tubuh. Prosedur ini dilakukan dengan cara mengambil sejumlah sampel darah dan
diperiksa di laboratorium.
Laju endap darah adalah salah satu bagian dari tes hematologi atau pemeriksaan darah
untuk mengukur berapa lama waktu yang dibutuhkan sel darah merah untuk menggumpal
atau mengendap ke dasar tabung reaksi kaca. Tes ini umumnya dilakukan bersamaan
dengan tes lain guna mendiagnosis peradangan atau infeksi tertentu yang mungkin Anda
derita.
1. Demam
2. Nyeri sendi atau kaku yang berlangsung lebih dari 30 menit di pagi hari
3. Nyeri di bahu, leher, atau panggul
4. Sakit kepala, terutama yang berhubungan dengan nyeri di bahu
5. Kehilangan nafsu makan
6. Penurunan berat badan yang terjadi secara cepat dan drastis.
Selain itu, kondisi lain yang mungkin membuat Anda perlu melakukan tes laju endap
darah adalah gangguan pada pencernaan, seperti diare, BAB berdarah, atau nyeri perut
yang tidak biasa dan tidak kunjung teratasi.
Dalam melakukan tes laju endap darah, dokter akan melakukan pengambilan sampel
darah yang kemudian disimpan dalam wadah khusus. Sampel darah kemudian akan
dibawa ke laboratorium.
Dokter ahli patologi klinik akan menempatkan sebagian sampel darah Anda ke dalam
tabung reaksi, kemudian mengukur seberapa tinggi endapan sel darah merah yang
terbentuk dalam rentang waktu 1 jam. Sebagian darah lainnya akan digunakan untuk
pemeriksaan lain, misalnya pemeriksaan darah lengkap atau gula darah.
Bila Anda mengalami peradangan di tubuh, darah akan mengandung protein yang
membuat sel darah merah mudah menggumpal. Penggumpalan inilah yang akan membuat
sel darah merah mengendap dan turun ke bawah. Nah, semakin cepat sel darah
mengendap, semakin tinggi pula kemungkinan adanya peradangan dalam tubuh.
8 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
1.4. PRINSIP PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH (LED)
Prinsip dari pengukuran Laju Endap Darah (LED) dengan menggunakan metode
westergren adalah darah vena dengan antikoagulan yang dimasukkan ke tabung sehingga
menghasilkan pengendapan eritrosit dengan endapan tertentu. Kecepatan pengendapan ini
ditentukan oleh interaksi antara kedua kekuatan fisik yakni tekanan kebawah oleh
gravitasi dan tekanan ke atas akibat perpindahan.
Prosedur Kerja dari pemeriksaan Laju Endap Darah (LED) metode Westergren sebagai
berikut :
a) Alat
1. Pipet westregren
2. Timer
3. Tourniquet
4. Karet penghisap
5. Rak westergren
6. Spoit 5 cc
7. Tissue
9 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
b) Bahan
1. Antikoagulan EDTA
2. Kapas alcohol 70%
3. Natrium sitrat 3,8%
c) Prosedur kerja
1) Diambil darah vena kemudian segera diencerkan dengan natrium sitrat 3,8% dengan
perbandingan 4:1 (1,6 darah vena + 0,4 bagian reagen)
2) Jika menggunakan darah EDTA, maka sampel diencerkan dengan Nacl 0,85% dengan
perbandingan 4:1 (1,4 darah EDTA + 0,4 bagian Nacl 0,85%). Sampel harus dihomogenkan
sebelum diencerkan
3) Sampel darah yang telah diencerkan tersebut kemudian dimasukan kedalam tabung
westergren sampai tanda/skala 0
4) Tabung diletakkan pada rak/penyangga tabung westergren dengan posisi tegak lurus pada
tempat yang rata, jauh dari getaran (misalnya jangan menaruh dimeja bersama dengan
centrifuge), tidak berdekatan dengan radiator pemanas sentral, dan tidak terpajang sinar
matahari langsung 16
5) Tunggu 1 jam (atur timer) selanjutnya diukur tinggi kolom plasma (dalam mm) baca skala
mulai dari batas tanda 0 mm pada puncak tabung ke bawah Interprestasi hasil :
2. Metode Wintrobe
Panjang tabung 120 mm Garis tengah bagian dalam 2,5 mm diberi pembagian 0-100
ke bawah dan ke atas. Prinsip metode wintrobe Darah dengan antikoagulan yang
telah di campur dengan baik dituang selama 1 jam, dicatat kecepatan pengendapan
eritrosit dalam mm sebagai laju endap darahnya.
a) Alat :
1. Pipet wintrobe
2. Pipet Pasteur
3. Rak wintrobe
4. Timer
5. Tornikuet
6. Spoit 5 cc 17
7. Kater pengisap
10 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
b) Bahan :
1. Alcohol 70%
2. Antikoagulan EDTA
c) Prsedur kerja :
1. Sampel yang digunakan berupa darah EDTA atau darah Amonium-kalium oksalat.
Homogenisasi sampel sebelum diperiksa.
2. Sampel dimasukkan ke dalam tabung Wintrobe menggunakan pipet Pasteur sampai
tanda 0. 3. Letakkan tabung dengan posisi tegak lurus.
4. Biarkan tepat 1 jam dan catatlah berapa mm menurunnya eritrosit. Interpretasi hasil
:
Pengendapan eritrosit terjadi akibat sel-sel eritrosit yang membentuk rouleaux dan saling
menempel, maka berat molekulnya menjadi semaakin besar dan pengaruh gaaya grafitasi
menjadi semakin basar pula akibatnya eritrosit mengendap kedasar tabung
Proses Pengendapan eritrosi pada pemeriksaan LED terdiri dari tiga fase yaitu :
a. Fase pertama
fase pembentukkan rouleaux yang berlangsung selama 10 menit
b. Fase kedua
fase pengendapan sel-sel eritrosit secara cepat yang berlangsung selama 40 menit.
11 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
c. Fase ketiga
fase pemdatan rouleaux eritrosit disertai pengendapan dengan kecepatan lambat
dimana terjadi proses agregasi sel-sel eritrosit dan pemadatan rouleaux sehingga
eritrosit mengendap ke dasar tabung, fase ini berlangsung dalam waktu 10 menit.
a. Perhatikan segala petunjuk yang telah diberikan pada waktu melakukan pungsi vena
karena stasis vena menyebabkan darah mengental (hemokonsentrasi) dan berakibat
kesalahan hasil pemeriksaan.
b. Penting sekali menempatkan pipet atau tabung laju endap darah dalam sikap benar-
benar tegak lurus, selisih sedikit saja dari garis vertikel sudah dapat berpengaruh
banyak terhadap hasil laju endap darah.
c. Oleh karena laju endap darah di pengaruhi oleh jumlah eritrosit, maka nilai laju endap
darah cara Wintrobe perlu di koreksi terhadap nilai hematokrit. Koreksi semacam ini
memerlukan grafik khusus. Hasil pemeriksaan laju endap darah menggunakan cara
Westergren dari cara Wintrobe tidak berbeda banyak jika hasil laju endap darah
berada dalam batas-batas normal. Akan tetapi, perbedaan hasil pemeriksaan akan
tampak nyata bila dalam kondisi patologis.
12 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB II
PEMERIKSAAN BT
2.1PENGERTIAN
Prosedur:
1. Lakukan vena puncti pada pendderita dengan cara yang benar, pada darah
masuk dalam syringe, nyalakan stopwatch, dan torniqet diolonggarkan.
2. Lanjutkan dengan menghisap darah perlahan sampai 3 ml
3. Syringe dilepas, penderita ditolong, spuit diambil.
13 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
4. Masukkan darah dalam ke -3 buah tabung melalui dindingnya masing – masing
1 ml.
5. Setelah berlangsung 4 menit darah dalam tabung 1 dimiringkan , untuk melihat
sudah membeku apa belum, apabila belum setiap ½ menit dimiringkan.
6. Selanjutnya setelah membeku waktu dicatat. (Misalkan : A)
7. Kemudian tabung kedua dimiringkan setiap ½ menit. Setelah membeku, waktu
pembekuan dicatat. (Misalkan: B)
8. Kemudian waktu ketiga dimringkan setiap ½ menit. Setelah membeku, waktu
pembekuan dicatat. (Misalkan: C)
b. Metode Duke
Metode duke dibuat dikuping telinga atau ujung jari yang ditusuk
untukmenyebabkan perdarahan, seperti dalam metode Ivy tes ini waktunya dari
awal perdarahan sampai perdarahan benar-benar berhenti.Pemeriksaan ditujukan
pada kadar trombosit, dilakukan dengan indikasi ada riwayat mudahnya terjadi
perdarahan. Niali norma :
Metode Duke: 1 –3 menit
Metode Ivy: 3 –7 menit
Metode duke dinilai kurang teliti dan kurang akurat, sehingga dilakukan
perbaikan berdasarkan metode Ivy.Agar pemeriksaan terstandarisasi maka
dilakukan penyamaan tekanan pembuluh darah dengan menggunakan
sfigmomanometer pada tekanan 40 mmHg. Tusukan dilakukan pada lengan bagian
bawahmenggunakan lanset. Metode Duke kurang memberatkan pada mekanisme
hemostasis karena tidak diadakan pembendungan. Namun metode Duke sebaiknya
hanya dipakai pada bayi dan anak kecil saja, karena pembendungan menggunakan
figmomanometer pada lengan atas tidakmungkin atau susah dilakukan.
Prosedur:
1. Cuping telinga penderita dibersihkan dengan alcohol 70% tunggu sampai
kering.
14 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
2. Cuping telinga penderita dijepit antara ibu jari dan telunjuk tangan kiri.
Kemudian ditusuk diposible lancet dengan tusukan yang cukup dalam. Segera
stopwatch dihidupkan.
3. Darah yang keluar ditempel dengan kertas saring pada 30 detik kemudian
usahakan agar kertas saring tidak menempel pada luka.
4. Ulangi 30 detik pada daerah kertas saring yang berbeda – beda mengelilingi
tepian lingkaran.
5. Pada saat darah tidak keluar lagi matikan stopwatch dan catat waktunya.
Laporkan sebagai waktu pendarahan.
16 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
obat anti-platelet yang menghambat plateletselama sekitar 7 hari setelah
konsumsi. Untuk obat-obatan herbal,termasuk rempah-rempah, pengaruh
signifikan pada platelet fungsi tetapkontroversial (Tantanate, C. 2013).
17 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB III
PEMERIKSAAN CT
3.1. PENGERTIAN
Clotting Time adalah waktu yang di perlukan darah untuk membeku atau waktu
yang di perlukan saat pengambilan darah sampai saat terjadinya pembekuan. Hal
ini menunjukkan seberapa baik platelet berinteraksi dengan dinding pembuluh
darah untuk membentuk pembekuan darah. Trombin waktu membandingkan
tingkat pasien pembentukan gumpalan dengan sampel dari normal plasma
dikumpulkan. Trombin yang ditambahkan pada sampel plasma. Jika plasma tidak
segera membeku, itu berarti kekurangan (fibrinogen kuantitatif) atau cacat
kualitatif (fibrinogen disfungsional). Reptilase memiliki tindakan yang mirip
dengan trombin tetapi tidak seperti trombin tidak dihambat oleh heparin. Trombin
waktu dapat diperpanjang oleh: heparin, produk degradasi fibrin, antikoagulan lupus
(Pramudianti, 2011)
Dalam bidang tes koagulasi, Clotting time adalah salah satu yang paling prosedural
sederhana. Setelah membebaskan plasma dari seluruh darah dengan sentrifugasi,
Trombin yang ditambahkan pada sampel plasma. bekuan ini terbentuk dan terdeteksi
optikal atau mekanis dengan alat koagulasi. Waktu antara penambahan trombin
dan pembentukan gumpalan dicatat sebagai Clotting time (Pramudianti,2011).
Prosedur:
1. Lakukan vena puncti pada pendderita dengan cara yang benar, pada darah
masuk dalam syringe, nyalakan stopwatch, dan torniqet diolonggarkan.
2. Lanjutkan dengan menghisap darah perlahan sampai 3 ml
3. Syringe dilepas, penderita ditolong, spuit diambil.
4. Masukkan darah dalam ke -3 buah tabung melalui dindingnya masing – masing
1 ml.
5. Setelah berlangsung 4 menit darah dalam tabung 1 dimiringkan , untuk melihat
sudah membeku apa belum, apabila belum setiap ½ menit dimiringkan.
6. Selanjutnya setelah membeku waktu dicatat. (Misalkan : A)
7. Kemudian tabung kedua dimiringkan setiap ½ menit. Setelah membeku, waktu
pembekuan dicatat. (Misalkan: B)
8. Kemudian waktu ketiga dimringkan setiap ½ menit. Setelah membeku, waktu
pembekuan dicatat. (Misalkan: C)
18 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
Perhitungan : Clothing Time adalah = A + B+ C 3
20 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB IV
PEMERIKSAAN HEMATOKRIT
4.1 PENGERTIAN
Hematokrit berasal dari kata haimat yang artinya darah dan krinein yang berarti
pemisahan. Proses pemisahan darah melalui uji hematokrit dilakukan dengan cara
mengambil beberapa mili volume darah baik darah vena ataupun darah kapiler, lalu
memasukannya kedalam suatu tabung khusus, dan memutarnya didalam alat centrifuge
dalam waktu dan kecepatan tertentu. Untuk pemeriksaan hematokrit darah tidak boleh
dibiarkan menggumpal sehingga harus diberi antikoagulan. Setelah tabung tersebut
diputar dengan kecepatan dan waktu tertentu, maka eritrosit akan mengendap (Sadikin,
M. 2002).
Tabung khusus yang di gunakan untuk proses hematokrit disebut tabung Wintrobe.
Tabung ini mempunyai skala khusus pula yang di sebut dengan skala hematokrit. Karena
menggunakan tabung wintrobe, maka hematokrit dengan cara ini sering di sebut dengan
istilah hematokrit metode wintrobe atau metode mikro.
Pemeriksaan hematologi dibagi dalam tiga rangkaian yaitu pemeriksaan darah rutin,
pemeriksaan darah khusus dan faal hemostasis. Pemeriksaan darah rutin adalah
serangkaian pemeriksaan laboratorium klinis yang diperiksa dengan atau tanpa indikasi,
bertujuan untuk menyaring (screning) atau diagnosis suatu penyakit, meliputi
pemeriksaan kadar hemoglobin, hitung jenis leukosit, hitung eritrosit, hitung leukosit,
nilai hematokrit, hitung trombosit dan Laju Endap Darah (Kosasih, 1984).
b. Metode mikrohematokrit
Pada metode mikro, sampel darah (darah kapiler, darah EDTA, darah heparin atau
darah amonium-kalium-oksalat) dimasukkan dalam tabung kapiler yang mempunyai
ukuran panjang 75 mm dengan diameter 1 mm. Tabung kapiler yang digunakan ada 2
macam, yaitu yang berisi heparin (bertanda merah) untuk sampel darah kapiler
(langsung), dan yang tanpa antikoagulan (bertanda biru) untuk darah
EDTA/heparin/amonium-kalium-oksalat.
Prosedur pemeriksaannya adalah : sampel darah dimasukkan ke dalam tabung
kapiler sampai 2/3 volume tabung. Salah satu ujung tabung ditutup dengan dempul
(clay) lalu disentrifus selama 5 menit dengan kecepatan 15.000 rpm. Tinggi kolom
eritrosit diukur dengan alat pembaca hematokrit, nilainya dinyatakan dalam vol %.
Prinsip : Sejumlah darah dimasukkan kedalam tabung kapiler lalu dilkukan
sentrifugasi untuk mendapatkan nilai hematokrit yang diukur menggunakan Ht
Reader
Metode : Mikrohematokrit
Prinsip
Darah ditambah antikoagulan disentrifuge, maka sel eritrosit akan terpisah dari plasmanya,
tingginya kolom eritrosit adalah nilai hematokrit.
Tujuan
Untuk mengetahui kadar hematokrit dalam darah.
Tabung kapiler
Mikrosentrifuge
Creatosol
Reading device
Prosedur
1. Diisi tabung kapiler dengan darah yang langsung mengalir, sampi kira - kira 2/3
tabung.
2. Disumbat salah satu ujung kapiler dengan creatosol.
22 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
3. Diletakkan tabung dalam lekukan radier sentrifuge mikrohematokrit dengan ujung
yang tertutup creatosol jauh dari pusat centrifuge.
4. Sentrifuge dengan kecepatan antara 11.000 - 15.000 rpm selama 5 menit.
5. Keluarkan tabung kapiler, kemudian baca dengan reading device.
Interpretasi Hasil
Laki - Laki : 42 - 52 %
Perempuan : 37 - 47 %
Anak - Anak : 30 - 40 %
23 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
4.4 NILAI NORMAL
Bayi baru lahir : Hematokrit 44-65 vol %
Anak (1-3 tahun) : Hematokrit 29-40 vol %
Anak (4-10 tahun) : Hematokrit 31-43 vol %
Pria dewasa : Hematokrit 40-50 vol %
Wanita dewasa : Hematokrit 36-46 vol %
24 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB V
PEMERIKSAAN JUMLAH LEUKOSIT
5.1 PENGERTIAN
Hitung jumlah sel berinti dianggap sebagai jumlah lekosit. Sedangkan pada hitung
jenis lekosit menyatakan persentase berbagai jenis lekosit yang ada dalam darah.Hitung
jenis ini kadang diabaikan bila jumlah lekosit normal dan tidak ada kelainan hematologik
baik klinis maupun laboratoris. Namun demikian banyak kelainan seperti keganasan,
inflamasi dan kelainan imunologik menyebabkan perubahan presentase ini meskipun
jumlahnya normal (Sadikin M, 2002).
Hitung jenis leukosit dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai cara. Diagnosis
rutin pemeriksaan hitung jenis leukosit dilakukan dengan mesin penghitung sel.
Teknologi yang digunakan untuk pemeriksaan hitung jenis bergantung pada tipe mesin,
dengan mengenali berbagai karakteristik sel, seperti http://repository.unimus.ac.id 3
ukuran, pembiasan optik, impedansi dan sebagian juga menurutpulasan sitokimiawi.
Namun bila hal tersebut berkenaan dengan pengenalan sel-sel patologis, validitas jenis
pemeriksaan diferensiasi tersebut sebagian besar terbatas. Karena itu penilaian
morfologis sediaan apus darah dengan menggunakan mikroskop masih menjadi dasar
diagnosis hematologi. (Freud, 2012)
25 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
5.2 METODE PERHITUNGAN JUMLAH LEUKOSIT
Pemeriksaan hitung jumlah leukosit terdiri dari 2 metode yaitu metode manual
menggunakan kamar hitung dan metode otomatik menggunakan Hematology Analyzer.
1. Cara manual
dilakukan dengan menghitung lekosit secara visual dengan mikroskop. Darah terlebih
dahulu diencerkan dengan larutan asam lemah dan perhitungan dilakukan
menggunakan bilik hitung (counting chamber). Kesalahan cara ini adalah sebesar
15%.
Prinsip : Darah diencerkan dengan asam lemah, sel-sel selain lekosit akan dilisiskan
dan darah menjadi encer sehingga lekosit lebih mudah dihitung. Jumlah lekosit per
mikroliter darah ditentukan dengan menghitung sel-sel di bawah mikroskop dan
kemudian mengalikannya dengan menggunakan faktor pengali tertentu.
Alat dan Bahan : Mikroskop; Bilik hitung dengan kaca penutupnya; Pipet
Lekosit beserta karet pembuluhnya. Dapat juga menggunakan mikropipet
dengan tip-nya; Tabung reaksi; Pipet Pasteur; Larutan Turk yang berisi asam
asetat glacial 15 ml, gentian violet 1% 1 ml, dan aquades add 475 ml.
Cara kerja
a. Mengencerkan darah dengan larutan Turk
b. Pengenceran dapat menggunakan pipet Thoma lekosit atau tabung, dalam
contoh pemeriksaan ini, darah diencerkan 20 kali
c. Pengenceran dengan menggunakan pipet lekosit
Pipet lekosit disiapkan, selang karet dipasang pada salah satu ujung pipet
yang berada di dekat bagian yang bulat; Sampel darah dicampur baik-baik
hingga homogen kemudian diisap dengan pipet lekosit sampai skala 0,5.
Darah yang menempel di bagian luar ujung pipet dibersihkan dengan
kertas tisu; Dilanjutkan menghisap reagen sampai skala 11.Hindari
terjadinya gelembung udara; Ujung pipet ditutup dengan ibu jari dan
lepaskan selang karet.Kemudian tutup salah satu ujung pipet dengan ibu
jari dan ujung pipet lainnya dengan jari tengah.Kocok tabung selama 2-3
menit supaya homogen. Letakkan pipet di atas meja dan biarkan selama 3-
5 menit;
d. Pengenceran dengan tabung
Ke dalam tabung reaksi yang bersih dan kering diisi larutan Turk
sebanyak 190 µl dengan menggunakan mikropipet; Sampel darah
dicampur baik-baik hingga homogen kemudian diisap dengan mikropipet
10 µl. Darah yang menempel di bagian luar ujung tip pipet dibersihkan
dengan kertas tisu; Tiupkan sampel darah tersebut ke dalam larutan Turk
yang telah disiapkan. Bilas pipet dengan cara mengisap dan meniup
larutan dengan beberapa kali sampai ujung tip pipet terlihat bersih;
Tabung dikocok-kocok beberapa kali supaya homogen. Letakkan tabung
pada rak dan biarkan selama 3-5 menit.
e. Mengisi bilik hitung dengan sampel yang telah diencerkan
26 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
Periksa kebersihan permukaan area perhitungan dan kaca penutup, jika
terlihat kotor dibersihkan dulu; Letakkan kaca penutup sedemikian rupa
sehingga kedua bidang yang dibagi pada bilik hitung tertutup.Agar kaca
penutup dapat mudah melekat, kedua tanggul dibasahi sedikit dengan jari
tangan basah; Masukkan sampel yang telah diencerkan ke dalam bilik
hitung.
f. Sampel yang diencerkan dengan pipet lekosit
Kocok pipet supaya larutan sampel homogen, lalu buang 3-4 tetes
pertama; Posisikan ujung pipet pada tepi permukaan bilik hitung dengan
menyentuh pinggir kaca penutup; Biarkan tetesan larutan sampel mengalir
perlahan-lahan dengan daya kapilaritasnya.Cairan tidak boleh mengalir ke
alur bilik hitung.
g. Sampel yang diencerkan dengan tabung
Tabung darah yang sudah diberi EDTA dihomogenkan; Ambil larutan
sampel dengan pipet Pasteur kemudian teteskan ke dalam bilik
hitung.Posisikan ujung pipet pada tepi permukaan bilik hitung dengan
menyentuh pinggir kaca penutup.Alirkan larutan sampel ke dalam bilik
hitung perlahan-lahan.Cairan tidak boleh mengalir ke alur bilik
hitung.Letakkan bilik hitung pada tempat yang rata, biarkan selama 2-3
menit unutk memberi kesempatan kepada lekosit mengendap.
h. Menghitung Lekosit
Meletakkan bilik hitung pada meja preparat mikroskop, gunakan
perbesaran 10x. Kurangi cahaya yang masuk dengan menegcilkan
diafragma; Pengamatan difokuskan pada bidang-bidang bergaris dalam
bilik hitung dan carilah lekosit; Lakukan penghitungan lekosit pada 4
bidang besar bilik hitung. Semua sel yang menempel garis batas sebelah
kiri dan atas dihitung, sedangkan semua sel yang menempel garis batas
sebelah kanan dan bawah tidak dihitung; Seluruh sel lekosit yang
ditemukan dalam 4 kotak besar dicatat kemudian dilakukan penghitungan
menggunakan rumus-rumus yang ada untuk menentuka jumlah lekosit
permilimeter kubik (mm3) atau mikroliter (µl) darah; Jika jumlah sel
terlalu rendah, perlu dilakukan penghitungan lagi dengan pengenceran
yang diperkecil. Sebaliknya, jika jumlah sel terlalu tinggi, naka
pengenceran diperbesar, jika pengenceran menggunakan pipet Thoma
Lekosit, maka dapat diganti dengan pipet eritrosit
2. Cara Elektronik
Cara elektronik dewasa ini telah banyak dilakukan dengan menggunakan sebuah
mesin penghitung sel darah (hematology analyzer). Prinsip dasar digunakan yaitu
impedansi (resistensi elektrik) dan pembauran cahaya (light scattering/optical
scatter). Prinsip impedansi didasarkan pada deteksi dan pengukuran perubahan
hambatan listrik yang dihasilkan oleh sel-sel darah saat mereka melintasi sebuah flow
cell yang dilalui cahaya. Hasil hitung lekosit dengan analyzer ditampilkan pada
lembar hasil sebagai WBC (White Blood Cell). Penggunaan cara elektronik dengan
27 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
alat penghitung sel darah lebih menguntungkan karena mampu menghitung sel dalam
jumlah yang jauh lebih besar, menghemat waktu dan tenaga serta hasil cepat diterima
oleh klinisi untuk kepentingan terapi pada pasien. Namun harga tersebut mahal,
prosedur pemakaian dan pemeliharaannya harus dilakukan dengan sangat cermat.
Disamping itu upaya penjaminan mutu juga harus selalu dilakukan
5.3 ALAT
Pemeriksaan hitung jenis leukosit dengan cara otomatis yang menggunakan alat
hematology analyzer bekerja berdasarkan prinsip impedance, pada impedance, jenis-jenis
leukosit dibedakanmenurut ukurannya saja, sehingga hanya bisa membedakan 3 (tiga)
jenis leukosit yaitu sel yangberukuran kecil dimasukkan dalam kelompok limfosit, sel
yang berukuran besar dimasukkankelompok granulosit dan sel yang berukuran sedang
dimasukkan dalam kelompok mid-cells, medium sel terdiri dari basofil eosinofil dan
monosit. (Wahid, 2015).
28 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB VI
HITUNG JUMLAH ERITROSIT
6.1 PENGERTIAN
Hitung jumlah eritrosit merupakan bagian hitung darah total. Hitung eritrosit
digunakan untuk mendeteksi jumlah sel eritrosit dalam satu mikroliter (μl) atau milimeter
kubik (mm3) darah dan untuk memberikan data yang dibutuhkan dalam menghitung
volume dan hemoglobin korpuskular rata-rata, yang memperlihatkan ukuran sel eritrosit
dan kandungan hemoglobin. Hitung jumlah eritrosit juga berguna untuk mendukung uji
hematologi lain yang diperlukan untuk mendiagnosis anemia atau polisitemia (Kowalak,
J.P., dan Welsh, W., 2009).
Hitung jumlah eritrosit yang tinggi menunjukkan adanya polisitemia absolut atau
relatif. Hitung eritrosit yang menurun menunjukkan adanya anemia, kelebihan cairan,
atau perdarahan yang berlangsung lebih dari 24 jam. Uji lebih lanjut, seperti
pemeriksaan sel yang diwarnai, hematokrit, hemoglobin, indeks sel darah merah, dan
pemeriksaan sel darah putih, dibutuhkan untuk memastikan diagnosis (Kowalak, J.P., dan
Welsh, W., 2009)
2. Kaca penutup.
Hendaknya memakai kaca penutup yang khusus diperuntukkan bagi kamar
hitung. Kaca penutup itu lebih tebal dari yang biasa, sedangkan ia dibuat dengan
sangat datar. Hanya dalam keadaan darurat kaca penutup biasa boleh dipakai.
29 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
Kaca penutup untuk menghitung jumlah trombosit dengan tehnik fasekontrast
lebih tipis daripada yang dipakai untuk mikroskop biasa.
3. Pipet
Pipet Thoma untuk pengenceran eritrosit (pipet eritrosit) terdiri dari sebuah pipa
kapiler yang bergaris – bagi dan membesar pada salah satu ujung menjadi bola.
Dalam bola itu terdapat sebutir kaca merah. Pada pertengahan pipa kapiler itu
ada garis bertanda angka ”0,5” dan ada bagian atasnya, yaitu dekat bola, terdapat
garis bertanda “1,0”. Di atas bola ada angka lain lagi, yaitu pada garis tanda
“101”. Perhatikan bahwa angka – angka itu bukanlah menandakan satu volume
yang mutlak melainkan perbandingan volume. Yang penting dan menentukan
ialah pengenceran darah yang terjadi dalam pipet itu. Seandainya lebih dulu
diisap darah sampai garis tanda “0,5” kemudian cairan pengencer sampai garis-
tanda “101”, maka darah dalam bola pipet itu diencerkan 200 kali.
(Gandasoebrata R., 2007).
b. Cara Automatik (BC-2600 Auto Analyzer Hematology)
BC-2600 adalah unit tunggal yang meliputi suatu penganalisis specimen yang
berisi perangkat keras untuk aspirasi dilusi dan menganalisis setiap spesimen darah
secara keseluruhan serta bagian modul data yang meliputi komputer, monitor,
keyboard, printer dan disk drives. Analyzer BC-2600 menggunakan mode sampler
terbuka untuk menghisap sampel darah dari tabung EDTA yang kemudian dilarutkan
dan dicampurkan sebelum pengukuran masing-masing parameter dilakukan.
Pemeriksaan hitung jumlah eritrosit dapat dilakukan menggunakan alat analisis sel
darah automatic yaitu BC-2600 Auto Hematology Analyzer yang merupakan suatu
penganalisis hematologi multi parameter untuk pemeriksaan kuantitatif maksimum
19 parameter dan 3 histogram yang meliputi WBC (White Blood Cell atau leukosit),
sel tengah (monosit,basofil,eosinofil), limfosit, granulosit, persentase limfosit,
persentase sel tengah, persentase granulosit, RBC (Red Blood Cell), HGB
(Hemoglobin), MCV (Mean Cospuscular Volume), MCH (Mean Cospuscular
Hemoglobin), MCHC ( Mean Cospuscular Hemoglobin Concentration), RDW-CV,
RDW-SD, HCT (Hematocrit), PLT (Platelet), MPV (Mean Platelet Volume), PDW
(Platelet Distribution Width), PCT (Plateletcrit), WBC Histogram (White Blood Cell
Histogram), RBC (Red Blood Cell Histogram), PLT Histogram (Platelet Histogram).
1. Pengukuran WBC
menggunakan metode impedansi yang dihitung dan diukur berdasarkan pada
pengukuran perubahan hambatan listrik yang dihasilkan oleh sebuah partikel,
yang dalam hal ini adalah sel darah yang disuspensikan dalam pengencer
konduktif saat melewati lubang dimensi. Setiap partikel yang melewati lubang
mengalami perubahan sementara dalam perlawanan antara elektroda yang
diproduksi. Perubahan ini menghasilkan dorongan listrik yang terukur. Amplitude
setiap pulsa sebanding dengan volume setiap partikel, setiap pulsa diperkuat dan
dibandingkan dengan saluran tegangan acuan internal, yang hanya menerima
30 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
dorongan dari amplitude tertentu. Jika getaran pulsa melebihi range WBC, maka
dihitung sebagai WBC.
b. Bahan
Larutan hayem dengan komposisi:
o HgCl2 0,25
o NaCl 0,50
o NaSO4 2,50
o Aquadest 100 ml
Darah dengan antikoagulan EDTA
Tissue
Aquadest
I. CARA KERJA
1. Disiapkan semua alat dan bahan yang akan digunakan
2. Dipipet darah dengan pipet thoma eritrosit hingga skala 0,5
3. Dipipet larutan hayem hinggan skala 101
4. Dihomogenkan campuran tersebut dengan membentuk angka 8
5. Dibuang 3 sampai 4 tetes
6. Diletakkan objek glass pada kamar hitung kemudian larutan tadi diteteskan pada
kamar hitung.
7. Ditunggu 1 sampai 2 menit
8. Diamati dibawah mikroskop pada kotak R
31 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
Perempuan 4,2 – 5,4
2. Pengukuran HGB
ditentukan oleh metode kolorimetrik. Pengenceran WBC/HGB tersebut dikirim
ke bak WBC yang dicampur dengan jumlah tertentu yang mengubah hemoglobin
menjadi hemoglobin komplek yang diukur pada 525 nm. Sebuah LED dipasang
di salah satu sisi bak yang memancarkan sinar monokromatik yang mempunyai
panjang gelombang 525 nm, kemudian diukur dengan sensor-foto yang dipasang
di sisi yang berlawanan. Sinyal tersebut kemudian diperkuat dan tegangan diukur
lalu dibandingkan dengan referensi bacaan kosong (bacaan yang diambil ketika
hanya ada pengencer di bak). HGB tersebut dihitung dan dinyatakan dalam g/L.
3. Pengukuran RBC/PLT
dihitung dan diukur dengan metode impedansi , metode ini berdasarkan pada
pengukuran perubahan daya tahan elektris yang di produksi sebuah partikel,
dalam hal ini adalah sel darah. Tergantung konduksi diluent dalam melewati
celah/lubang yang disebut dimensi, sebuah elektroda terendam dalam cairan di
kedua sisi dari celah/lubang yang menghasilkan arus listrik. Setiap partikel yang
melewati celah ini akan mengalami perubahan pada daya tahannya diantara
elektroda-elekrtoda yang di produksi. Perubahan yang dihasilkan dapat diukur
getaran elektrisnya. Jumlah getaran menghasilkan sinyal jumlah partikel yang
melewati celah/lubang. Setiap getaran diperkuat dan di bandingkan dengan
saluran voltasi referensi yang hanya diterima oleh getaran dengan amplitude
tertentu. Jika getaran yang di bandingkan melebihi range terendah RBC/PLT
maka dihitung sebagai RBC/PLT.
4. Reagen yang diperlukan dalam pemeriksaan hematokrit cara automatik dengan
menggunakan analyzer BC-2600 antara lain diluent sebagai larutan pengencer
dan sebagai medium penghantar, reagen lyse yang dapat melisiskan eritrosit, rinse
diformulasikan untuk membilas/mencuci bak dan tabung pengukur serta untuk
menetapkan miniskus yang tepat pada tabung pengukur, pembersih E-Z
(enzimatik) adalah enzim isotonik untuk membersihkan larutan dalam bak.
6.3 ALAT
32 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB VII
HITUNG JUMLAH TROMBOSIT
7.1 PENGERTIAN
Hitung jumlah trombosit merupakan bagian dari pemeriksaan hematologi rutin yang
dapat memberikan informasi mengenai kondisi hematologik seseorang. Hasil dari
pemeriksaan hitung jumlah trombosit mempunyai arti klinis yang sangat penting untuk
berbagai kasus baik menyangkut hemostasis maupun yang lainnya dalam penegakan
diagnosis, memantau perjalanan penyakit, menilai respon terhadap pengobatan dan masa
pemulihan (Sujud dkk, 2015).
Hasil hitung jumlah trombosit diperlukan oleh klinisi untuk menentukan langkah
penanganan selanjutnya terhadap pasien sehingga pemeriksaan hitung jumlah trombosit
yang akurat sangat diperlukan terutama pada sampel trombositopenia karena berkaitan
erat dengan resiko perdarahan (Rohmawati, 2003).
Pemeriksaan hitung jumlah trombosit sedikit lebih sulit dibandingkan dengan
pemeriksaan sel darah lainnya oleh karena ukuran yang lebih kecil dan sifat trombosit
yang mudah bergerombol sehingga diperlukan ketelitian dan keakuratan dalam
pemeriksaannya. Pemeriksaan di laboratorium sering dijumpai hasil trombositopenia
yaitu jumlah trombosit di bawah nilai normal yang hasilnya terkadang dipertanyakan
oleh pengguna sehingga memerlukan konfirmasi lanjutan untuk membandingkannya
dengan laboratorium lain untuk memastikan apakah sampel yang diperiksa memang
benar-benar trombositopenia atau karena faktor lainnya.
7.2 METODE
Metode hitung jumlah trombosit dibagi menjadi 2 metode yaitu secara langsung dan
tidak langsung.
a. Cara langsung
1. Metode Rees Ecker
Darah diencerkan menggunakan pipet eritrosit kemudian dihitung dikamar hitung.
Larutan pengencer terdiri dari Brilian cresyl blue.
2. Metode Brecher cronkite
Darah diencerkan dengan larutan pengencer Ammonium oxalat 1%. Trombosit
dihitung dengan bilik hitung menggunakan mikroskop fase kontras
b. Cara tidak langsung
1. Metode fonio
Darah dicampurka dengan larutan magnesium sulfat 14% kemudian dibuat
apusan darah tepi dan diwarnai dengan pewarna giemsa atau wight.
2. Estimasi barbara brown
Dihitung dari 5-10 lapang pandang pada apusan darah tepi.eritrosit akan terlihat
menyebar pada apusan darah tepi bagian ekor.
7.3 ALAT
Pemeriksaan trombosit cara otomatis dapat menggunakan alat Hematologi Analyzer
dengan prinsip impedansi.
33 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB VIII
PEMERIKSAAN RETIKULOSIT
8.1 PENGERTIAN
Retikulosit adalah sel darah merah imatur yang mengandung sisa RNA. Hitungan
retikulosit otomatis dilakukan dengan cara yang sama dengan sel darah merah otomatis
(Bolingger P, 2012). Retikulosit yang belum matang memiliki benang-benang atau
retikulum didalamnya. Sisa RNA tadi akan menghilang dalam 1-2 hari pertama setelah
berada diluar sumsum tulang, dan eritrosit yang belum matang kemudian menjadi
eritrosit yang matur atau matang (Hiru, 2013).
Adanya RNA pada retikulosit hanya dapat dinyatakan untuk eritrosit yang masih
hidup. Sedangkan eritrosit yang telah mengering pada kaca objek atau yang telah mati
(terlalu lama) tidak dapat dipulas vital. Apabila sel yang masih hidup tersebut diberi
pewarna khusus seperti BCB dan terjadi reaksi yang dapat membentuk granula bewarna
biru, maka disebut pewarna supravital.
Pemeriksaan retikulosit seluruhnya ditentukan dengan pemeriksaan mikroskopik
pada hapusan darah tepi, dimana retikulosit diwarnai dengan pewarnaan supravital yang
menggunakan Briliant Cresyl Blue , yang menyebabkan terjadinya presipitasi ribosom,
mitokondria dan organik sitoplasmik lainnya. Pada 2 dasarnya supravital hitung
retikulosit dilakukan setelah melakukan inkubasi sampel yang telah dicampur dengan
pewarna supravital sehingga sel retikulosit terwarnai dan dapat diamati.
Hitung retikulosit digunakan untuk menilai ketepatan reaksi sumsum tulang
terhadap anemia. Hitung retikulosit relatif akurat untuk menunjukkan jumlah produksi
eritrosit dalam sisitem eritropoetik. (Rosita, L, 2006) Serangkaian pemeriksaan penyaring
untuk menetapkan klasifikasi anemia, seperti jumlah sel darah merah yang terdiri dari
hitung eritrosit, hemoglobin, dan hematokrit; indeks eritrosit yang terdiri dari mean cell
volume (MCV), mean cell hemoglobin(MCH), mean cell concentration(MCHC), dan 2
red blood cell distribution width(RDW); serta pemeriksaan tambahan berupa morfologi
darah tepi, dan hitung retikulosit. (Rosita, L, 2006).
34 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
e. Periksalah memakai lensa minyak imersi dan tentukan berapa banyak retikulosit
didapat antara 1000 eritrosit.
2. Sediaan kering
a. Masukkanlah 0,5 sampai 1 mL larutan pewarna (dalam garam) ke dalam tabung
kecil.
b. Campurlah 5 tetes darah dengan larutan tadi dan biarkan selama 30 menit.
Mengambil 1 tetes dari campuran itu untuk membuat sediaan apus seperti biasa
yang kemudian dipulas Wright atau Giemsa.
c. Campuran di atas boleh juga dipakai untuk membuat sediaan basah: setetes
diletakkan ke atas kaca obyek dengan ditutup kemudian oleh kaca penutup.
d. Periksalah dengan lensa imersi dan hitunglah jumlah retikulosit yang terlihat per
1000 eritrosit (Gandasubrata, 2007).
35 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB IX
INDEKS ERITROSIT
9.1 PENGERTIAN
Indeks eritrosit yang diperoleh berupa Mean Corpuscular Values (MCV), Mean
Corpuscular Hemoglobin (MCH), dan Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration
(MCHC) (Salam, 2012). Perhitungan indeks eritrosit biasa digunakan untuk mendignosa
jenis anemia dan dapat dihubungkan untuk mengetahui penyebab terjadinya anemia.
Nilai MCV dan MCHC mencerminkan jenis eritrosit yang diproduksi oleh sumsum
tulang (Salam, 2012).
Indeks eritrosit adalah kuantifikasi ukuran dan kandungan hemoglobin dalam sel darah
merah.Pemeriksaan indeks eritrosit termasik dalam pemeriksaan darah rutin.
37 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB X
SADT (SEDIAAN APUS DARAH TEPI)
10.1 PENGERTIAN
Pemeriksaan sediaan apus darah tepi merupakan pemeriksaan darah rutin dan
pemeriksaan penyaring. Pemeriksaan darah rutin terdiri dari Hemoglobin, jumlah sel
darah putih, hitung jenis sel darah putih, dan laju endap darah. Pemeriksaan penyaring
tediri dari gambaran darah tepi, jumlah sel darah merah, hematokrit, indeks sel darah
merah, jumlah retikolosit,dan trombosit. Sediaan apus darah tepi menurut jenisnya dibagi
menjadi dua yaitu sediaan apus darah tipis dan sediaan apus darah tebal. sediaan apus
darah mempunyai kegunaan dalam bidang parasitologi dan hematologi.(Is Suhariah
ismid dkk, 2000)
Sediaan apus darah tipis yang baik harus memenuhi syarat yaitu lebar dan panjangnya
tidak memenuhi seluruh kaca, ekornya tidak terbentuk seperti bendera robek, secara
penebalannya nampak berangsur-angsur menipis dari kepala kearah ekor, tidak
berlubang-lubang, tidak terputus-putus, tidak terlalu tebal dan pewarnaan yang baik.
(Imam Budiwiyono, 1995) Macam-macam pewarnaan pada sediaan apus darah menurut
Romanowsky ada empat macam pewarnaan yaitu pewarnaan wright’s stain, pewarnaan
Lieshman, pewarnaan may grunwald dan pewarnaan giemsa. (Imam Budiwiyono, 1995).
Sebelum melakukan pewarnaan sediaan apus darah tipis terlebih dahulu giemsa
diencerkan menggunakan buffer atau aquadest. Sebagian kecil para tenaga laboratorium
analis kesehatan atau para klinisi melakukan pengenceran giemsa dengan menggunakan
aquadest dibandingkan buffer, karena lebih cepat dalam proses pembuatannya dan dalam
segi ekonomi lebih 3 murah menggunakan aquadest dari pada buffer.
Tujuan Pemeriksaan sediaan apus darah tepi adalah untuk menilai berbagai unsur sel
darah seperti eritrosit, leukosit, serta trombosit dan mencari adanya parasit seperti
malaria, mikrofilaria, dan lain sebagainya. Apusan darah tepi memberikan banyak
informasi, bukan saja berkaitan dengan morfologi sel darah tetapi juga memberikan
petunjuk keadaan hemologik yang semula tidak diduga (Kiswari R, 2014).
Bahan pemeriksaan yang terbaik adalah darah segar yang berasal dari kapiler atau vena
yang dihapuskan pada kaca obyek. Adapun ciri sediaan apus yang baik adalah sebagai
berikut :
1. Ketebalan gradual, paling tebal di daerah kepala, makin menipis ke arah ekor
2. Apusan tidak melampaui atau menyentuh pinggir kaca obyek
3. Tidak bergelombang dan tidak putus-putus
4. Tidak berlubang-lubang
5. Bagian ekor tidak membentuk bendera robek
6. Panjang apusan kira-kira 2/3 dari panjang kaca obyek
38 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
10.2 SEBAB AKIBAT APUSAN DARAH TEPI MENJADI TIDAK LAYAK UNTUK
DIPERIKSA
SEBAB AKIBAT
Tetesan terlalu banyak/sedikit Apusan terlalu tebal dan pendek atau terlau
tipis dan panjang
Sudut geseran terlalu besar atau terlalu Sudut terlalu besar apusan terlalu tebal ;
kecil sudut terlalu kecil apusan terlalu panjang
39 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
Hal-hal yang perlu diperhatikan pada pewarnaan giemsa :
Perhatikan agar metanol tidak mengenai sediaan tetes tebal karena akan membuat
bagian tersebut terfiksasi dan hasil pewarnaan tidak sesuai dengan hasil yang
diinginkan.
Hati-hati pada saat membilas sediaan tetes tebal karena bagian tersebut tidak
difiksasi dan tidak menempel dengan kuat ke slide kaca.
40 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB XI
PEMERIKSAAN PT
11.1 PENGERTIAN
Prothrombin Time dijelaskan oleh Quick pada tahun 1935 dan tes ini sering disebut
sebagai 'Waktu Protrombin Cepat'. PT dikembangkan untuk mengukur prothrombin
(Faktor II). PT menilai jalur ekstrinsik dari koagulasi dan sensitif terhadap kelainan
faktor VII, X, V, II dan fibrinogen.
Pemeriksaan PT menggunakan darah dengan antikoagulan sitrat sebaiknya dilakukan
segera, bila terpaksa ditunda sebaiknya memperhatikan batas waktu penundaan untuk
masing-masing pemeriksaan. Jangka waktu penundaan sampel yang berupa darah
dengan antikoagulan sitrat untuk penyimpanan pada suhu 2 kamar maksimal dalam 2 jam
setelah darah diambil (R. Gandasoebrata, 2007).
Karena jika lebih dari 2 jam dapat menghambat aktivitas faktor-faktor pembekuan
sehingga hasilnya dapat memanjang. Hal ini disebabkan karena CO2 akan keluar dari
plasma sehingga pH meningkat. Dengan meningkatnya pH plasma sitrat terjadi
perubahan faktor V faktor ini mempunyai sifat yang sangat labil, sehingga dapat
menghambat aktivitas faktor-faktor pembekuan lain dan hasil pemeriksaan PT dapat
memanjang (Zulaicha, 2010).
Pemeriksaan PT (Prothrombin Time) juga sering dipakai untuk memantau efek
pemberian antikoagulan oral. Pemberian kepekaan reagen tromboplastin yang dipakai
dan perbedaan cara pelaporan menimbulkan kesulitan bila pemantauan dikerjakan di
laboratorium yang berbeda-beda. Untuk mengatasi 24 masalah tersebut ICTH
(International Comittee on Thrombosis and Haemostasis) dan ICSH (International
Comitte for Standardization in Haematology) menganjurkan agar tromboplastin jaringan
yang akan digunakan harus dikalibrasi terlebih dahulu terhadap tromboplastin rujukan
untuk mendapatkan ISI (International Sensitivity Index). Juga dianjurkan agar hasil
pemeriksaan PT dilaporkan secara seragam dengan menggunakan INR (International
Normalized Ratio), yaitu rasio yang dipangkatkan dengan ISI dari reagens tromboplastin.
Menstandarkan nilai PT (Prothrombin Time) antar laboratorium. Digunakan untuk
memantau penggunaan warfarin (Menkes, 2011).
Faktor yang dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan PT adalah sampel darah membeku,
membiarkan sampel darah sitrat disimpan pada suhu kamar selama beberapa jam, diet
tinggi lemak (pemendekan PT) dan penggunaan alkohol (pemanjangan PT).
Menilai terbentuknya bekuan bila ke daiam plasma yang telah diinkubasi ditambahkan
campuran tromboplastin jaringan dan ion kalsium Reagen yang digunakan adalah
kalsium tromboplastin, yaitu trombaplastin janngan dalam larutan(CaC12).
Beberapa jenis tromboplastin yang dapat dipergunakan misalnya:
Tromboplastin jaringan berasal dari emulsi ek strak organ otak, paru atau otak
dan paru dari kelinci dalam larutan Caci2 dengan pengawet sodium azida
(misalnya Neoplastine Cl plus)
Tromboplastin jaringan dari plasenta manusia dalam larutan CaCl2 dan pengawet
(misalnya Thrombore S)
42 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB XII
PEMERIKSAAN APTT
12.1 PENGERTIAN
APTT (activated partial thromboplastin time) merupakan bagian dari PTT.Panel APTT
adalah endpoint dari waktu pemeriksaan pembekuan darah yang berfungsi untuk
membantu diagnosis defisiensi 43emoph koagulasi pada jalur 43emophili.Misalnya
mendeteksi adanya penyakit 43emophilia atau lupus anticoagulant (LA), serta untuk
memonitoring terapi heparin.
Pemeriksaan faal hemostasis merupakan pemeriksaan untuk menilai proses
pembekuan darah salah satunya adalah pemeriksaan activated Partial Thromboplastin
Time (Aptt) (Favaloro, 2012). Pemeriksaan hemostasis memerlukan perhatian khusus,
dimana pra – analitiknya memegang peranan penting yang dapat mempengaruhi hasil tes
secara keseluruhan. Beberapa hal yang harus diperhatikan seperti saat pengambilan
sampel darah yaitu identifikasi pasien, urutan pengambilan tabung dan penggunaan
antikoagulan. Pemeriksaan hemostasis penting dilakukan dengan tujuan membantu para
tenaga medis mendiagnosa dan memantau kelainan hemostasis (Rendra, 2007).
Salah satu hal yang harus diperhatikan dalam pra-analitik pmeriksaan hemostasis
adalah antikoagulan. Pada pemeriksaan APTT antikoagulan yang digunakan Na sitrat
3,2% dengan rasio 9 volume darah dengan 1 volume antikoagulan yang berfungsi
mengikat ion kalsium dalam darah dan membentuk kompleks kalsium sitrat agar tidak
terjadi pembekuan. Sedangkan reagen yang digunakan pada pemeriksaan APTT adalah
CaCl2 berfungsi sebagai ion kalsim yang akan direaksikan dengan plasma sitrat yang,
apabila Na sitrat dalam plasma berlebih maka akan mengakibatkan pengikatan ion
kalsium dari reagen CaCl2 sehingga jumlah ion kalsium yang digunakan untk proses
pembekuan menjadi berkurang.
12.3.PRINSIP
Prinsip pemeriksaan ini adalah mengukur lamanya terbentuk bekuan bila ke dalam
plasma yang dinkubasi pada suhu 37Oc, ditambahkan reagen tromboplastin jaringan
yang mengandung ion kalsium dalam bentuk kalsium klorida (Aulia D, 2007).
43 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
BAB XIII
PEMERIKSAAN DIFFERENTIAL COUNTING
13.1 PENGERTIAN
Pemeriksaan hitung jenis leukosit (Differential Count) digunakan untuk mengetahui
jumlah berbagai jenis leukosit. Terdapat lima jenis leukosit yang masing-masing
memiliki fungsi yang khusus. Sel-sel itu adalah neutrofil, limfosit, monosit, eosinofil,
dan basophil ( Azis & Wahyu,2015). Differensial counting merupakan hitung jenis
lekosit dilakukan bersama-sama dengan pemeriksaan apus darah tepi.
13.2 PENGUKURAN
Penghitungan diferensial merupakan hitung jenis lekosit yang biasanya dilakukan
bersama-sama dengan pemeriksaan apus darah tepi. Pada hitung jenis lekosit yang
dihitung adalah jenis lekosit normal sekaligus memperhatikan kemungkinan adanya sel
lekosit abnormal dalam darah tepi atau perifer. Sel lekosit normal merupakan sel
lekosit yang sudah matang atau dewasa yang beredar pada darah perifer dan terdiri dari
basofil, cosinofil, netrofil batang, netrofil segment, limposit dan monosit. Sel lekosit
abnormal merupakan sel lekosit yang masih muda secara normal ada dalam sumsum
tulang dan dalam beberapa kasus yang dijumpai pada darah perifer.
Untuk dapat melakukan hitung jenis diperlukan preparat apus darah tepi yang baik.
Kriteria preparat hapus yang baik adalah lebar dan panjangnya tidak memenuhi seluruh
benda, secara bertahap penebalannya darah berkembang-angsur menipis dari kepala ke
ekor, tidak berlubang, tidak terputus-putus, tidak terlalu tebal dan memiliki pengecatan
44 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
yang baik. Morfologi preparat darah hapus dibagi tiga bagian yaitu kepala, badan dan
ekor. Pada bagian badan dibagi dalam enam zona (daerah baca) yang dimulai dari zona
1 yang berada dekat kepala sampai zona VI yang dekat dengan ekor.
45 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
mendapatkan hasil pemeriksaan yang baik (Arjatmo Tjokronegoro, 1996).
Bahan pemeriksaan yang terbaik adalah darah segar yang berasal dari kapiler
atau vena, yang dihapuskan pada kaca obyek. Pada keadaan tertentu dapat pula
digunakan darah EDTA. (Arjatmo Tjokronegoro, 1996).
Cara pemeriksaan :
1. Sediaan apus diletakkan di mikroskop
2. Diperiksa dengan pembesaran lemah (lensa obyektif 10 kali) untuk
mendapatkan gambaran menyeluruh.
3. Pada daerah yang eritrositnya saling berdekatan adalah daerah yang paling
baik untuk melakukan hitungan jenis leukosit. Dengan pembesaran sedang
(lensa obyektif 40 kali dan lensa okuler 10kali) dilakukan hitung jenis
leukosit, bila diperlukan dapat dilakukan penilaian lebih lanjut dari sediaan
apus menggunakan lensa objektif 100kali menggunakan oil imersi.
46 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
DAFTAR PUSTAKA
Budiwiyono, Imam. 1995. Prinsip Pemeriksaan Preparat Hapus Darah Tepi. FKUNDIP,
Semarang
Depkes RI, 1989, Materia Medika Indonesia, Jilid V, 434, 436, Departemen Kesehatan RI,
Jakarta.
Freud M, Hecner F, Dany F alih bahasa. 2012. Atlas Hematologi. Buku Kedokteran EGC.
Jakarta.
Hiru. 2013. Live Blood Analysis Setetes Darah Anda Dapat Mengungkapkan Status
Kesehatan dan Penyakit yang Mengancam Anda. PT Gramedia Pustaka Utama, jakarta.
Jason and Frances. 2010. The Microflow Cytometer. Singapore : Pan Stanford Publishing .
Rohmawati, E., 2003. Penentuan Faktor Estimasi Jumlah Trombosit Pada Sediaan Apus
Darah Tepi Pasien Trombositopenia. Semarang: s.n.
Sacher, Ronald A., McPherson, and Richard A. (2004).Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan
Laboratorium, EGC, Jakarta
Santosa, B. 2010.Differential Counting berdasarkan Zona Baca Atas dan Bawah pada
Preparat Darah Apus.Prosiding Seminar Nasional UNIMUS.2010, Semarang, Indonesia.Hal
1.
Suhariah, Ismid dkk .2000 .Penuntun Praktikum Parasitologi Kedokteran .Jakarta : FK UI.
Sujud, dkk. 2015. Perbedaan Jumlah Trombosit Pada Darah EDTA yang Segera Diperiksa
dan Penundaan Selama 1 Jam di Laboratorium RSI Grhasia Yogyakarta. Medical
Laboratory Technology Journal.
Tantanate C (2013). The bleeding time: review of basic principle, clinical applications, and
laboratory pitfalls. Siriraj Medical Journal 65 (1) : 24-29.
Wintrobe, Maxwell M. et l.1974. Clinical Hematology, Sevent Edition Tokyo : Igaki Shoin
Ltd
Zulaicha, M., 2010.Perbedaan Hasil Pemeriksaan Plasma Protrombin Time (PPT) pada
Plasma Sitrat yang Disimpan pada Suhu Ruang (20° C – 30° C) Selama 0 Jam, 2 Jam, dan 4
Jam. Universitas Muhammadiyah Semarang, Semarang
48 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam
49 | Program Studi Teknologi Laboratorium Medik Fakultas Farmasi Institut Kesehatan Medistra
Lubuk Pakam