LAPORAN PRAKTIKUM

UJI ELISA PADA HUMAN EPIDERMAL GROWTH

FACTOR/EGF KIT

Oleh :

Nindya Paramita Ardyanty

NIM : 012221012

Kelompok 1

PROGRAM STUDI D3 PARAMEDIK VETERINER

FAKULTAS VOKASI
UNIVERSITAS AIRLANGGA 2023
 TUJUAN PRAKTIKUM

1. Tujuan Umum
Tujuan dilaksanaknnya praktikum ELISA ini adalah
untuk mengetahui jumlah kuantifikasi dari protein, kadar
peptida, antibodi dan mengetahui hormon berdasarkan prinsip
ikatan antigen-antibodi.
2. Tujuan khusus
2.1. Mampu memahami dan menjelaskan mengenai Teknik
ELISA
2.2. Memahami prinsip kerja Teknik ELISA
2.3. Mampu membuat grafik dari pengenceran standar dan
memperoleh rumus perhitungan konsentrasi sampel
dengan regresi linier

PRINSIP ELISA

Type dari Human EGF ELISA kit merupakan sandwich assay.

Teknik ELISA Sandwich menggunakan antibody peimer lalu
ditambahkan antigen yang diinginkan pada sampel selanjutnya
tambahkan antigen sekunder yang dilabeli enzim. Komplek antigen
antibod primer dan antibody sekunder ini selanjutnya ditambahkan
substrat akan menghasilkan presipitat warna dan intensitas warna ini
mencerminkan konsentrasi antibody yang dicari pada sampel
 Alat dan bahan
Alat
1. Micropipette
2. Pipette tips (Yellow, White)
3. Microplate reader
4. Plate sealer
5. Microwell
6. Incubator
7. Clean tubes
8. Timer
9. APD ( Latex glove, nurse cap, Jas lab ruangan)

Bahan
1. Aluminium foil
2. Elisa Kit (Epidermal Growth factor) :
2.1. Pre-Coated ELISA Plate
2.2. Standart Solution (3200ng/L)
2.3. Standart Dillution Buffer
2.4. Streptavidin-HRP
2.5. HRP Dilluent
2.6. Biotinylated Human EGF Antibody
2.7. Wash buffer concentrate (25x)
2.8. Substrate solution A
2.9. Substrate solution B
2.10. Stop solution
3. Papper towels (Absorbents papper)
4. Air deionisasi
 PROSEDUR ELISA
1. Siapkan semua reagen, larutan standar dan sampel yang mau
digunakan. Bawa semua reagen menuju ruangan bertemperatur
sebelum digunakan. Pengujian kadar logam harus berada di
ruangan khusus dan bertemperatur tertentu
2. Tentukan jumlah strip yang dibutuhkan saat pengujian.
Masukan strip kedalam frame yang digunakan. Strip yang
tidak digunakan harus disimpan pada suhu 2~8° hingga satu
bulan
3.

6. Hasil OD sampel

7. Hasil akhir konsentrasi setelah dianalisis

8. Tampilkan jiga grafiknya menggunakan excel

9. lampirkan foto fotonya juga