ISOLASI MIKROFLORA NORMAL

PRA ANALITIK

Tujuan Untuk mengetahui mikroorganisme flora normal yang ada pada tubuh

Prinsip Dilakukan swab pada bagian tubuh kemudian dibiakkan pada media yang
tepat maka akan tumbuh koloni kuman lalu diwarnai dengan pewarnaan
gram, diamati dibawah mikroskop bentuk, susunan dan sifat bakteri.

Alat 1. Swab steril 10. Botol semprot

2. Ose bulat 11. Mikroskop
3. Lampu spiritus 12. Tisu
4. Tabung reaksi 13. Timer
5. Rak tabung reaksi 14. Etiket
6. Inkubator 15. Spidol permanen
7. Penggaris 16. Pipet tetes
8. Objek glass 17. Kapas
9. Rak pewarnaan

Bahan 1. Media NA 6. Gentian violet (gram A)

2. Media BAP 7. Lugol (gram B)
3. Media TSB 8. Alkohol 96% (gram C)
4. Alkohol 70% 9. Karbol Fuchsin (gram D)
5. Aquadest steril .

ANALITIK

Prosedur Kerja Isolasi mikroflora normal

1. Disiapkan alat dan bahan
2. Dibasahi swab dengan aquadest steril
3. Dilakukan swab pada bagian tubuh dengan swab yang sudah dibasahi
dengan aquadest steril kemudian ditanam pada media BAP/NA dan TSB
4. Diinkubasi 370C selama 24-48 jam
5. Diamati dan dicatat pertumbuhan koloni kuman :
a. Bentuk (bulat, tidak beraturan, seperti akar dll)
b. Warna (putih, kuning, merah dll)
c. Ukuran (titik, kecil, sedang, besar), dalam mm
d. Elevasi (rata, cembung, cembung dibagian tengah dll)
e. Pinggiran (rata, berlekuk, bergelombang, bergerigi dll)
f. Permukaan (rata, bergelombang dll)
g. Sifat (BAP : Hemolisis sempurna/sebagian/nonhemolisis)

Pewarnaan gram
1. Disiapkan alat dan bahan
2. Diambil 2-3 ose TSB sebagai pengencer pada objek glass
3. Diambil koloni kuman dari media agar menggunakan ose
4. Dihomogenkan koloni kuman dengan larutan pengencer
5. Dikeringkan dan difiksasi
 6. Diletakkan sediaan diatas rak pewarnaan
7. Diwarnai dengan gentian violet 3 menit  cuci
8. Digenangi dengan lugol 1 menit  cuci
9. Dilunturkan dengan alkohol 96%  cuci
10. Diwarnai dengan fuchsin 2 menit  cuci
11. Dikeringkan
12. Diamati dibawah mikroskop perbesaran 10x100 dan laporkan :
a. Bentuk
b. Susunan
c. Warna
d. Sifat (gram +/-)

PEMBAGIAN KELOMPOK
Kelompok Media Sampel
1 BAP Hidung
4 NA Mata
Kulit (kaki)
Kulit wajah
2 BAP Tenggorokan
5 NA Telinga
Kulit (tangan)
Kulit wajah
3 BAP Kulit kepala
6 NA Mulut/gigi
Lipatan kulit
Kulit wajah