UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIMIKROBA DARI

PERMEN DAUN TEH HIJAU ( Camellia sinensis )

Proposal Penelitian untuk Skripsi

oleh :
NADYA FARALITA NUR SANDRA
SK.519026

PROGAM STUDI SARJANA FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN KENDAL
TAHUN AKADEMIK 2023
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIMIKROBA PADA
PERMEN DAUN TEH HIJAU ( Camellia sinensis )

Proposal
Diajukan untuk memenuhi persyaratan gelar Sarjana Farmasi pada Program
Studi Farmasi
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal

oleh :
NADYA FARALITA NUR SANDRA
SK.519026

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN KENDAL
TAHUN AKADEMIK 2023
 KATA PENGANTAR

Dengan memanjatkan puja dan puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah m

elimpahkan rahmat taufik dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaika

n proposal penelitian ini yang berjudul : Uji Akitvitas Antioksidan dan Antimikro

ba pada Permen Daun Teh Hijau (Camellia sinensis), penulis menyadari bahwa pr

oppsal penelitian ini tidak mungkin terselesaikan tanpa adanya dukungan bantuan

bimbingan dan nasehat dari berbagai pihak selama penyusunan proposal penelitia

n ini. Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih kepada :

1. Ns. Yuli Susanti, S.Kep, M.Kep. Kom. selaku Ketua Sarjana Farmasi Sekolah

Tinggi Kesehatan Kendal.

2. apt. Ariyanti, S.Farm, M.Sc., selaku Ketua Program Studi Farmasi Sekolah Ti

nggi Ilmu Kesehatan Kendal dan selaku pembimbing 1, yang telah memberika

n bimbingan, arahan, bantuan, dengan penuh kesabaran dan perhatian dalam p

enyusunan proposal penelitian ini.

3. apt. Eni Masruriati, S.Si, M.Sc., selaku pembimbing II yang telah memberikan

bimbingan, arahan, dan bantuan dengan penuh kesabaran dan perhatian dalam

menyusun proposal penelitian ini.

4. Seluruh Dosen Program Studi Ilmu Farmasi Sekolah Tinggi Iilmu Kesehatan

Kendal yang telah membekali penulis dengan berbagai ilmu dan pengetahuan

serta pengalamannya selama penulis mengikuti perkuliahan.

5. Seluruh staf dan kasryawan Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal.

6. Kedua orang tuaku, adikku, dan seluruh keluargaku yang telah memberikan se

mangat, inspirasi dan doa yang tiada henti sehingga penulis sampai dititik ini.

I
7. Teman satu angkatan yang telah bersama-sama untuk mendukung, memotivasi

dan mendoakan untuk menyelesaikan proposal penelitian ini.

8. Serta semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah m

embantu, sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal penelitian ini.

Penulis menyadari masih banyak kekurangan dan keterbatasan dalam peny

usunan proposal penelitian ini. Penulis mengharapkan saran dan kritik yang sif

atnya membangun untuk perbaikan yang akan dating lebih baik lagi.

Kendal,

Penulis

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL..........................................................................................................
KATA PENGANTAR.......................................................................................................I

II
DAFTAR ISI......................................................................................................................III
HALAMAN PERSYARATAN.........................................................................................V
HALAMAN PERSETUJUAN..........................................................................................
HALAMAN PENGESAHAN...........................................................................................
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................................
DAFTAR TABEL..............................................................................................................
DAFTAR PERSAMAAN..................................................................................................
BAB I PENDAHULUAN..................................................................................................
A. Latar Belakang.....................................................................................................
B. Rumusan Masalah................................................................................................
C. Tujuan Penelitian.................................................................................................
D. Manfaat Penelitian...............................................................................................
E. Keaslian Penelitian...............................................................................................
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................................
A. Tanaman Teh Hijau..............................................................................................
1. Klasifikasi Daun Teh Hijau...........................................................................
2. Morfologi Daun Teh Hijau...........................................................................
3. Karakteristik Daun Teh Hijau.......................................................................
4. Kandungan Senyawa Daun Teh Hijau..........................................................
5. Sortasi............................................................................................................
B. Bakteri gram positif dan negatif...........................................................................
1. Bakteri Staphylococcus aureus.....................................................................
a) Klasifikasi Staphylococcus aureus...............................................
b) Morfologi Staphylococcus aureus................................................
2. Bakteri Bacillus subtillis...............................................................................
a) Klasifikasi Bacillus subtillis.......................................................
b) Morfologi Bacillus subtillis.......................................................
3. Bakteri Escherichia coli................................................................................
a) Klasifikasi Eschrichia coli.........................................................
b) Morfologi Escherichia coli.........................................................
C. Permen..................................................................................................................
D. Spektrofotometer..................................................................................................
E. Kerangka Teori.....................................................................................................
F. Kerangka Konsep.................................................................................................
G. Hipotesis Penelitian..............................................................................................
BAB III METODE PENELITIAN...................................................................................
A. Desain Penelitian.....................................................................................................
B. Waktu dan Tempat Penelitian..................................................................................
C. Populasi dan Sampel Penelitian...............................................................................
D. Teknik Sampling......................................................................................................
E. Variabel Penelitian..................................................................................................

III
 F. Alur Penelitian.........................................................................................................
G. Definisi Operasional................................................................................................
H. Instrumen Penelitian................................................................................................
I. Sumber Data............................................................................................................
J. Analis Data..............................................................................................................
K. Jadwal Kegiatan.......................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................................

SURAT PERNYATAAN KEASLIAN PERELITIAN

Yang betanda tangan dibawah ini :

IV
Nama : Nadya Faralita Nur Sandra

NIM : SK.519026

Prodi : S1 Farmasi

Judul : Uji Aktivitas dan Antimikroba dari Permen Daun Teh Hijau (Camellia si

nensis).

Menyatakan bahwa penelitian ini benar-benar karya ilmiah yang bebas dari unsur

PLAGIARISME, FABRIKASI dan FALSIFIKASI. Apabila di kemudian hari t

erbukti bahwa karya ilmiah tersebut mengandung salah satu maupun beberapa dar

i unsur tersebut maka saya bersedia ditanggungkan segala hal yang berkaitan deng

an penyusunan karya ilmiah tersebut kelulusan studi yang saya alami.

Demikian surat pernyataan saya susun untuk dapat digunakan seperlunya.

Kendal, 27 Maret 2023

PERSETUJUAN PROPOSAL SKRIPSI

V
Yang bertanda tangan dibawah ini menyatakan bahwa proposal penelitian skripsi

yang berjudul

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIMIKROBA DARI PERMEN DAU

N TEH HIJAU (Camellia sinensis)

Dipersiapkan dan Disusun Oleh :

NADYA FARALITA NUR SANDRA

SK.519026

Telah disetujui sebagai usulan penelitian karya ilmiah dan dinyatakan telah meme

nuhi syarat untuk dilaksanakan

Pembimbing I Pembimbing II

apt. Ariyanti, S.Farm.,M.Sc apt. Eni Masruriati, S.Si.,M.Sc

Proposal Penelitian Untuk Skripsi

VI
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIMIKROBA DARI PERMEN

DAUN TEH HIJAU (Camellia sinensis)

Oleh :

NADYA FARALITA NUR SANDRA

SK.519026

Telah disetujui dan disahkan penguji proposal dan skripsi

Pada tanggal

Dan dinyatakan memenuhi syarat untuk diterima

Pembimbing I Pembimbing II

apt. Ariyanti, S.Farm.,M.Sc apt. Eni Masruriati, S.Si.,M.Sc

NIPS : 120.210.038 NIPS : 120.215.072

Penguji :

apt. Ria Septiyana, S.Farm., M.Si

NIPS : 120.215.073

DAFTAR GAMBAR

VII
Gambar 2.1 Daun Teh

Gambar 2.2 Bakteri Staphylococcus aureus

Gambar 2.3 Bakteri Bacillus subtillis

Gambar 2.4 Bakteri Escherichia coli

Gambar 2.5 Kerangka Teori

Gambar 2.6 Kerangka Konsep

Gambar 3.1 Desain Penelitian

Gambar 3.2 Alur Penelitian

DAFTAR TABEL

VIII
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian

Tabel 3.3 Formulasi Permen Ekstrak Daun Teh Hijau

Tabel 3.4 Data Primer Uji Aktivitas Antimikroba

Tabel 3.5 Data Primer Uji Aktivitas Antimikroba

Tabel 3.6 Jadwal Penelitian

DAFTAR PERSAMAAN

IX
Persamaan 1 Rumus % Inhibisi

X
 1

BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Teh (Camellia sinensis) merupakan minuman yang sudah dikenal dengan l

uas di Indonesia. Teh hijau banyak digemari oleh semua kalangan, baik orang dew

asa maupun anak-anak. Indonesia merupakan salah satu negara produsen teh utam

a di dunia dan banyak memiliki perkebunan teh yang tersebar di Indonesia, misaln

ya di Jawa Barat, Jawa Tengah, Sumatera Barat, dan Sumatera Utara (Amelia et a

l., 2010)

Teh (Camellia sinensis) tumbuh subur di perkebunan teh Medini, Gunung

Ungaran, Gonoharjo, Kecamatan Limbangan, Kabupaten Kendal. Masyarakat kur

ang memanfaatkan teh hijau yang biasanya hanya digunakan sebagai bahan dasar

pembuatan teh seduh. Teh hijau mempunyai kandungan senyawa polifenol yang le

bih banyak dari pada teh hitam dan teh oolong, selain kandungan polifenol yang ti

nggi pada teh hijau, polifenol pada teh hijau mengalami degradasi yang paling sed

ikit pada proses pengolahanya (Juniaty, 2013).

Masyarakat Indonesia lebih banyak mengkonsumsi teh hitam dibanding te

h hijau dengan alasan cita rasa teh hitam lebih nikmat. Konsumen tertentu menilai

bahwa teh hijau cenderung kurang disukai karena memiliki yang rasa pahit dan se

pet yang ditimbulkannya. Peneliti mengatasi masalah ini dengan membuat suatu d

iversifikasi produk teh hijau, dengan penambahan bahan-bahan lain seperti peman

is atau asam untuk menutupi rasa pahit dan sepat, maka permen adalah salah satu

produk yang dapat dikembangkan (Pujilestari & Agustin, 2017).

 2

Permen merupakan olahan produk pangan yang memiliki rasa manis dan d

apat dikonsumsi dimanapun dan kapanpun, salah satu jenis permen yang banyak b

eredar di pasaran adalah permen keras (hard candy). Hard candy pada dasarnya a

dalah campuran dari gula, sirup glukosa atau gula invert, air flavor dan pewarna.

Hard candy merupakan permen yang mempunyai tekstur yang keras, penampilan

yang jernih dan biasanya terdiri dari komponen dasar sukrosa dan sirup glukosa se

rta bahan-bahan lain yang dapat ditambahkan untuk memberikan rasa yang lebih b

aik (Sibarani, 2019). Permen teh hijau selain mempunyai rasa yang enak terdapat

pula manfaat untuk kesehatan, salah satu kandungan senyawa dalam teh yang ma

mpu menjaga kesehatan tubuh adalah antioksidan.

Antioksidan mempunyai peran yang sangat penting bagi kesehatan. Terkh

usus untuk mempertahankan tubuh dari penyakit yang disebabkan oleh radikal-rad

ikal bebas. Antioksidan dapat diperoleh dari kumpulan enzim-enzim dalam tubuh

dan vitamin suplemen (Kusmiyati et al., 2015). Salah satu contoh zat antioksidan

yang dibentuk oleh tubuh sendiri adalah cysteine, glutathione dan Dpenicillamin s

edangkan yang berasal dari luar tubuh salah satu contohnya dapat diperoleh dari te

h dan madu. (Youngson, 2003). Antioksidan yang tinggi dipercaya mampu mengh

ambat aktivitas bekteri, karena didalam ekstrak teh sendiri juga mengandung epig

allocatechin-3 gallate (EGCG), yaitu memiliki efek antibiotik yang bekerja langs

ung dengan cara merusak membran sel bakteri, menghambat sintesis asam lemak

dan menghambat aktivitas enzim pada bakteri.

 3

Bakteri merupakan salah satu golongan mikroorganisme prokariotik (berse

l tunggal) yang hidup berkoloni dan tidak mempunyai selubung inti namun mamp

u hidup dimana saja (Nua et al., 2016). Resistensi bakteri terhadap antibiotik diseb

abkan oleh penggunaan antibiotik yang tidak sesuai indikasi, dan tidak sesuai dosi

s, sehingga efektivitasnya akan berkurang. Bakteri-bakteri yang resisten terhadap

antibiotik telah menjadi masalah kesehatan yang sangat besar. Penanganan bakteri

yang resisten membutuhkan herbal yang mengandung zat antimikroba untuk mem

odulasi antibiotik. Salah satu kandungan yang memiliki efek antimikroba yaitu kat

ekin (polifenol) dan antioksidan yang tinggi (Sari et al., 2020).

Menurut Jambang dalam penelitiannya mengenai aktivitas antibakteri pada

beberapa merk teh di pasaran Kota Malang menyimpulkan bahwa teh memiliki ak

tivitas bakterisidal terhadap Staphylococcus aureus, Yersinia enterolitica, Escheri

chia coli, Pseudomonas fluorescens, dan Salmonella sp (Jambang, 2004). Peneliti

an pada Oktarini mengenai uji aktivitas antibakteri ekstrak teh hijau terhadp S. aur

eus dan E. coli didapatkan rata-rata diameter zona hambatan S. aureus 6,8 mm (20

%), 7,6 mm (40%), 7,4 mm (60%), dan untuk konsentrasi 80% dan 100% tidak di

dapatkan zona hambatan sama sekali untuk semua variasi konsentrasi ekstrak, hal

ini menunjukan bahwa ekstrak teh hijau memiliki pengaruh terhadap S. aureus, tet

api tidak memiliki pengaruh terhadap E. coli (Oktarini, 2009).

Berdasarkan latar belakang tersebut, peneliti tertarik melakukan penelitian

mengenai uji aktivitas antioksidan dan antibakteri dari permen daun teh hijau deng

an konsentrasi yang berbeda dari penelitian sebelum nya. Harapannya daun teh hij

au dapat dibuat menjadi olahan pangan yaitu permen yang tidak hanya di nikmati t
 4

etapi memberikan efek baik untuk kesehatan mulut terutama menghambat bakteri

dan sebagai antioksidan.

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah dari penelitian ini adalah :

1. Apakah permen teh hijau ( Camellia sinensis ) memiliki aktivitas daya hambat

terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, dan Escherichia coli?

2. Berapakah konsentrasi optimal aktivitas daya hambat dalam permen ekstrak te

h hijau ( Camellia sinensis ) ?

3. Berapakah nilai aktivitas antioksidan (IC50) pada permen esktrak teh hijau?

C. Tujuan Penelitian

Tujuan dari permasalahan penelitian ini adalah :

1. Untuk mengetahui aktivitas daya hambat pada permen teh hijau ( Camellia sin

ensis ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, dan Escheric

hia coli.

2. Untuk mengetahui konsentrasi optimal daya hambat dalam permen ekstrak teh

hijau ( Camellia sinensis ).

3. Untuk mengetahui nilai aktivitas antioksidan (IC50) pada permen ekstrak daun

teh hijau.

D. Manfaat Peneliti
 5

1. Bagi peneliti

Menambah wawasan dan juga menambah ilmu pengetahuan tentang uji aktvita

s antioksidan dan antimikroba dari permen daun teh hijau Camellia sinensis.

2. Bagi institusi

Menambah pustaka ilmiah dan bahan rujukan untuk peneliti tentang manfaat d

aun teh hijau.

3. Bagi masyarakat

Menambah informasi dan pengetahuan kepada masyarakat tentang daun teh hi

jau sebagai permen yang bermanfaat bagi kesehatan mulut.

E. Keaslian Penelitian
Keaslian penelitian dapat dilihat pada tabel 1.1

Tabel 1.1. Keaslian Penelitian

No Penelitian tahu Jenis penelitian Desain penelitia Perbedaan
n n
1 Shanti,dkk.,2017 Mutu Permen K Eksperimentsl Judul, konsentra
eras dengan Kon si sampel
sentrasi Ekstrak
Teh Hijau yang
Berbeda
2 Sri Redjeki,2014 Uji Aktivitas An Eksperimental Judul, konsentra
timikroba Infusu si sampel
m Teh Hijau dan
Teh Hitam (Cam
ellia sinensis
(L.) Kuntze) Ter
hadap Escherich
ia coli dan Cand
ida albicans
3 Popy dkk.,2017 Efektifitas Ekstr Eksperimental Judul, konsentra
ak Etanol Teh H si sampel
ijau dalam Meng
hambat Pertumb
uhan Escherichi
a coli
4 Prematellie dkk., Uji fitokimia da Eksperimental Judul, konsentra
2019 n perbandingan si sampel
efek antioksidan
pada daun teh hi
jau, teh hitam, d
an teh putih (Ca
mellia sinensis)
 6

dengan metode
DPPH (2,2-difen
il-1- pikrilhidraz
Lanjutan Tabel 1.1 Keaslian Penelitian
il)

Tabel 1.1 menjelaskan tentang perbedaan dengan penelitian ini. Penelitian pertam

a menggunakan sampel daun teh hijau dengan konsentrasi ekstrak daun teh hijau y

ang berbeda, sedangkan penelitian ini dilakukan uji kuantitatif dengan metode DP

PH. Penelitian kedua mengunakan sampel daun teh hijau dan teh hitam sebagai ak

tivitas antimikroba dengan metode sumuran, sedangkan penelitian ini hanya meng

gunakan daun teh hijau sebagai aktivitas antimikroba dengan metode sumuran. Pe

nelitian ketiga menggunakan sampel daun teh hijau sebagai daya hambat bakteri, s

edangkan penelitian ini juga menggunakan sampel daun teh hijau sebagai daya ha

mbat bakteri. Penelitian keempat mengunakan sampel daun teh hijau, teh hitam da

n teh putih sebagai aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH, sedangkan

penelitian ini hanya mengunakan daun teh hijau sebagai aktivitas antioksidan den

gan metode DPPH.

 7

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Tanaman Teh Hijau

Tanaman (daun) teh (Camellia sinensis) adalah spesies tanaman yang daun

dan pucuk daunnya digunakan untuk membuat teh. Teh adalah bahan minuma

n yang secara universal dikonsumsi di banyak negara serta berbagai lapisan m

asyarakat (Tuminah, 2004). Teh hijau mengandung senyawa katekin lebih ting

gi dibandingkan teh hitam, sehingga teh hijau dapat mencegah pertumbuhan p

enyakit kanker (Tuty Anggraini, 2017). Teh hijau memiliki nama ilmiah Came

llia sinensis dan telah dianggap memiliki anti-kanker, anti-obesitas, anti-ateros

klerosis, antidiabetes dan efek antimikroba (Ahmad et al, 2014).

1. Klasifikasi Daun Teh Hijau

Daun teh hijau dapat dilihat pada gambar 2.1.

Gambar 2.1. Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis )

Menurut Tuminah, (2007) klasifikasi tanaman teh adalah sebagai berikut:

Devisi : Spermatophyta

Kelas : Angiospermae
 8

Sub Kelas : Dicotyledoneae

Ordo : Guttiferales

Famili : Camelliaceae

Genus : Camellia

Spesies : Camellia sinensis L

2. Morfologi Teh Hijau

Teh hijau adalah tanaman dari keluarga Teaaceae, tanaman nya ber

warna hijau dan mempunyai tinggi 10-15 meter di alam dan tinggi 0,6-1,5

meter jika dibudidayakan sendiri. Daun tanaman ini berwarna hijau muda,

panjang 3-5 cm dan lebar sekitar 4 cm. Tanaman ini memiliki bunga berw

arna putih dengan diameter 2,5–4 cm dan biasanya soliter atau berpasanga

n (Mahmood et al., 2010). Teh merupakan tanaman yang berbentuk pohon,

tetapi karena pemangkasan sering kali deperti perdu dengan tinggi 5-10 m

(van Steenis, 2008). Buahnya berbentuk pipih, bulat, dan terdapat satu biji

dalam masing-masing buah dengan ukuran sebesar kacang (Biswas, 2006).

3. Karakteristik Teh Hijau

Teh dapat tumbuh di pantai hingga pegunungan, Pegunungan yang

ditanami teh biasanya dengan ketinggian lebih dari 2.000 meter di atas per

mukaan laut. Kebun teh biasanya dikembangkan di daerah pegunungan de

ngan iklim yang sejuk. Teh dapat tumbuh di dataran rendah, namun tana

man teh hijau tidak dapat menghasilkan kualitas yang baik, semakin tinggi

daerah tempat teh ditanam, semakin tinggi kualitasnya. Pohon teh membut

uhkan kelembaban tinggi 13-29,5 C (Soraya, 2002). Pohon teh mempunya

i batang yang kecil, sehingga tumbuh dengan bentuk yang mirip pohon ce
 9

mara (Muljiana, 1993). Teh komersial dibuat dari pucuk pohon teh (Camel

lia sinensis) melalui teknik pengolahan tertentu. Teh dapat dibagi menjadi

empat jenis, yaitu teh hijau, teh oolong, teh putih, dan teh hitam. Teh hijau

dibuat dengan memanaskan atau mengukus untuk menonaktifkan enzim ok

sidase/fenolase pada daun teh segar untuk mencegah oksidasi enzim kateki

n (Hartoyo, 2003).

4. Kandungan Senyawa Kimia Teh Hijau

Teh hijau mengandung beberapa senyawa kimia seperti katekin, flavanol,

pektin, alkaloid, klorofil dan zat warna, vitamin-vitamin dan mineral.

a. Katekin

Senyawa katekin merupakan senyawa penting dalam daun teh. Kat

ekin berperan sebagai antioksidan yang dapat meningkatkan kesehatan

tubuh. Katekin juga merupakan metabolit sekunder yang diproduksi se

cara alami oleh tumbuhan dan termasuk golongan flavonoid. Struktur

molekul katekin, cincin A dan B memiliki dua gugus fenolik dan satu

gugus dihidropirin pada cincin C. Katekin juga dapat disebut polifenol

karena terdapat lebih dari 1 (satu) gugus fenolik. Kandungan total kate

kin pada daun teh segar bervariasi antara 13,5-31% dari berat daun teh

kering (Towaha J, 2013). Katekin dalam daun teh merupakan senyawa

yang sangat kompleks yang terdiri dari komponen catechin (C), epicate

chin (EC), epigallocatechin (EGC), epicatechin error (ECG), dan epiga

lokatekin galat (EGCG). Epigalokatekin galat (EGCG) merupakan ko

mponen utama katekin dengan presentase sebesar 13% dihitung dari be

rat daun teh kering (Jatuwaparok, 2014). Katekin merupkan komponen

 10

dalam penentu mutu daun teh yang memiliki sifat tidak berwarna, larut

dalam air, serta dapat mempengaruhi rasa, warna, dan aroma pada teh

(Hartoyo, 2003). Katekin memiliki antioksidan yang melimpah dan pal

ing kuat 200 kalinya dari antioksidan lain seperti vitamin C dan E (Du

et al., 2012).

b. Flavanol

Flavanol atau flavonoid merupakan golongan terbesar dari polifeno

l yang juga efektif digunakan sebagai antioksidan (Astawan & Kasih, 2

008). Flavonol sebagai antioksidan mampu menghambat pertumbuhan

sel kanker (Winarsi, 2007). Flavanol merupakan senyawa yang memili

ki aktivitas sebagai antioksidan alami dan mempunyai kemampuan me

ngikat logam.Selain itu, flavanol juga dapat menguatkan dinding pemb

uluh darah. Flavonoid sangat larut dalam air (Wahyusi, et al., 2020).

c. Pektin

Pektin terdiri dari pektin dan asam pektat, dengan kandungan berki

sar 4,9- 7,6% dari berat kering daun. Proses pengolahan teh, pektin aka

n terurai menjadi asam pektat dan metil alkohol, sebagian metil alkoho

l akan menguap ke udara dan sebagian akan menjadi ester yang berper

an dalam memberikan aroma teh. Suasana asam, asam pektat akan me

mbentuk gel yang berfungsi mempertahankan bentuk gulungan daun se

telah digiling. Gel akan membentuk lapisan di permukaan daun teh yan

g berperan untuk mengurangi oksidasi, pada proses pengeringan lapisa

n gel akan mengering membentuk lapisan mengkilat yang disebut bloo

m dari teh (Kurnia Sari et al., 2019)

 11

d. Alkaloid

Alkaloid memiliki satu buah atom nitrogen atau lebh dengan sifat b

asa sehingga disebut alkaloid. Alkaloida yang ditemukan dan dihasilka

n oleh tanaman termasuk dalam bagian kelompok metabolit sekunder

(Trevor, 2000). Alkaloid mampu memberikan rasa menyegarkan pada t

eh. Presentase alkaloid yang terkandung dalam daun teh antara 3-4% d

ari berat daun kering Alkaloid utama dalam daun teh adalah senyawa k

afein, theobromin, dan theofolin. Alkaloid dan pengolahan kafein tidak

akan terurai, tetapi kafein akan bereaksi dengan katekin membentuk se

nyawa yang menentukan kesegaran (briskness) dari seduhan teh (Towa

ha J, 2013)

e. Klorofil dan Zat Warna yang lain

Klorofil diketahui berperan sebagai antioksidan bagi tubuh. Daun

mengandung klorofil, karena itu daun berwarna hijau (Istri Mirah, 202

0). Klorofil dan kandungan zat warna dalam daun teh sekitar 0,019% d

ari berat daun kering. Salah satu unsur penentu kualitas teh hijau adala

h warnanya, sehingga klorofil sangat berperan dalam warna hijau pada

teh hijau. Oksidasi enzimatis pada pengolahan teh hitam, klorofil yang

berwarna hijau segar mengalami penguraian menjadi feofitin yang ber

warna hitam. Sebagian warna karetenoid akan teroksidasi menjadi subs

tansi mudah menguap yang terdiri dari aldehid dan keton tak jenuh yan

g berperan memberikan aroma seduhan teh. Karetenoid lainnya berper

an dalam memberi warna kuning jingga (Towaha J, 2013).

f. Vitamin-vitamin
 12

Vitamin A, B1, B2, B3, B5, C, E dan K merupakan vitamin-vitami

n yang terkandung dalam daun teh. Kandungan vitamin-vitamin terseb

ut pada daun teh hijau lebih tinggi dibandingkan teh hitam, karena vita

min-vitamin tersebut sangat peka terhadap proses oksidasi dan suhu tin

ggi. Pada teh hijau kandungan vitamin B (B1, B2, B3, dan B5) lebih be

sar 10 kali lipat dari sayuran, selain itu kandungan vitamin C nya juga l

ebih tinggi dari buah apel, jeruk, ataupun tomat. Dalam satu cangkir te

h hijau mengandung 100-200 IU vitamin E dan 300-500 IU vitamin K

(Towaha J, 2013).

g. Mineral

Kandungan mineral dalam daun teh sekitar 4-5% dari berat daun ke

ring.Jenis mineral yang terkandung dalam daun teh adalah K, Na, Mg,

Ca, F, Zn, Mn, Cu dan Se.Mineral F merupakan mineral yang kandung

annya paling tinggi di antara jenis mineral lainnya yng terkandung dala

m daun teh. Mineral F memberikan maanfaat pada gigi dengan memba

ntu mempertahankan dan menguatkan gigi agar terhindar dari karies (T

owaha J, 2013).

5. Sortasi

Sortasi adalah proses pemisahan sampel berdasarkan grade dan ku

alitasnya, dalam hal ini meliputi fisika, biologi dan kimia (Pramono et al.,

2018). Sortasi bertujuan untuk menghasilkan produk yang memenuhi kond

isi yang diinginkan. Sortir mempunyai fungsi untuk mencapai kualitas yan

g konsisten, mengontrol ruang, dan memberikan tampilan spesimen yang l

ebih menarik pada sampel (Asiah et al.,2020).

 13

Menurut Setiawan (2017), sortasi berdasarkan prosesnya dibedakan menja

di dua antara lain :

a. Sortasi basah

Sortasi basah dilakukan saat bahan masih segar setelah proses pem

eriksaan. Sortasi basah dapat dilakukan secara manual (Seragih, 2020).

Sortasi basah bertujuan untuk memisakan kotoran dan bahan yang tida

k akan digunakan dalam penelitian sebelum proses pencucian (Setiawa

n, 2017). Kotoran ringan yang berukuran kecil dapat dipisahkan mengg

unakan nyiru dengan arah gerakan ke atas dan ke bawah serta memutar

(Indah Yulia, 2016).

b. Sortasi kering

Sortasi kering adalah tahap akhir dalam proses pembuatan simplisi

a (Saragih, 2020). Sortasi kering dilakukan setelah proses pengeringan.

Tujuan sortasi kering untuk memisahkan kotoran yang tertinggal dan

mendapatkan bahan simplisia yang terbaik dan tidak rusak (Setiawan,

2017). Kegiatan ini dilakukan secara manual untuk memastikan bahwa

simplisia terbebas dari bahan asing (IndahYulia, 2016).

6. Ektraksi

Ekstraksi adalah suatu proses dimana satu atau lebih komponen ki

mia dipisahkan dari suatu sampel dengan menggunakan pelarut tertentu ya

ng sesuai. Prinsip ekstraksi didasarkan pada kelarutan sampel dalam pelaru

t, sehingga komponen kimia sampel dapat terekstrak secara optimal (Wija

 14

ya et al., 2019). Ekstraksi yang sering digunakan di laboratorium adalah ek

straksi padat-cair. Ekstraksi memiliki mekanisme padat-cair yang diawali

dengan penyerapan pelarut pada permukaan sampel, dilanjutkan dengan di

fusi dan pelarut sampel. Difusi antara sampel dan pelarut terjadi sangat cep

at, yang mengontrol seluruh proses ekstraksi (Leba, 2017). Menurut wewe

kang et al.(2021), berdasarkan ada tidaknya proses pemanasan. Metode ek

straksi padat cair antara lain :

a. Cara dingin

Proses ekstraksi dingin tidak dilakukan pemanasan, hal ini dimaksudka

n agar komposisi yang diinginkan tidak rusak akibat tekanan suhu ting

gi (wewekang et al.,2021). Ekstraksi dingin dibagi menjadi beberapa je

nis, antara lain:

1) Maserasi

Maserasi adalah metode ekstraksi dengan cara perendaman pad

a suhu kamar dengan pelarut tertentu yang sesuai. Maserasi digunak

an dalam skala kecil atau industri (Mukhriani, 2014). Perendaman b

erlangsung 3-5 hari dengan pengadukan sesekali untuk mempercepa

t proses pelarutan. Maserasi diulangi untuk mendapatkan ekstraksi s

ampel yang di inginkan (Leba, 2017). Pengerjaan metode maserasi

yang lama dan dalam keadaan diam selama maserasi memungkinka

n banyak senyawa yang akan terekstraksi (Istiqomah, 2013).

2) Perkolasi

Perkolasi adalah metode ekstraksi di mana pelarut dituangkan d

i atas sampel dalam perkolator. Pelarut ditambahkan secara bertahap

 15

dan terus menerus. Pelarut dialirkan melalui wadah terpisah dengan

pola tetesan dan disesuaikan dengan jumlah pelarut yang keluar (Le

ba,2017). Prinsip metode perkolasi adalah serbuk simplisia ditempat

kan dalam bejana silinder, yang bagian bawahnya diberi sekat berpo

ri, cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melaluib serbuk terse

but, cairan penyari akan melarutkan zat aktif dalam sel-sel simplisia

yang dilalui sampel dalam keadaan jenuh (Dirjen POM, 2014). Peng

aliran meningkatkan difusi dengan dialiri cairan penyari sehingga za

t seperti terdorong untuk keluar dari sel (Sulaiman, 2011).

b. Ekstraksi panas

Ekstraksi secara panas dilakukan untuk mengekstraksi komponen k

imia yang tahan terhadap pemanasan, seperti glikosida, saponin, dan m

inyak-minyak menguap yang mempunyai titik didih yang tinggi. Menu

rut Tobo, 2011). Metode ekstraksi panas antara lain :

1) Sokhletasi

Sokhletasi merupakan ekstraksi dengan alat soklet. Sokhlet

asi mempunyai prinsip yaitu ekstraksi dilakukan secara terus mene

rus dengan sedikit pelarut. Proses ekstraksi pelarut dapat diuapkan

dan menghasilkan eskstrak. Pelarut yang digunakan biasanya pelar

ut yang memiliki titik didih rendah atau mudah untuk menguap (L

eba,2017). Proses ini berlangsung hingga penyarian zat aktif semp

urna yang ditandai dengan beningnya cairan penyari yang melalui

pipa sifon atau jika diidentifikasikan dengan kromatografi lapis tip

is tidak memberikan noda lagi (Dirjen POM, 2014).

 16

2) Refluks

Rrefluks merupakan metode yang dipengaruhi oleh waktu, juml

ah dan titik didih pelarut tersebut dengan adanya pendingin balik (k

ondensor) (Wewekang et al.,2021). Refluks dilakukan pada sampel

yang tahan terhadap panas. Pemanasan pada metode ini dilakukan s

ecara berulang, sehingga pelarut akan terus berkurang karena terjadi

penguapan. Kondensor digunakan untuk mendinginkan uap pelarut,

sehingga pelarut kembali ke tabung ekstraksi (Yasni, 2013). Ekstrak

si ini biasanya dilakukan tiga kali dan setiap kali diekstraksi selama

empat jam (Tobo, 2011).

B. Bakteri gram positif dan negatif

1. Bakteri Staphylococus aureus

a) Klasifikasi Staphylococus aureus

Menurut (Jawetz,2005) Klasifikasi Staphylococus aureus sebagai be

rikut :

Kingdom : Protozoa

Divisio : Schyzomycetes

Kelas : Schyzomycetes

Ordo : Eubacteriales

Famili : Micrococcacea

Genus : Staphylococus

Spesies : Staphylococus aureus

Bakteri Staphylococus aureus dapat diihat pada gambar 2.2

 17

Gambar 2.2. Bakteri Staphylococus aureus

b) Morfologi Staphylococus aureus

Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram positif berbentu

k bulat berdiameter 0,7-1,2 μm, tersusun dalam kelompok-kelompo

k yang tidak teratur seperti buah anggur, fakultatif anaerob, tidak be

rbentuk spora, dan tidak bergerak (Kristiani, 2018). Manusia hampir

semua pernah mengalami infeksi Staphylococcus aureus di beberap

a titik dalam hidup mereka, yang berkisar dari tingkat keparahan ker

acunan makanan atau infeksi kulit ringan hingga infeksi serius yang

mengancam jiwa. Staphlococus aureus patogen bersifat invasif, me

nyebabkan hemolisis, membentuk koagulase dan dapat merusak ma

nitol. Infeksi Staphlococus aureus ditandai dengan kerusakan jaring

an dan abses. Staphlococcus aureus juga merupakan penyebab utam

a infeksi yang didapat di rumah sakit, penyakit bawaan makanan da

n sindrom syok toksik (Kusuma, 2009). Bakteri ini pada agar mirin

g dapat hidup sampai berbulan-bulan (Syahrurahman et al., 2010).

2. Bakteri Bacillus subtilis

a) Klasifikasi bakteri Bacillus subtills

 18

Berikut ini klasifikasi Bacillus subtilis (Madigam, 2005).

Kingdom : Bacteria

Filum : Fimicutes

Kelas : Bacilli

Ordo : Bacillales

Famili : Bacillaceae

Genus : Bacillus

Spesies : Bacillus subtilitis

Bakteri Bacillus subtillis dapat dilihat pada gambar 2.3.

Gambar 2.3. Bakteri Bacillus subtilis

b) Morfologi Bacillus subtilis

Bacillus subtilis merupakan bakteri saprofit dan terbawa tana

h yang mendorong siklus hara karena kemampuannya menghasilk

an berbagai enzim. Bakteri ini telah digunakan dalam industri untu

k menghasilkan protease, amilase, antibiotik dan bahan kimia. Bac

illus subtilis dapat menyebabkan penyakit yang mempengaruhi fun

gsi kekebalan tubuh manusia, seperti meningitis dan gastroenteritis

akut (Jawetz et al., 2005). Bakteri Bacillus subtilis adalah jenis ba

kteri gram positif dan merupakan hasil (batang) yang mampu mem
 19

bentuk endospora berbentuk oval di tengahnya, menghasilkan asa

m sitrat katalase positif dan oksidasi positif (Awais et al., 2010). P

ertumbuhan bakteri ini seperti cincin konsentris, permukaan bakter

i pada agar berukuran kecil dengan tepi keriting, permukaannya be

rbentuk granular dan kusam. Bakteri ini berbentuk batang panjang

3-4 μm dan memiliki lebar 0,6-0,8 μm, bakteri ini mempunyai flag

ella sehingga bersifat motil (Wakita et al., 2010).

3. Bakteri Escherichia coli

a) Klasifikasi bakteri Escherichia coli

Kingdom : Bacteria

Filum : Proteobacteria

Kelas : Gamma Proteobacteria

Ordo : Enterobacteriales

Famili : Enterobacteriaceae

Genus : Escherichia

Spesies : Escherichia coli

Bakteri Escherichia coli dapat dilihat pada gambar 2.4.

Gambar 2.4. Bakteri Escherichia coli

 20

b) Morfologi bakteri Escherichia coli

Escherichia coli merupakan keluarga dari Enterobacteriace

ae. Escherichia coli adalah bakteri gram negatif yang terbentuk bat

ang pendek atau sering disebut kokobasil. Bakteri Escherichia coli

mempunyai flagel, yang mempunyai ukuran 0,4-0,7 μm x 1,4 μm,

dan memiliki panjang 2 μm, diameter 0,7 μm, lebar 0,4 μm dan be

rsifat anaerob fakulatif dan membentuk koloni yang bundar, cembu

ng, dan halus dengan tepi yang nyata (Hidayati dkk, 2016). Escheri

chia coli merupakan bakteri yang memiliki 150 tipe antigen O, 50 t

ipe antigen H, dan O tipe antigen K. Penyakit yang spesifik berhub

ungan dengan antigen O, dapat ditemukan pada penyakit infeksi sal

uran kemih dan diare (Karsinah,2011). Escherichia coli merupakan

bakteri anaerob fakulatif yang dapat hidup pada keadaan aerob mau

pun anaerob. Oksigen digunakan untuk sumber karbon dari luar ya

ng berfungsi sebagai tenaga untuk tumbuh baik secara oksidatif. Hi

dup anaerob dengan menggunakan cara fermentasi sebagai penghas

ilkan energi untuk kelangsungan hidup (Manning, 2010).

C. Permen

Permen adalah makanan padat yang dibuat dengan gula atau bahan

pemanis lainnya atau tanpa bahan makanan lain dan bahan tambahan maka

nan yang disetujui (SNI-01-3547-1993). Menurut penelitian Hardjant dan

Wariyah (2005), teh hijau diolah menjadi karamel dalam bentuk permen lu

nak. Penelitian ini mengembangkan jenis permen lain yaitu permen keras.

Masalah lain dalam membuat permen keras adalah membutuhkan suhu yan
 21

g lebih tinggi daripada membuat permen lunak, dan menambahkan terlalu

banyak ekstrak teh hijau akan membuat permen menjadi lebih gelap dan p

ahit, tetapi menambahkan terlalu sedikit akan menghasilkan kandungan po

lifenol yang rendah. Permen yang menggunakan sukrosa murni mudah me

ngalami kristalisasi, bagian sukrosa yang terdispersi ini akan menyebabka

n kristalisasi pada produk akhir, oleh karena itu digunakan bahan lain untu

k meningkatkan kelarutan dan menghambat kristalisasi, seperti sirup gluko

sa, dan gula invert (Sigit, 2016).

D. Spektrofotometer

Spektrofotometri UV diukur pada panjang gelombang 200-400 nm. Spektr

ofotometri UV disebut juga spektrum elektronik karena terjadi sebagai hasil in

teraksi radiasi UV dalam suatu molekul tempat terjadinya transisi elektronik.

Ketika radiasi elektromagnetik bekerja pada suatu molekul atau atom, sebagia

n radiasi tersebut diserap oleh molekul atau atom tersebut sesuai dengan strukt

urnya yang memiliki gugus kromoforik (Mukhriani, 2014). Bagian- bagian spe

ktrofotometri UV adalah antara lain :

1. Sumber cahaya (Wardani & Andria, 2012)

Sumber cahaya harus memiliki intensitas tinggi dan pancaran radiasi yang

harus stabil. Sumber cahaya spektrofotometri UV-Vis dibagi menjadi dua

sebagai berikut :

a. Lampu Wolfram

Lampu Tungsten (Wolfram) adalah lampu yang digunakan untuk men

gukur sampel pada daerah tampak. Lampu ini memiliki bentuk mirip

dengan bola lampu pijar biasa. Panjang gelombang antara 350-2200 n

 22

m. Spektrum radiasianya berupa garis lengkung. Umumnya memiliki

waktu 1000 jam pemakaian (Wayan Suarsa, 2015). IR dekat dapat di

gunakan sumber sinar lampu-lampu Tungsten-Hidrogen (Rohman, 20

14).

b. Lampu Deuterium

Lampu deuterium memiliki waktu pemakaian selama 500 jam. Deu

terium dipakai pada Panjang gelombang 190-380 nm. Spektrum radia

sinya lurus, dan digunakan untuk mengukur sampel pada daerah UV

(Sembiring et all.,2019).

2. Monokromator

Monokromator berfungsi untuk mendapatkan radiasi monokromati

s dari sumber radiasi yang memancarkan radiasi polikromatis. Monokrom

ator pada spektrofotometer UV-Vis biasanya terdiri dari susunan: celah (sl

it) masuk- filter – prisma - kisi (grating) - celah keluar (Wardani & Andri

a, 2012).

3. Kompartemen sampel

Komertemen merupakan tempat meletakkan kuvet, yaitu tempat di

mana sampel diletakkan. Kuvet memiliki fungsi meneruskan energi cahay

a pada daerah spectral yang diinginkan (Hidayah, 2021). Kuvet dipilih be

rdasarkan daerah panjang gelombang yang digunakan, bertujuan agar sina

r UV dapat diabsorbsi dengan maksimal dengan panjang gelombang yang

sesuai pengukuran pada daerah UV menggunakan jenis kuvet kuarsa atau

fuset silika karena kuvet kaca tidak dapat mengasorbsi sinar UV (Sembiri

ng et all.,2019).
 23

4. Detektor

Detektor adalah salah satu bagian dari spektrofotometer UV-Vis ya

ng penting, maka dari itu kualitas detektor akan menentukan kualitas sepk

trofotometer UV-Vis. Fungsi detektor didalam spektrofotometer adalah m

engubah sinyal radiasi yang diterima menjadi sinyal elektronik. Detektor

mempunyai beberapa macam yang telah dipakai dalam spektrofotometer

UV Vis dianatara lain :

a. Detektor fotosel

b. Detektor tabung foton hampa

c. Detektor tabung penggandaan foton (photomultiplier tube)

d. Detektor photo diode-array, yang merupakan detector dengan teknolo

gi yang modern (Mulya, 1994).

E. Kerangka Teori

Kerangka teori dapat dilihat pada gambar 2.5.

Daun Teh Hhijau

Katekin Flavanol Pektin

Dingin Panas

maserasi perkolasi sokletasi refluks

Ekstrak daun teh hijau

 24

Sortasi
Uji antioksidan Uji antimikroba

Analisa data

Gambar 2.5 Kerangka Teori

F. Kerangka Konsep

Kerangka konsep dapat dilihat pada gambar 2.6.

Variable Bebas Variable Terikat

Kontrol negatif

(permen daun teh hijau)

Kontrol positif Aktivitas daya hambat terhad

(permen daun teh hijau)
Konsentrasi ekstrak dau
n teh hijau 3%
ap bakteri Staphylococus aure
us, Bacillus subtilis dan Esch
erichia coli

Nilai aktivitas antioksidan (IC

50 )
Konsentrasi ekstrak dau
n teh hijau 5%
 25

Konsentrasi ekstrak dau

n teh hijau 7%

Gambar 2.6. Kerangka Konsep

G. Hipotesis Penelitian

1. Adanya aktivitas daya hambat pada permen teh hijau (Camellia sinensi

s) terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, dan Esche

richia coli.

2. Konsentrasi optimal daya hambat pada permen ekstrak teh hijau (Came

llia sinensis ) adalah pada konsentrasi 7%.

3. Nilai aktivitas antioksidan maksimum pada permen ekstrak daun teh hi

jau adalah pada konsentrasi 7%.

 26

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Desain Penelitian

Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental. Desai

n penelitian yang digunakan yaitu pra eksperimental berupa pendekatan on

e shot care study design. Perlakuan dilakukan setelah penelitian dengan se

kali pengukuran (Simarmata et al.,2021). Desain penelitian dapat diliat pad

a gambar 3.1.

Kontrol negatif

(permen daun teh hij

au)
Ekstrak Daun Te Kontrol positif
h Hijau
(permen daun teh hij
au)
Aktivitas antioksidan
Konsentrasi permen
dan antimikroba
ekstrak daun teh hija
u 3%
 27

Konsentrasi permen
ekstrak daun teh hija
u 5%

Konsentrasi permen
ekstrak daun teh hija
u 7%

Gambar.3.1 Desain Penelitian

B. Lokasi dan Waktu Penelitian

1. Tempat Penelitian

Tempat penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia Program Studi Sarjana Fa

rmasi STIKES Kendal

2. Waktu Penelitian

Waktu penelitian dilakukan pada bulan Maret sampai Juli 2023.

C. Populasi dan Sampel

1. Populasi Penelitian

Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh daun teh hijau (Camellia sinensi

s) yang terdapat di desa Gonoharjo, Perkebunan teh Medini, Gunung Ungaran.

2. Sampel Penelitian

Sampel yang digunakan adalah sebagian daun teh hijau (Camellia sinensis) ya

ng diperoleh di desa Gonoharjo, Perkebunan teh Medini, Gunung Ungaran. De

 28

ngan ciri daun yang diambil bagian pucuk yang masih muda, berwarna hijau,

panjang daun 3-5 cm dan lebar sekitar 4 cm.

D. Teknik Sampling

Teknik sampling dalam penelitian ini adalah purposive sampling, dengan syste

m pengambilan sampel non-eandom. Pengambilan sampel dilakukan dengan perti

mbangan peneliti sendiri berdasarkan ciri populasi yang telah diketahui (Riyanto e

t al.,2020). Tanaman daun teh yang digunakan adalah pucuk daun teh yang masih

muda.

E. Variabel Penelitian

Variabel adalah deskripsi tentang suatu objek atau fenomena yang berfariasi a

ntara satu dengan yang lainnya (Duli, 2019). Identifikasi variabel dalam penelitian

ini digunakan untuk membantu menentukan alat pengumpula data dan teknik anali

sa data. Variabel dalam penelitian ini sebagai berikut :

1. Variabel Bebas (Independen)

Variabel bebas yaitu variabel yang dapat mempengaruhi penyebab perubahan

atau timbulnya variabel terikat, variabel bebas dalam penelitian ini formulasi e

kstrak daun teh hijau konsentras 3%, 5% dan 7%.

2. Variabel Terikat (Dependen)

Variabel terikat yaitu variabel yang dipengaruhi atau menjadi akibat karena ad

anya variabel bebas, variabel terikat pada penelitian ini adalah daya hambat ter
 29

hadap bakteri Staphylococus aureus, Bacillus subtilis dan Escherichia colli pa

da permen ekstrak daun teh hijau dan aktivitas antioksidan.

F. Alur Penelitian

Alur penelitian dapat dilihat pada gambar 3.2.

Tanaman Daun Teh Hij

au

Determinasi

Ekstraksi

Soxhletasi

Ekstrak

Formulasi

Formulasi 1 Formulasi 2 Formulasi 3

Konsentrasi 3% Konsentrasi 5% Konsentrasi 7%
 30

Pengujian :
1. Uji aktivittas daya hamb
at
2. Konsentrasi IC50

Gambar 3.2. Alur Penelitian

G. Definisi Operasional

Definisi operasional adalah pedoman lengkap tentang apa yang harus d

iamati dan mengukur variabel yang akan diuji kesempurnaannya (Sugiarto

2016). Skala pengukuran digunakan untuk menentukan jumlah informasi d

an analisis data secara tepat (Sugiharti et al.,2021).

1. Permen konsentrasi 3% adalah suatu sediaan yang terbuat dari ekstrak

daun teh hijau (Camellia sinensis) yang melewati proses sokhletasi, dib

uat menjadi permen dengan menambahkan sukrosa, sirup glukosa dan

aquadest sebagai zat tanbahan.

2. Permen konsentrasi 5% adalah suatu sediaan yang terbuat dari ekstrak

daun teh hijau (Camellia sinensis) yang melewati proses sokhletasi, dib
 31

uat menjadi permen dengan menambahkan sukrosa, sirup glukosa dan

aquadest sebagai zat tanbahan.

3. Permen konsentrasi 7% adalah suatu sediaan yang terbuat dari ekstrak

daun teh hijau (Camellia sinensis) yang melewati proses sokhletasi, dib

uat menjadi permen dengan menambahkan sukrosa, sirup glukosa dan

aquadest sebagai zat tanbahan.

4. Kontrol positif merupakan kelompok kontrol yang menggunakan perm

en dengan merek yang ada di pasaran yaitu Bontea.

5. Kontrol negatif merupakan kelompok kontrol yang menggunakan perm

en tanpa ekstrak teh hijau.

6. Aktivitas antioksidan dan antimikroba dari permen ekstrak daun teh hij

au merupakan sediaan permen yang diperoleh dari ekstraksi daun teh h

ijau sebagai antioksidan dan daya hambat bakteri Staphylococcus aure

us, Bacillus subtillis, dan Escherichia coli.

H. Instrumen Penelitian

1. Alat dan Bahan Penelitian

a. Alat penelitian

Alat yang digunakan dalam penlitian ini antara lain, timbangan, waja

n, pengaduk, kertas saring, termometer, penangas, cetakan permen, b

uret, erlenmeyer, beaker glass, pipet, tube mixer, texture analyzer dan

spektrofotometer

b. Bahan Penelitian
 32

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain, ekstrak daun t

eh hijau, air, etanol 70%, sukrosa, sirup glukosa, dan NaCl.

2. Cara pengumpulan data

Pada penelitian ini, data diperoleh dengan metode praktik yaitu melakukan

praktikum secara langsung dengan perlakuan yang sesuai.

3. Formulasi sediaan

Formulasi sediaan permen yang sudah dimodifikasi dapat dilihat pada tabel

3.3.

Tabel 3.3. Formulasi permen ekstrak daun teh hijau

Bahan F0 F1 F2 F3 F+
Ekstrak daun teh 40% 60% 80%
Sukrosa 50 g 50 g 50 g
Sirup gkukosa 35 ml 35 ml 35 ml
Natrium klorida 0,4 g 0,4 g 0,4 g
Aquadest 6,6 ml 6,6 ml 6,6 ml

4. Prosedur Penelitian

a. Persiapan

1. Peneliti membuat surat permohonan izin penelitian yang

disetujui Dosen Pembimbing dan Ketua Program Studi S

arjana Farmasi Stikes Kendal.

2. Peneliti mengajukan surat izin permohonan penggunaan f

asilitas Laboratorium Kimia Unimus Semarang.

3. Mempersiapkan alat dan bahan yang diperlukan dalam m

elakukan uji aktivitas antioksidan dan antimikroba dari p

ermen teh hijau.

 33

4. Membuat lembar observasi untuk mencatat hasil penelitia

n.

b. Deskripsi Sampel

Penelitian ini menggunakan daun teh hijau (Camellia sinensis) yang

diambil dari Perkebunan Teh Medini, Nglimut, kec. Limbangan, Kab. Kend

al.

c. Pelaksanaan

1. Preparasi sampel

Sampel berupa daun teh hijau dengan kualitas baik, daun teh hija

u tidak busuk atau terlalu tua dan rusak. Kemudian daun dibersihkan da

ri kotoran yang melekat menggunakan air mengalir, lalu ditiriskan dan

dikeringkan dengan sinar matahari. Penjemuran daun teh hijau dibawah

sinar matahari harus ditutup menggunakan kain hitam agar senyawa yan

g terkandung pada daun teh hijau tidak rusak. Daun teh yang sudah keri

ng selanjutnya dihaluskan dengan cara diblender. Selanjutnya dilakukan

proses ekstraksi.

2. Pembuatan estrak daun teh hijau

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode sokhleta

si. 100 gram serbuk daun teh hijau dibungkus dengan kertas saring, ikat k

edua ujungnya dengan benang, lalu masukan ke dalam alat sokhlet, kemu

dian masukan 500 ml pelarut etanol 96% ke dalam labu sokhlet untuk me

mbasahi sampel. Lakukan proses sokletasi pada suhu 70°C sampai tetesan

siklus tidak berwarna. Filtrat yang dihasilkan kemudian diuapkan dengan

 34

rotary evaporator pada suhu tidak melebihi 50°C dan diuapkan hingga me

njadi ekstrak pekat.

3. Pembuatan sediaan permen

Permen keras dibuat dengan cara memasak bahan utama berupa su

krosa (gula pasir) dengan aquadest pada suhu 100°C hingga sukrosa larut.

Kemudian ditambahkan sirup glukosa, diaduk sampai homogen dan dipan

askan hingga suhu pemanasan akhir 150°C. Campuran gula diaduk terus s

ampai suhu turun menjadi 80°C, setelah suhu turun ditambahkan ekstrak

daun teh hijau sesuai formula yang sudah ditentukan dan diaduk sampai c

ampuran homogen. Permen lalu dicetak dan dikemas setelah dingin (Felg

a Zulfia, 2022).

4. Pengujian antioksidan

Pengujian antioksidan meliputi :

a) pembuatan DPPH

Larutan induk konsentrasi 50 ppm dibuat dengan melarutkan 50 mg

DPPH dalam 100 ml methanol dalam labu takar.

b) Pembuatan sampel uji

Siapkan larutan induk sampel sebesar 100 ppm dengan melarutkan 10

mg ekstrak dalam 100 ml methanol.

c) Uji aktivitas antioksidan

Sampel uji disiapkan masing-masing 2 ml dan 2 ml larutan DPPH. In

kubasi selama 30 menit pada suhu ruang hingga terjadi perubahan wa

rna. Setelah di inkubasi di uji nilai absorbansi pada Panjang gelomba

 35

ng 517 nm dengan spekstrofotometer Uv-vis. Aktivitas antioksidan d

alam menghambat radikal bebas dapat ditentukan dengan persamaan

…pe

rsamaan 1

d) Perhitungan nilai IC50

Berdasarkan data dan pengukuran yang telah diperoleh, kemudian dih

itung IC50

5. Pengujian antimikroba

Pengujian antimikroba meliputi :

a) Pembuatan biakan bakteri

Bakteri diambil menggunakan jarum ose dan diinokulasi dalam 10 ml

NaCl 0,9% secara aseptik. Homogenkan dan inkubasi pada suhu 37°

C.

b) Pembuatan media NA (Nutrigent agar)

Nutrigent Agar (NA) ditimbang sebanyak 4 gram kemudian dilarutka

n dengan aquadest steril sebanyak 200ml, aduk hingga homogen. Pan

askan diatas Bunsen sampai media menjadi bening dan terlarut sempu

rna sambal diaduk-aduk. Selanjutnya disterilkan dalam autoklaf pada

suhu 121°C selama 15 menit. Media NA disiapkan dengan cara ditua

ngkan ke dalam masing-masing cawan petri dalam keadaan hangat, bi

arkan memadat.

c) Uji daya hambat metode sumuran

Media yang sudah siap digunakan dibuat tiga sumuran, atur jarak sum

uran. Sumuran masing-masing diisi dengan bakteri dan formulasi per

 36

men dengan konsentrasi 3%, 5% dan 7% serta permen teh hijau sebag

ai kontrol positif, kemudian diinkubasi, amati zona yang terbentuk lal

u ukur diameternya menggunakan jangka sorong dalam satuan milim

eter (mm).

I. Sumber Data

Data yang digunakan pada penelitian ini adalah data primer yang didapatkan dari

pengujian sendiri di laboratorium. Data penelitian ini dapat dilihat pada tabel 3.4 d

an tabel 3.5

Tabel. 3.4. Data primer uji aktivitas antimikroba

Daya hambat radikal bebas (%)

Konsentrasi ekstrak pada perm

en
Bakteri Uji Replikasi Absorbansi Kontrol
Control Formulasi 1 Formulasi Formulasi positif
Konsentrasi 2 konsentr konsentrasi (perme
3% asi 5% 7% n teh hij
au)
Staphylococus 1
aureus 2
3
Bacillus subtil 1
is 2
3
Escherichia c 1
oli 2
3

Tabel. 3.5. Data primer uji aktivitas antimikroba

Daya hambat radikal bebas (%)

Konsentrasi ekstrak pada perm

Bakteri Uj en
Replikas Absorbans Kontrol
i i i Formulasi 1 Formulasi Formulasi positif
Control Konsentras 2 konsentr konsentras (perme
i 3% asi 5% i 7% n teh hij
au)
Staphylococu 1
s aureus 2
3
 37

Bacillus subtil 1
is 2
3
Escherichia c 1
oli 2
3

J. Analisis Data

Data dari hasil evaluasi dikumpulkan dan dianalisa. Analisa data yang dig

unakan pada penelitian ini adalah analisis univariate yang digunakan untuk me

njelaskan atau mendeskripsikan karakteristik setiap variabel penelitian (Notoat

modjo, 2018) dan analisis bivariate yang digunakan untuk mengetahui perbeda

an konsentrasi 3%, 5%, 7% dan konsentrasi paling optimal kemudian dianalisa

menggunakan uji anova.

a. Analisis univariate

Analisis univariate digunakan untuk menguji variabel tunggal. Analisis di

lakukan untuk menguji distribusi sampel menggunakan deskriptif atau me

njelaskan karakteristik yang telah disimpulkan (Hasinder et al., 2020).

b. Analisis bivariate

Analisa bivariate adalah Analisa langsung yang dilakukan pada dua variab

el. Hasil Analisa bivariate dapat berupa statistic deskriptif ataupun infrens

ial, yang diperoleh dari data variabel terikat dan variabel bebas yang salin

g terhubung. Data penelitian yang diperoleh dianalisis pengaruhb konsentr

asi sampel dengan presentase inhibisi. Hasil absorbansi yang didapatkan,

kemudian dihitung nilai IC50, sehingga didapatkan kesimpulan semakin ke

 38

cil IC50, maka semakin tinggi nilai aktivitas antioksidannya (Widyasanti et

al., 2016).

1. Jadwal Penelitian

Jadwal penelitian dapat dilihat pada tabel 3.6.

Tabel 3.6 Jadwal Penelitian

Kegiatan Bulan (tahun 2023)

Jan Feb Mar Apr Mei Jun Jul
Pengajuan judul
Penyusunan Propos
al
Sidang proposal
Revisi
Penyiapan bahan da
n alat penelitian
Penelitian
Analisa hasil
Pembuatan laporan
skripsi
Ujian skripsi
Revisi laporan skri
psi
Pengumpulan lapor
an skripsi
 39

DAFTAR PUSTAKA

Amelia, R., Sudomo, P., & Widasari, L. (2010). ( Camellia sinensis ) SEBAGAI A
NTI BAKTERI TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus dan Escherich
ia coli SECARA IN VITRO Perpustakaan UPN " Veteran " Jakarta Perpusta
kaan UPN " Veteran " Jakarta. 177–182.
Kurnia Sari, D., Rachmawanti Affandi, D., & Prabawa Jurusan Ilmu Teknologi Pa
ngan Fakultas Pertanian, S. (2019). Pengaruh Waktu Dan Suhu Pengeringan
Terhadap Karakteristik Teh Daun Tin (Ficus Carica L.) Effect of Drying Tim
e and Temperature on the Characteristics of Fig Leaf Tea (Ficus Carica L.). J
urnal Teknologi Hasil Pertanian, 12(2), 68–77.
Kusmiyati, M., Sudaryat, Y., Lutfiah, I. A., Rustamsyah, A., & Rohdiana, D. (201
5). Aktivitas Antioksidan, Kadar Fenol Total, Dan Flavonoid Total Teh Hija
u (Camellia Sinensis (L.) O Kuntze) Asal Tiga Perkebunan Jawa Barat. Jurn
al Penelitian Teh Dan Kina, 18(2), 101–106.
Nua, A. R., Fatimawali, & Bodhi, W. (2016). Uji Kepekaan Bakteri Yang Diisolas
i Dan Diidentifikasi Dari Urin Penderita Infeksi Saluran Kemih (Isk) Di Rsu
p Profi. Dr. R. D. Kandou Manado Terhadap Antibiotik Cefixime, Ciproflox
acin Dan Cotrimoksazole. Pharmacon, 5(4), 174–181.
 40

Pujilestari, S., & Agustin, I. (2017). Mutu Permen Keras Dengan Konsentrasi Ekst
rak Teh Hijau Yang Berbeda. Jurnal Konversi, 6(2), 55. https://doi.org/10.24
853/konversi.6.2.9
Sari, S. L., Hakim, R., & Sulistyowati, E. (2020). Efek Antibakteri Kombinasi Da
un Teh Hijau (Camellia sinensis) dengan Amoksisilin pada Staphylococcus a
ureus atau Escherichia coli secara in vitro. Jurnal Kedokteran Komunitas, 1–
10.
Sibarani, K. P. (2019). FORMULASI EKSTRAK BUAH KERSEN (Muntingia cala
bura L.) DAN EKSTRAK BUAH LEMON (Citrus limon) TERHADAP PEMB
UATAN HARD CANDY.
Wardani, & Andria, L. (2012). Validasi Penentuan Kadar Vitamin C Pada Minum
an Buah Kemasan Dengan Spektrofotometri Uv-Visible. Universitas Indones
ia, 37.
Amelia, R., Sudomo, P., & Widasari, L. (2010). ( Camellia sinensis ) SEBAGAI ANTI BAKTER
I TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus dan Escherichia coli SECARA IN VITRO
Perpustakaan UPN " Veteran " Jakarta Perpustakaan UPN " Veteran " Jakarta. 177–
182.
Kurnia Sari, D., Rachmawanti Affandi, D., & Prabawa Jurusan Ilmu Teknologi Pangan Faku
ltas Pertanian, S. (2019). Pengaruh Waktu Dan Suhu Pengeringan Terhadap Karakte
ristik Teh Daun Tin (Ficus Carica L.) Effect of Drying Time and Temperature on the C
haracteristics of Fig Leaf Tea (Ficus Carica L.). Jurnal Teknologi Hasil Pertanian, 12
(2), 68–77.
41