Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59

DOI 10.1186/s12879-015-0796-0

ARTIKEL PENELITIAN Akses terbuka

Kontribusi uji pelepasan interferon-gamma

haemagglutinin yang mengikat heparin untuk
mendeteksiMycobacterium tuberkulosisinfeksi pada
pasien terinfeksi HIV: perbandingan dengan tes kulit
tuberkulin dan QuantiFERON®-TB Gold In-tube

Chloe Wyndham-Thomas1,2, Violette Dirix1, Agak Penipu2,Charlotte Martin3, Marc Hildebrand4, Jean-
Christophe Goffard2, Fanny Domont1, Myriam Libin1, Marc Loyens5,6,7,8, Camille Locht5,6,7,8, Jean-Paul
Van Vooren2dan Francoise Mascart1,9*

Abstrak
Latar belakang:Skrining dan pengobatan infeksi tuberkulosis (TB) laten mengurangi risiko perkembangan penyakit aktif dan saat ini
direkomendasikan untuk pasien terinfeksi HIV. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi, dalam rangkaian kejadian TB
yang rendah, kontribusi potensial dari uji pelepasan interferon-gamma sebagai respons terhadap antigen latensi mikobakteri
Heparin-Binding Haemagglutinin (HBHA-IGRA), terhadap deteksiMycobacterium tuberkulosisinfeksi pada pasien yang terinfeksi HIV.

Metode:Orang dewasa terinfeksi HIV yang belum pernah menggunakan pengobatan direkrut dari 4 rumah sakit yang berbasis di
Brussels. Subyek menjalani skrining TB laten menggunakan HBHA-IGRA bersamaan dengan metode klasik yang terdiri dari riwayat
kesehatan, rontgen dada, tes kulit tuberkulin (TST) dan QuantiFERON®-TB Gold In-Tube (QFT-GIT). Tindak lanjut klinis dan biologis
pun dilakukan, dengan pengujian berulang dengan HBHA-IGRA. Sekelompok pasien terinfeksi HIV dengan dugaan klinis TB aktif juga
direkrut dan diuji dengan HBHA-IGRA. Analisis multipleks dilakukan pada supernatan kultur pengujian internal ini untuk
mengidentifikasi pembacaan tes alternatif selain interferon-gamma yang dapat meningkatkan sensitivitas tes.
Hasil:Di antara 48 kandidat yang terdaftar untuk skrining, 9 diidentifikasi menderita TB laten berdasarkan hasil TST dan/atau QFT-
GIT. Empat dari 9 pasien ini dan 3 pasien lainnya dinyatakan positif dengan HBHA-IGRA. Pengujian internal ini mengidentifikasi
semua pasien yang positif TST dan menunjukkan kesesuaian terbaik dengan adanya tes TST.M.tuberkulosis risiko paparan. Selama
masa tindak lanjut (median 14 bulan) tidak ada kasus TB aktif yang dilaporkan dan hasil HBHA-IGRA tetap konstan secara global.
Empat belas pasien terinfeksi HIV dengan dugaan klinis TB aktif direkrut. TB aktif dikonfirmasi pada 6 diantaranya, 3 di antaranya
positif HBHA-IGRA, masing-masing dengan konsentrasi interferon-gamma yang sangat tinggi. Semua pasien yang akhirnya
disingkirkan dari TB aktif, termasuk 2 pasien dengan infeksi mikobakteri non-TB, mempunyai hasil HBHA-IGRA negatif. Analisis
multipleks mengkonfirmasi interferon-gamma sebagai pembacaan terbaik.
(Lanjutan di halaman berikutnya)

* Korespondensi:fmascart@ulb.ac.be
1Laboratorium Vaksinologi dan Imunologi Mukosa, Université Libre de

Bruxelles, Brussels, Belgia

9Klinik Imunobiologi, Hôpital Erasme, Brussels, Belgia Daftar

lengkap informasi penulis tersedia di akhir artikel

© 2015 Wyndham-Thomas dkk.; pemegang lisensi BioMed Central. Ini adalah artikel Akses Terbuka yang didistribusikan berdasarkan
ketentuan Lisensi Atribusi Creative Commons (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0), yang mengizinkan penggunaan, distribusi, dan
reproduksi tanpa batas di media apa pun, asalkan karya aslinya adalah dikreditkan dengan benar. Pengabaian Dedikasi Domain Publik
Creative Commons (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) berlaku untuk data yang tersedia dalam artikel ini, kecuali
dinyatakan lain.
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59
(Lanjutan dari halaman sebelumnya)
Kesimpulan:HBHA-IGRA tampaknya melengkapi QuantiFERON®-TB Gold In-Tube untuk skrining TB laten pada pasien terinfeksi HIV.
Penelitian skala besar diperlukan untuk menentukan apakah kombinasi ini menawarkan sensitivitas yang cukup untuk mengabaikan
TST, seperti yang ditunjukkan oleh hasil kami. Selain itu, HBHA-IGRA dapat membantu dalam menegakkan diagnosis kecurigaan
klinis terhadap TB aktif.
Kata kunci:TBC aktif, Hemaglutinin pengikat heparin, Manusia, Human immunodeficiency virus, Uji
pelepasan interferon-gamma, Tuberkulosis laten, Multipleks,Mycobacterium tuberkulosis,QuantiFERON®-TB
Gold In-Tube, tes kulit tuberkulin
Latar belakang
Pada orang yang terinfeksi HIV, risiko reaktivasi infeksi
tuberkulosis laten (LTBI) mencapai 10% per tahun, dan risiko
keseluruhan terkena tuberkulosis (TB) aktif adalah 21 hingga
34 kali lebih besar dibandingkan orang yang tidak terinfeksi
HIV [1, 2]. Meskipun risiko ini menurun dengan pengobatan
kombinasi terapi antiretroviral (cART), risiko ini masih dua kali
lipat dibandingkan populasi umum [3]. Oleh karena itu, TBC
masih menjadi penyebab utama kematian pada pasien yang
terinfeksi HIV. Pada tahun 2012, 13% dari 8,6 juta kasus baru
TBC yang dilaporkan di seluruh dunia didiagnosis pada pasien
yang hidup dengan HIV dan 320.000 orang meninggal karena
TBC terkait HIV [4]. Menanggapi ancaman ini, pencegahan TBC
melalui skrining dan pengobatan LTBI pada pasien terinfeksi
HIV kini direkomendasikan oleh pedoman internasional dan
dipromosikan oleh strategi “Tiga I” Organisasi Kesehatan
Dunia untuk pengendalian TBC. (“Penemuan kasus yang
intensif, terapi pencegahan Isoniazid dan pengendalian infeksi
TBC untuk orang yang hidup dengan HIV”) [4-6].
Tes yang tersedia saat ini yang digunakan untuk mendeteksi
LTBI adalah tes kulit tuberkulin (TST), QuantiFERON®-TB Gold
In-Tube (QFT-GIT) dan T-SPOT.TB®. TST mengukursecara
alamirespon hipersensitivitas tertunda terhadap antigen
mikobakteri yang terkandung dalam Purified Protein
Derivative (PPD). Tes ini kurang sensitif, khususnya pada
orang yang terinfeksi HIV, dan memiliki spesifisitas yang
rendah karena reaktivitas silang dengan vaksin BCG dan
mikobakteri non-tuberkulosis [7,8]. QFT-GIT dan T-SPOT.TB®
adalah tes pelepasan interferongamma (IGRA) berbasis sel T
yang masing-masing mengukur tingkat Interferon-gamma
(IFN-γ) yang dilepaskan dan jumlah sel yang memproduksi
IFN-γ setelahnya. sebuahsecara in vitrostimulasi oleh RD-1/
RD-11 spesifikMycobacterium tuberkulosis (Mtb)antigen.
Kedua tes ini menunjukkan spesifisitas yang lebih besar
dibandingkan TST untuk diagnosis LTBI namun sensitivitasnya
masih kurang [9,10]. Hasil yang tidak sesuai antara ketiga tes
ini sering terjadi pada pasien terinfeksi HIV, bahkan di
rangkaian vaksinasi BCG yang rendah [11], dan oleh karena itu
kombinasi TST dan IGRA dianjurkan untuk meningkatkan
sensitivitas skrining [5,6].
Berbagai strategi untuk menemukan alat skrining LTBI
yang unggul sedang dijajaki, termasuk pengembangan
IGRA sebagai respons terhadap alternatifMtbantigen tidak
Halaman 2 dari 11
hadir di QFT-GIT dan T-SPOT.TB®. Kandidat potensial adalah
Heparin-Binding Haemagglutinin (HBHA), suatu senyawa
termetilasiMtbprotein dianggap sebagai antigen latensi. Memang
benar, sebagian besar subjek LTBI menunjukkan tingkat sekresi
IFN-γ yang tinggi oleh limfosit perifer ketika distimulasi dengan
HBHA. Tingkat IFN-γ yang dicapai secara signifikan lebih tinggi
dibandingkan dengan yang tercatat pada subjek yang bebas dari
IFN-γMtbinfeksi dan pada pasien dengan TB aktif [12,13]. IGRA in-
house berdasarkan HBHA (HBHA-IGRA) telah terbukti menjadi alat
skrining LTBI yang menjanjikan, baik pada orang dewasa yang
mempunyai imunitas yang baik maupun pada pasien yang
menjalani hemodialisis [13,14]. Pada pasien terinfeksi HIV, satu-
satunya hasil yang tersedia mengenai tanggapan IFN-γ terhadap
HBHA adalah yang diterbitkan oleh Loxtondkk.,yang menguji
respon antigenik dengan tes darah lengkap pada 4 subjek yang
tinggal di Afrika Selatan [15]. Tujuan dari penelitian ini adalah
untuk mengevaluasi, dalam rangkaian kejadian TB yang rendah,
potensi kontribusi HBHA-IGRA terhadap skrining LTBI pada pasien
terinfeksi HIV.
Metode
Pernyataan etika
Protokol untuk penelitian ini (P2011/311 dan P2011/113)
mendapat persetujuan dari komite etika terkemuka “ULB -
Hôpital Erasme” (nomor agregasi OMO21) dan semua
peserta menandatangani persetujuan.
Pengaturan belajar
Penelitian ini dilakukan di Belgia, negara dengan insiden TBC
rendah dengan kurang dari 10 kasus/100.000 penduduk, dan lebih
tepatnya di ibu kotanya, Brussel, yang melaporkan kejadian TBC
sebesar 27,4/100.000 penduduk [16]. Pendaftaran pasien
dilakukan antara Desember 2011 dan Desember 2012, dan tindak
lanjut klinis dilakukan hingga November 2013.
Garis besar studi
Orang dewasa yang terinfeksi HIV yang belum pernah menggunakan
pengobatan (≥18 tahun) direkrut dari 4 rumah sakit yang berbeda.
Kriteria eksklusi adalah kehamilan, menyusui dan pengobatan anti-TB
dalam 6 bulan terakhir. Subyek yang terdaftar menjalani skrining LTBI
pada awal dengan HBHA-IGRA yang paralel dengan pendekatan klasik
yang terdiri dari riwayat kesehatan, rontgen dada, TST dan QFT-GIT.
Tindak lanjut klinis prospektif
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59
terjadi dan semua peristiwa relevan didokumentasikan:
inisiasi pengobatan LTBI, inisiasi cART, novelMtb
paparan faktor risiko dan perkembangan TB aktif atau
sindrom pemulihan kekebalan terkait TB (TB-IRIS).
HBHA-IGRA diulangi selama tahun pertama masa
tindak lanjut dengan ritme yang ditentukan oleh dokter
yang merawat untuk mengevaluasi parameter infeksi
HIV pasien.
Sekelompok orang dewasa HIV-positif dengan dugaan klinis
TB aktif juga direkrut dan dites dengan HBHA-IGRA. Tujuannya
adalah untuk mengevaluasi apakah hasil HBHA-IGRA yang
diperoleh pada pengobatan TB aktif berbeda dengan hasil
yang diperoleh pada LTBI. Memang benar, diskriminasi relatif
antara TB dan LTBI berdasarkan HBHA-IGRA yang dilakukan
pada PBMC telah dijelaskan pada orang yang tidak terinfeksi
HIV tetapi apakah hal ini tetap terjadi pada pasien yang
terinfeksi HIV masih belum diketahui [13]. Untuk kelompok
pasien ini, sampel darah diambil untuk HBHA-IGRA sebelum
atau dalam waktu 5 hari setelah pengobatan anti-TB dan, jika
dipastikan TBC, diulangi setelah setidaknya 1 bulan terapi.
Diagnosis TBC didasarkan pada bukti mikrobiologis atau
kecurigaan klinis yang tinggi dengan respons yang baik
terhadap pengobatan anti-TB. Jika memungkinkan, infeksi
tersebut dikualifikasikan sebagai “membuka kedok TB-IRIS”,
“TB-IRIS paradoks” atau “terkait ART” menggunakan definisi
kasus Jaringan Internasional untuk Studi IRIS terkait HIV
(INSHI) [17]. Sekali lagi, kejadian klinis relevan yang timbul
selama pengobatan didokumentasikan.
Untuk semua pasien CD4+Jumlah sel T, CD4+persentase,
CD4+/CD8+rasio dan viral load yang dilakukan dalam waktu
1 bulan setelah HBHA-IGRA dicatat pada awal dan selama
masa tindak lanjut.
Akhirnya, berbagai kemokin dan sitokin
dikuantifikasi dengan teknologi multipleks dalam
supernatan kultur pilihan QTF-GIT dan HBHA-IGRA
dengan tujuan mengidentifikasi pembacaan tes
pelengkap untuk IFN-γ.
Skrining LTBI klasik: riwayat kesehatan,
rontgen dada, TST dan QFT-GIT
Riwayat kesehatan diambil dengan menggunakan kuesioner
tentang data epidemiologi umum, status vaksinasi BCG, faktor
risikoMtbpaparan dan untuk reaktivasi LTBI. Kuesioner diisi
oleh spesialis penyakit menular yang berpartisipasi. Rontgen
dada diperoleh dengan pandangan postero-anterior dan
lateral dan diinterpretasikan di setiap rumah sakit oleh ahli
radiologi lokal. TST dilakukan dengan injeksi intradermal 2
unit PPD RT23 (Statens Serum Institute, Denmark) dan
indurasi dievaluasi 72 jam kemudian oleh spesialis penyakit
menular tersebut. Batas positif yang digunakan adalah
diameter indurasi≥5 mm, seperti yang saat ini
direkomendasikan untuk pasien terinfeksi HIV [6,18]. QFT-GIT
adalah IGRA komersial yang digunakan (Qiagen, Venlo, The
Halaman 3 dari 11
Belanda). Analisis dan interpretasi dilakukan oleh
laboratorium Imunobiologi Hôpital Erasme, mengikuti
instruksi pabrik. Darah diambil sampelnya untuk QFT-
GIT, seperti untuk HBHA-IGRA in-house, pada hari
pertama TST atau dalam waktu 3 hari untuk
menghindari efek peningkatan dari injeksi PPD [19].
HBHA-IGRA
HBHA-IGRA dilakukan seperti yang dijelaskan sebelumnya
[20]. Singkatnya, sel mononuklear darah tepi (PBMC)
dimurnikan dari sampel darah segar. Empat juta sel kemudian
didistribusikan secara merata ke dalam 4 tabung untuk
memungkinkan stimulasi simultan dengan (1) 2 μg/ml HBHA
asli (dimurnikan seperti yang dijelaskan sebelumnya [21]), (2) 4
μg/ml PPD (Statens serum Institute, Copenhagen , Denmark)
sebagai sinyal paparan mikobakteri sebelumnya, (3) 0,5 μg/ml
superantigen SEB (Sigma Aldrich, Bornem, Belgia) sebagai
kontrol positif atau (4) media saja sebagai kontrol negatif. Di
setiap tabung, 1 ng/ml Interleukin-7 (R&D Systems Europe,
Abington, UK) ditambahkan, sebuah teknik yang baru-baru ini
terbukti meningkatkan sensitivitas pengujian tanpa
mengubah spesifisitasnya [20]. Sel-sel yang distimulasi
kemudian diinkubasi dalam medium RPMI 1640 (Lonza,
Verviers, Belgia) yang diperkaya sebagaimana dijelaskan di
tempat lain [22]. Supernatan kultur dipanen setelah 24 jam
dan disimpan pada suhu −20 C. Konsentrasi IFN-γ dalam
supernatan diukur dengan sandwich klasik ELISA (Elisa IFN-γ
Cytoset, Life technology, Gent, Belgia). Jika terdeteksi,
konsentrasi yang diperoleh dalam kondisi bebas antigen
dikurangi dari konsentrasi yang diperoleh dengan stimulasi
antigen untuk mengukur respons spesifik antigen. Pengujian
dengan konsentrasi IFN-γ di bawah 100 pg/ml sebagai
respons terhadap SEB dianggap tidak dapat ditentukan.
Batasan yang diterapkan untuk konsentrasi IFN-γ sebagai
respons terhadap PPD dan HBHA masing-masing adalah 200
pg/ml dan 50 pg/ml, sebagaimana telah didefinisikan pada
orang dewasa yang memiliki kompetensi imun. Respon positif
terhadap PPD dan HBHA diperlukan agar pengujian dianggap
positif, karena metode interpretasi ini telah divalidasi
sebelumnya dan meningkatkan spesifisitas pengujian [20].
Analisis multipleks
Untuk subjek terpilih, panel analit (IL-6, IL-8, IP-10,
MCP-1, MIP-1β, GM-CSF, IL-10, IL-13, IL-17A, IL-
2, TNF-α dan sCD40L) diukur dalam supernatan kultur HBHA-
IGRA (tabung PPD-, HBHA- dan non-stimulasi) dan tes QFT-GIT
(tabung Antigen TB dan tabung Nil) menggunakan panel
MILLIPLEX® MAG ( Merckx Millipore, Brussels, Belgia)
mengikuti instruksi dari pabriknya. Namun, supernatan kultur
awalnya diencerkan menggunakan faktor pengenceran yang
spesifik untuk masing-masing analit untuk mendapatkan
konsentrasi yang berada dalam kisaran yang dapat
diinterpretasikan. Hasil dianalisis dengan Bio-Plex® MAGPIX™
Pembaca multipleks, Manajer Bio-Plex™
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59 Halaman 4 dari 11

Perangkat Lunak MP dan Perangkat Lunak Bio-Plex Manager Tabel 1 Karakteristik dasar calon penapis LTBI
6.1 (laboratorium BIO-RAD, Nazareth Eke, Belgia). Jika
terdeteksi, konsentrasi analit yang diperoleh dalam kondisi Demografi Nomor (n = 48)
bebas antigen dikurangi dari konsentrasi analit yang Usia; median [kisaran] 38 [22–67]
diperoleh dengan stimulasi antigen. Untuk memungkinkan Jenis kelamin

analisis statistik dengan variabel kontinyu, konsentrasi di

Perempuan 15 (31%)
bawah batas deteksi diberi nilai sewenang-wenang sebesar 10
Pria 33 (69%)
pg/ml, yang menunjukkan respons tidak terdeteksi,
sedangkan hasil yang melebihi batas atas deteksi uji diberi Asal etnis
atribut konsentrasi yang sesuai dengan batas ini. Sub Sahara 22 (46%)

Kaukasia 18 (38%)
Metode statistik Afrika Utara 3 (6%)
Hasil dianalisis menggunakan GraphPad Prism versi
Asia 3 (6%)
5.04 (GraphPad Software, La Jolla California USA,
orang Amerika Selatan 2 (4%)
www.graphpad.com). Mann–Whitneykamuuji dan uji
Kruskall-Wallis diterapkan untuk membandingkan Mtbfaktor risiko paparan

variabel kontinu antar kelompok. Analisis univariat Kehadiran setidaknya satu jurusanMtbfaktor risiko 23 (48%)
paparan
dilakukan dengan uji eksak Fisher dan rasio odds untuk
variabel kategori. Uji chi-kuadrat untuk tren diterapkan Lahir di negara dengan insiden tinggiA 22 (46%)

untuk variabel ordinal. Korelasi antar variabel kontinyu Tiba di negara dengan insiden rendah≤2 tahun 4 (8%)B
dinilai dengan menggunakan koefisien product Kontak erat yang dilaporkan sendiri dengan kasus 1
moment Pearson. Nilai p <0,05 dianggap signifikan. TBC Kontak erat dengan kasus dahak positif TBC 1
LainnyaC 5 (10%)
Hasil
Pengunjung negara endemikD 14 (29%)
Karakteristik populasi
Empat puluh delapan pasien terinfeksi HIV yang belum pernah Faktor risiko reaktivasi LTBI

menggunakan pengobatan didaftarkan antara bulan Kehadiran dari≥1 faktor risiko reaktivasi 5 (10%)
Desember 2011 dan Desember 2012. Karakteristik demografi, selain HIV

Mtbfaktor risiko paparan dan reaktivasi LTBI, serta status Diabetes 2 (4%)
vaksinasi BCG dan karakteristik infeksi HIV pada awal Indeks massa tubuh < 18,5 2 (4%)
dirangkum dalam Tabel 1. Insufisiensi ginjal +/− dialisis 1
Tiga pasien mangkir. Untuk pasien lainnya, median waktu tindak
Tumor padat 1
lanjut klinis mencapai 418 hari, berkisar antara 6 hingga 23 bulan.
Alkoholisme 1
cART dimulai pada 26 pasien pada berbagai titik waktu, 15 pasien
Status vaksinasi BCG yang dilaporkan sendiri
segera setelah pendaftaran. Peningkatan rata-rata CD4+Jumlah sel
T antara nilai awal dan pengukuran akhir adalah 113 sel/mm33 Divaksinasi 16 (33%)
pada pasien yang dirawat, dan 6 pasien menunjukkan Tidak divaksinasi 17 (35%)
peningkatan >200 sel/mm33. Pengobatan profilaksis Isoniazid Tidak dikenal 15 (31%)
ditawarkan kepada 3 pasien, namun, karena ketidakpatuhan,
Parameter infeksi HIV
hanya diselesaikan oleh satu pasien. Enam pasien melakukan
HIV-1 47 (98%)
perjalanan ke negara dengan kejadian TBC sedang hingga tinggi
(>40 kasus/100.000 penduduk) selama masa tindak lanjut, namun HIV-2 1
tidak ada faktor risiko utama lainnya untuk penyakit TBC.Mtb Serokonversi≤2 tahun CD4+jumlah 9 (19%)e
paparan dicatat. Tidak ada pasien yang mengembangkan TB aktif. sel T; median [kisaran] viral load; 517 [1–1065]

median [kisaran] 23242 [<40-1.107]F

Empat belas pasien HIV dengan dugaan TB
didaftarkan dan dibahas secara terpisah pada
paragraf terkait.
Satuan: Umur (tahun); CD4+Jumlah sel T (sel/mm3); viral load (salinan/ml).
A>100 kasus TBC/100.000 penduduk.
BMewakili 17% dari mereka yang lahir di negara dengan insiden tinggi.
CRisiko profesional, penahanan sebelumnya, pencari suaka, tunawisma.
DBerkenaan dengan pasien yang lahir di negara dengan insiden rendah.

Hasil skrining LTBI eTanggal serokonversi HIV tidak diketahui pada 40% subjek yang terdaftar.s
FPasien dengan viral load tidak terdeteksi merupakan elite controller (terinfeksi HIV-2).
Di antara 48 pasien terinfeksi HIV yang menjalani pemeriksaan
LTBI, 23 diantaranya memiliki setidaknya satu penyakit utama.Mtb
faktor risiko paparan yang diungkapkan oleh kuesioner (Tabel 1).
Item “pengunjung negara endemik” dalam kuesioner
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59 Halaman 5 dari 11

tidak memiliki ketelitian yang diperlukan untuk
mengkategorikan perjalanan dalam halMtbrisiko paparan
(durasi, kondisi, dll.) dan oleh karena itu diklasifikasikan secara
terpisah. Tujuh pasien memiliki faktor risiko reaktivasi LTBI
selain infeksi HIV.
Rontgen dada dilakukan pada 46 pasien dan ditemukan
mencurigakan pada 3 pasien, dengan infiltrat apikal bilateral pada
satu pasien, infiltrat apikal lobus kanan dengan bekas luka fibrotik
dan kemungkinan kalsifikasi kelenjar getah bening mediastinum
pada pasien kedua dan jaringan parut fibrotik bi-apikal dengan
retraksi pada pasien ketiga. . Pemindaian Tomografi
Komplementer (CT-scan) dada dilakukan pada 2 pasien pertama
dan kelainan yang dijelaskan pada awalnya tidak dapat
dikonfirmasi. Ketiga pasien tersebut mempunyai hasil negatif
untuk QFT-GIT, TST dan HBHA-IGRA.
Hasil TST tersedia untuk 46 orang karena 2 pasien tidak
kembali untuk membaca hasil TST, sementara QFT-GIT dan
HBHA-IGRA tersedia untuk semua orang. HBHA-IGRA,
sebagaimana dirinci dalam metode, menggabungkan respons
IFN-γ yang diinduksi PPD dan HBHA. Hasil tes ini sehubungan
dengan hasil TST dan QFT-GIT ditunjukkan pada Gambar 1.
Pada awal, TST positif pada 4 subjek yang disaring (semuanya
dengan diameter indurasi≥10 mm), 3 di antaranya memiliki
QFT-GIT positif bersamaan (semuanya dengan respons
antigen >2 IU/ml), dan keempatnya positif dengan HBHA-
IGRA. 4 pasien ini telah melaporkanMtbrisiko paparan dan
CD4 masing-masing+Jumlah sel T meningkat dari 98 menjadi
912 sel/mm3.
Lima pasien dinyatakan positif hanya dengan QFT-GIT,
dengan respons antigen berkisar antara 0,82 hingga 1,98 IU/
ml. Semua pasien ini menderita CD4+Jumlah sel T di atas 450
sel/mm3. Hanya 2 yang jelasMtbrisiko paparan.
HBHA-IGRA mendeteksi 3 pasien tambahan, salah satunya
memiliki hasil QFT-GIT yang tidak dapat ditentukan karena
nilai kontrol negatif yang berlebihan. Ketiga subjek lahir dan
tinggal selama lebih dari 20 tahun di negara dengan kejadian
TB di atas 40 kasus/100.000 penduduk [23], sesuai denganMtb
paparan dan potensi LTBI. CD4 mereka+Jumlah sel T pada saat
skrining sama atau di atas 450 sel/mm33. Sebagai catatan,
untuk 5 pasien dari 48 pasien yang diskrining, HBHA-IGRA
tidak dapat ditentukan, satu karena kesalahan teknis dan 3
lainnya karena tidak adanya respons IFN-γ terhadap kontrol
positif.
Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1, dua subjek memiliki
respons IFN-γ terhadap PPD (di atas batas 200 pg/ml) tetapi tidak
terhadap HBHA, dan semua tes tuberkulosis laten lainnya negatif.
Hasil ini mungkin disebabkan oleh paparan sebelumnya terhadap
mikobakteri non-tuberkulosis (keduanya tumbuh di Afrika sub-
Sahara) atau vaksinasi BCG sebelumnya (tercatat setidaknya pada
satu kasus). Sebaliknya, satu pasien mempunyai respons IFN-γ
terhadap HBHA tetapi tidak terhadap PPD, meskipun hasil ini
mungkin merupakan kesalahan karena tidak lagi ditemukan
setelah pengujian diulang. Seperti yang diharapkan, semua pasien
positif TST menunjukkan respons IFN-γ yang tinggi terhadap PPD.
Sebaliknya, dan karena alasan yang tidak jelas, 5 subjek memiliki
QFT-GIT positif tetapi TST negatif dan negatif

Gambar 1Skrining LTBI pada pasien terinfeksi HIV yang belum pernah menggunakan pengobatan: hubungan antara hasil HBHA-IGRA, QFT-GIT dan TST.Empat puluh
delapan subyek terinfeksi HIV yang belum pernah diobati menjalani skrining tuberkulosis laten dengan 3 alat imunologi berbeda: TST, QFT-GIT dan HBHA-IGRA. Hasil
HBHA-IGRA dapat diinterpretasikan pada 43 subjek. Tes ini mengukur respons IFN-γ terhadap PPD dan HBHA yang masing-masing harus di atas atau sama dengan
200 pg/ml dan 50 pg/ml agar pengujian dianggap positif. Potongan-potongan ini direpresentasikan dalam grafik sebagai garis putus-putus. Setiap titik pada grafik
mewakili hasil individu. Format titik (kotak hitam, titik hitam, segitiga putih, atau kotak hitam putih) mewakili hasil TST dan QFT-GIT yang diperoleh untuk individu
tertentu, sebagaimana ditunjukkan dalam legenda grafik. Seperti yang ditunjukkan pada kotak yang diperbesar, 26 pasien memiliki tingkat IFN-γ yang tidak terdeteksi
sebagai respons terhadap PPD dan HBHA, termasuk 4 pasien yang memiliki tes QFT-GIT positif.
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59
Semua HBHA-IGRA memiliki kadar IFN-γ yang diinduksi PPD di bawah
60 pg/ml.
HBHA-IGRA diulang dengan frekuensi rata-rata 3 per subjek
selama periode rata-rata 7 bulan (tidak terulang pada 6 pasien
dan tindak lanjut terhenti pada satu pasien yang hamil).
Mayoritas pasien memiliki respon yang stabil (82%). Empat
pasien mendapatkan hasil tes yang bervariasi dari waktu ke
waktu. Tambahan 3 orang dengan HBHA-IGRA yang awalnya
negatif terus-menerus mengalami tes positif selama masa
tindak lanjut meskipun tidak ada yang baruMtbfaktor risiko
paparan. Salah satu pasien ini mempunyai QFT-GIT positif
pada awal (respon antigen 0,82 IU/ml) dan pasien lainnya
mempunyai respon baik terhadap cART dengan peningkatan
CD4.+Jumlah sel T dari 457 hingga 641 sel/mm3dan
normalisasi CD4 nya+/CD8+rasio pada saat konversi tes.
Efek dariMtbrisiko paparan, status vaksinasi BCG dan
parameter infeksi HIV pada hasil tes skrining LTBI
Hubungan non-acak antara hasil tes awal dan variabel
yang dipilih (Mtbfaktor risiko paparan, vaksinasi BCG, CD4+
Jumlah sel T dan viral load) diselidiki. Hasilnya ditunjukkan
pada Tabel 2. Hubungan yang signifikan denganMtbrisiko
paparan ditunjukkan pada HBHA-IGRA (p = 0,0353) namun
tidak pada QFT-GIT. Pentingnya hubungan antaraMtbrisiko
paparan dan kepositifan TST tidak dapat disimpulkan,
karena hasil uji eksak Fisher tidak sesuai dengan interval
kepercayaan untuk rasio odds (sebuah fenomena yang
mungkin disebabkan oleh perbedaan penanganan
inferensi dua sisi dari distribusi pengambilan sampel
asimetris oleh kedua pengujian ini [24] ). Hasil yang sama
juga ditemukan antara vaksinasi BCG dan outcome HBHA-
IGRA. Selanjutnya variabel “vaksinasi BCG” dan “Mtbfaktor
risiko paparan” berhubungan secara signifikan (p =
0,0002). Terdapat tren linier antara QFT-GIT dan tingkat
viral load (lebih banyak hasil positif terjadi pada pasien
dengan viral load lebih rendah), namun tidak ada tren
yang terdeteksi antara berbagai tes skrining dan CD4.+
jumlah sel T.
Kami selanjutnya menilai apakah parameter infeksi
HIV (CD4+Jumlah sel T, CD4+persentase, CD4+/CD8+T
Tabel 2 Faktor-faktor yang berhubungan dengan hasil tes skrining LTBI positif
TST
P ATAU [CI 95%])
Mtbpaparan 0,0455 11.8 [0.6-232]
BCG 0,2273 6.0 [0.2-136]
CD4+Jumlah sel T 0,8773 TIDAK
Viral load 0,1844 TIDAK
Hubungan non-acak antara hasil tes positif dan 1) adanyaMtbfaktor risiko paparan, 2) status vaksinasi BCG, 3) CD4+Jumlah sel T dan 4) viral load dinilai untuk
TST, QFT-GIT dan HBHA-IGRA. Uji eksak Fisher dan rasio odds (OR) dengan interval kepercayaan 95% (CI 95%) diterapkan untuk variabel dikotomis (ada atau
tidaknya variabelMtbfaktor risiko paparan dan status vaksinasi BCG). Uji chi-kuadrat untuk tren digunakan untuk CD4+Jumlah sel T dan viral load disusun
dalam variabel ordinal (CD4+jumlah sel T <50; 50–199; 200–499, >500 sel/mm3dan viral load <40, 40–10.000; 10.000–100.000; >100.000 eksemplar/ml). Nilai p
signifikan dicetak tebal (p <0,05).
Halaman 6 dari 11
rasio sel dan viral load) merupakan variabel prediktor
signifikan terhadap tingkat IFN-γ yang diinduksi PPD dan
HBHA, seperti ditunjukkan pada Tabel 3. Hal ini terjadi pada
jumlah CD4+Persentase sel T dan CD4+/CD8+Rasio sel T
sehubungan dengan tingkat IFN-γ yang diinduksi PPD. Hasil
yang tidak dapat ditentukan, baik untuk QFT-GIT atau HBHA-
IGRA, tidak secara sistematis dikaitkan dengan depresi
kekebalan tingkat lanjut, atau viral load yang sangat tinggi,
karena hanya satu dari 5 pasien yang bersangkutan
mempunyai CD4.+Jumlah sel T <500 sel/mm3(280 sel/mm3) dan
viral load di atas 10.000 kopi/ml.
Hasil HBHA-IGRA pada pasien TBC aktif
TB aktif dikonfirmasi pada 6 dari 14 pasien terinfeksi HIV yang
terdaftar dengan kecurigaan klinis terhadap penyakit
tersebut. Untuk subjek ini, demografi, parameter HIV dan
presentasi klinis dirangkum dalam Tabel 4. Pada awal, 3 dari
pasien ini adalah responden HBHA-IGRA, semuanya dengan
tingkat pelepasan IFN-γ yang sangat tinggi sebagai respons
terhadap PPD dan HBHA, seperti yang diilustrasikan pada
Gambar 2. HBHA-IGRA diuji ulang setelah setidaknya 1 bulan
pengobatan anti-TB (+/− cART) pada 4 kasus terkonfirmasi
HIV/TB (pada 2 responden HBHA-IGRA dan 2 non-responden).
Respon IFN-γ terhadap HBHA bertahan pada 2 responden
dan, pada berbagai titik waktu pengobatan, berubah menjadi
2 pada awalnya non-responden. Dua pasien mengembangkan
TB-IRIS paradoks selama pengobatan tetapi tidak ditemukan
hubungan dengan respons awal HBHA-IGRA.
Analisis multipleks
Profil sitokin/kemokin dari 11 subjek dengan skrining
LTBI positif, 8 subjek dengan skrining LTBI negatif, dan
6 subjek TB aktif yang dikonfirmasi dievaluasi dan
dibandingkan. Skrining LTBI positif didefinisikan
sebagai adanya setidaknya satu tes imunologi positif
(TST, QFT-GIT atau HBHA-IGRA), dan skrining LTBI
negatif didefinisikan sebagai ketiga tes tersebut negatif
dan tidak ada tes apa pun.Mtbfaktor risiko paparan.
Hasilnya ditunjukkan pada Gambar 3. Kadar IL-10 yang
diukur pada supernatan kultur yang distimulasi HBHA
secara statistik lebih tinggi pada pasien TB aktif ketika
QFT-GIT HBHA-IGRA
P ATAU [CI 95%] P ATAU [CI 95%]
0,4455 2.2 [0.5-10.3] 0,0353 9.9 [1.1-90.7]
1 0,7 [0,1-5,0] 0,0318 15 [0,7-307]
0,7777 TIDAK 0,6021 TIDAK
0,0261 TIDAK 0,0752 TIDAK
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59 Halaman 7 dari 11

Tabel 3 Pengaruh HIV pada tingkat IFN-γ yang diinduksi PPD dan HBHA
IFN-γ konsentrasi. sebagai respons terhadap stimulasi PPD IFN-γ konsentrasi. sebagai respons terhadap stimulasi HBHA

N P R N P R
-
CD4+Jumlah sel T 43 0,1499 0,2261 42 0,9029 0,0192

CD4+% 42 0,0034 0,4473 41 0,5827 0,0873

CD4+/CD8+rasio 43 <0,0001 0,8586 42 0,4265 0,1245

- -
viral load 41 0,5777 0,0896 41 0,4643 0,1175

Korelasi Pearson digunakan untuk mengukur hubungan antara tanggapan IFN-γ yang diinduksi PPD atau HBHA dan empat variabel prediktor berbeda yang terkait
dengan tingkat keparahan infeksi HIV: CD4 absolut+Jumlah sel T, CD4+persentase (%), CD4+/CD8+rasio dan viral load. Nilai p signifikan dicetak tebal (p <0,05).
konsentrasi = konsentrasi; n = jumlah tes; r = koefisien product moment pearson.

dibandingkan dengan dua kelompok lainnya (p = 0,008).
Namun, hanya dua dari 6 subjek TB aktif yang memiliki kadar
IL-10 yang mencapai dua kali lipat konsentrasi yang
ditemukan pada kondisi tidak distimulasi. Untuk 2 pasien ini,
ditemukan konsentrasi analit yang lebih tinggi untuk sebagian
besar sitokin/kemokin yang diukur. Oleh karena itu,
peningkatan kadar IL-10 yang ditemukan pada pasien TB aktif
tidak spesifik dan mungkin mencerminkan aktivasi kekebalan
umum yang disebabkan oleh penyakit tersebut.
Ketika kami fokus pada subjek HBHA-IGRA negatif/
positif QFT-GIT, konsentrasi IL-6 melebihi 100 pg/ml
dalam supernatan kultur yang distimulasi PPD untuk
semua 5 subjek terkait. Empat di antaranya memiliki
konsentrasi IP-10 di atas 100 pg/ml dalam supernatan kultur
yang distimulasi HBHA. Namun, peningkatan sensitivitas
deteksi HBHA-IGRA terhadap LTBI yang diperoleh dengan
menggunakan kedua analit ini diimbangi dengan hilangnya
spesifisitas: untuk kedua analit, 3 dari 8 subjek dengan
skrining LTBI negatif juga menunjukkan kadar melebihi 100
pg. /ml. Demikian pula, tidak ada analit yang diukur dalam
supernatan kultur QFT-GIT yang dapat mengidentifikasi 3
pasien yang hanya positif HBHA-IGRA.
Diskusi
Penelitian ini merupakan penelitian pertama yang mengevaluasi penggunaan HBHA-IGRA

sebagai alat skrining LTBI pada pasien terinfeksi HIV yang tinggal di negara dengan

insiden TB rendah. Dalam kohort yang terdiri dari 48 orang yang terinfeksi HIV yang belum
Tabel 4 Karakteristik Subjek HIV dengan TBC Aktif
pernah menggunakan pengobatan ini, 9 orang teridentifikasi

Subjek Demografi HIV dasar Presentasi klinis

parameter
1 47 tahun CD4: 68 (6%) Membuka kedok milier

Kaukasia VL: tidak diuji TB-IRIS

kereta: ya

2 42 tahun CD4:124 (14%) TBC Miliar

Sub Sahara VL: 712000

kereta: tidak

3 28 tahun CD4: 26 (6%) TBC Miliar

Sub Sahara VL: 8070000

kereta: tidak

4 38 tahun CD4: 141 (35%) TBC paru

Sub Sahara VL <40
kereta: ya
Gambar 2Perbandingan respon IFN-γ terhadap PPD dan HBHA antara
5 38 tahun CD4: 25 (5%) Paru dan subjek TB/HIV dan LTBI/HIV.Secara keseluruhan, 62 pasien terinfeksi HIV
Sub Sahara VL: 201000
TBC ganglion
dites dengan HBHA-IGRA: 48 kandidat skrining LTBI dan 14 pasien
kereta: tidak
dengan dugaan klinis TB aktif. Pada awal, 10 pasien ini mempunyai
HBHA-IGRA positif. 10 pengujian positif ini diwakili dalam grafik dalam
6 43 tahun CD4: 580 (37%) Terkait dengan ART bentuk konsentrasi IFN-γ yang diperoleh sebagai respons terhadap
TBC pleuro-paru stimulasi PPD (sumbu Y) dan HBHA (sumbu X). Batasan pengujian
Sub Sahara VL <40
ditandai dengan garis putus-putus. Subjek terinfeksi HIV dari kelompok
kereta: ya
skrining LTBI (n = 7) digambarkan dengan titik, sedangkan pasien HIV
ART: terapi antiretroviral; kereta: kombinasi SENI; CD4: CD4+Jumlah sel T dengan konfirmasi TB dikelilingi dan masing-masing diwakili dengan
sel/mm3(persentase); TBC: TBC; TB-IRIS: sindrom inflamasi pemulihan segitiga (n = 3).
kekebalan terkait TB; VL: viral load (salinan/ml); kamu: tahun.
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59 Halaman 8 dari 11

Gambar 3Analisis multipleks supernatan kultur.Panel sitokin dan kemokin diukur dalam supernatan kultur (A) Sel mononuklear darah tepi
(PBMC) yang distimulasi PPD, (B)PBMC yang distimulasi HBHA dan (C)tabung Antigen TB dari QFT-GIT. Konsentrasi median dengan rentang
interkuartil ditunjukkan dalam grafik. Hasil antara subjek dengan skrining LTBI positif (n = 11), subjek dengan skrining LTBI negatif (n = 8) dan
pasien TB aktif (n = 6) dibandingkan menggunakan Mann-Whitneykamutes atau tes Kruskall-Wallis. Nilai p signifikan ditampilkan.

dengan LTBI ketika menggabungkan IGRA yang
dikomersialkan (QFT-GIT) dan TST seperti yang saat ini
direkomendasikan di Eropa [6]. HBHA-IGRA mengidentifikasi
semua pasien yang terdeteksi oleh TST (termasuk pasien yang
negatif untuk QFT-GIT) dan mengenali 3 kasus LTBI potensial
yang tidak terdeteksi oleh TST maupun QFT-GIT. HBHA-IGRA
adalah alat skrining yang menunjukkan kesesuaian terbaikMtb
risiko paparan, seperti yang sebelumnya ditemukan pada
kelompok pasien hemodialisis [14]. Tes ini tampaknya dapat
direproduksi, karena sebagian besar pasien memiliki respons
yang stabil dari waktu ke waktu, dan analisis multipleks
memastikan IFN-γ sebagai hasil pembacaan terbaik.
13 kemokin/sitokin. Meskipun masa tindak lanjut rata-rata adalah 14
bulan, tidak ada pasien yang mengembangkan TB aktif. Hebatnya,
pengobatan profilaksis isoniazid diresepkan dan diselesaikan hanya
pada satu pasien setelah skrining LTBI. Hal ini menggambarkan
bagaimana hambatan terhadap pengobatan LTBI pada pasien
terinfeksi HIV lebih dari sekedar masalah efisiensi alat skrining, seperti
yang telah diulas di tempat lain [25,26].
Keterbatasan utama penelitian ini adalah sedikitnya jumlah
pasien yang terdaftar sehingga hasil dan analisisnya bersifat
deskriptif. Seperti dalam semua penelitian skrining LTBI,
kurangnya tes standar emas mempersulit interpretasi hasil.
Selanjutnya, tidak adanya pembangunan
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59
jumlah TB aktif di antara individu yang diskrining menghalangi
penghitungan nilai prediktif dari tes tersebut. Meskipun demikian,
penelitian percontohan ini memberikan dukungan untuk penelitian
lebih lanjut yang lebih besar yang menilai HBHA-IGRA sebagai alat
pelengkap dalam skrining LTBI pada pasien terinfeksi HIV.
Beberapa penelitian, baik di negara-negara berpenghasilan
rendah dan tinggi, telah mengevaluasi dan membandingkan TST
dan IGRA yang dikomersialkan untuk skrining LTBI pada pasien
yang terinfeksi HIV, sebagaimana ditinjau oleh meta-analisis pada
tahun 2011 [10]. Meskipun tes-tes tersebut tampaknya memiliki
sensitivitas yang sebanding, sensitivitas setiap tes dipengaruhi
secara negatif oleh defisiensi imun pasien. Memang benar, orang
yang terinfeksi HIV lebih kecil kemungkinannya untuk mempunyai
TST positif atau IGRA positif dibandingkan orang yang tidak
terinfeksi HIV, dengan hasil tes positif berkorelasi terbalik dengan
CD4.+jumlah sel T. Hasil IGRA yang tidak dapat ditentukan juga
lebih sering terjadi pada pasien terinfeksi HIV bila dibandingkan
dengan populasi umum [11]. T-SPOT.TB®, meskipun dilaporkan
secara tidak konsisten, mungkin memiliki keunggulan
dibandingkan QFT-GIT pada pasien dengan CD4 rendah+Jumlah sel
T, karena jumlah PBMC yang terpapar antigen mikobakteri dalam
pengujian distandarisasi [9]. Hal serupa juga terjadi pada HBHA-
IGRA. Dalam penelitian ini, potensi dampak negatif dari rendahnya
CD4+Jumlah sel T pada pengujian internal kami tidak terlihat.
Selain itu, selama masa tindak lanjut, hanya tercatat 1 konversi tes
HBHA-IGRA setelah respons imunologis yang baik terhadap cART.
Namun, hasil ini harus diinterpretasikan dengan hati-hati, karena
jumlah subjek yang terdaftar berjumlah sedikit dan hanya 2 pasien
yang memiliki CD4 pada awal.+Jumlah sel T di bawah 50 sel/mm3.
HBHA-IGRA, seperti IGRA yang dikomersialkan, menawarkan
beberapa keunggulan dibandingkan TST termasuk kebutuhan
satu kunjungan, lebih sedikit bias pembaca dan tidak adanya
efek booster pada pengujian serial [11]. Kontrol internal
negatif dan positif juga menunjukkan keuntungan yang besar
dibandingkan TST dimana alergi imunologi mungkin salah
dianggap sebagai hasil negatif. Aset penting lainnya dari IGRA,
QFT-GIT dan T-Spot TB® yang dikomersialkan adalah tidak
adanya reaktivitas silang dengan vaksinasi BCG. Dalam kasus
HBHA-IGRA, telah terbukti bahwa vaksinasi BCG pada bayi
mampu memicu respon imun spesifik HBHA [27]. Hal ini dapat
dibayangkan karena HBHA diungkapkan oleh seluruh anggota
M.tuberkulosiskompleks termasuk strain BCG yang
dilemahkanMycobacterium bovisdari mana ia dimurnikan.
Namun, nampaknya pengaruh vaksinasi BCG pada anak usia
dini terhadap HBHA-IGRA menjadi dapat diabaikan pada usia
dewasa [13,21,28]. Di sini pertanyaannya tidak dapat dijawab
dengan benarMtbpaparan dan vaksinasi BCG merupakan
faktor perancu dan ukuran sampel terlalu kecil untuk
melakukan analisis multivariat.
Sejalan dengan penelitian sebelumnya, ditemukan hasil
sumbang antara TST, QFT-GIT dan HBHA-IGRA [11,13,14].
Bahkan perselisihan antar-pengujian ini tetap ada
Halaman 9 dari 11
ketika analit alternatif untuk IFN-γ diukur dalam supernatan QFT-
GIT dan HBHA-IGRA. Ada pendapat yang berbedaMtbprofil infeksi
dapat menjelaskan perbedaan ini. Memang benar, LTBI kini
dianggap sebagai suatu entitas yang heterogen, mulai dari basil
yang diam hingga bereplikasiMtbdengan penyakit subklinis
[29,30]. Sebagai IGRA yang dikomersialkan menggunakan antigen
RD-1 yang disekresikan dengan cara berkembang biak secara aktif
mtb,pasien LTBI yang merespons secara eksklusif terhadap tes ini
diyakini masih terus berlanjut Mtbreplikasi. Sebaliknya, karena
respons sel T terhadap HBHA dianggap sebagai penanda latensi,
maka responden eksklusif HBHA-IGRA diyakini sebagai pihak yang
mengendalikanMtb replikasi [31]. Pada orang yang tidak terinfeksi
HIV, telah dikemukakan bahwa ketidaksesuaian ini memungkinkan
klasifikasi LTBI berdasarkan potensi reaktivasi, suatu kualitas yang
akan membantu menargetkan profilaksis INH [31]. Namun, pada
pasien terinfeksi HIV, apakah risiko perkembangan LTBI menjadi
TB aktif berbeda pada responden QFT-GIT dan/atau HBHA-IGRA
tidak diketahui. Karena pasien-pasien ini berisiko tinggi terkena TB
aktif terutama selama pemulihan kekebalan, mendeteksi semua
pasien dengan LTBI tampaknya penting, bahkan pada pasien
dengan latensi terkontrol. Menggabungkan QFT-GIT dan HBHA-
IGRA bisa menjadi pilihan yang cocok untuk menawarkan deteksi
spektrum LTBI yang lebih luas. Penelitian skala besar diperlukan
untuk menentukan apakah kombinasi ini memberikan sensitivitas
yang cukup untuk mengabaikan TST dari skrining LTBI pada
pasien terinfeksi HIV, seperti yang disarankan oleh hasil kami.
Pada pasien yang tidak terinfeksi HIV, median tanggapan
IFN-γ dari PBMC terisolasi terhadap HBHA tampak lebih
rendah pada pasien dengan TB aktif dibandingkan pada
subjek dengan LTBI, sehingga memberikan diskriminasi relatif
antara kedua kelompok [13]. Respons IFN-γ yang lebih rendah
pada TB aktif disebabkan oleh adanya limfosit T regulator
(Treg) yang menekan respons sel T terhadap antigen dan
migrasi limfosit spesifik HBHA ke lokasi jaringan yang
terinfeksi [32,33]. HBHA-IGRA tidak menunjukkan hal ini pada
pasien yang terinfeksi HIV, kemungkinan karena beban
mikobakteri yang tinggi atau perubahan fungsi Treg dan
kemotaksis yang terkait dengan infeksi HIV [34,35]. Akibatnya,
seperti semua alat skrining LTBI yang tersedia saat ini, HBHA-
IGRA tidak dapat membedakan LTBI dari TB aktif pada pasien
terinfeksi HIV. Karena pasien terinfeksi HIV dapat
mengembangkan penyakit dengan gejala pauci [36], TB aktif
harus selalu disingkirkan sebelum memulai terapi profilaksis.
Ketika menganalisis secara lebih rinci, tampak bahwa hasil
HBHA-IGRA pada subjek HIVpositif dengan TB aktif bersifat
dikotomis: tidak ada respons IFN-γ yang terdeteksi pada
sekitar separuh pasien, sementara respons yang sangat tinggi
teramati pada pasien lainnya. Faktor-faktor yang
memperkirakan tanggapan HBHA-IGRA di antara pasien
koinfeksi HIV/TB aktif masih belum teridentifikasi. Elemen
yang mencerminkan atau menyebabkan perubahan respon
imun, seperti CD4+sel T
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59
jumlah <200 sel/mm3, CD4+persentase <30%, CD4 terbalik+/
CD8+rasio, viral load >100.000 kopi/ml dan penyakit milier,
ditemukan di antara responden dan nonresponden.
Menariknya, setelah pemberian terapi anti-TB (baik yang
berhubungan dengan cART atau tidak), respons terhadap
HBHA-IGRA tetap ada pada responden dan muncul pada
subjek dengan hasil awal negatif. Karena penderita TBC yang
diobati kadang-kadang digunakan sebagai pengganti LTBI
(keduanya mewakili keadaan terkendaliMtbinfeksi), hasil ini
menggarisbawahi potensi HBHA-IGRA sebagai alat diagnostik
LTBI. Selain itu, semua pasien dengan dugaan TB yang pada
akhirnya tidak dikonfirmasi, termasuk 2 pasien dengan infeksi
mikobakteri non-TB lokal, memiliki HBHA-IGRA negatif. Secara
keseluruhan, pada pasien terinfeksi HIV dengan dugaan klinis
TBC, tampaknya respons IFN-γ yang sangat tinggi terhadap
HBHA-IGRA dapat dianggap sebagai argumen yang
mendukung diagnosis TBC. Namun, pada TST dan IGRA yang
dikomersialkan, hasil negatif tidak mengecualikan TB aktif.
Salah satu metode alternatif yang mungkin terbukti menarik
dalam dugaan klinis TB adalah HBHA-IGRA yang dilakukan
pada sel dari lokasi penyakit, bukan pada sel mononuklear
darah tepi [32], namun pendekatan ini masih harus diselidiki
pada pasien yang terinfeksi HIV.
Kesimpulan
Penelitian ini, meskipun ukurannya terbatas, menawarkan
gambaran sekilas tentang potensi nilai diagnostik HBHA-IGRA
pada pasien yang terinfeksi HIV. Uji ini muncul sebagai alat
pelengkap untuk skrining LTBI, yang mengidentifikasi kasus-kasus
yang tidak ditemukan pada tes lainnya. Penelitian di masa depan
harus menguji apakah kombinasi QFT-GIT dan HBHA-IGRA, yang
dapat dilakukan setelah pengambilan darah tunggal, menawarkan
kinerja skrining LTBI yang cukup untuk menghilangkan TST dari
skrining LTBI. Pada pasien HIV-positif, tes ini juga dapat
berkontribusi pada diagnosis kecurigaan klinis terhadap TB,
karena tanggapan IFN-γ yang tinggi terhadap tes tersebut
tampaknya mendukung diagnosis.
Kepentingan yang bersaing
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan bersaing
Kontribusi penulis
CWT berpartisipasi dalam perancangan penelitian, melaksanakan HBHA-IGRA,
mengumpulkan data, melakukan analisis statistik dan menyusun naskah. VD berpartisipasi
dalam desain penelitian, membantu menganalisis dan menafsirkan data serta
berkontribusi pada rancangan naskah. KS, CM, MH, secara aktif mengkoordinasikan
perekrutan pasien di berbagai rumah sakit. KS dan JCG juga berpartisipasi dalam
perancangan penelitian ini. FD melakukan immunoassay, ML (Brussels, Belgia) melakukan
analisis multipleks dan ML (Lille, Prancis) memurnikan HBHA. CL memberikan rekomendasi
substansial dan merevisi naskah secara kritis untuk konten intelektual yang penting. JPVV
berpartisipasi dalam desain penelitian, memberikan rekomendasi substansial dan merevisi
naskah secara kritis untuk konten intelektual yang penting. FM menyusun penelitian ini,
berpartisipasi dalam desainnya, menafsirkan hasilnya secara kritis, membantu menyusun
naskah dan memberikan keputusan akhir untuk mengirimkan teks untuk dipublikasikan.
Semua penulis membaca dan menyetujui naskah akhir.
Halaman 10 dari 11
Informasi penulis
CWT mendapat manfaat dari persekutuan dari “Fond Erasme”. VD didukung
oleh Komunitas Eropa dalam Program Kerangka ketujuh (FP7) NEWTB-VAC
(Penemuan dan pengembangan praklinis vaksin tuberkulosis generasi baru)
(HEALTH-2009-2.3.2–2), oleh “Institut Bruxellois pour la Rercherche et
l'Inovasi” (innovbunga iris.brussels), dan oleh Fonds de la Recherche
Scientifique Médicale (FRSM).
Ucapan Terima Kasih
Kami ingin mengucapkan terima kasih kepada semua sukarelawan yang berpartisipasi
dalam penelitian ini. Selain itu, seluruh anggota tim peneliti yang berbeda menerima
ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya, khususnya kolega kami dari LoVMI (Drs
Véronique Corbière dan Kaatje Smits, Alexandra Dreesman, Julie Smet, Miss Julie Bosse,
Mrs Anne Vanpraet) atas kontribusi mereka terhadap akuisisi data, dokter yang merekrut
(Drs Sara Debulpaep, Kabamba Kabeya, Marie-Christine Payen, Brice Layeux, Sarah
Spruyt, Delphine Mathieu), perawat penelitian (Zoe Kipouros, Virginie Lenoir, Laura Riesi)
dan manajer data Ny Leslie Andry.
Detail penulis
1Laboratorium Vaksinologi dan Imunologi Mukosa, Université Libre de
Bruxelles, Brussels, Belgia.2Unit imunodefisiensi, Hôpital Erasme, Brussels,
Belgia.3Penyakit Menular, CHU Saint-Pierre, Brussels, Belgia.4Unit penyakit
menular, rumah sakit IRIS SUD, Brussels, Belgia.5INSERM U1019, Lille,
Perancis.6CNRS UMR8204, Lille, Prancis.7Université Lille Nord de France, Lille,
Prancis.8Pusat Infeksi dan Imunitas Lille, Institut Pasteur de Lille, Lille,
Prancis.9Klinik Imunobiologi, Hôpital Erasme, Brussels, Belgia.
Diterima: 9 April 2014 Diterima: 3 Februari 2015
Referensi
1. Kwan CK, Ernst JD. HIV dan tuberkulosis: sindrom mematikan pada manusia. Clin
Microbiol Rev.2011;24:351–76.
2. SIAPA | Fakta TB/HIV 2012–2013 [http://www.who.int/hiv/topics/tb/
tbhiv_facts_2013/en/index.html]
3. Horsburgh Jr CR. Prioritas pengobatan infeksi tuberkulosis laten di
Amerika Serikat. N Engl J Med. 2004;350:2060–7.
4. Laporan pengendalian tuberkulosis global WHO tahun 2012 [http://apps.who.int/iris/
bitstream/10665/91355/1/9789241564656_eng.pdf]
5. Mazurek GH, Jereb J, Vernon A, LoBue P, Goldberg S, Castro K. Komite ahli IGRA, pusat
pengendalian dan pencegahan penyakit (CDC): pedoman terbaru untuk
menggunakan uji pelepasan interferon gamma untuk mendeteksi
infeksi mycobacterium tuberkulosis - Amerika Serikat, 2010. MMWR Recomm
Rep Morb Mortal Wkly Rep Recomm Rep Cent Dis Control. 2010;59:1–25.
6. ECDC 2011: penggunaan tes pelepasan interferon-gamma untuk mendukung
diagnosis TB. [http://www.ecdc.europa.eu/en/publications/Publications/
1103_GUI_IGRA.pdf]
7. Markowitz N, Hansen NI, Wilcosky TC, Hopewell PC, Glassroth J, Kvale
PA, dkk. Tes tuberkulin dan alergi pada orang HIV-seropositif dan
HIV-negatif. Kelompok Studi Komplikasi Paru Infeksi HIV. Ann
Magang Med. 1993;119:185–93.
8. Huebner RE, Schein MF, Bass Jr JB. Tes kulit tuberkulin. Clin Menginfeksi Dis Off Publ
Menginfeksi Dis Soc Am. 1993;17:968–75.
9. Tes pelepasan Santin M, Muñoz L, Rigau D. Interferon-γ untuk diagnosis tuberkulosis
dan infeksi tuberkulosis pada orang dewasa yang terinfeksi HIV: tinjauan sistematis
dan meta-analisis. PLoS Satu. 2012;7:e32482.
10. Cattamanchi A, Smith R, Steingart KR, Metcalfe JZ, Date A, Coleman C, dkk. Tes
pelepasan interferon-gamma untuk diagnosis infeksi tuberkulosis laten pada
orang yang terinfeksi HIV: tinjauan sistematis dan meta-analisis.
J Memperoleh Sindrom Defisiensi Kekebalan Tubuh. 1999;56:230–8.
11. Redelman-Sidi G, Sepkowitz KA. Tes pelepasan interferon gamma dalam
diagnosis infeksi tuberkulosis laten di antara orang dewasa dengan sistem
kekebalan yang lemah. Am J Respir Crit Care Med. 2013;188:422–31.
12. Locht C, Hougardy JM, Rouanet C, Place S, Mascart F. Hemagglutinin yang mengikat
heparin, dari faktor penyebaran ekstrapulmonal menjadi antigen diagnostik dan
protektif yang kuat terhadap tuberkulosis. Tuberc Edinb Scotl. 2006;86:303–9.
13. Hougardy JM, Schepers K, Place S, Drowart A, Lechevin V, Verscheure V, dkk.
Pelepasan IFN-gamma yang diinduksi pengikatan heparin-hemagglutinin sebagai
alat diagnostik untuk tuberkulosis laten. PLoS Satu. 2007;2:e926.
Wyndham-Thomasdkk. Penyakit Menular BMC (2015) 15:59 Halaman 11 dari 11

14. Dessein R, Corbière V, Nortier J, Dratwa M, Gastaldello K, Pozdzik A, dkk.

Haemagglutinin pengikat heparin, alat baru untuk mendeteksi infeksi laten
mycobacterium tuberkulosis pada pasien hemodialisis. PLoS Satu.
2013;8:e71088.
15. Loxton AG, Black GF, Stanley K, Walzl G. Hemagglutinin pengikat heparin
menginduksi sel T CD4+ multifungsi IFN-γ + IL-2+ IL-17+ selama penyakit
tuberkulosis laten tetapi tidak aktif. Vaksin Clin Imunol CVI. 2012;19:746–51.
16. Registrasi belge de la tuberculose 2012 [http://www.fares.be/documents/
Regtbc2012.pdf].
17. Definisi Kasus TB-IRIS - MED - Studi Jaringan Internasional IRIS Terkait HIV,
Universitas Minnesota [http://www.inshi.umn.edu/definitions/TB_IRIS/
home.html]
18. Rekomendasi mengenai penyakit menular dan sifat infeksi tuberkulosis
laten [http://www.fares.be/documents/recomm.pdf]
19. Van Zyl-Smit RN, Zwerling A, Dheda K, Pai M. Variabilitas dalam subjek hasil uji
interferon-g untuk tuberkulosis dan meningkatkan efek tes kulit tuberkulin:
tinjauan sistematis. PLoS Satu. 2009;4:e8517.
20. Wyndham-Thomas C, Corbière V, Dirix V, Smits K, Domont F, Libin M, dkk.: Uji
pelepasan interferon-gamma Heparin-Binding Haemagglutinin inkubasi
singkat untuk mendeteksi tuberkulosis laten: peran kunci efektor limfosit T
CD4+ memori. Vaksin Clin Imunol CVI 2014.
21. Masungi C, Temmerman S, Van Vooren JP, Drowart A, Pethe K, Menozzi FD, dkk.
Respons sel T dan B yang berbeda terhadap adhesin hemaglutinin pengikat heparin
Mycobacterium tuberkulosis pada orang sehat yang terinfeksi dan pasien
tuberkulosis. J Menginfeksi Dis. 2002;185:513–20.
22. Temmerman ST, Place S, Debrie AS, Locht C, Mascart F. Fungsi efektor
limfosit T CD8+ hemagglutinin pengikat heparin spesifik pada tuberkulosis
manusia laten. J Menginfeksi Dis. 2005;192:226–32.
23. SIAPA | Profil negara tuberkulosis [http://www.who.int/tb/country/data/
profiles/en/]
24. Agresti A. Analisis Data Kategorikal. edisi ke-2. Amerika Serikat: John
Wiley & Sons; 2002.
25. Getahun H, Granich R, Sculier D, Gunneberg C, Blanc L, Nunn P, dkk. Penerapan
terapi pencegahan isoniazid untuk orang yang hidup dengan HIV di seluruh dunia:
hambatan dan solusi. AIDS London Inggris. 2010;24 Tambahan 5:S57–65.
26. Lester R, Hamilton R, Charalambous S, Dwadwa T, Chandler C, Churchyard GJ,
dkk. Hambatan penerapan terapi pencegahan isoniazid di klinik HIV: studi
kualitatif. AIDS London Inggris. 2010;24 Tambahan 5:S45–8.
27. Smith SG, Lecher S, Blitz R, Locht C, Dockrell HM. Respons sitokin dan kemokin
spesifik haemaglutinin yang mengikat heparin secara luas pada bayi setelah
Mycobacterium bovisvaksinasi BCG. Eur J Imunol. 2010;42:2511–22.
28. Delogu G, Chiacchio T, Vanini V, Butera O, Cuzzi G, Bua A, dkk. HBHA termetilasi yang
diproduksi di M smegmatis membedakan antara penyakit tuberkulosis aktif dan
non-aktif di antara responden RD1. PloS Satu. 2011;6:e18315.
29. DB Muda, Gideon HP, Wilkinson RJ. Menghilangkan tuberkulosis laten. Tren
Mikrobiol. 2009;17:183–8.
30. O'Garra A, Redford PS, McNab FW, Bloom CI, Wilkinson RJ, Berry MPR.
Respon imun pada TBC. Annu Rev Imunol. 2013;31:475–527.
31. Corbière V, Pottier G, Bonkain F, Schepers K, Verscheure V, Lecher S, dkk.
Stratifikasi risiko tuberkulosis laten ditentukan dengan uji pelepasan interferon
gamma gabungan. PLoS Satu. 2012;7:e43285.
32. Tempat S, Verscheure V, de San N, Hougardy JM, Schepers K, Dirix V, dkk.
Sintesis IFN-gamma spesifik heparin dan hemagglutinin di tempat infeksi
selama tuberkulosis aktif pada manusia. Am J Respir Crit Care Med.
2010;182:848–54.
33. Hougardy JM, Tempat S, Hildebrand M, Drowart A, Debrie AS, Locht C, dkk. Sel
T pengatur menekan respons imun terhadap antigen pelindung pada
tuberkulosis aktif. Am J Respir Crit Care Med. 2007;176:409–16.
34. Chevalier MF, Weiss L. Kepribadian ganda sel T pengatur pada infeksi
Kirimkan naskah Anda berikutnya ke BioMed Central dan
HIV. Darah. 2013;121:29–37. manfaatkan sepenuhnya:
35. Choe EY, Schoenberger ES, Groopman JE, Park IW. HIV Nef menghambat migrasi
sel T. J Biol Kimia. 2002;277:46079–84. • Pengiriman online yang nyaman
36. Oni T, Burke R, Tsekela R, Bangani N, Seldon R, Gideon HP, dkk. Tingginya prevalensi
• Tinjauan sejawat yang menyeluruh
tuberkulosis subklinis pada orang yang terinfeksi HIV-1 tanpa defisiensi imun tingkat
lanjut: implikasi terhadap skrining TB. dada. 2011;66:669–73. • Tidak ada batasan ruang atau biaya gambar warna

• Publikasi segera tentang penerimaan

• Penyertaan dalam PubMed, CAS, Scopus dan Google Cendekia

• Penelitian yang tersedia secara bebas untuk didistribusikan kembali

Kirimkan naskah Anda ke

www.biomedcentral.com/submit