LAPORAN AKHIR MAGANG

PERBANYAKAN TANAMAN TIN (Ficus carica) MELALUI

KULTUR JARINGAN DI SEAMEO BIOTROP

Oleh:
MUHAMMAD ISRA AULIA
E1J015096

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI

JURUSAN BUDIDAYA PERTANIAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS BENGKULU
2017
 LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN MAGANG

PERBANYAKAN TANAMAN TIN (Ficus carica) MELALUI

KULTUR JARINGAN DI SEAMEO BIOTROP

Oleh
Muhammad Isra Aulia
E1J015096

Laporan ini disusun berdasarkan hasil Magang Program Studi Agroekoteknologi,

Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Bengkulu dan telah
diuji pada tanggal 14 bulan Oktober tahun 2017

Mengetahui
Jurusan Budidaya Pertanian
Ketua, Dosen Pembimbing Magang/ Penguji

( Dr. Hesti Pujiwati, SP. M.Si ) ( Dr. Ir., Rustikawati, M.Si )

NIP. 1977112112006042001 NIP. 196505081990012001

i
 RINGKASAN

PERBANYAKAN TANAMAN TIN (Ficus carica) MELALUI KULTUR

JARINGAN DI SEAMEO BIOTROP (Muhammad Isra Aulia dibawah bimbingan
Dr. Ir., Rustikawati, M.Si. 2017)

Magang atau praktek kerja lapang merupakan salah satu mata kuliah wajib
pada program studi agroekoteknologi yang bertujuan untuk meningkatkan
pemahaman tentang kultur jaringan, tentang budidaya jamur, kemampuan bekerja
sama dalam tim dan kemampuan manajerial. Pelaksanaan praktek lapangan atau
magang dapat menjadi pengalaman bekerja secara langsung di lapangan yang tidak
diperoleh di perkuliahan.
Pelaksanaan magang dilakasanakan pada tanggal 16 Juni 2017 – 05 Agustus
2017. Lokasi magang ini dilaksanakan di Service Laboratory Kultur Jaringan
SEAMEO BIOTROP Kota Bogor. Magang atau praktek kerja lapang ini bertujuan
khusus untuk (1) menentukan teknik sterilisasi eksplan tin yang sesuai, (2)
menentukan media yan tepat untuk kultur jaringan tanaman tin dan (3) menentukan
perbedaan teknik kultur jaringan tin dengan tanaman pisang dan talas.
Hasil dari kegiatan magang ini ialah mahasiswa memperoleh pengetahuan
keunggulan perbanyakan kultur jaringan dan dapat menerapkan kultur jaringan
pada tanaman tin seperti tahap sterilisasi eksplan tin yang dilakukan secara dua
tahap yaitu sterilisasi luar dengan perendaman bakterisida dan fungisisda selama 1
jam dan sterilisasi dalam yaitu dengan tiga kali perendaman ekslpan kedalam
bayclin 15% selama 15 menit, bayclin 10% selama 10 menit dan alkohol 70%
selama 1 menit serta penggunaan media yang tepat untuk kultur jaringan tin yaitu
media TP (penanaman), media CA (elongasi), dan media 8 (multiplikasi) dengan
media TP dan media 8 mengandung zpt sitokinin yaitu BAP 2,5ml. Mahasiswa juga
dapat melihat manfaat budidaya kultur jaringan yang dapat menghasilkan bibit
dalam jumlah banyak dengan waktu yang relatif singkat, sifat bibit yang sama
dengan induknya, dan perbanyakan bibit tidak tergantung perubahan iklim serta
gambaran dunia kerja seperti bekerja sama dalam tim, bekerja individu, mengatur
waktu dan memenuhi target produksi.

ii
 Kata Pengantar

Puji syukur kita panjatkan terhadap rahmat Tuhan Yang Maha Esa dimana
kita masih diberiberi tubuh dan pikiran yang sehat. Salawat beriring salam kita
panjatkan terhadap Nabi Besar Muhammad SAW, dimana Ia telah mengantarkan
kita dari jaman yang gelap hingga jaman terang benderang yang penuh dengan
teknologi ini.
Dalam penyusunan laporan ini, saya mengucapkan banyak terimakasih
kepada dosen pembimbing magang Dr. Ir., Rustikawati, M.Si dan pembimbing
lapang bapak Samsul A. Yani S.Si serta seluruh pegawai di SEAMEO BIOTROP
yang telah membantu dalam praktek kerja lapang.
Laporan dengan judul Perbanyakan Tanaman Tin (Ficus carica) Secara
Kultur Jaringan) ini diselesaikan dengan tujuan agar mengetahui manfaat dari
peranan kultur jaringan terhadap perbanyakan tanaman tin pada sektor pertanian,
perbedaan kultur jaringan dari tanaman tin, talas dan pisang serta spesifik dari
proses kultur jaringan tanaman tin.
Akhir kata saya mengucapkan terimakasih dan semoga hasil laporan saya
dapat bermanfaat.

Bengkulu, November 2017

Penulis

iii
 DAFTAR ISI

LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN MAGANG................................................i

RINGKASAN ..........................................................................................................ii
Kata Pengantar ........................................................................................................iii
DAFTAR ISI...........................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR ..............................................................................................vi
DAFTAR TABEL..................................................................................................vii
DAFTAR LAMPIRAN.........................................................................................viii
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang .................................................................................................. 1
1.2 Tujuan ................................................................................................................ 2
1.3 Manfaat .............................................................................................................. 2
BAB II GAMBARAN UMUM TEMPAT MAGANG........................................... 3
2.1 Sejarah Perusahaan........................................................................................... 3
2.1.1 Latar belakang berdirinya perusahaan ...................................................... 3
2.1.2 Tujuan perusahaan .................................................................................... 4
2.1.3 Visi dan Misi perusahaan.......................................................................... 4
2.2 Struktur Organisasi........................................................................................... 5
2.3 Sistem Manajemen Produksi .......................................................................... 6
2.4 Sistem Tata Kelola Tenaga Kerja................................................................... 6
BAB III TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................... 7
BAB IV METODE MAGANG............................................................................. 12
4.1 Waktu dan Tempat ......................................................................................... 12
4.2 Tahapan Pelakasanaan ................................................................................... 12
4.3 Mekanisme Pelaksanaan ................................................................................ 12
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN................................................................ 14
5.1 Pembuatan Media ........................................................................................... 14
Tahapan Penggunaan Media dan Kultur Jaringan Tanaman Tin ........................ 18
5.2 Tahapan Budidaya Tanaman Tin Secara Kultur Jaringan ........................ 18
1. Inisiasi .............................................................................................................. 18

iv
 1.1 Pengambilan Eksplan................................................................................ 18
1.2 Sterilisasi Luar ................................................................................................... 19
1.3 Sterilisasi Dalam ............................................................................................... 20
1.4 Penanaman......................................................................................................... 21
2. Elongasi ............................................................................................................. 23
3. Multiplikasi ....................................................................................................... 24
4. Aklimatisasi ...................................................................................................... 25
5. Penanaman ke Polibag ..................................................................................... 27
6. Green House ..................................................................................................... 28
7. Lahan Terbuka .................................................................................................. 29
BAB VI PENUTUP .............................................................................................. 30
6.1 Kesimpulan....................................................................................................... 30
6.2 Saran .................................................................................................................. 30
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 31
LAMPIRAN.......................................................................................................... 33
Lampiran 1. Alamat Perusahaan ............................................................................. 34
Lampiran 2. Logbook dan Rangkuman Kegiatan ................................................. 35

v
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.Bagan Organisasi Laboratorium Kultur Jaringan Seameo Biotrop 5

Gambar 2. Sistem Manajemen Laboratorium Kultur Jaringan Seameo
Biotrop 6
Gambar 3. Pembuatan media TP, CA dan 8 17
Gambar 4. Pengukuran pH dengan pH meter 17
Gambar 5. Sterilisasi media dengan autoclave 17
Gambar 6. Tahapan Kultur Jaringan Tanaman Tin 18
Gambar 7. Perendaman eksplan dengan aquades dan tween 19
Gambar 8. Pembuatan larutan fungisida & bakterisida 19
Gambar 9. Sterilisasi luar dengan perendaman eksplan menggunakan
bakterisida dan fungisida 20
Gambar 10. Laminar Air Flow untuk melakukan sterilisasi dalam dan
penanman 20
Gambar 11. Sterilisasi dalam eksplan tin 21
Gambar 12. Penanaman eksplan tin di media TP 22
Gambar 13. Eksplan tin yang telah ditanam 22
Gambar 14. Hasil elongasi planlet 23
Gambar 15. Planlet tin yang akan di multipilikasi 24
Gambar 16. Planlet tin yang telah di multiplikasi 25
Gambar 17. Alat dan Bahan Aklimatisasi tanaman tin 26
Gambar 18. Hasil aklimatisasi tin 26
Gambar 19. Tanaman tin dalam sungkup 27
Gambar 20. Media Penanaman Polibag tanaman tin 27
Gambar 21. Penanaman dalam sungkup dan luar sungkup 28
Gambar 22. Tanaman tin dalam green house 28
Gambar 23. Tanaman tin di lahan terbuka 29

vi
 DAFTAR TABEL

Tabel. 1 Komposisi Larutan Media TP (5ltr) 14

Tabel. 2 Komposisi Larutan Media CA (5ltr) 15
Tabel. 3 Komposisi Larutan Media 8 (5ltr) 16

vii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Alamat Perusahaan 34

Lampiran 2. Log Book 35

viii
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sejak revolusi pertanian, perkembangan pertanian terus mengalami
peningkatan, baik pada produksi tanaman maupun permintaan bibit tanaman yang
harus siap. Dengan meningkatnya permintaan, dilakukan perbanyakan tanaman
baik generatif maupun vegetatif agar dapat memenuhi kebutuhan. Kemajuan di
bidang pertanian, tanaman sangat ditentukan oleh tersedianya bibit-bibit tanaman
dengan kualitas unggul dalam jumlah yang memadai. Seiring berjalannya waktu
ditemukan teknik perbanyakan tanaman secara vegetatif yang lebih modern seperti
teknik kultur jaringan.
Teknik kultur jaringan sebenarnya sangat sederhana, yaitu suatu sel atau
irisan jaringan tanaman yang sering disebut eksplan secara aseptik diletakkan dan
dipelihara dalam medium yang cocok dan dalam keadaan steril. Medium terdiri dari
zat nutrisi dan zat pengatur tumbuh. Kultur jaringan didasari dari teori totipotensi
sel yang menyatakan sel memilki kemampuan menjadi tanaman baru dengan
keadaan yang mendukung.
SEAMEO BIOTROP telah mendirikan laboratorium kultur jaringan untuk
produksi bibit tanaman unggul. Laboratorium ini menghasilkan bibit berbagai jenis
tanaman agar siap memenuhi kebutuhan konsumen. Hingga saat ini, telah banyak
tanaman yang diproduksi bibitnya antaranya bibit tanaman jati, gaharu, talas,
pisang, nanas, dan tin. Laboratorium Kultur Jaringan SEAMEO BIOTROP akan
membantu pemenuhan bibit tanaman unggul yang memadai.
Salah satu bibit yang dihasilkan melalui teknik kultur jaringan SEAMEO
BIOTROP ialah bibit tin. Tanaman tin (Ficus carica L.) merupakan tanaman asli
Asia Barat dan telah dibudidayakan selama ribuan tahun di Mediterania negara-
negara Eropa dan Afrika Utara. Buah Tin mengandung banyak zat gizi yang
dibutuhkan tubuh seperti karbohidrat, protein, vitamin, mineral, serat, dan lain-lain.
Manfaat dari buah tin yang banyak dan saat ini masih merupakan buah-buahan
langka di Indonesia, menyebabkan buah tin memiliki peluang yang besar untuk
dibudidayakan. Pohon tin baru ditanam di beberapa daerah di Indonesia, terutama
di Pulau Jawa dan sebatas di lingkungan penggemar.
Budidaya tanaman tin memilki potensi besar. Masa panen buah tin umur 4–
6 bulan. Buah memiliki manfaat yang cukup banyak danbernilai ekonomis apabila
dijual segar maupun kering. Harga rata-rata buah tin segar di pasar tradisional per
kilonya Rp. 250.000 dan buah tin kering termurah Rp. 400.000 perkilogramnya.
Bahkan pada varietas tertentu, harga buah ini mencapai Rp. 200.000/100 gram.
Buah ini akan berdampak baik apabila diekspor dan pemasukan negara dengan
harga yang dapat dikatakan tinggi. Buah tin juga dapat diolah menjadi beberapa
olahan seperti selei dan manisan yang juga tidak kalah memiliki nilai ekonomis.

1
 Tanaman tin umumnya diperbanyak dengan setek, dan yang terbaik
digunakan berasal dari potongan kayu yang tumbuh baik, dengan pohon induk
sumber tanaman berumur 2 tahun. Selain itu juga diperbanyak dengan benih dan
cangkok Namun masih banyak kendala seperti keberhasilan stek dalam membentuk
akar dipengaruhi oleh umur tanaman, fase pertumbuhan dan perbedaan bagian
tanaman yang digunakan sebagai bahan stek. Perbanyakan biji sulit tumbuh,
cangkok yang sangat lambat dan terbatas, serta kualitas bibit yang kurang baik,
sehingga diperlukan alternatif lain untuk memenuhi permintaan bibit dalam jumlah
besar dan waktu relatif singkat yaitu dengan cara kultur jaringan.
Kultur jaringan pada tanaman tin akan lebih besar presentase
keberhasilannya bila menggunakan jaringan meristem. Faktor-faktor penunjang
keberhasilan kultur tin Faktor eksplan, media, zat pengatur tumbuh dan faktor
lingkungan seperti cahaya, temperatur, kelembaban dan pH.
1.2 Tujuan
1. Menentukan teknik sterilisasi eksplan tin yang sesuai.
2. Menentukan media yan tepat untuk kultur jaringan tanaman tin.
3. Menentukan perbedaan teknik kultur jaringan tin dengan tanaman pisang
dan talas.
1.3 Manfaat
1. Mampu bekerja sama dalam tim
2. Mendapatkan pengalaman praktek lapangan kerja lapang, teori dan
menambah wawasan.
3. Mendapatkan gambaran dunia kerja

2
 BAB II
GAMBARAN UMUM TEMPAT MAGANG

2.1 Sejarah Perusahaan

2.1.1 Latar belakang berdirinya perusahaan
Services Laboratory SEAMEO BIOTROP (SL-SEAMEO BIOTROP)
merupakan salah satu bagian dari organisasi SEAMEO BIOTROP yang merupakan
salah satu Pusat (Centre) di bawah SEAMEO (South East Asian Ministers of
Education Organization) yang didirikan secara resmi pada tanggal 6 Februari 1968,
berlokasi di lingkungan Kebun Raya Bogor. Pendirian ini berdasarkan pada
kesepakatan Menteri - Menteri Pendidikan Asia Tenggara yang dituangkan dalam
SEAMEO Charter pada tahun 1965. Negara-negara anggota SEAMEO adalah
Indonesia, Brunei Darusalam, Kamboja, Laos, Malaysia, Myanmar, Philippina,
Singapura, Thailand dan Vietnam serta 6 negara sahabat (Associate Member
Countries) yaitu Australia, Selandia Baru, Canada, Belanda, Jerman dan
Perancis. Pada tahun 1997, SEAMEO BIOTROP dikelompokkan menjadi salah
satu Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi Tropika di Lingkungan Institut
Pertanian Bogor melalui SK Menteri Pendidikan dan Kebudayaan No.
0186/9/1997. Keputusan tersebut diperkuat dengan SK Menteri Pendidikan
dan Kebudayaan No. 099/O/1997 tentang Penunjukkan Institut Pertanian Bogor
sebagai Institusi Induk bagi The Southeast Asian Ministers of Education
Organization for Tropical Biology (SEAMEO BIOTROP).
Salah satu tujuan utama SEAMEO adalah meningkatkan pendidikan dan
pengembangan sumber daya manusia, khususnya di Asia Tenggara yang
berpenduduk sekitar 500 juta jiwa dan hampir setengahnya berada di
Indonesia. BIOTROP yang berlokasi di Indonesia merupakan Pusat di bawah
SEAMEO yang bergerak dalam kegiatan riset dan pelatihan bidang Biologi
Tropika, serta salah satu yang tertua dan terbesar disamping SEARCA dan
INNOTECH di Filipina.
Di dalam perkembangannya, pada tahun 2000 Laboratorium Services
ditetapkan menjadi salah satu bagian dari SEAMEO BIOTROP yang mempunyai
tugas sebagai pelayanan jasa laboratorium pengujian berdasarkan keputusan Sidang
Dewan Pembina (Governing Board) SEAMEO BIOTROP yang beranggotakan 10
negara anggota Asia Tenggara, di Phnon Phen, Kamboja pada tanggal 3 - 5 Oktober
2000. Keberadaan Laboratorium ini diperkuat dengan SK Direktur SEAMEO
BIOTROP No. 212.1/Dir-SK/SL/V/2003 tentang Penetapan Struktur Organisasi
dan Susunan Personalia Services Laboratory SEAMEO BIOTROP Bogor. Saat ini
Services Laboratory telah memperoleh Sertifikat Akreditasi sebagai laboratorium
penguji sesuai dengan SNI: 17025 - 2005 dari Komite Akreditasi Nasional.

3
2.1.2 Tujuan perusahaan
1. Penyediaan informasi berbasis sains untuk memungkinkan masyarakat dan
institusi mengatasi masalah biologis yang kritis dan mendapatkan
keuntungan dari nilai nyata dan pemanfaatan berkelanjutan sumber daya
hayati di kawasan tropis.
2. Penguatan kapasitas individu dan kelembagaan terhadap pengetahuan
terkini dan praktik yang baik dalam biologi tropis
3. Penyediaan akses yang setara terhadap informasi yang disintesis dalam
biologi tropis untuk meningkatkan pengetahuan, praktik, dan kebijakan
4. Fasilitasi intervensi dan kemitraan pembangunan yang efektif untuk
pemanfaatan berkelanjutan dan pemerataan manfaat sumber daya biologis
tropis daerah secara adil
5. Peningkatan manajemen organisasi dan efisiensi terhadap penggunaan
sumber daya secara maksimal dan pemberian layanan yang efektif kepada
klien dan mitra

2.1.3 Visi dan Misi perusahaan

 Visi SEAMEO BIOTROP
Menjadi pusat unggul dalam penelitian, pelatihan dan penyedia informasi di
bidang biologi tropis.
 Misi SEAMEO BIOTROP
1. Mendukung konservasi keanekaragaman hayati,
2. Mendukung pembangunan berkelanjutan.

4
2.2 Struktur Organisasi
STRUKTUR ORGANISASI LABORATORIUM KULTUR JARINGAN
SEAMEO BIOTROP

Senior Supervisior

Ir. Erina Su;istiani, MSi

Pengendali Dokumen dan

Pemasaran
Lillys Betty

Koordinator Produksi
Rosadi, S.Pd.

Teknisi Lab
Teknisi Lab
Pembuatan Media
Cutter
Iwan Kurniawan
Iwan Setiawan
Amung
Hendro Sucipto M. Teknisi
Sya'roni Maja Atmaja
Persemaian
Nurwihayat Hardi
Muhammad Yususf
Dwi Cahyono Fery Dwinanda
Dede Amzah
Hasan Basri Ujang Ahmad
Andri Yansyah Adi Juandi
Sukirman Hadiat M. Abdul Kodir
Sofian Hadi Deden
Asep Nurussamsi Agus Suryani
Yana Kanyana Maksum
Usep
Saefudin
Ading Sunjaya
Khoerudin
Mad Turi

Gambar 1.Bagan Organisasi Laboratorium Kultur Jaringan SEAMEO

BIOTROP

5
2.3 Sistem Manajemen Produksi
Sistem Manajemen Produksi Kultur Jaringan SEAMEO BIOTROP ialah
unit usaha. Unit usaha diterapkan sehingga setiap unit (kordinator) dapat
menjalankan tugasnya agar tercapainya produksi.

bertanggunga
jawab untuk menjaga agar tetap
Cutter mengambil eksplan
dan mengkultur di
produktif
(multiplikasi)
dalam botol

bertanggung jawab
digunakan pada
Pembuatan untuk pembuatan
media pertumbuhan
saat penanaman
dan pergantian
Media tanaman yang akan
di kultur
media

bertanggung jawab
memelihara
untuk memilih
Persemaian tanaman yang siap
tanaman yang telah
masuk fase semai
untuk disemai

Gambar 2. Sistem Manajemen Laboratorium Kultur Jaringan SEAMEO

BIOTROP

2.4 Sistem Tata Kelola Tenaga Kerja

Sistem tata kelola tenaga kerja adalah pegawai tetap. Tenaga kerja dikelola
dengan kordinator yang telah dipilih oeh atasan. Seperti Bapak Rosadi sebagai
kordinator produksi bertanggung jawab atas produksi bibit kultur jaringan,
ketersediaan bibit sampai ke pemasaran. Produksi bibit tanaman kultur jaringan
dilakukan setiap hari kerja. Bapak iwan sebagai kordinator pembuatan media
bertanggung jawab atas tersedianya media yang akan digunakan baik untuk
menanam maupun pergantian media. Media harus tercukupi setiap harinya. Maka
dari itu pembuatan media dilakukan setiap hari kerja sebanyak 15 liter. Sedangkan
untuk semai dikordinatori oleh bapak Yus. Ia bertanggung jawab terhadap bibit
yang siap dipindahkan ke lingkungan bebas hingga siap di perjual belikan. Untuk
fase semai dilakukan dua kegiatan yaitu aklimatisasi dihari rabu dan jumat dan
selebihnya pemindahan tanaman ke polibag.
Perekrutan tenaga kerja dilakukan dengan menebar pengumuman di situs
SEAMEO BIOTROP. Syarat perekrutan ialah minimal SMA dan dapat memotong
tanaman. Laboratorium kultur jaringan SEAMEO BIOTROP menggunakan sistem
5 hari kerja dalam seminggu dan jam kerja dimulai pukul 07.00 WIB hingga 16.00
WIB dengan istirahat selama 1 jam di pukul 12.00 WIB. Jadwal akan berganti pada
setiap bulan puasa dengan pemotongan waktu 1 jam.

6
 BAB III
TINJAUAN PUSTAKA

Secara alami tanaman termasuk pohon hutan dapat memperbanyak diri

tanpa bantuan manusia dengan dua cara, yaitu perbanyakan generatif dan
perbanyakan vegetatif. Pada umumnya jenis-jenis pohon hutan memperbanyak diri
secara alami melalui biji (generatif), tetapi ada beberapa jenis yang secara alami
memperbanyak diri secara vegetatif misalnya sonokeling (Dalbergia latifolia) dan
bambu (Dendrocalamus sp.) yang dapat memperbanyak diri dengan menumbuhkan
tunas baru dari sistem perakarannya. Namun untuk memenuhi kebutuhan bibit,
perbanyakan tanaman perlu dilakukan dengan cara yang cepat (Hartmann, 1997).
Salah satu perbanyakan tanaman agar dapat memenuhi permintaan bibit
ialah dengan cara perbanyakan kultur jaringan. Kultur jaringan adalah suatu metode
untuk mengisolasi bagian dari tanaman seperti protoplasma, sel, jaringan, organ
serta menumbuhkannya dalam kondisi aseptik sehingga bagian-bagian tersebut
dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman utuh kembali
(Gunawan, 1995).
Kultur jaringan tanaman bermula dari pembuktian teori totipotensi sel yang
dikemukakan oleh Schwann dan Schleiden (1838). Menurut teori ini, setiap sel
tanaman hidup mempunyai informasi genetik dan perangkat fisiologis yang lengkap
untuk dapat tumbuh dan berkembang menjadi tanaman utuh, jika kondisinya sesuai.
(Yusnita, 2003).
Selain itu teknik perbanyakan dengan kultur jaringan mempunyai beberapa
keunggulan dibandingkan caracara tradisional (Santoso dan Nursandi, 2002), antara
lain:
1. Budidayanya dimulai dengan sedikit bahan tanaman (eksplan), kemudian
dimultiplikasi menjadi sejumlah tunas.
2. Perbanyakan ini menggunakan pendekatan lingkungan yang aseptik, bebas dari
patogen sehingga merupakan awal seleksi bahan tanaman yang bebas dari
penyakit.
3. Meningkatkan efektivitas perbanyakan klonal pada tanaman yang hampir
punah dan sulit perbanyakan vegetatifnya.
4. Produktivitas perbanyakan klonal dengan kultur jaringan dapat dilakukan
sepanjang tahun tanpa tergantung pada kondisi perubahan iklim.
Selain itu, kultur jaringan juga bertujuan,
1. Bidang pemuliaan tanaman. Kultur jaringan digunakan untuk meningkatkan
keragaman genetik, seperti induksi mutasi, kultur haploid dan fusi protoplast.
2. Bidang bioteknologi tanaman. Teknik kultur jaringan sangat diperlukan untuk
meregenerasikan sel tanaman yang telah direkayasa genetiknya.
3. Bidang industri. Kultur jaringan dapat juga digunakan untuk mengasilkan
senyawa metabolit sekunder.

7
4. Bidang pengendalian penyakit tanaman. Kultur jaringan dapat menghasilkan
tanaman yang bebas patogen seperti virus, bakteri, atau mikoplasma melalui
kultur maristem.
5. Bidang konservasi. Kultur jaringan dapat digunakan untuk memperbanyak
tanaman yang hampir punah atau untuk penyimpanan plasma nutfah yang
dilakukan dengan cara penyimpanan beku atau cryopreservation
Macam-macam Teknik Kultur Jaringan
1. Kultur tunas. Kultur tunas adalah perbanyakan tanaman dengan cara
merangsang pertumbuhan tunas aksiler atau lateral yang sudah ada pada
eksplan. Umunya ada 4 tahap dalam teknik kultur ini yaitu tahap inisiasi tunas,
multiplikasi tinas, induksi prakaran dan aklimatisasi.
2. Organogenesis. Ialah proses pembentukan tunas dari eksplan yang tidak
memiliki jaringan maristematik. Tunas yang dihasilkan disebut tunas adventif.
Tunas ini tumbuh pada bagian tanaman yang tidak umum seperti bagian daun,
bagian batang antar nodus, kotiledon atau akar.
3. Embriogenesis Somatik. Ialah proses pembentukan embrio dari jaringan
somatik tanaman. pada teknik mikropropagasi ini, sel-sel somatik berkembang
melalui pembelalahan sel dan membentuk embrio yang sama dengan embrio
zigotik, yaitu mempunyai struktur bipolar terdiri atas jaringan maristem tunas
dan maristem akar (Samsul, 2015).
Dengan adanya perbanyakan tanaman dengan kultur jaringan, akan
mempermudah perbanyakan tanaman yang sulit di kembangkan namun berpotensi
besar seperti tanaman tin.
Tanaman Tin/Ara (Ficus carica L.) merupakan tanaman khas Timur Tengah
yang saat ini tengah dibudidayakan di Indonesia. Meskipun masih tergolong langka,
tanaman ini telah dikenal sebagai tanaman yang mempunyai khasiat. Tanaman asal
Timur Tengah menyebar sampai ke daratan Eropa dan Amerika yang dikenal
dengan nama “Figs”. Tanaman ini sendiri di Indonesia masih kurang dikenal.
Kandungan vitamin buah tin tidak kalah dengan apel dan jeruk.
Adapun taksonomi tanaman tin
Kerajaan : Plantae
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnolipsida
Ordo : Rosales
Famili : Moraceae
Genus : Ficus
Spesies : Ficus carica
Tin adalah buah-buahan yang mengandung zat sejenis alkalin yang mampu
menghilangkan keasaman pada tubuh. Zat-zat aktif yang terdapat dalam buah tin
adalah sejenis zat-zat pembersih yang bisa dipakai untuk mengobati luka luar

8
dengan cara melumurinya. Unsur yang terkandung dalam buah Tin adalah
karbohidrat, protein, dan minyak. Buah Tin juga mengandung yodium, kalsium,
fosfor, zat besi, magnesium, belerang (fosfat), chlorin, serta malic acid dan nicotinic
acid. Hasil penelitian lebih lanjut menyebutkan bahwa buah Tin termasuk buah
yang dapat merangsang pembentukan hemoglobin darah, cocok sebagai obat
penyakit anemia. Di samping itu buah Tin juga mengandung kadar glukosa yang
cukup tinggi.
Selain itu, Departemen Pertanian Amerika Serikat mengungkapkan bahwa
buah Tin mengandung beragam nutrisi mulai dari vitamin A, C, kalsium,
magnesium hingga potasium. Buah ini juga baik untuk mengendalikan nafsu makan
dan membantu usaha penurunan berat badan. Jus buah Tin pun merupakan
minuman yang baik untuk membunuh bakteri merugikan dalam sebuah peneltian
(Khasanah, 2011).
Manfaat dari buah tin yang banyak dan saat ini masih merupakan buah-
buahan langka di Indonesia, menyebabkan buah tin memiliki peluang yang besar
untuk dibudidayakan. Tanaman tin ternasuk tanaman eksotis karena sampai saat ini
yang membudidayakannya hanya kalangan kolektor. Tanaman tin sudah bisa
ditanam dan beradaptasi dengan kondisi iklim tropis dan Indonesia memiliki tanah
yang lebih subur. Pohon tin baru ditanam di beberapa daerah di Indonesia, terutama
di Pulau Jawa dan sebatas di lingkungan penggemar (Haris, 2010).
Tanaman tin umumnya diperbanyak dengan setek, dan yang terbaik
digunakan berasal dari potongan kayu yang tumbuh baik, diameter batang ± 1,5–
2,5 cm, dengan pohon induk sumber tanaman berumur 2 tahun. Keberhasilan stek
dalam membentuk akar dipengaruhi oleh umur tanaman, fase pertumbuhan dan
perbedaan bagian tanaman yang digunakan sebagai bahan stek. Tin juga
diperbanyak dengan menggunakan biji dan cangkok. Namun masih banyak
ditemukan berbagai kendala, antara lain perbanyakan biji sulit tumbuh, cangkok
yang sangat lambat dan terbatas, serta kualitas bibit yang kurang baik (Fauza,
2013).
Oleh karena itu, dibutuhkan metode perbanyakan dengan kultur jaringan.
Teknik kultur jaringan merupakan metode alternatif yang dapat digunakan untuk
perbanyakan tanaman tin karena menghasilkan bibit dalam jumlah besar dengan
waktu yang relatif singkat (Farid, 2003).
Dibandingkan dengan perbanyakan bibit tin secara konvensional seperti
dari biji, stek, atau cangkok, perbanyakan klonal kultur jaringan pada tanaman tin
mempunyai beberapa keunggulan diantaranya (1) perbanyakan bibit tin dapat
dilakukan dengan cepat dan dalam sekala banyak, (2) kontinuitas ketersediaan bibit
akan terjaga sepanjang waktu, tanpa harus menunggu musim berbuah, dan (3) bibit
yang dihasilkan akan sama dengan induknya sehingga tingkat keseragaman
pertumbuhan bibit dilapangan sangat tinggi (Samsul, 2015)
Perbanyakan tanaman tin dengan teknik kultur jaringan untuk skala massal
dapat menggunakan metode perbanyakan tunas (maristem) karena cara ini relatif

9
tidak ada kendala yang berarti. Jaringan meristem adalah jaringan muda, yaitu
jaringan yang terdiri dari sel-sel yang selalu membelah, dinding tipis, plasmanya
penuh dan vakuolanya kecil-kecil. Kebanyakan orang menggunakan jaringan ini
untuk kultur jaringan maristem. Sebab, jaringan meristem keadaannya selalu
membelah, sehingga diperkirakan mempunyai zat hormon yang mengatur
pembelahan (Rahman 2013).
Secara umum, produksi bibit melalui metode kultur jaringan tanaman tin
memerlukan beberapa tahap, yaitu (1) penyediaan bahan tanaman (eksplan) dari
induk terpilih, (2) sterilisasi eksplan yang akan ditanam pada media inisiasi, (3)
penanaman pada media untuk penggandaan atau multiplikasi tunas, (4) penanaman
pada media untuk perakaran atau pembentukan planlet, dan (5) aklimatisasi (Deden,
2013).
Faktor-faktor yang mempengasruhi keberhasilan kultur jaringan tanaman
tin ialah
1. Eksplan
Eksplan merupakan potongan yang diisolasi dari tanaman yang
dipergunakan untuk inisisasi suatu kultur jaringan. Eksplan yang baik memiliki
syarat daya regenerasi yang tinggi, lebih baik merupakan bahan tanaman yang
tertutup seperti pucuk dan meristem, sehat dan tidak mengandung bibit penyakit.
Hampir semua bagian jaringan tanaman dapat dijadikan sebagai eksplan. Organ
yang biasa digunakan sebagai eksplan antara lain tunas pucuk, tunas ketiak
(aksilar), akar, mata tunas, daun dan embrio (Hartmann et al., 1990).
Eksplan yang telah terpilih disterilisasi permukaannya dengan berbagai
bahan sterilisasi. Bahan sterilisasi yang digunakan untuk sterilisasi permukaan
misalnya sodium hipoklorit, hidrogen peroksida, bromine water, dan silver nitrat.
Penggunaan alkohol 70% dan penambahan deterjen atau tween 80 dapat lebih
mengefektifkan sterilisasi. Eksplan tanaman berkayu seringkali mengeluarkan
senyawa fenol yang menyebabkan terjadinya pencoklatan bila jaringan diisolasi.
Untuk mengatasi masalah ini dapat dilakukan antara lain dengan membilas terus-
menerus dengan air atau menggunakan arang aktif yang dapat mengabsorpsi
senyawa fenol (Santoso dan Nursandi, 2002).
2. Media Kultur
Keberhasilan dalam penggunaan metode kultur jaringan sangat tergantung
pada media yang digunakan (Gunawan, 1987). Unsur-unsur yang penting dalam
media tersebut adalah garam-garam anorganik, vitamin, zat pengatur tumbuh,
sumber energi, dan karbon. Komposisi garam dalam medium dasar Murashige dan
Skoog (MS) merupakan media yang paling umum digunakan khususnya untuk
morfogenesis, kultur meristem, dan regenerasi tanaman. Media ini mempunyai
konsentrasi garam-garam mineral yang tinggi dan senyawa N dalam bentuk NO3-
dan NH4+. Media kultur jaringan tanaman tidak hanya menyediakan unsur-unsur
hara makro dan mikro, tetapi juga karbohidrat yang pada umumnya berupa gula
untuk menggantikan karbon yang biasanya diperoleh dari atmosfer melalui

10
fosintesis. Gula yang digunakan sebagai sumber karbon misalnya sukrosa atau
glukosa. Konsentrasi sukrosa dalam media biasanya 2-4% (Santoso dan Nursandi,
2002).
3. Zat Pengatur Tumbuh Tanaman
Zat pengatur tumbuh sangat diperlukan sebagai komponen medium bagi
pertumbuhan dan diferensiasi. Tanpa penambahan zat pengatur tumbuh dalam
medium, pertumbuhan sangat terhambat bahkan mungkin tidak tumbuh sama
sekali. Pada umumnya media perbanyakan secara in vitro menggunakan zat
pengatur tumbuh dari golongan sitokinin, seperti BAP, kinetin, dan zeatin yang
merupakan salah satu zat pengatur tumbuh yang banyak digunakan untuk memacu
pembentukan tunas dengan daya aktivitas yang kuat mendorong proses pembelahan
sel. Sedangkan golongan auksin yang sering ditambahkan dalam medium adalah
2,4-D, IAA (Indol Asam Asetat), NAA (Naftalen Asam Asetat), dan IBA (Indol
Butirik Asetat) (Hendaryono dan Wijayani, 1994).
Penggunaan zat pengatur tumbuh di dalam kultur jaringan tin tergantung
pada arah pertumbuhan jaringan tanaman yang diinginkan. Untuk pembentukan
tunas pada umumnya digunakan sitokinin sedangkan untuk pembentukan akar atau
pembentukan kalus digunakan auksin. Namun demikian sering pula dibutuhkan
keduanya tergantung pada perbandingan/ratio sitokinin terhadap auksin atau
sebaliknya (Lestari, 2011)

11
 BAB IV
METODE MAGANG

4.1 Waktu dan Tempat

Kegiatan magang dilaksanakan mulai tanggal 16 Juni 2017 dan berakhir
pada tanggal 5 Agustus 2017. Kegiatan dilaksanakan di SEAMEO BIOTROP Kota
Bogor. Dengan fokus perbanyakan tanaman di Service Laboratory Biotrop

4.2 Tahapan Pelakasanaan

Tahapan pelaksanaan praktek lapang yang dilakukan mengenai
perbanyakan tanaman tin secara kultur jaringan, antara lain :
1. Melakukan pengenalan dan observasi terhadap lingkungan service
laboratory SEAMEO BIOTROP
2. Melakukan diskusi dan bimbingan teknis mengenai kultur jaringan.
3. Melakukan Penanaman Eksplan
4. Melakukan elongasi planlet kultur jaringan
5. Melakukan multiplikasi planlet kultur jaringan
6. Melakukan evaluasi
7. Melakukan Aklimatisasi
8. Penanaman ke polibag terhadap bibit yang telah siap tanam

4.3 Mekanisme Pelaksanaan

Mekanisme pelaksanaan praktek lapang berdasarkan tahapan pelaksanaan
diatas yang dilakukan mengenai budidaya tanaman selada secara hidroponik,
antara lain :
1. Melakukan pengenalan dan observasi terhadap lingkungan service
laboratory SEAMEO BIOTROP
Observasi dilakukan dengan berjalan dan menjelaskan mengenai
laboratorium kultur jaringan dan budidaya jamur tiram bersama
pembimbing magang.
2. Melakukan diskusi dan bimbingan teknis mengenai kultur jaringan.
Diskusi dan bimbingan teknisi mengenai kultur jaringan dan
keuntungannya dalam perbanyakan tanaman budidaya. Diskusi dan
bimbingan teknisi dipimpin oleh pembimbing magang bersama
mahasiswa magang lainnya.
3. Melakukan Penanaman Eksplan
Mengambil eksplan berupa jati, pisang dan talas jepang dari luar,
kemudian disterilisasi dan ditanam pada media agar.
4. Melakukan elongasi planlet kultur jaringan
Elongasi bibit kultur jaringan dilakukan pada bibit yang telah berumur
1 bulan dari waktu perbanyakan.
5. Melakukan multiplikasi planlet kultur jaringan

12
 Multiplikasi dilakukan pada tanaman tin yang telah berumur 1 bulan
dari jadwal penanaman baik pada penanaman elongasi maupun pada
saat inisiasi.
6. Melakukan evaluasi
Evaluasi dilakukan selesai jam kerja. Pembahasan evaluasi mengenai
pembuatan laporan bersama pembimbing magang.
7. Melakukan Aklimatisasi
Aklimatisasi dilakukan pada tanaman yang telah berumur 1 bulan
setelah di multiplikasi. Aklimatisasi yang dilakukan di laboratorium
kultur jaringan SEAMEO BIOTROP ialah dengan menggunakan media
campuran pasir dan eceng gondok.
8. Penanaman ke polibag terhadap bibit yang telah siap tanam
Penanaman ke polibag dilakukan pada tanaman yang telah 1 bulan pada
tahap aklimatisasi. Penanaman ke polibag yang dilakukan di SEAMEO
BIOTROP dengan menggunakan media campuran tanah dan arang
sekam.

13
 BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN

Perbanyakan tanaman tin yang dilakukan ialah dengan cara kultur tunas.
Pemilihan kultur tunas dikarenakan cara ini relatif tidak ada kendala yang berarti.
Dalam perbanyakan tanaman tin secara kultur jaringan, hal yang paling awal
dipersiapkan ialah media pertumbuhan berupa media agar. Penggunaan agar pada
media pertumbuhan bertujuan agar ekslpan tidak terendam dan tidak mengalami
pembusukan saat menjadi planlet.

5.1 Pembuatan Media

Sebelum membuat media, bahan disiapkan dan disarankan peletakan bahan
diurutkan agar mempermudah pengerjaan. Tidak lupa juga mempersiapkan alat-alat
seperti timbangan analitik, gelas ukur, panci, pH meter, spiner, pipet, autoklaf dan
magnetic strirrer. Media yang dibutuhkan dalam budidaya tin secara kultur jaringan
terdiri dari media TP, media CA dan media 8.
Media Tp digunakan pada saat penanaman yang didalamnya terdapat bahan
makro, mikro, garam organik, vitamin serta zat pengatur tumbuh golongan sitokinin
yaitu BAP. Sitokinin digunakan saat penanaman karena berperan mengatur
pembelahan sel dan morfogenesis. Gunawan mengemukakan sitokinin juga mampu
menstimulasi pertumbuhan tunas kultur jaringan. BAP lebih banyak digunakan
karena relatif lebih murah dan tahan degradasi.

Bahan Konsentrasi
Makro 500 ml
Mikro 50 ml
MSG
FeEDTA 50 ml
Myoinositol 500 ml
Melamin 5 ml
Tyamin 5 ml
BAP 2,5 ml
NAA
Adenin
Gula 150 g
Agar-agar 35 g
Casein
L-Tirosin
Kinetin
IBA
pH 5,8
Tabel. 1 Komposisi Larutan Media TP (5ltr)

14
 Media CA digunakan pada saat elongasi. Elongasi merupakan pemotongan
kalus menjadi lebih kecil dengan tujuan agar tidak menghambat pertumbuhan tunas.
Larutan ini tidak memiliki zpt khusus didalamnya. Sehingga media CA berfungsi
sebagai pengontrol agar tunas tetap tumbuh dan berdiri tegak. Komposisi media CA
sama dengan media Tp namun tidak memiliki zpt.

Bahan Konsentrasi
Makro 500 ml
Mikro 50 ml
MSG 50 ml
FeEDTA 500 ml
Myoinositol 5 ml
Vit Melamin 2 ml
Tyamin
BAP
NAA
IAA
Adenin
Gula 150 g
Agar-agar 35 g
Casein 500 mg
L-Tirosin
Kinetin
IBA
pH 5,8
Tabel. 2 Komposisi Larutan Media CA (5ltr)

Media 8 digunakan pada saat multiplikasi. Bahan makro dan mikro di

satukan dan dibagi kedalam 4 bagian (I1,I2,I3 dan I4) dengan konsentrasi yang
sama. Multiplikasi berarti penanaman kembali dari bagian planlet tanaman tin
tersebut, sehingga pada media 8 ini juga digunakan zpt golongan sitokinin yaitu
BAP. Sama halnya dengan media TP, fungsi sitokinin berperan dalam pembelahan
sel, sitokinin juga mampu menstimulasi pertumbuhan tunas dalam kultur jaringan.
Sehingga apabila tunas dipotong maka sel akan tetap memanjang dan akan tumbuh
tunas baru apabila ditanam di media 8.

15
 Bahan Konsentrasi
I1 50 ml
I2 50 ml
I3 50 ml
I4 50 ml
FeEDTA 50 ml
Myoinositol 500 ml
Vit Melamin 5 ml
Tyamin 2 ml
BAP 2,5 ml
Gula 150 g
Agar-agar 35 g
Casein 500 mg
pH 5,7
Tabel. 3 Komposisi Larutan Media 8 (5ltr)

Setiap media yang duat sudah dalam stok, sehingga mempermudah

pembuatan. Unsur Fe digunakan setiap penggunaan media dan dibuat stok
tersendiri dari unsur mikro. Hal ini dikarenakan unsur Fe sering bertentangan atau
antagonis dengan unsur mikro lain. Untuk mengurangi efek itu , maka Fe sering
dibungkus dengan Kelat (chelate) seperti EDTA (Ethylene Diamine Tetra-acetic
Acid). EDTA adalah suatu komponen organik yang bersifat menstabilkan ion
metal. Adanya EDTA maka sifat antagonis Fe pada pH tinggi berkurang jauh.
EDTA juga memberikan pengaruh terhadap sistem enzim dalam morfogenesis
kultur.
Media yang digunakan dalam kultur jaringan tanaman tin tidak
menggunakan zpt perangsang pertumbuhan akar yaitu auksin. Hal ini dikarenkan
akar tanaman tin mudah dalam pertumbuhannya, selain itu penggunaan zpt auksin
hanya akan menambahkan biaya produksi, sehingga zpt auksin dipakai saat proses
aklimatisasi.
Bahan yang telah diurutkan dimasukkan satu persatu kedalam labu ukur
dengan konsentasri yang telah ditentukan sambil diaduk. Setelah larut, larutan
media dipindahkan ke panci agar dapat membuat media sebanyak 5 liter dengan
menambahkan aquades sebanyak kekurangan labu ukur. Setelah semua bahan
dimasukin ditunggu hinggap pH mencapai 5,8. pH tersebut agar tidak mengganggu
membran sel dan pH sitoplasma. Selain itu juga memudahkan pengambilan/
penyerapan bahan zat pengatur tumbuh dan bahan-bahan kimia yang lain dan
meningkatkan efisiensi pembekuan agar.

16
 Gambar 3. Pembuatan media TP, CA dan 8

Pemberian agar disarankan dilakukan pada akhir larutan memiliki pH 5,8.

Hal ini bertujuan agar sensor yang ada pada pH meter tidak mengalami penjelian
akibat agar.

Gambar 4. Pengukuran pH dengan pH meter

Langkah selanjutnya ialah pemanasan media hingga mendidih. Setelah itu

dimasukin kedalam botol steril dan ditutup. Tidak lupa juga memberi siler agar
lebih rapat dan diberi kode agar media tidak tertukar. Media yang telah selesai akan
dimasukan kedalam autoklaf agar steril kemudian didinginkan di ruang
penyimpanan media.

Gambar 5. Sterilisasi media dengan autoclaf

17
 Tahapan Penggunaan Media dan Kultur Jaringan Tanaman Tin

Inisiasi MTP 1 bulan

Elongasi

1 bulan
MCA
Multipfikasi

M8 1 bulan

Aklimatisasi 3-4 minggu

2 minggu
dalam sungkup
Penanaman Kepolibag
2 minggu luar
sungkup

Green House
1 bulan

Lahan Terbuka

Gambar 6. Tahapan Kultur Jaringan Tanaman Tin

5.2 Tahapan Budidaya Tanaman Tin Secara Kultur Jaringan

1. Inisiasi
Inisiasi adalah tahap pengambilan eksplan dari tanaman induk yang akan
diperbanyak secara kultur jaringan. Sebelum melakukan inisiasi sebaiknya terlebih
dahulu melakukan sterilisasi.

1.1 Pengambilan Eksplan

Eksplan merupakan potongan yang diisolasi dari tanaman tin yang
dipergunakan untuk inisisasi suatu kultur jaringan. Sandra mengatakan eksplan
yang baik memiliki syarat daya regenerasi yang tinggi, lebih baik merupakan bahan
tanaman yang tertutup seperti pucuk dan meristem, sehat dan tidak berpenyakit.
Perbanyakan tanaman tin dengan teknik kultur jaringan untuk skala massal
yang dilakukan menggunakan metode perbanyakan tunas (maristem) karena cara
ini relatif tidak ada kendala yang berarti. Rahman mengemukakan, kebanyakan

18
orang menggunakan jaringan ini untuk kultur jaringan. Sebab, jaringan meristem
keadaannya selalu membelah, sehingga diperkirakan mempunyai zat hormon yang
mengatur pembelahan.

Tunas tin diambil dari pohon induk yang masih muda dan dipotong sekitar
3cm, dimasukan kedalam air steril 100ml yang telah dicampurkan tween 80 3 tetes
selama 1 jam. Tween 80 berfungsi membuka pori eksplan dan juga sebagai
pembasah, emulgator, dan peningkat kelarutan.

Gambar 7. Perendaman eksplan dengan aquades dan tween

1.2 Sterilisasi Luar

Prinsip dasar sterilisasi eksplan adalah mensterilkan eksplan dari berbagai
mikroorganisme, tetapi eksplannya tidak ikut mati. Setiap tanaman memerlukan
perlakuan khusus sehingga sebelum mengulturkan tanaman tin perlu melakukan
percobaan sterilisasi.
Eksplan Tin yang telah dipilih dan dipotong selajutnya akan memasuki
tahap sterilisasi luar. Dikatakan sterilisasi luar dikarenakan sterilisasi dilakukan
diluar lingkungan laboratorium. Sterilisasi luar bertujuan untuk meminimalkan
gangguan oleh mikroorganisme yang tidak dikehendaki (kontaminan). Sterilisasi
luar dilakukan 2 kali perendaman. Perendaman pertama yaitu dengan fungisida B.A
Benomil 50,4% 0,2 gr/100ml ditambah tween 3 tetes. Direndam selama 1 jam.
Perendaman kedua dengan bakterisida Streptomycin Sulfate 80gr/100ml ditambah
tween 3 tetes selama 1 jam.

Gambar 8. Pembuatan larutan fungisida & bakterisida

19
 Gambar 9. Sterilisasi luar perendaman eksplan dengan bakterisida dan
fungisida.............................................................

1.3 Sterilisasi Dalam

Sterilisasi dalam dilakukan di tempat yang steril, yaitu di laminar flow dan
menggunakan alat-alat yang juga steril agar meminimalkan gangguan akibat proses
streilisasi itu sendiri sekecil mungkin. Sterilisasi juga dilakukan terhadap peralatan,
yaitu menggunakan alkohol 70% yang disemprotkan secara merata pada peralatan
yang digunakan. Teknisi yang melakukan kultur jaringan pun juga harus dalam
keadaan steril.

Gambar 10. Laminar Air Flow untuk melakukan sterilisasi dalam dan
penanman..........................................

Sterilisasi dalam dilakukan dengan perendaman eksplan dengan bayclin

15% (15ml NaOCl + 85ml air steril + 3 tetes twen) direndam selama 15 menit.
Kemudian dibilas dengan aquades minimal 3 kali dan di rendam kembali dengan
bayclin 10% ditambah twenn 3 tetes selama 10 mneit. Dibilas kembali dengan
aquades sebanyak 3kali. Selanjutnya direndam dengan alkohol 70% selama 1
menit. Konsentrasi bayclin yang digunakan pada tanaman seperti pisang jauh lebih
tinggi dibandingkan tin yaitu bayclin 30 % selama 30 menit dan bayclin 20%
selama 20 menit. Hal ini karena bayclin merupakan salah satu disinfektan yaitu

20
substansi kimia yang bersifat toksik, dipakai untuk mencegah pertumbuhan
mikroorganisme dengan menghalangi /merusaknya dan membunuh mikroorganisme
yang terpapar secara langsung. Menurut Prayoga bagian yang kontak dengan
desinfektan biasanya mengandung sel yang telah mati karena pengaruh desinfektan,
oleh karena itu pada tanaman tin konsentrasi yang digunakan tidak terlalu tinggi.
Pada tanaman pisang, konsentrasi bayclin yang digunakan berbeda dengan tanaman
tin, hal ini dikarenakan bonggol pisang yang akan ditanam memiliki lapisan-lapisan
yang dapat menghalangi dari sifat browning yang diakibatkan pemberian bayclin.
Rhomi mengemukakan keseimbangan antara konsentrasi bahan sterilan dan lama
perendaman harus ditentukan secara empiris karena adanya sifat fitotoksis dari
sterilan.

Gambar 11. Sterilisasi dalam eksplan tin

1.4 Penanaman
Sebelum dilakukan penanaman, dianjurkan untuk sterilisasi alat yang akan
digunakan baik alat pembuatan media (botol kultur) dan alat inokulasi eksplan
(cawan petri, scalpel blade, pisau, pinset, dan tissue). Nugroho mengemukakan
sterilisasi dilakukan dengan autoklaf dengan suhu 120oC tekanan 1 atm selama 20
menit. Tidak lupa pula untuk membersihkan tangan dengan menggunakan alkohol
70%.
Sebelum ditanam, eksplan mengalami browning pada saat proses sterilisasi
dibagian ujungnya akibat perendaman dengan bayclin, sehingga perlu membuang
bagian yang berwarna coklat dengan cara memotongnya. Media yang digunakan
dalam kultur jaringan tin mengandung Fe EDTA yang berfungsi mengurangi reaksi
oksidasi enzim fenolase yang menyebabkan tumbuhan berkayu umumnya
mengalami browning dalam hal ini tanaman tin.
Kondisi eksplan yang aseptik merupakan syarat untuk dapat meningkatkan
keberhasilan eksplan tumbuh dan aseptik sehingga dapat dilanjutkan ke tahapan
berikutnya. Tahapan ini disebut dengan tahap inisiasi (penanaman). Penanaman
dilakukan di atas Laminar air flow dalam keadaan aseptik. Eksplan yang telah
dibersihkan, dimasukkan kedalam botol media TP dengan posisi vertikal.

21
Kemudian ditutup dan disiler dengan pemberian kode serta disimpan di rak
penyimpanan selama 1 bulan.

Gambar 12. Penanaman eksplan tin di media TP

Media TP mengandung zat pengatur tumbuh Sitokinin yaitu BAP. BAP

(Benzylaminopurin) merupakan zat pengatur tumbuh yang tergolong kedalam
sitokinin sintetik. Menurut Wattimena, sitokinin mempengaruhi berbagai proses
fisiologi di dalam tanaman. Aktivitas utama sitokinin adalah sitokinesis atau
pembelahan sel. Aktivitas ini yang menjadi kriteria utama untuk menggolongkan
suatu zat pengatur tumbuh ke dalam sitokinin.
Bonga dan Durzan mengemukanan BAP dinilai lebih stabil, tidak mahal
dan lebih efektif dibandingkan kinetin. BAP biasanya digunakan untuk induksi
kalus tapi yang terpenting adalah BAP dapat menginduksi pembentukan tunas,
pucuk atau kecambah.
Dalam kultur jaringan, induksi kalus disebabkan oleh luka atau irisan
eksplan sebagai respon terhadap hormon baik secara eksogen maupun endogen.
Eksplan pucuk tin yang ditanam pada media secara in vitro mengalami
pembentangan sebelum membentuk kalus.

Gambar 13. Eksplan tin yang telah ditanam

22
 Arya mengemukakan proses penanaman di laboratorium Kultur Jaringan
Biotrop dilakukan cepat dan hati-hati. Dikarenakan semakin lama botol dan petri
dish terbuka, semakin besar peluang kontaminan masuk ke dalam. Selama proses
penanaman minimalkan tangan keluar dari LAF dan berbicara.
Kontaminasi merupakan masalah paling umum yang ditemui pada teknik
mikropropagasi. Umumnya ada empat sumber kontaminan yaitu: (1) pada tanaman
baik internal maupun eksternal, (2) media kultur yang tidak disterilisasi dengan
baik, (3) kondisi lingkungan, dan (4) cara kerja yang salah. Kontaminan yang
berasal dari berbagai sumber, seperti fungi dan bakteri, dapat mengurangi
produktivitas dan tingkat keberhasilan kultur

2. Elongasi
Elongasi merupakan tahap pemotongan kalus yang bertujuan agar
pertumbuhan tunas tidak terhambat. Tahap elongasi atau pemanjangan tunas,
biakan ditanam pada media dasar MS tanpa penambahan zat pengatur tumbuh atau
pada laboratorium ini digunakan medai CA.
Tanaman tin yang telah berumur 1 bulan dapat di elongasi. Sama hal dengan
inisiasi, elongasi dilakukan dengan cara aseptik, diatas laminar menggunakan pinset
dan pisau untuk memotong kalus. Sebelum memotong, disarankan untuk
membersihkan tangan dengan alkohol 70%. Tanaman pada botol media TP diambil
menggunakan pinset dan diltekkan diatas cawan petri yang telah dialasi dengan tisu
setril. Kalus pada tanaman tersebut diotong menjadi lebih kecil, kemudian
dimasukkan kedalam botol media CA dan disiler. Tidak lupa pula untuk memberi
kode CA dan tanggal tanam agar tidak tertukar dengan botol lainnya dan dapat
menegtahui kapan akan di multiplikasi.
Botol yang telah selesai disimpan dalam ruang penyimpanan selama 1 bulan
dan tidak lupa juga untuk mencatat nomor rak tempat diletakannya botol, hal ini
bertujuan agar mempermudah pencarian data klon tin. Setelah tahapan elongasi
selesai, laminar air flow dibersihkan. Hal ini agar menjaga tempat tetap dalam
keadaan aseptik.

Gambar 14. Hasil elongasi planlet tin

23
3. Multiplikasi
Tahap selanjutnya ialah multiplikasi. Multiplikasi adalah kegiatan
memperbanyak calon tanaman dengan menanam eksplan pada media. Kegiatan ini
dilakukan di laminar flow untuk menghindari adanya kontaminasi yang
menyebabkan gagalnya pertumbuhan eksplan. Multiplikasi merupakan
perbanyakan tanaman tin tanpa mengambil eksplan dari luar lagi.
Tanaman yang dimultiplikasi dapat dapat berasal dari inisiasi tanpa
memasuki tahapan elongasi. Media yang digunakan pada tahap mutilpikasi
tanaman tin ialah media 8. Sama halnya dengan proses inisiasi dan elongasi, proses
multiplikasi juga dilakukan pada keadaan aseptik. Peralatan yang dilakukan juga
sama dan dalam keadaan steril sepeti cawan petri, pisau, pinset, tisu dan alkohol
70%.

Gambar 15. Planlet tin yang akan di multipilikasi

Multiplikasi dilakukan dengan cara mengambil tanaman tin berumur 1

bulan dari proses inisiasi maupun 2 bulan dari proses elongasi. Tanaman tin
diletakan diatas cawan petri yang telah dialasi tisu. Hal pertama yang dilakukan
ialah memotong semua daun kemudian batang tin dipotong menjadi bagian lebih
kecil. Pemotongan tanaman tin dilakukan pada setiap nodusnya. Yaitu dibawah
cabang atau bagian jaringan maristem, hal ini dilakukan untuk memperanyak
jumlah planlet. Tanaman yang telah dipotong kemudian ditanam pada Media 8,
disiler dan diberi kode Media 8 serta tanggal penanaman agar mempermudah
pencarian informasi klon dan disimpan pada ruang penyimpanan selama 1 bulan.
Proses ini dapat dilakukan secara berulang setiap tanggal waktu tertentu, namun
perlu diperhatiakn untuk proses multiplikasi tanaman tin disarankan agar tidak
melebih 20 kali multiplikasi karena akan mengakibatkan mutasi pada tanaman
tersebut. Keuntungan dari multiplikasi ialah perbanyakan dari 1 tanaman akan
menjadi beberapa tanaman. sehingga cara ini sangat berdampak baik agar tidak
mengambil ekplan dari luar lagi untuk diperbanyak.

24
 Gambar 16. Planlet tin yang telah di multiplikasi

Media 8 memiliki ZPT dari golongan sitokinin yaitu BAP. Sama halnya
dengan proses inisiasi dengan media TP, media ini memiliki efek membentangkan
sel sehingga potongan tanaman dapat membentuk kalus dan organ baru.

4. Aklimatisasi
Aklimatisasi merupakan tahap akhir dari lingkungan in vitro. Aklimatisasi
adalah suatu tahapan pemindahan tanaman dari lingkungan yang terkendali
(invitro) ke lingkungan mandiri (eksvitro). Aklimatisasi dapat didefinisikan sebagai
proses penyesuaian tanaman tin untuk beradaptasi pada lingkungan yang baru.
Proses aklimatisasi sangat penting karena akan menentukan apakah tanaman yang
berasal dari in vitro dapat beradaptasi atau tidak pada kondisi eks vitro.
Dalam tahap ini planlet tin mengalami penyesuaian sekaligus dengan
lingkungan luar botol, yaitu di green house. Tahap aklimatisasi berlangsung sekitar
3-4 minggu. Yustina mengemukakan dengan intensitas cahaya rendah dan
kelembapan nisbi tinggi, kemudian secara berangsur-angsur kelembapannya
diturunkan dan intensitas cahayanya dinaikkan.
Media tanam tahap aklimatisasi berupa pasir dan eceng gondok yang telah
dikomposkan dengan perbandingan 2:4. Kompos eceng gondok yang dipergunakan
laboratorium kultur jaringan ini dibeli siap. Penggunaan media ini dikarenakan
ringan, memiliki aerasi yang baik, mengandung hara atau larutan garam,
mempunyai kapasitas menyerap air, serta harganya murah. Selain itu juga
digunakan air dan zpt perangsang akar atau auksin yaitu root on F. Penggunaan zpt
dikarenakan planlet yang diaklimatisasi belum memiliki akar dan mudah dalam
pertumbuhannya. Selain itu, dalam proses in vitro, tidak menggunakan zpt auksin.
Sebelum memindahkan planlet tin, hal pertama dilakukan ialah dengan
menggemburkan media dengan sekop kecil di dalam bak, kemdian diratakan.
Setelah itu, disiram dengan air dan diberi jarak tanam. Jarak tanam yang digunakan
ialah 10 baris dengan setiap baris terdiri dari 13 tanaman. Planlet tin diambil dari
botol dan dibersihkan dari media agar yang menempel dengan air yang mengalir.

25
Selanjutnya pada pangkal batang di beri zpt dengan cara di oles (dalam bentuk
pasta) dan di tanam pada media pasir dan eceng gondok. Setelah planlet ditanam,
disiram kembali dan ditutup dengan plastik bening untuk mengurangi penguapan.

Gambar 17. Alat dan Bahan Aklimatisasi

Gambar 18. Hasil aklimatisasi tin

Bak yang telah siap diletakan di dalam sungkup dibawah paranet dengan
intensitas cahaya rendah dan kelembapan nisbi tinggi. Penampakan bak yang
memilki kelembaban ialah dengan melihat plastik penutup dipenuhi uap air atau
berkabut. Apabila tanaman tampak jelas dari luar maka perlu dinaikkan
kelembabannya dengan cara menyemprotkan air kedalam bak dan ditutup kembali.

26
 Gambar 19. Tanaman tin dalam sungkup

Media yang telah dipakai berupa campuran pasir dan eceng gondok dapat
dipakai untuk tahap aklimatisasi berikutnya. Untuk bisa dipakai terus menerus,
harus dilakukan sterilisasi media yaitu dengan fasterisasi selama ± 6 jam di dalam
tong yang panaskan.

5. Penanaman ke Polibag
Setelah aklimatisasi dan penumbuhan akar selama 1 bulan, tanaman tin siap
dipindahkan kedalam polibag. Polibag yang digunakan ialah berukuran 10x15.
Media yang digunakan ialah campuran arang sekam dan tanah top soil dengan
perbandingan 4:1. Penggunaan arang sekam bertujuan sebagai penopang tanah agar
tidak padat ketika disiram dan juga untuk memberi ruang agar akar dapat
menembus tanah.

Gambar 20. Media Penanaman Polibag

Tanah yang telah dicampur arang sekam dimasukan kedalam polibag.

Media tersebut diberi ruang dengan cara menekan dengan jari. Tanaman tin
diletakkan kedalam ruang tersebut dan ditutup. Setelah ditanam, tanaman tin
diletakkan didalam sungkup selama 2 minggu. sama hal pada tahap aklimatisasi,
pemakaian sungkup bertujuan agar dapat menurunkan suhu & meningkatkan
kelembaban udara sehingga pertumbuhan tanaman bisa lebih baik. Sanggup juga

27
menghalangi hewan/serangga pengganggu tanaman. Kemudian dipindahkan keluar
sungkup selama 2 minggu namun masih dalam naungan paranet untuk melatih
tanaman beradaptasi. Untuk pemeliharaan, tanaman disiram setiap hari di waktu
sore.

Gambar 21. Penanaman dalam sungkup dan luar sungkup

6. Green House
Green house digunakan untuk pembesaran bibit tanaman dan mengurangi
rusaknya tanaman akibat faktor lingkungan seperti batang yang patah akibat angin.
Selain itu, peletakan bibit tin di green house juga bertujuan untuk menunggu
tanaman siap dipasarkan. Media yang digunakan yaitu tanah topsoil. Perawatan
bibit tin yaitu dengan penyiraman setiap hari pada waktu sore. Perlu diperhatikan,
saat penyiramana, agar kekuatan air tidak terlalu kuat, agar tanaman tidak patah dan
mati sebelum dipindahkan ke lapangan.

Gambar 22. Tanaman tin dalam green house

28
7. Lahan Terbuka
Pemindahan bibit tin dari green house ke lahan terbuka menandakan
tanaman tin sudah dapat beradaptasi dengan lingkungan luar dan juga sudah siap
untuk dipasarkan. Selain itu, pemindahan ke lahan terbuka juga bertujuan agar
green house dapat di fungsikan sebagai penyiapan bibit tin yang baru.
Tanaman tin yang akan dipasarkan dari hasil perbanyakan kultur jaringan
ini memilki sifat yang sama dengan induknya, serta perbanyakannya tidak
tergangtung oleh perubahan iklim.

Gambar 23. Tanaman tin di lahan terbuka

29
 BAB VI
PENUTUP

6.1 Kesimpulan
Dari hasil dan pembahasan yang didapatkan pada praktek lapangan atau
magang di Laboratorium kultur jaringan SEAMEO BIOTROP kota Bogor, dapat
disimpulkan bahwa :
1. Sterilisasi eksplan tin dilakukan secara dua tahap yaitu sterilisasi luar dengan
perendaman bakterisida dan fungisisda selama 1 jam dan sterilisasi dalam yaitu
dengan tiga kali perendaman ekslpan kedalam bayclin 15% selama 15 menit,
bayclin 10% selama 10 menit dan alkohol 70% selama 1 menit.
2. Media yang tepat untuk kultur jaringan tin adalah media TP (penanaman),
media CA (elongasi), dan media 8 (multiplikasi). Media TP dan Media 8
mengandung zpt sitokinin yaitu BAP 2,5ml
3. Media agar pada perbanyakan tin tidak menggunakan zpt auksin yang dapat
merangsang akar, hanya digunakan pada saat aklimatisasi. Fe EDTA pada
media yang digunakan untuk mengurangi oksidasi fenolase dan konsentrasi
bayclin yang digunakan pada saat sterilisasi lebih kecil untuk meminimalkan
terjadinya browning eksplan.

6.2 Saran
Dalam kegiatan magang di laboratorium kultur jaringan SEAMEO
BIOTROP diharapkan lebih banyak melakukan sharing dan bimbingan teknisi
mengenai kegiatan yang dilakukan. Evalusi juga harus lebih sering dilakukan
selesai melakukan kegiatan. Sebelum melakukan kegiatan juga disarankan
menanyakan terlebih dahulu kegiatan yang bisa dilakukan sehingga bisa
disesuaikan dengan kerangka rencana acuan magang yang nantinya akan dibuat.

30
 DAFTAR PUSTAKA

Bonga, JM. Durjan, D.J. 1982. Tissue Culture in Forestry. Martines Nyhoff
Publishers. Boston.

Farid, M. 2003. Perbanyakan Tebu (Saccharum officinarum L.) Secara In Vitro

pada Berbagai Konsentrasi IBA dan BAP. J. Sains & Teknologi. 3: 103—
109.

Fauza, S. 2013. Pengaruh Komposisi Media Tanam Dan Aplikasi

Azotobacterchroococcum Terhadap Pertumbuhan Stek Tanaman Tin (Ficus
carica L.) J. Pertanian Tropik, 23-24

Gunawan, L. W. 1987 Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. PAU Bioteknologi IPB.

Bogor

Gunawan, L.W. 1995. Teknik Kultur in vitro dalam Hortikultura. PT. Penebar
Swadaya. Jakarta.

Haris, M. 2010. Buah Surga. Balai Besar Penelitian Pertanian (BBPP) Ketindan
Malang. Jawa Timur

Hartmann, H.T. Kester, D.E., Davies, F.T. and Geneve, R.L., 1997. Plant
Propagation And Principles Practices (No. Ed. 6). Prentice-Hall Inc. New
Jersey

Hendaryono, D.P.S. and Wijayani, A. 1994. Teknik Kultur Jaringan. Kanisius.

Yogyakarta.

Khasanh, N. 2011. Kandungan Buah-Buahan Dalam Alqur’an: Buah Tin (Ficus

carica L), Zaitun (Olea europea L), Delima (Punica granatum L), Anggur
(Vitis vinivera L), Dan Kurma (Phoenix dactylifera L) Untuk Kesehatan. J.
Phenomenn, 11-12

Lestari, E. 2011. Peranan Zat Pengatur Tumbuh dalam Perbanyakan Tanaman

Melalui Kultur Jaringan. Agro Biogen, 63-64.

Prayoga, L. 2001. Proses Sterilisasi Dan Penanganan Kontaminasi.

http://bio.unsoed.ac.id/sites/default/files/Proses%20Sterilisasi%20dan%20P
enanganan%20Kontaminasi-_0.pdf (Diakses Oktober 2017).

Rahman. 2013. Induksi Tunas Tin (Ficus carica L) Secara In Vitro pada Medium
MS dengan Penambahan BAP dan NAA. Skripsi. Fakultas Pertanian.
Universitas Muhammadiyah Yogyakarta.

31
Sandra, E and Karyaningsih, I. 2000. Panduan Teknis Pelatihan Kultur Jaringan.
Unit Kultur Jaringan Laboratorium Konservasi Tumbuhan Jurusan
Konservasi Sumberdaya Hutan Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor.
Bogor.

Santoso, U and Nursandi, F. 2002. Kultur Jaringan Tanaman. UMM Press. Malang

Wattimena, G.A. 1988. Zat Pengatur Tumbuh Tanaman. Laboratorium Kultur

Jaringan Tanaman PAU Bioteknologi IPB, Bogor

Windujati, A. 2011. Kajian Penggunaan Zat Pengatur Tumbuh Bap Dan Tdz Dalam
Kultur Jaringan Daun Tanaman Penghasil Gaharu (Aquilaria Malaccensis
Lamk). Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan Dan Ekowisata Fakultas
Kehutanan Institut Pertanian Bogor. Bogor

Yani, S.A. 2015. Produksi Bibit Tanaman Dengan Menggunakan Teknik Kultur
Jaringan. Seameo Biotrop. Bogor

Yusnita. 2003. Kultur Jaringan Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien.

Agromedia Pustaka. Jakarta.

Zulkarnain. 2009. Kultur Jaringan Tanaman : Solusi Perbanyakan Tanaman Budi

Daya. IPB. Bogor

32
LAMPIRAN

33
Lampiran 1. Alamat Perusahaan

Alamat : Jalan Raya Tajur Km. 6, Kota Bogor (16122).

Provinsi : Jawa Barat

Telepon : Telepon (0251) 8323848, 8357175

Fax : Fax (0251) 8357175, 8326861

Website : http://www.biotrop.org

Email : services.lab@biotrop.org.

Denah Lokasi Biotrop

34
Lampiran 2. Logbook dan Rangkuman Kegiatan

35