Downstream Process
Lipase Xanthan Gum
Isolasi Lipase dari Aspergillus
niger
Media Fermentasi
media fermentasi sebanyak 1,4 liter
yang sudah mengandung 3% b/v
induser minyak goreng sawit.
Sterilisasi
disterilisasi dalam autoklaf pada suhu
121C selama 15 menit.
Pengaturan Fermentasi
cairan fermentasi diatur pada pH
netral (pH = 7) dengan larutan
NaOH 50%.
Inokulasi
Media starter sebanyak 10% (dari
volume kerja fermentor)
diinokulasikan secara aseptik ke
dalam fermentor
Fermentasi
Fermentasi dilakukan pada suhu
ruang selama 24 jam dengan laju
putaran pengadukan 250 rpm dan
laju aerasi 1 vvm. Pengambilan sampel
dilakukan setiap interval waktu 4 jam.
Analisis Aktivitas Lipase
Selanjutnya sampel dianalisis
aktivitas enzim lipase menggunakan
metode Lindfield dkk (1984) dan
berat kering selnya menggunakan
metode gravimetri.
Vitamin B12
Produksi Xanthan Gum dari
Xanthomonas campestris
Persiapan Kultur Bakteri
Kultur murni Xanthomonas
campestris digunakan sebagai
mikroorganisme yang
menghasilkan xanthan gum.
Inokulum dibuat dengan
mencampurkan media cair yang
mengandung nutrisi dengan
kultur mikroorganisme.
Fermentasi
Media fermentasi terdiri dari
karbohidrat dan nutrien lain yang
dibutuhkan oleh mikroorganisme,
seperti ion ammonium, buffer
fosfat, ion magnesium, dan sedikit
unsur lainnya.
Selama fermentasi, asam organik
terbentuk sebagai produk
sampingan dan bahan dasar
untuk molekul polisakarida.
Pasteurisasi
Broth fermentasi dipasteurisasi
dengan memanaskan hampir
mencapai titik didih.
Xanthan gum dipisahkan dari
broth dengan pengendapan
menggunakan isopropil alkohol.
Polisakarida xanthan yang
terendapkan kemudian
dikeringkan.
Penggilingan dan
Pengemasan
Xanthan gum yang telah
dikeringkan digiling untuk
mendapatkan ukuran partikel
yang diinginkan.
Xanthan gum yang telah digiling
kemudian dikemas dan siap
untuk dipasarkan.
Interferon
Pembentukan Vitamin B-12 Pada
Fermentasi Kedelai Dengan Isolat
Rizophus oryzae dan Klebsiella
Peneumonae
Perubahan Karbohidrat
Selama fermentasi tempe, enzim
amilase yang dihasilkan oleh
Rhizopus oligosporus akan
mengubah karbohidrat kompleks,
seperti pati (amilum), menjadi
gula sederhana yang larut dalam
air.
Perubahan Protein
Enzim protease yang dihasilkan
oleh Rhizopus oligosporus akan
merombak protein kedelai
menjadi asam amino yang lebih
mudah dicerna oleh pencernaan
manusia.
Keterlibatan K.
peneumoniae
Dalam penelitian yang dilakukan,
hasil menunjukkan bahwa K.
peneumoniae (bakteri) dapat
bersimbiosis dengan baik dengan
R. oligosporus, sehingga dapat
tumbuh dengan baik dan
menghasilkan vitamin B12.
Proses Pembentukan
Vitamin B12
Proses pembentukan vitamin B12
pada tempe dimulai sekitar jam
ke-20 dan semakin meningkat
hingga mencapai puncaknya
pada jam ke-48. Setelah 48 jam,
kadar vitamin B12 cenderung
stabil.
Pemilihan Mikroorganisme
Beberapa mikroorganisme yang umum
digunakan adalah bakteri seperti
Escherichia coli (E. coli) atau
Saccharomyces cerevisiae (ragi).
Mikroorganisme ini dapat dimodifikasi
genetik untuk menghasilkan interferon.
Pengembangan
Vektor
Vektor adalah suatu alat yang digunakan
untuk memasukkan gen yang mengkodekan
interferon ke dalam mikroorganisme. Dalam
kasus ini, gen interferon manusia
dimasukkan ke dalam vektor yang
kompatibel dengan mikroorganisme yang
dipilih.
Transformasi Genetik Group 2 - Kelas B
Mikroorganisme dipapar dengan vektor
yang mengandung gen interferon.
Pembentukan Koloni
Transforman Sesi Kumala Dewi (Ketua)
Setelah mikroorganisme mengambil vektor
dan mengintegrasikan gen interferon,
mereka dibiarkan tumbuh dan membentuk Mahfuzatul Khairani (Sekretaris)
koloni. Koloni transforman yang
mengandung gen interferon dipilih untuk
langkah selanjutnya. Wita Kristianda
Pemupukan Kultur
Koloni transforman ditanam dalam media
yang sesuai, seperti medium nutrisi yang
Yuni Rahma Sari
mengandung gula, garam, nitrogen, dan
faktor-faktor pertumbuhan lainnya.
Selvia Rahayu
Induksi Ekspresi
Untuk memicu produksi interferon,
mikroorganisme dikenai kondisi yang Farhan Hammadi
menginduksi ekspresi gen interferon.
Pertumbuhan dan Produksi
Selama proses ini, mereka memproduksi
interferon yang dihasilkan dari ekspresi gen
interferon manusia yang telah dimasukkan
sebelumnya.
Pemurnian dan
Pemrosesan
kultur mikroba diolah untuk memisahkan
interferon dari sel-sel mikroba dan bahan-
bahan lainnya dalam kultur
Karakterisasi dan
Pengujian