Machine Translated by Google

Heliyon 7 (2021) e06085

Daftar isi tersedia di ScienceDirect

Heliyon

beranda jurnal: www.cell.com/heliyon

Artikel Penelitian

Analisis faktorial dua tingkat pengaruh fruktosa terhadap kapasitas

biosintesis DHA Aurantiochytrium sp. SW1
Vidyah Manikan A , Yusuf Nazir , Aidil Abdul Hamid a,*
B

A
Departemen Ilmu Biologi dan Bioteknologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universiti Kebangsaan Malaysia 43600 UKM Bangi, Selangor, Malaysia
B
Departemen Ilmu Pangan, Fakultas Sains dan Teknologi, Universiti Kebangsaan Malaysia, 43600 UKM Bangi, Selangor, Malaysia

INFO PASAL ABSTRAK

Kata kunci: Thraustochytrid semakin populer karena potensi perannya yang tinggi sebagai produsen alternatif asam lemak tak jenuh ganda
Thraustochytrid (PUFA) ÿ-3 yang bernilai tinggi, asam docosahexaenoic (DHA). Meskipun sebagian besar thraustochytrid lebih menyukai glukosa
Fruktosa
sebagai sumber karbon utama, hanya sedikit strain yang dilaporkan lebih menyukai fruktosa. Salah satu strain tersebut adalah
Desain faktorial Aurantiochytrium sp. SW1. Dalam penelitian ini, pengaruh fruktosa terhadap akumulasi DHA oleh SW1 diselidiki menggunakan
Asam docosahexaenoic (DHA)
desain faktorial dua tingkat penuh. Selain itu, profil akumulasi biomassa, lipid dan DHA dari SW1 yang dibudidayakan dalam media
fruktosa dan glukosa juga dibandingkan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fruktosa mempunyai pengaruh positif yang sangat
signifikan terhadap kandungan DHA volumetrik. Sementara itu, keterlibatannya dalam mempengaruhi kapasitas biosintesis DHA,
meskipun signifikan, tidak terlalu besar. Ditemukan juga bahwa ketika dibudidayakan dalam medium fruktosa, SW1 memiliki fase
log yang kurang curam dibandingkan dengan medium glukosa. Namun, setelah 48 jam budidaya, akumulasi biomassa dan lipid
dalam media fruktosa melebihi media lainnya. Kandungan DHA volumetrik dalam medium fruktosa pada 96 jam adalah 11% lebih
tinggi dibandingkan dengan medium glukosa. Secara keseluruhan, fruktosa ditemukan menjadi substrat yang lebih cocok untuk
akumulasi biomassa, lipid dan DHA di SW1 dibandingkan dengan sumber konvensional, glukosa.

1. Perkenalan
Asam lemak omega-3, dalam beberapa dekade terakhir, telah banyak
dikaitkan dengan penuaan yang sehat karena banyaknya peran mendasar yang
dimainkannya dalam kesehatan dan perkembangan manusia. Asam
docosahexaenoic (DHA) adalah anggota penting dari keluarga ÿ-3. Ini adalah
komponen penting di otak, kulit dan mata [1,2]. Asam lemak ini biasanya diperoleh
dari ikan berlemak seperti salmon, mackerel dan ikan todak, krustasea seperti
kepiting dan lobster berduri, serta moluska seperti kerang dan tiram [3].
Sejak diperkenalkannya konsep “minyak buatan” [4], bioproduksi DHA dari
mikroalga telah mendapat perhatian besar dibandingkan metode konvensional
yang memperolehnya dari makanan laut. Gagasan untuk memperoleh DHA dari
mikroalga dibandingkan sumber makanan laut merupakan hal yang menguntungkan.
Selain potensi pemurnian yang lebih baik, DHA mikroalga biasanya bebas dari
kontaminasi bahan kimia [5]. Berbeda dengan persediaan ikan yang menipis dan
tidak mampu menyediakan pasokan yang cukup untuk permintaan pasar yang
terus meningkat [6], bioproduksi DHA dari mikroalga menjanjikan pasokan
berkelanjutan yang dapat disesuaikan tergantung permintaan.
Thraustochytrids adalah mikroalga heterokont uniseluler, memiliki sebaran
geografis yang luas dari daerah kutub hingga tropis, menghuni berbagai
lingkungan seperti sedimen bakau, muara dan
ekosistem laut dalam [7]. Karena kekurangan kloroplas, mereka tidak dapat
melakukan fotosintesis namun memiliki kemampuan sintesis DHA yang sangat
baik sehingga dianggap sebagai produsen DHA utama di lingkungan laut [8].
Thraustochytrid mempunyai sifat yang cocok untuk produksi DHA dalam industri,
yaitu, mereka dapat dikultur secara massal menggunakan tabung fermentor tanpa
sinar matahari, dan mereka dapat mengakumulasi DHA dalam jumlah besar
dalam tetesan lipid intraseluler yang berkembang dengan baik.
Beberapa strain thraustochytrid telah dilaporkan menghasilkan biomassa
yang tinggi, mengandung lipid kaya DHA dalam jumlah besar [9]. Salah satu
thraustochytrid tersebut adalah Aurantiochytrium sp. SW1, yang dilaporkan
mengakumulasi hingga setengah biomassanya sebagai lipid, mengandung
40-60% DHA dari total asam lemak. Isolat ini, tidak seperti kebanyakan
thraustochytrid penghasil DHA lainnya, lebih memilih fruktosa dibandingkan
glukosa untuk akumulasi biomassa, lipid dan DHA [10]. Pemanfaatan karakteristik
unik SW1 ini diharapkan dapat meningkatkan produktivitas DHA secara
keseluruhan. Karena penelitian sebelumnya hanya melaporkan berdasarkan
parameter produksi umum seperti konsentrasi dan hasil, dalam penelitian ini,
kami bermaksud untuk mendefinisikan pentingnya fruktosa sebagai sumber
karbon utama untuk produksi DHA dengan menggunakan desain faktorial dua
tingkat penuh. Dibandingkan dengan metode konvensional 'satu faktor pada satu
waktu' (OFAT), desain faktorial menawarkan dasar induktif yang lebih luas, yang mencakup ru

* Penulis yang sesuai.

Alamat email: aidilmikrob@gmail.com (AA Hamid).

https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2021.e06085
Diterima pada 21 November 2020; Diterima dalam bentuk revisi 11 Desember 2020; Diterima 20 Januari
2021 2405-8440/© 2021 Penulis. Diterbitkan oleh Elsevier Ltd. Ini adalah artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-
nc-nd/4.0/).
Machine Translated by Google
V. Manikan dkk.
bisa ditarik. Selain itu, analisis menggunakan metode ini memungkinkan penentuan
besarnya efek fruktosa sendiri serta
interaksinya dengan komponen medium lainnya. Ini memberikan kunci untuk
memahami efek keseluruhan [11] dari semua komponen medium terhadap DHA
produksi di SW1.
2. Bahan dan etos
2.1. Kondisi mikroorganisme dan kultur
Aurantiochytrium sp. SW1 (GenBank: KF500513, UNiCC UPM-WDCM
988: UPMC 963) diperoleh dari Laboratorium Fisiologi Mikroba, Fakultas Biosains dan
Bioteknologi, Universiti Kebangsaan
Malaysia. Glukosa (60 g/L) diganti dengan fruktosa (60 g/L) untuk
persiapan kultur benih yang melibatkan kultur produksi yang mengandung
fruktosa. Budidaya dilakukan dalam labu Erlenmeyer 500 mL pada suhu 30
C.
2.2. Desain eksperimental
Desain faktorial dua tingkat penuh digunakan untuk menyelidiki efek fruktosa dan
komponen lain yang ada dalam media produksi. Perangkat lunak ahli desain (DOE;
versi 10.0, Stat-Ease, USA) dulu
digunakan untuk merancang percobaan. Kisaran komponen medium
ditunjukkan pada Tabel 1. Rentang dipilih berdasarkan tahap awal
percobaan (data tidak ditampilkan).
Rancangan percobaan beserta nilai responnya adalah
ditunjukkan pada Tabel 2. Desain berisi duplikat untuk setiap proses, sehingga total
jumlah proses adalah 32. Tingkat kepercayaan ditetapkan sebesar 95%.
2.3. metode analitis
Kondisi budaya dan metode analisis untuk penentuan
konsentrasi biomassa, lipid, dan DHA seperti yang dijelaskan sebelumnya
bekerja [12].
3. Hasil
Dalam penelitian kami sebelumnya, eksperimen untuk menyelidiki kemampuan
SW1 untuk memanfaatkan sumber karbon yang berbeda menunjukkan bahwa fruktosa adalah yang paling banyak
gula pilihan untuk akumulasi biomassa, lipid, dan DHA berdasarkan
tingkat konsentrasi DHA dan hasil yang dicapai [10]. Hasil serupa juga terjadi
diamati oleh Chatdumrong dkk. [13] di mana S. limacinum BR2.1.2 menghasilkan
peningkatan jumlah DHA ketika fruktosa digunakan sebagai bahan utama
sumber karbon menggantikan glukosa. Oleh karena itu, dalam penelitian ini digunakan dua level penuh
desain faktorial digunakan untuk lebih menetapkan pentingnya
fruktosa pada akumulasi DHA dengan penekanan khusus pada interaksinya dengan
komponen medium lainnya. Untuk evaluasi yang lebih baik
dampak fruktosa, akumulasi DHA direpresentasikan sebagai volumetrik
konten (g/L kultur) serta kapasitas biosintesis DHA sel (%
g/g biomassa kering). Hasil percobaan ditunjukkan pada Tabel 2.
3.1. Pengaruh fruktosa terhadap kandungan volumetrik (g/L) DHA
Pengaruh fruktosa, serta faktor lain terhadap volume DHA
produksi, awalnya divisualisasikan dengan signifikansi masing-masing koefisien,
ditunjukkan dengan nilai F dan p dari analisis varians
Tabel 1. Kisaran komponen medium untuk analisis faktorial dua tingkat.
Faktor
J: Fruktosa
B: Ekstrak ragi
C: MSG
D: Garam laut
Heliyon 7 (2021) e06085
(ANOVA) data (Tabel 3). Nilai 'Prob > F' kurang dari 0,005 menunjukkan
bahwa model tersebut signifikan dan sebaliknya. Berdasarkan Tabel 3, nilai p-value
model adalah (p <0,0001) dan nilai F besar (562,77)
menyiratkan bahwa model tersebut signifikan untuk menafsirkan data. "Kurangnya Kesesuaian
p-value" adalah 0,8475 yang menunjukkan Kurangnya Kesesuaian relatif tidak signifikan
ke kesalahan murni. ANOVA menunjukkan bahwa semua faktor yang disebutkan di atas
dan interaksinya, kecuali faktor C (MSG), sangat signifikan, dengan a
nilai probabilitas kurang dari 0,0001.
Selain itu, penting untuk menentukan efek relatif fruktosa dan
interaksinya dengan variabel lain untuk mengetahui sejauh mana partisipasinya dalam
pengaruh keluaran volumetrik DHA oleh SW1. Jadi, itu
perubahan nilai respon atau istilah sebagai “efek standar” adalah
ditunjukkan pada Gambar 1. Nilai ini berfungsi sebagai indikator
besarnya pengaruh yang disumbangkan oleh suatu faktor serta arahnya,
apakah itu dampak positif atau negatif. Ringkasan dampak
semua komponen media dan interaksinya pada konten volumetrik
DHA diilustrasikan pada Gambar 1.
Gambar 1 secara nyata menunjukkan bahwa faktor A (fruktosa) dan B (ragi
ekstrak), serta interaksinya, memberikan efek positif yang sangat signifikan
pada kandungan DHA dibandingkan dengan faktor lainnya. Demikian pula interaksi
antara AC (fruktosa-MSG) dan CD (MSG-garam laut) mempengaruhi kandungan DHA pada
skala negatif yang cukup besar, sedangkan AD (garam laut fruktosa) dan BD
(ekstrak ragi-garam laut) memberikan kontribusi efek negatif yang kecil. Sedangkan untuk 3 faktor
interaksi, BCD (ekstrak ragi-MSG-garam laut) memberikan efek negatif yang terlihat, sedangkan
ABC (ekstrak ragi fruktosa-MSG), ABD (ekstrak ragi fruktosa-MSG), ABD (ekstrak ragi fruktosa-MSG),
ekstrak garam laut) dan ACD (fruktosa-MSG-garam laut) memberikan efek positif.
Secara keseluruhan, berdasarkan Gambar 1, fruktosa setara dengan tiga perempat dari total
empat faktor yang paling berpengaruh (A, B, AB dan ACD). Hal ini menunjukkan peran
positif signifikan yang dimainkan oleh fruktosa di antara media lainnya
komponen dalam meningkatkan kandungan DHA volumetrik SW1. Hal ini disebabkan
menjadi fruktosa, sebagai sumber karbon, merupakan senyawa penting dalam
biosintesis asam lemak.
3.2. Pengaruh fruktosa terhadap kapasitas biosintesis DHA (% g/g biomassa).
SW1
Hasil ANOVA mengenai pengaruh fruktosa terhadap kapasitas biosintetik DHA (%
g/g biomassa) SW1 ditunjukkan pada Tabel 4. Hasilnya
menunjukkan bahwa faktor B, AB, AC, AD, BD, CD, ACD dan BCD adalah yang paling tinggi
faktor signifikan dengan nilai probabilitas kurang dari 0,0001; Sementara itu,
faktor A, C dan nilai probabilitas skor ABD sebesar 0.0181, dan 0.0007
masing-masing 0,0025. Padahal peran fruktosa dalam mempromosikan DHA
kapasitas biosintesis SW1 kurang menonjol dibandingkan dengan DHA
kandungannya, masih dapat disimpulkan bahwa fruktosa memang memiliki pengaruh yang signifikan
berpengaruh positif berdasarkan keterlibatannya dalam interaksi yang sangat signifikan,
AB dan ACD.
Demikian pula dengan efek standar dari komponen medium dan
interaksinya terhadap kapasitas biosintesis DHA SW1 juga
dievaluasi (Gambar 2). Berbeda dengan kandungan DHA volumetrik yang dibahas pada artikel ini
bagian sebelumnya, kapasitas biosintetik, yang mencerminkan jumlahnya
DHA yang mampu disintesis per gram biomassa, terpengaruh
kira-kira sama dalam arah positif dan negatif oleh
komponen medium dan interaksinya (Gambar 2).
Fruktosa, meskipun tampak sebagai faktor negatif, berbeda dengan fruktosa
berpengaruh pada kandungan volumetrik DHA, memberikan pengaruh yang sangat kecil pada
Kapasitas biosintesis DHA SW1. Namun interaksinya dengan ragi
ekstrak (AB) dan MSG-garam laut (ACD) memiliki efek positif yang besar.
Tingkat rendah (-1) (g/L) Tingkat tinggi (þ1) (g/L)
0 60
0 2
0 8
0 6
2
Machine Translated by Google

V. Manikan dkk. Heliyon 7 (2021) e06085

Tabel 2. Desain eksperimen dan nilai respon untuk analisis faktorial dua tingkat.

Urutan standar Fruktosa Ekstrak ragi MSG Garam laut DHA (g/L) Kapasitas biosintetik DHA (% g/g biomassa)

Diprediksi Sebenarnya Diprediksi Sebenarnya

1 -1 -1 -1 -1 0,44 0,46 15.80 15.81

2 -1 -1 -1 -1 0,46 15.75

3 1 -1 -1 -1 1.61 1.45 24.03 25.35

4 1 -1 -1 -1 1.74 22.75

5 -1 1 -1 -1 0,22 0,19 7.97 7.88

6 -1 1 -1 -1 0,20 8.10

7 1 1 -1 -1 3.28 3.15 29.03 29.15

8 1 1 -1 -1 3.08 28.87

9 -1 -1 1 -1 1.17 1.07 24.74 23.41

10 -1 -1 1 -1 1.23 26.11

11 1 -1 1 -1 1.15 1.19 18.11 18.00

12 1 -1 1 -1 1.14 18.18

13 -1 1 1 -1 2.00 2.12 30.47 31.83

14 -1 1 1 -1 1.91 29.07

15 1 1 1 -1 3.04 3.54 27.00 26.92

16 1 1 1 -1 3.27 27.12

17 -1 -1 -1 1 1.36 1.38 20.28 20.54

18 -1 -1 -1 1 1.31 19.97

19 1 -1 -1 1 1.15 1.19 11.60 11.63

20 1 -1 -1 1 1.15 11.62

21 -1 1 -1 1 1.19 1.23 32.59 32.54

22 -1 1 -1 1 1.18 32.69

23 1 1 -1 1 3.85 3.45 32.29 32.50

24 1 1 -1 1 3.26 32.04

25 -1 -1 1 1 1.09 1.17 23.78 22.24

26 -1 -1 1 1 1.04 25.37

27 1 -1 1 1 1.18 1.12 12.08 12.71

28 1 -1 1 1 1.20 11.40

29 -1 1 1 1 0,69 0,73 16.25 16.59

30 -1 1 1 1 0,62 15.86

31 1 1 1 1 3.84 3.91 22.62 22.09

32 1 1 1 1 3.81 23.19

Tabel 3. ANOVA pengaruh fruktosa dan faktor lain terhadap kandungan volumetrik (g/L) DHA.

Sumber Jumlah Kuadrat df Berarti Persegi Nilai F nilai p Prob > F

Model 87.39 12 7.28 562.77 <0,0001 (signifikan)
A-Frc 31.80 1 31.80 2457.50 <0,0001

SELAMAT TINGGAL 24.33 1 24.33 1879.84 <0,0001

C-MSG 6.125E-004 1 6.125E-004 0,047 0,8301

D-Garam 0,30 1 0,30 23.51 0,0001

AB 24.12 1 24.12 1863.70 <0,0001

AC 1.45 1 1.45 112.33 <0,0001

IKLAN 0,83 1 0,83 64.30 <0,0001

BD 0,71 1 0,71 54.72 <0,0001

CD 1.58 1 1.58 122.43 <0,0001

ABC 0,33 1 0,33 25.67 <0,0001

ACD 1.13 1 1.13 86,94 <0,0001

BCD 0,81 1 0,81 62.32 <0,0001

Sisa 0,25 19 0,013

Kurangnya Kesesuaian 0,012 3 3.921E-003 0,27 0,8475 (Tidak signifikan)

Kesalahan Murni 0,23 16 0,015

Jumlah Kor 87.63 31

3
Machine Translated by Google

V. Manikan dkk. Heliyon 7 (2021) e06085

1.6

1.4

1.2

0,8

0,6
radkneaftEs

0,4

0,2

-0,2

-0,4 ABCD AB AC IKLAN BC BD CD ABC ABD ACD BCD

-0,6
Faktor

Gambar 1. Pengaruh komponen medium dan interaksinya terhadap kandungan volumetrik DHA.

Tabel 4. ANOVA pengaruh fruktosa dan faktor lain terhadap kapasitas biosintesis DHA.

Sumber Jumlah Kuadrat df Berarti Persegi Nilai F nilai p Prob > F

Model 1743.73 14 124,55 118.56 <0,0001 signifikan
A-Frc 2.98 1 2.98 2.83 0,1106

SELAMAT TINGGAL 285.61 1 285.61 271.86 <0,0001

C-MSG 0,26 1 0,26 0,25 0,6234

D-Garam 4.00 1 4.00 3.81 0,0676

AB 225.14 1 225.14 214.31 <0,0001

AC 159,76 1 159,76 152.07 <0,0001

IKLAN 140.28 1 140.28 133.53 <0,0001

SM 19.69 1 19.69 18.74 0,0005

BD 73.33 1 73.33 69.80 <0,0001

CD 259.12 1 259.12 246.65 <0,0001

ABD 13.68 1 13.68 13.02 0,0022

ACD 231.45 1 231.45 220.31 <0,0001

BCD 281.44 1 281.44 267.89 <0,0001

ABCD 47.00 1 47.00 44.73 <0,0001

Sisa 17.86 17 1.05

Kurangnya Kesesuaian 0,017 1 0,017 0,015 0,9030 tidak signifikan

Kesalahan Murni 17.84 16 1.12

Jumlah Kor 1761.59 31

2
radkneaftE
s

-2
ABCD AB AC IKLAN BC BD CD ABC ABD ACD BCD

-4

-6
Faktor

Gambar 2. Pengaruh komponen medium dan interaksinya terhadap kapasitas biosintesis DHA SW1.

4
Machine Translated by Google

V. Manikan dkk. Heliyon 7 (2021) e06085

25 6

5
20

15

AH/)gD
L(
3
assamdoi/p)ig&
B
Li(l

10
%
ispoa
)ksaiatsetsitsanam /iK
b(
g

5
1

0 0
24 48 72 96 120
Waktu (jam)

Biomassa-G Lipid-G

Kapasitas biosintetik DHA-G Biomassa-F

Lipid-F Kapasitas biosintetik DHA-F

DHA-G DHA-F

Gambar 3. Profil akumulasi biomassa, lipid dan DHA SW1 yang dibudidayakan dalam medium yang mengandung glukosa dibandingkan dengan fruktosa; G ¼ glukosa, F ¼ fruktosa.

3.3. Profil pertumbuhan, akumulasi lipid dan DHA SW1 menimbulkan dampak yang kuat pada produksi DHA volumetrik SW1
(Gambar 1). Hal ini mungkin terkait dengan fungsi vitalnya dalam lipid
Gambar 3 menggambarkan profil akumulasi biomassa, lipid dan DHA jalur biosintesis dan pertumbuhan. Peningkatan konsentrasi
SW1 dibudidayakan secara terpisah dalam media yang mengandung glukosa dan fruktosa. sumber karbon (khususnya fruktosa dalam penelitian ini) diketahui meningkat
Berdasarkan grafik, budidaya yang mengandung fruktosa, meskipun fase lognya sedikit produksi lipid di semua mikroorganisme berminyak termasuk thraus-tochytrid karena
lebih curam (24–48 jam), menghasilkan biomassa yang jauh lebih tinggi. menyediakan fluks karbon terus menerus berlebih di pusat
dan akumulasi lipid pada 72 jam dan seterusnya. Adapun kandungan DHA volumetrik, tulang punggung karbon yang kemudian memasuki jalur biosintesis lipid
3,84 g/L dicapai dengan menggunakan fruktosa, yang 11% lebih tinggi dibandingkan dengan fruktosa batasan nitrogen tercapai [28]. Di sisi lain, ekstrak ragi
glukosa. Namun, hanya perbedaan kecil yang diamati dalam hal menyediakan vitamin esensial terutama B kompleks yang penting untuk sel
Kapasitas biosintesis DHA antara kedua budaya di seluruh dunia pertumbuhan, sehingga berkorelasi langsung dengan dampak positifnya terhadap
masa budidaya. kandungan volumetrik DHA dengan mempengaruhi secara positif konsentrasi biomassa.
Oleh karena itu, peningkatan kandungan DHA dalam jumlah besar merupakan dampaknya Namun berbeda dengan penelitian sebelumnya, ditemukan fruktosa-MSG
peningkatan biomassa dalam budidaya yang dipasok dengan fruktosa interaksi memiliki efek negatif pada konsentrasi DHA [29]. Demikian pula,
sebagai sumber karbon utama. Hasil ini sesuai dengan studi lain yang ditujukan pada optimasi medium untuk SW1 mengungkapkan hal itu
pengamatan dalam percobaan faktorial dua tingkat yang dibahas di atas. glukosa, baik sebagai faktor tunggal maupun interaksi, mempengaruhi konsentrasi
DHA secara signifikan [12]. Hal ini jelas menunjukkan bahwa peningkatan
4. Diskusi Akumulasi DHA oleh SW1 dapat dicapai lebih baik dengan menggunakan fruktosa,
dibandingkan dengan substrat paling konvensional, glukosa. Selanjutnya, a
Menjadi material yang sangat menarik dan menjanjikan bagi keberlanjutan interaksi 3 faktor fruktosa-MSG-garam laut (ACD) positif signifikan
produksi DHA, thraustochytrid dipelajari secara ekstensif untuk diamati dalam penelitian ini sesuai dengan temuan sebelumnya,
meningkatkan prospek pasar. Banyak strategi berbeda yang digunakan di mana interaksi glukosa-MSG ditemukan mempengaruhi DHA secara positif
meningkatkan dan merekayasa produksi lipid organisme ini [14,15]. Dari konsentrasi [29].

Oleh karena itu, dampak komposisi media pertumbuhan telah dipelajari secara luas dan Sedangkan kapasitas biosintetik DHA berfungsi sebagai indikator yang baik
literatur banyak tentang hal itu [16]. Fruktosa, bersama dengan monosakarida lainnya, kemampuan sel untuk mensintesis DHA, hal ini tidak selalu bersifat pasti
terutama glukosa, serta polisakarida seperti gliserol, diasimilasi dengan baik oleh indikator produksi DHA. Budidaya yang menghasilkan biomassa tinggi
berbagai strain Aurantiochytrium dan konsentrasi tetapi dengan kapasitas biosintesis yang rendah masih dapat menghasilkan lebih banyak

Skizochytrium. Namun demikian, kapasitas asimilasi setiap substrat berbeda-beda
antar strain dan hanya sedikit strain yang dilaporkan memiliki kapasitas tersebut
lebih sedikit preferensi terhadap fruktosa dibandingkan dengan substrat lainnya. Tabel 5
mencantumkan beberapa contoh thraustochytrid dan asimilasi fruktosanya
kemampuan.
Dalam penelitian kami sebelumnya, dimaksudkan untuk mengevaluasi penggunaan glukosa sebagai
sumber karbon utama untuk akumulasi DHA, ditemukan bahwa DHA
Konsentrasi lipid total hanya dipengaruhi secara signifikan oleh ekstrak glukosa-ragi
dan interaksi glukosa-MSG. Sejalan dengan penelitian ini,
produk dibandingkan dengan produk dengan biomassa rendah dan biosintetik tinggi
kapasitas. Oleh karena itu, untuk mencapai produksi yang optimal, penting dilakukan
pertimbangkan kandungan DHA volumetrik dan kapasitas biosintetik. Karena fruktosa
dan interaksinya dengan ekstrak ragi (AB).
ditemukan memiliki efek positif yang signifikan terhadap kandungan DHA volumetrik
dan kapasitas biosintesis DHA, dapat disimpulkan bahwa manipulasi kedua faktor ini
sangat penting dalam setiap upaya untuk meningkatkan
produksi.
Memiliki preferensi yang lebih baik terhadap fruktosa dibandingkan glukosa untuk keduanya

faktor tunggal dan interaksi ekstrak fruktosa-ragi juga terbukti Akumulasi biomassa dan DHA kurang umum terjadi pada kelompok yang diketahui

5
Machine Translated by Google
V. Manikan dkk.
Tabel 5. Contoh thraustochytrid dan kemampuan asimilasi fruktosanya.
Tekanan
S.agregatum
T.aureum ATCC 34304
S. limacinum sp. November
A. limacinum SR21
S. limacinum BR2.1.2
S.mangeovei PQ6
Aurantiochytrium sp. SD116
Thraustochytrium sp. ONC-T18
Aurantiochytrium sp. YLH70
Aurantiochytrium sp. SW1
Aurantiochytrium sp. CB15-5
Aurantiochytrium sp. ZJWZ-7
*
lebih memilih fruktosa daripada glukosa untuk akumulasi biomassa dan DHA.
thraustochytrids. Seperti tercantum pada Tabel 3, SW1, Aurantiochytrium sp. YLH70
[25], S.limacinum BR2.1.2 [13] dan Aurantiochytrium sp. ZJWZ-7 [27] adalah
di antara sedikit strain yang dilaporkan memiliki preferensi unik ini. Ini
atribut unik mungkin karena sistem transportasi fruktosa yang lebih aktif
dalam membran Thraustochytrid ini, seperti yang diamati pada
Corynebacterium glutamicum yang lebih disukai fruktosa menunjukkan hal itu
fruktosa sebagian besar
dulu dikatabolisme melalui
sistem fosfotransferase yang bergantung pada fosfoenolpiruvat, menghasilkan
dalam masuknya fruktosa dalam jumlah besar melalui fruktosa 1,6-bifosfat untuk produksi
dihidroksiaseton [30]. Mekanisme serupa mungkin terlibat
dalam metabolisme fruktosa oleh SW1 dan fruktosa-lebih disukai lainnya
thraustochytrids, namun, penelitian lebih lanjut perlu dilakukan untuk memastikannya
klaim tersebut. Selain itu, bisa juga dijelaskan dengan mencerminkan metabolisme
gula yang reaksi pertama dalam metabolisme fruktosa adalah
pembentukan langsung fruktosa 1-fosfat oleh fosfoenolpiruvat (PEP)
sedangkan metabolisme glukosa memerlukan langkah ekstra yaitu glukosa
perlu diubah menjadi glukosa 6-fosfat terlebih dahulu dan kemudian menjadi fruktosa
6-fosfat oleh isomerase glukosa-6-fosfat dengan biaya satu
molekul ATP. Oleh karena itu, pemanfaatan fruktosa sebagai sumber karbon membutuhkan lebih sedikit
energi dan langkah-langkah dibandingkan dengan glukosa, yang mungkin menghasilkan lebih tinggi
fruktosa dalam asupan dibandingkan dengan glukosa [31,32]. Hal ini kemudian akan menyebabkan
fluks karbon kontinu berlebih yang memasuki biosintesis lipid
jalur setelah penghentian pertumbuhan sebagai kondisi terbatas nitrogen
tercapai, menjelaskan produksi DHA lebih tinggi yang dicapai dalam penelitian ini.
Namun, tidak ada laporan tersedia mengenai penelitian lebih lanjut yang melibatkan fruktosa sebagai
sumber karbon utama atau tambahan. Hal ini dapat dikaitkan dengan aspeknya
biaya, dimana fruktosa umumnya lebih mahal dibandingkan glukosa. Sejak
hampir setiap penelitian di bidang DHA mikroba mengutamakan keekonomian
produksi, fruktosa seringkali tidak dipelajari sebagai kemungkinan sumber karbon.
Namun demikian, penyelidikan lebih lanjut mengenai kemampuan asimilasi fruktosa dari
beberapa thraustochytrid dapat mengarah pada penemuan dan kemungkinan baru di bidang
ini.
Kesimpulannya, fruktosa berfungsi sebagai sumber karbon yang signifikan secara positif
untuk akumulasi DHA oleh Aurantiochytrium sp. SW1 dan dampaknya adalah
lebih mendalam dibandingkan dengan glukosa. Oleh karena itu, penggabungan fruktosa
dan/atau substrat yang mengandung fruktosa dalam media pertumbuhan dapat menyebabkan
produktivitas DHA yang lebih baik.
Deklarasi
Pernyataan kontribusi penulis
Vidyah Manikan: Menyusun dan merancang eksperimen; Melakukan percobaan;
Menganalisis dan menafsirkan data; Berkontribusi
reagen, bahan, alat analisis atau data; Menulis makalahnya.
Yusuf Nazir: Menganalisis dan menafsirkan data; Reagen yang dikontribusikan,
bahan, alat analisis atau data; Menulis makalahnya.
Heliyon 7 (2021) e06085
Kemampuan asimilatif fruktosa Referensi
ÿ [17]
ÿ
[18,19]
ÿ [20]
ÿ [21]
ÿ* [13]
ÿ [22]
ÿ [23]
ÿ [24]
ÿ* [25]
ÿ* [10]
ÿ [26]
ÿ* [27]
Aidil Abdul Hamid: Menyusun dan merancang eksperimen;
Reagen, bahan, alat analisis, atau data yang disumbangkan.
Pernyataan pendanaan
Pekerjaan ini didukung oleh KEMENTERIAN PENDIDIKAN TINGGI
MALAYSIA di bawah Skema Hibah Penelitian Fundamental, hibah
nomor FRGS/2/2013/SG05/UKM/02/1.
Pernyataan ketersediaan data
Data disertakan dalam artikel/sup. materi/referensi dalam artikel.
Pernyataan minat bersaing
Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.
Informasi tambahan
Tidak ada informasi tambahan yang tersedia untuk makalah ini.
Referensi
[1] WS Harris, ML Baack, Selain membangun otak yang lebih baik: menjembatani
kesenjangan asam docosahexaenoic (DHA) prematuritas, J. Perinatol. 35 (1) (2015) 1–7.
[2] SJ Carlson, EM Fallon, BT Kalish, KM Gura, M. Puder, Peran ÿ-3 berlemak
asam DHA dalam siklus hidup manusia, J. Parenter. Nutrisi Enteral. 37 (1) (2013) 15–22.
[3] E. Peltomaa, MD Johnson, SJ Taipale, Kriptofit laut adalah sumber yang bagus
EPA dan DHA, Mar. Narkoba 16 (1) (2018) 3.
[4] DJ Kyle, VJ Skotte, SE Reeb, Bioproduksi asam docosahexaenoic (DHA) oleh
mikroalga, dalam: DJ Kyle, C. Ratledge (Eds.), Minyak Sel Tunggal, Am Oil Chem Soc,
Champaign, 1992, hlm.287–320 .
[5] O. Pulz, W. Gross, Produk berharga dari bioteknologi mikroalga, Appl.
Mikrobiol. Bioteknologi. 65 (6) (2004) 635–648.
[6] VJ Furlan, V. Maus, I. Batista, NM Bandarra, Produksi asam docosahexaenoic
oleh Aurantiochytrium sp. ATCC PRA-276, Braz. J. Mikrobiol. 48 (2) (2017) 359–365.
[7] C. Corinaldesi, G. Barone, F. Marcellini, A. Dell'Anno, R. Danovaro, Marinir
molekul turunan mikroba dan potensi penggunaannya dalam kosmetik dan kosmetik
produk, Mar. Narkoba 15 (4) (2017) 118.
[8] E. Nutahara, E. Abe, S. Uno, Y. Ishibashi, T. Watanabe, M. Hayashi, N. Okino, M. Ito,
Gliserol-3-fosfat asiltransferase PLAT2 berfungsi dalam pembentukan
Gliserolipid kaya DHA di Aurantiochytrium limacinum F26-b, PloS One 14 (1)
(2019), e0211164.
[9] TE Lewis, PD Nichols, TA McMeekin, Potensi bioteknologi
thraustochytrids, Mar. Bioteknologi. 1 (6) (1999) 580–587.
[10] V. Manikan, MY Nazir, MS Kalil, MH Isa, AJ Kader, WM Yusoff, AA Hamid,
Mikroalga penghasil asam docosahexaenoic strain baru dari pesisir Malaysia
perairan, Algal Res 9 (2015) 40–47.
[11] MJ Anderson, PJ Whitcomb, DOE Sederhana: Alat Praktis untuk Efektif
Eksperimen, edisi kedua, Productivity Press, New York, 2007.
[12] V. Manikan, MS Kalil, AA Hamid, Respon optimasi permukaan kultur
media untuk meningkatkan produksi asam docosahexaenoic oleh orang Malaysia
thraustochytrid, Sci. Ulangan 5 (2015) 8611.
[13] W. Chatdumrong, W. Yongmanitchai, S. Limtong, W. Worawattanamateekul,
Optimalisasi produksi dan peningkatan asam docosahexaenoic (DHA) .
6
Machine Translated by Google
V. Manikan dkk.
kandungan astaxanthin pada mutan Schizochytrium limacinum yang diisolasi dari hutan
bakau di Thailand, Nat. Sains. 41 (2007) 324–334.
[14] Y. Nazir, H. Halim, P. Prabhakaran, X. Ren, T. Naz, H. Mohamed, S. Nosheen,
K. Mustafa, W. Yang, A. Abdul Hamid, Y. Song, Kelas fitohormon yang berbeda bertindak
secara sinergis untuk meningkatkan pertumbuhan, kapasitas biosintesis lipid dan DHA
Aurantiochytrium sp. SW1, Biomolekul 10 (5) (2020) 755.
[15] Y. Nazir, S. Shuib, MS Kalil, Y. Song, AA Hamid, Optimalisasi kebudayaan
kondisi untuk peningkatan pertumbuhan, produksi lipid dan asam docosahexaenoic (DHA)
Aurantiochytrium SW1 dengan metodologi permukaan respons, Sci. Ulangan 8 (1) (2018) 1–
12.
[16] C. Morabito, C. Bournaud, C. Ma€es, M. Schuler, RA Cigliano, Y. Dellero,
E. Marechal, A. Amato, F. Rebeille, Metabolisme lipid pada thraustochytrids, Prog.
Res Lipid. 101007 (2019).
[17] G. Bahnweg, Studi tentang fisiologi thraustochytriales. II. Karbon
nutrisi Thraustochytrium spp., Schizochytrium sp., japonochytrium sp., ulkenia spp. dan
labirinhuloides spp, Veroff Inst Meeresforsch Bremerh 17 (1979)
269–273.
[18] A. Singh, S. Wilson, OP Ward, produksi asam Docosahexaenoic (DHA) oleh
Thraustochytrium sp. ATCC 20892, Dunia J. Mikrobiol. Bioteknologi. 12 (1) (1996) 76–
81.
[19] PK Bajpai, P. Bajpai, OP Ward, Optimasi produksi asam docosahexaenoic (DHA) oleh
Thraustochytrium aureum ATCC 34304, J. Am. Kimia Minyak. sosial. 68 (7) (1991) 509–
514.
[20] D. Honda, T. Yokochi, T. Nakahara, M. Erata, T. Higashihara, Schizochytrium
limacinum sp. nov., thraustochytrid baru dari kawasan bakau di barat Samudera Pasifik,
Mycol. Res. 102 (4) (1998) 439–448.
[21] T. Yokochi, D. Honda, T. Higashihara, T. Nakahara, Optimasi
produksi asam docosahexaenoic oleh Schizochytrium limacinum SR21, Appl.
Mikrobiol. Bioteknologi. 49 (1) (1998) 72–76.
[22] DD Hong, HT Anh, NT Thu, Studi tentang karakteristik biologis mikroalga laut heterotrofik-
Schizochytrium mangrovei PQ6 yang diisolasi dari pulau phu quoc, provinsi Kien Giang,
Vietnam 1, J. Phycol. 47 (4) (2011) 944–954.
[23] M. Gao, X. Song, Y. Feng, W. Li, Q. Cui, Isolasi dan karakterisasi
Spesies Aurantiochytrium: produksi asam docosahexaenoic (DHA) yang tinggi oleh
Heliyon 7 (2021) e06085
mikroalga yang baru diisolasi, Aurantiochytrium sp. SD116, J.Oleo Sci. 62 (3) (2013) 143–
151.
[24] AM Burja, H. Radianingtyas, CJ Barrow, AJ Winddust, Paten AS No.8.921.069,
Kantor Paten dan Merek Dagang AS, Washington, DC, 2014.
[25] XJ Yu, ZQ Yu, YL Liu, J. Sun, JY Zheng, Z. Wang, Pemanfaatan sirup jagung fruktosa tinggi
untuk produksi biomassa yang mengandung asam docosahexaenoic tingkat tinggi oleh
Aurantiochytrium sp. YLH70, Aplikasi. Biokimia. Bioteknologi. 177 (6) (2015) 1229–1240.
[26] T. Tajima, K. Tomita, H. Miyahara, K. Watanabe, T. Aki, Y. Okamura, Y. Matsumura, Y.
Nakashimada, J. Kato, Konversi manitol yang efisien yang berasal dari rumput laut coklat
menjadi fruktosa untuk fermentasi dengan thraustochytrid, J. Biosci. Bioeng. 125 (2) (2018)
180–184.
[27] Q. Wang, H. Ye, Y. Xie, Y. He, B. Sen, G. Wang, Keanekaragaman budaya dan lipid
profil produksi protista labirin yang diisolasi dari habitat mangrove pesisir Tiongkok, Mar.
Drugs 17 (5) (2019) 268.
[28] Y. Nazir, H. Halim, NKN Al-Shorgani, V. Manikan, AA Hamid, Y. Song, Konversi ekstrak yang
efisien dari buah-buahan yang ditolak dan berbiaya rendah menjadi produksi
asam Docosahexaenoic yang bernilai tinggi oleh Aurantiochytrium sp. SW1, Penelitian Alga
50 (2020) 101977, 2020.
[29] V. Manikan, MS Kalil, MH Isa, AA Hamid, Peningkatan prediksi untuk optimasi medium
menggunakan skrining faktorial untuk produksi asam docosahexaenoic oleh
Schizochytrium SP. SW1, pagi. J. Aplikasi. Sains. 11 (3) (2014) 462–474.
[30] P. Kiefer, E. Heinzle, O. Zelder, C. Wittmann, Analisis fluks metabolik komparatif dari
Corynebacterium glutamicum penghasil lisin yang dikultur pada glukosa atau fruktosa, Appl.
Mengepung. Mikrobiol. 70 (1) (2004) 229–239.
[31] NJ Patni, JK Alexander, Katabolisme fruktosa dan manitol dalam Clostridium
thermocellum: adanya fosfoenolpiruvat: fruktosa fosfotransferase, fruktosa l-fosfat
Kinase, fosfoenolpiruvat: mannitol fosfotransferase, dan mannitol l-fosfat dehidrogenase
dalam ekstrak sel, J. Bakteriol. 105 (1) (1971) 226–231.
[32] NKN Al-Shorgani, MHM Isa, WMW Yusoff, MS Kalil, AA Hamid, Isolasi strain Clostridium
acetobutylicum dan karakterisasi kinerja fermentasinya pada limbah pertanian,
Renew. Energi 86 (2016) 459–465.